常见荧光定量PCR仪汇总共59页
四种常见PCR仪的区别及运用-科邦实验室-2020.6.24
四种常见PCR仪的区别及运用PCR扩增仪(俗称PCR仪)PCR:PCR(聚合酶链式反应)是利用DNA在体外摄氏95°高温时变性会变成单链,低温(经常是60°C左右)时引物与单链按碱基互补配对的原则结合,再调温度至DNA聚合酶最适反应温度(72°C左右),DNA聚合酶沿着磷酸到五碳糖(5'-3')的方向合成互补链。
PCR仪实际就是一个温控设备,能在95℃,55℃,72℃之间很好地进行温度控制。
PCR扩增仪又称为PCR基因扩增仪、PCR核酸扩增仪、聚合酶链反应核酸扩增仪,是利用PCR(Polymerase chain reaction,聚合酶链反应)技术对特定DNA扩增的一种仪器设备,被广泛运用于医学、生物学实验室中,例如用于判断检体中是否会表现某遗传疾病的图谱、传染病的诊断、基因复制以及亲子鉴定等。
根据DNA扩增的目的和检测的标准,可以将PCR仪分为普通PCR仪,梯度PCR 仪,原位PCR仪,实时荧光定量PCR仪四类。
1). 普通PCR仪(2万以下,赛默飞、伯乐、大龙,艾本德)一次PCR扩增只能运行一个特定退火温度的PCR仪称作传统PCR仪,也叫普通PCR仪。
如果要做不同的退火温度需要多次运行。
主要是用于简单的、对目的基因退火温度的扩增。
该仪器主要应用于科学研究、教学、医学临床、检验检疫等机构。
如:启步BSW-2P,BSW-3P,BSW-6P-I/II ,ABI 2720型2). 梯度PCR仪(2万-8万,赛默飞、伯乐、大龙,艾本德)一次性PCR扩增可以设置一系列不同的退火温度条件(温度梯度,通常有12种温度梯度)的PCR仪称作梯度PCR仪。
因为被扩增的不同DNA片段,其最适退火温度是不同的,通过设置一系列的梯度退火温度进行扩增,从而一次性PCR 扩增,就可以筛选出表达量高的最适退火温度,进行有效的扩增。
用于研究未知DNA退火温度的扩增,这样节约成本的同时也节约了时间。
常见荧光定量PCR仪汇总
率
Bio-Rad (伯乐)
市
ROChe
场
价
格
ABI
Bio-Rad
如何选择荧光定量 PCR 仪器?
1 、仪器使用的广泛程度 2 、仪器的检测通量(反应孔数) 3、仪器的通道数量 4、耗材的开放性 5、硬件设计特点 6、运行速度 7、灵活性
热模块系统
荧光定量PCR的光学系统
决定其通道数
综上所述:LightCycler系列检测速度快,稳定性非常好,灵敏度 明显比其它仪器高。但操作过程是以毛细管进行,操作时应特别小心。 Roche使用的耗材的通用性差,成本高(毛细管),且每次的检测数量低。
进口定量PCR仪器厂商
ABI
市
场
占 有
ROChe (罗氏)
率
Bio-Rad (伯乐)
市
ROChe
优缺点:
IQ 5
1.检测孔数:96孔板 或 8联管 2.激发光源:卤素灯光源激发 3.加热模块:iCycler 4.运行时间:2h完成40个循环。 5.检测通道:冷CCD检测 ,5通道,无需ROX校正 6.可以脱离电脑控制,独立运行 7.具有温度梯度功能,1-25℃
Bio-rad DNA Eng源自ne Opticon 2国产各厂家仪器展示
达安基因 DA 杭州 博日FQD 厦门安普利 GeneLight 上海宏石 SLAN
达安基因 DA 7600
性能描述
样本容量 :支持48孔,48×0.2ml离心管或6×8连管 检测通道:两个检测通道,F1.F2 升温速率: 4.0℃/s 加热基座:半导体加热模块 光路系统:LED激发+PMT检测 支持本公司体系:40ul
pcr概述技术发明史1992年由日本科学家higuchi在报告中提出1996年由美国appliedbiosystems公司推出技术发展趋势从单一的染料染色法发展到特异性更高的探针法从最初的只能检测单一波长光源发展到可以检测多种波长光源进口定量pcr仪器厂商abirochebiorad伯乐abirochebiorad如何选择荧光定量pcr仪器
常见荧光定量PCR仪汇总讲解
而3320为双通道检测(FAM,HEX),支持三种荧光染料
杭州 博日FQD-48a
