常用精子功能检测与男性不育
精子功能检测在辅助生殖中的应用
精子功能检测在辅助生殖中的应用曹泽磊,朱亮(中国人民解放军第306医院生殖医学中心,北京,100101)摘要:精子功能检测在男性不育的诊断和治疗中的作用越来越引起人们的重视。
目前精液检测的技术和方法很多,如对精子运动特征检测、形态学分析、体外存活试验、精子膜完整性试验、顶体状态测定、精子-宫颈黏液相互作用试验等。
这些试验均为男性不育症的诊断提供帮助,但各个检测项目的结果对体内外生育能力的预测有所差异,因此有必要结合临床实际对检测项目进行必要地筛选,既能为临床诊断提供依据,又可提高效率节约患者的医疗成本。
关键词:精子功能;辅助生殖;筛选中图分类号:R446.144文献标识码:B文章编号:1006-9534(2011)01-0136-03Sperm function tests in assisted reproduction.CAO Ze-lei,ZHU Liang.(Department of Reproductive Medicine,the306th Hospital of P.L.A.Beijing100101)Abstract:Human sperm function test has such an essential role on the etiologic diagnosis of male infertility that it attracts more and more attention.Many tests have offered indispensable approaches to diagnose the male infertility such as sperm movement charac-ter,morphological analysis,survival test in vitro,integrity of sperm membrane,acrosomic status,interaction between sperm and cervical mucus and so on.We should select them to apply the clinical and to reduce the costs.Key words:Sperm Function;Assisted Reproduction;selection在男性不育的诊治过程中,精液的常规化验分析一直作为一个很重要的参考指标,来指导临床的治疗方案,随着男科学研究的深入,传统的精液分析已不足以对男性生育能力进行准确评价。
精子线粒体功能检测与男性不育相关性的研究进展
DOI:10.13602/j.cnki.jcls.2021.04.12·生殖检验·精子线粒体功能检测与男性不育相关性的研究进展作者简介:李红林,1980年生,男,副主任技师,硕士,主要从事生殖检验研究,E mail:hayylhl@163.com。
李红林,傅广波,吕述彦(南京医科大学附属淮安第一医院生殖医学中心,江苏淮安223300)摘要:精子线粒体是唯一含有独立基因组的细胞器,通过氧化磷酸化产生的适量活性氧(ROS)和三磷酸腺苷(ATP)维持精子活力、获能、顶体反应和DNA完整性。
精子线粒体膜电位(MMP)水平的变化、mtDNA突变或缺失均可引起精子能量合成障碍,是临床评估特发性男性不育的重要指标。
该文综述精子线粒体功能检测与男性不育相关性的研究进展。
关键词:精子线粒体;不育;活性氧;线粒体膜电位;线粒体DNA中图分类号:R446 文献标志码:A 不孕不育症指育龄夫妇未采取任何避孕措施,有规律性生活12个月内女方未获得临床妊娠[1]。
据WHO估计全球约有1.9亿人患有不孕不育症[2],其中约50%是由男方因素导致的不育症[3]。
临床工作中,男性不育症的筛查和诊断主要是依据精液量、精子浓度、精子活力和精子形态等指标的检验结果[4 5],但大约30%~50%的特发性男性不育症患者的精液常规检验指标却完全正常[6]。
线粒体是唯一含有独立基因组的细胞器,通过氧化磷酸化产生的适量活性氧(ROS)和三磷酸腺苷(ATP)维持精子活力、获能、顶体反应和DNA完整性[7]。
精子线粒体损伤会引发能量合成障碍,导致精子质量和功能下降、甚至消失。
现对近年来应用精子线粒体分子结构和功能检验指标评估男性生育力的研究进展作一综述,为男性不育症发病机制的研究以及精子线粒体功能检测指标的临床应用提供参考。
1 精子线粒体功能与ROS精子细胞中线粒体数超过103个/细胞。
精子发育成熟过程中,随着其他细胞器和细胞质的消失,线粒体的数量和结构也发生显著变化,当精卵结合形成受精卵时,精子线粒体会通过自噬途径被完全降解清除[8]。
精子形态和精子活力分析在男性不育诊断中的应用
[] 袁 洁 . 细 胞 分 析 仪血 涂 片复 审标 准 的 制定 及 应 用 评 价 [] 国 际 5 血 J.
