动物繁殖学课件4转基因与克隆2
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动物克隆技术ppt课件
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▪ 将新的卵细胞植入羊的结扎的输卵管内，6 天后发育成桑椹期胚胎或囊胚（8－16个细 胞），再移入假孕母羊子宫内。
▪ 产下多莉即为6岁母羊的复制品，也为白色。
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使用最多的克隆方法 ——胚胎细胞克隆
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3.克隆的基本过程
▪ 动物克隆技术的核心是核移植。 ▪ 核供体动物的选择与细胞核的获得。 ▪ 核受体动物的选择与细胞核的移出。 ▪ 供体核的移入及原核的取出。 ▪ 胚泡的体外试管培养。 ▪ 代母的选择与胚泡移入子宫。 ▪ 克隆动物的体内发育与出生。
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4.克隆动物的研究价值和发展趋势
▪ ①应用克隆技术，繁殖优良物种 ▪ ②建造动物药厂，制造药物蛋白。 ▪ ③建立实验动物模型，探索人类发病
规律。 ▪ ④克隆异种纯系动物，提供移植器官。 ▪ ⑤拯救濒危动物，保护生态平衡。
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有关克隆动物与人存在 的问题
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（1）技术不成熟
是指由一个动物经无性繁殖是指由一个动物经无性繁殖asexualasexualreproductionreproduction或孤雌生殖而产生的多个具有与或孤雌生殖而产生的多个具有与亲本相同遗传信息的同质性后代包括孤雌激活亲本相同遗传信息的同质性后代包括孤雌激活生殖生殖卵裂球分离与培养卵裂球分离与培养胚胎分割胚胎分割以及核移植以及核移植根据核卵供体的来源不同可分为胚胎细胞克隆动物和体细胞克隆动物两种
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世界10年克隆研究之路
1996年 第一只成年体细胞克隆羊“多利” 诞生 1997年 一头用胎盘克隆而成的荷兰牛亮相。 1998年 两头由母牛细胞克隆而成的小牛在东京出生。
《动物克隆》PPT课件
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2.2 受体胞质的选择和处理
2.2.1 卵母细胞在动物克隆中的作用
在克隆中，供核细胞的全能性是基础，但这种全能性 只有在特定的条件下才能实现。这一特定条件就是卵 母细胞。研究发现：早期胚胎的发育首先是由母型信 息调控（maternal regulation）的，直到合子型基因 被 激 活 ， 才 能 过 渡 到 合 子 型 调 控 （ zogotic regulation）。也就是要经过由母源控制向合子型控 制胚胎发育的转变（maternal-zygotic transition, MZT）。
目前一般以排出第一极体作为卵母细胞成熟 的标志。
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2.2.5 卵母细胞的激活
成熟后的卵母细胞停滞于MⅡ期，自然条件下， 当精子穿入（受精）后会激活卵母细胞，启动一 系列生化事件和形态变化。
