试论玉米中蛋白质含量测定的技术方法

ＤＯＩ:１０.１９３９２/ｊ.ｃｎｋｉ.１６７１￣７３４１.２０２０１２０１４
试论玉米中蛋白质含量测定的技术方法
邵㊀兵
中粮生化能源(榆树)有限公司㊀吉林长春㊀１３０４０１
摘㊀要:玉米是我们日常生活中常见的一种食物ꎬ含有人体所需要的各种营养物质ꎬ包括脂肪㊁蛋白质㊁碳水化合物以及各种微量元素ꎮ其中ꎬ蛋白质含量最高ꎮ蛋白质作为人体生命活动所必须的一种营养物质ꎬ可以从各种食物中都获得ꎬ玉米也是其中的一样ꎮ玉米中含有大量的蛋白质ꎬ人们经常会从玉米中摄取所需要的蛋白质ꎮ那么ꎬ玉米中到底含有多少成分的蛋白质呢?其实ꎬ是可以通过一定的测量技术计算出来的ꎮ本文将针对玉米种蛋白质含量测定的技术方法进行一定的探究ꎬ仅供参考ꎮ
关键词:蛋白质提取ꎻ蛋白质浓度测定ꎻ玉米一㊁蛋白质的提取方法
想要从玉米中提取一定含量的蛋白质ꎬ就必须采用一定的化学药剂ꎬ这些化学药剂可以帮助实验者从玉米中提取一定数量的蛋白质ꎬ让蛋白质作为一种清晰可见的物质呈现在人们面前ꎮ另外ꎬ对于蛋白质的提取与研究也可以促进生命科学的发展ꎬ其技术的发展水平将直接影响着生命科学的发展进步ꎮ蛋白质的提取是对蛋白质进行研究的重要一步ꎬ它影响蛋白质活性的研究㊁产率和结构的完整性ꎬ因此ꎬ提取过程必须万无一失ꎬ采用合适的提取方式是进行蛋白质提取的第一步ꎮ
(一)磷酸缓冲液法
磷酸缓冲液法在化学实验中是一种常见的化学药剂ꎬ通常使用的有磷酸钠缓冲液(ＮａＨ２ＰＯ４＆Ｎａ２ＨＰＯ４)和磷酸钾缓冲液(Ｋ２ＨＰＯ４＆ＫＨ２ＰＯ４)ꎬ由于他们有两极解离ꎬ因而被用作提取蛋白质的药剂ꎮ用这种方法进行蛋白质提取时ꎬ在存放的过程中对于温度有一定的要求ꎬ温度不宜太高ꎬ不然会破坏蛋白质的生物结构特性ꎮ这种方法ꎬ过程非常复杂ꎬ且耗时较长ꎬ但是蛋白质提取的效率很高ꎬ因而也是常用的一种提取方法ꎮ磷酸缓冲液是利用磷酸钾和磷酸钠两种化学物质配比得来的ꎬ因此ꎬ在应用的过程中ꎬ要注意两者之间的配比比例ꎬ按照一定的比例配比成功之后ꎬ才能够具体用于实验当中ꎮ
(二)Ｔｒｉｓ法
Ｔｒｉｓ缓冲溶液(英文:ｂｕｆｆｅｒｓｏｌｕｔｉｏｎ)是一种能在加入少量酸或碱和水时大大减低ｐＨ变动的溶液ꎮ蛋白质作为一种物质从玉米中提取出来ꎬ在自然环境的影响下ꎬ其物质结构特性很容易受到改变ꎬ在温度㊁湿度以及阳光的照耀下ꎬ蛋白质的结构会被打破ꎮ而采用Ｔｒｉｓ缓冲溶液进行蛋白质的提取ꎬ可以保证蛋白质在自然环境中的ｐｈ值ꎬ可以应用这种缓冲体系来抵抗蛋白质在提取的过程中发生的ｐｈ值变化ꎮ
(三)ＴＣＡ￣ａｃｅｔｏｎｅ法
ＴＣＡ￣ａｃｅｔｏｎｅ法与其说是一种方法ꎬ还不如说是一种裂解液ꎬ在蛋白质的提取过程中ꎬ裂解液可以充分的将蛋白质从玉米中分离出来ꎬ这种利用解离液的方法相比较于前两种方法来说ꎬ其过程操作非常复杂ꎬ且每一步步骤都必须严格按照操作规则来进行ꎬ如果中间出现错误ꎬ那么就会对蛋白质的提取产生一定的影响ꎬ且会破坏蛋白质本身的结构特性ꎮ另外ꎬ这种方法对蛋白质存储的环境也有一定的要求ꎬ在高于或者低于一定范围的温度时ꎬ会破坏蛋白质本身的结构特性ꎮ蛋白质本身具有的结构特性才能在食物中提供人们身体所需要的营养物质ꎬ如果在实验中破坏了蛋白质结构ꎬ就要考虑重新进行提取与测量过程了ꎮ