性能描述
FQD-48a具有单通道和4通道两种规格,通
过硬件转换可升级至4通道,支持0.2mlPCR 管,支持本公司体系:40ul 梯度温度范围:1℃~24℃ 升温速率:4.0℃/S 光路:LED激发+PMT检测
杭州 博日FQD-66A
孔数:96孔(10-100ul)检测1小时,384孔(5-20ul)检
测40min 材料:专用板,理论支持本公司PCR体系:40ul
集多个优点于一身,目前市面上最强悍的PCR仪
LightCycler Nano
优缺点:
检测通道:12个以上 加热模式:空气加热/冷却
升温:20℃/S
孔数: 32孔(4×8联管) 理论支持本公司PCR体系:40ul,价格为LC480的一半
进口定量PCR仪器厂商
市 场 占 有 率
ABI
ROChe (罗氏)
Bio-Rad (伯乐)
市 场 价 格
ROChe ABI Bio-Rad
ROChe
厂家介绍:
市 场 罗氏公司始创于1896年,总部位于瑞士巴塞尔,主要涉及药品、医疗诊 占 断、维生素和精细化工、香精香料等四个领域。LightCycler以运行速度 有 快而著称,在国内市场占有率单款最高 率
支持本公司体系:40ul
杭州 博日 linegene-3310/3320
性能描述
linegene-3310/3320具体的型号为FQD -33a 。最多检测33个样本, 支持0.2mlPCR管和8联管,支持本公司体系:40ul 升温速率:6℃/秒,通过Peltier技术控温 光路:LED激发+PMT检测 其中3310为单通道检测(FAM),支持两种荧光染料 (FAM/SYBR)
PCR实验室主要仪器设备一览表完整
1台
22
标准恒温水浴
CF-B
上海锡仪试验仪器
1500
/
合格
1年
温州市计量技术研究院
刘惠民
1台
23
容量瓶
500mL
/
50
/
A级
1年
温州市计量技术研究院
刘惠民
2个
24
电子天平
BS-6KH
上海友声衡器
450
6000kg
III级
1年
温州市计量技术研究院
刘惠民
1台
25
电子天平
JA5001
上海上浦春密仪器
850
5000g
III级
1年
温州市计量技术研究院
刘惠民
1台
26
万能角度尺
0-320°
上量
/
0~320mm
合格
1年
温州市计量技术研究院
陈伟
1把
27
压力试验机
JES-300型
无锡市锡东建材设备厂
13200
300
1级
1年
温州市计量技术研究院
刘惠民
1台
28
水泥标准养护箱
HBY-40B
无锡市建工试验仪器设备
4300
如果有后续实验(如测序、电泳等)需多分一区:4区:扩增产物分析区。
设备
编号
设备名称
型号规格
生产厂家
购置
日期
单价
(元)
量程或规格
准确度
检定/校准
周期
检定/校准单位
最近检定/校准日期
保管人
备注
1
万能材料试验机
WES-600B
常见荧光定量PCR仪汇总
常见荧光定量PCR仪汇总常见的荧光定量PCR仪(Fluorescence Quantitative PCR Instrument)主要有以下几种:1. Applied Biosystems 7500 Fast System:该系统是ABI公司旗下产品之一,具有优秀的性能和稳定性。
其特点包括快速准确的PCR结果、高通量PCR样品处理能力以及灵活的试剂和探针选择。
该系统可应用于基因表达分析、SNP检测、病毒定量等多个领域。
2. Bio-Rad CFX96 Touch System:这个PCR仪是Bio-Rad公司的产品之一,具有高精度的温控技术和可靠的荧光检测系统。
它支持多种共轭染料和探针,可以同时检测多个靶序列,适用于基因表达分析、蛋白质分析和病毒检测等多个应用领域。
3. Roche LightCycler 480 System:这是一款高通量的PCR仪,可同时处理多达384个孔的样品,适用于高通量基因表达分析和蛋白质研究。
该系统具有高分辨率荧光检测和精确的温度控制能力,可提供更准确和一致的PCR结果。
4. Thermo Fisher QuantStudio 6 Flex Real-Time PCR System:该PCR仪具有灵活多样的探针和染料选择,可以满足不同的研究需求。