面对问题：核移植胚是怎样被激活的？
解决途径：
途径一：电激活。电脉冲剌激是最经典、应用最 为广泛的卵母细胞激活方式。细胞膜在瞬间高压 电流脉冲的作用下，激发穿孔，从而使细胞内外 的离子和大分子物质发生短暂流动，其中钙离子 的内流会导致卵母细胞活化。
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途径二：化学物质激活。包括乙醇、钙离子载 体A23187（Calcium ionophore A23187, CaA）、 离 子 霉 素 （ Ionomycin）、Sr2+、 Thimerosal(THI) 、Dithiothreitol(DTT)、三 磷 酸 肌 醇 、 精 子 因 子 （ sperm factor, SF） （精子的提取物）。
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1938年，Hans Spermann提出了克隆动物的设想：从一 个分化细胞中提取细胞核，然后注入另一个去核的受 精卵中构建新胚胎，他同时提出用体细胞进行动物克 隆的思想，但一直未能付诸实施。
转基因动物与克隆精精品PPT课件
模型 2、肿瘤转基因动物模型
3、代谢疾病转基因动物模型 （1）高歇氏病转基因动物模型 （2）家族性神经多发性淀粉样变
（FAP）转基因小鼠 （二）基因治疗的动物模型：
将外源生长激素基因导入“侏儒 症”小鼠——个头增大3倍，恢复生育 能力。
左侧为转移了大鼠生长激素基因的小鼠
1982年，Richard Palmiter 和 Ralph Brinster 领导 的一个小组将一个能够被锌调控的DNA元件与大鼠的生长激 素基因连在一起，并将其注射到了受精了的小鼠胚胎中， 从而培育出了世界上第一批转基因小鼠。这些转基因小鼠 长期取食含有足量锌的食物后，就会长得非常大。转基因 小鼠的出现掀起了遗传学研究的新的浪潮。
第二节 克隆动物
一、克隆动物的概念—— 动物通过体细胞进行的无性生殖（也
称无性繁殖）以及由无性生殖形成的基因 型几乎完全相同的后代个体组成的群体。
世界卫生组织在关于克隆的非正式声 明中定义为：
遗传上同一的机体或细胞系（株）的 无性生殖。
二、动物克隆技术的基本方法 （一）胚胎分割 （二）细胞核移植：
6、 1989年，意大利拉维特拉纳运用精 子载体法转移外源性DNA，获得PSV2— CAT转基因小鼠。
7、我国1980年代开始转基因动物 研究，成功研制出转基因牛、小 鼠、猪、羊、兔、金鱼。
新进展：
2000年10月，世界首只 转基因猴在美国诞生， 取名“安迪”，这是世 界上首次培育成功转基 因灵长类动物。
料极少的转基因家畜。
（四）研制和生产生物活性物质：
将具有医学价值的生物活性物质
（如组织型纤溶蛋白元激活因子，tPA） 导入家畜或家禽的受精卵，从转基因 动物的体液如乳汁、血液、尿液、腹 水中收获基因产物。
3、代谢疾病转基因动物模型 （1）高歇氏病转基因动物模型 （2）家族性神经多发性淀粉样变
（FAP）转基因小鼠 （二）基因治疗的动物模型：
将外源生长激素基因导入“侏儒 症”小鼠——个头增大3倍，恢复生育 能力。
左侧为转移了大鼠生长激素基因的小鼠
1982年，Richard Palmiter 和 Ralph Brinster 领导 的一个小组将一个能够被锌调控的DNA元件与大鼠的生长激 素基因连在一起，并将其注射到了受精了的小鼠胚胎中， 从而培育出了世界上第一批转基因小鼠。这些转基因小鼠 长期取食含有足量锌的食物后，就会长得非常大。转基因 小鼠的出现掀起了遗传学研究的新的浪潮。
