生化检验实验TGTC

实验四
实验名称：磷酸甘油氧化酶法测定血清甘油三脂
实验目的与要求：掌握磷酸甘油氧化酶法测定血清甘油三脂的基本原理。

实验仪器、试剂：血清甘油三脂测定试剂盒，分光光度计
实验原理：血清中甘油三脂经脂蛋白脂酶作用，可以水解为甘油和游离脂肪酸，甘油在ATP和甘油激酶的作用下，生成3-磷酸甘油，再经磷酸甘油氧化酶作用氧化生成磷酸二羟丙酮和过氧化氢，过氧化氢与4-氨基安替比林及4-氯酚在过氧化物酶作用下，生成红色醌类化合物，其显色程度与TG的浓度成正比
操作方法：
1、取3支试管，依次加入下列试剂
单位（ml）空白标准样本
试剂R1 0.8 0.8 0.8
蒸馏水 0.01 －－
标准－ 0.01 －
样本－－ 0.01
混匀各管，37℃水浴5分钟
试剂R2 0.2 0.2 0.2
混匀各管，37℃水浴5分钟，
546nm，0.5cm比色杯比色，空白调零，读取各管的吸光度
结果分析与结论：TG（mmol/L） =A样/A标×2.26（参考值： 0.7－1.7mmol/L）
临床意义：
思考题：实验指导79页3题
实验五
实验名称：血清中总胆固醇的测定
实验目的与要求：掌握胆固醇氧化酶法测定血清中总胆固醇的基本原理。

实验仪器、试剂：血清总胆固醇体外测定试剂盒，可见分光光度计
实验原理：血清中胆固醇酯可被胆固醇酯酶水解为游离胆固醇和游离脂肪酸，胆固醇在胆固醇氧化酶的氧化作用下生成Δ4－胆甾烯-3-酮和过氧化氢，过氧化氢在4－氨基安替比邻和酚存在时，经过氧化物酶催化，反应生成苯醌亚胺非那腙的红色醌类化合物，其颜色深浅与标本中TC含量成正比。

操作方法：
1、将R1试剂和R2试剂等量混合，组成工作液
2、取3支试管，依次加入下列试剂
单位（ml）空白标准样本
蒸馏水 0.01 －－
标准－ 0.01 －
样本－－ 0.01
酶工作液 1.0 1.0 1.0
3、混匀各管，37℃水浴10分钟，505nm，0.5cm比色杯比色。

空白调零，读取各管的吸光度
结果分析与结论：TC=A样/A标×5.16（mmol/L）
正常参考值：<5.17mmol/L 临界值：5.17-6.18 mmol/L
临床意义：
思考题：实验指导75页4题。