它具有宽广的检测动态范围和高灵敏度,适用于基因表达分析、SNP分型和病毒定量等多个应用领域。
5. Qiagen Rotor-Gene Q:这是一款高通量PCR仪,可同时处理多达72个样品。
它具有快速高效的PCR扩增速度和精确的荧光检测能力,适用于基因表达分析、基因突变检测和染色体融合分析等多个研究领域。
6. Stratagene Mx3000P/QPCR System:这是Agilent Technologies旗下的产品,具有高精度和稳定性的特点。
它支持多种探针和染料,可以同时检测多个靶序列,适用于基因表达分析、非编码RNA研究和表观遗传学研究等多个领域。
PCR实验室主要仪器设备一览表讲课稿
2区
21
全自动荧光定量PCR仪
1
3区
22
紫外线消毒车
1
3区
23
ABI基因分析仪
4区
24
移液器
0.5-10ul
1
4区
25
移液器
10-100ul
1
4区
26
移液器
20-200ul
1
4区
27
移液器
200-1000ul
1
4区
28
高速冷冻离心机
1
4区
29
生物安全柜
1
4区
30
小PCR仪(定性PCR仪)
1
4区
31
1
1区
9
移液器
200-1000ul
1
1区
10
紫外线消毒车
1
2区
11
干式恒温器
1
2区
12
高速冷冻离心机
1
2区
13
冰箱
1
2区
14
生物安全柜
1
2区
15
微型离心机
1
2区
16
微型混合器
1
2区
17
移液器
0.5-10ul
1
2区
18
移液器
10Байду номын сангаас100ul
1
2区
19
移液器
20-200ul
1
2区
20
移液器
200-1000ul
PCR实验室主要仪器设备一览表
附表3-12主要仪器设备一览表
序号
仪器设备名称
编号
型号规格
荧光定量PCR实验室所需仪器设备清单
所有四区均需准备的仪器设备为:
专用工作服和工作鞋
专用办公用品
一次性手套、一次性吸水纸
可移动紫外灯(近工作台面)
微量加样器一套(覆盖1~1000ul)
以上物品各一套。
一、试剂贮存和准备区
2~8℃和-15℃冰箱
混匀器(可加热)
耐高压处理的离心管和加样器吸头(带滤心)天平
高压锅
二、标本制备区
2~8℃冰箱和-20℃或-80℃冰箱
高速台式冷冻离心机
混匀器
水浴箱或PCR仪
耐高压处理的离心管和加样器吸头(带滤心)超净工作台
超声波水浴仪(处理大分子DNA用)
三、扩增反应混合物配制和扩增区
核酸扩增仪
耐高压处理的离心管和加样器吸头(带滤心)国产离心机
四、扩增产物分析区
酶标仪、洗板机、恒温箱(PCR—ELISA)
加样器吸头(带滤心)
电泳仪及电泳槽
杂交仪
核酸转移仪
国产离心机。
荧光定量PCR仪器简介-liuyi
Taqman 探针
4、荧光定量PCR仪的原理
5、荧光定量PCR仪的应用
基础科学研究 疾病检测与治疗检测、预后 优生优育及遗传筛查 基因表达分析 临床医学应用 肿瘤分型/耐药性评估 食品卫生检疫及安全评估 医院检验科、感染病科等 疾控中心 血站、血液中心 研究所等机构 食品监督管理局 海关进出口检疫
Peltier-based system 96-well(fast) Fast-mode: +/-3.5℃/s +/-0.5℃ 48-well Fast-mode: +/-2.2℃/s +/-0.25℃ 96-well Fast-mode: +/-2.2℃/s +/-0.25℃
温度精确度
光学系统
卤钨灯,单 色激发,4色 检测,CCD
1. Thermal Block Cycler包括了样本底座(96孔或384孔),Peltier元件,配合 Therma-BaseTM 热均衡器,银质散热块和电子元件。 2. Block cycler cover (热盖) 3. Multiwell plate loader, Multiwell plate detector, Multiwell plate bar-code scanner (条形码扫描装置), Block Cycler door with fans.