检 验 医 学 杂 志 ,0 9 3 ( 1 :0 61 6 ,0 9 20 ,0 1 ) 16 —0 7 1 6 .
精 能力 仅有 7 的 准 确 性 , O 而且 由 于 男 性 不 育 的 病 因 复 杂 , 个
体 差 异 较 大 , 此 , 凭 精 液 常 规 分 析 往 往 不 能 满 足 临 床 诊 断 因 单
的 需 要 _ 。近 年 来 , 床 常 借 助 一 些 精 子 功 能 检 查 实验 以评 价 1 ] 临 男 性 生 育 能 力 , 中精 子 形 态 染 色分 析就 是 近 年来 才 得 以重 视 其
解 决 , 追在 眉睫的问题之一 。 且
参 考 文 献
[] 中华检验医学杂志编辑委员会 . 强形态学临床检验 专家座谈会 1 加
纪 要 [] 中华 检 验 医学 杂 志 ,0 5 2 ( ) 1 71 8 J. 2 0 ,8 2 :4—4 .
fl wiga tmae B n C df rn i n ls [ 1 L b ol n uo tdC C ad WB iee t l ayi J . a o f aa s
精 子 症 的 发 生 率 很 高 ( 3 , ) 占 5 2 。结 论 男 性 不 育 或 生 育 力低 下 的诊 断 。 关 键 词 : 子 ; 精 子 形 态 ; 男性 不 育 ; 精 子 活 力 精 D :0 3 6 /.sn 17 —1 0 2 1 . 10 1 OI1. 99 jis. 6 34 3 . 0 2 0 . 4 文 献 标 识 码 : B 文 章 编 号 :6 34 3 (0 2 0—0 10 17 —1 02 1 ) 10 9—3 精 子 形 态 是 影 响 男性 生 育 力 的 重要 因素 , 液 常 规 和 精 子 形 态 联 合 分析 , 利 于提 高 精 有
探讨抗精子抗体检验对男性不育症的应用价值
倒 ,其 中抗精 子抗体 阳性 患者 5 2 例,占1 7 . 2 %;精子 密度在 0 . 2 ̄ L / mL以下的患者共 8 8例 ,其 中抗精子抗体 阳性患者 6 1 例 ,占 6 9 . 3 %,经比较 ,差异有统计 学意义 ( 尸< 0 . O 5 ) 。精子 密度越 高的患者 ,血清 中抗精 子抗 体阳性率越低 ( P< O . 0 5 ) ,死精与无精 患 者血清 中抗精子抗体 阳性 率高达 7 5 . 6 %、7 0 %;精子活动力越差 ,血清 中抗精子抗体检 出率越 高 ( 尸< 0 . 0 5 ) ,精 液中白细胞计数越
[ A b s t r a c t ] O b j e c t i v e T o e v a l u a t e a p p l i c a t i o n v a l u e o f t h e a n t i — s p e r m a n t i b o d i e s i n t h e t r e a t me n t o f ma l e i n f e r t i l i t y t e s t a p p l i c a t i o n .
