磁珠法土壤基因DNA提取试剂盒

磁珠法土壤基因组DNA提取试剂盒

MagBeads Soil DNA Extraction Kit

［目录号】SMDE-5005、SMDE-5010

【运输条件】2~25 C；

【保存条件】磁珠分散液2~8 C；蛋白酶K -20 C；其它组分室温保存; 【试剂盒组成】

【注意事项】

1. 磁珠悬浮液严禁反复冻融和离心，以免磁珠受到损害，使用前务必充分混匀；

2. 使用前请检查裂解液1和裂解液2是否出现沉淀，如有沉淀请将试剂瓶置于65 C水浴中温热至

液体澄清；

3. 蛋白酶K长期不使用，请置于-20 C保存，融化后4C保存，并尽快使用；

【产品简介】

本试剂盒适用于从新鲜或冷冻的干燥土壤中提取基因组DNA。试剂盒采用独特的缓冲液

体系，在裂解液环境中基因组DNA与磁珠高效结合，经过清洗和洗脱等步骤之后，可去除土壤中的杂质与腐植酸，获得高质量基因组DNA产物，OD260/OD280比值一般在1.7~1.9之间, 可直接用于酶切、PCR、电泳、Southern Blot、分子标记等下游分子生物学实验。

【试剂盒说明】

【自备仪器、耗材和试剂】

手动普通版：涡旋混合仪、水浴锅或金属浴、EP管（2.0mL ）、EP管配套用磁力架、异丙醇、无水乙醇、RNase A 溶液（100mg/mL，分散液：10mM Tris-HCl、1mM EDTA、pH值8.0）。

手动高通量版：涡旋混合仪、水浴锅或金属浴、48孔尖底板、48孔板配套专用磁力架、超强

磁板架48孔板专用硅胶盖、异丙醇、无水乙醇、RNase A溶液（100mg/mL，分散液：10mM Tris-HCl、1mM EDTA、pH 值8.0 ）。

【手动普通版】

本操作方法在2.0mL EP管中进行操作。

1. 释放土壤微生物

称取100~500mg 土壤样本至2.0mL EP管中，依次加入1.0mL裂解液1和20卩蛋白酶K，

涡旋振荡1~3min，将土壤样本分散均匀，58 C温浴10min，期间每隔5min颠倒3次混匀内容物。

注：1）如需去除RNA，请额外加入5 RNase A溶液；2）干燥的土壤样本请研磨至均一细小颗粒，有助于微生物的高效释放。

2. 获得土壤基因组DNA粗液

室温、12000rpm将EP管离心5min，然后转移全部上清液至新的 2.0mL EP管中。加入

400卩裂解液2，颠倒混匀，再次室温、12000rpm将EP管离心5min。

3. 核酸结合

转移全部上清液至另一只2.0mLEP管，依次加入400卩屏丙醇和50卩磁珠悬浮液（提前摇晃均匀），涡旋振荡5min。

4. 磁性分离

将EP管置于磁力架上静置约20s至磁珠吸附完全，如EP管内盖有残留磁珠，可保持EP管

在磁力架上，上下颠倒2~3次，磁珠可完全被磁力架吸附。保持EP管于磁力架上，吸弃上清液，期间避免接触磁珠。

5. 清洗

1）向EP管中加入600卩清洗液，将EP管从磁力架上取下，剧烈摇动使磁珠充分分散，涡旋震荡2min ，磁性分离（参照步骤4操作）；

2）使用600^L80%乙醇，参照上一步操作2次。

6. 除醇

将除尽上清液后的EP管保持在磁力架上，加入600卩除醇液，快速手摇润洗吸附的磁珠表面，之后快速弃去除醇液。

注：该步骤操作时间不宜过长，且不可吹散磁珠，否则影响核酸得量。

7. 洗脱：

向EP管中加入100 洗脱液，移液枪吹打使磁珠与洗脱液充分混匀，将EP管置于58 C环境中加热洗脱10min，期间每隔3min涡旋振荡30s。

注：洗脱液要求》25卩，100~200^L效果较好，洗脱液体积较少时会影响核酸得率。

8. 核酸转移

将EP管放置于磁力架上静置30s至磁珠吸附完全，用移液枪将洗脱液转移至另一干净EP 管中，提取过程完毕，此时可以弃去磁珠。

【手动高通量版】

该方法配套48孔尖底板、超强磁板架，以及英芮诚48孔板专用磁力架进行操作，可同步完成48个样本的提取工作。

1 ．释放土壤微生物

称取100~500mg 土壤样本至2.0mL EP管中，依次加入1mL裂解液1和20卩蛋白酶K，涡旋振荡1~3min将土壤样本分散均匀，58 °C温浴10min，期间每隔5min颠倒3次混匀内容物。

注：1）如需去除RNA，请额外加入5 RNase A溶液；2）干燥的土壤样本请研磨至细小均一，有助于微生物的高效释放。

2．获得土壤基因组DNA 粗液

室温、12000rpm将EP管离心5min，然后转移全部上清液至新的 2.0mL EP管中。加入400卩裂解液2，颠倒混匀，再次室温、12000rpm将EP管离心5min。

3．核酸结合

转移全部上清液至48孔板对应样品孔，并做好位置记录。向样品孔中加入400卩异丙醇

和50卩磁珠悬浮液（提前摇晃均匀），盖上48孔板专用硅胶盖，将48孔板置于涡旋混合仪上1200rpm振荡5min，使磁珠与核酸充分结合。

4．磁性分离

将48孔板置于超强磁板架上约10~20s ，磁珠快速吸附到48孔板底部；将48孔板转移至专用磁力架，轻微小范围四周移动至磁珠完全集中于底部孔尖端；保持48孔板固定于磁力架上，直接倒扣弃去上清液，保持倒扣状置于吸水纸（提前铺好）上吸尽上清液（操作方式下同）。

5．清洗

1）向48孔板中分别加入600 uL青洗液，1200rpm涡旋振荡1min，确保磁珠充分分散。磁性分离弃上清液（参照步骤4操作）；

2）使用600 uL80%乙醇，参照上一步操作2次。

6．除醇

将除尽上清液的48孔板固定于磁力架上，加入600 uL除醇液，快速手摇润洗吸附的磁珠表面，之后快速倒扣48孔板弃上清液，继续呈倒扣状置于吸水纸上吸尽上清液。

注：该步骤操作时间不宜过长，且不可震散磁珠，否则影响核酸得量。7．洗脱

向48孔板孔位中分别加入100 uL洗脱液，盖上硅胶盖，涡旋振荡30s使磁珠与洗脱液充分混匀。将48孔板置于58 C水浴中加热洗脱10min，期间每隔3min涡旋振荡30秒，确保磁珠与核酸洗脱完全。

注：洗脱液要求》25 uL，100~200^L效果较好，洗脱液体积较少时会影响核酸得率。

8．核酸转移

将48孔板置于磁力架上，静置30s至磁珠完全吸附于48孔板底部尖端，将48孔板固定于磁力架上，倾斜45°轻磕3-4次，使洗脱液集中于48孔板尖端一侧（完全与磁珠分离）；保持45° 倾斜同时用移液枪将洗脱液转移至干净的EP管中，做好标记，提取过程完毕，此时可弃去磁珠。