Wavelength (nm)
石英卤钨灯激发范围 (350-750nm) 激光的激发范围 (488-514nm)
3、检测装置比较
光电倍增管(PMT) 电荷耦合装置(CCD) 光电二极管(PDT)
优点
信噪比高; 背景噪音信号低; 对较低的光信号敏感度 高; 检测范围宽。 成本较高;
7500型荧光定量PCR仪
●
●
2
3
AB具有的Real-Time PCR相关的知识产权
● ● ● ●
PCR仪器专利 定量PCR仪器专利 VIC dye TaqMan MGB探针
4
ABI提供基因分析全套解决方案
基因序列分析,SNP和突变分析,STR基因分型,基因表达分析 ● ● ● ● • ●
5
常规PCR仪
– 2720、9700、9800、Veriti;
● ● ● ● ●
Bacillus anthrasis – 炭疽芽胞杆菌 Yersinia pestis – 鼠疫杆菌 Francisella tularensis – 土拉弗朗西斯菌 Pseudomonas aeruginosa – 绿脓杆菌 Staphylococcus – 葡萄球菌
– 阪崎肠杆菌
其他检测试剂盒
● ● ● ● ●
药物代谢基因分型分析试剂盒 病原体检测试剂盒 转基因检测试剂盒 禽流感检测试剂盒 ……
32
全面解决方案
● ● ● ●
安装培训 用户培训 售后服务
全面的试剂、耗材支持 ● …………
ABI不仅仅提供仪器
33
Q & A
34
Thanks!
4006209660 cnmcbsupport@
独特的茎环设计,有效区分前体 和成熟的microRNA; 检测灵敏度高,仅需1-10ng总 RNA或类似样品; 检测速度快,两步反应3小时内 得到高质量的结果; 涵盖人、线虫、果蝇、拟南芥、 小鼠和大鼠等众多物种,1000多 个检测试剂盒可供选择。
27
miRNA研究举例——生殖细胞瘤表达谱
DG YST
7
7500定量PCR仪热循环系统
实时荧光定量PCR仪比较表
软件易用性
LED
3通道
2/4通道
2、4、5、6不 3块检测滤光片 /6块检测滤光片 等 PMT 光电二极管 3个/6个发射光 检测滤光镜 32
五通道
4通道
2/4/6/8通道
光电二极管 带有3个/4个检 测端滤光片 48孔/96孔
1/2个PMT 激发端没有滤 光片发射端有 2/4个滤光片 96孔
CCD 5个激发端滤 光片和6个检 测断滤光片 96/384
卤钨灯 5通道其中一个 为校正染料通 道 冷CCD
5
4
2
2
4 通道
5通道
6个光电二极管 5个光电二极管 3个光电二极管 2个光电二极管 6个激发与6个 检测 96孔 5个激发与5个 检测 384孔
PMT
PMT
5个激发光滤镜 4个激发光滤镜 5个激发光滤镜 3个激发与3个 48个激发与2个 光栅分光/全波 6色激发滤光片 与5个发射光滤 与4个发射光滤 与5个发射光滤 检测 检测 长检测 /6色检测滤光片 镜 镜 镜 96/384(14块 标准96孔模 48 96孔 96孔 96孔 96孔 384孔样品板/ 块;• 快速96孔 天) 模块;• 384孔 450-580 nm 470-500 nm 350-750nm 350-750nm 488nm
有
有 单个拷贝的基 因组DNA Peltier半导体
有 单个拷贝的基 因组DNA Peltier半导体
几种常用PCR仪的用途及介绍
几种常用PCR仪的用途及介绍普通PCR仪一般把一次PCR扩增只能运行一个特定退火温度的PCR仪,称之为普通PCR仪。
如果要用它做不同的退火温度则需要多次运行。
主要是用作简单的,对目的基因退火温度的扩增。
主要应用于科研、教学、临床医学、检验、检疫等。
梯度PCR仪一次性PCR扩增可以设置一系列不同的退火温度条件(通常12种温度梯度)的称之为梯度PCR仪。
因为被扩增的不同的DNApian段其最适合的退火温度不同,通过设置一系列的梯度退火温度进行扩增,从而一次性PCR扩增就可以筛选出表达量高的最适合退火温度进行有效的扩增。