高,抗精子抗体 阳性 率越 高 ( P< o . 0 5 ) 。结论 抗精子抗体检验在 男性不育症的诊 断中有较好的t 临床 价值 ,值得在 ・ 临床 上推 广。 【 关键词 】 抗精子抗体 ;不育症 ;精 子活动 力;应 用价值
中 图分 类 号 :R 4 4 6 . 1 文 献 标 识 码 :A d o i : l O . 3 9 6 9  ̄ . i s s n . 1 6 7 4 — 4 6 5 9 . 2 0 1 3 . 1 2 . 1 5 1 5
精子形态与男性不育关系的研究
t O c l a r i f y t h e r e l a t i o n s h i p b e t we e n ma l e i n f e r t i l i t y a n d s p e r m mo r p h o l o g y a n d f u n c t i o n . Me t h o d s 2 1 5 c a s e s o f ma l e
学意义( P >0 . 0 5 ) 。但 在 精 子 活 力 方 面 , 实验 组精 子 头 部、 体 部 以 及 尾 部 畸 形 的 比 例 均 显 著 高 于 健 康 对 照 组
( 2 0 . 8 和 9 . 5 ; 1 5 . 7 和7 . 4 ; 2 7 . 3 和1 1 . 6 ) , 差异有统计学意义( P <o . 0 5 ) 。 实验 组 A 级 和 A+ B级 精 子
活力( 1 3 . 1 ±5 . 2 1 ) , ( 2 7 . 5 ±4 . 8 6 ) , 明 显低 于 健 康 对 照 组 ( 3 3 . 5 ±5 . 3 4 ) , ( 6 2 . 4 ±4 . 5 7 ) , 差 异 有 统 计 学 意 义 ( P <0 . 0 5 ) 。结论 精 子 的 形 态 和 活 力 是 影 响 男性 不 育 的 重 要 原 因 。
检验医学与临床 2 O i n, J u n e 2 0 1 5 , Vo 1 . 1 2 , N o . 1 1
男性精子检查项目有哪些?如何判断男性不育
男性精子检查项目有哪些?如何判断男性不育孕前精液检查与不孕优生精液检查是分析男性生育能力的一个重要依据。
因此,男性一方的孕前检查和男性不育症病人在诊治过程中,医生首先要让他进行精液检查。
精液检查的结果不仅对男性科医生很重要,对妇产科医生也很重要,经精液检查后明确男方患有不育症时,可以避免妻子许多烦琐的检查,以及时进行治疗。
精液检查的具体检查内容1、精液检查时首先需要受检者采集自己的精液,是否正确采集精液标本影响到检查结果的准确性。
2、在精液采集时要求受检者禁欲3-5天,如果时间过短或过长都会影响检查结果。
3、用手淫或体外射精的方法,将精液全部收集在干净的容器内,保存于接近体温的环境下(如贴身内衣下)尽快送到实验室检查,最迟不能超过1小时。
4、不能使用避孕套保存,因为平时使用的避孕套内含有杀精子物质,可导致精子死亡。
精液常规检查常规检查是精液检查中最主要的内容,一般包括精液颜色、精液量、精液液化时间、精子密度、精子1小时存活率、精子活力、畸形精子百分比、精液中白细胞数等。
精液颜色正常精液的颜色呈透明灰白色,如果禁欲时间长,可呈淡黄色,生殖道有炎症时呈黄色甚至精液中有血液。
精液量每次排精量2ml-6ml,但受排精频率及次数的影响。
精液量少于1ml/次称为精液量减少,精液量多于6ml/次称为精液量过多,这些都是异常情况。
精液液化时间精液刚排出体外时呈凝胶状态,经过5-30分钟会变成液体状态,这一过程称为液化。
精液的液化需要有一系列蛋白水解酶的参与,黏稠而且不液化的精液,常见于有前列腺或精囊疾病的患者。
精液呈弱碱性,pH值在7.2-7.8之间,如pH<7则偏酸,pH>8则偏碱,均会使精子功能受到限制。
精子密度精子密度是指每毫升精液中含有的精子数量,正常每毫升精液中精子数量在2000万以上,如少于2000万/ml属于少精症,就会影响生育。
精子1小时存活率排精后1小时内活动精子的百分比应不小于60%。
精子顶体酶活性检测对诊断男性不育症的价值分析
精子顶体酶活性检测对诊断男性不育症的价值分析发布时间:2022-07-27T02:34:42.512Z 来源:《医师在线》2022年4月7期作者:邓颖芸韦海燕覃宣富[导读]邓颖芸韦海燕覃宣富(广西河池市人民医院;广西河池547000)【摘要】目的:探究男性不育症诊断中应用精子顶体酶活性检测的临床价值。
