化学发光技术手册[1]
化学发光介绍 ppt课件
感染性疾病检测
乙肝五项标志物的检测 2、HBsAb 对HBsAg所产生的一种保护性抗体 临床意义： （1）乙型肝炎的恢复期； （2) HBV既往感染; （3）乙肝疫苗接种者
感染性疾病检测
乙肝五项标志物的检测
糖类抗原125（CA125）
临床意义：主要见于浆液性卵巢癌、上皮细胞卵巢癌、子宫内膜 癌。其他非卵巢肿瘤如宫颈癌、乳腺癌、胰腺癌、肺癌、肝癌、结 肠癌、良性卵巢瘤、子宫肌瘤等也可见CA125升高。非恶性肿瘤如 子宫内膜异位症、盆腔炎、卵巢囊肿、肝炎、肝硬化等也有不同程 度的升高，但多为中轻度升高或一过性升高。
感染性疾病检测
戊型肝炎病毒（HEV）检测 是单链RNA病毒，肝炎病毒科，肝炎病毒属，急性感染死亡率高，
需引起重视。
HEV-IgM 可作为急性感染或近期感染的诊断指标 HEV-IgG 可作为既往感染或HAE感染恢复期的指标
感染性疾病检测
人类免疫缺陷病毒（HIV）检测
人类免疫缺陷病毒是两条相同的RNA构成的RNA病毒
唐氏筛查 心血管及心肌标志物 高血压辅助诊断 糖代谢 骨代谢 贫血类 炎症 药物浓度
肿瘤标志物
肿瘤标志物的定义：在肿瘤发生和发展过程中，由肿瘤细胞合成、 分泌或由机体对肿瘤细胞反应而产生的一类物质。
存在：一般存在于血液、尿液、其他体液、细胞和组织中
检测方法：生物化学、免疫学和分子生物学
作用：肿瘤的辅助诊断、鉴别诊断、治疗监测及疗效评估、预后 判断、复发监测及高危人群随访等。
•化学发光免疫检测介绍
主要内容
免疫学检测方法介绍 感染性疾病检测 肿瘤标志物检测 甲状腺及甲状旁腺功能检测 肝纤维化检测 肾功能检测 激素检测 自身抗体检测 优生优育
化学发光SOP
第 1 页全自动化学发光免疫分析仪标准化操作规程第1版第 1次修改生效日期：2012年1月1日标题一. 封面雅培I 1000全自动化学发光免疫分析仪标准化操作规程（SOP）文件编号01是否受控是/否持有人签字XXXXXXXX医院2010年3月1日批准人质量负责人编写人生效日期第 2 页全自动化学发光免疫分析仪标准化操作规程第1版第 1次修改生效日期：2012年1月1日标题二 . 目录一 . 封面 1二 . 目录 2三. 标本的采集及保存 3四. 检验标准化操作规程 4五. 各项试剂 10批准人质量负责人编写人生效日期第 3 页全自动化学发光免疫分析仪标准化操作规程第1版第 1次修改生效日期：2012年1月1日标题三. 标本的采集及保存一、标本的采集及保存1.1 原始样本类型血清（真空干燥采血试管或带分离胶的真空采血管分离的血清）、血浆或全血（应用抗凝剂为EDTA-K3）1.2 样本量单次全套乙肝血清标志物检测需全血样本5ml1.3 患者准备•严禁使用接受过鼠单克隆抗体诊断或治疗的病人样品,因其体内含有人抗鼠抗体（HAMA），当这些样品在使用含鼠单克隆抗体分析试剂进行测试时会引起值假的升高或降低。
•对于一些有药物干扰的分析，注意避免（详情参阅试剂说明书）1.4 标本采集方法一般采用静脉采血1.5 标本采集要求•避免过度溶血，必须在无菌条件下采集•确保离心的速度（10000转/分钟）和时间（10分钟），避免颗粒物质的干扰•避免样品的反复冻融，融解后的样品需低速震荡或轻轻颠倒混匀以获得稳定的结果，当样品中有颗粒物质，红血球或浑浊物时必须离心使其澄清后再进行测试1.6 样品的稳定期和保存•上机3小时内完成检测•2︒C —8︒C ，标本可保存1~14天•如长期保存，必须将血清分离出来，冷冻保存（-10︒C或更冷）•-20︒C可稳定3个月。
标本可冻融5次。
•注意：冻融过的标本、有沉淀的标本、反复测定过的标本使用前需离心。
化学发光仪使用说明
Promega化学发光检测仪使用说明
1．打开仪器电源，同时打开电脑上操作软件。
2．在仪器操作面板上选择所需运行程序，点击进入。
3．放入样品，点击“Measure”。
测得读数会在仪器和操作软件上均有显示。
以Promega公司双荧光素酶检测试剂盒为例：
1. 试剂准备
按照说明书配制PLB细胞裂解液、LAR II检测液、
Stop&Glo检测液。
2. 样品准备
按照说明书使用PLB细胞裂解液裂解细胞，取
20ul细胞裂解液
3. 检测过程
a) 在1.5ml离心管中加入20ul细胞裂解液，然
后加入100ul的LARII溶液，混合后放入发光检
测仪检测第一次发光值；
b) 然后加入Stop&Glo检测液，终止第一次发光，
同时开始第二次发光，混合后放入发光检测仪检
测第二次发光值。
4.测定完毕后，取出样品，保存数据，关闭电源。
注意事项：
（1）仪器盖子上含有电器元件，开关请轻开轻关；
（2）该仪器请保持干燥，不要泼溅任何液体，如不慎滴入液体，请立即擦干；（3）测定完毕后一定要记得保存数据；
（4）仪器如果出现任何故障，请不要擅自修理，请及时报告管理员，通知相关专业维修人员。
化学发光免疫分析试剂操作规范
化学发光免疫分析试剂操作规范化学发光免疫分析试剂操作规范化学闪光免疫分析试剂操作规范一、试剂盒的保存1.保存条件:1.1试剂盒应放置于2~8℃冰箱中存放。
1.2试剂盒在取用过程中禁止颠倒,以避免试剂被污染。