第二节 克隆动物
一、克隆动物的概念—— 动物通过体细胞进行的无性生殖（也
称无性繁殖）以及由无性生殖形成的基因 型几乎完全相同的后代个体组成的群体。
世界卫生组织在关于克隆的非正式声 明中定义为：
遗传上同一的机体或细胞系（株）的 无性生殖。
二、动物克隆技术的基本方法 （一）胚胎分割 （二）细胞核移植：
6、 1989年，意大利拉维特拉纳运用精 子载体法转移外源性DNA，获得PSV2— CAT转基因小鼠。
7、我国1980年代开始转基因动物 研究，成功研制出转基因牛、小 鼠、猪、羊、兔、金鱼。
新进展：
2000年10月，世界首只 转基因猴在美国诞生， 取名“安迪”，这是世 界上首次培育成功转基 因灵长类动物。
料极少的转基因家畜。
（四）研制和生产生物活性物质：
将具有医学价值的生物活性物质
（如组织型纤溶蛋白元激活因子，tPA） 导入家畜或家禽的受精卵，从转基因 动物的体液如乳汁、血液、尿液、腹 水中收获基因产物。
《转基因克隆动物》课件
04
转基因克隆动物的伦理和社 会问题
转基因克隆动物的伦理问题
动物福利问题
转基因克隆动物通常在实验室或 农场中饲养，可能导致动物遭受
痛苦和折磨。
生物多样性问题
转基因克隆动物可能对生物多样性 产生负面影响，例如破坏生态平衡 和导致基因污染。
人类干预自然规律
转基因克隆技术违背了自然规律， 过度干预可能导致不可预测的后果 。
2000年代
随着CRISPR-Байду номын сангаасas9等新型基因编辑 技术的出现，转基因克隆动物的培育 效率和质量得到进一步提高。
1990年代
科学家开始尝试将转基因技术与克隆 技术结合，培育转基因克隆动物。
2010年代至今
随着基因编辑技术的发展，科学家成 功培育出多种转基因克隆动物，如转 基因克隆猪、转基因克隆牛等。
转基因克隆动物的应用前景
医学研究
01
转基因克隆动物可用于医学研究，模拟人类疾 病的发生和发展过程，为疾病治疗和药物研发
提供实验模型。
农业生产
03
转基因克隆动物可用于优良品种的快速繁殖和 遗传改良，提高农业生产效率。
生物制药
02
利用转基因克隆动物生产人类疾病治疗所需的 蛋白质、酶等生物活性物质，具有广阔的市场
THANKS
前景。
濒危物种保护
04
通过转基因克隆技术，可以保护濒危物种，避 免其灭绝。
02
转基因克隆动物技术
转基因技术
转基因技术定义
转基因技术是指通过人工方法将一个生物的基因切出来，接到另一个生物的基因上，让接收基因 的生物表现出新的特性。
转基因技术的应用
转基因技术广泛应用于农业、医药、工业等领域，例如转基因作物、转基因药物等。
《动物克隆技术》课件
动物克隆技术的挑战与前景
技术难题与挑战
虽然动物克隆技术取得了一定的成果，但仍存在许多技术难题和挑 战，如细胞核移植的成功率、胚胎发育的异常等。
伦理道德问题
动物克隆技术也引发了许多伦理道德问题，如对动物的权益保护、 人类的道德责任等。
前景展望
尽管存在许多挑战，但动物克隆技术的发展前景仍然广阔，未来有望 在繁殖、医学、生物多样性保护等领域发挥更大的作用。
感谢您的观看
THANKS
《动物克隆技术》ppt 课件
目录 CONTENT
• 克隆技术简介 • 动物克隆技术的基本原理 • 动物克隆技术的实践与案例 • 伦理和法律问题 • 结论
01
克隆技术简介
克隆技术的定义
克隆技术是一种通过无性繁殖产生与原个体遗传物质完全相同的复制体的技术。
无性繁殖是指不经过生殖细胞的结合，由母体直接产生新个体的生殖方式。
对动物克隆技术的监管和规范
01
02
03
制定技术标准
制定严格的动物克隆技术 标准，确保技术的安全性 和可靠性，减少对动物的 伤害。