大量全血基因组DNA提取试剂盒操作方法及步骤说明书

大量全血基因组DNA提取试剂盒目录号：DN04 DN0401 16次×10ml DN0402 32次×10ml DN0403 96次×10ml 适用范围：适用于快速提取各种动物全血基因组DNA 试剂盒组成、储存、稳定性：试剂盒组成保存16次×10ml 32次×10ml 96次×10ml 10x红细胞裂解液室温50 ml 100 ml 300 ml 细胞核裂解液室温180 ml 180×2 ml 250 m l×4 蛋白沉淀液室温55 ml 110 ml 330 ml DNA溶解液室温15 ml 30 ml 90 ml 本试剂盒在室温储存18个月不影响使用效果。储存事项: 1.环境温度低时细胞核裂解液中某些去污剂成份会析出出现浑浊或者沉淀，可在 37℃水浴加热几分钟，即可恢复澄清，不要剧烈摇晃，以免形成过量的泡沫。 2.蛋白沉淀液可能出现析出和沉淀，可以在37℃水浴几分钟帮助重新溶解，如果不能完全溶解，也不影响使用效果，直接取用上层溶液即可。

3.避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化，各溶液使用后应及时盖紧盖子。产品介绍：本试剂盒根据全血特点采用几个快速步骤提取基因组DNA。首先红细胞裂解液裂解去除不含DNA的红细胞，细胞核裂解液裂解白细胞释放出基因组DNA，然后蛋白沉淀液选择性沉淀去除蛋白，最后纯净的基因组DNA通过异丙醇沉淀并重溶解于DNA 溶解液。产品特点： 1.从十几个配方中优选出的红细胞裂解液配方，裂解快速完全。 2.不需要使用有毒的苯酚等试剂。 3.快速，简捷，单个样品操作一般可在1小时内完成。 4.结果稳定，产量高（典型的产量10ml全血可提取出150-500μg），OD260/OD280 典型的比值达 1.7～1.9，长度可达50kb-150kb，可直接用于构建文库、PCR、Southern-blot和各种酶切反应。注意事项 1.所有的离心步骤均在室温完成，使用转速可以达到2,500 x g，并配备容纳50ml心管转头的传统台式离心机。 2.用户需自备异丙醇和70％乙醇。 3.典型的产量10ml全血可提取出150-500μg基因组DNA（不同样品尤其疾病样品中中白细胞数量差异可能非常大，因此产量的个体差异也可能非常大）。 4.本试剂盒为溶液型，可以很容易的按照比例扩大或者缩小每次处理的全血量（20μl-10ml），请联系我们索取其它处理量的操作手册。

组织基因组DNA提取试剂盒磁珠法

组织基因组DNA提取试剂盒（磁珠法）使用说明书（Cat#Yu-TD02-1）【产品介绍】组织基因组DNA提取试剂采用国内领先的专利技术合成的纳米磁珠颗粒和多次实验优化的缓冲液体系，能从样品中分离纯化高质量DNA。在一定条件下，磁珠表面修饰的基团高效吸附目的DNA，而当条件改变时，磁珠释放吸附的DNA，达到快速分离纯化DNA的目的。整个过程安全、无毒、便利，提取的DNA质量稳定、纯度高。纯化后的DNA适用于多种后续实验。本试剂盒可以从少量动物组织中分离纯化出高质量、高浓度的DNA。【产品特点】 1. 效率高：DNA提取得率高，操作简便。 2. 安全、无毒害：整个操作过程无需使用苯酚、氯仿等有毒物质，提取环境更加安全。 3. 高纯度：OD260/230在1.5左右，OD260/280在2.0左右。可直接用于各种分子生物学实验。【试剂盒组成】【规格】50T/盒【自备试剂】无水乙醇，异丙醇【贮藏与有效期】裂解吸附液和Buffer AW1必须室温（15-25℃）避光保存；磁珠室温保存；其他所有试剂室温保存，有效期为1年。【注意事项】

1、Buffer AW1使用前，加入18mL无水乙醇，混匀，使乙醇含量为60%。★ 2、Buffer AW2使用前，加入21mL无水乙醇，混匀，使乙醇含量为70%。★ 3、磁珠使用前必须充分混匀。★ 4、组织最好置于组织核酸（DNA/RNA）保存液（Cat#Yu-TP01）或液氮中保存。【操作步骤】 1、样本的处理 1.1、液氮中保存的组织将组织在液氮中磨成粉末后，使液氮充分挥发。再以50-100mg组织中加入1mL裂解吸附液，充分研磨。以下进入步骤2。 1.2、组织保存液中保存的样本取出在组织保存液中保存的组织，加入1mL无水乙醇洗涤组织两次。再以50-100mg组织中加入1mL裂解吸附液，充分研磨。以下进入步骤2。 2、吸取400μL研磨后的裂解吸附液转入1.5mL的EP管中，加入5μL蛋白酶K，60℃1500rpm10分钟。 3、取出EP管，加入250μL异丙醇和10μL混匀的磁珠，闭盖，充分混匀。室温1500rpm振荡10min。 4、取出EP管，瞬时离心，将EP管放于磁力架上，吸附磁珠4分钟。 5、在磁力架上，打开EP管盖，吸弃液体，保留磁珠。 6、加入600μL Buffer AW1，闭盖。从磁力架上取下EP管，充分混匀使磁珠完全分散至洗液中。注：可以在漩涡振荡仪上3000rpm振荡20秒，使EP管壁上的磁珠完全分散至洗液中。 7、将EP管放回磁力架，吸附磁珠3分钟至液体清澈（吸附磁珠2分钟后，颠倒磁力架3次，使EP管盖上残留的磁珠被充分回收）。打开EP管盖子，吸弃液体，保留磁珠（需吸干EP管底和管盖中的残留液体）。注：由于各个实验室磁力架磁力不尽相同，吸附时间可以延长，直至液体清澈。 8、加入600μL Buffer AW2，闭盖。从磁力架上取下EP管，充分混匀使磁珠完全分散至洗液中。注：可以在漩涡振荡仪上3000rpm振荡20秒，使EP管壁上的磁珠完全分散至洗液中。

DNAzol基因组DNA快速提取试剂盒操作方法及步骤说明书

DNAzol 基因组DNA快速提取试剂目录号：DN26 DN2601 50ml DN2602 100ml 产品介绍： DNAzol 是一种完全的、可直接使用的基因组DNA提取试剂，简单高效，结果可靠，可快速提取基因组DNA，适用于多种大量或少量样品。DNAzol 可在一个步骤中裂解细胞并水解RNA，经过乙醇沉淀后即可快速得到基因组DNA。整个过程只需10-30 分钟，DNA 回收率可达70-100％，得到的DNA 不需再纯化，可直接用于Southern 杂交、斑点杂交、分子克隆、PCR 反应和其他分子生物学应用。产品储存：室温保存至少一年。注意事项： DNAzol 有毒害性，应避免直接接触皮肤和眼睛。操作步骤：（实验前请先阅读注意事项） 1.裂解，匀浆 a.组织：25-50mg 组织加1ml DNAzol ，使用匀浆仪处理5-10 次。少量（5-10mg）柔软组织，如脾或脑组织，可切成或者捣成小块使用微量取样器吹打