方法:选择各种原因导致的男性不育症患者组成实验组,病例数300例,时间2021年1月至2021年8月,其中100例精液参数异常纳入实验1组,剩余100例精液参数正常纳入实验2组,另选同期健康体检可生育男性100例组成对照组,比较不同组别受检者精子顶体酶活性检测结果(精液顶体酶活性)。
结果:实验1组精液顶体酶水平显著低于实验2组和对照组,实验2组也显著低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。
实验1组精液顶体酶活性低于实验2组和对照组,实验2组和对照组比较精液顶体酶活性明显更低,差异均有统计学意义(P<0.05)。
结论:在男性不育症临床诊断中应用精子顶体酶活性检测具有很高的价值,可以通过精液顶体酶活性检测对男性不育症患者精子受精能力进行评价,且可对不育症患者精液参数异常情况进行定性,为男性不育症诊断提供准确依据,可进行推广使用。
【关键词】“男性不育症”指的是夫妇同居一年,在不采取避孕措施且性生活正常的条件下,无法使女性怀孕的疾病。
导致男性不育症的原因很多,一般情况下无法进行病因明确,常见的致病因素包括先天因素、内分泌异常、感染等[1]。
尽早确诊、尽早开始治疗可以获得理想的治疗效果。
顶体酶存在于精子头部顶体内膜与赤道膜之间。
当精子与卵母细胞结合后,精子头部发生顶体反应,顶体外膜破裂,顶体酶释放。
顶体酶是受精过程中重要的蛋白水解酶,可溶解卵母细胞周围的放射冠和透明带,使精子穿过透明带与卵细胞融合完成受精。
精子顶体酶活性降低可影响精子穿透卵母细胞透明带,从而导致不育。
除精子自身质量之外,严重的生殖系统感染,也可造成精子顶体酶活性降低。
浅析男性不育症精液的临床检验
浅析男性不育症精液的临床检验(作者:___________单位: ___________邮编: ___________)男性不育症同其他疾病的诊断一样,临床检验仍然是男性不育症诊断的重要内容,从中可以得到很多信息和资料,以有助于诊断、治疗的选择和预后的估价。
根据目前男科学的情况,应作出极大努力来提高男科学的诊断水平。
这些检验方法归纳起来可分下列几类。
1精液常规分析和CASA精液常规分析对大部分男科学实验室和医院检验室来说是了解男性生育力的主要检测项目,也具有一定的实用价值,但以下几方面值得引起注意。
1.1要严格规定禁欲时间严格的禁欲时间是精液常规分析资料有无参考价值和资料有无可比价值的重要先决条件。
因禁欲时间的长短不但能影响精子的数量,而且也会影响精子的活动力及精子的其他参数的精确性。
一般规定为3~5天,笔者认为作为精确的科学资料或要衡量治疗的效果,则应更严格,如规定禁欲时间为5天。
但有不少情况是根本不考虑这一因素,或禁欲时间相差甚大。
1.2要注意精液标本的采集精液标本采集完整与否会明显影响精液标本分析的结果,因此精液标本的采集一定要严格,医生要给病员必要的说明和方法指导,提倡手淫法采精,采精宜在实验室内进行,并要有一良好的采精环境。
标本收集瓶不仅应消毒,而且大小应有一定规格,瓶口不宜太小。
1.3精液常规分析要有严格的操作方法和认真的工作态度精液常规分析不是一个很难掌握的技术,但不严格操作和不认真的工作态度,所测结果会很不正确,有时甚至可把精子数完全正常的精液标本误诊为无精子症。
1.4要科学评价精液分析结果精液常规分析结果有两种情况:一种是完全正常;另一种是精液常规结果呈现或轻或重、或多或少的异常。
要科学地分析和评价这些结果,不能由于精液常规正常便得出该男子具有生育能力的结论,因为精液常规所能反映的参数是有限的,这时应继续采用更先进的检测方法以发现可能存在的异常,这实际上涉及到所谓的原因不明性男性不育症。
性医学男性不育症的诊断与治疗探讨
性医学男性不育症的诊断与治疗探讨男性不育症是指男性因种种原因导致无法自然受孕的状况。
现代生活压力及环境污染等因素使男性不育症发病率逐年上升,给很多夫妻带来了困扰。
为了解决这一问题,性医学领域对男性不育症的诊断与治疗进行了深入探讨。
一、男性不育症的诊断男性不育症的诊断是通过一系列的检查和评估来确定的。
常见的诊断方法包括:1. 精液分析:精液分析是男性不育症诊断的第一步。
此检查用于评估精液中的精子密度、数量、运动能力和形态等指标。
根据国际卫生组织的标准,正常精液应包含数量足够的健康活动的精子。
2. 精子功能评估:通过评估精子活力、渗透力和精子中的糖类酶、酸性磷酸酶等酶活性,可以进一步了解精子是否具备受精能力。