1.3有特殊要求的试剂应严酷按照操作说明书要求的保存条件保存。
2.保存时间:2.1未开封试剂盒于2~8℃保存时,可在有用期以内正常使用。
2.2已开封试剂盒每次使用后需及时放回2~8℃冰箱内保存,应尽可能在开封后1个月内使用。
(按说明指示的开封的半制品有用期计算,尽量在半制品最短的有用期内用完)一、标本的处置惩罚以及保存1.标本收罗1.1.要注意避免出现严重溶血。
血红卵白中含有血红素基团,其有类似过氧化物的活性,因此,在以HRP为标记酶的酶促化学闪光测定中,如血清标本中血红卵白液体浓度较高,则其就很容易在温育过程中吸附于固相,从而使后面加入的HRP底物反应值偏高。
1.2.样本的收罗及血清分离中要注意尽量避免细菌污染,一则细菌的生长,其所分泌的一些酶可能会匹敌原抗体等卵白产生分解作用;二则一些细菌的内源性酶如大肠杆菌的β-半乳糖苷酶自己会对用相应酶作标记的测定要领产生非特异性干扰。
1.3.常规项目对标本收罗的要求:晨起空腹、安静状态下、或者休息半小时后收罗。
1.4.如无特殊说明,源德公司试剂盒合用的标本类型均为血清;故采血时应选用非抗凝采血管。
采血后应尽早离心,将血清分离后单独保存。
1.5.建议接纳真空采血管及蝶形针具,以免直接接触血液。
收罗器皿最好为一次性无菌密闭器皿。
采血后将真空采血管颠倒、轻轻混匀3~4次,不宜过猛,以避免溶血。
1.6.标本收罗时间及患者准备根据检测项目不同对标本的收罗要求也不相同,具体内部实质意义参见试剂盒说明书。
1.6.1激素:可的松峰值在早晨4~6点之间;生长激素、促黄体激素(LH)以及促卵泡激素(FSH)均以阵发性方式释放,须在密切相连的时间间隔内采取数份血样本,以资中心值为测定值。
化学发光仪器操作方法
化学发光仪器操作方法
化学发光仪器是一种常用的实验仪器，用于检测和测量物质的发光性质和发光强度。
以下是化学发光仪器的一般操作方法：
1. 准备工作：根据仪器的使用说明书和实验要求，检查仪器是否正常工作，并确保仪器中的发光试剂和样品符合实验要求。
2. 样品处理：根据实验要求，将样品进行必要的处理和制备。
例如，如果需要检测荧光物质的发光性质，可以通过溶解、稀释等方法将样品处理成适合测量的形式。
3. 仪器设置：根据实验要求，设置合适的仪器参数。
这些参数包括激发光源的波长和强度、发光检测器的灵敏度等。
通常，仪器会提供一些预设的程序和参数选择，可以根据需求进行调整。
4. 校准和基线测量：在进行实际测量前，通常需要进行校准和基线测量。
校准可以通过使用标准溶液或已知浓度的样品来确定仪器的响应特性和灵敏度。
基线测量是指在没有样品时进行的测量，用于确定背景发光或仪器误差的影响。
5. 测量操作：将处理好的样品放入仪器中，并按照实验要求进行测量。
测量过程中需要注意避免外界光源和干扰物对测量结果的影响。
通常，仪器会提供自动记录和显示测量结果的功能。
6. 数据处理和分析：根据实验要求和需要，对测量结果进行数据处理和分析。
这包括计算发光强度、建立标准曲线、进行定量分析等。
7. 仪器维护：使用完毕后，应对仪器进行适当的清洁和维护，以确保仪器的长期稳定工作。
需要注意的是，具体的化学发光仪器的操作方法会根据不同的仪器型号和实验要求有所差异，因此在操作之前，还应详细阅读仪器的使用说明书和实验指导。
化学发光仪英文软件操作手册
Luminoskan Ascent化学发光仪软件操作手册1.安装将随机附送的软件光盘插入光驱，确认默认的安装路径及选择正确的仪器类型(图1)，按提示输入单位名及任意的序列号（图2）,一路按”next”进行安装。
完成后在桌面上自动生成快捷图标。
如图（1）,(2)所示。
图1图22.操作双击图标打开软件，点“session”下拉菜单，选择“new”编新程序或“open”打开已有的程序。
如图3所示。
选择荧光或化学发光的检测方法图3按“new”编新程序，先选择酶标板类型，一般选择第一个选项。
如图4所示。
图4点击general，分别有area definition,鼠标点击可用来定义检测的范围，如图5。
按下代表不选中，然后用鼠标拖拉按下代表选中，然后用鼠标拖拉图5点击layout,可设置对应于试剂盒的标准品，测试样本，空白和对照等。
设置方法为先用鼠标点击所要设置的位置，下拉”type”菜单，选择所定义的类型，再点击”apply”。
如图6。
图6点击“settings”可设置仪器相关的一些参数。
详细情况可见图7。
图7然后可根据实验的实际情况，按次序设置实验步骤，这些步骤包括“measure(测量步骤)，incubate(温控步骤)，shake(振荡步骤)，dispense(单独分液步骤)，dispense and measure(分液并检测步骤，适合于发光时间极短的反应)等。
如图8。
图8测量步骤见图9。
控制进板控制出板温控步骤，先设置仪器起始温度，如图10。
待仪器达到起始温度再设置“incubate ”。
如图11。
图10图11分液步骤，如图12。
图12振荡步骤，如图13设置温控时间设置温度，需与起始温度一致图13加液并检测步骤，如图14，此步骤是指对每孔先加液，然后马上检测，适合于发光时间很短的实验。
图14设置完步骤后，就可保存程序，如图15。
