动物组织基因组DNA提取试剂盒说明书

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动物组织基因组 DNA 提取试剂盒(心、肝、肌肉)(磁珠法)使用说明

动物组织基因组 DNA  提取试剂盒(心、肝、肌肉)(磁珠法)使用说明

动物组织基因组DNA提取试剂盒(心、肝、肌肉)(磁珠法)使用说明货号:DM1702规格:50T保存:磁珠可以在室温下(15-25℃)运输,但请在4℃冰箱中保存,禁止冻存。

其余试剂可以室温保存,更长时间的保存可置于2-8℃。

复检期1年。

试剂盒内容:试剂盒组成DM1702-50T裂解液S1-233ml裂解液S2 2.2ml漂洗液1(空瓶)洗脱液 5.5ml磁珠 1.4ml×2说明书1份产品说明:动物组织基因组DNA提取试剂盒(心、肝、肌肉)(磁珠法)采用具有独特分离作用的磁珠和缓冲液系统,可从样品中分离纯化高质量基因组DNA。

特殊包被的磁珠在一定条件下对目的DNA具有很强的亲和力,而当条件改变时,磁珠释放吸附的DNA,能够达到快速分离纯化DNA的目的。

整个过程安全、便捷,提取的DNA纯度高。

使用本试剂盒纯化的基因组DNA的OD260/OD280均在 1.7-1.9之间,可以应用于各类下游分子生物学实验。

使用前请先在漂洗液中配置70%乙醇。

若裂解液产生沉淀,使用前应将试剂盒内的溶液在室温放置一段时间,必要时可在37℃水浴中预热10min溶解沉淀,摇匀后使用。

操作步骤:1.裂解取适量的动物组织样本(肌肉组织≤50mg;心脏≤30mg;肝脏≤20mg;)用液氮研磨成粉末,并迅速转移到已加入600μl裂解液S1-2、40μl裂解液S2的EP管中,吹打或震荡混合均匀。

将EP管置于65℃水浴25~30min。

待冷却到室温,加入400ul氯仿,剧烈震荡15s,静置3min,12000rpm4℃离心5-10min。

2.结合尽量取净上清于新的1.5mL EP管中,加入等体积的异丙醇以及振荡混匀的50μL磁珠,颠倒混匀1min,静置3min。

将EP管置于磁铁上进行磁分离,吸弃废液(吸净管盖及管底残液)。

3.洗涤加入600μL漂洗液(使用前请预先配置70%乙醇),轻柔混匀1-2min,将EP管置于磁力架上进行磁分离,吸净管盖及管底的残液;重复本步骤一次。

基因组DNA提取试剂盒 说明书

基因组DNA提取试剂盒 说明书

基因组DNA 提取试剂盒使用说明书此说明书仅适用于此说明书仅适用于基因组基因组DNA 提取试剂盒提取试剂盒,,使用前请务必仔细阅读说明书有关内容使用前请务必仔细阅读说明书有关内容,,若有任何疑问若有任何疑问,,欢迎致电厦门欢迎致电厦门致致善生物科技有限公司生物科技有限公司((4006618810*************)进行咨询进行咨询,,您也可以登录我们公司的网站您也可以登录我们公司的网站(( )了解相关信息或者通过E-mail ( ****************) 与我们进行沟通与我们进行沟通。

一 产品简介基因组DNA 提取试剂盒采用本公司自行研制的磁珠,用于从抗凝全血、新鲜或冻存组织、培养细胞、石蜡包埋组织、唾液、培养细菌等一系列不同样品中分离、纯化高质量的基因组DNA。

我们根据磁珠的独特分离作用,提供了一个极其简便的操作程序:样品裂解、磁珠吸附、洗涤以及洗脱。

在最适的试剂及操作条件下,可获得高质量DNA。

该方法具有简便、快捷、高效等特点,整个提取过程无须使用苯酚、氯仿等有机溶剂。

品名规格 货号 基因组DNA 提取试剂盒100T 4hk001裂解液DL 120ml ×2 磁粒 40ml 洗涤液 50ml ×5 洗脱液 45ml 缓冲液HTL 20ml ×1 二硫苏糖醇(DTT ) 10管,0.18g/管 说明书 1份储存条件储存条件::本试剂盒所有试剂(除DTT 外)均可以室温保存,应避免阳光直射。

当室温低于15℃时,裂解液中可能有结晶析出,38℃水浴加热几分钟,恢复澄清后即可使用,提取效率不受影响。

DTT 需要于冰箱4℃保存。

本试剂盒有效期为12个月, 请于有效期内使用。

安全信息:试剂中含刺激性化合物,操作时应小心,避免沾染皮肤,眼睛和衣服,若沾染皮肤、眼睛时,要立即用大量清水或生理盐水冲洗,必要时寻求医疗咨询。

三 使用者自配试剂DTT 溶液使用浓度为1mol/L 。

动物组织基因组DNA提取试剂盒说明书

动物组织基因组DNA提取试剂盒说明书

磁珠法动物组织基因组DNA提取试剂盒MagBeads Tissues Gen DNA Extraction Kit【目录号】TGDE-5005、TGDE-5030【运输条件】2~25℃;【保存条件】磁珠悬浮液2~8℃,其它组分室温保存;【试剂盒组成】【注意事项】1. 磁珠悬浮液严禁反复冻融和离心,使用前请充分混匀;2. 使用前请检查裂解液1和裂解液2是否出现结晶,如有结晶请置于65℃水浴重新溶解;3. 在使用本试剂盒前,请用户自配80%乙醇;4. 如需去除RNA请自备RNase A溶液(100mg/mL, 分散液10mM Tris-HCl,1mM EDTA, pH值8.0);5. 本操作指南经本公司反复验证,使用前请仔细阅读,并且按照操作指南的建议操作。

磁珠法·自动化:为生命科学提供自动化磁纳米捕获方案【产品简介】本产品适用于从各种动物组织以或者细胞样本中提取基因组DNA。

试剂盒采用具有独特分离作用的纳米磁珠和独特的缓冲液系统。

特殊技术包埋的纳米磁珠在特定条件下对核酸具有极强的亲和力,而当条件改变时可以释放所吸附的核酸,从而达到快速分离纯化核酸的目的。

本试剂盒提取所得基因组DNA产物得量高、纯度好,适用于各种下游分子生物学实验,如:酶切、PCR、QPCR、文库构建、Southern 杂交、芯片检测和高通量测序等。

本试剂盒可配合核自动化酸提取仪或工作站使用,实现高通量操作。

【试剂盒说明】【自备仪器、耗材及试剂】仪器自动版研钵(或组织研磨机、匀浆机)、英芮诚ETP-300型全自动核酸提取仪、核酸提取仪配套用磁棒套、水浴锅或金属浴、涡旋振荡仪、96孔方孔圆底板、80%乙醇、异丙醇、液氮。