建立审查机制
建立独立的审查机制，对 动物克隆项目进行审批和 监督，确保其符合伦理和 法律规定。
加强国际合作
加强国际合作，共同制定 动物克隆技术的国际法律 和监管框架，促进技术的 合理应用和发展。
生物多样性保护
用于保护濒危物种和珍稀动物，通 过克隆技术可以繁殖出更多的个体 ，增加种群数量，降低灭绝风险。
02
动物克隆技术的基本原理
动物克隆技术的定义
动物克隆技术的定义
核移植
动物克隆技术是一种通过核移植、胚胎发 育和生产克隆动物的过程，实现动物的无 性繁殖。
核移植是将动物的一个细胞核转移到另一 个去除了细胞核的卵母细胞中，通过电刺 激使两者融合，形成重构卵。指通过受精或人工受精获得胚胎 ，再经过移植获得新个体的方法；体细胞克隆则是通过核移植技术将体细胞核移植到去核的 卵母细胞中，再经过胚胎发育和移植获得新个体的方法。
《动物转基因技术》课件
生物制药与生物反应器
生物制药
利用动物转基因技术，可以生产出具有特定生物活性的蛋白质、酶等生物制品 ，用于治疗、诊断和预防疾病。
生物反应器
动物转基因技术还可以用于构建生物反应器，通过转基因动物的器官或组织作 为生物反应器，生产出大量的生物制品，降低生产成本和提高生产效率。
动物育种与改良
动物育种
利用动物转基因技术，可以对动物的 遗传物质进行改造和优化，培育出具 有优良性状的新品种。例如，转基因 猪、转基因牛等。
动物改良
通过转基因技术，可以改善动物的生 长性能、繁殖性能、抗病性能等性状 ，提高动物的产量和品质，为畜牧业 的发展提供有力支持。
05
动物转基因技术的安全性 问题
转基因动物的安全性评估
01
02
03
转基因动物的安全性评估是确保 转基因技术应用的重要环节，需 要从多个方面进行综合评估，包 括遗传稳定性、生物学特性、生 态影响等方面。
详细描述
转基因猪的实验研究主要通过胚胎移植、体 细胞核移植等技术手段，将外源基因导入猪 的受精卵或胚胎细胞中，从而获得携带外源 基因的转基因猪。这些转基因猪可用于研究 外源基因的表达、功能以及对生长发育、生 产性能等方面的影响。
转基因牛的实验研究
总结词
转基因牛是研究转基因技术的又一重要动物 模型，具有繁殖周期长、生产性能高、经济 价值大等优点，可用于提高牛的抗病能力和 生产性能等方面的研究。
安全性、毒理学等方面的评估。
评估过程中需要关注转基因食品的原料 来源、生产工艺、成分含量等方面的变
化，以及可能对人类健康的影响。
评估结果需经过严格的科学论证和审查 ，确保转基因食品的安全性和可控性。
转基因技术的伦理与法律问题
动物克隆教学课件ppt
06
教学总结与展望
本课程的教学目标与内容总结
• 教学目标 • 掌握动物克隆的基本原理和技术 • 了解克隆技术在科研和生产中的应用 • 培养学生的独立思考和实验操作能力 • 内容总结 • 克隆技术的历史与发展 • 克隆技术的原理和方法 • 克隆技术在动物育种、生物医药、濒危物种保护等领域的应用案例 • 实验操作：动物克隆实验的基本流程与注意事项
克隆技术在人类社会面临的挑战和争议
伦理问题
安全和健康问题
社会接受程度
克隆技术涉及到人类自身的复制和改 造，引发了关于人类尊严、身份和伦 理的争议。
克隆技术可能带来新的安全和健康问 题，如基因突变、传染病传播等。
克隆技术的社会接受程度也是一大挑 战，许多人对其持怀疑态度，需要更 多的教育和宣传来提高公众的认识和 理解。
02
保护动物权益的意义
保护动物权益有助于减少对动物的伤 害，维护生态平衡和可持续发展。
03
动物保护的法律与政 策
各国制定了一系列法律和政策来保护 动物的权益，如《动物保护法》、《 野生动物保护法》等。
