2 植物组织培养实验设备及培养条件
植物组织培养实验室的组成仪器设备及基本操作
植物组织培养实验室的组成仪器设备及基本操作1. 引言植物组织培养实验室是进行植物细胞培养、植物组织培养和植物遗传转化等研究工作的重要场所。
该实验室的组成仪器设备和基本操作对于顺利进行植物组织培养实验至关重要。
本文将详细介绍一个典型的植物组织培养实验室的组成仪器设备及其基本操作。
2. 仪器设备2.1. 无菌操作台无菌操作台是植物组织培养实验室中最关键的设备之一，用于保持操作区域的无菌条件。
它通常由一个工作台和一个无菌工作区组成。
无菌操作台配备了紫外线灯和高效过滤器，可以杀灭空气中的微生物，并防止外界空气中的微生物进入无菌工作区。
2.2. 培养箱培养箱是用于培养和生长植物组织的设备。
它可以提供恒温、恒湿和光照条件，从而满足不同植物组织培养实验的要求。
培养箱通常配备了温度控制器和湿度控制器，可以精确地控制环境参数。
2.3. 培养基配制设备在植物组织培养实验中，需要制备不同种类的培养基用于培养和生长植物组织。
培养基配制设备包括天平、培养基配制器和pH计。
天平用于精确称量各种培养基成分的质量，培养基配制器用于自动配制培养基，pH计用于测量培养基的酸碱度。
2.4. 高压灭菌器高压灭菌器用于对实验室的培养器具、培养基和试剂进行高温高压的灭菌处理。
灭菌是植物组织培养实验的基本操作之一，可以有效杀灭培养器具和培养基中的微生物，保证实验的无菌性。
2.5. 显微镜显微镜是用于观察和分析植物组织培养过程中的细胞和组织结构的设备。
它可以放大样本，使研究人员能够观察细胞中的微小结构。
显微镜通常配备了不同倍数的物镜和目镜，以满足不同观察需求。
2.6. 高速离心机高速离心机用于分离植物组织培养中的混合物。
在植物组织培养实验中，常常需要将悬浮细胞和培养基分离以获得纯净的细胞。
高速离心机通过离心力将混合物中的悬浮细胞沉降到管底，从而实现分离的目的。
3. 基本操作3.1. 灭菌操作在进行植物组织培养实验之前，必须对实验室的培养器具、培养基和试剂进行灭菌处理，以确保实验的无菌性。
植物组织培养设备及条件
光照设备：提供植物生 长所需的光照
温度控制系统：控制培 养箱内的温度，保持恒
定
培养基制备设备：制备 培养基，包括培养基的
配制、灭菌等
灭菌设备
高压灭菌 锅：用于 培养基、 器皿、工 具等灭菌
紫外灯： 用于培养 室、操作 台等空间 灭菌
酒精灯： 用于培养 基、器皿、 工具等灭 菌
超净工作 台：用于 培养基、 器皿、工 具等灭菌
培养环境控制
温度：植物组织 培养的最佳温度 为25-30℃
光照：植物组织 培养的光照强度 为2000-3000勒 克斯
湿度：植物组织 培养的湿度为7080%
气体：植物组织 培养的气体成分 为氧气和二氧
恒温培养箱：提供稳定的温度条件，保证 植物组织的正常生长
显微镜：观察植物组织的生长和发育情 况，进行细胞学研究
培养设备
培养箱：提供稳定的温度、 湿度和光照条件
气体交换设备：提供植物 生长所需的氧气和二氧化
碳
湿度控制系统：控制培养 箱内的湿度，保持恒定
培养瓶：用于培养植物 组织，包括培养基、培
养液等
植物组织培养设备及条件
汇报人：
植物组织培养设备 植物组织培养条件
植物组织培养设备
实验室设备
培养箱：用于培养植物组织，提供适宜的 温度、湿度和光照条件
超净工作台：提供无菌环境，防止植物 组织受到污染和感染
光照培养箱：提供光照条件，促进植物 组织的生长和发育
离心机：用于分离植物组织中的细胞和 细胞器，提高培养效率
培养条件
温度：植物组织培养的温度一般在20-30℃之间，不同植物种类和培养阶段对温度的要求不同。
光照：植物组织培养的光照强度和光照时间对植物生长和分化有重要影响，一般采用人工光源 进行光照。
第2章植物组织培养的设备与培养条件
试管——特别适合于用少量培养基及试验各种不同配方 时选用，在茎尖培养及花药和单子叶植物分化长苗培 养时更显方便。有圆底的和平底的两种。 三角瓶——是植物组织培养中最常用的培养器皿，适合 于各种培养，固体或液体、大规模或小规模都行。 其优点是：采光好、瓶口较小不易失水和污染。 L形管和T形管——为专用的旋转式液体培养试管。 培养皿——适于作单细胞的固体平板培养、胚和花药培 养和无菌发芽。 角形培养瓶和圆形培养瓶——适于液体培养用。 果酱瓶或罐头瓶——常用于试管苗大量繁殖，200ml500ml规格 太空玻璃杯——可机械化洗瓶，适于工厂化生产
（3）磨口瓶 用于存装试剂、分装母液。 （4）滴瓶 盛装酸液（1N盐酸和1N氢氧化钠） （5）锅具：配置和熬制培养基
