富硒青钱柳虫草复方制剂的研制及降血糖作用研究
抗糖尿病新药青钱柳植物的开发研究可行性报告.doc
抗糖尿病新药青钱柳植物的开发研究可行性报告.doc南昌市科技计划项目可行性研究报告计划类别：工业攻关项目类别：重点攻关项目课题名称：抗糖尿病新药青钱柳植物的开发研究申请单位：江西中医学院（盖章）项目（课题）负责人：舒任庚起止年限：2006.8-2008.8通讯地址、邮编：南昌市湾里区云湾路18号330002联系电话、传真：0791-*******、135********二○○五年十月抗糖尿病新药青钱柳植物的开发研究可行性研究报告一、选题的必要性1、项目所处技术领域产业政策；2、项目所处技术领域技术发展现状；3、项目技术先进性，对相关领域技术进步的推动作用；4、项目目前进展情况。
青钱柳[Cyclocarya Paliurus（Batal.）Iljinsk]别名摇钱树（江西）、甜茶树（江西、四川）、青钱李（浙江）、山麻柳（湖北、湖南）、山化树（安徽）等，系胡桃科（Juglandaceae）青钱柳属的乔木植物，该属植物现仅存一种，为我国特产。
主要分布于江西、安徽、江苏、浙江、福建、台湾、湖北、湖南、四川、贵州、广西、广东和云南东南部，我省民间采摘其甜嫩叶制成保健茶（称为“神茶”）用于清热解暑、生津止渴、延年益寿、提神益智、降脂减肥、治疗高血压和冠心病等已有二百多年的历史。
本课题组从1986年开始着手对青钱柳树叶的化学成分、药理活性、毒理学及临床应用等方面进行全面的研究，取得了省科技成果一项，研究水平经专家评审达到国际先进水平。
在此基础上研制开发出青钱茶，然后组建江西修水神茶集团公司，将青钱柳神茶全面推向市场。
产品先后荣获香港国际食品博览会银奖，全国星火计划成果展销洽谈会金奖，联合国TIPS 发明创新之星奖，香港国际家庭保健食品批准证书和绿色食品证书，并先后通过日本厚生省、美国FDA、德国卫生部的审查批准，产品远销美欧、日、韩等发达国家。
由于神茶明显的保健功效，已引起国内外的关注，自从上世纪90年代初开始，《江西日报》、新华社、《人民日报》、《健康报》、《北京日报》、《解放日报》、《文汇报》等许多国内媒体先后推介梅山神茶─青钱柳神茶。
广西青钱柳降血糖有效成分及作用机制的研究
学校代码 编 号
张 小 芳 硕 士 降 血 糖 有 效 成 分 及 作 用 机 制 的 研 究
2010
硕士研究生学位论 文
广西青钱柳降血糖有效成分及作用机 制的研究
学 科 专 业 : 病理与病理生理学 研 究 方 向 : 糖尿病病理 研究生姓名 : 张 学 小 芳
号 : 0701008 科学学位 小 群 副教授
目录
中 文 摘 要 .......................................................................................................... I ABSTRACT ........................................................................................................ III 符号说明 .............................................................................................................. V 前言 ..................................................................................................................... VI 广西青钱柳降血糖有效成分及作用机制研究 ................................................... 1 第一节 青钱柳多糖降血糖作用的研究 ............................................................. 1 1 材料与方法 ....................................................................................................... 1 1.1 实验材料 ......................................................................................................... 1 1.2 实验方法 ......................................................................................................... 