手动版研钵(或组织研磨机、匀浆机)、水浴锅或金属浴、涡旋振荡仪、真空干燥箱、80%乙醇、异丙醇、2.0mL离心管、离心管配套用磁力架、液氮。

【仪器自动版操作步骤】本操作以英芮诚ETP-300型全自动核酸提取仪为例,同步可完成32个样本的提取。

康为世纪 CW2089海洋动物基因组提取试剂盒

康为世纪 CW2089海洋动物基因组提取试剂盒

Marine Animals DNA Kit海洋动物组织基因组提取试剂盒Version 09152010‐2.2 I 组分说明Catalog no. CW2089 CW2089A CW2089BNumber of preps 50 6 200Buffer OTL 15 ml 3 ml 60 mlBuffer GL 15 ml 3 ml 60 mlBuffer GW1(concentrate) 19 ml 3.8 ml 76 mlBuffer GW2(concentrate) 13 ml 2.6 ml 52 mlBuffer GE 15 ml 2 ml 60 mlProteinase K 1.25 ml 150 μl 1.25×4 mlSpin Column DM Collection Tube (2 ml) 505066200200Protocol 1 1 1II 保存条件自收到之日起,该试剂盒室温干燥条件下(15-25℃)可保存一年, Proteinase K置于-20℃保存。

III 产品简介本试剂盒用于多种组织中总DNA的分离纯化,纯化过程无需苯酚或氯仿,无需乙醇沉淀,提取后可以立即使用。

优化的缓冲液体系使裂解液中的DNA高效的结合在吸附柱上,吸附柱可吸附分子量最大为50kb的DNA,同时对100bp 的DNA片段也能有效的回收。

DNA特异性结合到硅胶膜上而其他污染物可流过膜。

PCR和其他酶促反应的抑制剂可通过两步有效的洗涤步骤被完全去除,低盐缓冲液或水洗脱下来的纯化DNA可以直接用于AFLP;RFLP;RAPD;Southern Blot;Real-time PCR等下游操作。

IV 注意事项1.样品应避免反复冻融,否则会导致提取的DNA片段较小且提取量也下降。

2.第一次使用前应按照试剂瓶标签的说明先在Buffer GW1和Buffer GW2中加入无水乙醇。

3.若Buffer GL 和Buffer OTL中有沉淀,可在56℃水浴中重新溶解,摇匀后使用。

海洋动物组织基因组DNA快速提取试剂盒操作方法及步骤说明书

海洋动物组织基因组DNA快速提取试剂盒操作方法及步骤说明书

海洋动物组织基因组DNA快速提取试剂盒目录号:DN37适用于快速提取各种海洋动物组织基因组DNA 试剂盒组成、储存、稳定性:试剂盒组成保存50次(DN3701)100次(DN3702)200次(DN3703)裂解液SL 室温11 ml 20 ml 40 ml 结合液CB 室温11 ml 20 ml 40 ml 抑制物去除液IR 室温25 ml 50 ml 100 ml漂洗液WB 室温15 ml 25 ml 50 ml 第一次使用前按说明加指定量乙醇洗脱缓冲液EB 室温15 ml 15 ml 15ml×2蛋白酶K粉(可选)20mg/ml-20℃20mg 2×20mg 4×20mg吸附柱AC 室温50个100个200个收集管(2ml)室温50个100个200个本试剂盒在室温储存12个月不影响使用效果储存事项:1.结合液CB或者抑制物去除液IR低温时可能出现析出和沉淀,可以在37℃水浴几分钟帮助重新溶解,恢复澄清透明后冷却到室温即可使用。

2.为避免降低活性、方便运输,提供蛋白酶K为冻干粉状,收到后,可短暂离心后,加入1ml灭菌水溶解,因为反复冻融可能会降低酶活性,因此溶解后立即按照每次使用量(20微升)分装冻存,-20℃保存。

3.避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化,各溶液使用后应及时盖紧盖子。

产品介绍:独特的结合液/蛋白酶K迅速裂解细胞和灭活细胞内核酸酶,然后基因组DNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜,再通过一系列快速的漂洗-离心的步骤,抑制物去除液和漂洗液将细胞代谢物、蛋白等杂质去除,最后低盐的洗脱缓冲液将纯净基因组DNA从硅基质膜上洗脱。

注意事项洗脱液EB不含有螯合剂EDTA,不影响下游酶切、连接等反应。

也可以使用水洗脱,但应该确保批pH大于7.5,pH过低影响洗脱效率。

用水洗脱DNA应该保存在-20℃。

DNA如果需要长期保存,可以用TE缓冲液洗脱(10mM Tris-HCl,1mM EDTA,pH 8.0),但是EDTA可能影响下游酶切反应,使用时可以适当稀释。

D0061 哺乳动物基因组DNA抽提试剂盒

D0061 哺乳动物基因组DNA抽提试剂盒

哺乳动物基因组DNA抽提试剂盒产品简介:碧云天生产的哺乳动物基因组DNA抽提试剂盒(Mammalian genomic DNA extraction kit),采用了经典的蛋白酶K处理法,可以抽提到100-150kb以上的基因组DNA。

用本试剂盒抽提到的基因组DNA适用于Southern杂交、基因组DNA的PCR扩增及基因组DNA文库的构建等。

通常使用本试剂盒,从20毫克组织可以抽提到约40微克基因组DNA,从106-107Hela细胞可以抽提到约5-50微克基因组DNA。

本试剂盒足够抽提50个常规量的样品。

保存条件:-20℃保存,一年有效。

10M 醋酸铵和Nuclease Free Water也可以室温保存。

注意事项:需自备Tris平衡苯酚、氯仿和无水乙醇。

如果打算抽提到大片断的基因组DNA,则要尽量避免基因组DNA的物理性剪切。

例如避免剧烈振荡含有基因组DNA的样品,可以用剪掉枪头尖的枪头吸取含有基因组DNA的样品。

不可过分干燥基因组DNA沉淀,否则会极难溶解。

为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明:1. 样品收集a)对于组织样品:切下组织,并剪切成小块,置液氮中冻结,研碎或捣碎。