2.2.1.3计量容器 （1）容量瓶：培养基配置时定容 （2）移液管和移液枪 （3）量筒、量杯
2.2.2器械用具 组织培养所需要的器械用具，可选 用医疗器械和微生物实验所用的 器具。常用的器械用具如图： （1）镊子：可用于接种和转移植 物材料 （2）剪刀：一般在转移植株时用。 （3）解剖刀： （4）显微接种工具：包括接种针、 接种钩及接种铲，用来接种花药 或转移植物组织。
（1）功能：植物材料的灭菌、接种以及培养 物的继代转接等。 （2）仪器设备及用品： 超净工作台，紫外灯、小推车、搁架、接种 工具（各种镊子、解剖刀、手术剪、普通 剪刀接种针、酒精灯、手持喷雾器、细菌 过滤器等），紫外灯，换气扇，空调。
超净工作台
接种工具
无菌操作室消毒的方法： 照射灭菌： 紫外灯， 15—20分钟（接种前） 熏蒸灭菌 ：甲醛加高锰酸钾（定期）（一般 每立方米用甲醛2mL、高锰酸钾1g。 ） 超净工作台的消毒方法： 每次接种前，用70%酒精药棉擦拭台面。
植物组织培养的基本条件—组培常用的仪器设备及使用
目录
基本仪器与设备 无菌操作设备 培养器皿及实验工具
灭菌设备 材料培养设备
一、基本仪器与设备
1、天平
天平存放的环境要求： 干燥、无震动、无腐蚀性药品的地方，避免移动，天平匣内应放硅胶或其他 中性干燥剂以保持干燥（如万分之一天平）。 A.电子天平 精度高、称量快。
恒温水浴锅
恒温箱
4、培养箱
生化培养箱 光照培养箱
生化培养箱Βιβλιοθήκη 光照培养箱5、解剖镜
用于剥离茎尖。 多采用双筒实体解剖镜，在分离茎尖等较小组织时，便于观察、操作，通常 放大5-80倍。
6、显微镜
双目体视显微镜用的较多，多用于剥离茎尖以及隔瓶观察内部植物组织生长 情况。
双目体视显微镜
生物显微镜，用以观察花粉发育时期以及培养过程中细胞核的变化 生物显微镜
A. 烘箱类 有些材料需要烘干，或器皿需要干燥，实验室需要配备烘干设备。烘箱和干 燥箱差别不大，主要在烘干时间上以及强度上有差异。 迅速干燥，在烘箱内烘干，80-100℃为宜。 干热灭菌，温度升至150-180℃，持续1-3h。 培养物分析，在80℃条件下烘干。
B. 恒温箱类 恒温箱用于原生质体和酶制剂保温，也用于暗培养。 恒温箱内装上日光灯可进行温度及光照小型实验。 恒温水浴锅可用于超低温保存的材料的解冻实验。
B.分析天平
精度为0.0001g，用来称取微量元素和植物生长调节物质及微量附加物。 选择平稳，干燥，没有腐蚀性药品和水气的地方放置。
2、冰箱和冰柜
A.普通冰箱 很多材料需要提前配制（如母液），于冰箱内保存。 B.低温冰箱 某些试剂、药品和母液需要低温保存，有些材料需低温处理。
3、烘箱、干燥箱、恒温箱和恒温水浴锅
植物组织培养实验室的构建
药品柜
冰箱
天
平
磁 力 搅 拌 器
恒温水浴锅
2、洗涤室（区）
功能：完成各种器具的洗涤、干 燥、保存、材料预处理，同时兼 顾试管苗出瓶等。 要求：需安装一个较大的水池， 水泥制作，白瓷砖砌内外表面， 池底放一张橡胶垫，以减少玻璃 器皿的破损。下水道应畅通，以 免妨碍工作。 设备：玻璃器皿、塑料器皿、周 转箱、洗涤刷、洗瓶机、洗涤剂、 晾干台等。
3、培养基制作与灭菌室（区）
要求：20 m2左右，明亮，通风。配置大型 工作台1张。 功能：培养基配制、分装、 高压灭菌，无 菌水的制备以及其它物品的高压灭菌等。 设备：高压灭菌器、电炉、不锈钢锅、培 养基分注器、物品橱1-3个，用以放置线绳、 封口材料等。此外还应有烘箱、天平、酸度 计、盆与桶等。
洗 涤 室
接 种 室
培 养 室
灭 菌 室
驯 化 室
植物组织培养实验室 的组成
分体式-研究性质实验室，分开的若干房间将 准备室分解为药品贮藏室、培养基配制与洗涤室 和灭菌室等，功能明确，便于管理，但不适于大 规模生产。
通间式-规模化实验室，一般设计成大的通间 ，试验操作的各个环节在同一房间内按程序完成 。便于程序化操作与管理，减少各环节间的衔接 时间，提高工作效率。还便于培养基配制、分装 和灭菌的自动化操作程序设计，减少规模化生产 的人工劳动，更便于无菌条件的控制和标准化操 作体系的建立。
9、天平
植物组织培养实验室需要不同精度的天平。 感量0.001g的天平（分析天平）和感量0.0001g 的天平（电子天平）用于称量微量元素和一些 较高精确度的实验用品。 感量0.01g和0.1g的天平，用于大量元素母液配 制和一些用量较大的药品的称量。 陈列于 中
植物组织培养实验(2)
（二）实验原理
在一定的条件下，不同器官（根、茎、叶 等）来源的外植体均可以脱分化形成愈伤 组织。
（三）实验材料和用具