2 1.3 统计学方法 ..................................................................................................... 5 2 结果 ................................................................................................................... 6 2.1 多糖组分的提取及鉴定 ................................................................................ 6 2.2 CP 降血糖作用的研究 ................................................................................... 6 2.3 胰岛形态学观察 ............................................................................................. 8 3 讨论 ................................................................................................................... 9 3.1 糖尿病动物模型的建立和评定 ..................................................................... 9 3.2 CP 改善糖代谢紊乱的作用 ......................................................................... 10 3.3 CP 对胰腺组织形态学上的影响 ................................................................. 11 4 结论 ................................................................................................................. 12 第二节 青钱柳多糖体外抗氧化作用的研究 ................................................... 13 1 材料与方法 ..................................................................................................... 13 1.1 实验材料 ....................................................................................................... 13 1.2 实验方法 ....................................................................................................... 14
利用青钱柳进行降糖药物研发
利用青钱柳进行降糖药物研发目的:青钱柳[Cyclocarya paliurus（Batal）Iljinsk]为双子叶植物纲（Dicotyledoneae）胡桃科（Juglandaceae）青钱柳属（Cyclocarya）植物,广泛分布于长江以南的贵州、广东、广西和云南等省,在中药处方中其树树皮、叶具有清热消肿、解毒、止痛功能,对高血压、糖尿病、冠心病及神经衰弱等疾病具有很好的防治作用。
现代药理学研表明青钱柳具有明显的降血糖、降血脂、降血压及增强免疫力,抗衰老等多种生物活性,虽然青钱柳具有多种药理活性,但其研究多集中于粗提物水平,而单体化合物少有报道。
为了更好的探究青钱柳的药效物质基础,对其化学成分进行系统的研究具有十分重要的意义。
本文对青钱柳叶的乙醇提取物的乙酸乙酯萃取物进行系统化学成分研究和结构鉴定,并且对分离到的单体化合物进行了初步的抗氧化和α-葡萄糖苷酶抑制活性进行了评价,为青钱柳的进一步开发利用提供了科学依据。
方法:运用溶剂萃取法和综合色谱方法（硅胶柱色谱、ODS柱色谱、MCI-gel CHP-20P柱色谱、Sephadex LH-20柱色谱、半制备型HPLC等）,同时,利用抗氧化法和α-葡萄糖苷酶抑制活性法对分离得到的21个化合物进行了抗氧化研究和α-葡萄糖苷酶抑制活性研究。
