病理切片染色
病理切片的特殊染色方法
1.Van Gieson苦味酸和酸性品红法【染色方法】（1）中性甲醛固定组织，石蜡切片；（2）组织切片脱蜡至水；（3）用Van Gieson液染1～5分钟；（4）倾去染液，直接用95％乙醇分化和脱水；（5）无水乙醇脱水，二甲苯透明，中性树胶封固。
【结果】胶原纤维呈红色，肌纤维、胞质及红细胞呈黄色。
2.Masson氏结缔组织三合染色法【染色方法】（1）石蜡切片厚6μm，脱蜡至水；（2）0.2％冰醋酸水溶液浸泡片刻；（3）Masson氏染色液中5分钟或更长时间；（4）0.2％冰醋酸水溶液浸泡片刻；（5）5％磷钨酸水溶液2～3分钟，再入0.2％冰醋酸水溶液浸洗（6）投入淡绿、冰醋酸水溶液浸染5分钟或更长时间；（7）再入0.2％冰醋酸水溶液浸洗片刻；（8）脱水、透明和封固。
【结果】胞浆和神经胶质纤维染红色，胶原纤维染绿色。
【染色方法】（1）石蜡切片、脱蜡至水；（2）0.25％高锰酸钾液3分钟；（3）蒸馏水洗2次；（4）1％草酸漂白即可；（5）蒸馏水洗2次；（6）2.5％铁明矾水溶液媒染5～10分钟，蒸馏水洗多次；（7）二氨氢氧化银浸染1分钟，蒸馏水洗3次；（8）10％甲醛液还原2分钟，蒸馏水洗3次；（9）0.2％氯化金液调色1～2分钟，蒸馏水洗3次；（10）5％硫代硫酸钠固定5分钟；（11）蒸馏水洗，需要时复染；（12）水洗、脱水、透明和封固。
【结果】网状维呈黑色，其他组织呈复染的颜色。
显示弹性、胶原纤维的双重组合染色法【染色方法】（1）中性甲醛液固定组织，石蜡切片，常规脱蜡至水；（2）切片入70％乙醇中洗2分钟；（3）将切片浸入盛有维多利亚蓝液中染0.5～2小时；（4）直接入95％乙醇中分色数秒钟；（5）浸入蒸馏水洗2分钟；（6）用丽春红S液滴染切片5分钟；（7）直接用无水乙醇冲洗多余染色液2次；（8）将切片在空气中或冷风干燥；（9）二甲苯透明，中性树胶封固。
【结果】弹性纤维呈蓝绿色，胶原纤维呈红色，背景呈淡黄色。
HE染色原理
HE染色原理HE染色原理是一种常用的组织切片染色技术，用于观察组织结构和病理变化。
HE染色技术结合了不同染色剂的特性，能够清晰地显示出组织中的细胞核、胞浆和胶原纤维等结构，为病理诊断提供了重要依据。
HE染色原理的基本步骤包括组织切片脱脂、脱水、浸入熔蜡、切片、脱蜡、脱水、染色和封片。
在染色过程中，组织切片首先被浸泡在嗜酸性染色剂中，如酸性染料Hematoxylin，其主要作用是染色细胞核和胞质。
Hematoxylin能与细胞核中的DNA结合形成复合物，使细胞核呈蓝色或紫色。
接着，组织切片在嗜碱性染色剂中浸泡，如酸性染料Eosin，其主要作用是染色胞质和胶原纤维。
Eosin具有亲和性，能与细胞胞浆中的蛋白质结合，使细胞胞浆呈粉红色或红色。
通过HE染色，可以清晰地区分细胞核、胞浆和胶原纤维，为病变的诊断提供了有力支持。
在病理诊断中，HE染色被广泛应用于肿瘤、炎症和组织结构异常等疾病的鉴别诊断。
不同的组织结构在HE染色下呈现出不同的颜色和形态特征，通过观察组织切片的染色情况，病理医师可以判断组织是否存在异常变化，进而制定合理的治疗方案。
HE染色技术的准确性和可靠性为临床诊断提供了重要的参考依据。
除了在病理诊断中的应用，HE染色技术还被广泛用于科研领域。
科研人员可以通过HE染色观察细胞结构和组织形态的变化，研究细胞生物学、病理生理学等领域的问题。
HE染色技术的简便易行性和可靠性使其成为科研工作中不可或缺的工具。
总的来说，HE染色原理是一种简单而有效的组织染色技术，通过染色显示细胞核、胞浆和胶原纤维等结构，为病理诊断和科研研究提供了重要帮助。
HE染色技术的应用范围广泛，对于促进医学和生命科学的发展起到了重要作用。
希望通过对HE染色原理的了解，可以更好地理解组织结构和病理变化，为人类健康和科学研究做出贡献。
医院病理科病理切片操作规范
医院病理科病理切片操作规范病理切片是病理科诊断疾病的重要步骤之一，因此，对于病理切片操作应该遵循以下规范：2.标本固定：对于切片需要的组织标本，需要及时进行固定以防止组织脱落和变形。
通常使用10%的中性缓冲福尔马林进行固定，固定时间应根据样本大小和类型进行调整，以确保组织固定充分。
3.标本处理：接受标本后，需要进行适当的标本处理。
对于组织标本，应进行组织去水、蜡浸渍等处理，确保标本组织的切片质量。
对于细胞标本，应进行细胞离解和离心等处理。
4.病理切片制作：对于组织标本，制作病理切片通常采用甩片法或旋片法。
在制作切片之前，需要使用切片机对刀片进行清洗和消毒，并根据需要调整切片机的切片厚度。
确保制作的病理切片的厚度均匀一致。
5.切片染色：病理切片制作完成后，需要进行染色。
常用的染色方法包括苏木精-伊红染色、血液学染色、免疫组化染色等。
染色时，需要严格按照染色试剂的使用说明进行操作，确保染色的质量和结果的准确性。
6.切片质量控制：在病理切片操作过程中，需要进行质量控制以确保切片的质量。
包括检查切片的厚度、颜色、染色效果等。
对于染色不好或有问题的切片，需要重新制作。
7.切片保存和归档：制作完的病理切片需要进行保存和归档。