实验材料：黄瓜无菌苗 实验药品： MS、 1mg/ml NAA 、 1mg/ml 6-BA、
1mol/L HCl、1mol/L NaOH、蒸馏水、灯 用酒精、70％酒精、无菌水 。 灭菌培养基：MS1 （MS+1.0mg/LBA+0.5mg/L NAA）
实验用具：
天平、烧杯、玻璃棒、量筒、移液枪、三 角瓶、pH试纸、电炉、高压灭菌锅。
无菌室、无菌滤纸、无菌培养皿、烧杯、 解剖刀、镊子、剪刀、酒精灯、酒精棉花、 滴管、记号实验步骤
1. 配制以下培养基各100ml ： MS2：MS+2.0mg/LBA+0.1mg/L NAA MS3：MS+2.0mg/LBA+0.5mg/L NAA MS4：MS+2.0mg/LBA+2.0mg/L NAA ① 取200ml烧杯3只，标记，各加入4g MS培养基和
4. 接种 ① 进入无菌室，用70％乙醇擦洗双手和工作台面，点燃酒
精灯。 ② 解开三角瓶的绳子，将三角瓶按使用先后顺序排好。 ③ 再次消毒双手和工作台面，取出无菌滤纸，用无菌水润
湿。 ④ 在火焰边打开三角瓶的封口纸，烧灼瓶口和镊子，待镊
子冷却后取出无菌苗，放置在无菌滤纸上。 ⑤ 剪成5～10mm小段（根部去掉部分根尖，叶片去叶缘后
剪成50mm2左右的小片），每平皿接种3～5段（片）。 每组接种8瓶，根、茎段、茎尖、叶各2瓶。 ⑥ 光照培养箱25℃暗培养。
作业
1. 1周后观察培养体系有无污染，计算每一个平皿 内染菌外植体数和外植体外的菌落数，分析染 菌原因。
植物组织培养实验
植物组织培养实验室基本设备：超净工作台；培养室、；洗涤、消毒室，卧式高压消毒锅；温室（培养大棚）；常用仪器：1.蒸馏水器（学习操作），2.手提式高压消毒锅、卧式高压消毒锅（学习使用、操作），3.天平：⑴药物天平（工业天平）、粗天平、（精密度1/10）⑵分析天平（精密度1/10000），4.超净工作台（学习、使用、操作），5.电热干燥箱（烘箱），6.恒温光照培养箱（学习、操作），7.电冰箱，8.显微镜和解剖镜：①手提式解剖镜（学习、使用、操作）②立体解剖镜③普通显微镜，9.旋转培养机，10. 离心机（学习、使用、操作），11. 酸度测定仪：⑴精密PH4－7 试纸；⑵笔型袖珍酸度计。
必要的器皿：（一）玻璃器皿：1.培养器皿：①试管②三角烧瓶（锥形瓶）③圆形高形培养瓶（罐头瓶）④培养皿⑤扁身培养瓶⑥L 型和T 型管⑦凹面载玻片，2.盛装器皿：①试剂瓶②烧杯，3.计量器皿①量筒②容量瓶③吸管，4.其它器皿滴瓶、称量瓶、漏斗、玻璃管、注射器等实验室常用器皿。
（二）金属器械：1.镊子类：①20－25cm 长型镊子（接种或转移愈伤组织）②尖端弯曲“枪型”镊子（镊取较小的植物组织）③尖头钟表镊子和鸭嘴镊子（剥离表皮用）④尖端为小铲状镊子（挖取带琼脂培养基的培养物），2.解剖刀和刀类：①眼科用刀种牛痘疫苗的菱形刀（切割柔软组织中小细胞团）②解剖刀（手术刀）③双面刀片焊接在玻棒上（切取茎尖用）④锋利小刀、大刀和小铁锹，3.剪刀类：①解剖剪②眉剪③眼科剪④18－25cm 弯头剪⑤俢枝剪，4.接种针。
几种常用药剂的配制：（一）用95%尝试酒精配比不同浓度的酒精的配制。
学习配制70%和75%酒精。
（二）消毒剂:1. 20%次氯酸钠溶液：称取20g 次氯酸钠用少许水溶解，100ml 水定容。
2. 0.1%升汞（HgCl2）溶液：称取0.1g HgCl2少许水溶解，100ml水定容。
（三）洗涤剂:1. 2HCl酒精：95%酒精100ml 加入2mlHCl，2.硫酸－重铬酸钾洗液：取10g 重铬酸钾加入蒸馏水90ml，加热溶解冷却后，逐渐加入浓硫酸175ml，放入棕色玻璃瓶备用，（注意：切记不可将盛过洒精，甲醛等原剂的药品玻璃器皿直接泡入洗液在，因为重铬酸钾是一种强的氧化剂，一旦被还原氧化，洗液变绿，失去洗涤作用）。
植物组织培养的设备与培养条件
培养基、植物材料、接种工具、器皿及环境的消毒处理。
（一）常用灭菌方法及其使用范围
湿热
高温
物 理
干热 超声波
物 理
灭
射线 微波
菌
紫外线
灭 菌
滤膜过滤
无菌水反复冲洗
升汞 福尔马林 双氧水
升汞 来苏水 高锰酸钾
漂白粉 次氯酸钠 抗菌素 酒精
第四节 基本操作技术与实验室管理
三 无菌操作及注意事项
（一）常用灭菌方法及其使用范围
二 光照
最常用的周期是16h的光照，8h的黑暗。 常用的光照强度，一般为1000-5000lx。 一般用日光灯进行光照，光谱成分主要是蓝紫光，波长为 419-467nm。针对不同的植物种类，不同的培养阶段，根据 不同的培养目的，选用合适的光质照明。
第三节 植物组织培养所需环境条件