可指定程序名及保存路径。
设置总振荡时间 振荡开启时间振荡关闭时间设置振荡速度保存键图15最后按“start”开始检测，如图16。
罗氏2010化学发光SOP
罗氏诊断Elecsys 2010SOP文件运行条件ROCHE（罗氏）Elecsys 2010全自动电化学发光免疫分析仪1、环境条件为了确保系统操作的正常运转，应该保证以下的条件：∙无灰尘的、良好通风的环境∙无直接日照∙地面水平(角度：<1/200 º)∙地面足够坚硬能够承受仪器的重量∙温度：18~32摄氏度∙当系统启动时，温度的改变应该小于2度/小时∙屋内湿度：20%~85%∙电源电压没有明显的波动∙在附近没有会产生电磁波的仪器∙有接地的三相电源∙噪音应该小于65分贝2，水质要求∙无菌 (< 10 cfu/ml)，去离子水∙ 1.5 MΩ电阻值 (最大1.0 Ms/cm)∙15-25 磅/英寸2 (0.5~3.5 kg/cm2或 49~343 kpa)安全注意事项尤其要注意以下安全注意事项。
如果忽视了这些安全注意事项，则操作人员可能遭受重伤或致命伤害。
每个注意事项都很重要。
操作人员资格操作应在技术人员的监督之下进行，该技术人员曾于销售代理指定的实验室培训过。
认真遵守操作手册中规定的程序进行系统操作和维护。
本操作手册中没有说明的维护应由经过培训的罗氏技术支持人员进行。
安装要求安装由罗氏诊断代表进行。
客户负责提供必要的设施。
接通仪器在停机后1秒内不要接通电源。
电气安全注意事项对于任何电子设备，可能出现触电的危险。
不要企图接近标有该标签的仪器部件。
不要企图在任何电子室中工作。
只有经过授权的和具备资格的人员才能进行安装、维护和修理。
固体和液体废物与废液接触会导致感染。
在进行维护时，要确保佩带防护设备。
如果废液与皮肤接触，立即用水冲洗并加以消毒剂。
向内科医生咨询。
运动部件在仪器操作期间，不要将手放入仪器中。
接触标本机构、试剂移液机构、搅拌机构或其它机构可造成伤害。
在开始操作或维护/检查之前，要保证关闭并锁紧顶盖。
不要在操作期间，打开顶盖。
在打开顶盖进行维护和检查时，要保证遵循本手册中提供的程序。
化学发光仪的操作规程--
化学发光仪的操作规程--II MPC-1型增敏化学发光仪操作程序[目的]规范仪器设备的操作程序，保证发光仪的正常运转[适用范围]本实验室操作[操作人员]本实验室人员[操作步骤]1．插上隔离电源，打开隔离电源键，打开发光仪后面的电源键，然后再打开电脑主机2．双击桌面上的“亮精灵免疫分析软件”，输入用户名yuande 密码 yuande按ENTER进入软件3.任选一个检验批号进入软件4.在病人信息管理界面下,输入病人相关信息5.在检测界面下,按照加样的顺序设定孔位属性.6.把实验完成的微孔板放到发光仪内,启动软件进行测定7.测试完毕后保存数据,然后在病人管理信息界面读取化验结果8.打印化验单,检测结束,退出微孔板[仪器的维护]1.仪器表面应保持清洁，不可用有机溶液擦拭，如遇试剂遗洒要及时用纸巾或棉球擦净。
仪器工作时如出现声音异常、震颤等情况发生，应立即关断电源并通知维修人员处理。
仪器使用中突然停电，不要试图强行取出微孔板，待来电后点击或按下“开关仓门”按钮方能取出，如使用场所经常断电，建议使用UPS电源。
2.如果用户剩余的试剂盒人份数已经为零，则主机会停止运行，同时软件也会弹出一个提示对话框。
此时应请尽快购买相应品种的试剂盒并用所附的IC卡更新试剂盒管理信息（见软件说明书）。
[注意事项]该仪器是测量微弱光信号的高灵敏度仪器，因此过强的外界光线干扰将导致仪器发生不可恢复的致命损害。
虽然设计中已经充分考虑了避光问题，但在使用时也应尽量避开直射强光；同时绝对禁止非维修人员开启机箱，以防破坏内部的光密封结构。
1、每次测量时必须确保仓门可靠密闭，如仓门未完全盖好，主机内的检测装置会自动终止仪器的运行，同时软件会弹出一个提示对话框。
此时应检查仓门是否关好，或清除仓门边上夹杂的异物。
如果故障依然无法排除，说明仪器外壳有破损或者光密封设施被破坏，应立即联系维修人员。
2、因外界强电磁场干扰或操作不当出现死机，或偶遇在开关仓门或测定过程中出现机械故障时，软件也会弹出一系列提示对话框。
罗氏电化学发光ECL2010中文操作手册
3.光标移到POS栏。输入所需样本位置号，按ENTER。将样本放入指定位置。
4.如果以多样本盘形式运行，按第一个样本盘的POS，输入样本盘号（0－9），按ENTER。
5.按屏幕上试验项目键进行试验项目的选择。当某一项目被选择，此项目键变蓝色。
释放/拒绝定标：
A.按CALIBRATIONDATA屏幕上的试验键
B.按RALEASE或REJECT
C.按OK
红色:表明定标失败。
8.保养
8.1日常保养
注意不要清洗搅拌器
清洗样本/试剂针(S/R):
在关机状态下手工移动S/R针到方便擦拭的位置用纱布沾70%酒精擦拭针表面
注意:针的尖端部分不能擦拭
擦拭外表面 小心尖端部分
6.如需要，按SAMPLECUPNORMAL键转变成REDUCED而使样本死腔量减少。REDUCED
只是针对样品杯或试管顶部而言。
注:只有当样本稀释液在机,自动稀释功能才有效.按DILUTION FACTOR选择相应稀释倍数