b) 对于贴壁细胞:胰酶消化后,PBS或生理盐水洗一次,1000-2000g离心1-2分钟,弃上清,收集细胞。

c)对于悬浮细胞:1000-2000g离心1-2分钟,弃上清,收集细胞。

2. 基因组DNA抽提a) 样品处理完毕后,每1毫升样品裂解液中加入5微升蛋白酶K,混匀。

b) 对于上述处理好的样品,每20毫克组织或106-107个细胞中加入500微升添加了蛋白酶K的样品裂解液,颠倒混匀数次,充分裂解组织或细胞。

c) 50℃水浴消化过夜。

d) 加入500微升Tris平衡苯酚抽提样品。

e) 吸出酚相及中间相(可以吸除少量靠近中间相的水相液体),剩余的水相用等体积Tris平衡酚再抽提一次。

f) 吸出酚相及中间相(可以吸除少量靠近中间相的水相液体),剩余的水相用等体积氯仿再抽提一次。

QIAGEN试剂盒--动物组织样品DNA提取方法

QIAGEN试剂盒--动物组织样品DNA提取方法

QIAGEN试剂盒--动物组织样品DNA提取方法QIAGEN试剂盒提取组织DNA试验前的注意事项1、仔细阅读试剂盒使用说明。

2、所有的离心操作应在15-25℃下完成。

3、涡旋一般进行5-10s。

4、对于福尔马林或石蜡浸泡过样品,另见说明。

5、总RNA提取另见说明。

试验准备1、Buffer ATL 和Buffer AL保存时可能会出现沉淀,如果必要的话,可置于56°C水浴至完全溶解。

2、提供的Buffer AW1 和Buffer AW2是高浓度液,使用前需用96-100%的乙醇稀释至瓶子上注明的使用浓度。

3、预备一个热的振荡器或摇床或摇动的平板至56°C备步骤2使用。

4、如果为冻存的组织,需要将其溶至室温。

但是要避免此类的反复溶解。

应额外准备的物品:200μL枪及枪头;20μL枪及枪头;2mL的微量离心管;96-100%乙醇;56℃水浴锅;离心机(20,000 ×g (14,000 rpm));小镊子;振荡器操作步骤:1、取25mg的动物组织(脾脏最多10mg)粉碎成碎片放入1.5ml的微量离心管中。

对于啮齿类的尾巴,择取两只小鼠或一只大鼠尾巴0.4-0.6cm。

加入180μL buffer ATL,并将对应的动物作以标记。

(保证足够量的组织样本,对于脾脏由于其细胞含量丰富,我们建议不超过10mg。

我们强烈建议将组织粉碎以便于溶解提取DNA。

最好的方法是在添加bufferATL和蛋白酶K之前置于液氮中冻融。

同时,也可以采用QIAGEN公司产的几种组织匀浆机进行组织粉碎)2、加入20μL蛋白酶K,涡旋混合均匀,56℃孵育直至溶解。

在组织溶解的过程中不断(偶尔)涡旋使组织充分散开,或将该微量离心管置于摇晃的平台上,如摇床等。

(不同组织溶解时间不同,通常组织为1-3h,小鼠尾巴为6-8h。

如果试验条件许可,可以溶解过夜,其不会影响DNA提取)3、涡旋15s。

加入200μL buffer AL并涡旋使充分混匀,70℃孵育10min,然后加入200μL 乙醇(96%-100%),再次涡旋混合。

PH0211 动物组织细胞基因组 DNA 提取试剂盒使用手册

PH0211 动物组织细胞基因组 DNA 提取试剂盒使用手册
操作步骤: 如非指出,所有离心步骤均为使用台式离心机在室温下离心。 1. 处理材料: a. 培养细胞:贴壁培养的细胞应先处理为细胞悬液(如用 PBS 缓冲液或类似缓冲液),10,000 g 离心 1 分钟,倒尽上清,加入 200 μl 缓冲液 GA,振荡至彻底悬浮。 b. 组织:取约 30mg 动物组织(脾组织用量应少于 10 mg)加入到事先盛有 200μl 缓冲液 GA 的 1.5ml 离心管中,用研磨杵彻底将组 织研碎。 2. 加入 20 μl 蛋白酶 K (20 mg/ml)溶液。 a. 提取细胞基因组时,加入蛋白酶 K 混匀后,55℃放置 5-10 分钟。 b. 提取组织基因组时,加入蛋白酶 K 混匀后,在 55℃放置,直至组织溶解。 注:不同组织裂解时间不同,通常需 1-3 小时即可完成(鼠尾需要消化过夜),期间间歇颠倒混匀样品。 3. 加入 10 μl RNaseA(10 mg/ml)溶液,混匀后室温放置 2 分钟。 4. 加入 220 μl 缓冲液 GB,充分颠倒混匀,70℃放置 10 分钟,溶液应变清亮,简短离心以去除管盖内壁的水珠。 注:加入缓冲液 GB 时可能会产生白色沉淀,一般 70℃放置一段时间后会消失。如溶液未变清亮,说明细胞裂解不彻底,会影响 DNA 的 纯度和得率,而且可能导致步骤 6 中离心柱堵塞。 5.加入 220 μl 无水乙醇,颠倒混匀,简短离心以去除管盖内壁的水珠。 注:加入乙醇后会产生絮状沉淀,可用枪头反复抽打 1-2 次将沉淀弄碎后再上柱。如果絮状物未做处理,容易导致步骤 6 中离心柱的堵塞。 6.将上一步所得溶液和絮状沉淀都加入一个吸附柱 CG 中(吸附柱放入收集管中),11,000g 离心 2 分钟,倒掉废液,吸附柱 CG 放回 收集管中。 注:如果出现吸附柱堵塞现象,可将离心时间延长到 5 分钟。 7.向吸附柱 CG 中加入 500 μl 去蛋白液 GD(使用前请先检查是否已加入无水乙醇),11,000g 离心 1 分钟,倒掉废液,吸附柱 CG 放 入收集管中。

大量全血基因组DNA提取试剂盒操作方法及步骤说明书

大量全血基因组DNA提取试剂盒操作方法及步骤说明书

大量全血基因组DNA提取试剂盒目录号:DN04DN0401 16次×10mlDN0402 32次×10mlDN0403 96次×10ml适用范围:适用于快速提取各种动物全血基因组DNA试剂盒组成、储存、稳定性:试剂盒组成保存16次×10ml 32次×10ml 96次×10ml10x红细胞裂解液室温50 ml 100 ml 300 ml细胞核裂解液室温180 ml 180×2 ml 250 m l×4蛋白沉淀液室温55 ml 110 ml 330 mlDNA溶解液室温15 ml 30 ml 90 ml 本试剂盒在室温储存18个月不影响使用效果。

储存事项:1.环境温度低时细胞核裂解液中某些去污剂成份会析出出现浑浊或者沉淀,可在37℃水浴加热几分钟,即可恢复澄清,不要剧烈摇晃,以免形成过量的泡沫。

2.蛋白沉淀液可能出现析出和沉淀,可以在37℃水浴几分钟帮助重新溶解,如果不能完全溶解,也不影响使用效果,直接取用上层溶液即可。

3.避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化,各溶液使用后应及时盖紧盖子。

产品介绍:本试剂盒根据全血特点采用几个快速步骤提取基因组DNA。

首先红细胞裂解液裂解去除不含DNA的红细胞,细胞核裂解液裂解白细胞释放出基因组DNA,然后蛋白沉淀液选择性沉淀去除蛋白,最后纯净的基因组DNA通过异丙醇沉淀并重溶解于DNA 溶解液。

产品特点:1.从十几个配方中优选出的红细胞裂解液配方,裂解快速完全。

2.不需要使用有毒的苯酚等试剂。

3.快速,简捷,单个样品操作一般可在1小时内完成。

4.结果稳定,产量高(典型的产量10ml全血可提取出150-500µg),OD260/OD280典型的比值达 1.7~1.9,长度可达50kb-150kb,可直接用于构建文库、PCR、Southern-blot和各种酶切反应。