三 湿度
一是培养容器内的湿度条件，容器内主要受培养基水分含 量和封口材料的影响。 一是环境的湿度条件。环境的相对湿度一般要求70～80%。
第三节 植物组织培养所需环境条件
四 气体
氧气是培养中必需的因素，瓶盖封闭时要考虑通气问题， 可用附有滤气膜的封口材料。 液体培养采用振荡培养。 高浓度的乙烯对正常的形态发生是不利的。培养基高压灭 菌时，可能产生乙烯，培养物本身也可能产生乙烯。
第三节 植物组织培养所需环境条件
五 培养基的渗透压
培养基中添加的盐类、蔗糖等化合物影响到渗透压的变化。
实验室设计原则： ① 保证无菌操作，达到工作方便，防止污染。 ② 培养室减少通风。 ③ 具有缓冲室。
第二节 植物组织培养所需要的基本仪器和设备
一 玻璃器皿
培养器皿 盛装容器
三角瓶 培养皿
培养瓶 试管
2 植物组织培养实验设备及培养条件
走廊
门 厅
准备室
洗涤室 配置室 观察室 接种室
案例2：实验室构成
配置室 灭菌室 洗涤室 驯化室
走
廊
观察室 培养室 接种室 培养室
1、洗涤室
功能：用于玻璃器具的
清洗、干燥和贮 存；接种材料冲 洗。试管苗出瓶清洗。 配备：上下水；水槽； 塑料筐；干燥箱； 晾干架等。
面积：根据规模，可与 配置室合并，一般20m2 。
2.透明度好； 3.便于接种。
（二）玻璃器皿的规格：
• 三角瓶：50、100、250、500ml或用250ml罐头瓶代 替。
• 培养皿：6、9、12cm • 试管：18×180mm或20×200mm • 量筒：10、50、100、500、1000ml
烧杯：50、100、200、500、1000ml 容量瓶：100、200、500、1000ml 试剂瓶（棕色）：50、100、250、500、1000ml 移液管：0.2、0.5、1.0、2、5、10ml 微量移液器
★不同波长的光对细胞的分裂和器官的 分化有影响。
如：①红光促进杨树愈伤组织的生长， 蓝光阻碍其生长。
②白光促进小花天竺葵愈伤组织 的生长，蓝光则无作用。
3.光照时间
根据植物生物学特性 决定； 光照长短对试管内花 的形成有重要影响； 在胡萝卜组织培养中 随着日照长度的增加， 而促进生长。
三、湿度
1.瓶内的湿度：
要求：室内清洁、明亮、安静，设 备先进。
7. 驯化棚室
功能：提供组培苗炼苗的环境。 要求：能够控温调湿、控光通风。 面积：据规模来定。 注：室内驯化与设施下驯化均可。
①
②
③
7.驯化棚室
第二节 设备和器材
一、玻璃器皿 二、器械用具 三、仪器设备
组织培养所需的实验条件和器具
组织培养所需的实验条件和器具图片怎样才能发上来？请帮助！一、植物组织培养全过程：二、植物组织培养常用的设备和器材1、培养室:包括准备室、洗涤灭菌室、无菌操作室、培养室、缓冲间，是组织培养实验所必须具备的基本条件。
2、仪器设备：主要有超净工作台、冰箱、水浴锅、高压蒸汽灭菌锅、烘箱等。
超净工作台高压蒸汽灭菌锅水浴锅3.实验常用用具三、常用药品组织培养所需药品主要用于培养基的配制，也有部分用于消毒，主要有以下几类：1、光照光照是组织培养中的重要外界条件之一，它对外植体生长和分化有很大的影响。
光照对组织培养的影响主要表现在光周期、光照强度（光强）和光质这三个方面。
2、温度温度最重要的作用是决定呼吸的速度和控制植物组织代谢过程的化学反应。
在植物组织培养中，不同植物繁殖的最适温度不同，大约为23～28℃之间，但也有不少例外，差异比较大。
通常低于15℃时，培养的外植体组织生长缓慢或出现停滞，但高于35℃对生长也不利。
在实际工作中，在考虑某种培养物的温度要求时，也应考虑原植物的生态环境所处温度条件，如生长在高海拔和较低温度环境的植物，则培养的环境温度可适当低些。
3、湿度植物组织培养中的湿度影响主要有两个方面：一是培养容器内的湿度条件，二是培养室的湿度条件。
培养容器内的湿度主要受培养基的影响，相对湿度可达100%，而培养室的湿度变化随季节而有很大变动，它可以影响培养基的水分蒸发，一般要求70%～80%的相对湿度。
4、培养基的PH值外植体的培养增殖都要求一定的PH值。
通常一般培养基的PH值都在5.6～6.0之间。
如果PH值不适则直接影响外植体对营养物质的吸收，进而影响外植体的脱分化、增殖和器官形成。
不过PH值对不同植物的影响会有差异，有的宜偏酸，有的宜偏碱，在实际工作中，依不同植物而调整。
5、氧和其他气体培养容器中的气体成分会影响到培养物的生长和分化。
氧是植物组织培养必需的，在接种时应避免把整个外植体全部埋入培养基中，以免造成缺氧。
植物组织培养实验室的基本要求
植物组织培养实验室的基本要求