混匀，室温放置5-10 分钟。 b.细胞：单层培养的细胞应直接裂解，倒出培养基，加入DNAzol 用取样器吹打几次混匀。每10cm2 细胞培养板加0.75-1.0ml DNAzol。 c.细胞沉淀或悬浮液：每1-3×107细胞（体积小于0.1ml）加1ml DNAzol，反复吹打混匀。以上均要使用大口径枪头吹打，以免过度剪切断基因组。 2.离心 4 -25℃，10000g 离心10 分钟。将得到的上清转入新管。此步骤去除组织碎片、部分水解的RNA和多糖。如果所提样品为含较多细胞和细胞外物质的样品，如肝、肌肉和大部分植物组织等，或要提取不含RNA 的DNA 时，可加此步骤。其他样品可省略此步。 3.沉淀每使用1ml DNAzol 加0.5ml 100%乙醇，颠倒离心管5-8 次，混匀样品至出现DNA 沉淀，室温放置1-3分钟。可以看见DNA 絮状沉淀，让沉淀自然沉降到管底，尽可能吸弃上清。用枪头搅绕DNA贴附在离心管上端壁上，仔细吸弃剩下的在管底和管壁的上清。如果因为剪切太厉害导致形成小片段或者量少的DNA(少于15ug)，无法缠绕到枪头上，可在4 -25℃，4000g 离心1-2分钟沉淀DNA，弃上清。 4.漂洗用0.8-1ml 75％乙醇漂洗DNA 两次。漂洗时，将DNA 悬浮在乙醇中，颠倒离心管3-6 次，然后静置0.5-1 分钟使DNA 沉降到管底，尽可能吸弃上清。如果需要，可在4 -25℃，1000g 离心1-2 分钟沉淀DNA。从组织中提取DNA 时，如需去除其他内含物，第一次漂洗可用70％DNAzol 和30％乙醇的溶液代替75％乙醇。

通用基因组DNA提取试剂盒使用说明

通用基因组DNA提取试剂盒使用说明货号：D2100 规格：50T/100T 保存：室温(15℃-25℃)干燥保存，复检期12个月，2℃-8℃保存时间更长。开封后请将RNase A，蛋白酶K于-20℃保存。试剂盒内容：D2100-50T D2100-100T RNase A1ml1ml×2 蛋白酶K1ml1ml×2 溶液A25ml50ml 溶液B25ml50ml 漂洗液15ml15ml×2 洗脱液15ml30ml 吸附柱50个100个收集管50个100个说明书1份1份产品简介: 本试剂盒为通用型，适合于从土壤，粪便，昆虫，以及其他样本中提取基因组DNA。对细菌，真菌，昆虫等样本都具有很好的裂解效果，最大限度的保留了生物DNA的多态性。使用本试剂盒提取的DNA产量大、完整性好，可直接用于各种常规操作，包括酶切、PCR、文库构建、Southern杂交等实验。

操作步骤：使用前请先在漂洗液中加入无水乙醇，加入体积请参照瓶上的标签。所有离心步骤均为使用台式离心机在室温下离心。 1、样品的处理： 1）土壤：称取0.1-0.3g(根据干湿)土壤，放入研钵中，倒入适量的液氮，立即研磨，重复3次，使土壤颗粒研成粉末，加500ul溶液A，振荡至彻底悬浮。 2）粪便：称取0.1-0.3g(根据干湿)粪便，加500ul溶液A，振荡至彻底悬浮。 3）昆虫：称取0.1-0.3g昆虫，倒入适量的液氮，立即研磨，重复3次，使昆虫研成粉末，加500ul溶液A，振荡至彻底悬浮。 4）未知样品，如为细未状，可直接称取0.1-0.3g(根据干湿)加500ul 溶液A，如为块状，可0.1-0.3g用液氮研磨成粉未，再加500ul溶液A，振荡至彻底悬浮。 2、向悬浮液中加入20ul10mg/ml的RNase A，55℃放置10min。 3、加入20ul10mg/ml的蛋白酶K，充分混匀，55℃水浴消化，30min。消化期间可颠倒离心管混匀数次，12000转离心10min。将上清转移到一个新的离心管中。如有沉淀，可再次离心。 4、加入500ul溶液B，充分混匀。如出现白色沉淀，于55℃放置5min，沉淀即会消失，不影响后续实验。如溶液未变清亮，说明样品消化不彻底，可能导致提取的DNA量少及不纯，还有可能导致上柱后堵柱子，请增加消化时间。

mobioDNA提取试剂盒说明书翻译

1.加2g土壤到15mL Bead Tube中 2.加入0.25mLSR1和0.8mLSR2之后，加入2.5mL Bead Solution到Bead Tube 3.加入3.5mL酚：氯仿：异戊醇25:24:1到试管中，加盖后涡旋混合直到分层消失。 4.最大转速涡旋震荡15min 5.室温，2500g离心10min 6.取出后，小心地转移上层水相到干净的15mL收集管中，弃掉下层酚 7.加1.5mL SR3到水相中，然后涡旋混匀，4℃孵育10min 8.室温，2500g离心10min。转移上清到一个新的15mL收集管中 9.加入5mL SR4溶液到装有上清的收集管中，混匀，室温孵育30min 10.室温，2500g离心30min 11.倒掉上清，将收集管倒置在纸上5min 12.震荡SR5混合。加1mL SR5到15mL收集管中，并反复吹打使完全重悬。 13.为每一个RNA样品准备一个RNA Capture Column A．拿去15mL收集管的盖子，将RNA Capture Column放入15mL收集管中。 B．加2mL SR5到RNA Capture Column中，让其完全流尽。 14.从第12步加入RNA样品至RNA Capture Column中，然后让其在重力作用下流尽。收集液体。 15.用1mLSR5清洗柱子。重力流尽，收集洗脱液。 16.转移柱子到新的收集管，加入SR6震荡混合，然后加入1mL SR6到RNA Capture Column 洗脱RNA到15mL收集管中，重力流尽。 17.转移洗脱的RNA到2.2mL收集管中，并且加入1mL SR4.颠倒至少一次混合，然后-20℃ 孵育最少10min 18.室温13000g离心15min浓缩RNA 19.倒掉上清并倒转收集管在纸上10min晾干 20.用100μL SR7溶液重悬RNA沉淀，去除其中的基因组