GSYNTM基因组DNA提取试剂盒说明书

GSYNTM基因组DNA提取试剂盒说明书

Page 1 of gSYNC TM 基因组DNA 提取试剂盒 仅供科研使用产品编号 GS100, GS300完整说明书(英文)下载如果您是第一次使用本产品或对本产品的操作步骤不熟悉,请您经由扫描QR code 下载并详阅完整说明书1. 处理材料 A. 动物组织 取最多25 mg 动物组织或0.5 cm 老鼠尾巴(若组织含有较多数量细胞,如胰脏及肝脏,组织用量应减 少为10 mg )转移到1.5 ml 微量离心管中. 加入200 μl 缓冲液GST 及20 μl Proteinase K (使用前依据标签加入适量体积ddH 2O ,充分摇动混匀),使 用涡旋振荡器振荡混匀,放置60ºC 消化过夜或直至组织溶解完全,溶液呈现清亮. 期间颠倒混匀样 品几次或使用水浴振荡器可帮助组织溶解. 注意:在此期间,将洗脱缓冲液EB 置于60ºC 预热(200 μl /样品). 以14-16,000×g 离心2分钟去除未溶解组织,取200 μl 上清液转移到新1.5 ml 微量离心管中. 加入200 μl 缓冲液GSB ,充分摇动混匀10秒钟.B. 血液 取200 μl 血液,血浆,血清或白血球衣转移到1.5 ml 微量离心管中(不足200 μl 可加缓冲液PBS 补足), 加入20 μl Proteinase K (使用前依据标签加入适量体积ddH 2O ,充分摇动混匀),使用移液器混合均匀, 在60ºC 放置5分钟. 加入200 μl 缓冲液GSB ,充分摇动混匀,在60ºC 放置5分钟,期间每2分钟颠倒混匀样品. 注意:在此期间,将洗脱缓冲液EB 置于60ºC 预热(200 μl /样品).C. 细胞 贴壁培养的细胞应先使用0.1-0.25% Trypsin in PBS 处理为细胞悬液. 取最多1X107细胞转移到1.5 ml 微量离心管中,300 ×g 离心5分钟. 吸去上清,向留有细胞沉淀的离心管中加入200 μl 缓冲液PBS ,使用移液器彻底悬浮细胞沉淀,加入 20 μl Proteinase K (使用前依据标签加入适量体积ddH 2O ,充分摇动混匀),使用移液器混合均匀,在 60ºC 放置5分钟. 加入200 μl 缓冲液GSB ,充分摇动混匀,在60ºC 放置5分钟,期间每2分钟颠倒混匀样品. 注意:在此期间,将洗脱缓冲液EB置于60ºC 预热(200 μl /样品).可选步骤:如果需要去除RNA ,可加入5 μl RNaseA (50 mg/ml )溶液,充分摇动混匀,室温放置5分钟.2. 吸附加入200 μl 无水乙醇,充分摇动混匀,此时可能会出现絮状沉淀,简短离心以去除管盖内壁的水珠. 将吸附柱GS 放入2 ml 收集管中. 将所得溶液和絮状沉淀都加入吸附柱GS 中,以14 -16,000×g 离心1分钟,丢弃收集管,将吸附柱放入新的收集管中.3. 漂洗向吸附柱GS 中加入400 μl 漂洗液W1,以14-16,000×g 离心30秒,倒掉收集管中的废液,将吸附柱放入收集管中. 向吸附柱GS 中加入600 μl 漂洗液Wash (使用前请先检查是否已加入无水乙醇),以14-16,000×g 离心30秒,倒掉收集管中的废液,将吸附柱GS 放入收集管中. 以14-16,000×g 离心3分钟将吸附柱中残余的漂洗液去除.注意:漂洗液中乙醇的残留会影响后续的酶反应(酶切,PCR 等)实验.4. 洗脱将吸附柱GS 放入一个干净的离心管中,向吸附膜中间位置悬空滴加50-200 μl 预热的洗脱缓冲液EB ,室温放置3分钟后,以14-16,000×g 离心1分钟收集DNA 溶液.注意:1. 为了增加DNA 回收率,可将得到的溶液重新加入吸附柱中,室温放置2分钟,以14-16,000×g 离心1分钟,将DNA 溶液收集到离心管中.2. 如果使用ddH 2O 做洗脱液,需保证其pH 值≥8.0, pH 值低于8.0会降低洗脱效率.Instruction Manual Download。

DK614已降解基因组 DNA 小量提取试剂盒 说明书

DK614已降解基因组 DNA 小量提取试剂盒 说明书

上海莱枫生物科技有限公司网址:订货电话:传真:技术解答:技术支持:上海)已降解基因组DNA小量提取试剂盒一、产品简介本试剂盒采用独特的组织和细胞裂解液,配合蛋白酶K裂解细胞释放基因组DNA,Buffer GB调整DNA结合条件后,释放的基因组DNA被选择性吸附到硅胶膜上。

本试剂盒能有效回收≥50 bp的DNA片段,特别适合从DNA已经严重降解的动物组织中提取DNA,比如动物源性饲料或者固体食品、因保存不当DNA已经严重降解的组织,也适合从Trizol相间沉淀中提取DNA。

本试剂盒使用DNA吸附柱-CA回收DNA,最大吸附量为10 μg DNA,最小洗脱体积为15 μl。

相关产品:痕量DNA提取试剂盒(DK803)使用DK803处理DNA有明显降解的组织(乙醇或者福尔马林等固定液浸泡的组织和石蜡包埋的组织)可获得更高的产量,石蜡包埋组织无需脱蜡。

二、试剂盒组成和储存组成内容DK614-01 (50次) 原理与用途Proteinase K* 1 ml 降解蛋白Buffer TG-A 15 ml 分散组织Buffer GL 15 ml 释放DNABuffer GB 30 ml 调整DNA结合条件Buffer WAG 30 ml 洗涤去除蛋白Buffer WB2§16 ml 洗涤去除盐DNA吸附柱-CA 50个吸附DNA收集管50个×2 接收废液1.5 ml离心管(用于洗脱) 50个接收洗脱的DNATE※15 ml 洗脱DNA说明书1份*Proteinase K:20 mg/ml, 室温保存。

可能会析出白色粉末状、絮状或者晶体状不溶物,不影响使用效果,使用前混合均匀。

§Buffer WB2:第一次使用前按试剂瓶所示体积加入无水乙醇,混合均匀。

※TE:10 mM Tris-HCl, 0.1 mM EDTA, 0.025%NaN3, pH 8.0(25°C)。

试剂盒所有组成成分均于室温储存。

动物源性基因组DNA提取试剂盒说明书

动物源性基因组DNA提取试剂盒说明书

动物源性基因组DNA提取试剂盒说明书试剂盒简介本试剂盒可用于多种动物源性基因组DNA的提取,将处理好的样品通过裂解后加入到纯化柱内高速离心,核酸可以特异性结合在吸附柱内,通过洗涤液处理可最大限度去除杂质蛋白及细胞中其他有机化合物,获取高纯度、质量稳定的DNA。

