固定化的酶与微生物
固定化技术应用-酶和细胞的固定化
固定化技术应用-酶和细胞的固定化试题中出现固定酶能不能催化一系列反应,查找资料,没有权威资料认为已经存在催化系列反应的酶,应该是研究方向。
选修知识的考查已经出现应用方向,也拓展到了技术的前景。
也就是说,需要在教学中创设情境适当扩大知识面,结合试题进行教学会收到很好的效果,如固定化酶技术可以拓展到固定化细胞。
问题:固定化技术以及发展前景如何?什么是固定化酶?什么是固定化细胞?011.固定化酶技术固定化酶技术是用物理或化学手段。
将游离酶封锁住固体材料或限制在一定区域内进行活跃的、特有的催化作用,并可回收长时间使用的一种技术。
酶的固定化技术已经成为酶应用领域中的一个主要研究方向。
经固定化的酶与游离酶相比具有稳定性高、回收方便、易于控制、可反复使用、成本低廉等优点,在生物工业、医学及临床诊断、化学分析、环境保护、能源开发以及基础研究等方面发挥了重要作用。
2.固定化酶技术的发展以前,固定化酶技术是把从生物体内提取出来的酶,用人工方法固定在载体上。
1916年Nelson和GrImn最先发现了酶的固定化现象。
科学家们就开始了同定化酶的研究工作。
1969年日本一家制药公司第一次将固定化的酰化氨基酸水解酶用于从混合氨基酸中生产L-氮基酸,开辟了固定化酶在工业生产中的新纪元。
我国的固定化酶研究开始于1970年,首先是微生物所和上海生化所的工作者开始了固定化酶的研究。
当今,固定化酶技术发展方向是无载体的酶固定化技术。
邱广亮等用磁性聚乙二醇胶体粒子作载体,采用吸附-交联法,制备出具有磁响应性的固定化糖化酶,简称磁性酶(M I E)一方面由于载体具有两亲性,M I E可稳定的分散于水相或有机相中,充分的进行酶催化反应;另一方面,由于载体具有磁响应性,M I E又可借助外部磁场简单地回收,反复使用,大大提高酶的使用效率。
Puleo等将钛合金表面用丙烯酸胺等离子体处理引入氨基,然后将含碳硝化甘油接枝于钛合金表面,或者将等离子体处理的钛合金先由琥珀酸酐处理,再用含碳硝化甘油接枝,进而将溶菌酶和骨形态蛋白进行固定,实现了生物分子在生物惰性金属上的固定化。
环境工程中固定化酶与固定化微生物的应用初探
环境工程中固定化酶与固定化微生物的应用初探环境工程是通过采取适当的技术手段,保护和改善自然环境,维护人类健康和促进可持续发展的工程学科。
在环境工程中,固定化酶和固定化微生物是两种常见的应用技术。
固定化酶是指将酶固定在固体载体上,形成固定化酶颗粒,以实现酶的稳定性和重复使用。
固定化酶具有许多优点,如提高催化活性,提高酶的稳定性和重复使用能力,提高产量和纯度,降低生产成本等。
固定化酶在环境工程中的应用非常广泛。
固定化酶可以用于废水处理。
废水中含有各种有机和无机污染物,这些污染物通过固定化酶可以得到有效降解。
固定化酶可以应用于废水中的有机废物处理,通过酶的作用将废物转化为无害物质,从而达到净化废水的目的。
固定化酶也可以用于废水中的重金属去除,在一定条件下,酶可以选择性地结合和去除废水中的重金属离子。
固定化酶可以用于土壤修复。
土壤污染是一个严重的环境问题,污染的土壤中含有大量的有害物质,会对生态系统和人类健康造成严重影响。
固定化酶可以应用于土壤污染物的修复。
通过固定化酶催化作用,有机和无机污染物可以被有效地降解,从而修复受污染的土壤。
固定化酶还可以应用于空气处理。
空气中存在着各种有害气体和颗粒物,这些污染物对人类健康和环境造成危害。
固定化酶可以用于空气中有害气体的降解。
一些固定化酶可以催化空气中有毒气体的转化为无害物质,从而达到净化空气的目的。
固定化微生物还可以应用于生物膜反应器。
