关于临床血脂测定的建议
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德国Centronic GmbH公司
(一) HDL-C的匀相测定法（3） (homogeneous method)
免疫分离法（Immunoseparation method, IS法） PEG/抗体包裹法（International Reagents Corp HDL- C assay，IRC法） 日本国际试药公司（International Reagents Co.）/Sysmex 抗体免疫分离法（antibody immunoseparation HDL-C assay ，AB法） 日本和光制药公司(Wako Pure Chemicals Industry)
建议:
三、参数设置
应按照仪器和所用试剂盒的要求 合理设置测定及校准参数。 一般不宜随意更改参数。
四、质量控制
采用符合要求的质控血清进行室内质控。 质控血清应至少包括有参考范围内水平 和病理异常水平的两个值 实验室需购买商品化的血脂质控专用的 质控血清
四、质量控制
需要注意的是，选择质控血清时，应考 虑血脂测定的项目和所用测定方法以及 质控血清的适用范围。 更换室内质控物时应提前做好准备，确 保前后衔接。还应重视室间质评工作。
参见：鄢盛恺.临床检验杂志，2002，20（6）：325-328
（二）血清LDL-C的匀相测定法(2) (homogeneous method)
可溶性反应法（Solubilization LDL-C assay，SOL法） 日本协和（Kyowa Medex）公司 Roche公司 保护性试剂法（Protecting reagent LDL-C assay， PRO法） 日本和光（Wako Chemicals）公司 美国 Sigma Diagnostics公司 杯芳烃法（Calixarene LDL-C assay，CAL法） 日本国际试药公司（International Reagents Co.）
主要内容
前言 分析前变异对血脂测定结果的影响 血脂测定的方法学 试剂的选择原则与血脂测定的技术指标 血脂异常水平的划分及血脂分析的临床 意义
参见：中华检验医学杂志,2003,26(3):182-184
分析前变异 对血脂测定结果的影响
建议采取以下措施(1)
血脂分析前受试者应处于稳定代谢状态 至少2周内保持一般饮食习惯和体重稳定 测定前24h内不应进行剧烈体育运动
三、可检测上限 (2)
免疫浊度法测定血清线性: ApoAI、ApoB至少不低于2.0g/L Lp(a) 至少可达800mg/L
四、特异性（1）
酶法测定血清 TC 时，血清中多种非胆固 醇甾醇会不同程度地与本试剂显色。 正常人血清中非胆固醇甾醇约占TC的1%， 故在常规测定中这种影响可以不计。 酶法测定 TG 时， LPL除能水解 TG 外，还 能水解甘油一酯和甘油二酯（血清中后 两者约占 TG 的 3 ％），亦被计算在 TG 中， 实际上测定的是总甘油酯。
血清标本应及时测定
24h内不能完成测定, 可密封置于 4℃保存1周 -20℃可保存数月 -70℃至少可保存半年 应避免标本反复冻溶
血脂测定的方法学
血脂常规测定方法
血清TC 酶法[如胆固醇氧化酶- 过氧化物酶-4-氨基安替 比林和酚法（CHOD-PAP法）] 血清TG 酶法[如甘油磷酸氧化酶-过氧化物酶-4-氨基安 替比林和酚法（GPO-PAP 法）] 血清HDL-C和LDL-C 匀相测定法（homogeneous method） 血清apoAI、apoB 和Lp(a) 免疫浊度法。首选ITA法，其次为INA法。
七、反应速度
酶法测定血清胆固醇反应到达终点时间 37℃不应超过5min。酶法测定TG 37℃不 应超过8min。 免疫浊度法测定血清 apoAI 、 apoB 和Lp(a) 可根据自动分析仪反应进程曲线确定读 取终点时间，一般以8~10 min为宜。
八、校准
应选用试剂配套的校准物，校准物的 定值应可溯源到已有的参考系统。应避 免不同试剂体系间校准物的混用所带来 的测定结果的系统偏差。
试剂的选择原则 与血脂测定的技术指标
一、不精密度与不准确度
TC/TG/HDL-C/LDL-C测定的技术目标
血脂指标 TC TG HDL-C LDL-C apoAI apoB Lp(a) 不准确度(偏差) 不精密度(CV) ≤±3% ≤3% ≤±5% ≤5% ≤±5% ≤4% ≤±4% ≤4% ≤ ±3% ≤5% ≤±3% ≤5% ≤±4% ≤10% 总误差* 8.9% ≤15% ≤13% ≤12%