结果:从青钱柳叶乙酸乙酯部位分离得到21个化合物,利用谱学分析鉴定了它们的结构,分别属于黄酮类:山奈酚-3-O-α-L-鼠李糖苷（1）,kaempferol-3-O-α-L-（4"-Z-p-cumaroyl）-rhamnoside（2）,柚皮素（3）,4’-羟基汉黄芩素（4）,hirsutrin（5）,高山苷B（6）,sterubin （7）,山柰酚（8）。
木脂素类:（6S,7R,8R）-7α-[（β-glucopyranosyl）oxy]lyoniresinol （9）,南烛木糖苷（10）,（-）-lyoniresinol 3α-O-β-D-吡喃木糖苷（11）。
青钱柳叶复方对糖尿病大鼠胰岛素抵抗影响的实验研究
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Ｊ Ｉ Ａ Ｙ ｅ ， Ｚ Ｈ Ａ Ｎ Ｇ Ｑ ｉ ａ ｎ
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ａ ｎ ｄ Ｑ ｉ ｎ ｇ ｑ ｉ ａ ｎ Ｌ ｉ ｕ ｙ ｅ Ｐ ｒ ｅ ｓ ｃ ｒ ｉ ｐ ｔ ｉ ｏ ｎ ｔ ｈ ｒ ｅ ｅ ｄ ｏ ｓ ｅ ｒ ｇ ｏ ｕ ｐ ｓ ｗ ｅ ｒ ｅ ｇ ｉ ｖ ｅ ｎ ｄ ｅ ｘ ａ ｍｅ ｔ ｈ ａ ｓ ｏ ｎ ｅ ０ ． ８ ｍ ｓ ／ ｋ ｇ・ Ｂ Ｗ ｉ ｎ ｔ ｒ ａ ｐ ｅ ｒ ｉ ｔ ｏ ｎ ｅ ａ ｌ ｉ ｎ －
柳叶复方可有效降低 ２型糖尿病 大鼠血糖水平 ， 改善 胰岛素抵抗 。 关键词 青钱柳 叶复方 ； 糖尿病 ； 胰 岛素抵抗 ； 大鼠
Ｅ ｘ ｐ ｅ ｒ ｉ ｍ ｅ ｎ ｔ ａ ｌ Ｓ ｔ ｕ ｄ ｙ ｏ ｎ Ｅ ｆ ｅ ｃ ｔ ｓ ｏ ｆ Ｑ ｉ ｎ ｇ ｑ ｉ ａ ｎ Ｌ ｉ ｕ ｙ ｅ Ｐ ｒ ｅ ｓ ｃ ｒ ｉ ｐ ｔ ｉ ｏ ｎ（ 青钱柳叶复方）
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７ ０ ４・
中国中医药科技 ２ ０ １ ７年 １ １ 月第 ２ ４卷第 ６期 Ｎ ｏ ｖ ． ２ ０ １ ７ Ｖ ｏ １ ． ２ ４ Ｎ ｏ ． ６
青 钱 柳 叶复 方对 糖 尿 病 大 鼠胰 岛素 抵抗 影 响 的 实 验 研 究
富硒青钱柳虫草片降血糖、免疫调节的实验研究
• 实验研究 •29青钱柳（Cyclocarya paliurus （Batal ） Ijinskaja ），为我国特有的单种属植物，早有古籍记载其枝叶具有清热解毒等功效，民间多将其制成茶叶饮用。
目前已有大量研究表明青钱柳具有降血糖、降血脂等功效[1-4]。
硒是一种人体重要的微量元素。
研究表明，硒具有提高人体抗氧化能力和改善免疫力等功效，适量补硒对于糖尿病的预防与治疗具有重要意义[5-8]。
有研究表明硒可以与青钱柳多糖结合形成硒多糖，且具有更好的降血糖作用[9]。
发酵虫草菌粉是通过分离天然虫草菌株，进行深层发酵得到的。
已有文献报道，发酵虫草菌粉与冬虫夏草具有相同的功效成分，具有提高免疫力、抗肿瘤等多种功效[10-11]。
我们采用恩施富硒青钱柳提取物复配发酵虫草菌粉、枸杞提取物和茯苓提取物等功效成分制成压片，旨在用富硒青钱柳提取物复配以虫草菌粉为主的天然药物活性成分能够增强降血糖效果，并且提高药物服用顺应性。
本文主要探讨富硒青钱柳虫草片对糖尿病小鼠血糖、抗氧化和免疫力的影响，为富硒青钱柳虫草片的开发利用提供实验依据。
1 材料与试剂1.1 材料：富硒青钱柳叶由湖北恩施思慧生物科技有限公司提供，75 ℃蒸馏水提取2 h 浓缩冷冻干燥得富硒青钱柳提取物。
发酵虫草菌粉、枸杞提取物、茯苓提取物购于杭州众芝康菇生物技术有限公司。
富硒青钱柳虫草片规格为0.6克/片，根据相关专利设计配方[12]，主要成分为：富硒青钱柳提取物、发酵虫草菌粉、枸杞提取物、茯苓提取物、辅料。
片剂中硒含量为79.4 µg/g ，腺苷含量为895 µg/g 。
1.2 动物：4周龄，SPF 级雄性 C57BL/6 小鼠 65只，由湖北省疾病预防控制中心提供，许可证号：SCXK （鄂）2015–0018，实验动物合格证号：42000600020649。
普通维持料及高脂饲料由湖北省疾病预防控制中心提供。
1.3 试剂和仪器：消渴丸（广州白云山中一药业有限公司）；链脲佐菌霉素（阿拉丁试剂）；罗康全活力型血糖试纸（罗氏诊断产品（上海）有限公司）；超氧化物歧化酶（SOD ）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px ）检测试剂盒（南京建成生物工程研究所）。
富硒青钱柳-黄精复方降血糖及抗氧化作用的研究
谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）和丙二醛（MDA）等指标。另外，采用体外法检测富硒青钱柳-黄精复方对 -淀粉酶及 -葡萄糖苷酶