7.按REGISTER键储存当前样本信息。
光标回到SAMPLEID栏。
顺序号被自动累加。
材料准备:
清洗液:SysClean
清洗液容器: SysClean adapter
将9ml左右清洗液倒入清洗液容器
放在系统试剂位3如左图位置:
进入Util-maintenance-liquid flow cleaning-start
完成清洗后将清洗液容器用蒸馏水冲洗干净,仪器废液桶也用次氯酸钠泡洗干净
♥C.按BC♥CARD♥SCAN。SCANNING出现在状态线上。在分析仪未回到STAND－BY
化学发光分析仪使用说明书
化学发光分析仪使用说明书一、产品概述本产品是一种化学发光分析仪，用于定量测量样品中的特定分析物。
该分析仪基于化学发光原理，通过测量样品产生的光信号强度来确定目标分析物的浓度。
本使用说明书将详细介绍该仪器的使用方法和操作步骤，以帮助用户正确操作并获得准确的分析结果。
二、安全警告使用本化学发光分析仪前，请务必阅读本章节内容并严格遵守以下安全要求，以确保操作人员和仪器安全：1. 仅限专业人士操作：本仪器仅适用于熟悉化学实验操作且具备相关知识的专业人士。
2. 电源要求：请使用指定电源提供商提供的电源，并确保电源稳定可靠。
3. 防护措施：在操作过程中，请佩戴防护手套、护目镜等必要的个人防护装备。
4. 样品处理：遵循各种样品处理和废物处理的标准操作规程。
5. 化学品储存：储存和处理化学试剂时，请严格遵守安全操作规程。
三、仪器组成本化学发光分析仪主要包括以下组成部分：1. 主机：包含仪器的核心控制系统和显示屏，用于显示分析结果和操作界面。
2. 试剂仓：用于存放化学试剂和控制试剂加入的时间和量。
3. 样品槽：用于接收待测样品。
4. 光学系统：用于测量样品产生的发光信号。
5. 数据处理模块：用于对测量数据进行处理和存储。
四、使用步骤1. 准备工作：a. 将仪器放置在平稳的工作台面上，并接通电源。
b. 打开仪器主机，待系统自检完成后，进入操作界面。
2. 样品处理：a. 打开样品槽盖，将待测样品倒入样品槽中。
b. 根据操作要求，在试剂仓加入必要的化学试剂。
c. 关闭样品槽盖，确保样品和试剂处于封闭状态。
3. 测量操作：a. 在操作界面选择待测分析物和相应的测量方法。
b. 设置测量参数，如测量时间、波长等。
c. 点击“开始测量”按钮，仪器将自动开始测量过程。
d. 测量完成后，记录测量结果。
4. 数据处理与导出：a. 在操作界面选择数据处理功能。
b. 根据需要选择数据处理方法，如拟合曲线、计算浓度等。
c. 完成数据处理后，选择导出数据的格式和路径。
化学发光法技术概要
对于测定不同浓度的标本，至少在试剂盒标准曲线 范围内能明显区分两者的RLUs。
第十页，课件共有19页
Байду номын сангаас
市场上主要全自动仪器机型及应用（1）
雅培公司
Axsystem: 基于粒子的荧光偏振技术。
Architect系列：基于磁分离的化学发光检测。
拜尔公司
ADVIA Centaur：基于磁分离的化学发光检测。
➢ 抗原-抗体反应
抗体能够特异性识别相对应的抗原，并与之结合，这种反应称之为 抗原抗体反应。
抗原-抗体反应具有特异性、敏感性、可逆性等特点。
➢ 酶促底物发光
将检测试剂中的抗原或抗体用碱性磷酸酶（AP）加以标记，通 过发光底物测定相对光子数（RLUs值），来检测目标抗体或抗 原的浓度。
第二页，课件共有19页
第十九页，课件共有19页
样品加量10µl~200 µl，试剂加量50µl~200 µl， 随检测项目不同而有所增减。
洗涤液加量不小于350 µl。 发光检测恒温为宜。PMT能达到实验所需要求。 带有内置计算浓度功能及校准功能。
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需要解决的关键点（1）
洗涤模块：
洗涤次数？洗涤液种类？洗涤液体积？洗涤是否带 超声？洗涤流速？是否预洗？加液速度？
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化学发光法反应介质
✓ 固相介质：磁珠 ✓ 酶标记物：碱性磷酸酶（AP） ✓ 发光底物：AMPPD
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磁珠
基本材质：Fe3O4/Fe2O3，褐色磁性物质 直径大小：1μm左右
磁珠类型： 分为氨基磁珠、羧基磁珠、苯甲磺酰基磁珠和链霉亲和素 磁珠等四种磁珠
磁珠特性： 不同供应商的不同类型磁珠，亲水性不同，在溶液中 的状态也不同，所需的磁吸时间也不同。磁吸时间过 短，会造成丢磁；磁吸时间过长，会造成磁珠聚集， 不宜分散。
化学发光项目-SOP