粪便基因组DNA提取试剂盒使用说明

粪便基因组DNA提取试剂盒使用说明货号：D2700 规格：50T/100T 保存：室温(15℃-25℃)干燥保存，复-检期12个月，2℃-8℃保存时间更长。试剂盒内容：D2700-50T D2700-100T 溶液SA25ml50ml 溶液SB3ml6ml 溶液SC5ml10ml 溶液SD10ml20ml 漂洗液15ml15ml×2 洗脱液15ml30ml 吸附柱50个100个收集管50个100个说明书1份1份注：试剂盒开封后溶液SA、SB、SC、SD需在2-8℃保存。产品简介：粪便基因组DNA提取试剂盒适合于从各种粪便中提取微生物DNA。对粪便中各种细菌、真菌有很好裂解效果，最大限度的保留了微生物DNA的多态性。使用本试剂盒提取的DNA产量大、完整性好，可直接用于各种常规操作，包括酶切、PCR、文库构建、Southern杂交等实验。操作步骤：使用前请先在漂洗液中加入无水乙醇，加入体积请参照瓶体上的标签。所有离心步骤均为使用台式离心机在室温下离心。

1、称取粪便样本0.1-0.5g，在液氮中充分研磨成细粉末，加入450ul溶液SA震荡混匀。 *也可直接称取样本0.1-0.5g于离心管(建议使用2ml圆底管)，加入450ul溶液SA剧烈震荡混匀1-2min至没有固体块。使用液氮研磨效果最佳。 2、加入50ul溶液SB充分颠倒混匀（不要剧烈震荡），65℃水浴6min，每2min充分颠倒混匀一次。 3、加入100ul溶液SC充分颠倒混匀（不要剧烈震荡），12000rpm离心10min。 4、将上清转移到新的离心管，12000rpm离心2min。 5、在吸附柱中加入200ul溶液SD，将离心后的上清加入到带有溶液SD的吸附柱中，用移液器吹吸几次混匀，12000rpm离心1min。 6、将收集管中的滤出液混匀后重新吸入吸附柱(必须)，12000rpm离心1min。 7、倒掉收集管中的废液，在吸附柱中加入漂洗液500ul，12000rpm离心1min。 8、倒掉收集管中的废液，重复步骤7两次(共漂洗三次)。 9、倒掉收集管中的废液，将吸附柱放回收集管，12000rpm离心2min。 10、拿出吸附柱在室温干燥数分钟(因季节及气候等因素不等)，或50℃干燥1min。 11、将吸附柱放入一个新的离心管中，加入50-100ul洗脱液(65℃预热)，12000rpm离心1min。 12、将离心管中的液体重新加入到吸附柱中，12000rpm离心1min。离心管中即为粪便微生物DNA溶液。注意事项: 1、新鲜的粪便样本会得到更高的产率，不同样本在采样前应先查阅相应的最佳保存条件。 2、若溶液中出现浑浊可在37℃水浴中溶解片刻至清澈，不会影响结果。 3、在需要吸取上清液的步骤中应避免吸到沉淀，否则会堵塞吸附柱，并影响产物纯度。

动物组织基因组DNA提取试剂盒说明书

磁珠法动物组织基因组DNA提取试剂盒 MagBeads Tissues Gen DNA Extraction Kit 【目录号】TGDE-5005、TGDE-5030 【运输条件】2~25℃；【保存条件】磁珠悬浮液2~8℃，其它组分室温保存；【试剂盒组成】【注意事项】 1. 磁珠悬浮液严禁反复冻融和离心，使用前请充分混匀； 2. 使用前请检查裂解液1和裂解液2是否出现结晶，如有结晶请置于65℃水浴重新溶解； 3. 在使用本试剂盒前，请用户自配80%乙醇； 4. 如需去除RNA请自备RNase A溶液（100mg/mL, 分散液10mM Tris-HCl, 1mM EDTA, pH值8.0）； 5. 本操作指南经本公司反复验证，使用前请仔细阅读，并且按照操作指南的建议操作。

磁珠法·自动化：为生命科学提供自动化磁纳米捕获方案【产品简介】本产品适用于从各种动物组织以或者细胞样本中提取基因组DNA。试剂盒采用具有独特分离作用的纳米磁珠和独特的缓冲液系统。特殊技术包埋的纳米磁珠在特定条件下对核酸具有极强的亲和力，而当条件改变时可以释放所吸附的核酸，从而达到快速分离纯化核酸的目的。本试剂盒提取所得基因组DNA产物得量高、纯度好，适用于各种下游分子生物学实验，如：酶切、PCR、QPCR、文库构建、Southern 杂交、芯片检测和高通量测序等。本试剂盒可配合核自动化酸提取仪或工作站使用，实现高通量操作。【试剂盒说明】【自备仪器、耗材及试剂】仪器自动版研钵（或组织研磨机、匀浆机）、英芮诚ETP-300型全自动核酸提取仪、核酸提取仪配套用磁棒套、水浴锅或金属浴、涡旋振荡仪、96孔方孔圆底板、80%乙醇、异丙醇、液氮。手动版研钵（或组织研磨机、匀浆机）、水浴锅或金属浴、涡旋振荡仪、真空干燥箱、80%乙醇、异丙醇、2.0mL离心管、离心管配套用磁力架、液氮。【仪器自动版操作步骤】本操作以英芮诚ETP-300型全自动核酸提取仪为例，同步可完成32个样本的提取。 1．准备96孔板参照下表向96孔板各孔位中分别加入相应试剂：

土壤基因组DNA提取试剂盒使用说明

土壤基因组DNA提取试剂盒使用说明货号：D2600 规格：50T/100T 保存：室温(15℃-25℃)干燥保存，复检期12个月，2℃-8℃保存时间更长。试剂盒内容：D2600-50T D2600-100T 溶液A25ml50ml 溶液B3ml6ml 溶液C5ml10ml 溶液D10ml20ml 漂洗液15ml15ml×2 洗脱液10ml20ml 吸附柱50个100个收集管50个100个 PCR增强剂500ul1ml 说明书1份1份注：试剂盒开封后溶液A、B、C、D需在2-8℃保存。PCR增强剂-20℃保存。产品简介: 本试剂盒适合于从褐土、淤泥、火山灰等各种极端土壤环境中提取微生物DNA。对土壤中各种细菌、真菌有很好裂解效果，最大限度的保留了微生

物DNA的多态性。本试剂盒采用我公司特有的腐殖质吸附材料，可高效专一的去除各种腐殖质成分而丝毫不会影响DNA的产率，纯度较酚、氯仿抽提法提高数倍。使用本试剂盒提取的DNA产量大、完整性好，可直接用于各种常规操作，包括酶切、PCR、文库构建、Southern杂交等实验。操作步骤：使用前请先在漂洗液中加入无水乙醇，加入体积请参照瓶体上的标签。所有离心步骤均为使用台式离心机在室温下离心。 1、称取土壤样本0.1-0.5g，在液氮中充分研磨成细粉末，加入450ul溶液A震荡混匀。 *也可直接称取样本0.1-0.5g于离心管(建议使用2ml圆底管)，加入450ul溶液A剧烈震荡混匀1-2min至没有固体块。使用液氮研磨效果最佳。 2、加入50ul溶液B充分颠倒混匀(不要剧烈震荡)，65℃水浴6min，每2min充分颠倒混匀一次。 3、加入100ul溶液C充分颠倒混匀(不要剧烈震荡)，12000rpm离心10min。 4、将上清转移到新的离心管，12000rpm离心2min。 5、在吸附柱中加入200ul溶液D，将离心后的上清加入到带有溶液D 的吸附柱中，用移液器吹吸几次混匀，12000rpm离心1min。 6、将收集管中的滤出液混匀后重新吸入吸附柱(必须)，12000rpm离心1min。