植物组织培养实验室基本要求如下：
1. 实验室环境：实验室应具备充足的自然光照或者人工照明，并保持适宜的温度和湿度。
实验室内应保持清洁，并采取合适的措施防止尘埃和微生物的污染。
2. 设备需求：实验室应配置必要的设备，包括培养箱、植物生长灯、显微镜、培养皿和多功能离心机等。
这些设备要保持良好的工作状态，并定期进行维护和检修。
3. 培养基和试剂：实验室应准备不同种类的培养基和试剂，以满足不同植物组织培养的需求。
这些培养基和试剂应具备高质量，且需要储存在符合要求的条件下，以保证其稳定性和有效性。
4. 安全措施：实验室应制定相应的安全管理制度，并配备必要的安全设施，如安全柜和消防设备等。
实验人员应经过培训，了解正确的实验操作方法和急救知识，以提高实验室操作的安全性和可靠性。
5. 实验操作规范：实验室应建立完善的操作流程和实验记录制度，保证实验操作的标准化和规范化。
实验人员应严格按照实验操作规程进行操作，并详细记录实验数据和结果。
6. 废物处理：实验室应配备合适的废物处理设施，对实验产生的废弃物进行正确处理，避免对环境和人体造成污染和危害。
7. 人员素质要求：实验室人员应具备相关专业知识和技能，且具备较高的实验技术水平。
人员应具备良好的团队合作精神和沟通能力，并遵守实验室的规章制度和安全规范。
最后，实验室应定期进行质量管理和风险评估，不断改进实验室的管理体系和技术水平，以确保实验室的正常运行和科学研究的顺利进行。
植物组培实验室设置条件及器具.
4、用70%—75%的酒精擦拭工作台和双手。
5、用沾有70%—75%酒精的纱布擦拭盛培养基的 培养器皿，放进工作台。 6、把解剖刀、剪刀、镊子等器械浸泡在95%的 酒精中，再在火焰上消毒，放在器械架上。 7、在酒精灯火焰附近切割备用的接种材料。 8、打开瓶口，用火焰烧瓶口，转动瓶口使瓶口 各部分都烧到。
2.微量营养元素：
3、碳源 5、肌醇 7、天然复合物 8、琼脂 12、细胞分裂素类 4、维生素类 6、氨基酸 如：水解酪蛋白、玉米胚乳、酵母提取物 9、活性炭 10、抗生素 11、生长素类
13、赤霉素类和脱落酸
因地制宜，创设实验
上述是正规的组培条件，很多学校并不具备这样 的条件。但因为组培实验在课标中是应用要求，最好 创设条件做一下。 比如做一个组培的实验最低要求就是要有一个灭 菌锅和一个超净台，这个就能满足洁净的要求。 如果没有灭菌锅可用高压锅代替，进行细菌的灭 菌； 如果没有超净台，可选择比较容易做的材料，就 用胡萝卜，在外面的开放的环境下，点上两个酒精灯， 最主要保证在火焰温度的范围内，温度可以保证无菌， 瓶子也置于酒精灯的外焰灼烧灭菌，而胡萝卜也进行 外部的消毒，用消毒的刀片割里面的韧皮部即可。
植物组培实验室设置条件及器具
一、实验室组成 二、基本设备
三、培养器皿及实验用具
四、无菌条件及创设
五、无菌操作
六、组培的环境条件和营 养条件
一、实验室组成
组织培养实验室布局的总体要求
便于隔离 便于操作
便于灭菌
便于观察
准备室
缓冲室
基本实验室 实验室 组成 辅助实验室 无菌操作室 培养室 细胞生物学实验室
0.1%—0.2%氯化汞 液中浸泡10min左右 在10%的次氯酸钠、 饱和漂白粉浸泡 30min左右
植物组织培养实验设备及培养条件
植物组织培养实验设备及培养条件引言植物组织培养技术是一种通过培养植物细胞、组织和器官的方法，以便进行植物生长、繁殖和遗传改良的技术。
在植物组织培养实验中，适宜的实验设备和培养条件是实现高效培养和增殖的关键。
本文将介绍常用的植物组织培养实验设备以及适宜的培养条件。
实验设备无菌工作台无菌工作台是植物组织培养实验中必不可少的设备之一。
它是一个封闭的工作环境，能够提供洁净的实验条件，防止外源性杂质进入培养环境。
无菌工作台通过空气过滤器过滤空气，并提供紫外线杀菌功能，确保实验操作的无菌性。
培养室培养室是为植物组织培养提供稳定的温度、光照和湿度的环境。
通常，培养室被设置在黑暗的地方，以防止光照对实验结果的影响。
培养室还应配备通风系统，以确保空气流通，并保持合适的湿度和温度。
培养箱培养箱是用于培养植物组织的常见设备。
它提供了一种恒温、恒湿的环境，可以控制温度、湿度和光照条件。
培养箱通常分为两个区域：生长区和照明区。
生长区提供适宜的温度和湿度，而照明区则提供光照。
培养瓶和培养皿培养瓶和培养皿是用来放置植物组织培养基和培养植物组织的容器。
培养瓶通常是透明的塑料或玻璃容器，有通气膜或通气塞以保证氧气和二氧化碳的交换。
培养皿可以用于培养无菌的植物组织块。
培养基配置设备培养基是植物组织培养中必不可少的营养来源。