应该注意的几个问题
血脂测定标准化是保证测定结果准确可靠的基 础，其核心要求是准确性的可溯源性。 临 床 常 规 血 脂 测 定 中 应 至 少 测 定 TC 、 TG 、 HDL-C 及LDL-C这四项。有条件的实验室可测 定ApoAI、ApoB及Lp(a)。
应该注意的几个问题
血脂指标大都可以反映脂代谢状态，也用作冠 心病风险程度的估计，但都不是冠心病诊断指 标。但对于高脂蛋白血症与异常脂蛋白血症， 血脂测定则为必要的诊断指标。 应避免把危险因素当作诊断指标看待，才能做 到血脂分析的合理应用，恰如其分地评价其应 用价值。
*总误差=偏差%+1.96CV(与参考血清的靶值比较)
二、灵敏度（1）
酶法测定血清TC显色剂用酚时 TC 5.2mmol/L的吸光度A500nm 约0.30~0.35 A500nm=0.005 时的 TC 浓度约 0.08mmol/L 。 酶法测定TG灵敏度为2mmol/L TG A500nm≥0.2
五、干扰因素 (2)
匀相测定法测定HDL-C、LDL-C 免疫浊度法测定血清apoAI、apoB和Lp(a) 时： TG<5.65mmol/L(500mg/dl) Bil<513μ mol/L(30mg/dl) Hb<5g/L 时: 对测定结果基本无干扰
六、试剂稳定性
干粉试剂未开瓶 2℃~8℃存放应至少稳定 1 年。 复溶后的胆固醇和TG酶试剂在2~8℃应至少稳 定2天，在此期内出现肉眼可辨的粉红色建议 不要使用。 试剂空白吸光度A500nm≤0.05。 液体试剂未开封的试剂盒在2℃~8℃应至少稳 定6个月，开封后应至少可保存1个月。
（二）血清LDL-C的匀相测定法(1) (homogeneous method)
清除法（Clearance method） 表面活性剂清除法（surfactant LDL-C assay， SUR法） 日本第一化学（Daiichi） Genzyme Diagnostics 公司 过氧化氢酶清除法（Catalase LDL-C assay， CAT法） 日本Denka Seiken公司 英国RANDOX 公司 美国Polymedco公司
二、灵敏度（2）
匀相测定法测定HDL-C、LDL-C时 最小检测水平至少为0.01mmol/L 免疫浊度法测定血清 ApoAI、ApoB检测下限至少为0.5g/L Lp(a) 至少为5mg/L
三、可检测上限 (1)
酶法测定血清 TC 血清与酶试剂用量之比 为1:100时，测定上限为13mmol/L。 酶 法 测 定 TG 线 性 至 少 可 达 11.3mmol/L （1000mg/dl）。 匀相测定法测定 HDL-C 、 LDL-C 时线性 至少分别可达 2.59mmol/L 和 7.77mmol/L 。
建议采取以下措施(2)
血脂检测异常，在进一步处理前，应在两月内进行
再次或多次测定，但至少要相隔一周
虽然有人认为TC
、 HDL-C测定可不用禁食 ，但
应注意饱餐后TC会有所下降
对于TG和其他脂蛋白检测则需至少禁食12h
采 血 采血时一般取坐位 静脉穿刺过程中止血带使用不应超过1min 标 本 血清或血浆标本均适用于血脂、脂蛋白测定 现在主张一律用血清, 如用EDTA作抗凝剂， 分离血浆后应马上放在2℃~8℃保存，以防组 分改变, 测定结果需乘以1.03
关于临床血脂测定的建议
鄢盛恺
中国医学科学院 中国协和医科大学 北京协和医院检验科
周
新
武汉大学医学院检验系 武汉大学中南医院检验科
血脂分析不仅对动脉粥样硬化(AS) 冠心病的防治具有重要意义 已经应用于糖尿病、肾病以及内分泌代谢 改变等诸多临床相关专业疾病的研究
中华医学会检验分会血脂专题委员会 就当前临床血脂测定的方法与临床应用等方面 进行了系统讨论与研究，针对临床实验室常规 血脂测定提出提出如下建议: 项目包括 TC、TG HDL-C、LDL-C、 Lp(a) ApoAI、ApoB
四、特异性（2）
匀相测定法测定HDL-C、LDL-C 免疫浊度法测定血清 apoAI、apoB和 Lp(a)时: 回收率为90%~110% 基本不受其它脂蛋白的干扰
五、干扰因素(1)
酶法测定血清TC时， 血红蛋白高于2g/L会引起正干扰， 胆红素>0.1g/L时有明显负干扰。 血中抗坏血酸与甲基多巴浓度高于治疗水平时 也使结果偏低。 酶法测定TG干扰因素与胆固醇测定类同。 胆红素＞100μmol/L 抗坏血酸＞170μmol/L 时, 出现负干扰。 血红蛋白的干扰是复杂的, 明显溶血标本不宜 作为TG测定。
八、校准