试剂盒用途本试剂盒适用于饲料、多种动物细胞和动物组织等样品的动物源性基因组DNA提取与纯化。

试剂盒组成(50T/Kit)注:请自备无水乙醇(分析纯)储存条件及有效期蛋白酶K于-20 ℃保存,其余组分均室温保存。

有效期一年。

注意事项1.当缓冲液DA、DB及洗液1于低温保存时,可能会有沉淀析出,将试剂瓶于室温下放置一段时间,使析出物充分溶解并混匀即可。

2.缓冲液DA、DB及洗液1中含有胍盐,与次氯酸钠、漂白液(粉)以及酸性液体混合会产生毒性气体,切记不能将两类液体倒在一起。

3.如样本脂类含量过高,影响操作,可在操作步骤1结束后用等体积氯仿抽提一次,避免脂类对后面操作的影响。

4.所有离心步骤室温下进行即可。

5.为了避免外源DNA酶或细菌降解DNA提取物,操作时请戴口罩和手套。

准备工作13 ml洗液1浓缩液加入17 ml无水乙醇;7ml洗液2浓缩液加入23 ml无水乙醇。

操作步骤1. 样品处理1.1 饲料:将饲料充分研磨粉碎后,称取50 mg样本加入到1.5 ml洁净的离心管中,加入300μl缓冲液DA、20 μl蛋白酶K溶液。

振荡混匀后56 ℃水浴1 h,每隔10~15 min取出颠倒混匀一次。

1.2 动物细胞或组织:剪取不超过50 mg样本加入到1.5 ml洁净的离心管中,用研磨棒充分研磨,加入300 μl缓冲液DA、20 μl蛋白酶K溶液。

振荡混匀后56 ℃水浴1 h,每隔10~15 min取出颠倒混匀。

2. 向处理好的样品加入400 μl的缓冲液DB,振荡混匀后70 ℃水浴10 min后,12 000 rpm离心3 min。

取400 μl上清液到新的1.5 ml洁净的离心管中。

动物组织细胞基因组DNA提取

动物组织细胞基因组DNA提取

动物组织细胞基因组DNA提取一、实验原理真核生物的一切有核细胞(包括培养细胞)都能用来制备基因组DNA。

真核生物的DNA 是以染色体的形式存在于细胞核内,因此,制备DNA的原则是既要将DNA与蛋白质、月旨类和糖类等分离,又要保持DNA分子的完整。

提取DNA的一般过程是将分散好的组织细胞在含SDS(十二烷基硫酸钠)和蛋白酶K的溶液中消化分解蛋白质,再用酚和氯仿/异戊醇抽提分离蛋白质,得到的DNA溶液经乙醇沉淀使DNA从溶液中析出。

蛋白酶K的重要特性是能在SDS和EDTA(乙二胺四乙酸二钠)存在下保持很高的活性。

在匀浆后提取DNA的反应体系中,SDS可破坏细胞膜、核膜,并使组织蛋白与DNA分离,EDTA则抑制细胞中Dnase的活性;而蛋白酶K可将蛋白质降解成小肽或氨基酸,使DNA 分子完整地分离出来。

二、仪器及试剂1. 仪器:恒温水浴锅、台式离心机、紫外分光光度计(GeneQuant)、移液器、玻璃匀浆器、离心管(灭菌)、吸头(灭菌)2. 试剂:(1)细胞裂解缓冲液:Tris(pH8.0)100mmol/LEDTA(pH8.0)500mmol/LNaCL20mmol/LSDS10%胰RNA酶20ug/ml(2)蛋白酶K:称取20mg蛋白酶k溶于1ml灭菌的双蒸水中,C20°C备用。

(3)TE缓冲液(pH8.0):高压灭菌,室温贮存。

(4)酚?氯仿?异戊醇(25:24:1)、(5)异丙醇、冷无水乙醇、70%乙醇、灭菌水。

三、操作步骤1.取新鲜或冰冻动物组织块0.1g(0.5cm3),尽量剪碎。

置于玻璃匀浆器中,加入1ml的细胞裂解缓冲液匀浆至不见组织块,转入1.5ml离心管中,加入蛋白酶K(500ug/ml)20pl,混匀。

在65C恒温水浴锅中水浴30min,也可转入37C水浴12〜24h,间歇振荡离心管数次。

于台式离心机以12000rpm离心5min,取上清液入另一离心管中。

2•加2倍体积异丙醇,倒转混匀后,可以看见丝状物,用100ul吸头挑出,凉干,用200ulTE 重新溶解。

小鼠基因型鉴定说明书Mouse Genotyping

小鼠基因型鉴定说明书Mouse Genotyping
该试剂盒可用于从小鼠尾巴耳朵以及脚趾等组织快速提取基因组dna提取产物可直接进行pcr扩增无需匀浆破碎过夜消化酚氯仿抽提dna沉淀或柱式纯化等操作极大缩短了实验耗时
One Step Mouse Genotyping Kit
PD101-01
Vazyme biotech co., ltd.
产品简介
本试剂盒包含整套的DNA粗提取以及PCR扩增体系,可用于小鼠基因型快速鉴定(Rapid Genotyping)。该试剂盒可用于从 小鼠尾巴、耳朵以及脚趾等组织快速提取基因组DNA,提取产物可直接进行PCR扩增,无需匀浆、破碎、过夜消化、酚氯 仿抽提、DNA沉淀或柱式纯化等操作,极大缩短了实验耗时。使用时,将组织浸泡在预添加了Proteinase K的裂解液中, 55oC孵育20 min再95oC加热5 min灭活Proteinase K。裂解产物经离心后可直接用做PCR扩增模板,经反复测试广泛适用于 2 kb以内目标片段扩增,并适用于4对引物以内的多重PCR反应。 试剂盒中配有2 × Taq Plus Master Mix(Dye Plus)(P212),包含高性能的Taq Plus DNA Polymerase,dNTP以及优化的缓 冲体系。PCR反应时只需加入引物和模板即可进行扩增,减少了开管/移液等操作,显著降低了样品交叉污染并且提高了检 测通量和结果的重现性。独特的保护剂使得Taq Plus Master Mix经过反复冻融后仍可保持稳定的活性。体系中预混有电泳 缓冲液和染料,可在反应结束后直接进行电泳,使用方便快捷。PCR产物的3’端带A,可克隆至T载体,并适用于 ClonExpressTM快速克隆试剂盒(C112/C113)。
应用实例
操作注意事项: - 用70%的乙醇(自备)预先清洗组织分离过程中所使用的所有工具; - Proteinase K灭活步骤(95oC,5min)必须进行,其残留活性会抑制后续PCR反应; - PCR反应体系配制过程应于冰水浴中进行,以提高扩增特异性(热启动)。