的抑制作用和对 1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH）自由基、羟基（OH）自由基的清除能力和总抗氧化能力（T-AOC）。结果显示，富硒
青钱柳-黄精复方可降低糖尿病大鼠的空腹血糖（P ＜ 0.01），提高血清中 SOD 和 GSH-Px 的活性（P ＜ 0.01），降低 MDA 的水平
特产研究
Special Wild Economic Animal and Plant Research
11
DOI：10.16720/ki.tcyj.2021.024
富硒青钱柳 黄精复方降血糖及抗氧化作用的研究
陈丹1，罗丹1，白曦晨2，向极钎3，樊建元4，刘卫2, 5※
(1.武汉百思凯瑞生物科技有限公司，湖北 武汉 430075；2. 华中科技大学生命科学与技术学院，湖北 武汉 430074； 3. 恩施州农业科学院，湖北 恩施 4450993；4. 恩施思慧益臣生态农业发展有限公司，湖北 恩施 445099； 5. 华中科技大学国家纳米药物工程技术研究中心，湖北 武汉 430075）
(1.Wuhan Bestcarrier Biotechnology Co., Ltd., Wuhan 430075, China; 2.College of Life Science and Technology, Huazhong University of Science and Technology, Wuhan 430074, China; 3.Enshi Academy of Agricultural Sciences, Enshi 445099, China; 4. Enshi Savant ecological agriculture development Co., Ltd., Enshi 445099, China; 5.National Engineering Research
青钱柳叶复方对糖尿病大鼠胰岛素抵抗影响的实验研究
青钱柳叶复方对糖尿病大鼠胰岛素抵抗影响的实验研究贾野;张倩【期刊名称】《中国中医药科技》【年(卷),期】2017(024)006【摘要】目的:观察青钱柳叶复方对糖尿病大鼠胰岛素抵抗的影响.方法:将60只Wistar大鼠随机分为正常对照组,模型组,青钱柳叶复方低、中、高剂量组,模型组及青钱柳叶复方各剂量组在高热能饲料喂养基础上给予地塞米松腹腔注射造模,青钱柳叶复方低、中、高剂量组分别给予青钱柳叶复方7.8、15.6、31.2 mg/kg·d-1灌胃,42 d后检测血耱、胰岛素、肝耱原、肌糖原并计算胰岛素敏感指数和胰岛素抵抗指数,Tunel检测胰岛β细胞凋亡率.结果:与正常对照组比较,模型组血糖、胰岛素、胰岛素抵抗指数、胰岛β细胞凋亡率明显升高,肝耱原、肌糖原、胰岛素敏感指数明显降低,差异具有显著统计学意义(P＜0.01);与模型组比较,低、中、高剂量组血糖、胰岛素、胰岛素抵抗指数、胰岛细胞凋亡率明显降低,肝糖原、肌糖原、胰岛素敏感指数明显升高,中、高剂量组与模型组比较差异具有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01),随剂量增加,作用趋势更明显,但中剂量组和高剂量组比较无显著性差异(P＞0.05).结论:青钱柳叶复方可有效降低2型糖尿病大鼠血糖水平,改善胰岛素抵抗.【总页数】4页(P704-706,709)【作者】贾野;张倩【作者单位】武汉市普仁医院,武汉科技大学附属医院·湖北武汉430081;武汉市第九医院·湖北武汉430081【正文语种】中文【相关文献】1.青钱柳叶对糖尿病大鼠的治疗作用 [J], 扶丽君;操红缨;胡明华;尹西拳;连大卫;任文康;许艺飞;范平龙;陈娅琦;蔡泳锋2.青钱柳对T2D胰岛素抵抗大鼠肝脏氧化应激、炎症反应及FAS/IRS1的影响 [J], 姚骏凯;高学敏;李伟;付璐;王玉杰;贾岚;王蕾蕾;罗珍;王景霞3.青钱柳多糖和青钱柳黄酮对非酒精性脂肪性肝病合并2型糖尿病模型大鼠血液代谢指标及肝脏病变的影响 [J], 彭晓娟;钟绿;吴楚添;龙亮;李庆;汤绍辉4.青钱柳叶与葛根水提物对糖尿病大鼠模型的降血糖作用及其机制研究 [J], 高飞;王景霞;刘静;唐潇然;付璐;姚骏凯5.青钱柳叶煎剂对大鼠的致畸实验 [J], 田泽敏;张凯琳;刘小真;杜必钰;夏小华;邹文华;杨建军因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
富硒青钱柳多糖对糖尿病模型小鼠降血糖研究
富硒青钱柳多糖对糖尿病模型小鼠降血糖研究姜霞;罗丹;谭开祥;向极钎;刘卫【期刊名称】《中医药导报》【年(卷),期】2018(24)17【摘要】目的:探究富硒青钱柳多糖(Se-CPP)对糖尿病模型小鼠降血糖的影响。