培养基配置设备包括天平、移液器、pH计等。
天平用于准确称量培养基成分，移液器用于精确添加液体试剂，pH计用于调节培养基的酸碱平衡。
培养条件温度温度是植物组织培养中一个重要的生长因素。
不同的植物组织对温度的要求有所不同。
通常情况下，室温（20-25摄氏度）是适宜的生长温度范围。
对于某些特定植物组织培养，可能需要调节温度以促进生长或诱导分化。
光照光照是植物生长和光合作用的关键因素。
在植物组织培养中，光照条件需要根据具体的实验要求进行调节。
对于光照要求较高的组织培养，可以使用培养箱提供合适的光照强度和周期。
湿度湿度是植物组织培养中另一个重要的环境因素。
植物组培室设备及培养条件全攻略
植物组培室设备及培养条件全攻略组培室建设首要考虑的问题就是组培室需要哪些设备条件和需要什么样的培养条件。
对这些有了全面了解以后，我们便可以因地制宜地新建或利用现有房屋建设实验室。
在设计组培室时，一般情况应按组培的流程来设计，同时考虑人物分流顺畅，空间合理利用。
植物组织培养要求严格的无菌的条件，需要一定专业仪器设备、器材和用具，同时还需要人工控制温度、光照、湿度等培养条件。
第一、实验室一个标准的组织培养实验室应当包括洗涤室、•配置室、接种室、培养室、观察室（冷却室）、灭菌室、洗苗室等。
在实际中可结合可行条件，合并一部分。
（一）洗涤室洗涤室完成玻璃器皿和其它仪器的清洗、干燥和贮存。
室内应配备大型水槽，用于培养器皿的洗涤，最好是内衬白瓷砖的水泥槽。
为防止碰坏玻璃器皿，可铺橡胶板，上下水道要畅通。
备有大型塑料筐，用于放置培养器皿。
可直接置于搁架上，以节约空间和便于运输工作。
备有空干架，以空干涮净的培养器皿。
（二）配置室、灭菌室（可分开）准备室要求明亮、通风。
在准备室内要完成培养基制备以及试管苗出瓶、清洗与整理工作。
如果房间较多，可将准备室分为洗涤室和配置室两部分。
洗涤室专门负责试管苗出瓶与培养器皿的清洗工作；配置室则负责培养基的配制、分装、包扎和高压灭菌等工作。
为完成培养基的制备工作，准备室还应配备以下仪器设备：1．工作台。
其高度应方便配制工作。
2．药品柜。
用以放置常用药品。
3．普通冰箱。
主要用于贮存母液、各种易变质、易分解的化学药品以及植物材料等。
4．电子分析天平和托盘天平。
电子分析天平精确度为0.001g，用于称取大量元素、微量元素、维生素、激素等微量药品；托盘天平精确度为0.1g，用于称取用量较大的糖和琼脂等。
天平应放置在干燥、不受振动的固定操作台上。
5．纯水仪或电蒸馏水器。
纯水仪提供纯水，水质好。
电蒸馏水器，采用硬质玻璃或金属制成。
蒸馏水用于配制母液或培养基，配培养基可用自来水来代替，若实验要求严格的话，则须用蒸馏水。
植物组织培养的设备与条件
植物组织培养的设备与条件组培设备与条件开展植物组织培养工作需要一个比较合理实用的场所，一套适宜的设备和提供必要的实验环境条件，这是首先要考虑到的。
根据科学、合理的原则，一个较为理想的配置应该包括：1、化学药品室2、配培养基室3、灭菌室4、接种室5、无菌培养室基本仪器设备与用品1、仪器设备超净工作台、高压灭菌锅（手提式、立式或卧式）、小推车（可选）、精密电子天平（至少千分之一）、电子天平或托盘天平、酸度计、普通冰箱、烘箱、解剖镜、光照培养箱（选购）、电炉、微量可调移液器及配套吸嘴、移液管架、磁力搅拌器（可选）、不锈钢托盘、灌装机（可选）、培养架、定时器（控制光照时间）、紫外线杀菌灯、照度计（可选）、温湿度计（可选）蒸馏水器、摇床（可选）、针头滤器及配套滤膜2、小型用品枪镊，弯剪、解剖刀、接种盘3、玻璃器皿组培瓶（玻璃或塑料）、烧杯、量筒、移液管、试剂瓶、移液管架、容量瓶、试管、酒精、玻璃棒、滴瓶4、组培药品（详细药品请见常用配方）5、其他吸耳球、刷子、记号笔、定时钟、手套、封口膜、卫生药棉、拖鞋、口罩、白大褂、滤纸、洗瓶培养条件在植物组织培养中温度、光照、湿度等各种环境条件，培养基组成、 PH值、渗透压等各种化学环境条件都回影响组织培养育苗的生长和发育。
一、温度（temperature)因为温度是植物组织培养中的重要因素，所以植物组织培养在最适宜的温度下生长分化才能表现良好，大多数植物组织培养都是在23～27 ℃之间进行，一般采用25±2℃。
低于15℃时培养，植物组织会表现生长停止，高于35℃时对植物生长不利。
但是，不同植物培养的适温不同。
白鹤非的最适温度是20℃、月季是25～27℃、番茄是28℃。
温度不仅影响植物组织培养育苗的生长速度，也影响其分化增殖以及器官建成等发育进程。
如烟草芽的形成以28℃为最好，在12℃以下，33℃以上形成率皆最低。