动物组织基因组DNA小量提取试剂盒

动物组织基因组DNA小量提取试剂盒

动物组织基因组DNA小量提取试剂盒一、产品简介本试剂盒采用独特的组织和细胞裂解液,配合蛋白酶K裂解细胞释放基因组DNA,释放的基因组DNA被选择性吸附到硅胶膜上。

适合从≤25mg动物组织中提取多至20 μg基因组DNA。

纯化的基因组DNA长度可达20-30 kb,适合用于酶切、PCR、Southern杂交、RAPD、RFLD 等分子生物学实验。

二、试剂盒组成和储存组成内容DK611-01 (50次) DK611-02 (200次) Proteinase K* 1 ml 4×1 mlBuffer TG-A 15 ml 60 mlBuffer TG-B 15 ml 60 mlBuffer WA19 ml 75 mlBuffer WB§16 ml 65 mlDNA吸附柱-C 50套200套1.5 ml离心管50个200个TE※15 ml 30 ml说明书1份1份*Proteinase K: 20 mg/ml, -20℃长期保存;频繁使用可置于4℃保存。

§Buffer WA和Buffer WB,使用前按试剂瓶所示体积加入无水乙醇或者95%乙醇,混合均匀。

※TE:10 mM Tris-HCl, 0.1 mM EDTA, pH 8.0(25°C)。

除Proteinase K外,其他组成成分于室温储存。

三、注意事项1.Buffer TG-A、Buffer TG-B和Buffer WA含刺激性化合物,避免沾染皮肤、眼睛和衣服、谨防吸入口鼻。

若沾染皮肤、眼睛,立即使用大量水或生理盐水冲洗沾染处,必要时寻求医疗咨询。

2. 使用后应及时盖紧试剂瓶盖子,以免影响下次使用效果。

3. 操作步骤1,切碎组织块可减少水浴消化时间,并且提高DNA产量。

组织切碎后应立即进行下一个操作步骤,以免基因组DNA被内源DNA酶降解。

4. 操作步骤4,转移离心上清时勿将沉淀转移到干净的离心管,否则会堵塞DNA吸附柱-C中的吸附膜,大大降低DNA结合和洗脱效率,并且影响DNA纯度。

组织基因组DNA提取试剂盒

组织基因组DNA提取试剂盒

组织基因组DNA提取试剂盒(柱式法)使用说明书(Cat#Yu-TD01-1)【产品介绍】组织基因组DNA提取试剂采用国内领先的专利技术合成的纳米磁珠颗粒和多次实验优化的缓冲液体系,能从样品中分离纯化高质量DNA。

在一定条件下,吸附柱表面修饰的基团高效吸附目的DNA,而当条件改变时,吸附柱释放吸附的DNA,达到快速分离纯化DNA的目的。

整个过程安全、无毒、便利,提取的DNA质量稳定、纯度高。

纯化后的DNA适用于多种后续实验。

本试剂盒可以从少量动物组织中分离纯化出高质量、高浓度的DNA。

【产品特点】1. 效率高:DNA提取得率高,操作简便。

2. 安全、无毒害:整个操作过程无需使用苯酚、氯仿等有毒物质,提取环境更加安全。

3. 高纯度:OD260/230在1.5左右,OD260/280在2.0左右。

可直接用于各种分子生物学实验。

【试剂盒组成】【规格】50T/盒【自备试剂】无水乙醇,异丙醇【贮藏与有效期】裂解吸附液和Buffer AW1必须室温(15-25℃)避光保存;磁珠室温保存;其他所有试剂室温保存,有效期为1年。

【注意事项】1、Buffer AW1使用前,加入18mL无水乙醇,混匀,使乙醇含量为60%。

★2、Buffer AW2使用前,加入21mL无水乙醇,混匀,使乙醇含量为70%。

★3、组织最好置于组织核酸(DNA/RNA)保存液(Cat#Yu-TP01)或液氮中保存。

【操作步骤】1、样本的处理1.1、液氮中保存的组织将组织在液氮中磨成粉末后,使液氮充分挥发。

再以50-100mg组织中加入1mL裂解吸附液,充分研磨,混匀。

以下进入步骤2。

1.2、组织核酸保存液中保存的组织取出在组织保存液中保存的组织,加入1mL 无水乙醇洗涤组织两次。

再以50-100mg组织中加入1mL裂解吸附液,充分研磨混匀。

以下进入步骤2。

2、吸取400µL研磨后的裂解吸附液转入1.5mL的EP管中,加入5µL蛋白酶K,60℃1500rpm10分钟。

艾德莱基因组DNA提取试剂盒

艾德莱基因组DNA提取试剂盒

匀浆 10 秒钟,将裂解物转入 1.5ml 离心管。另一种方法:在液氮中研磨 10-20mg 组织(植物叶片可以适当多加如用 40mg)成细粉后,转入装有 600μl 冰预冷的细 胞核裂解液的 1.5ml 离心管, 用大口径枪头吹打混匀。
-3-
b. 将裂解物放置在 65℃水浴 15-30 分钟。 c. 3. 接操作步骤项下 4。
-2-
2.
用户需自备异丙醇、70%乙醇、PBS(用于细胞)、液氮研钵/或匀浆器(用于组织) 、 0.5M EDTA和蛋白酶K(用于鼠尾)、水浴箱。
3. 4.
开始实验前将需要的水浴先预热好备用。 本试剂盒为溶液型,可以很容易的按照比例扩大或者缩小每次处理的组织细胞 量,请联系我们索取其它处理量的操作手册。
11.
加入 1ml 70%乙醇,颠倒几次漂洗 DNA 沉淀,12,000rpm 离心 1 分钟, 倒去上 清 (注意不要把 DNA 沉淀倒掉了) , 倒置后在吸水纸上轻敲几下以控干残留乙醇, 还可以用枪头小心吸掉管底沉淀周围和管壁的残留乙醇,空气晾干沉淀几分钟。 注意不要干燥过头,否则 DNA 极其难溶;也不能残留太多乙醇,否则乙醇可能 抑制下游如酶切反应。
*如果异丙醇沉淀后没有迅速进行 70%乙醇漂洗的步骤,有的组 变色的 DNA 织如肝脏提取出的 DNA 可能会变色-建议: 异丙醇沉淀离心后, 马上进行 70%乙醇清洗的步骤。
-6-
问题
评论与建议
* 样品太旧或者不正确的存放,反复冻融等,造成 DNA 降解建议:选用新鲜的样品。。
DNA 长度 小于 20kb *操作不当,造成对基因组 DNA 的剪切-建议:混匀轻柔,不可 以用手剧烈振荡离心管,选用大口径的枪头转移或者混匀 DNA。 *加入蛋白沉淀液前,裂解混合物没有冷却回室温 -建议:冷却 至室温或者冰上放置 5 分钟后再加入蛋白沉淀液。 未见到蛋白沉淀 *蛋白沉淀液没有和裂解混合物充分混匀 -建议:应该连续高速 涡旋振荡混匀 25 秒,涡旋并不会剪切断 DNA。 *加入蛋白沉淀液后,混合物没有在冰上放 5 分钟-建议:离心 前在冰上放置 5 分钟帮助沉淀。 *晾干 DNA 沉淀时过度了-建议:晾干时候密切观察,不要干燥 过头,注意应该观察管底的 DNA 沉淀,有时候管壁上的残留 DNA 沉淀难以 重新溶解水化 乙醇已经挥发,但留下一些水分还没有干,只要管底 DNA 干 了就可以加入 DNA 溶解液。 可在 65℃温育帮助重新溶解 (不 要超过一小时)然后室温或者 4℃放置过夜,期间可以颠倒轻 弹帮助溶解。 下游酶切切不开 或者 PCR 反应受抑制 * DNA 未干燥完全, 残留乙醇太多-建议: 敞开离心管口, 在 65℃ 温育几分钟,让乙醇挥发。