克隆动物的福利问题
克隆动物的概念
克隆动物是指通过基因技术复制 出来的动物个体。
克隆动物的福利问题
在克隆动物的过程中，可能会出 现一些问题，如发育异常、疾病 和死亡等，这些都是克隆动物的 福利问题。
目前，科学家正在研究如何提高克隆效率、降低成本 以及解决伦理和安全问题等方面的问题。
02
动物克隆技术
胚胎克隆技术
定义
胚胎克隆技术是一种通过细胞 核移植技术将一个胚胎的细胞 核转移到另一个去除了细胞核 的卵母细胞中，从而产生遗传
相同的胚胎的方法。
应用
胚胎克隆技术在畜牧业、医学 、濒危动物保护等方面具有广
动物繁殖学课件4转基因与克隆2
已获得整合有生长激素（GH）、生长激素释放因子（GRF）、 肌肉生长刺激因子（cSK1）及能提高羊毛质量、牛奶产量等外源 基因的转基因家畜。其中含有GH的转基因猪己稳定地的遗传了五 个世代，其血液中GH均保持较高浓度，虽个体不比同胞更大，但 体重增长较快，料肉转化率提高17%，背膘厚度从18.5±1.8毫米 下降到7.0±1.8毫米；
出于安全性考虑，反转录病毒转染法主要是作 为实验手段应用于转基因动物的研究。
胚胎干细胞转移基因转移 法
胚胎干细胞(Embryonic Stem Cell，简称ES细胞)是从哺乳动物早 期胚胎的内细胞团中分离的一种二倍体细胞，可在体外培养并保持 全能分化的潜能，如给予适当环境即可形成胚系集落。
因此，胚胎干细胞经转染并鉴定后，移植到哺乳动物正常发育的囊 胚腔内，再将囊胚植入假孕动物子宫中，可产生嵌合体动物。转化 的细胞在嵌合体中能分化发育成为全能的生殖细胞，经简单的杂交 繁育即可得到携带外源基因的纯合转基因动物。
Measure Transgenic milk target protein
expression
目前，国际上己有多种转基因动物（绵羊、山羊、猪和牛） 能生产上百种医用蛋白，其中有30余种进入Ⅱ、Ⅲ期临床，有 的也己进行商业开发，产生了良好的经济效益，正逐步发展成 一新兴产业。
如荷兰金发马公司培育的转基因牛，生产人乳铁蛋白，提炼 的营养奶粉销售额为50亿美元；英国罗斯林研究所培育的抗胰 蛋白酶转基因羊，每升羊奶价值6000美元；芬兰得到红细胞生 成素的转基因牛，年产奶价值为40多亿美元。
异种移植目前最大的障碍，便是受体对异种器官的超急 性排斥反应，克服这一障碍便成为异种器官移植成功的一 个关键。
应用转基因技术，培育表达人补体调控蛋白，如人膜辅助 因子蛋白（human membrane cofactor protein MCP）、 人衰变加速因子（human decay-accelerating factor DAF） 的转基因猪，有望抑制或减弱人补体对猪器官的攻击。
出于安全性考虑，反转录病毒转染法主要是作 为实验手段应用于转基因动物的研究。
胚胎干细胞转移基因转移 法
胚胎干细胞(Embryonic Stem Cell，简称ES细胞)是从哺乳动物早 期胚胎的内细胞团中分离的一种二倍体细胞，可在体外培养并保持 全能分化的潜能，如给予适当环境即可形成胚系集落。
因此，胚胎干细胞经转染并鉴定后，移植到哺乳动物正常发育的囊 胚腔内，再将囊胚植入假孕动物子宫中，可产生嵌合体动物。转化 的细胞在嵌合体中能分化发育成为全能的生殖细胞，经简单的杂交 繁育即可得到携带外源基因的纯合转基因动物。
Measure Transgenic milk target protein
expression
目前，国际上己有多种转基因动物（绵羊、山羊、猪和牛） 能生产上百种医用蛋白，其中有30余种进入Ⅱ、Ⅲ期临床，有 的也己进行商业开发，产生了良好的经济效益，正逐步发展成 一新兴产业。