试剂盒DNA提取详细操作步骤

一、试剂盒打开后需要准备的工作 1、Proteinase K（蛋白酶K）的溶解 ①取4.5ml双蒸水加入蛋白酶K粉中使其充分溶解 ②将溶解好的蛋白酶K溶液分装进小离心管，每管100u l～200ul ③将分装好的Proteinase K放入-20℃冰箱中保存，使用期限为12个月 2、组织抑制剂（Inhibitor Removal buffer）的调配加入20ml无水乙醇（absolute ethanol）颠倒混匀并在空白方框处打钩 3、洗液（wash buffer）的调配加入80ml无水乙醇（absolute ethanol）颠倒混匀并在空白方框处打钩二、组织DNA提取（试剂盒） 1、组织样品处理与消化 ①将采集来的样品剪碎（≤0.1cm）洗净保存液。 ②加入组织破解液Tissue-lysis 200ul 蛋白酶K 40ul然后放入55℃水浴锅内3个小时使其充分消化。 2、DNA提取 ①在消化好的组织样品中加入结合液binding buffer 200ul 然后放入70°水浴锅中10分钟。 ②再加异丙醇100ul 混合均匀吸取上清液放入柱体中，然后离心8000g一分钟。 ③倒掉底液，加500ul组织抑制剂Inhibitor Removal 然后离心倒掉底液 ④加洗液washing buffer500ul离心（洗液加两次） ⑤在70℃预热Elution Buffer，然后将洗好的柱体下部分丢掉，换新的离心管加入Elution Buffer200ul溶解10分钟离心保留底液放-20℃保存。三、细胞DNA的提取（试剂盒） 1、组织样品处理与消化 ①将带有培养基的样品用PBS清洗干净8000rpm/1min离心，倒掉上清 ②加PBS200ul振荡摇匀使之样品成为单个细胞的悬浊液 ③加200ul Binding Buffer，40ul蛋白酶K 混合均匀放入70℃水浴锅内消化10 分钟。 2、DNA提取 ①加异丙醇100ul 混合均匀吸取上清液放入柱体中，然后离心8000g一分钟。 ②倒掉底液，加500ul组织抑制剂Inhibitor Removal 然后离心倒掉底液 ③加洗液washing buffer500ul离心（洗液加两次） ④预热双蒸水（37℃）然后将洗好的柱体下部分丢掉，换新的离心管加入双蒸水 100ul溶解10分钟离心保留底液放-20℃保存。（注：最好溶解两次）。四、分光密度仪的操作方法及样品的测试结果 1、光密度（optical delnsity）简称OD 2、操作示意图电源开关→主界面→按1键→核酸dsDNA 3、检测 ①首先做一个空白对照，将1ul的水滴到镜头上盖上盖子，按一下蓝色键

酵母基因组DNA提取试剂盒操作方法及步骤说明书

试剂盒组成、储存、稳定性：试剂盒组成保存50次100次200次酵母裂解液室温15 ml 30 ml 60 ml 蛋白沉淀液室温 5 ml 10 ml 20 ml DNA溶解液室温 5 ml 5 ml 10 ml 本试剂盒在室温储存12个月不影响使用效果。储存事项: 1.环境温度低时酵母裂解液中某些去污剂成份会析出出现浑浊或者沉淀，可在37℃ 水浴加热几分钟，轻轻旋摇，即可恢复澄清，不要剧烈摇晃，以免形成过量的泡沫。 2.蛋白沉淀液可能出现析出和沉淀，可以在37℃水浴几分钟帮助重新溶解，如果不能完全溶解，也不影响使用效果，直接取用上层溶液即可。 3.避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化，各溶液使用后应及时盖紧盖子。产品介绍：本试剂盒用于快速的从酵母中提取基因组DNA。在针对酵母细胞特点配制的酵母裂解液作用下，酵母细胞被裂解释放出基因组DNA，然后蛋白沉淀液选择性沉淀去除蛋白，最后纯净的基因组DNA通过异丙醇沉淀并重溶解于DNA溶解液。产品特点： 1.不需要使用有毒的苯酚、氯仿等试剂。 2.快速，简捷，整个过程可在1个小时内完成。

3.结果稳定，产量高（比离心柱型的产量高一倍以上），OD260/OD280典型的比值达1.7～1.9，长度可达50Kb-150kb，可直接用于PCR，Southern-blot和各种酶切反应以及文库构建。操作步骤：（实验前请先阅读注意事项） 1.吸取1.5ml 酵母培养物到一个1.5ml离心管；12,000rpm离心2分钟，尽可能弃上清，必要时候可以用枪吸去。 2.高速涡旋振荡，打散重悬酵母细胞团。 3.加入300μl酵母裂解液，涡旋振荡混匀，或者用1毫升的枪头反复吹打混匀。酵母细胞的重悬分散对下一步裂解非常重要，必须充分分散重悬。 4.将裂解物放置在70℃水浴15-30分钟。如果产量低，可以适当提高水浴温度和延长水浴时间，中间可以涡旋振荡混匀几次帮助裂解。 5.冰上至少5分钟使回复到室温。 6.在回复到室温的裂解物内加入100μl蛋白沉淀液后，在涡旋振荡器上高速连续振荡混匀20秒。混匀后可能见到一些小的蛋白团块。冰浴5分钟。 7.13,000rpm离心5-10分钟。这时应该可以见到管底蛋白沉淀，也可能见到一些蛋白沉淀漂浮在液体表面。 8.小心缓慢吸取上清到一个新的1.5ml离心管中，不要吸到沉淀。吸取上清时，注意不要吸到管底的和漂浮在液体表面的蛋白沉淀。如果不小心将蛋白沉淀转入新的离心管中，可再次离心2分钟后取上清。 9.加入等体积的室温异丙醇（约400μl），颠倒30次混匀或者直到出现絮状DNA沉淀（或者白色浑浊沉淀）。

酵母基因组DNA提取试剂盒使用说明

酵母基因组DNA提取试剂盒使用说明货号:D1900 规格:50T/100T 保存:室温(15℃-25℃)干燥保存，复检期12个月，2℃-8℃保存时间更长。试剂盒内容：50T100T RNase A1m11ml×2 蛋白酶1m11ml×2 酵母破壁酶 1.25m1 2.5m1 β-巯基乙醇300ul600ul 山梨醇Buffer25m150m1 溶液A10ml20ml 溶液B10ml20ml 漂洗液15m115ml×2 洗脱液10ml20ml 吸附柱50个100个收集管50个100个说明书1份1份产品简介: 本试剂盒采用可以特异性结合DNA的离心吸附柱和独特的缓冲液系统，提取酵母基因组DNA。离心吸附柱中采用的硅基质材料为本公司特有新型材料，能够高效专一吸附DNA，可最大限度去除杂质蛋白及细胞中其他有机化合物。提取的基因组DNA片段大，纯度高，