一、人绒毛膜促性腺激素β亚单位测定标准操作规程SYXRCYYLAB-MYSOP-02/01二、黄体生成素测定标准操作规程SYXRCYYLAB-MYSOP-02/02三、卵泡刺激素测定标准操作规程SYXRCYYLAB-MYSOP-02/03四、雌二醇测定标准操作规程SYXRCYYLAB-MYSOP-02/04五、非结合雌三醇测定标准操作规程SYXRCYYLAB-MYSOP-02/05六、催乳素测定标准操作规程SYXRCYYLAB-MYSOP-02/06七、孕酮测定标准操作规程SYXRCYYLAB-MYSOP-02/07八、睾酮测定标准操作规程SYXRCYYLAB-MYSOP-02/08九、前列腺特异性抗原测定标准操作规程SYXRCYYLAB-MYSOP-02/09十、游离前列腺特异性抗原测定标准操作规程SYXRCYYLAB-MYSOP-02/10十一、癌胚抗原测定标准操作规程SYXRCYYLAB-MYSOP-02/11十二、甲胎蛋白测定标准操作规程SYXRCYYLAB-MYSOP-02/12十三、皮质醇测定标准操作规程SYXRCYYLAB-MYSOP-02/13十四、总IgE测定标准操作规程SYXRCYYLAB-MYSOP-02/14十五、胰岛素测定标准操作规程SYXRCYYLAB-MYSOP-02/15十六、总甲状腺素T4测定标准操作规程SYXRCYYLAB-MYSOP-02/16十七、游离甲状腺素测定标准操作规程SYXRCYYLAB-MYSOP-02/17十八、总三碘甲状腺氨酸测定标准操作规程SYXRCYYLAB-MYSOP-02/18十九、游离三碘甲状腺氨酸测定标准操作规程SYXRCYYLAB-MYSOP-02/19二十、促甲状腺素测定标准操作规程SYXRCYYLAB-MYSOP-02/20二十一、甲状腺球蛋白测定标准操作规程SYXRCYYLAB-MYSOP-02/21二十二、铁蛋白测定标准操作规程SYXRCYYLAB-MYSOP-02/22二十三、叶酸测定标准操作规程SYXRCYYLAB-MYSOP-02/23二十四、维生素B12测定标准操作规程SYXRCYYLAB-MYSOP-02/24一、人绒毛膜促性腺激素β亚单位测定标准操作规程第1页共 5 页1 检验申请单独检验项目申请：人绒毛膜促性腺激素β亚单位测定（缩写βhCG）；组合项目申请：肿瘤标志物检查组合。
ADVIACentaur化学发光中文操作手册
12
质控
1、定义质控 单击 Quality Control 下 Control Definition 显示下图：
增加新质控：单击 Add 键，在 Control 下输入质控名称。在 Type 下选择质控类 型 Routine，在 Lot 下输入质控批号，在 Expiration 下输入有效期(DD MMM YY) 在 Test 栏中选择一个项目，输入均值和 2SD 值，按 Save Test 键。 重复选择另一个项目，直至输入所有项目后保存。 编辑旧质控：选择需要编辑的质控名称和批号，单击 Edit 键，选择需要添加或 修改的项目名称，输入均值和 2SD 值，按 Save Test 键。选择要删除的项目名 称，按 Delete Test 键。 2、编排质控工作表做质控 详见操作中编排质控样品。 3、查阅质控数据 单击 Quality Control 下 Data 显示下图：
7
选择样品类型：Patient。 选择编排方式：Schedule by SID 或 Schedule by Rack。 在 SID 框下输入病人编号，在 Rack 框下输入试管架号，后加 A-E，按回车。 若是急诊标本，选择 ! Stat (样品架从急诊通道放入)。 选择测试项目或组合，按 SAVE 保存。 样品稀释： 若样品需要稀释，在选择架号和项目后，选择 Dilutions 键，显示下图：
固相：氧化铁（Fe2o3）
特点： 磁性微粒极小，比包被管或包被珠的反应面积增大 50 倍，减少了扩散时间， 增加了捕获效率。同时结合动力保证了较大的灵敏度。
反应类型：
双抗体夹心法 竞争法 抗体捕获法
化学发光第一部分教材
法有很好应用前景。
12.4电生试剂化学发光反应体系
电生试剂化学发光分析
Co(Ⅲ) + quinine (Red) → Co(Ⅱ) + quinine (OX)* Quinine (OX)* → quinine (OX ) + hυ (540mm)
还原剂 氧化产物
e-
Ru(bpy)32+
Ru(bpy)32+*
Ru(bpy)32+
发光 （620nm）
12.2 鲁米诺电化学发光体系
• 在电极上所产生氧化性物质来氧化鲁米诺产生化学发光。在电极上施加 一定的电压，从而使溶液中的溶解氧还原成H2O2，H2O2进一步反应产生 一些具有强氧化性的氧自由基，这些活性氧与鲁米诺反应产生化学发光
Sample Pump
a
V
E
b
JH2C
F D
Waste
PC
Fig.1
WC
Inlet
MM
Fig.2
Outlet
1 3 、 荧 光 素 （ luciferine)- 荧 光 素 酶 （luciferase-磷酸三腺苷（ATP）体系
化学发光和生物发光 I
一、引言
• 公元前亚里士多德
真菌类和死鱼的发光
• 1668年，罗伯特.波义耳 BL需要氧参与
• 19世纪80年代末，Dubois命名荧光虫素酶和荧光虫素
• 1877年，Radziszewski发现洛汾碱的CL
• 1928年，Albrecht发现luminol的CL
• 1935年，光泽精的CL
Mn3+
化学发光免疫分析临床应用手册2012..