如荷兰金发马公司培育的转基因牛，生产人乳铁蛋白，提炼 的营养奶粉销售额为50亿美元；英国罗斯林研究所培育的抗胰 蛋白酶转基因羊，每升羊奶价值6000美元；芬兰得到红细胞生 成素的转基因牛，年产奶价值为40多亿美元。
异种移植目前最大的障碍，便是受体对异种器官的超急 性排斥反应，克服这一障碍便成为异种器官移植成功的一 个关键。
应用转基因技术，培育表达人补体调控蛋白，如人膜辅助 因子蛋白（human membrane cofactor protein MCP）、 人衰变加速因子（human decay-accelerating factor DAF） 的转基因猪，有望抑制或减弱人补体对猪器官的攻击。
动物转基因技术 ppt课件
是否会认为老师的教学方法需要改进？
• 你所经历的课堂，是讲座式还是讨论式？ • 教师的教鞭 • “不怕太阳晒，也不怕那风雨狂，只怕先生骂我
笨，没有学问无颜见爹娘 ……”
• “太阳当空照，花儿对我笑，小鸟说早早早……”
那么是否可以让龙生出来的凤生来就会打洞呢？
这一个问题放在班个世纪以 前就只能是痴心妄想。我们的祖 先一刻也没有停止对用人工手段 改造生命的幻想。而我们熟知的 中国龙也许就是先民们不断幻想 的产物。但是今天这一幻想却变 成了现实它就是——基因工程。
脂 质 体 载
体 包 埋 法
流 程
病毒转染法
反转录病毒具有侵入宿主细胞并整合于 细胞染色体DNA的能力。将外源基因 DNA插入反转录病毒载体，通过辅助 细胞包装成高感染度的病毒颗粒，感染 胚胎后，将感染的桑椹期胚胎细胞导入 子宫，可发育成携带外源基因的子代动 物。该法整合率较高，目的基因不易破 坏，多是单拷贝、单位点整合，适合于 难以观察到原核的禽类受精卵。由于病 毒衣壳大小的限制，目的基因不宜超过 10kb，否则影响活性和稳定。此外， 病毒DNA可能影响外源基因在宿主动 物的表达。
显微注射法转入基因长度可以达到数百kb，并能随机地整合在 受体细胞染色体DNA上，并且直接、相对容易控制应用范围广。
但是有时会导致转基因动物基因组的重排易位、缺失或者定点 突变
显 微 注 射 法 流 程 图
脂质体载体包埋法
脂质体为人工膜泡，可作为体外物质 传递的载体。将需要转移的外源 DNA或RNA包裹于脂质体内，位于 脂质体内具有磷脂双层结构，与细胞 膜类似，因此可以与细胞膜融合，从 而将外源DNA转入到宿主细胞。此 种方法转基因效率高。
GENE
古语有云 龙生龙凤生凤，兔子生来会打洞。 老祖先么通过长期生活经验总结出的俗谚 往往与现代科学发现有着惊人的共同点。 现代生物学认为生物的遗传性状由基因决定 基因遗传信息的基本单位。一般指位于染色体上 编码一个特定功能产物(如蛋白质或RNA分子 等)的一段核苷酸序列。
• 你所经历的课堂，是讲座式还是讨论式？ • 教师的教鞭 • “不怕太阳晒，也不怕那风雨狂，只怕先生骂我
笨，没有学问无颜见爹娘 ……”
• “太阳当空照，花儿对我笑，小鸟说早早早……”
那么是否可以让龙生出来的凤生来就会打洞呢？
这一个问题放在班个世纪以 前就只能是痴心妄想。我们的祖 先一刻也没有停止对用人工手段 改造生命的幻想。而我们熟知的 中国龙也许就是先民们不断幻想 的产物。但是今天这一幻想却变 成了现实它就是——基因工程。
脂 质 体 载
体 包 埋 法
流 程
病毒转染法
反转录病毒具有侵入宿主细胞并整合于 细胞染色体DNA的能力。将外源基因 DNA插入反转录病毒载体，通过辅助 细胞包装成高感染度的病毒颗粒，感染 胚胎后，将感染的桑椹期胚胎细胞导入 子宫，可发育成携带外源基因的子代动 物。该法整合率较高，目的基因不易破 坏，多是单拷贝、单位点整合，适合于 难以观察到原核的禽类受精卵。由于病 毒衣壳大小的限制，目的基因不宜超过 10kb，否则影响活性和稳定。此外， 病毒DNA可能影响外源基因在宿主动 物的表达。