不同培养目标采用的培养温度也不同，百合鳞片在30℃以下再生的小鳞茎的发叶速度和百分率比在25%以下的高。
第2章—实验室设备及培养条件
琼脂用量，否则，将使培养基干硬，以致不利于外植体
接触或插进培养基，导致生长受阻。封口材料直接影响 容器内湿度情况，但封闭性较高的封口材料易引起透气 性受阻，也会导致植物生长发育受影响。
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2.环境的相对湿度可以影响培养基的水分蒸发，一般
要求70%-80%的相对湿度，常用加湿器或经常洒水的 方法来调节湿度。
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第二章
实验室设备和培养条件
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第一节
实验室设计
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在进行植物组织培养工作之前，首先应对工作中 需要哪些最基本的设备条件有个全面的了解，以便
因地制宜地利用现有房屋，或新建、改建实验室。
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实验室的大小取决于工作的目的和规模：
1.以工厂化生产为目的，实验室规模太小，则会限制
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(二)光照
组织培养中光照也是重要的条件之一
主要表现在 光强、 光质、 光照时间
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1 光照强度
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光照强度对培养细胞的增殖和器官的分化有重要影响， 从目前的研究情况看，光照强度对外植物体、细胞的最 初分裂有明显的影响。 光照强度：1000lx—1500lx 黑暗条件：利于细胞、愈伤组织的诱导增殖 光照条件：利于器官的分化
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2. 高压灭菌锅（手提式、立式或卧式）
用于进行培养基和器械用具的灭菌。小规模实验室可选
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用小型手提式高压灭菌锅
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卧式灭菌锅
手提式灭菌锅
3.恒温培养箱:
用于植物材料的
培养，其内有温度感 受器，控制箱内温度 到所调指标。生化培 养箱还配有光照装置
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超净工作台 电子灭菌器
臭氧灭菌机
5.培养室
功能：培养植物材料。 配备：培养架 边台 解剖镜 照明设备 定时器 空调器 干湿温度计 工作台 除湿机 换气扇 面积：根据规模定
5.培养室
6.观察室
功能：观察并研究培养材料的生长 分化情况及其形态发生规律；检查 培养材料是否脱毒和发生变异。
主要配备：生物显微镜，切片机， 酶联免疫检测仪，PCR扩增仪等。
★不同波长的光对细胞的分裂和器官的 分化有影响。
如：①红光促进杨树愈伤组织的生长， 蓝光阻碍其生长。
②白光促进小花天竺葵愈伤组织 的生长，蓝光则无作用。
3.光照时间
根据植物生物学特性 决定； 光照长短对试管内花 的形成有重要影响； 在胡萝卜组织培养中 随着日照长度的增加， 而促进生长。
三、湿度
1.瓶内的湿度：
பைடு நூலகம்
二、器械用具
5.其它：周转筐 搪瓷盘
移液管架 、玻璃棒、酒精 灯、试管架等。
三、仪器设备
1、恒温培养箱 2、烘箱 3、空调
4、高压灭菌锅 5、冰箱 6、天平
7、酸度计
8、显微镜 9、水浴锅
10、蒸馏水器 11、磁力搅拌器
12、人工气候室 13、摇床转床
14、干燥箱
15.细菌过滤器
第三节 培养条件
恒温培养箱
人工气候室
3.灭菌室
功能：完成培养基、接种 工具等的高压灭菌过程。 配备：高压灭菌器或微波 炉，烘干箱。
4、接种室
功能：用于植物材料的无菌分离、接种 和转移培养物。 结构：缓冲间+接种室 配备：超净台，工作台，搁架，医用平 车， 细菌过滤器、解剖镜、紫外灯等。 面积：一般10－20m2 设计要求:地面平坦无缝、顶棚及墙壁密 闭光滑，干爽安静，清洁明亮，配置横 拉门，门窗严密。