美国贝克曼库尔特化学发光免疫分析临床应用手册【2012版】贝克曼库尔特商贸（中国）有限公司广州市沃克贸易有限公司(粤北总代理)前言标记免疫分析实现了医学生物学超微量的分析，对许多疾病的临床诊断、危险分层、治疗方案选择和预后评估具有重大意义。
化学发光免疫分析技术发展于上世纪90年代，通过对标记的化学发光物质发光的控制及测量，检测相应的生物标志物，因具有灵敏度高、检测快速、试剂稳定无生物毒性、易全自动化，成为非放射性免疫分析技术中最具有发展前景的方法之一。
美国贝克曼库尔特是这一检测技术领域的先锋，其系列发光免疫分析系统采用最新的第三代辉光型发光物质-AMPPD，结合优秀的仪器设计，以方法学先进、灵敏度高（可达10-21mol/L）、线性范围宽、菜单丰富和检测速度快等优点，成为现代临床诊断的有力助手！手册旨在对其临床应用起抛砖引玉的作用，鉴于收集的资料及经验有限，不足之处在所难免，恳请有关专家和同道批评指正。
甲状腺功能总三碘甲状腺原氨酸（T3）总甲状腺素（T4）游离三碘甲状腺原氨酸（FT3）游离甲状腺素（FRT4）促甲状腺激素（超敏）（hTSH）甲状腺球蛋白（Tg）抗甲状腺球蛋白抗体（ThgAb）甲状腺激素摄取率（TU）抗甲状腺过氧化物酶抗体（TPO-Ab）生殖／内分泌激素绒毛膜促性腺激素（β-HCG）促卵泡生成激素（FSH）促黄体生成激素（LH）垂体泌乳素（PRL）孕酮（Prog）雌二醇（E2）未结合雌三醇（uE3）睾酮（T）硫酸脱氢表雄酮 (DHEA-S)心肌标志物肌钙蛋白-Ⅰ（aTnI）肌酸激酶同工酶（CK-MB）肌红蛋白（Mb）地高辛（Dig）肿瘤标志物甲胎蛋白（AFP）癌胚抗原（CEA2）前列腺特异抗原（PSA）游离前列腺抗原（free PSA）糖类抗原CA-125（OV）糖类抗原CA15-3（BR）糖类抗原CA19-9（GI）骨代谢甲状旁腺激素（iPTH）骨碱性磷酸酶(Ostase)人生长激素（hGh2）贫血标志物铁蛋白（SF）维生素B12（VB12）叶酸（Fol2/RBC2）内因子抗体(IF Ab)促红细胞生成素（EPO）糖尿病超敏胰岛素 (Ins)唐氏产前筛查炎症总免疫球蛋白E（T IgE）白介素-6（IL-6）甲状腺功能总三碘甲状腺原氨酸（Tot T3）临床意义Tot T3是判断甲状腺功能亢进首选指标之一，对甲状腺功能紊乱进行确诊。
光激化学发光的应用教材
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名1，密码1
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批量输入：对已占用试管架输入无效，必须从空试 管架输入样本输入
依次点击：批量输入→起始管架号→起始编号→结 束编号→选择项目→点击确定；
加样到一半提示液体量不足，如何处理？ 标本不足，试剂不足或有气泡，都会导致实验中断。在补齐相关的液体剔除
气泡，后再点击“继续加样”。 （有时候会多出来几个灰色废弃的孔位，说 明软件已重新分配任务） 定标不通过都有哪些因素？ 定标有可能会不通过，因此我们建议在定标日，定标时就别带待测和质控了， 避免定标不通过造成试剂浪费，应先定标后测试。 校正液偏差较大的原因是什么？如何修正？ 校正液量不足，吸液有气泡，用前未混匀室温平衡，或开瓶放置过久都有可 能造成测值偏差较大。可以通过前后次的发光值对其修正。 质控失控的原因是什么？ 同校正液一样：质控液量不足，吸液有气泡，用前未混匀室温平衡，或开瓶 放置过久都有可能造成测值偏差较大。重新开一瓶。 哪些物质会影响或干扰我们的实验结果 血浆，RF，溶血性标本，腹水标本都不是我们的测试对象，建议用血清（红 盖或黄盖采血管）。
通用液并启动更换通用液即可
实验前准备工作？
标本编号，平衡校正液及质控并混匀，目测校正质控的余量以及是否有气泡， 查看感光液及清洗液余量，放置吸头架和板架。养成一个好的习惯，实验前 准备严格规范的实验，保证实验的连续性，都是为了获得较好的实验结果。
实验结束后收尾工作注意哪些？ SP一旦完成加样转板之后就可以撤下试剂、校正液和质控品，存入冰箱，这
4、无论是SP、HT报故障，进行处理后都在SP面板、HT面 板里进行复位；
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肿瘤标志物检测一、肿瘤标志物简介近年来，肿瘤已成为危害人类生命健康的常见病、多发病。
肿瘤根据来源可分为瘤和癌，按照性质可分为良性和恶性。
肿瘤的发生直接影响机体的代谢，如改变糖的代谢途径，改变蛋白质与核酸的合成，改变代谢过程中关键酶的活性，以及引起激素代谢异常等。
以蛋白质为例，肿瘤组织中的蛋白质含量要比正常组织高。
作为可用于肿瘤标志检测蛋白质来讲，属于肿瘤组织自身增值中合成的标志蛋白质或酶均见增高，而属于肿瘤细胞分化标志的蛋白质或酶，其合成往往成减低趋势。