方法:高脂饮食加腹腔注射链脲佐菌霉素建立小鼠糖尿病模型,随机分为模型组、普通青钱柳多糖(CPP)组、无机硒组、无机硒+CPP组、SeCPP低、中、高剂量组及消渴丸组,分别以生理盐水、CPP、CPP+无机硒、无机硒、Se-CPP低、中、高剂量及消渴丸连续灌胃给药42 d。
检测给药21 d、35 d及42 d的小鼠口服葡萄糖耐量,谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力,小鼠脾淋巴细胞转化指数SI。
结果:给药21 d时,消渴丸组和Se-CPP中剂量组AUC均明显低于模型组(P<0.05);给药35 d时,消渴丸组、Se-CPP低、中剂量组AUC均明显低于模型组(P<0.05或P<0.01);给药42 d时,各给药组AUC均明显低于模型组(P<0.05或P<0.01)。
各给药组小鼠血清GSH-Px活力均高于模型组(P<0.01),其中Se-CPP中剂量组GSH-Px活力最高。
在淋巴细胞转化实验中,Se-CPP中、高剂量组小鼠SI值均高于模型组(P<0.05或P<0.01)。
SeCPP对正常小鼠血糖无不良影响。
结论:Se-CPP降血糖效果优于CPP、无机硒、CPP+无机硒,其中Se-CPP中剂量组效果最为显著。
【总页数】4页(P66-69)【关键词】富硒青钱柳多糖;糖尿病;小鼠;血糖;抗氧化;淋巴细胞【作者】姜霞;罗丹;谭开祥;向极钎;刘卫【作者单位】武汉体育学院;华中科技大学;湖北思慧生物科技有限公司;恩施州农业科学院【正文语种】中文【中图分类】R285.5【相关文献】1.富硒青钱柳多糖对糖尿病模型小鼠血糖、血脂和免疫力的影响 [J], 张浩;陈伟鸿;马方励;王珊;谭开祥;向极钎;刘卫2.青钱柳对四氧嘧啶糖尿病小鼠降血糖作用的研究 [J], 易醒;谢明勇;温辉梁;邓泽元3.富硒青钱柳虫草片降血糖、免疫调节的实验研究 [J], 李东山;吕萌;谭开祥;向极钎;刘卫4.富硒青钱柳-黄精复方降血糖及抗氧化作用的研究 [J], 陈丹;罗丹;白曦晨;向极钎;樊建元;刘卫5.青钱柳多糖和青钱柳黄酮对非酒精性脂肪性肝病合并2型糖尿病模型大鼠血液代谢指标及肝脏病变的影响 [J], 彭晓娟;钟绿;吴楚添;龙亮;李庆;汤绍辉因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
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富硒青钱柳虫草复方制剂的研制及降血糖作用研究青钱柳（Cyclocarya paliurus（Batal）Ijinskaja）,为我国特有的单种属植物,又名铜钱树、摇钱李等。
早有古籍记载其枝叶具有清热解毒等功效,民间多将其制成茶叶饮用。
目前已有大量研究表明青钱柳具有降血糖、降血脂和抗氧化等功效。
发酵虫草菌粉是通过分离天然虫草菌株,进行深层发酵得到的。
已有文献报导,发酵虫草菌粉与冬虫夏草具有相同的功效成分,具有提高免疫力、抗肿瘤等多种功效。
本文以富硒青钱柳与发酵虫草菌粉为主要成分制成复方制剂,通过糖尿病模型小鼠评价其降血糖、抗氧化和免疫调节功效,采用二苯代苦味酰自由基（DPPH）、羟基自由基（·OH）、超氧阴离子
（O<sub>2</sub>·<sup>-</sup>）的反应体系对其体外抗氧化活性进行评价,并探究对链脲佐菌霉素损伤的胰岛素瘤β细胞存活率的影响。
开展的主要研究工作如下:（1）水提和醇提富硒青钱柳叶得复合提取物,复配发酵虫草菌粉、枸杞提取物、茯苓提取物制成富硒青钱柳虫草复方,将其制剂成片剂、口服液和饮料。
采用氢化物原子荧光光谱法检测富硒青钱柳虫草复方中硒元素含量,HPLC法测量腺苷含量。
结果表明,富硒青钱柳虫草复方中硒含量为79.4μg/g,腺苷含量为895μ
g/g。
（2）腹腔注射链脲佐菌霉素联合高脂饲料建立糖尿病模型小鼠,按照人体推荐剂量分为富硒青钱柳虫草复方低、中、高剂量组,连续给药42天,测量实验小鼠糖耐量、血清中抗氧化酶活力、免疫器官指数。
实验结果显示,适宜剂量的富硒青钱柳虫草复方显著降低糖尿病小鼠餐后血糖,并且具有一定的抗氧化活性和提高免疫器官指数的功效。
（3）采用二苯代苦
味酰自由基（DPPH）、羟基自由基（·OH）、超氧阴离子
（O<sub>2</sub>·<sup>-</sup>）的反应体系检测富硒青钱柳虫草复方体外抗氧化活性。
实验结果显示富硒青钱柳虫草复方可以有效的清除活性氧自由基（ROS）。
（4）使用链脲佐菌霉素损伤胰岛素瘤β细胞,测定富硒青钱柳虫草复方对损伤的胰岛素瘤β细胞存活率的影响,并检测细胞中ROS水平。
结果显示适宜剂量的富硒青钱柳虫草复方显著提高胰岛素瘤β细胞存活率。
并显著降低细胞内ROS水平。
目前,关于富硒青钱柳复配其他中药活性成分的制剂尚未有文献报道,上述研究结果为富硒青钱柳虫草复方制剂的开发提供坚实的实验依据。