用免疫浊度法进行 ApoA1 、 ApoB 和 Lp(a) 测 定 校 准 时 应 选 用 符 合 国 际 标 准 （ WHO-IFCC ）的校准血清，并应备有 不同水平多种浓度（至少5个水平）。采 用多点定标，用数学方程进行曲线拟合 制作剂量-响应曲线。 不能用定值质控血清作校准物使用。
参见：鄢盛恺.临床检验杂志，2002，20（6）：325-328
（一）HDL-C的匀相测定法（4） (homogeneous method)
选择性抑制法（Polyanion
Polymer/
detergent HDL-C assay，PPD法） 日本第一化学药品株式会社（Daiichi Pure Chemicals Co.） 美国Genzyme Diagnostics公司
(一) HDL-C的匀相测定法（1） (homogeneous method)
清除法（Clearance method） 反应促进剂-过氧化物酶清除法（Synthetic polymer/ detergent HDL-C assay , SPD法） 日本第一化学药品株式会社（Daiichi） 过氧化氢酶清除法（Catalase HDL-C assay， CAT法） 日本生研（Denka Seiken Co.）公司 英国朗道（Randox ）公司 Reference Diagnostics公司 Polymedco 公司
（三）血清Lp(a)测定
免疫浊度法作为临床实验室测定血清 Lቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ(a) 的常规方法。 首选 ITA 法，其次
为INA法。
试剂所用抗体应为多克隆抗体或混合数 株识别 apo(a)上不同抗原位点的单克隆抗 体。
二、测定所需仪器设备
性能符合要求或经检定合格的 分光光度计、 全自动或半自动生化分析仪均可用 所用加样器、稀释器或 微量与常量吸管等均需校正合格 用全自动或半自动生化分析仪 进行临床血脂常规测定。
参见：鄢盛恺.临床检验杂志，2002，20（6）：325-328
(一) HDL-C的匀相测定法（2） (homogeneous method)
PEG修饰酶法（PEG-modified enzyme HDL-C
assay，PEGME法）
日本协和（Kyowa Medex Co.）
罗氏诊断（Roche Diagnostics）
(一) HDL-C的匀相测定法（3） (homogeneous method)
免疫分离法（Immunoseparation method, IS法） PEG/抗体包裹法（International Reagents Corp HDL- C assay，IRC法） 日本国际试药公司（International Reagents Co.）/Sysmex 抗体免疫分离法（antibody immunoseparation HDL-C assay ，AB法） 日本和光制药公司(Wako Pure Chemicals Industry)
建议:
三、参数设置
应按照仪器和所用试剂盒的要求 合理设置测定及校准参数。 一般不宜随意更改参数。
四、质量控制
采用符合要求的质控血清进行室内质控。 质控血清应至少包括有参考范围内水平 和病理异常水平的两个值 实验室需购买商品化的血脂质控专用的 质控血清
四、质量控制
需要注意的是，选择质控血清时，应考 虑血脂测定的项目和所用测定方法以及 质控血清的适用范围。 更换室内质控物时应提前做好准备，确 保前后衔接。还应重视室间质评工作。
参见：鄢盛恺.临床检验杂志，2002，20（6）：325-328
（二）血清LDL-C的匀相测定法(2) (homogeneous method)
可溶性反应法（Solubilization LDL-C assay，SOL法） 日本协和（Kyowa Medex）公司 Roche公司 保护性试剂法（Protecting reagent LDL-C assay， PRO法） 日本和光（Wako Chemicals）公司 美国 Sigma Diagnostics公司 杯芳烃法（Calixarene LDL-C assay，CAL法） 日本国际试药公司（International Reagents Co.）
主要内容
前言 分析前变异对血脂测定结果的影响 血脂测定的方法学 试剂的选择原则与血脂测定的技术指标 血脂异常水平的划分及血脂分析的临床 意义
参见：中华检验医学杂志,2003,26(3):182-184
分析前变异 对血脂测定结果的影响
建议采取以下措施(1)