并且通过研究发现，在哺乳类动物胚胎期所具有蛋白质，随着年龄增长其结构有所改变，当人体出生后或随着年龄变化，某些基因被关闭，不再表达或很少表达该基因的活性，当癌变时，某些细胞退化成为分化较差的、近似于胚胎细胞时，使得某些基因失活，某些基因被激活，重新合成一些胚胎蛋白，如甲胎蛋白、癌胚抗原等，这一现象称为返祖现象。
这即为肿瘤标志物的检测建立了科学基础。
所谓肿瘤标志物（tumormarker,TM），是指由肿瘤组织产生的存在于肿瘤组织本身，或分泌至血液或其他体液，或因肿瘤组织刺激，由宿主细胞产生而含量明显高于正常参考值的一类物质。
肿瘤标志物的检测，对于肿瘤的早期发现，病情的发展、治疗后的评价、监测复发和转移等方面都具有一定的应用价值，可以为患者争取治疗时间，延长患者生命。
因而近年来，世界许多医学科学工作者致力于对肿瘤细胞生长各环节、代谢与调控的基本规律和变化研究，寻求新的特异性或相对特异性的肿瘤标志物。
二、瘤标志物的分类[肿瘤胚胎性抗原标志物]该类蛋白质即前文所提到的因返祖现象的出现，而产生的肿瘤标志物。
虽然该类标志物与肿瘤组织不一定具有特定的相关性，但与肿瘤的发生存在着内在的联系。
例：甲胎蛋白（alpha-fetoprotein, AFP）癌胚抗原（carcinoembryonic antigen, CEA）[糖类抗原标志物]该类物质是肿瘤细胞表面的抗原物质，或肿瘤细胞所分泌的物质。
这类标志物的出现为临床肿瘤的诊断带来方便，但其命名无规律可言。
有些是肿瘤细胞株编号，有些是抗体物质的编号。
该类标志物又可分为两类1．糖类高分子粘蛋白抗原例：癌抗原CA125癌抗原CA15-32．血型类抗原例：癌抗原CA19-9癌抗原CA50[酶类标志物]酶及同工酶是最早出现和使用的肿瘤标志物之一。
肿瘤状态时，机体的酶活力就会发生较大变化，这主要是因为①肿瘤细胞或组织本身诱导其他细胞和组织产生异常含量的酶；②肿瘤细胞的代谢旺盛，细胞通透性增加，使得肿瘤细胞内的酶进入血液，或因肿瘤使得某些器官功能不良，导致各种酶的灭活和排泄障碍。
例：前列腺特异性抗原（prostate specific antigen, PSA）神经原特异性烯醇化酶（neuron-specificenolase, NSE）[激素类标志物]当具有分泌激素功能的细胞癌变时，就会使分泌的激素量发生异常。
这种现象被称为正位激素异常。
而正常情况下不能生成激素的那些细胞，转化为肿瘤细胞后所产生的激素，或者是那些能产生出激素的细胞癌变后，分泌出的是其他激素细胞所产生的激素，这种现象被称为异位激素异常。
衡量异位激素异常的条件是：①有非内分泌腺细胞合成的激素；②某种内分泌细胞却分泌其他分泌腺细胞的激素；③肿瘤患者同时伴有分泌异常综合征；④这类肿瘤细胞在体外培养时也能产生激素；⑤肿瘤切除或经治疗肿瘤消退时，此种激素含量下降，内分泌综合征的症状改善。
例：人绒毛膜促性腺激素（human chorionic gonagotropin,HCG）人胎盘催乳素（PRL）[其它蛋白质类标志物]另外还有一些早期发现的蛋白类肿瘤标志物，特异性稍差，但检测方法相对比较容易，因而常作为常规检测项目，用以肿瘤普查。
例：β2-微球蛋白（β2-microglobulin,β2-MG）血清铁蛋白（Serum Ferritin,SF）三、肝癌及甲胎蛋白（AFP）原发性肝癌是指由肝细胞或肝内胆管细胞癌变所形成的恶性肿瘤，是我国常见的恶性肿瘤。
近年来国内外原发性肝癌的发病率，均有不断增高的趋势。
从世界范围来看，各地区发病有较大差别，欧美国家发病率较低（1.9～3.4人/10万人），亚非国家发病率较高（4.6～98.2人/10万人）。
根据我国一些地区的普查，我国的发病率为14.5～53人/10万人,可见我国亦属原发性肝癌的高发区。
男性肝癌的死亡率仅次于胃癌和食管癌，占各种恶性肿瘤的第三位，女性则仅次于胃癌、宫颈癌和食管癌，为第四位。
肝癌的发病率呈一定的地区分布，沿海高于内地，东南和东北高于西北、华北和西南部，沿海岛屿和江河海口又高于沿海其他地区。
肝癌多见于男性，男女发病之比为2～5:1，年龄大多为40～49岁。
越是肝癌高发区，这种性别差异就越明显，发病年龄也越早。
原发性肝癌起病隐匿，早期症状不明显，一旦出现临床病状和体征，诊断多属晚期，难以治疗。
因此临床上迫切需要一种能够早期诊断原发性肝癌的检查方法。
1956年Bergstrand和Czar在人胎儿血清中发现一种胚胎专一性甲种球蛋白，以后证实为甲胎蛋白（AFP）；1963年苏联GlAbelev首先在移植肝癌细胞的小鼠血清中发现了甲胎蛋白，并发现甲胎蛋白主要由胎肝合成；1964年Tatarinov证明肝癌病人血清中也存在AFP；其后Uriel 等进一步证实AFP在原发性肝癌诊断中的价值。
1970年后，通过广泛的临床应用，证实AFP是诊断肝癌的可靠指标之一，从而使肝癌的诊断获得重大突破。
大量研究结果表明，原发性肝癌者血清AFP含量90%以上超过500ng/ml,最高可达每毫升数毫克，一般正常人血清AFP含量都在20ng/ml以下。
世界各国已先后将AFP检查作为早期诊断原发性肝癌的有效方法用于临床。