主要用于研究未知DNA退火温度的扩增,这样既节约时间,也节约经费。
在不设置梯度的情况下亦可当做普通的PCR用。
正真的梯度,是每一排管都有精确的加热控温探头,2009年为止只有美国ABI公司可以做到。
其他的都是从两头的热传递来设计控温。
梯度PCR仪多应用于科研、教学机构。
实时荧光定量PCR仪在普通PCR仪设计基础上增加荧光信号激发和采集系统和计算机分析处理系统,形成了具有荧光定量PCR功能的仪器。
其PCR扩增原理和普通PCR扩增原理相同,在PCR扩增时加入的引物是利用同位素、荧光素等进行标记,使用引物和荧光探针同时与模板特异性结合扩增。
扩增的结果通过荧光信号采集系统实时采集信号连接输送到计算机分析处理系统,得出量化的实时结果输出。
荧光定量PCR仪有单通道,双通道和多通道之分。
当只用一种荧光探针标记的时候,选用单通道;有多种荧光标记的时候使用多通道。
单通道也可以检测多荧光的标记和目的基因表达产物,因为一次只能检测一种目的基因的扩增量,需多次扩增才能检测完不同的目的基因片段的量。
多通道利于做多重PCR,实现一次检测多种目的基因的功能。
实时荧光定量PCR仪主要应用于临床医学检测、生物医药研发、食品行业、科研院校等。
原位PCR仪(有些品牌的PCR仪具有普通PCR、梯度PCR、原位PCR的功能,通过替换模块进行多用途开展实验工作)是用于从细胞内靶DNA的定位分析的细胞内基因扩增仪。
荧光定量PCR仪技术参数
荧光定量PCR仪技术参数1.仪器规格*1.1Block规格: 48 孔,支持标准与快速反应模式*1.2通道:支持3通道检测1.3支持耗材:48 孔、8联管、单管*1.4Block最高升降温速率:≥ 4.5°C/秒*1.5温度范围: 4°C–100°C1.6温度精确度:≤±0.26°C*1.7融解曲线分辨率:≤ 0.1°C1.8光源:单一LED激发光源1.9触摸屏: LCD/6.5 英寸Full VGA (640x480)/260K 色*1.10具有高分辨率融解曲线功能(HRM)*1.11机器结构:一体化设计、加样过程光学模块无机械位移2已验证性能指标2.1精密度:使用 TaqMan® RNaseP 仪器验证反应板,可分辨 5,000 至 10,000 个RNaseP 模板拷贝(置信度 99.7%)*2.2运行时间:快速:40 循环少于 40 分钟;标准:40 循环少于 2 小时3.软件支持应用基于标准曲线的绝对定量、相对标准曲线、基于比较Ct值的相对定量、融解曲线分析、存在/不存在、基于或非基于实时扩增的基因分型4.仪器应用要求4.1可提供专业的食品安全检测试剂盒:大肠杆菌O157检测试剂盒;沙门氏菌检测试剂盒;空肠弯曲杆菌检测试剂盒;李斯特菌检测试剂盒;副溶血性弧菌,创伤弧菌和霍乱弧菌的多重弧菌检测试剂盒4.2原装进口笔记本电脑1台。
5.仪器资质5.1生产商必须具有ISO9001认证证书。
*5.2必须具有医疗注册许可证书6仪器配置6.1满足上述要求快速定量PCR主机一台含一年免费质保6.2满足上述要求的原装进口DELL笔记本电脑一台6.3SDS定量分析软件一套(含绝对定量功能;相对定量功能,自动基因分析和阴阳性鉴定功能)6.4定量PCR安装验证试剂包一套(含验证试剂盒)6.5引物探针设计软件一套。
荧光定量PCR仪参数比照表
这个表格反映的是碱基的不同,带来的Tm值的变化,可以看出A/T之间的突变,需要温度分辨率小于﹤0.2℃才能区分开,而象AB等其它公司的分辨率是± 0.25℃,所有它是区别不开第四类的SNP变化的,HRM技术的发明者,曾发表过一篇文章,用市场上所有能做HRM机器的定量,做了一次比较,结果显示QIAGEN Rotor-Gene Q 是能做的最好的一个公司;文章全文可见以下链接:Herrmann et al 2007 Clinical Chemistry 53,/cgi/content/abstract/clinchem.2007.088120v1 Expanded Instrument Comparison of Amplicon DNA Melting Analysis for Mutation Scanning and GenotypingFig 1 (detail) Normalized melting curves of a 110 bp β-globin amplicon (triplicate HRM data)以下是一些关于定量PCR HRM(High Resolution Melt中文:高分辨率熔解曲线)一些介绍!