质量稳定可靠。使用本试剂盒提取的基因组DNA可用于各种常规操作，包括酶切、PCR、文库构建、Southern杂交等实验。操作步骤: 使用前请先在漂洗液中加入无水乙醇，加入体积请参照瓶体上的标签。所有离心步骤均为使用台式离心机在室温下离心。 1、取酵母细胞(不超过5×107ce l1s)，12000rpm离心1min.，尽量吸除上清。 2、酵母细胞壁的破除：向酵母菌体中加入470ul山梨醇Buffer。充分悬浮菌休，加入25ul酵母破壁酶和5ulβ-巯基乙醇，充分混匀。30℃处理1-2h.，期间可颠倒离心管混匀数次。 3、12000rpm离心lmin，弃上清，收集沉淀。 4、向沉淀中加入200ul溶液A，充分悬浮沉淀，向悬浮液中加入20ul(10mg/ml)的RNase A，充分颠倒混匀，室温放置10min。 5、加入20ul(10mg/ml)的蛋白酶K，充分颠倒混匀。65℃水浴消化15-30min，消化期间可颠倒离心管混匀数次，直至样品消化完全为止。 6、加入200ul溶液B，再加入200ul无水乙醇，充分颠倒混匀，此时可能会出现絮状沉淀，不影响DNA的提取，可将溶液和絮状沉淀都加入吸附柱中，室温放置2min。 7、12000rpm离心2min，弃废液，将吸附柱放入收集管中。 8、向吸附柱中加入700ul漂洗液(使用前请先检查是否己加入无水乙醇)。12000rpm离心1min，弃废液，将吸附柱放入收集管中。 9、向吸附柱中加入500ul漂洗液，12000rpm离心l min，弃废液，将吸附柱放入收集管中。

新型植物基因组DNA快速提取试剂盒使用说明书

◆新型植物基因组DNA快速提取试剂盒◆目录号DN15 ◆使用手册 ◆实验室使用，仅用于体外

新型植物基因组DNA快速提取试剂盒目录号：DN15 目录编号包装单位 DN1501 50次 DN1502 100次 DN1503 200次适用范围：适用于快速提取植物组织、细胞、真菌基因组DNA

试剂盒组成、储存、稳定性：试剂盒组成保存50次100次200次RNase A(10mg/ml) -20℃250 μl500 μl 1 ml 缓冲液AP1 室温25 ml 50 ml 100 ml 缓冲液AP2 室温10 ml 20 ml 40 ml 缓冲液AP3/E 室温15 ml 25 ml 50 ml 第一次使用前按说明加指定量乙醇漂洗液WB 室温15 ml 25ml 50ml 第一次使用前按说明加指定量乙醇洗脱缓冲液EB 室温15 ml 20 ml 40 ml 吸附柱AC 室温50个100个200个收集管（2ml）室温50个100个200个本试剂盒在室温储存12个月不影响使用效果。储存事项: 1.裂解液AP1、AP3/E低温时可能出现析出和沉淀，可以在65℃水浴几分钟帮助重新溶解（AP3加入乙醇前可加热，加入乙醇后不可加热），恢复澄清透明后冷却到室温即可使用。 2.避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化，各溶液使用后应及时盖紧盖子。

产品介绍：该试剂盒采用DNA吸附柱和新型独特的溶液系统，适合于从含酚类、多糖类和酶抑制物的植物样品中快速简单地提取基因组DNA。可在30分钟内完成一个或多个100mg新鲜或20mg干燥的植物样品DNA的纯化工作。提取过程不需要用到有毒的酚氯仿等有机物抽提，也不需要用到耗时的异丙醇或乙醇沉淀，并能快速高效地去除多糖类、酚类和酶抑制物等杂质，纯化的DNA可直接用于PCR、酶切和杂交等实验。新鲜或干燥的植物组织（细胞）磨碎后经裂解液裂解；蛋白质、多糖、细胞残片被沉淀去除；然后基因组DNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜，再通过一系列快速的漂洗－离心的步骤, 进一步将多糖，多酚和细胞代谢物，蛋白等杂质去除，最后低盐的洗脱缓冲液将纯净基因组DNA从硅基质膜上洗脱。产品特点： 1.离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口特制吸附膜，柱与柱之间吸附量差异极小，可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。 2.不需要使用有毒的苯酚等试剂，也不需要乙醇沉淀等步骤。 3.快速，简捷，单个样品操作一般可在1小时内完成。 4.数种去多糖、多酚成份和多次柱漂洗确保高纯度，OD260/OD280典型的比值达 1.7～1.9，可直接用于PCR，Southern-blot和各种酶切反应。