切片应放置在干燥、阴凉而通风良好的地方，避免切片暴露在阳光下，防止切片变形和褪色。
8.切片质量评估：对于制作的病理切片进行质量评估，包括切片的清晰度、染色的均匀性、细胞结构的完整性等。
评估结果可以作为诊断和治疗的参考。
总结：病理切片操作规范是病理科工作中非常重要的一环，合理规范的操作可以保证病理切片的质量，提高疾病的诊断准确性。
因此，医院病理科应该建立标本接受和登记制度，对标本进行适当处理，制作和染色病理切片，对切片进行评估和保存。
同时，医院病理科还应定期进行切片质量控制，提高切片的质量。
病理制片技1
病理制片技术——常用特殊染色一、六胺银染色1．第一步准备工作：配制六胺银染液，将10％硝酸银2．5ml倒入干净的染色缸内，加入2％硼砂5ml，液体呈乳白色，再加入3％乌洛托品40ml，染液逐渐呈透明状。
2．第二步染色过程：事先把温箱调至60℃备用，切片经脱蜡至水，用1％过碘酸氧化10 min，水洗，然后切片放人六胺银染液放置60℃温箱1 h，染真菌时间要相对短一些，一般情况下肉眼看到染液变色，切片呈棕色时从温箱取出染色缸，倒掉染液，自来水冲洗1min，用0．25％氯化金调色1 min，水洗后，用3％硫代硫酸钠染5min,水洗，用苏木精染液浅染，水洗、分化、冲水返蓝，伊红染10 s，最后经脱水、透明、封固。
3．图示结果：基底膜与毛细血管间质性物质、真菌呈棕黑色，核呈蓝色。
4．注葸事项(1)掌握染色温度和时间，如60℃染1 h，80℃染30～40 min。
(2)真菌类染色时间相对要短，染色时间过长，切片染色过深，可用分色剂处理。
二、黏液卡红染色1．第一步准备工作：配制黏卡染液，将称好的胭脂1 g、氢氧化铝1 g倒入瓶内，加入5 0％L醇100 rnl混合摇匀，再加入氯化铝0．5g，水浴加温逐渐煮沸并搅动液体，使其充分溶解(注意染液容易外溅)，数分钟后，染液由红色变成透明深紫红色，冷却后将液体倒入量筒，再加入50％乙醇至原量，过滤，放人冰箱备用。
2．第二步染色方法：染液使用时原液与蒸馏水比例为1：4稀释.切片厚5 um，脱蜡至水，经苏木精染色2 min、水洗、分化、返蓝后进人黏卡液染色2 h以上，染液可以重复使用多次，但要适当延长染色时间．切片水洗后，脱水、透明、封固。
3．图示结果：黏液为红色，胞核为蓝色．4．注意事项(1)染液使用时比例为1份黏卡原液，4份蒸馏水。
(2)用酶消化对照染色特异性很大，消化时间为20 min。
(3)配制黏卡染液时要防止液体溅出。
三、石碳酸品红染色1．第一步准备工作(1)配制盐基性品红饱和液：盐基性品红溶于乙醇内。
病理切片染色方法
病理切片染色方法
病理切片染色是一种常用的病理学检查方法，可以帮助病理医师观察和诊断疾病。
常用的病理切片染色方法有以下几种：
1. 高尔基染色法：可以染色细胞核为蓝色，细胞质为粉红色，便于观察细胞形态和排列情况。
2. 血液涂片染色：常用的涂片染色方法有吉姆萨染色法、健康那染色法等，可以帮助观察血细胞的类型和数量。
3. 组织切片染色：常用的组织切片染色方法有血红素-伊宁染色法、苏木精-伊宁染色法等，可以染色细胞核和细胞质，以及观察组织结构和病理变化。
4. 免疫组化染色：通过特定抗体与组织中的特定抗原结合，来观察和诊断疾病。
常用的免疫组化染色方法有免疫组织化学染色法、免疫荧光染色法等。
5. 特殊染色：用于染色特定的结构或化合物，例如透明质酸染色、银染色等。
以上是一些常见的病理切片染色方法，根据具体需要和疾病类型，病理医师会选择不同的染色方法来进行诊断和研究。
病理制片技术――常用特殊染色
病理制片技术――常用特殊染色1．第一步准备工作：配制六胺银染液，将10％硝酸银2．5ml倒入干净的染色缸内，加入2％硼砂5ml，液体呈乳白色，再加入3％乌洛托品40ml，染液逐渐呈透明状。
2．第二步染色过程：事先把温箱调至60℃备用，切片经脱蜡至水，用1％过碘酸氧化10 min，水洗，然后切片放人六胺银染液放置60℃温箱1 h，染真菌时间要相对短一些，一般情况下肉眼看到染液变色，切片呈棕色时从温箱取出染色缸，倒掉染液，自来水冲洗1min，用0．25％氯化金调色1 min，水洗后，用3％硫代硫酸钠染5 min,水洗，用苏木精染液浅染，水洗、分化、冲水返蓝，伊红染10 s，最后经脱水、透明、封固。
3．图示结果：基底膜与毛细血管间质性物质、真菌呈棕黑色，核呈蓝色。
4．注葸事项(1)掌握染色温度和时间，如60℃染1 h，80℃染30～40 min。
(2)真菌类染色时间相对要短，染色时间过长，切片染色过深，可用分色剂处理。
二、黏液卡红染色1．第一步准备工作：配制黏卡染液，将称好的胭脂1 g、氢氧化铝1 g倒入瓶内，加入50％L醇100 rnl混合摇匀，再加入氯化铝0．5g，水浴加温逐渐煮沸并搅动液体，使其充分溶解(注意染液容易外溅)，数分钟后，染液由红色变成透明深紫红色，冷却后将液体倒入量筒，再加入50％乙醇至原量，过滤，放人冰箱备用。
2．第二步染色方法：染液使用时原液与蒸馏水比例为1：4稀释.切片厚5 um，脱蜡至水，经苏木精染色2 min、水洗、分化、返蓝后进人黏卡液染色2 h以上，染液可以重复使用多次，但要适当延长染色时间．切片水洗后，脱水、透明、封固。
