微生物鉴定与药敏试验流程

微生物鉴定与药敏试验流程

1、实验原理

（1）微生物鉴定原理

微生物鉴定卡中含有几十种生化反应培养基，当微生物在培养基中代谢基质时导致pH值的改变而使指示剂发生变化；同时微生物生长产生各种酶，可与相应的荧光标记底物发生反应，使荧光强度发生改变。仪器通过检测这些变化得到待检微生物的生化特征，自动与数据库内几千种菌株的生化参数进行比对分析，并自动计算得出鉴定结果。

（2）药敏分析系统工作原理

药敏分析系统使用药敏测试板（卡）进行测试。将抗生素微量稀释在条孔或条板中，加入菌悬液孵育后放入仪器或在仪器中直接孵育，仪器每隔一定时间自动测定细菌生长的浊度，或测定培养基中荧光指示剂的强度或荧光原性物质的水解，观察细菌的生长情况。得出待检菌在各药物浓度的生长斜率，经回归分析得到最低抑菌浓度MIC值。

2、实验步骤

（1）取洁净菌液管，加3mL 0.45%的无菌盐水，将纯培养的待检菌配制成浓度为0.5~0.63麦氏单位的菌悬液，将菌液管放入带芯片的专用试管架，在紧挨待检菌液管的位置放入一空的菌液管（供药敏试验用）。

（2）打开检验信息录入工作站电源，仪器自检完毕后按F2键，仪器进入操作程序。将试管架放入工作站，芯片中的数据自动清零。

（3）手工输入待检菌样品编号，扫描输入鉴定卡和药敏卡的ID号，将鉴定卡和药敏卡放入相应的槽位，进样管插入相应的菌液管中。取下试管架，关闭工作站电源。

（4）打开鉴定仪，仪器自检完毕后自动进入检测程序，按要求设定好参数。（5）进样指示灯为绿色长亮时，打开进样盖，将试管架放到传送船上，关好进样盖。仪器自动检测并读取样品信息，自动完成稀释、进样、封口程序，并将卡片送入孵育监测单元。传送船回到进样口，指示灯闪烁时，取出试管架。

（6）由计算机控制的读数器定时对卡片进行扫描并读数，动态记录反应变化。一旦卡内的终点指示孔达到临界值，则表示整个实验已完成。

（7）微生物鉴定及药敏分析完成后，检测数据自动传入数据管理系统进行计算分析，结果经人工确认后即可打印报告。

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