3. 男性激素水平检测:检测男性激素水平,如睾酮、垂体促性腺激素、卵泡刺激素等,有助于了解男性生殖系统的功能状态。
4. 精液培养和病原体筛查:通过对精液的培养和病原体筛查,可以确定是否存在感染或炎症等问题,同时也有助于确定治疗方案。
二、男性不育症的治疗根据男性不育症的具体原因,可以采用不同的治疗方法。
常见的治疗方式包括:1. 药物治疗:药物治疗是治疗男性不育症的常用方法之一。
根据不同病因,可以使用激素类药物、抗感染药物、抗氧化剂等进行治疗。
例如,对于由垂体功能减退引起的不育症,可以通过补充相应的激素进行治疗。
2. 辅助生殖技术:辅助生殖技术是治疗男性不育症的重要手段。
常用的辅助生殖技术包括人工授精、体外受精和胚胎移植等。
这些技术可以帮助很多夫妻实现生育愿望,尤其是在精液质量较差或精液中含有特定病原体时。
3. 手术治疗:对于一些结构性问题,如阻塞性无精子症、输精管阻塞等,经过手术治疗可以恢复男性生育能力。
常见的手术方式包括输精管吻合术、睾丸活检等。
4. 生活方式调整:生活方式对男性不育症也有很大影响。
调整饮食、避免吸烟和酗酒、保持适当的运动等,有助于提升精子质量和数量。
总结性医学领域对男性不育症的诊断与治疗进行了深入研究,为不孕不育夫妇提供了有效的解决方案。
精液中三种生殖道支原体的检测及其与男性不育症的关系
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( 收稿 :0 0l- 1 2 0 10 )
精 液 中三种 生殖 道 支 原体 的检 测及 其 与男性 不 育 症 的关 系
尹 秋 生 韩 玲 霞 刘 玉 娥 程 友 琴 周 书 明
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精子DNA碎片率及顶体酶活性对男性不育的诊断价值
健康域公卫引言男性不育是高发于男性群体的生殖系统疾病,是指夫妻生活正常,且无避孕措施,因男性因素造成不育症状。
其致病因素与性病史、吸烟饮酒和环境污染有关,多需要通过精液质量检测诊断该病,而后开展针对性治疗[1]。
DFI (DNA 碎片指数)是精液质量的常用诊断指标,可以评估疾病程度。
顶体酶活性可以判断精子活性,其指数降低则精子具有较差的穿越力,进而降低精子质量。
现阶段,以上两项指标是男性不育的常规诊断指标,便于疾病的早期治疗。
为此,本研究选取1727例男性筛查者,分析以上两项指标的诊断效果。
1资料与方法1.1一般资料选择2016年6月~2021年12月入院诊断的1727例男性筛查者,其中男性不育患者481例。
根据DFI 分组,一组306例,不育时长为9个月~3年,平均(1.24±0.48)年。
二组113例,不育时长为10个月~3年,平均(1.30±0.44)年。
三组35例,不育时长为11个月~4年,平均(1.30±0.34)年。
四组27例,不育时长为8个月~4年,平均(1.51±0.33)年。
根据顶体酶活性分组,≤48.2U/106为27例,不育时长为8个月~3年,平均(1.17±0.66)年;>48.2U/106为416例,不育时长为10个月~4年,平均(1.21±0.69)年。
经假设检验并无差异,>0.05。
1.2方法根据精液检查与处理实验室手册对精液进行常规检测,用改良的牛鲍氏计数板测量精液密度,采取手工法计数。
用快速染色法(Diff-Quik )测定精子形态学特点,正常形态4%为参考值的具体下限。
所有操作人员经过系统化培训以后上岗,具备熟练的操作能力。
顶体酶活性检测采取顶体酶试剂盒,根据改良后的Kennedy 法实施检测,将精液标本混匀以后进行计数操作,使每个反应管内部的精子个数大概是7.5×106个,对各个标本设置对照以及反应管,然后添加反应液以及抑制剂。
精子膜检测与男性不育的相关性研究
S t u d y o n c o r r e l a t i o n b e t we e n s p e r m me mb r a n e d e t e c t i o n a n d ma l e i n f e r t i l i t y LI ANG L t — h o n g, LI ANG J i e — l i n g。 TAN
S h a n  ̄h u a, W UXi a o 一 训e , TAN Z h e n — h u a, S U Xi a o — me i ( Z h a o q i n gFi r s t Pe o p l e S Ho s p i t a l , Zh a o q i n g, Gu a n gd o n g 5 2 6 0 2 0, Ch i n a )