3．图示结果：黏液为红色，胞核为蓝色．4．注意事项(1)染液使用时比例为1份黏卡原液，4份蒸馏水。
(2)用酶消化对照染色特异性很大，消化时间为20 min。
(3)配制黏卡染液时要防止液体溅出。
三、石碳酸品红染色1．第一步准备工作(1)配制盐基性品红饱和液：盐基性品红溶于乙醇内。
病理切片的流程
病理切片的流程病理切片是一种常用的医学检查方法，它通过将组织样本切割成极薄的切片，然后染色和显微镜观察，以帮助医生诊断疾病。
下面将详细描述病理切片的流程步骤和流程。
1. 样本获取首先需要从患者身上获取组织样本。
常见的样本来源包括手术切除物、活检、穿刺等。
手术切除物通常是大块的组织，活检则是小块或细针抽吸得到的组织。
2. 样本固定获取到样本后，需要立即进行固定处理，以防止组织腐败和变形。
最常用的固定剂是10%中性缓冲福尔马林（neutral buffered formalin），它可以使组织保持形态和结构不变，并能够杀灭病原体。
将样本完全浸泡在足够量的福尔马林溶液中，并确保其充分渗透进入组织内部。
通常需要固定24小时以上，以确保固定效果达到最佳。
3. 组织处理在固定完成后，需要对样本进行一系列的组织处理步骤，以使其适合切片。
3.1 去水脱脂福尔马林会使组织中的水分增加，因此需要将其去除。
首先将样本从福尔马林中取出，然后放入含有逐渐浓度乙醇的溶液中进行脱水。
常用的脱水级别是70%、80%、95%和100%乙醇。
每个浓度的乙醇溶液中浸泡时间一般为30分钟至1小时。
脱水过程中要轻轻摇晃容器，以确保组织均匀浸泡。
3.2 渗透剂处理在去水脱脂之后，需要将样本置于渗透剂中。
渗透剂通常是芳香烃类物质（如苯），可以与石蜡相互溶解。
渗透剂的作用是将石蜡渗入组织内部，以增加刚性和硬度。
将样本转移到含有石蜡和渗透剂混合物的容器中，并在恒温槽中加热慢慢进行渗透。
通常需要至少3个小时，以确保组织充分渗透。
3.3 石蜡浸渍渗透剂处理完成后，需要将样本浸泡在纯石蜡中，使其充分浸润。
将样本转移到含有熔融石蜡的容器中，并在恒温槽中加热慢慢进行浸渍。
通常需要至少2个小时，以确保组织完全浸润。
此外，还可以使用自动化的石蜡浸渍机来加快浸润过程。
4. 组织包埋组织处理完成后，需要将其包埋到切片所需的形状和大小。
包埋是将组织样本固定在切片机上的过程。
主动脉病理切片 染色
主动脉病理切片染色
主动脉病理切片染色是临床病理学中常用的一种技术手段，通
过对主动脉组织进行染色，可以观察其微观结构，从而帮助医生进
行疾病诊断和治疗方案制定。
常见的主动脉病理切片染色方法包括
H&E染色、弹性纤维染色和Masson氏染色。
H&E染色（hematoxylin and eosin staining）是最常用的染
色方法之一，它能够染色细胞核和细胞质，使细胞核呈蓝色，细胞
质呈粉红色，从而使细胞和组织结构清晰可见。
这种染色方法可以
帮助观察主动脉内膜、中膜和外膜的病理变化，如动脉粥样硬化斑块、动脉瘤等。
弹性纤维染色是一种专门用于观察弹性纤维的染色方法，它能
够将弹性纤维染成黑色或蓝黑色，而胶原纤维和细胞核则呈粉红色。
主动脉病理切片经过弹性纤维染色后，可以清晰地显示主动脉弹性
纤维的分布和形态，帮助诊断主动脉夹层等疾病。
Masson氏染色是一种用于观察胶原纤维的染色方法，它能够将
胶原纤维染成蓝色或绿色，而细胞核呈黑色或棕色，从而清晰地显
示出胶原纤维的分布和形态。
这对于观察主动脉中膜的纤维化情况
以及炎症反应具有重要意义。
总的来说，主动脉病理切片染色是临床病理诊断中不可或缺的一部分，不同的染色方法可以从不同的角度揭示主动脉组织的病理变化，为临床诊断和治疗提供重要依据。
病理检验流程常识
病理检验流程常识
病理检验是通过对患者组织或细胞进行取样、固定、切片、染色、观察和诊断的一种检查方法。
病理检验是诊断和研究疾病的重要手段之一，主要用于判断疾病的性质、病理类型和分级，为临床医生提供治疗方案和预后判断的依据。
病理检验的常见流程如下：
1. 标本采集：根据临床需要，采集患者的组织标本或细胞标本，如活检组织、手术切除标本、刷拭物等。
2. 采样固定：将采集到的标本放入10%的甲醛溶液中进行固定，以保持组织形态的不变性，防止腐败和衰变。
3. 组织处理：将固定好的组织标本进行脱水、清洁和浸渍等处理，使其逐渐转化为蜡块。
4. 切片制备：将处理好的组织标本切割成薄片，通常为厚度为3-4微米的切片。
5. 制片染色：将切片染色，常用的染色方法包括血液病学染色、组织学染色和免疫组织化学染色等。
6. 镜检观察：通过显微镜观察和分析染色后的切片，评估组织细胞的形态和结构特点，判断疾病的类型、分级和程度。
7. 报告诊断：根据镜检结果，编写病理报告，提供详细的病理
诊断，供临床医生参考。
除了上述基本流程外，病理检验还可能涉及特殊检查方法，如免疫组织化学、原位杂交、核酸扩增检测等。
此外，在某些情况下，还可能会进行分子病理学检测、电子显微镜观察等高级技术的应用。
需要注意的是，病理检验是一项复杂和细致的工作，需要高度专业的知识和技能，通常由病理医师和技术人员进行操作和解读结果。