质粒DNA小量提取试剂盒说明书

质粒DNA 小量提取试剂盒一、产品简介采用SDS碱裂解法，结合硅胶膜选择性吸附DNA的方法，适合1-4ml细菌培养物中提取多至20 μg质粒DNA。纯化的质粒DNA适合用于酶切、PCR、测序、转化和转染等分子生物学实验。二、试剂盒组成和储存组成内容DK301-01 (50次) DK301-02 (200次) RNase A1＊30 μl 120 μl Buffer BL 15 ml 60 ml Buffer P1 15 ml 60 ml Buffer P2 15 ml 60 ml Buffer P3 20 ml 90 ml Buffer WA§19 ml 75 ml Buffer WB§16 ml 65 ml DNA吸附柱-B 50套200套 1.5 ml离心管50个200个 TE※15 ml 30 ml 说明书1份1份＊RNase A1: 50 mg/ml, -20℃长期保存；第一次使用前将RNase A1全部加入Buffer P1中，于4℃保存。 §Buffer WA和Buffer WB，使用前按试剂瓶所示体积加入无水乙醇或者95%乙醇，混合均匀。 ※TE：10 mM Tris-HCl, 0.1 mM EDTA, pH 8.0(25°C)。除RNase A1和Buffer P1(已加入RNase A1)外，其他组成成分于室温储存。三、注意事项 1.Buffer P3和Buffer WA含刺激性化合物，避免沾染皮肤、眼睛和衣服、谨防吸入口鼻。若沾染皮肤、眼睛，立即使用大量水或生理盐水冲洗沾染处，必要时寻求医疗咨询。 2. 使用后应及时盖紧试剂瓶盖子，以免影响下次使用效果。 3. 操作步骤A2和B2，充分悬浮细菌，无可见的块状菌团，不然会影响裂解效果。 4. 操作步骤A3和B3，缓慢翻转离心管，以免机械力打断基因组DNA而导致最后纯化的质粒DNA中有基因组 DNA污染，同时避免打断质粒DNA，保持其完整性。 5. 操作步骤A3和B3，溶液呈透亮后，需立即加入Buffer P3，避免质粒DNA长时间暴露于Buffer P2（含NaOH，强碱性环境）中完全变性为单链DNA后无法复性恢复为超螺旋状态。 6. 操作步骤A4和B4，形成紧实的大团状凝集物前需缓慢摇晃离心管，避免机械力打断基因组DNA和质粒DNA；之后快速剧烈摇晃3次将凝集物打散，有助于充分释放质粒DNA，从而提高产量。 7. 操作步骤5，室温放置1-2 min，有助于提高DNA吸附效率，从而提高产量。 8. 操作步骤10，室温放置1-2 min，有助于提高DNA洗脱效率，从而提高产量。四、操作步骤平衡DNA吸附柱(此步骤可提高硅胶介质吸附DNA效率，可在使用本试剂盒当天任何时间操作) 在DNA吸附柱-B（置于2 ml离心管中）中加250 μl Buffer BL，室温12,000×g离心1 min，弃废液，将DNA 吸附柱-B放回2 ml离心管中。根据菌量选择方法A或者B提取质粒DNA 从≤2×109细菌中提取质粒DNA，请选择方法A. 从少量细菌中提取质粒DNA。从2×109-4×109细菌中提取质粒DNA，请选择方法B. 从常规数量细菌中提取质粒DNA； ▲培养至OD600 为1-1.5，此时1 ml 菌液中约含1.0×109细胞。从1-2 ml菌液中提取质粒DNA按照方法A操作，从2-4ml 菌液中提取质粒DNA按照方法B操作。 ▲如果细菌生长状态不佳，视离心收集后细菌沉淀体积选择提取质粒DNA的方法。估算细菌沉淀体积，细菌沉淀体积≤30 μl 按照方法A操作，细菌沉淀体积≥30 μl 按照方法B操作。 ▲方法A可以减弱Buffer P2（含NaOH，强碱性环境）对质粒DNA的变性作用，减少质粒DNA完全变性为单链DNA后无法复性恢复为超螺旋状态的比例。 A. 从少量细菌中提取质粒DNA 实验准备：第一次使用前，将试剂盒携带的RNase A1全部加入Buffer P1中。检查Buffer P2是否析出白色沉淀，如有沉淀在37℃放置数分钟，沉淀溶解后恢复至室温使用。 A1. 用干净的1.5 ml离心管，室温12,000×g离心1 min收集≤2×109细菌；弃尽上清。 A2. 加入100 μl Buffer P1（含RNase A1），Vortex震荡或者用Tips充分悬浮细菌。 A3. 加入100 μl Buffer P2，缓慢翻转离心管混合均匀，直至溶液呈浅黄色透亮状。 A4. 立即加入140 μl Buffer P3，缓慢翻转离心管混合均匀，形成紧实的大团状凝集物后（约摇晃15次），快速剧烈摇晃3次使凝集物呈松散状；室温12,000×g离心5 min。 ▲如果离心上清中有漂浮的凝集块，快速摇晃3次后再次离心。继续操作步骤5.

全血基因组DNA提取试剂盒使用说明

全血基因组DNA提取试剂盒使用说明货号：D1800 规格：50T/100T 保存：室温(15℃-25℃)干燥保存，复检期12个月，2℃-8℃保存时间更长。试剂盒内容：50T100T RNase A1ml1ml×2 蛋白酶K1ml1ml×2 红细胞裂解液120ml120ml×2 溶液A15ml25ml 溶液B15ml30ml 漂洗液15ml15ml×2 洗脱液10ml20ml 吸附柱50个100个收集管50个100个说明书1份1份产品简介: 本试剂盒采用可以特异性结合DNA的离心吸附柱和独特的缓冲液系统，提取全血基因组DNA。离心吸附柱中采用的硅基质材料为本公司特有新型材料，能够高效、专一吸附DNA，可最大限度去除杂质蛋白及细胞中其他有机化合物。提取的基因组DNA片段大，纯度高，质量稳定可靠。使用本试剂

盒提取的基因组DNA可用于各种常规操作，包括酶切、PCR、文库构建、Southern杂交等实验。操作步骤：使用前请先在漂洗液和溶液B中加入无水乙醇，加入体积请参照瓶体上的标签。所有离心步骤均为使用台式离心机在室温下离心。 1、样品的处理(本产品适用于处理新鲜的或已经添加抗凝剂的0.lml-1ml血液样品)： a、在血液样品中加入2-3倍体积的红细胞裂解液，充分颠倒混匀，12000rpm离心1min，小心吸去上清，沉淀应为白色或淡红色，如果裂解不彻底，可重复以上述步骤一次。向沉淀中加200ul溶液A，振荡至彻底混匀。 b、如果处理的血样为禽类、鸟类、两栖类或更低级生物的血液，其红细胞为有核细胞，因此处理量为5-20u1，不需要再用红细胞裂解液处理，直接加200ul溶液A，振荡至彻底混匀。 2、向悬浮液中加入20ul(10mg/ml)的RNase A，充分颠倒混匀，室温放置10min。 3、加入20ul(10mg/ml)的蛋白酶K，充分颠倒混匀，65℃水浴消化30-60min，消化期间可颠倒离心管混匀数次，直至样品消化完全为止。 4、加入2倍体积溶液B(使用前请先检查是否己加入无水乙醇)，充分颠倒混匀，此时可能会出现絮状沉淀，不影响DNA的提取，可将溶液和絮状沉淀都加入吸附柱中，室温放置2min。 5、12000rpm离心2min，弃废液，将吸附柱放入收集管中。

口腔咽拭子基因组DNA快速提取试剂盒操作方法及步骤说明书

口腔/咽拭子基因组DNA快速提取试剂盒目录号：DN30 目录编号包装单位 DN3001 50次适用范围：适合于从口腔/咽拭子中分离纯化基因组DNA。试剂盒组成、储存、稳定性：试剂盒组成保存50次裂解液ML 室温20 ml 结合液CB 室温20 ml 抑制物去除液IR 室温25 ml 漂洗液WB 室温15ml 第一次使用前按说明加指定量乙醇 Poly Carrier -20℃200μl 洗脱缓冲液EB 室温15 ml 蛋白酶K粉（可选） 20mg/ml -20℃20 mg 吸附柱AC和收集管室温50套本试剂盒在室温储存12个月不影响使用效果储存事项： 1.结合液CB或者抑制物去除液IR低温时可能出现析出和沉淀，可以在37℃水浴几分钟帮助重新溶解，恢复澄清透明后冷却到室温即可使用。 2.为避免降低活性，方便运输，提供蛋白酶K为冻干粉状，收到后，可短暂离心后，