、
[ Ab s t r a c t ] Ob j e c t i v e To s t u d y t h e c o r r e l a t i o n b e t we e n t h e s p e r m me mb r a n e d e t e c t i o n a n d ma l e i n f e r t i l i t y .
检 验 医学 与 临床 2 0 1 3年 3月 第 1 O卷 第 6期
L a b Me d C l i n , Ma r c h 2 0 1 3 , Vo 1 . 1 0 , No . 6
・
・
6 57 ・
论 著 ・
精 子膜 检 测 与 男 性 不 育 的 相 关 性 研 究
的不育患者精液标本 1 0 2例 为研 究 组 ; 并 同 时收 集 同 时段 来 检 查 的 正 常 生 育 者 精 液 标 本 1 0 0例 为 对 照 组 , 采 用 伊
男性精液检测结果与不育原因探讨
男性精液检测结果与不育原因探讨摘要] 目的通过对本地区不育男性不同年龄段精液检测结果的分析,了解男性不育症的病因及精液质量状况。
方法采用人工常规分析结合SQA精子质量分析系统,对2017年7月~2018年12月来我院就诊的1025例男性不育患者的精液进行检测,并按≤30岁及>30岁两个年龄组对异常结果进行统计分析。
结果在1025例精液标本中,各项检查指标均在正常范围的205例(占20.00%),其余820例(占80.00%)的标本有一项或多项指标异常。
两个年龄组测定结果均值均低于正常判定标准的为精子存活率及精子活动力;异常检出率前三位为:精子存活率(54.83%)、精子活动力(49.85%)及液化时间异常(42.34%);两个年龄组比较,>30岁组液化时间异常检出率为49.27%,明显高于≤30岁组的39.81%,差异有统计学意义(P<0.05),其他各项检查指标的异常检出率两个年龄组比较差异无统计学意义(P>0.05)。
结论精液常规检测中任何指标异常都可能导致不孕,除液化时间外年龄对其他检测指标无明显影响,精子存活率降低、活动力下降及液化时间异常是本地区男性不育的主要原因。
[关键词] 男性;不育;精液检测;年龄;异常检出率[Abstract] Objective To analyze the semen test results of different age groups of infertile men in this area, so as to understand the etiology and semen quality of male infertility. Methods the semen of 1025 male infertile patients who came to our hospital from July 2017 to December 2018 was detected by using the artificial routine analysis combined with SQA sperm quality analysis system, and the abnormal results were statistically analyzed according to the age groups of ≤ 30 and > 30. Results among the 1025 semen samples, 205 (20.00%) were in the normal range, and 820 (80.00%) had one or more abnormalities. The results of the two age groups were lower than the normal criteria for sperm survival rate and sperm motility; the top three abnormal detection rates were: sperm survival rate (54.83%), sperm motility (49.85%) and abnormal liquefaction time (42.34%); compared with the two age