在临床医学中，病理检验结果对于疾病的诊断和治疗决策具有重要的意义。
病理切片的流程范文
病理切片的流程范文病理切片是一种用于疾病诊断的重要方法，它通过将组织标本固定、处理、切片、染色和观察，从而得到组织结构的详细信息。
下面是病理切片的主要流程。
1.标本收集与固定：医生在病患进行手术或活检时，会取得病变组织标本。
标本收集应当严格遵循无菌操作原则，以保持标本的无污染状态。
收集到的组织标本需要立即放入含有适当的固定试剂的容器中，以防止组织腐败和细胞变性。
2.溶解和去水：收集的组织标本被放入一系列浓度不同的酒精中，以逐渐去除其中的水分。
此过程称为溶解和去水。
这一步通常需要一连串的酒精浓度渐变溶解过程，并配合组织处理机器进行多次处理。
3.渗透与包埋：当细胞内的水分被完全去除后，组织标本需要渗透和浸润在石蜡中，以增强其硬度和切片的稳定性。
标本首先被浸泡在组织处理机或真空滤波机中的低温石蜡溶液中，确保组织与石蜡完全接触。
然后，标本被浸入常温石蜡。
待组织，石蜡和溶剂之间的渗透平衡达到后，将标本置于标本夹中，加入液态石蜡，之后快速冷却或冷冻标本以完成固定。
4.切片：固定的组织标本被放入切片机中，使用特制的切片刀或刀片进行切割。
基本原理是标本切割面与刀片之间夹有细的临界介质，使切割更加精确。
切割的过程中，为了获取准备的切片，可以使用不同的切割模式、刀速和刀的旋转速度。
5.切片染色：切片得到后，需要进行染色以便观察细胞和组织结构。
常用的染色方法有血涂、朗格汉斯染色、文澜索尔法、肉眼观察染色法等。
这些染色方法可以突出显示细胞核、胞浆、组织结构和疾病所特有的变化。
6.显微镜观察与诊断：切片样本染色完成后，被放置在显微镜下进行观察和分析。
经验丰富的病理医生会通过观察细胞和组织结构，准确地诊断疾病类型和病情。
需要注意的是，以上流程是一个简单的概述，实际操作中可能会根据具体情况进行调整。
另外，不同的切片技术和方法也可能会在实际操作中进行选择和应用。
总之，病理切片作为一项重要的诊断方法，通过严格的操作和观察，能够为医生提供准确的组织结构和病变情况信息，为疾病诊断和治疗提供重要依据。
HE染色和巴氏染色法
HE染色和巴氏染色法普通染色又称常规染色或HE（Haematoxylin and eosin）染色。
它是病理技术中最常用的一种方法，通过它可以做出病理诊断和发现寻求别的辅助方法，以达到准确，完整的病理诊断。
一、染色目的病理学的所有切片，都必须通过一种以上的染料，通过各种不同的方法，将切片中各种不同的物质，在不同染液的作用下，将其显示出来，使之在光学显微镜下，能够完全的观看各种结构。
例如，HE染色，好质量的切片可以清晰地显示出许多不同的结构，细胞核着蓝黑色，细胞浆着粉红色，软骨着蓝色等。
清晰的结构为诊断提供可靠的依据，因此，染色技术也是病理技术中的重要组成部分，必须不断地总结，方能提高。
如果染色不好，切片染色一团糟，红蓝不分，结构不清，层次不明，影响了镜下的观察，直接影响了临床诊断，染色结果的好坏直接关系到诊断的准确性。
二、染色的作用1．化学作用：所有的染色液中，可把它们分为两种类型，一种为酸性，另一种为碱性。
酸性染料中有染色作用的为阴离子；碱性染料中有染色作用的为阳离子，每个细胞也存在着两种物质，细胞核含的是酸性物质，细胞浆含的是碱性物质。
在染色时，细胞核中的酸性物质与苏木素染液中的阳离子发生作用，细胞浆中的碱性物质与伊红染液中的阴离子发生作用，由于反应的部位不同，结果着色有异。
2．物理作用：在染色过程中，染液中的色素微粒子浸入到被染组织的粒子间隙内，此时，因受分子的引力作用，色素微粒子被吸附而着色。
由于各种组织有不同的吸附能力和不同的吸附程度，因此就可显出来不同的颜色来。
一般来说，染色的学说还有许多，但说服力强的仅有上述两种。
但不管怎么样解释，实际上完成的每一种染色，都与上述两种学说分不开，它们的作用是相辅相成，同时存在的。
三、染色方法及步骤1．人工苏木素，伊红染色法（HE法）(1)切片浸入二甲苯中5-10min；(2)切片浸入二甲苯中5-10min；(3)100%酒精1min。
(4)100%酒精1min。
病理制片和染色技术
4）固定剂兼有硬化作用，使组织硬化 增加组织硬义，便于制片。
5）防止细胞过度收缩或膨胀而失去其 原有形态结构。
6）经过固定的组织，能对染料产生不 同的亲和力而着色清晰，便于辩认。
由于固定的目的是在于尽量使组织和 细胞保持与生活时相仿的成分和形态。因 此，固定的组织愈新鲜愈好，固定组织时， 应使用足量的固定液，其固定液的量一般
5）尽可能避免使组织膨胀或收缩。 6）能使细胞内的成分（蛋白质）凝固或沉 淀下来。 7）增加细胞内含物的折光程度，易于鉴别。 增加媒染作用和染色能力。 8）使组织变硬，适于制片，但又不使材料 太坚硬而松脆。 9）使组织充分固定，便于保存。
第二节 介绍几种常见固定液
固定剂有简单固定剂（液）和混合固定剂两 类。作为较好的固定液，首先有强渗透力，能迅 速地渗入组织内部；其次不会使组织过渡收缩或 膨胀，并能使组织内易观察的成分得以凝固为不 溶性物质；最后能使组织达到一定硬度，获得较 佳的折光率和对某些染料具有较强的亲和力。