(QIAGEN)有2个最显著特点:1)是温控精度非常高(温度均一性:±0.01℃,温度分辨率:±0.02℃)及升降温速度非常快(升温可达15 ℃/秒,降温可达20℃/秒)2)是区别与其它的公司定量PCR的是它的HRM功能,这个是其它厂家都无法能做到的(比如ABI 7500Fast及其它公司这种板式加热系统,因为它的温度分辨率达不到)QIAGEN 是一个集遗传分析和定量完美结合的一款机器;现阶段,大家检测SNP时都用一贯的检测方法,包括测序,探针还有DHPLC等等,而甲基化大多用MSP.至于HRM技术并不为大家所熟知,有两个原因:1)适合做HRM技术的仪器在国内的普及程度不高,具我了解能真正能够做HRM的只有QIAGEN Roter-Gene Q+HRM系列和Idaho LightScanncer.Roche;其中QIAGEN 在其温度控制及软件分析上是做的最好的. (其它的比如ABI 7500 Fast及伯乐也对外宣传它的HRM功能,但由于它的温控精度,决定了它做HRM功能是做不好的,可见也是一个赶时髦的功能,也只能通过软件的模拟来处理)2)HRM的实验灵敏度太高,影响实验因素过多,很多人都做了,但是就是做不出来.因此就放弃,就换用其他比较成熟的方法.殊不知,HRM技术的检测方法有其他技术难以比拟的优势,不仅能实现高通量和高精度的同时,PCR和荧光定量在同一管内进行,能够有效避免假阳性.(QIAGEN 在上海有个用的非常好的用户,是交通大学华山医院的关明主任,用这个机器发表了一篇非常好的文章,如果老师有兴趣,可过去看看)作为新一代的遗传扫描工具,HRM具有"简,效,快,廉"等其他技术难以比拟的优势:简:无需序列特异性探针,不受碱基位点局限,同时检出已知或未知突变、SNP和甲基化位点:闭管操作,避免交叉污染。
常见荧光定量PCR仪汇总
技术发明史
概述
1992年由日本科学家Higuchi在报告中提出 1996年由美国Applied Biosystems公司推出
技术发展趋势
从单一的染料染色法发展到特异性更高的探针法
从最初的只能检测单一波长光源发展到可以检测多种波长光源
进口定量PCR仪器厂商
ABI
市
场
占
ROChe (罗氏)
缺点:价格昂贵,体积大
综上所述,以上几款为ABI常见的荧光定量PCR仪器,像ABI7700,7000已 被市面所淘汰。ABI系列是市场占有率最大的荧光PCR仪器厂商,但由于 硬件设计上的缺陷,需要额外的ROX染料进行校正,且ABI维修费用相当 高。
进口定量PCR仪器厂商
ABI
市
场
占
ROChe (罗氏)
优缺点:
ABI ViiA7
ABI第7代产品,优点比7900有所提升,理论支持本公司PCR体系:40ul 1.检测孔数:96孔板,384孔板,Taqman 低密度表达谱芯片 2.激发光源:齿钨灯 3.加热模块:半导体加热模块,升温3℃/S,温控准确性好。 4.运行时间:35min完成40个循环。 5.检测通道:6通道,除去ROX后5通道
测40min 材料:专用板,理论支持本公司PCR体系:40ul 集多个优点于一身,目前市面上最强悍的PCR仪
优缺点:
LightCycler Nano
检测通道:12个以上 加热模式:空气加热/冷却 升温:20℃/S 孔数: 32孔(4×8联管) 理论支持本公司PCR体系:40ul,价格为LC480的一半
综上所述:LightCycler系列检测速度快,稳定性非常好,灵敏度明 显比其它仪器高。但操作过程是以毛细管进行,操作时应特别小心。 Roche使用的耗材的通用性差,成本高(毛细管),且每次的检测数量低。