显微注射法转入基因长度可以达到数百kb，并能随机地整合在 受体细胞染色体DNA上，并且直接、相对容易控制应用范围广。
但是有时会导致转基因动物基因组的重排易位、缺失或者定点 突变
显 微 注 射 法 流 程 图
脂质体载体包埋法
脂质体为人工膜泡，可作为体外物质 传递的载体。将需要转移的外源 DNA或RNA包裹于脂质体内，位于 脂质体内具有磷脂双层结构，与细胞 膜类似，因此可以与细胞膜融合，从 而将外源DNA转入到宿主细胞。此 种方法转基因效率高。
GENE
古语有云 龙生龙凤生凤，兔子生来会打洞。 老祖先么通过长期生活经验总结出的俗谚 往往与现代科学发现有着惊人的共同点。 现代生物学认为生物的遗传性状由基因决定 基因遗传信息的基本单位。一般指位于染色体上 编码一个特定功能产物(如蛋白质或RNA分子 等)的一段核苷酸序列。
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人类疾病 动物模型
特有性状的 经济动物
转基因动物 Transgenic animal
动物生 物反应器
异种器 官移植
动物模型(转基因鼠)
由于小鼠与人类基因具有很高的同源性，且遗传背景清 晰，因此含有人类致病基因的转基因小鼠所表现的症状，与 人类相应疾病具有很高程度的可比性和真实性。
同时，转基因小鼠通过对外源基因的操作，能从分子、 蛋白、细胞、生理、遗传等不同水平，直接研究外源基因在 个体内的动态表现，能精确地检测到一个遗传改变所发生的 效应,四维的研究体系。
转基因小鼠已大量应用于基础研究的 各个领域，而转基因大动物（家畜） 则在应用研究中显示出良好的应用前 景。
制备转基因动物的基本过程
（上游） 目的(外源)基因的克隆及重组
（中游） 重组(外源)基因向载体细胞的转移
( 依据外源基因的性质、受体动物和载体细胞 的类 型，常采用反转录病毒转染、干细胞转移、电击法、 精子携带、显微注射等不同的技术途径。)
已获得整合有生长激素（GH）、生长激素释放因子（GRF）、 肌肉生长刺激因子（cSK1）及能提高羊毛质量、牛奶产量等外源 基因的转基因家畜。其中含有GH的转基因猪己稳定地的遗传了五 个世代，其血液中GH均保持较高浓度，虽个体不比同胞更大，但 体重增长较快，料肉转化率提高17%，背膘厚度从18.5±1.8毫米 下降到7.0±1.8毫米；
精子载体法转基因
子 以精子作为基因的裁体制作转基因动物以其简单、高效、 广泛适用的特点引起众多的科学家的广泛兴趣，大量实验证实， 精子能够吸附外源DNA，而且大多数被吸附的外源DNA位于 精子头部的赤道段和顶体后区，精子这种吸附DNA的能力不 是简单的物理过程而是由精子头部蛋白所介导的。
子 极少数DNA能够穿入精子核区，这部分DNA在核区内有的 被降解；有的以附加体形式存在于基因组之外，只有极少数能 够整合到基因组上，而且这种整合不是随机发生的。 子 虽然精子吸附外源基因，通过体外受精或人工授精的途径 制作转基因动物的阳性结果和阴性结果的报道时有发表，但是 这些实验之间转基因效率差异极大，而且未能获得足够的数据 对这一差异提供解释， 子 没有从理论上阐明精子携带外源基因入卵的机制，也没有建 立一套可重复性的稳定的制作转基因动物技术路线。
优点:单拷贝基因导入且转导效率高，可达100%；整合常发生在病毒基因片段 上，宿主基因不会被破坏；整合受病毒基因插入机制控制，不易发生大的突变； 单一位点整合，易分析插入位点；