2．标本切开或取厚块→组织固定（冰 冻切片法）→冰冻切片→粘片→乙醇固
定及水洗→常规染色→脱水→透明→ 树胶封片。
第二章 固定、固定液和取材
第一节 组织固定方法
在制作组织切片的过程中，首 先将组织充分固定后才能进行制片， 尤其对石蜡切片，这是不可少的重 要步骤。
1、固定的意义
就是使要观察的组织构造尽量 接近于它生前的正常状态。
此固定液是应用最广的一种，它可以保 护脂类和细胞核。在作酸性染色时，入 Ｖ-Ｇ，或三重染色之前，还可以再使用 第2次固定。
第三章
洗涤、脱水、透明、浸蜡 和包埋、切片
第一节 组织洗涤
一、洗涤的目的
6、丙酮
丙酮又名醋酮或本酮，极易挥发、 易燃的无色液体，能与水、醇、氯仿、醚 及多种溶液混合。
组织病理切片以及HE染色
组织病理切片以及 HE 染色组织病理切片以及HE 染色（一）实验原理:苏木素-伊红染色（hematoxylin-eosin staining,HE 染色）能较好地显示组织结构与细胞形态,可用于观察、描述正常与病变组织的形态学,而且HE 切片可较长时间保存,被称为常规染色方法。
（二）实验步骤:一、制作切片1、取材、固定:取小鼠肾脏组织适当大小,并且放入盛有固定液的小瓶中保存。
2、组织的脱水、透明、浸蜡与包埋组织固定后还需经过脱水、透明、浸蜡等过程才能制成蜡块,进行石蜡切片。
脱水就是指用某些溶媒置换组织内水分的过程。
组织脱水后,必须经过一种既能与酒精相混合又能溶解石蜡的溶剂,通过这种溶剂的媒介作用,使石蜡浸入组织块。
在此过程中,因组织块中的水分被溶剂所取代,组织块变得透亮,因此称之为透明。
组织染色后也要进行透明。
最常用的透明剂为二甲苯,处理时间为30min 左右。
组织经透明后在溶化的石蜡内浸渍的过程称浸蜡。
用其她浸透剂（如火棉胶、碳蜡与明胶等）渗入组织内部的过程称为浸透或透入。
为使石蜡充分渗入组织块中,常需经过 3 小时的浸渍,期间需更换 3 次石蜡。
一般用于浸蜡的石蜡熔点为组织病理切片以及 HE 染色52-56 C。
组织块经过浸蜡或浸透,用包埋剂（石蜡、火棉胶、碳蜡与树脂等）包起的过程称包埋,包埋后便制成含组织的块。
这种包埋块可使组织达到一定的硬度与韧度,有利于切成薄片。
石蜡包埋就是病理日常工作中最常用的包埋方法。
用于包埋的石蜡熔点一般为60 C左右。
但在有些情况下，如某些酶染色时,则需采用低温石蜡包埋,以保存组织内酶的活性。
3、切片、制片石蜡切片常用的切片机有轮转式切片机与平推式切片机,以前者为多用。
切片厚度一般为3-5 ym。
切片时先将组织片平摊于一块玻璃上,迅速滴加30％的酒精水溶液使组织片完全展开，再移入40 C恒温热水器中。
也可直接将组织切片移入40 C的恒温热水器中，待组织片完全展开后将其贴附于载玻片上，经56-60 C烤片30-60min后即可进行染色。
病理切片染色方法
病理切片染色方法病理切片染色是病理学中常用的一种技术，通过对组织切片进行染色，可以观察和分析组织结构、细胞形态和病理变化，从而对疾病进行诊断和鉴定。
本文将介绍常见的病理切片染色方法，包括常规染色、特殊染色和免疫组织化学染色。
一、常规染色常规染色是最常用的病理切片染色方法之一，主要包括血液染色和组织染色。
1. 血液染色血液染色常用的染色剂有偏碱性染料和酸性染料。
偏碱性染料如伊红、结晶紫和新蓝等，可用于染色细胞核和嗜酸性颗粒；酸性染料如朗格汉斯染剂、伊红B和伊红O等，可用于染色细胞质和嗜碱性颗粒。
2. 组织染色组织染色主要是为了观察细胞核、细胞质和细胞间质的结构，常用的染色剂有苏木精-伊红、伊红-酸性品红和伊红-伊红B等。
二、特殊染色特殊染色是指用于特定目的的染色方法，常用于观察特定组织结构、细胞器和病理变化。
1. 酶组织化学染色酶组织化学染色是利用酶的催化作用来观察组织和细胞中的特定物质。
常见的酶包括过氧化物酶、碱性磷酸酶和酸性磷酸酶等。
2. 共聚焦显微镜染色共聚焦显微镜染色是一种高分辨率的显微镜技术，可以观察细胞内的亚细胞结构和分子分布。
常用的染色剂有荧光染料如DAPI、荧光素和罗丹明B等。
三、免疫组织化学染色免疫组织化学染色是利用抗体与抗原的特异性反应来观察组织和细胞中的蛋白质分布和表达情况。
免疫组织化学染色常用的标记物有酶标记物和荧光标记物，常用的抗体有单克隆抗体和多克隆抗体。
四、染色结果的评价染色结果的评价是病理切片染色中的重要步骤，可以通过显微镜观察染色结果的颜色、强度和分布情况，进而判断组织和细胞的状态和病变程度。
总结：病理切片染色方法是病理学中常用的一种技术，通过染色可以观察和分析组织结构、细胞形态和病理变化，为疾病的诊断和鉴定提供重要依据。
常规染色、特殊染色和免疫组织化学染色是常见的病理切片染色方法，每种方法都有其特定的应用范围和适用对象。
在进行染色时，我们需要注意染色剂的选择、染色时间的控制和染色结果的评价，以保证染色结果的准确性和可靠性。
病理切片染色方法
病理切片染色方法病理切片染色是病理学中一项重要的技术，可以通过染色的方式使组织细胞的结构和特征更加清晰可见。
病理切片染色方法主要包括常规染色、特殊染色和免疫组织化学染色。