康为世纪 CW0546动物组织基因组提取试剂盒

康为世纪 CW0546动物组织基因组提取试剂盒

Version 10112010 TissueGen DNA Kit动物组织基因组提取试剂盒Cat. No. CW0546保存:Proteinase K:-20℃其他组分:室温组分说明Cat. No. CW0546CW0546AKit Size 50 6Buffer GTL 15 ml 3 mlBuffer GL 15 ml 3 mlBuffer GW1(concentrate)19 ml 3.8 mlBuffer GW2(concentrate)13 ml 2.6 mlBuffer GE 15 ml 2 mlProteinase K 1.25 ml 150 μlSpin Column DM 50 6Collection Tube(2ml) 50 6产品简介本试剂盒用于新鲜或冰冻动物组织、细胞、血液或细菌的高纯度总DNA的分离纯化。

纯化过程无需苯酚或氯仿,无需乙醇沉淀,提取后可以立即使用。

优化的缓冲体系使裂解液中的DNA高效结合在吸附柱上,吸附柱可吸附分子量最大为50kb 的DNA片段,同时对100bp的DNA片段也能有效回收。

DNA特异性结合到硅胶膜上而其他污染物可流过膜,PCR和其他酶促反应的抑制剂可通过两步有效的洗涤步骤被完全去除。

低盐缓冲液或水洗脱下来的纯化DNA可以直接用于AFLP、RFLP、RAPD、Southern Blot、Real-Time PCR等下游操作。

注意事项1.样品应避免反复冻融,否则会导致提取的DNA片段较小且提取量下降。

2.如果提取次生代谢产物大量积累或细胞壁厚的细菌培养物的基因组,建议在对数生长期早期收集样品。

3.第一次使用前应按照试剂瓶标签的说明在Buffer GW1和Buffer GW2中加入无水乙醇。

4.若Buffer GL 和Buffer GTL中有沉淀,可在56℃水浴中重新溶解,摇匀后使用。

5.所有离心步骤均应使用台式离心机,在室温下进行离心。

6.如果下游实验对RNA污染比较敏感,可以在加入Buffer GL前加入4 μl DNase-free的RNase A(100 mg/ml),RNase A本试剂盒并未提供,如需要可单独向本公司订购,货号:CW0601。

组织细胞基因组DNA快速提取试剂盒

组织细胞基因组DNA快速提取试剂盒

组织细胞基因组DNA快速提取试剂盒编号:N1141/N1142说明书下载组织细胞基因组DNA快速提取试剂盒产品组分注:裂解液MS有轻微腐蚀性,请不要直接接触。

漂洗液PE初次使用前用无水乙醇按1: 3稀释,即含75%乙醇。

保存条件蛋白酶K于-20℃保存。

其余试剂置于室温(15-25℃)干燥条件下保存1年。

消化缓冲液DS如有沉淀,在55℃加热溶解,待恢复室温后混匀即可使用。

不会影响基因组DNA 纯化效率。

产品说明本产品用于多种动物组织(新鲜或冻存)与培养细胞等样本的基因组DNA的纯化。

其纯化原理是利用细胞裂解液裂解细胞核释放基因组DNA,由硅胶膜柱可逆吸附基因组DNA,经蛋白酶消化、漂洗液清洗除去蛋白质、脂质以及多糖等杂质后,用纯化液洗脱获得基因组DNA。

本产品可从不超过10 mg组织材料或不超过1×106-107培养细胞中提取到3-35 μg 超纯基因组DNA(OD260/OD280 = 1.7-1.9),此基因组DNA可直接用于PCR、酶切、文库构建等后续实验。

产品特点高效:一次可获得3-35 μg基因组DNA。

快速:30min内即可获得超纯的基因组DNA。

通用:可从多种样本材料中获取基因组DNA。

安全: 整个操作中不用酚/氯仿有机物。

高纯度:无须再纯化即可直接用于下游实验。

产品用途常规限制性酶切PCR扩增文库构建Southern 杂交分子标记分析质量控制纯化的基因组DNA质量通过限制性酶切和单拷基因的PCR扩增鉴定。

基因组DNA提取流程图图1 基因组DNA纯化流程图操作方法1 材料处理[动物组织]取少量样本材料,放入液氮预冷的研钵中。

快速用力研磨的同时加入少量液氮,直至样本材料被研磨成粉末。

将研磨好的样本转移至1.5 ml离心管中,每管组织材料含量应不超过10 mg。

注:某些匀浆困难,或在匀浆过程中DNA容易降解的特殊组织应加液氮研磨。

如DNA酶含量丰富的组织:肝脏、脾脏、胰腺、胸腺、淋巴等;胶原蛋白含量丰富的组织:皮肤、肌腱等;角质蛋白含量丰富或坚硬的组织:骨骼等。

动物基因显学组DNA提取晨中试剂(AnimalDNAout)

动物基因显学组DNA提取晨中试剂(AnimalDNAout)

动物基因组DNA提取试剂(Animal DNAout)货号: M090038产品及特点:本产品用于快速提取新鲜或冷冻的动物组织中的基因组DNA。

阿甘,他不仅赐予阿甘一双疾步如飞的“飞毛腿”,还赐给了他一个单纯正直、不存半点邪念的头脑。

在上学的校车里,阿甘与金发小女孩珍妮相遇,(珍妮是一个受父亲“虐待”的女孩)从此,在妈妈和珍妮的爱护下,阿甘开始了他一生不停的奔跑。

在中学时,阿甘为了躲避同学的追打而跑进了一所学校的橄榄球场,就这样跑进了大学。

在大学里,他被破格录取,并成了橄榄球巨星,受到了肯尼迪总统的接见。

越战时常思念珍妮,而这时的珍妮早已误入歧途,陷于绝望之中。

终于有一天,珍妮回来了,她和阿甘共同生活了一段日子,在一天夜晚,珍妮投入了阿甘的怀抱,之后又在黎明悄然离去。

后来阿甘开始了他长达三年多的长跑生活。

三年的长跑之后,阿甘感到过度的劳累,就回到了故乡,替他人免费除草。

再见珍妮3年以后,阿甘收到珍妮的信并按照信上的地址去到了珍妮的住处,与珍妮在一起居住的还有一名与阿甘同名小男1.DNA纯净,大多数DNA样品的OD260/280值在1.9左右,不含蛋白质和RNA污染,可直接用于PCR、酶切、杂交等后续反应,DNA产率为0.5-2 mg/g组织。