我国在十一届国际肝瘤会议上报告了49430人AFP普查工作，初步肯定了AFP普查对原发性肝癌具有早期诊断意义。
通过普查在临床上发现了许多无症状、无体征的“小肝癌”，对早期治疗、提高患者的生存率起到了十分重要的作用。
AFP测定的临床意义：1．原发性肝癌的诊断检测血清AFP含量是诊断原发性肝癌的重要手段之一。
由于方法学的不断改进，使原发性肝癌的阳性检出率达到了90%以上。
正常成人血清AFP含量各家报告不一致。
可能与测定方法、标准品等不同有关。
中国肝癌研究协会报导正常人血清AFP＜20ng/ml。
而原发性肝癌患者血清AFP多数在500ng/ml左右。
目前国内多采用1977年全国肝癌防治协作会议拟定的单项AFP诊断肝癌的标准：定量≥500ng/ml,持续一个月以上，并能排除妊娠，活动性肝病，生殖腺胚胎性肿瘤等。
通过观察血清AFP的动态变化可了解患者病情进展状态，因为血清AFP升高常在患者症状和体征出现数月之久之前，故AFP检测对原发性肝癌具有早期诊断价值。
Kwata等检测一例肝癌患者血清AFP仅31ng/ml,一年后即达10000ng/ml。
Purres报导一例血清AFP为300ng/ml的患者，经尸检证实其肝癌结节的直径仅0.5 cm。
上海1971～1976年普查196万人，发现300例肝癌，其中134例为无明显肝癌症状和体征的早期病人。
普查发现的临床前期病人，经手术证实81.6%为≤5cm的小肝癌。
以上的结果提示：AFP检测用于普查可早期发现原发性肝癌。
此外检测AFP还可作为治疗效果的评价指标。
2．急慢性肝炎和肝硬化的鉴别诊断急慢性肝炎、肝硬化患者血清中可检出AFP一般仅为50～200ng/ml，少数病人可暂时升高到400ng/ml 以上。
但急性肝炎患者随着病情好转，常在短时间内下降至正常水平，此即AFP“一过性升高”。
慢性肝病和肝硬化可呈下降或持续低水平，肝癌则呈逐渐上升趋势。
由于肝硬性患者有转化为肝癌的可能，故在AFP 原来正常的肝硬化病人中，出现AFP持续升高应考虑癌变的可能。
据文献报告，我国某些地区肝硬化病例中肝癌发生率可高达到32.1%。
在临床工作中，应进行多项动态测定才能与肝癌进行鉴别。
3．先天性胎儿畸形诊断胎儿AFP可有少量通过胎盘屏障进行母体，因此孕妇血清AFP可升高，一般在500ng/ml以下，产后20天内降至正常人水平。
在无脑儿脊柱裂畸形妊娠时，孕妇血清AFP异常升高，高者可达800ng/ml以上。
近年来，羊水中AFP检测的意义又引起人们的注意，如胎儿为无脑儿、开放性脊柱裂时，羊水中甲胎蛋白含量可显著增加。
因此，羊水中甲胎蛋白的测定已成为开放性神经管畸形的特异诊断方法。
４．恶性畸胎瘤的诊断一些胚胎性肿瘤如睾丸和卵巢的恶性畸胎瘤细胞也可合成AFP，所以恶性畸胎瘤患者血清中可出现较高含量的AFP，所以恶性畸胎瘤患者血清中可出现较高含量的AFP，临床上应注意根据患者的症状、体征等进行鉴别。
四、前列腺癌及其肿瘤标志物前列腺癌的发病率在全球范围内呈上升趋势。
据美国统计约占男性癌肿的36%，以及男性癌肿相关死亡率的13%。
在欧美国家前列腺癌是发病率最高的恶性肿瘤，死亡率仅次于肺癌位于男性肿瘤的第二位。
在我国，随着人口的老龄化、膳食结构的改变和诊断技术的提高，前列腺癌的发病率和死亡率也在迅速增长。
1992年，美国白人前列腺癌的发病率为 404.5/10万男性人口，黑人可达477.2/10万男性人口。
我国前列腺发病率约为3.4/10万男性人口，远低于西方国家，但国人良性前列腺增生（BPH）手术发现的偶发癌和尸检前列腺标本的潜伏癌约为欧美一半左右。
由此推断中国人前列腺癌从组织学发展到临床要比欧美人需要更长的时间，而前列腺癌的早期诊断是决定能否进行根治性治疗的关键。
根据Stamey前列腺癌临床分期标准，可将前列腺癌分为4期。
A期：直肠指检不能触及前列腺癌结节；B 期：可触及节结但局限在前列腺内；C期：肿瘤侵犯周围组织；D期：前列腺癌有远处转移。
其中，A、B期为临床早期，而前列腺癌根治术也只限于A、B期的肿瘤。
前列腺癌为老年性疾病，50岁以前很少发生。
前列腺癌患者的表现变化多端。
其自然发展规律无法预测。
多数前列腺癌发生在腺体周边，远离尿道，故早期患者很少出现症状。
其诊断主要通过直肠指检（DRE）、血清PSA检测或直肠B超（TRUS）针刺活检确定诊断。
自1979年Wang等首先从前列腺组织内分离和提纯出前列腺特异性抗原（prostatic specific antigen，PSA）以来，PSA在临床上得到了广泛的研究和应用。
PSA是由人前列腺上皮细胞合成并分泌至精浆中的一种糖蛋白，分子量为33000～34000道尔顿。
许多体外试验表明，PSA具有糜蛋白酶样活性，其本质是一种丝氨酸蛋白酶，能使精液的凝块水解，功能与男性性生育力有关。
PSA主要存在于前列腺组织中，女性体内不存在，当发生前列腺癌时，PSA会大量释放进入血液，因此测定血PSA对前列腺癌的诊断有重要价值。