常规染色是最常用的病理切片染色方法，它通过使用染料染色剂，如血液学染色剂和组织学染色剂，来突出显示组织细胞的形态和结构。
其中，血液学染色剂如伊红染色剂和朗格汉斯染色剂可用于染色红细胞和白细胞等血液细胞，组织学染色剂如伊红-伊红染色剂和伊红-嘧啶蓝染色剂可用于染色胶原纤维和细胞核等组织结构。
特殊染色是一种针对特定组织或结构的染色方法，通过使用特殊染料或特殊处理方法，可以突出显示某些特定的组织成分或病理变化。
常见的特殊染色方法包括银染色、PAS染色和酸性染色等。
银染色可用于染色神经纤维和胶原纤维等，PAS染色可用于染色糖原和黏液等，酸性染色可用于染色酸性粒细胞和酸性黏液等。
免疫组织化学染色是一种利用抗体与抗原特异性结合的原理，通过染色方法来检测和定位组织中的特定蛋白质或抗原。
免疫组织化学染色可以用于诊断和鉴定肿瘤、炎症和感染等疾病。
常见的免疫组织化学染色方法包括免疫组化方法、原位杂交染色和免疫荧光染色等。
免疫组化方法通过使用抗体与特定抗原结合来染色组织切片，可以用于检测和定位肿瘤标志物和免疫细胞等。
原位杂交染色可以用于检测和定位特定的核酸序列，常用于病毒感染和基因突变的分析。
免疫荧光染色通过使用荧光标记的抗体来染色组织切片，可以用于检测和定位特定蛋白质和抗原，常用于免疫组织化学和细胞生物学研究。
除了上述常规染色、特殊染色和免疫组织化学染色方法外，还有一些其他的病理切片染色方法，如核型分析染色、DNA染色和RNA染色等。
核型分析染色是一种用于检测和分析染色体结构和数量的方法，常用于遗传学研究和肿瘤诊断。
DNA染色和RNA染色是一种用于检测和定位DNA和RNA分子的方法，常用于基因表达和转录调控的研究。
病理切片染色是病理学中不可或缺的技术之一，通过染色方法可以使组织细胞的结构和特征更加清晰可见。
优化病理切片与染色流程
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血液科病理组织切片与染色技术
血液科病理组织切片与染色技术血液科病理组织切片与染色技术是现代医学领域中非常重要的研究和诊断手段。
通过对血液科病理组织进行切片和染色，可以帮助医生准确诊断疾病，了解病理变化，制定科学的治疗方案。
在本文中，我们将详细介绍血液科病理组织切片与染色技术的原理、方法和应用。
一、病理组织切片技术的原理与方法1. 原理病理组织切片技术是将组织标本切割成非常薄的切片，使其可以在显微镜下观察。
病理组织切片是病理诊断的重要步骤之一，通过对组织细胞的形态、结构和功能进行观察和分析，可以发现异常变化并鉴定疾病。
2. 方法a. 标本处理：将取得的血液科病理组织进行固定、包埋和切片的预处理。
首先，将组织标本固定在适当的固定液中，以保持其形态和结构。
然后，将固定的组织标本进行包埋，使其可以被切割成所需的薄片。
最后，用切片机将包埋的组织标本切割成薄片。
b. 切片染色：将切下的组织标本放在载玻片上，并进行染色处理。
染色是为了增强组织细胞的对比度，使其更易于观察和分析。
染色方法有很多种，常用的包括血液科染色、组织染色以及免疫组化染色等。
c. 封片处理：将染色后的组织切片放在载玻片上，并加入封片剂进行封片处理。
封片处理是为了保护切片和染色剂，使其可以长期保存，并方便后续的观察和分析。
二、染色技术的原理与方法1. 原理染色技术是为了使细胞或组织中的某些结构、成分或代谢产物显现出特殊颜色，以便于观察、分析和诊断。
不同的染色方法可以突出或改变细胞或组织中特定成分的性质和形态，从而帮助医生进行病理分析和诊断。
2. 方法a. 血液科染色：血液科染色是将血液样本涂在玻片上，然后通过染色剂的作用，使不同的细胞成分显现出不同的颜色。
b. 组织染色：组织染色是将切片样本经过一系列染色处理，使不同的组织结构和成分显现出不同的颜色。
常见的组织染色方法有苏木精-伊红染色和光学显微镜下依据染色结果进行分析。
c. 免疫组化染色：免疫组化染色是一种用于检测特定蛋白质和抗原的方法，通过使用特异性抗体与目标物质结合，然后用染色剂标记抗体，将目标物质显现出来。
滴染和缸染应用病理
滴染和缸染在病理学中的实际应用情况1. 应用背景滴染和缸染是病理学中常见的组织切片染色技术，主要用于观察和诊断疾病组织的形态结构、细胞类型和病变程度等。
这两种技术可以帮助医生确定诊断，指导治疗，并对研究疾病的发生机制提供重要线索。
2. 应用过程2.1 滴染过程滴染是将组织切片浸泡在染色剂溶液中，使其吸收并着色。
具体过程如下：步骤1：将取自患者体内的组织标本进行固定处理，以保持其形态结构和细胞完整性。
步骤2：将固定后的组织标本进行脱水处理，即通过一系列浓度递增的乙醇溶液使其脱去水分。
步骤3：将脱水后的组织标本进行透明化处理，即使用透明剂（如苯胶）使其透明。
步骤4：将透明化后的组织标本放入染色剂溶液中，使其吸收并着色。
步骤5：将着色后的组织标本进行脱色处理，即通过一系列递减浓度的乙醇溶液使其脱去多余染料。
步骤6：将脱色后的组织标本进行透明化处理，以保持其形态结构和细胞完整性。
步骤7：最后，将透明化后的组织标本封片，并使用显微镜观察和分析。