2.操作简单,整个过程室温操作约15分钟,适合大规模样品处理,不需要离心柱,不会发生该类产品经常发生的离心柱堵塞现象。

3.安全无毒,本试剂盒对人体无毒,无腐蚀性和刺激性气味。

4.性价比高,质量和国外同类产品相当,但价格更便宜。

规格及成分成份100次包装动物DNA OUT100 mLRNase A溶液 1.5 mL使用手册1份运输及保存:常温运输、4℃保存,有效期一年使用方法1.取10 mL圆底塑料离心管一支,加入1 mL 65℃预热的动物DNAOUT溶液,接第二步。

如果使用培养的细胞,则需要先吸弃培养基,然后在培养瓶中直接加入1 mL 65℃预热的动物DNAOUT溶液,充分吹打后转移到1.5 mL无菌塑料离心管中,接第三步。

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磁珠法动物组织基因组DNA提取试剂盒
MagBeads Tissues Gen DNA Extraction Kit
【目录号】TGDE-5005、TGDE-5030
【运输条件】2~25℃;
【保存条件】磁珠悬浮液2~8℃,其它组分室温保存;
【试剂盒组成】
【注意事项】
1. 磁珠悬浮液严禁反复冻融和离心,使用前请充分混匀;
2. 使用前请检查裂解液1和裂解液2是否出现结晶,如有结晶请置于65℃水浴重新溶解;
3. 在使用本试剂盒前,请用户自配80%乙醇;
4. 如需去除RNA请自备RNase A溶液(100mg/mL, 分散液10mM Tris-HCl,
1mM EDTA, pH值8.0);
5. 本操作指南经本公司反复验证,使用前请仔细阅读,并且按照操作指南的建议操作。

磁珠法·自动化:为生命科学提供自动化磁纳米捕获方案
【产品简介】
本产品适用于从各种动物组织以或者细胞样本中提取基因组DNA。

试剂盒采用具有独特分离作用的纳米磁珠和独特的缓冲液系统。

特殊技术包埋的纳米磁珠在特定条件下对核酸具有极强的亲和力,而当条件改变时可以释放所吸附的核酸,从而达到快速分离纯化核酸的目的。

本试剂盒提取所得基因组DNA产物得量高、纯度好,适用于各种下游分子生物学实验,如:酶切、PCR、QPCR、文库构建、Southern 杂交、芯片检测和高通量测序等。

本试剂盒可配合核自动化酸提取仪或工作站使用,实现高通量操作。

【试剂盒说明】
【自备仪器、耗材及试剂】
仪器自动版
研钵(或组织研磨机、匀浆机)、英芮诚ETP-300型全自动核酸提取仪、核酸提取仪配套用磁棒套、水浴锅或金属浴、涡旋振荡仪、96孔方孔圆底板、80%乙醇、异丙醇、液氮。

手动版
研钵(或组织研磨机、匀浆机)、水浴锅或金属浴、涡旋振荡仪、真空干燥箱、80%乙醇、异丙醇、2.0mL离心管、离心管配套用磁力架、液氮。

【仪器自动版操作步骤】
本操作以英芮诚ETP-300型全自动核酸提取仪为例,同步可完成32个样本的提取。

1.准备96孔板
参照下表向96孔板各孔位中分别加入相应试剂:
磁珠法动物组织基因组DNA提取试剂盒
2.样本前处理
组织样本:
取适量组织样本,液氮研磨至粉末状。

尽可能转移至2.0mL离心管中,加入400μL裂解
液1,涡旋振荡1~3min,至组织粉末呈云雾状;
注:针对毛发样本,可剪除毛发根部,毛干部分剪成1~5mm长度。

细胞样本:
用离心管收集组织细胞(细胞个数:5*101~5*107),PBS清洗2次,向收集好的细胞
中加入400μL裂解液1重悬细胞,涡旋振荡1~3min。

3.样本裂解
将离心管置于65℃水浴锅中温浴15min,每隔5min颠倒混匀一次。

结束后将离心管12000rpm室温(勿低于15℃)离心5min,待用。

注:如需去除RNA,请额外加入5μL RNase A。

4.上机提取
将裂解完毕离心管中所有上清液转移至准备好的96孔板第2、8列孔位,然后将96孔板
放入ETP-300型核酸提取仪中,插入磁棒套,打开仪器操作软件,调用“动物组织DNA提取
实验方法”程序,单击“运行”执行程序。

5.核酸转移
程序运行完毕,取下96孔板,将洗脱液转移至干净的离心管或者PCR板中,做好标记,
-20℃保存备用,此时可以弃去96孔板。

“动物组织DNA提取实验方法”程序各参数设置如下,如果原程序不慎丢失,可自行设定:
3
磁珠法·自动化:为生命科学提供自动化磁纳米捕获方案
【手动版操作步骤】
1. 样本前处理
参考【仪器自动版操作步骤】步骤2操作。

2. 样本裂解
参考【仪器自动版操作步骤】步骤3操作。

3. 核酸结合
将裂解完毕离心管中所有上清液转移至新的离心管中,加入200μL磁珠悬浮液以及300μL异丙醇,颠倒混匀,涡旋振荡6min,静置2min。

4. 磁性分离
将离心管置于磁力架上静置20s至磁珠吸附完全;如果离心管内盖有磁珠,可保持离心管在磁力架上,整体上下颠倒2~3次至磁珠被完全吸附。

保持离心管固定于磁力架上,用移液枪吸弃上清液,期间避免接触磁珠。

5. 清洗
1) 将离心管从磁力架上取下,加入600μL清洗液,高速涡旋振荡1min,重新置于磁力
架上磁性分离(参考步骤4操作)。

2) 使用600μL80%乙醇,参考步骤5(1)操作2遍。

6. 除醇
将除尽上清液后的离心管置于磁力架上,连同磁力架一起放入45℃真空干燥箱中,干燥约10min至无明显乙醇味。

注:亦可置于通风橱通风或电风扇直吹约10min,具体时间以磁珠干透无乙醇味为准。

7. 洗脱
取出离心管,加入100μL洗脱液,用移液枪吹散磁珠,65℃温浴10min,每隔3min涡旋振荡30s,确保磁珠与核酸洗脱完全。

8. 核酸转移
洗脱完毕后,将离心管置于磁力架上静置20s至磁珠吸附完全,用移液枪将洗脱液转移至另一干净离心管中,做好标记,-20℃保存备用,此时可以弃去磁珠。

*本产品仅供科研使用,请勿用于临床诊断及其他用途。

版权声明:© 英芮诚生化科技(上海)有限公司保留本使用指南所有权利。

版本:V201702.201。

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