加入1毫升灭菌水溶解。因为反复冻融可能会降低酶活性，因此溶解后立即按照每次使用量分装冻存，－20℃保存。 3.避免试剂长时间暴露于空气中发生挥发、氧化、pH值变化，各溶液使用后应及时盖紧盖子。产品介绍：本试剂盒采用特制的进口DNA吸附柱和独特的缓冲液系统，特别适合于从口腔/咽拭子中分离纯化基因组DNA。各种来源样品裂解消化处理后DNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜（特别配备了Poly Carrier可以从体系中轻松捕获微量核酸），再通过一系列快速的漂洗－离心的步骤，将盐、细胞代谢物、蛋白等杂质去除，最后低盐的洗脱缓冲液将纯净的基因组DNA从硅基质膜上洗脱。纯化后的DNA 无杂质和PCR抑制剂，可直接适用于PCR分析。典型产量0.5μg-3.5μg/拭子。产品特点： 1.不需要使用有毒的苯酚等试剂，也不需要乙醇沉淀等步骤。 2.节省时间，简捷，单个样品操作一般可在20分钟内完成。 3.配备了Poly Carrier 用于充分收集特别微量DNA。 4.多次柱漂洗确保高纯度，提取的DNA 纯度高，质量稳定可靠，可适用于各种常规操作，包括PCR、酶切、测序、Southern 杂交等。注意事项： 1.所有的离心步骤均在室温完成，使用转速可以达到13,000rpm的传统台式离心机，如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。 2.开始实验前将需要的水浴先预热到特定温度备用。 3.结合液CB 和抑制物去除液IR中含有刺激性化合物，操作时戴乳胶手套，避免沾染皮肤、眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时，要用大量清水或者生理盐水冲洗。

细菌基因组DNA提取试剂盒(溶液型)操作方法及步骤说明书

细菌基因组DNA提取试剂盒目录号：DN12 DN1201 50次 DN1202 100次 DN1203 200次适用范围：适用于快速提取各种细菌基因组DNA 试剂盒组成、储存、稳定性：细胞核裂解液室温30 ml 60 ml 120 ml 蛋白沉淀液室温10 ml 20 ml 40 ml DNA溶解液室温10 ml 15ml 30 ml RNase A(10mg/ml) -20℃150μl250μl400μl 本试剂盒在室温储存12个月不影响使用效果。储存事项: 1.环境温度低时细胞核裂解液中某些去污剂成份会析出出现浑浊或者沉淀，可在 37℃水浴加热几分钟，轻轻旋摇，即可恢复澄清，不要剧烈摇晃，以免形成过量的泡沫。

2.蛋白沉淀液可能出现析出和沉淀，可以在37℃水浴几分钟帮助重新溶解，如果不能完全溶解，也不影响使用效果，直接取用上层溶液即可。 3.避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化，各溶液使用后应及时盖紧盖子。产品介绍：本试剂盒用于快速的从各种细菌中提取基因组DNA。细菌样品加入细胞核裂解液(或者通过溶菌酶或者其它一些酶帮助裂解细胞壁后)，首先在强去污剂作用下裂解细胞释放出基因组DNA，接着加入RNase A去除RNA，然后蛋白沉淀液选择性沉淀去除蛋白，最后纯净的基因组DNA通过异丙醇沉淀并重溶解于DNA溶解液。产品特点： 1.不需要使用有毒的苯酚等试剂。 2.快速，简捷，单个样品操作一般可在30分钟内完成。 3.结果稳定，产量高，OD260/OD280典型的比值达1.7～1.9，长度可达50 kb -150kb，可直接用于构建文库，PCR，Southern-blot和各种酶切反应。注意事项 1.所有的离心步骤均在室温完成，使用转速可以达到13,000 rpm的传统台式离心机，如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。 2.用户需自备异丙醇、70％乙醇、0.5M EDTA和Lysozyme（溶菌酶）(用于革兰氏阳性菌)、lysostaphin(用于某些难裂解的革兰氏阳性菌)、水浴箱。 3.开始实验前将需要的水浴先预热好备用。 4.本试剂盒为溶液型，可以很容易的按照比例扩大或者缩小每次处理的细菌细胞

革兰氏阳性菌基因组DNA提取试剂盒使用说明

革兰氏阳性菌基因组DNA提取试剂盒使用说明货号：D1650 规格：50T/100T 保存：室温(15℃-25℃)干燥保存，复检期12个月，2℃-8℃保存时间更长。试剂盒内容：D1650-50T D1650-100T 溶菌酶3ml 5.5ml RNase A1m11m1×2 蛋白酶K1ml1m1×2 溶液A10ml20ml 溶液B10ml20ml 漂洗液15m115ml×2 洗脱液15m130m1 吸附柱50个100个收集管50个100个说明书1份1份产品简介：革兰氏阳性菌基因组DNA提取试剂盒采用可以特异性结合DNA的离心吸附柱和独特的缓冲液系统，提取革兰氏阳性菌基因组DNA。离心吸附柱中采用的硅基质材料，能够高效专一吸附DNA，可最大限度去除杂质蛋白及细胞中其他有机化合物。提取的基因组DNA片段大，纯度高，质量稳定可靠。使用革兰氏阳性菌基因组DNA提取试剂盒提取的基因组DNA可用于各种常规操作，包括酶切、PCR、文库构建、Southern杂交等实验。操作步骤：使用前请先在漂洗液中加入无水乙醇，加入体积请参照瓶体上的标签。所有离心步骤

均为使用台式离心机在室温下离心。 1、取细菌培养液1ml，12000rpm离心1min.，尽量吸除上清。 2、向菌体中加入200ul溶液A，振荡或用移液器吹打使菌体充分悬浮，向悬浮液中加入20ul 的RNase A(10mg/ml)和50ul溶菌酶，充分颠倒混匀，室温放置30min-60min。 3、向管中加入20ul的蛋白酶K(10mg/ml)，充分混匀，55℃消化30-60min，消化期间可颠倒离心管混匀数次，直至样品消化完全为止，此时可见菌液呈清亮粘稠状。 4、向管中加入200ul溶液B，充分颠倒混匀，如出现白色沉淀，可于75℃放置15-30min，沉淀即会消失，不影响后续实验。如果溶液未变清亮，说明样品消化不彻底，可能会导致DNA的提取量以及纯度降低，还可能堵塞吸附柱。 5、向管中加入200ul无水乙醇，充分混匀，此时还可能会出现絮状沉淀，不影响DNA的提取，可将溶液和絮状沉淀都加入到吸附柱中，静置2min。 6、12000rpm离心2min.弃废液，将吸附柱放入收集管中。 7、向吸附柱中加入600ul漂洗液(使用前请先检查是否己加入无水乙醇)。12000rpm离心1min，弃废液，将吸附柱放入收集管中。 8、向吸附柱中加入600ul漂洗液，12000rpm离心l min，弃废液，将吸附柱放入收集管中。 9、12000rpm离心2min，将吸附柱敞口置于室温或50℃温箱放置数分钟，目的是将吸附柱中残余的漂洗液去除，否则漂洗液中的乙醇会影响后续实验如酶切、PCR等。 10、将吸附柱放入一个干净的离心管中，向吸附膜中央悬空滴加50-200ul经65℃水浴预热的洗脱液，室温放置5min，12000rpm离心1min。 11、离心所得洗脱液再加入吸附柱中，室温放置2min，12000rpm离心2min，即可得到高质量的细菌基因组DNA。注意事项: 1、样品应避免反复冻融，否则会导致提取的DNA片段较小且提取量下降。