2.2 缸染过程缸染是将组织切片浸泡在染色剂溶液中，然后放入石油醚和凝胶等介质中，通过离心作用使染料沉积在特定区域。
具体过程如下：步骤1：将取自患者体内的组织标本进行固定处理，以保持其形态结构和细胞完整性。
步骤2：将固定后的组织标本进行脱水处理，即通过一系列浓度递增的乙醇溶液使其脱去水分。
步骤3：将脱水后的组织标本置于缸染石油醚溶液中，使其渗透。
步骤4：将石油醚浸泡的组织标本放入染色剂溶液中，使其吸收并着色。
步骤5：将着色后的组织标本放入凝胶中，并进行离心处理，使染料沉积在特定区域。
步骤6：将凝胶和组织标本一起切片，并进行封片处理。
步骤7：最后，使用显微镜观察和分析染色后的组织切片。
3. 应用效果滴染和缸染技术在病理学中具有广泛的应用，能够提供以下方面的信息：3.1 组织结构滴染和缸染技术可以帮助医生观察和分析组织切片的形态结构。
通过对不同染色剂的选择和处理方法的调整，可以突出显示不同类型的细胞、间质、基质等。
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3．标本多的单位，可根据标本的性质、大小、分类分批进行脱水，以便按组织的特点安排时间，保证质量，常规标本脱水和透明均应在室温进行。
4．一般以乙醇为组织脱水剂，自低浓度向高浓度渐进并多次更换，组织所含水分才能充分去除，透明、浸蜡才能顺利进行，对保证切片质量甚为重要。
5．组织块在二甲苯中的时间不宜过长，使组织透明即可。若较长时间后透明度仍不好，应检查原因，如因脱水不充分，应重行脱水。
染液着色力显著减退时应更新，染色反应不正常，应检查染液及试剂是否失效或误用。
5．染色过程中，勿使切片干燥，以免影响细胞形态。染色完毕后用显微镜检查染色结果，是否符合要求，并核对标本种类、号码、数量是否无误。
(二)染色步骤
1．二甲苯去蜡(经2次)5～10min。
(三)自动组织处理机的使用和维护
1．自动组织处理机产品有多种，其结构和性能各异，使用前应熟悉机器说明书中的使用说明及注意事项，按照说明书中的使用方法和程序操作。
2．组织处理的程序和时间参见表31-2-2。
表31-2-2 组织处理机处理活检组织的程序和时间(min)
4．标本如为整个器官或其大部，或体积较大，可不固定，但应尽早送病理科处理பைடு நூலகம்外地或远途标本，可参照第三节的方法处理后送检)。
5．各种体液、穿刺液细胞学检查标本，应立即送检。若不能立即送检，应随即离心沉淀，将沉渣做成均匀的涂片2～3张，及时放入乙醚和95％乙醇等量混合液或95％乙醇中固定，然后连同固定液，或在涂片表面涂以甘油后送检。阴道排出物、鼻咽或其他分泌物、穿刺物涂片，应于涂片制成后即放入上述固定液中固定，然后送检。
处 理 程 序 处理时间(min)
80％乙醇
95％乙醇I、Ⅱ、Ⅲ
无水乙醇I、Ⅱ、Ⅲ
二甲苯I、Ⅱ*
蜡I／或硬脂酸-蜡(3：2)
蜡Ⅱ／或硬脂酸-蜡(2：3)
蜡Ⅲ／蜡
60
各90
各60
各60
90／180
90／120
60／60
* 用硬脂酸－蜡时不用二甲苯。
实验五 病理组织切片染色
一、实验目的
任何切片，不经过染色，在显微镜下只能看到细胞和组织的轮廓，远不能满足观察和诊断的目的。染色是将染料配制成溶液，将组织切片浸入染色剂内，经过一定时间，使组织和细胞的成分被染上不同的颜色，产生不同的折射率，便于在光学显微镜下进行观察。因此，染色在组织形态学、病理学诊断、研究工作中，具有非常重要的实用价值。
2．无水乙醇、95％乙醇、80％乙醇、70％乙醇各1～2min，然后蒸馏水洗3min(换数次)。
3．苏木紫液染色约5rain(视染液种类和着色情况增减)。
4．水洗；l％酸性乙醇(盐酸1mI，70％乙醇99m1)，或1％盐酸分化。显微镜下控制。
5．流水浸洗至少15min，至细胞核呈蓝色。也可短时水洗后，浸于40℃温水使核变蓝。显微镜观察，若核染色过深或不足，应再分化或重染。
3．根据实际工作条件，设计脱水机运行程序、时间和温度等，机器调好后，不要随意变动。使用过程中，要经常注意运行情况，温度、时间控制是否准确。
4．机器应放置干燥、通风、平稳处，经常做好保洁，按说明书要求做好必要的维护。出现有故障时应请维修人员修理。
★石蜡切片HE染色法★
(一)染色注意事项
2．在H．E染色过程中，其成败的关键在于分化，如果分化不当致使应该分化脱色的部分末予脱去，或分化不足致染色不均匀，复染对也不能得到对比鲜明的色彩，另外流水冲洗时间的长短对组织返蓝色彩鲜艳与否也有一定的关系。须要提及的是，染色的成败除染色技术以外，组织材料的过分陈旧或长期固定在甲醛中的组织，由于过度酸化都会影响染色；或组织固定不当，固定不足组织发生自溶等均会使染色模糊。
6．伊红液染1～2min后，95％乙醇2次，无水乙醇2次，每次约1～2min。
7．苯酚二甲苯(1：3)5min。
8．二甲苯2次，每次3～5min。
9．用中性树胶或DPX以盖片封片，贴标签。