要求：室内清洁、明亮、安静，设 备先进。
7. 驯化棚室
功能：提供组培苗炼苗的环境。 要求：能够控温调湿、控光通风。 面积：据规模来定。 注：室内驯化与设施下驯化均可。
①
②
③
7.驯化棚室
第二节 设备和器材
一、玻璃器皿 二、器械用具 三、仪器设备
三、玻璃器皿
（一）对玻璃器皿要求：
1.耐腐蚀；耐高温、 高压；
复习思考题：
1.你认为组培实验室在规划布局上应 考虑哪些问题？并尝试设计1个组培 实验室。
2.按类别列举组培实验室所需设备
3.如何理解温度、光照条件对组培的 影响？
9、静夜四无邻，荒居旧业贫。。21.3.421.3.4Thursday, March 04, 2021
第二章 实验设备及培养条件
目的要求：
（1）掌握组培室的功能布局与设计要求 （2）掌握组培常用的实验仪器设备及使用 （3）掌握调控组培的主要环境条件
第二章 实验设备及培养条件
第一节 实验室
﹡
第二节 设备和器材
﹡
第三节 培养条件
﹡
第一节 组培实验室
组培实验室
配 置 室
驯化室 观察室 培养室 接种室 洗涤室
2.透明度好； 3.便于接种。
（二）玻璃器皿的规格：
• 三角瓶：50、100、250、500ml或用250ml罐头瓶代 替。
• 培养皿：6、9、12cm • 试管：18×180mm或20×200mm • 量筒：10、50、100、500、1000ml
烧杯：50、100、200、500、1000ml 容量瓶：100、200、500、1000ml 试剂瓶（棕色）：50、100、250、500、1000ml 移液管：0.2、0.5、1.0、2、5、10ml 微量移液器
一、温度
1.一般控制在25±2ºC 。
2.植株种类及外植体
的不同，其最适温度
也是不同的。如百合
20℃；月季25－27℃
；番茄28℃。
△
二、光照
1.光强 ★影响外植体细 胞的增殖、组织 和器官的分化。
★有的材料愈伤组织的诱导需光或需暗； ★光照强，幼苗生长健壮；光照弱，幼 苗生长弱小，容易徒长。
2.光质
案例1：实验室平面设计
培养室 培养室 培养室
走廊
门 厅
准备室
洗涤室 配置室 观察室 接种室
案例2：实验室构成
配置室 灭菌室 洗涤室 驯化室
走
廊
观察室 培养室 接种室 培养室
1、洗涤室
功能：用于玻璃器具的
清洗、干燥和贮 存；接种材料冲 洗。试管苗出瓶清洗。 配备：上下水；水槽； 塑料筐；干燥箱； 晾干架等。
四、pH值
1.培养基适宜PH值5-6.5，一般为5.8， 调整用0.1M的NaOH和HCl溶液 。
2.ｐH影响培养基的硬度。
ｐH ＞6.5
培养基会变硬；
ｐH ＜5.0
培养基不易凝固。
3.灭菌之前，培养基的ｐH要比标准提高 0.2－0.3个单位。
五、气体(必要条件)
1.培养瓶内氧气的 充足与否与封口材 料有关。 可用棉塞或特制的 封口塑料。通气最 好的是棉塞，但棉 塞易使培养基干燥， 夏季易引起污染。
玻璃棒、酒精灯
二、器械用具
1、镊子类：接种、转移 材料或分离茎尖用，以 100ml三角瓶为培养瓶， 可用20cm长。
二、器械用具
2、剪刀类：医用剪刀，剪 切割外植体或继代培养时分 离材料。
3、解剖刀：切割芽、茎段、 愈伤组织等，继代时分离
材料，也可用于微小外植
体的接种等。
4、解剖针：转移细胞或愈 伤组织，微茎尖分离及接 种等。
五、气体(必要条件)
2.培养基内氧气充足与否与培养基 的种类和培养方式有关。 ◆固体培养基可加进活性炭来增加
通气度,以利于发根。 ◆液体培养时，可考虑采取振荡培
养的方式，以增加通气性。
六、渗透压
1.1-2个大气压促进生长。
2.２个大气压以上 就对生长有阻碍作 用，5－６个大气压 生长就完全停止， ６个大气压细胞就 不能生存。
面积：根据规模，可与 配置室合并，一般20m2 。
2.配置室
功能：用于培养基的配制、试管苗出瓶清 洗。
配备：药品柜，天平， 工作台，蒸馏水器，磁 力搅拌器，冰箱，电炉 或电饭锅，酸度计，培 养箱 设计要求：明亮、通风、 洁净。
药品柜
冰箱
天平
磁力搅拌器
恒温水浴锅
酸度计
电蒸馏水器
水处理中心
电炉
主要受到培养基含水量和 封口膜透性的影响。如培 养基过硬，则不利于外植 体接触和插入培养基，导 致生长迟缓；封口膜过于 透气，也会使瓶内湿度下 降。
三、湿度
1.瓶内的湿度
2.环境湿度： 过低会使培养基丧失 大量水分，渗透势升 高，影响材料对营养 物质的吸收，也会阻 碍外植体的生长。一 般为70－80%。