各款荧光定量PCR仪的性能比较
各款荧光定量PCR仪的性能比较本人从事荧光定量PCR检测试剂的开发工作,用过市场上主流的多款荧光定量PCR仪,如ABI5700,ABI7700,ABI7000,ABI7300,ABI7500,MJ opticon,MJ opticon2,bio—rad I Cycler,LightCycler1。
5,roter-gene3000,Stratagene Mx3000P,line-gene等等.这种仪器各有各的特点,但都存在不足之处。
ABI公司的荧光定量PCR仪产品比较多,成系列,但目前而言ABI5700和ABI7700不能实时在线地检测荧光,因而已经退出历史舞台,尤其是ABI7700,不但很贵,而且采用苹果机电脑,使用很不方便。
ABI7000目前也已经淘汰,我用的这台仪器老出问题,曲线极不光滑,但同样的反应体系在国产机杭州博日line-gene上曲线非常好,在ABI7500上曲线也很光滑,所以,本人估计是ABI7000设计上有不足之处.而且卤钨灯特别容易坏,在南方,我们实验室平均5个月换一个,配件容易坏,后续使用成本就会高一些。
现在市场上的ABI7300就是ABI7000的简单升级版,硬件设计上几乎没有改变,只是换过几个性能更好的配件,软件有所升级.另外我个人感觉ABI7900(ABI公司第二代产品)有些华而不实,价格应该是所有荧光定量PCR仪中最贵的,硬件上跟ABI7700差不了太多,但性能指标还不如ABI7500(ABI公司第三代产品),硬件设计上也不如ABI7500合理.所以这个型号的仪器,谁买了,用的时候会不呼上当。
ABI7500是ABI公司最成功的产品,各方面性能都不错,虽然加热模块还是有一些边缘效应,但使用中央的孔位效果可以得到保证,在96孔板使用中间的48个孔位,结果都能得到保证。
总的来说,ABI公司在荧光定量领域上还是做出很多贡献的,其仪器在科研上还是可以用的,但由于硬件设计上的缺陷,需要额外的ROX染料进行校正,并且占用了一个检测通道.国内的试剂厂商都不加ROX染料,科研用户一般也不使用,所以其检测的准确性和重复性还是很难保证的,尤其浓度较低的模板进行检测时效果不佳,偏差会很大。
实时荧光定量PCR仪比较表
/JOE ™,NED/TA
MRA™ /CY3,和 ROX™ CY5
FAM™ /SYBR® Green, VIC ®/JOE™, and ROX™
没有明确注 明可用染 料, SybrGreen I 可用
SYBR® Green, FAM, VIC, TET, HEX, ROX, JOE, TAMRA
470nm 450-730 nm 450-730 nm
470nm
365nm/470 nm/530nm/ 585nm/625 nm/680nm/
460nm
470nm
Stratagene扩大了光谱的检测范围,从350-
430-630nm
750nm。目前市场上所有的荧光探针都适用。 优化的4通道能减少各通道光谱之间的相互干
Roche LC480
简评
主体评价
1.开放的系
1.开放的系
统,宽广的 波长范围,
统,宽广的 能采用所有
波长范围, 的定量探针
能采用所有 可用的探针 染料 . 2.孔间 温差小,实 验重复性好 。 3. 采用 PMT检测, 减少激发光 、检测光交 叉干扰,提 高灵敏度
4.软件功能 强大,但非 常简单易用 5,机器内置 芯片能保存 数据,电脑 死机等情况 不会丢失数 据。 6,完全 的荧光定量 PCR培训项 目。7,个人 化的荧光定
Green
I,TET,HEX VIC™
/JOE,/TA MRA™
/CY3,Texa s Red和 ROX™ CY5
FAM/SYB,L C610.LC71 0(2.0增加
HEX ,JOE,640,67
0)
500/ SYBR Green I/
FAM/ HEC(VIC)/ LightCycle r®Red 610/ LightCycle r®Red 640/