groups, the abnormal detection rate of liquefaction time in the > 30-year-old group was 49.27%, significantly higher than 39.81% in the ≤ 30-year-old group, with statistical differences There was no significant difference between the two age groups (P > 0.05). Conclusion any abnormality in semen routine test may lead to infertility. Age has no significant effect on other test indexes except liquefaction time. The main reasons of male infertility in this area are the decrease of sperm survival rate, motility and liquefaction time.[Key words] male; infertility; semen test; age; abnormal detection rate精液分析是评估男性生殖能力的重要依据,对男性不育症的诊断、治疗及疗效的观察具有非常重要的意义。
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常用精子功能检测与男性不育
国家人口计生委科研所/世界卫生组织生殖合作研究中心
谷翊群
不育症患病率各国报道不尽相同,WHO研究结果表明: 发达国家患病率约在5%-8%,发展中国家亚洲和中东地区较低,约 3.0%-4.8%;非洲一些国家高达10%-30%。
我国患病率约为1-5%。
按8%计算,全世界约有5000-8000万人有生育问题,每年新增200万对不育夫妇,而且这数目还在增加。
在不育夫妇中,男性生殖能力异常的约占50%。
男性生育力的判断缺乏金标准。
精液常规分析是临床诊疗男性不育症的最常用、最简便、直观的辅助检查及判断男性生育力的实验室指标。
临床研究资料显示,精液中的精子浓度、精子活力及活精子数与自然妊娠率有着明确的统计学上的相关性。
这些指标参数只是在一定程度上反映出达到自然妊娠所要求的最低精子质量,不能反映精子功能及顶体激活、顶体反应、精卵识别及受精过程诸多环节中是否功能正常。
因此,有必要建立或选用特殊实验对精子功能进行测定,这些包括:精子存活率、精子膜完整性检测、精子顶体完整性、精子与透明带结合试验、精子表面结合抗体检测、附睾功能检测、精子细胞核成熟度与DNA损伤检测、血清抑制素B测定等。
精子存活率:用1%伊红、伊红-苯胺黑染色或低渗肿胀实验来鉴定。
显微镜下计数200个精子,精子存活率应大于58%。
顶体完整性检测:常用方法为荧光标记的豌豆黄凝集素 (PSA) 法。
PSA与顶体内容物结合,在荧光显微镜下,正常完整的顶体占镜子头部的1/2~3/4呈现很强的荧光。
精子与透明带结合试验:目前透明带主要来源于IVF/ICSI失败的卵子。
应使用与透明带竞争结合率的方法。
也可使用半透明带竞争结合率的方法,将一个卵平均切割成两半,一半与患者精子培养,另一半与正常对照的人精子培养,并计算与比较结合百分率。
精子包被抗体检测:可用免疫珠试验方法或混合球蛋白试验(MAR)进行检查。
免疫珠是将兔抗人免疫球蛋白通过共价结合在聚丙烯酰胺微粒上。
这一试验可同时检测IgG和IgA抗体的存在。
至少50%的活动精子被免疫珠所包被才考虑有临床意义。
精子细胞核成熟度与DNA损伤检测:丫啶橙(AO)染色法可用来检测精子核的DNA损伤或功能状态,是常用检测方法之一。
AO是荧光染料双链DNA破坏后变成单链而失去正常功能。
AO与双链DNA染色后即成绿色,与单链DNA染色后即成黄或红色。
用荧光显微镜计数200个精子,计算正常DNA精子百分率或红色与红绿总和的比率(DFI,DNA碎片指数)。
荧光原位杂交(FISH)可用于检测人精子性染色体非整倍体畸变。
也可采用单细胞凝胶电泳用于检测人精子DNA链断裂。
当前所有精子功能实验对预测男性生育力的准确性有限,需要进行更多的研究来探讨精子功能异常与男性不育的关系、明确男性不育症的病因诊断及治疗和提高男性生育力的预测能力。