血脂分析前受试者应处于稳定代谢状态 至少2周内保持一般饮食习惯和体重稳定 测定前24h内不应进行剧烈体育运动
三、可检测上限 (2)
免疫浊度法测定血清线性: ApoAI、ApoB至少不低于2.0g/L Lp(a) 至少可达800mg/L
四、特异性（1）
酶法测定血清 TC 时，血清中多种非胆固 醇甾醇会不同程度地与本试剂显色。 正常人血清中非胆固醇甾醇约占TC的1%， 故在常规测定中这种影响可以不计。 酶法测定 TG 时， LPL除能水解 TG 外，还 能水解甘油一酯和甘油二酯（血清中后 两者约占 TG 的 3 ％），亦被计算在 TG 中， 实际上测定的是总甘油酯。
血清标本应及时测定
24h内不能完成测定, 可密封置于 4℃保存1周 -20℃可保存数月 -70℃至少可保存半年 应避免标本反复冻溶
血脂测定的方法学
血脂常规测定方法
血清TC 酶法[如胆固醇氧化酶- 过氧化物酶-4-氨基安替 比林和酚法（CHOD-PAP法）] 血清TG 酶法[如甘油磷酸氧化酶-过氧化物酶-4-氨基安 替比林和酚法（GPO-PAP 法）] 血清HDL-C和LDL-C 匀相测定法（homogeneous method） 血清apoAI、apoB 和Lp(a) 免疫浊度法。首选ITA法，其次为INA法。
七、反应速度
酶法测定血清胆固醇反应到达终点时间 37℃不应超过5min。酶法测定TG 37℃不 应超过8min。 免疫浊度法测定血清 apoAI 、 apoB 和Lp(a) 可根据自动分析仪反应进程曲线确定读 取终点时间，一般以8~10 min为宜。
八、校准
应选用试剂配套的校准物，校准物的 定值应可溯源到已有的参考系统。应避 免不同试剂体系间校准物的混用所带来 的测定结果的系统偏差。
试剂的选择原则 与血脂测定的技术指标
一、不精密度与不准确度
TC/TG/HDL-C/LDL-C测定的技术目标
血脂指标 TC TG HDL-C LDL-C apoAI apoB Lp(a) 不准确度(偏差) 不精密度(CV) ≤±3% ≤3% ≤±5% ≤5% ≤±5% ≤4% ≤±4% ≤4% ≤ ±3% ≤5% ≤±3% ≤5% ≤±4% ≤10% 总误差* 8.9% ≤15% ≤13% ≤12%
应该注意的几个问题
血脂测定标准化是保证测定结果准确可靠的基 础，其核心要求是准确性的可溯源性。 临 床 常 规 血 脂 测 定 中 应 至 少 测 定 TC 、 TG 、 HDL-C 及LDL-C这四项。有条件的实验室可测 定ApoAI、ApoB及Lp(a)。
应该注意的几个问题
血脂指标大都可以反映脂代谢状态，也用作冠 心病风险程度的估计，但都不是冠心病诊断指 标。但对于高脂蛋白血症与异常脂蛋白血症， 血脂测定则为必要的诊断指标。 应避免把危险因素当作诊断指标看待，才能做 到血脂分析的合理应用，恰如其分地评价其应 用价值。
*总误差=偏差%+1.96CV(与参考血清的靶值比较)
二、灵敏度（1）
酶法测定血清TC显色剂用酚时 TC 5.2mmol/L的吸光度A500nm 约0.30~0.35 A500nm=0.005 时的 TC 浓度约 0.08mmol/L 。 酶法测定TG灵敏度为2mmol/L TG A500nm≥0.2
五、干扰因素 (2)
匀相测定法测定HDL-C、LDL-C 免疫浊度法测定血清apoAI、apoB和Lp(a) 时： TG<5.65mmol/L(500mg/dl) Bil<513μ mol/L(30mg/dl) Hb<5g/L 时: 对测定结果基本无干扰
六、试剂稳定性
干粉试剂未开瓶 2℃~8℃存放应至少稳定 1 年。 复溶后的胆固醇和TG酶试剂在2~8℃应至少稳 定2天，在此期内出现肉眼可辨的粉红色建议 不要使用。 试剂空白吸光度A500nm≤0.05。 液体试剂未开封的试剂盒在2℃~8℃应至少稳 定6个月，开封后应至少可保存1个月。
（二）血清LDL-C的匀相测定法(1) (homogeneous method)
清除法（Clearance method） 表面活性剂清除法（surfactant LDL-C assay， SUR法） 日本第一化学（Daiichi） Genzyme Diagnostics 公司 过氧化氢酶清除法（Catalase LDL-C assay， CAT法） 日本Denka Seiken公司 英国RANDOX 公司 美国Polymedco公司
二、灵敏度（2）
匀相测定法测定HDL-C、LDL-C时 最小检测水平至少为0.01mmol/L 免疫浊度法测定血清 ApoAI、ApoB检测下限至少为0.5g/L Lp(a) 至少为5mg/L