二㊁蛋白质浓度测定方法(一)Ｂｒａｄｆｏｒｄ
Ｂｒａｄｆｏｒｄ法测量蛋白质的浓度属于染料结合法的一种ꎮ蛋白质与Ｂｒａｄｆｏｒｄ结合在２ｍｉｎ左右的时间内达到平衡ꎬ完成反应十分迅速ꎮ这种测量方法所需要的实验药剂需要进行现场配比ꎬ在常温条件保存在棕色试剂瓶中三个月ꎬ但这段时间可能会出现染料的沉淀ꎬ所以每次使用前需混合均匀ꎮ在实验开始之前ꎬ进行摇晃ꎬ可以让两者之间充分混合均匀ꎬ使他们的作用能发挥到最大ꎬ在实验中能进行充分反应ꎮ
(二)紫外分光光度法
紫外线在我们的生活中是一种常见的光束ꎬ每天我们都会被紫外线照射ꎬ但是紫外线长时间的照射会对人的身体造成一定的伤害ꎮ紫外线在工业化学领域中也发挥着重要的作用ꎬ尤其是在室内实验中ꎬ紫外线的照射能发现很多化学原料内在的性质ꎮ同样的ꎬ紫外线的光照也可以测量出玉米中各个部位的蛋白质含量ꎮ在玉米中测量蛋白质含量的方法ꎬ利用的是紫外分光光度法ꎮ紫外￣可见分光光度法是在１９０~８００ｎｍ波长范围内测定物质的吸光度ꎬ用于鉴别㊁杂质检查和定量测定的方法ꎮ紫外分光光度法是一种采用光束对于蛋白质浓度进行测量的一种方法ꎬ因为蛋白质对于光波的吸收程度不一样ꎬ对比不同浓度下蛋白质对于光波的吸收程度ꎬ从而判断出蛋白质的浓度ꎮ
三㊁对玉米中蛋白质含量测定结果的分析
玉米中含有丰富的㊁大量的蛋白质ꎬ通过以上几种提取与测量浓度方法的分析发现ꎬ在玉米中不同部位ꎬ蛋白质含量是不同的ꎬ而要测量蛋白质的含量ꎬ就需要在实验中针对不同玉米不同部位采用不同的方法进行测定ꎮ在实际实验中ꎬ提取蛋白质的实验可以多做几组ꎬ通过应用不同的提取方法ꎬ或者实验的变量可以改为是玉米中不同的部位ꎮ最终得出不一样的结论ꎮ
四㊁小结
本文分析了几种提取蛋白质与浓度测量的方法ꎮ在实际的实验过程中ꎬ实验者应当根据现场的自然环境确定采用何种方法ꎬ避免外界环境对蛋白质的结构性质产生影响ꎬ同时也要保证蛋白质的生物结构特性在提取㊁测量的过程中不会发生变化ꎮ本文针对玉米中含有的蛋白质含量进行了探究ꎬ首先探讨了玉米中提取蛋白质的方法ꎬ主要有磷酸缓冲液法㊁Ｔｒｉｓ法㊁ＴＣＡ￣ａｃｅｔｏｎｅ法ꎬ这三种方法都是采用化学试剂完成的ꎬ因而在实验中要注意试剂的配比与反应ꎬ另外ꎬ化学试剂在实际环境中具有一定特殊的性质ꎬ可能会发生挥发ꎬ也可能会发生氧化ꎬ因而要注重化学试剂的保存方法ꎮ其次ꎬ介绍了蛋白质含量的测定方法ꎬ即测量在玉米中含有多少蛋白质ꎬ应用的方法有Ｂｒａｄｆｏｒｄ和紫外分光光度法ꎬ对于测量方法的应用ꎬ研究者在实验的过程中要充分考虑实验环境的情况ꎬ确定采用哪种方法才是最为合适的ꎬ对测量结果进行最终的总结与分析ꎮ
参考文献:
[１]张龙翔ꎬ张庭芳ꎬ李令媛.生化实验方法和技术[Ｍ].北京:高等教育出版社ꎬ１９８１:１６４￣１６９.
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１科技创新
科技风２０２０年４月。