植物生理实验课件

【实验原理】
根据物理化学溶液理论——拉乌尔冰点下降原理，溶液单位 体积中所溶解的溶质颗粒总数相同，则引起冰点下降的数 值相同。利用冰点渗透压计测定一定的冰点下降值对应的 渗透浓度单位ic，代入公式计算。
【仪器与用品】
新鲜植物材料；
冰点渗透压计、液氮罐、注射器、纱布、吸水纸、Eppendorf 管
【方法与步骤】
[思考题]
植物营养必须的大量元素和微量元素有哪些
植物的大量元素和微量元素缺乏时的表现症状有什么 不同 如何做好植物的缺素实验
实验6 叶绿体色素的提取、分 离及理化性质的鉴定
【实验原理】
叶绿素是一种双羧酸的酯，可与碱发生皂化作用，产 生的盐能溶于水，可用此法将叶绿素与类胡萝卜素分开。 叶绿素与类胡萝卜素都有光学活性，表现出一定的吸收光 谱，可用分光镜检查或用分光光度计精确测定。叶绿素在 光照下可产生暗红色的荧光；叶绿素的化学性质很不稳定， 容易受强光的破坏，特别是叶绿素与蛋白质分离后破坏更 快；叶绿素中的镁可被氢离子取代而生成褐色的去镁叶绿 素；加入铜盐后，去镁叶绿素则成为绿色的铜代叶绿素， 后者很稳定，在光下不易破坏，故用此法制作绿色植物的 浸制标本。
【仪器与用品】
洋葱或紫鸭趾草；
显微镜 载玻片 盖玻片 镊子 刀片 蔗糖 移液器
【方法与步骤】
配制各种浓度的蔗糖溶液→剥取洋葱鳞茎（或紫鸭趾 草叶片）表皮→迅速投入各种浓度的蔗糖溶液中→低 倍显微镜观察并记录质壁分离的相对程度→确定使细 胞发生初始质壁分离的浓度→计算渗透势
【思考题】
1.测定并计算不同植物组织的渗透势。 2.为什么选用有色素的洋葱鳞茎外表皮实验效果较好？
实验2 植物组织水势的测定 （小液流法）
【实验原理】
把等量的植物组织放入一系列具浓度梯度的蔗糖溶液中， 利用小液流法寻找植物组织放入后浓度不变的蔗糖溶液， 计算出此蔗糖溶液的渗透势即等于所测植物的水势。
【仪器与用品】
菠菜 试管 毛细滴管 移液器 剪刀 镊子 蔗糖 甲烯蓝
【方法与步骤】
另取一部分称重，放于50ml烧杯中，10%硝酸5ml于电 热板上加热熔解，定容于100ml容量瓶中。
原子吸收分光光度计测定其Ca、K、Mg、Fe、Zn、Mo含 量（同时要测定和元素的标准曲线）
观察的现象描述及计算
【思考题】
灰分元素在植物样品中的含量是怎样的？ 各灰分元素的化学反应原理是什么？
实验3 印迹法测定气孔开张度
【实验原理】
有些有机溶剂涂在叶片表面，失水很快形成一层 薄膜，上面就印在叶片表面的保卫细胞与气孔的 轮廓。在显微镜下可观察到，结合显微测微尺可 测其开张度大小。
【仪器与用品】
植物叶片
显微镜 显微测微尺 载玻片 盖玻片 牛皮胶(或火 棉胶)
【方法与步骤】
实验1 植物组织渗透势的测定
【实验原理】
当植物组织细胞内的汁液与其周围的某种溶液处于渗透平衡 状态,细胞压力势为零时,细胞汁液的渗透势就等于该溶液的 渗透势。该溶液的浓度称为等渗浓度。
设计并配制一系列具浓度梯度的蔗糖溶液，通过实验找出使 细胞发生初始质壁分离的浓度，代入公式计算可得植物组织 的渗透势。
配制牛皮胶溶液→在叶的下表皮涂胶→成膜后取一小 片→镜检→测量
【思考题】
测量不同生境下、不同植物叶片的气孔开张度，比较 后说明原因。
实验4 植物灰分元素的定性鉴定 和定量分析
【实验原理】
植物风干样品在高温灼烧后，剩下灰分 灰分元素发生特定的化学反应后显现出颜色及结晶
灰分元素在高温下吸收特定光谱的能量发生能级的 跃迁，可用原子吸收分光光度计定量测定
配制一系列蔗糖溶液→各放入等量植物组织→加入次 甲基蓝粉，染色→毛细管移取蓝色小液滴，放入未染 色同浓度的蔗糖溶液中→找出液滴不动的蔗糖溶液→ 计算蔗糖溶液的渗透势＝所测植物组织的水势。
【思考题】
用小液流法测定植物组织水势与用质壁分离法测定植 物细胞渗透势都是以外界溶液的浓度算出的溶质势为 根据，它们之间的区别何在？
【仪器与用品】
1.仪器 大试管或展层缸，台天平，研钵，量筒，烧杯，漏 斗，软木塞，滤纸，毛细滴管，剪刀，分液漏斗，移液管， 分光计
取材1-2克新鲜植物材料洗净包在锡箔纸中，放入液氮或 低温冰箱中将细胞杀死→取出剪碎放入注射器溶冰，用加 压法将胞液挤出，存于Eppendorf管待测→取20微升待测 液于冰点渗透压计的测定管测定→提出探头，擦拭后可继 续下一个样品的测定。
【思考题】
冰点下降法与质壁分离法的原理有何不同？
西昌学院基础生物植物生理学课堂教学中的一个重要环 节，不仅与课堂讲授的基本理论、基础知识相 结合，而且要使学生学会植物生理学的基本实 验方法，并在科学态度、实验技能技巧、独立 工作能力、理论联系实际能力等方面获得基本
的训练。
二、基本要求
通过教学，要使学生学会植物生理学的基本实验 方法、技术和设计思路，掌握植物生理学基本原 理的验证方法和定量测定植物体内发生的生理生 化变化，并初步具有完成综合性、设计性实验的 能力。每次实验结束，学生均需写出一份实验报 告。
【仪器设备及试剂】
植物样品 高温电炉、显微镜、原子吸收分光光度计、坩埚等， 10%硝酸、5%盐酸、5%硫氰化钾等（见实验指导） 各元素的标准溶液
【实验步骤】
植物样品5g放在坩埚（已称重）中，在灰化炉中缓慢 升温至400度，灰化1小时，冷却，称重。
取出一部分进行灰分元素的定性分析。详见实验指导 45页
原子吸收分光光度计的工作原理以及他可以测定多 种灰分元素的技术关键是什么？
实验5 植物的无土培养和缺素症状
[实验原理]
水溶液培养
缺乏某种元素会表现出特定的缺素症状
[仪器设备及试剂]
离子交换器 培养罐 玻璃房 漂浮盘、恒温培养箱、光照培养箱、刻度移液管、 通气泵等
[实验操作]
水培液所需的化学试剂（化学纯） 培育玉米苗 配制营养储备液 配制完全培养液和缺素培养液 完全培养液及缺素培养液培养玉米苗 观察记载、根据实验结果描述缺素时所表现的典型症状， 并分析其原因。