缺点:经嵌合体途径，实验周期长；转导基因不能超过10kb；不安全。在外源 基因整合的同时，病毒基因也被整合到宿主染色体上，造成野生型病毒污染，有 突变成新病毒及激活致癌原基因的可能。
己培育了许多种(如白血病、高血压、肿瘤、老年病等) 转基因小鼠，使人类对致病基因的发病机理、遗传规律及 基因表达与结构、环境因素的关系有了一个深入的了解， 从而能进行科学的诊治。
转基因经济动物
受“超级小鼠”的启发，人们希望通过转移和表达适当的基因， 进行转基因育种，就可以培育出生长快、节省饲料和抗病的经济动 物，使畜牧业和水产养殖业的效益成倍提高。
转基因动物的研究
首例整合有不同外源基因的转基因动物 转基因兔 (Brem 1985) 转基因绵羊 (Hammer 1985) 转基因猪 (Hammer 1985) 转基因牛(Roschlau1989) 转基因山羊 (Ebert 1991) 转基因鱼 (朱作言1986) 转基因鸡 (Sang 1994)
出于安全性考虑，反转录病毒转染法主要是作 为实验手段应用于转基因动物的研究。
胚胎干细胞转移基因转移 法
胚胎干细胞(Embryonic Stem Cell，简称ES细胞)是从哺乳动物早 期胚胎的内细胞团中分离的一种二倍体细胞，可在体外培养并保持 全能分化的潜能，如给予适当环境即可形成胚系集落。
因此，胚胎干细胞经转染并鉴定后，移植到哺乳动物正常发育的囊 胚腔内，再将囊胚植入假孕动物子宫中，可产生嵌合体动物。转化 的细胞在嵌合体中能分化发育成为全能的生殖细胞，经简单的杂交 繁育即可得到携带外源基因的纯合转基因动物。
应用胚胎干细胞进行基因转导，不仅整合率较高，并能在细胞水平 对外源基因的表达载体进研究筛选，结合相关技术手段，能实现定 点操作，比如基因剔除(gene knockout)、基因置换(gene knockin)。
但获得哺乳动物胚胎干细胞的克隆株系具有相当的难度。目前，该 方法仅在转基因小鼠的研究中应用较为成熟。
但由于动物的经济性状(如生长速度、瘦肉率、产蛋量等)一般是由 多个基因协调控制的，仅转移单个基因较难达到理想的效果。如整 合有生长激素基因的猪和羊，其血液中的生长激素水平显著提高， 在表现出生长快、饲料省、瘦肉率高的同时，也存在体质普遍下降 及有繁殖障碍等不良性状，难以推广应用。转基因鱼是个例外。
应用显微18-24小时， 输卵管回收
手术法回收受精卵
受体母猪
原核期受精卵
同步发情
离心是显示 原核有效的
方法
雄性原核
假孕母猪 产仔
胚胎移植
移植至同步化处理 的受体输卵管内
超数排卵
每微升约含1000 个拷贝基因
外源基因
显微注射
外径1-2微米玻璃 微针，向原核注
入1-2微升
（下游） 转基因的检测及转基因动物的培育
反转录病毒基因转染 法
反转录病毒(retrovirus,RV)是RNA病毒，含两条RNA，进入细胞后，反转录 成双链DNA，通过DNA进行复制。己有几种哺乳类和禽类的反转录病毒，作为 转基因载体 (复制缺陷型和复制互补型)。
将外源基因与反转录病毒的原病毒重组，与细胞或胚胎共培养，通过感染将外 源基因转导到载体细胞的常染色体或性染色体上。这一过程都是由病毒编码的酶 所介导的 。
外源基因显微注射法具有外源基因的长度 不受限制，可直接转导不含载体的DNA片段， 实验周期短，且较安全，是目前培育转基因动 物最有效、成功率较高的技术途径；
影响因素：DNA浓度、缓冲液成份、基因 构型、注射部位等
阳性率(以移植产下的原代活仔畜计)： 小鼠(17.3%)、家兔(12.8%)、大鼠 (17.6%)、 牛(3.6%)、猪(9.2%)、绵羊 (8.3%)。