大概过程是先取材，脱水，浸蜡，包埋，切片，脱蜡，染色，脱水，透明，封片几个过程。取材要根据你的实验目的来决定，脱水浸蜡有专门的仪器，包埋是另外的仪器，然后上切片机切片，如果要按区域切片，建议分成几个蜡块包埋。切片好了要烘片，趁热放进二甲苯、梯度酒精脱蜡直至蒸馏水，然后将脱蜡好了的切片染苏木精，根据苏木精效果，一般染色2-3分钟即可，流水冲洗去除多余苏木精，盐酸酒精酸化15秒，弱碱水蓝化，然后染伊红，再梯度酒精脱水，二甲苯透明，树胶封片。
45～60
60～120
120～240
95％乙醇Ⅱ
45～60
60～120
120～240
无水乙醇I
45～60
60～t20
120～240
无水乙醇Ⅱ
45～60
60～120
120～240
二甲苯I*或
15～30
30
60
硬脂酸-蜡(3：2)
120
脱蜡和脱水的不能公用，需要染色缸23个左右。
染色缸用铜制的比较好。“灌流时组织缩水变形”你是指动物心脏灌注吗？那你注意一下灌洗用的PBS的渗透压和PH值对不对。
实验五 病理组织切片染色
6．经常注意所用试剂质量减退情况，根据需要及时更换新液，更换时乙醇可降级重复使用。试剂应经常过滤，以保持清洁
，避免混杂。
7．常规制片所用石蜡的熔点，以56℃左右为宜。在温热的地区或夏季，应用熔点较高的石蜡，在寒冷地区或冬季，则以熔点较低的石蜡为好。
慎防切片脱落。
3．各种染料试剂一般选用化学纯。各种染料着色效果常因生产厂和批号不同而异，启用任何新品，均应先试染。配成的染液、试液应盛于有色试剂瓶内，瓶签应写明名称、含量、配制年月日，顺序保存于避光橱中，必要者放冰箱内。凡须临用时配制者，配量应适当。
4．染色各步骤所需的时间，常受温度、切片厚度等影响，可根据镜下观察所见酌情予以调整。但对组织化学反应(尤其是酶)，其时间、温度等因素务必恒定，且应做对照片。
二、实验原理
染色是染色剂和组织细胞的结合过程。使用不同的染色方法，其原理有差别。苏木素伊红染色法为病理组织切片最常用的染色方法。由于它对组织细胞的各种成分都可染出，便于对组织成分的全面观察，且以任何固定液固定的材料，各种切片法都可适用。用H．E染色的标本，不易褪色可以长期保存。
在常规的苏木素伊红染色中，苏木素经过氧化变成酸性染料苏木红，而苏木红和铝结合形成一种带正电荷的蓝色色精，带正电荷的蓝色色精和带负电荷的脱氧核糖核酸酸根，通过正、负电荷的极性吸着来完成结合，使细胞核染成蓝紫色。伊红是一种酸性红色胞浆性染料，它们的染色可能是通过渗透作用或弥散作用而完成的，使细胞浆染成红色。
2. 标本容器上，应贴有患者姓名或送检单联号的标签。如同一患者同时取有数种组织，或同一组织由不同部位取出，应分装不同容器，并分别注明。不同患者的标本，不得放在同一容器内。
3．采取标本时，注意勿用有齿镊或钳夹取，勿挤压，以免发生人为的变形，影响诊断。标本送检前勿剖开，应保持原形全部送检。必须剖开时，最好邀请病理医师到场，否则应在病理检查申请单内详细描写标本剖开前后情况。送检的组织不可太小，以免影响诊断。
三、主要仪器及试材
HE染色全套试剂，染色缸（卧式），摊片盘，搪瓷缸，盖玻片，中性树胶，牙签，显微镜。
四、实验方法与步骤
常规石蜡切片H．E染色程序
(一)脱蜡至水
1．二甲苯Ⅰ 5-15分钟
2．二甲苯Ⅱ 5-15分钟
3．无水乙醇 3分钟
180
240
二甲苯Ⅱ或
15～30
30
60
硬脂酸-蜡(2：3)
60
90
120
蜡I**
60
60
60～120
蜡Ⅱ
60
120
120～240
* 使用硬脂酸—蜡时，不需二甲苯透明。** 有条件单位可负压浸蜡，以提高浸蜡效果，缩短时间。用时应装压力表和安全瓶。
8．硬脂酸-蜡可作为乙醇和石蜡间的中介剂，且可使组织硬度适中便于切片。
9．乙醇、二甲苯等为易燃品，使用过程中2m内不得有明火。加温脱水及浸蜡全过程，应用隔水温箱或无明火设备，提前一级加温，不得用干烤箱。熔蜡用水浴，并有专人守护。
贮存品保管于无火源房间内明亮易取处。实验室应通风良好，备有灭火器及砂箱。丙酮、乙醚、氯仿、氯乙烷、火棉胶等易燃、易爆物品，均应按上述原则处理。
4．95％酒精 3分钟
5．80％酒精 3分钟
6．70％酒精 3分钟
7．自来水洗
(二)染色
1．Harris苏木素液 5-7分钟
2．自来水洗 5分钟
3．1％盐酸溶液分化 30秒
l．95％酒精 2分钟
2．无水酒精Ⅰ 2分钟
3．无水酒精Ⅱ 2分钟
4．二甲苯Ⅰ 5分钟
5．二甲苯Ⅱ 5分钟
1．切片脱蜡应彻底，室温较低时更应注意，以切片在二甲
苯中呈透明状，或移入乙醇后，片上无白色斑点为佳。
2．特殊染色、组织化学反应、免疫组化染色，按各方法的要求进行组织固定处理，以保证效果。做酶反应的组织固定更应严格要求。凡用含升汞固定液固定的组织，于切片脱蜡后，应经脱汞处理，方可染色。其法为：切片经水洗2min，浸于0.5％碘酊溶液中10min，水洗，0.5％硫代硫酸钠水溶液5min，用水彻底冲洗，经蒸馏水洗后染色。在脱汞过程中，
★常规病理送检注意事项★
1. 手术中切取的组织标本，应立即投入固定液中固定(手术室应备有标本瓶和固定液)。一般以10％中性福马林为固定液。固定液的量不得少于标本体积的5～10倍。标本瓶口宜大，便于标本固定后取出。标本与瓶壁、瓶底接触影响固定者，以脱脂棉衬垫；浮于液面者，以脱脂棉覆盖。如为传染性标本，应注意勿污染容器外面。