三、可检测上限 (1)
酶法测定血清 TC 血清与酶试剂用量之比 为1:100时，测定上限为13mmol/L。 酶 法 测 定 TG 线 性 至 少 可 达 11.3mmol/L （1000mg/dl）。 匀相测定法测定 HDL-C 、 LDL-C 时线性 至少分别可达 2.59mmol/L 和 7.77mmol/L 。
建议采取以下措施(2)
血脂检测异常，在进一步处理前，应在两月内进行
再次或多次测定，但至少要相隔一周
虽然有人认为TC
、 HDL-C测定可不用禁食 ，但
应注意饱餐后TC会有所下降
对于TG和其他脂蛋白检测则需至少禁食12h
采 血 采血时一般取坐位 静脉穿刺过程中止血带使用不应超过1min 标 本 血清或血浆标本均适用于血脂、脂蛋白测定 现在主张一律用血清, 如用EDTA作抗凝剂， 分离血浆后应马上放在2℃~8℃保存，以防组 分改变, 测定结果需乘以1.03
关于临床血脂测定的建议
鄢盛恺
中国医学科学院 中国协和医科大学 北京协和医院检验科
周
新
武汉大学医学院检验系 武汉大学中南医院检验科
血脂分析不仅对动脉粥样硬化(AS) 冠心病的防治具有重要意义 已经应用于糖尿病、肾病以及内分泌代谢 改变等诸多临床相关专业疾病的研究
中华医学会检验分会血脂专题委员会 就当前临床血脂测定的方法与临床应用等方面 进行了系统讨论与研究，针对临床实验室常规 血脂测定提出提出如下建议: 项目包括 TC、TG HDL-C、LDL-C、 Lp(a) ApoAI、ApoB
四、特异性（2）
匀相测定法测定HDL-C、LDL-C 免疫浊度法测定血清 apoAI、apoB和 Lp(a)时: 回收率为90%~110% 基本不受其它脂蛋白的干扰
五、干扰因素(1)
酶法测定血清TC时， 血红蛋白高于2g/L会引起正干扰， 胆红素>0.1g/L时有明显负干扰。 血中抗坏血酸与甲基多巴浓度高于治疗水平时 也使结果偏低。 酶法测定TG干扰因素与胆固醇测定类同。 胆红素＞100μmol/L 抗坏血酸＞170μmol/L 时, 出现负干扰。 血红蛋白的干扰是复杂的, 明显溶血标本不宜 作为TG测定。
八、校准
用免疫浊度法进行 ApoA1 、 ApoB 和 Lp(a) 测 定 校 准 时 应 选 用 符 合 国 际 标 准 （ WHO-IFCC ）的校准血清，并应备有 不同水平多种浓度（至少5个水平）。采 用多点定标，用数学方程进行曲线拟合 制作剂量-响应曲线。 不能用定值质控血清作校准物使用。
参见：鄢盛恺.临床检验杂志，2002，20（6）：325-328
（一）HDL-C的匀相测定法（4） (homogeneous method)
选择性抑制法（Polyanion
Polymer/
detergent HDL-C assay，PPD法） 日本第一化学药品株式会社（Daiichi Pure Chemicals Co.） 美国Genzyme Diagnostics公司
(一) HDL-C的匀相测定法（1） (homogeneous method)
清除法（Clearance method） 反应促进剂-过氧化物酶清除法（Synthetic polymer/ detergent HDL-C assay , SPD法） 日本第一化学药品株式会社（Daiichi） 过氧化氢酶清除法（Catalase HDL-C assay， CAT法） 日本生研（Denka Seiken Co.）公司 英国朗道（Randox ）公司 Reference Diagnostics公司 Polymedco 公司
（三）血清Lp(a)测定
免疫浊度法作为临床实验室测定血清 Lቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ(a) 的常规方法。 首选 ITA 法，其次
为INA法。
试剂所用抗体应为多克隆抗体或混合数 株识别 apo(a)上不同抗原位点的单克隆抗 体。
二、测定所需仪器设备
性能符合要求或经检定合格的 分光光度计、 全自动或半自动生化分析仪均可用 所用加样器、稀释器或 微量与常量吸管等均需校正合格 用全自动或半自动生化分析仪 进行临床血脂常规测定。
参见：鄢盛恺.临床检验杂志，2002，20（6）：325-328
(一) HDL-C的匀相测定法（2） (homogeneous method)
PEG修饰酶法（PEG-modified enzyme HDL-C
assay，PEGME法）
日本协和（Kyowa Medex Co.）
罗氏诊断（Roche Diagnostics）