生物膜反应器是一种基于固定化微生物的废水处理技术。
在生物膜反应器中,微生物生长在固体载体的表面,通过微生物的代谢作用,将废水中的有机和无机污染物转化为无害物质。
生物膜反应器具有高效、节能、稳定性好等特点,已广泛应用于废水处理。
酶及细胞固定化技术
酶及细胞固定化技术酶作为生物体内的催化剂,具有高效性和高特异性的特点。
但在工业生产中,酶稳定性差、易流失,造成成本过高,限制其广泛应用。
因此将酶采用固定化技术,使酶在发挥其高效、专一性同时,还能增强酶的贮存稳定性,提高了生产效率,节约了成本。
本文对酶和细胞的固定化技术进行综述。
【关键词】酶细胞固定化载体应用酶及细胞固定化技术是生物技术的重要组成部分。
20世纪60年代出现了固定化酶技术,60年代末固定化酶技术用于工业生产,70年代出现了固定化细胞技术,80年代又发展了固定化增殖细胞技术以及包括辅助因子在内的固定化多酶反应体系技术。
工程技术日益成熟,成为近代工业生产中不可缺少的组成部分。
所谓固定化技术,是指利用化学或物理手段将游离的酶或细胞(微生物),定位于限定的空间区域并使其保持活性和可反复使用的一种基本技术,包括固定化酶技术和固定化细胞技术。
固定化细胞的制备方法是多种多样的,任何一种限制细胞自由流动的技术,都可以用于制备固定化细胞。
一般来说,固定化技术大致可以分成吸附法、共价结合法、交联法和包埋法等4大类,其中以包埋法使用最为普遍。
一、固定化技术分类1.吸附法很多细胞都有吸附到固体物质表面的能力,这种吸附能力可以是天生具有的,也可以是经过处理诱导产生的,依靠这种吸附能力,人们发展起许多廉价而又有效的固定化方法。
吸附法可分为物理吸附法和离子吸附法,前者是使用具有高度吸附能力的硅胶、活性炭、多孔玻璃、石英砂和纤维素等吸附剂将细胞吸附到表面上使之固定化,是一种最古老的方法,操作简单、反应条件温和、载体可以反复利用,但结合不牢固,细胞易脱落。
后者根据细胞在解离状态下可因静电引力(即离子键合作用)而固着于带有相异电荷的离子交换剂上,如DEAE-纤维素、DEAE-Sephadex、CM-纤维素等。
2.共價结合法共价结合法是细胞表面上功能团和固相支持物表面的反应基团之间形成化学共价键连接,从而成为固定化细胞。
环境工程中固定化酶与固定化微生物的应用初探
环境工程中固定化酶与固定化微生物的应用初探
近年来,环境污染问题日益严重,如何有效地治理和修复污染地区成为全球环境工程
领域的一大挑战。
固定化酶和固定化微生物作为环境治理的重要手段,在环境工程中的应
用也越来越受到关注。
固定化酶是将酶固定在载体上,形成酶载体复合体,在环境中起到催化作用的一种技术。
与游离酶相比,固定化酶具有更高的稳定性和重复利用能力。
在环境工程中,固定化
酶可以用于废水处理、废气净化和土壤修复等领域。
固定化酶在废水处理中的应用主要是通过酶的催化作用降解废水中的有机物、重金属
等污染物。
采用固定化酶技术可以降解废水中的苯酚和酚类化合物,提高废水处理的效率。
固定化酶还可以用于废气净化。
可以利用固定化酶降解废气中的二氧化硫和氮氧化物等有
害气体,减少对大气环境的污染。
虽然固定化酶和固定化微生物在环境工程中的应用有诸多优势,但也存在一些挑战。
固定化酶和固定化微生物的制备工艺相对复杂,成本较高。
固定化酶和固定化微生物在实
际应用中的稳定性和重复利用能力还需要进一步提高。
固定化酶和固定化微生物在环境工程中具有很大的应用潜力。
随着研究的深入和技术
的进步,固定化酶和固定化微生物的应用前景将会更加广阔。
这将为环境治理提供一种可
行的、高效的解决方案。
固定化酶技术在医疗和环境中的应用
固定化酶技术在医疗和环境中的应用酶是一种生物催化剂,能够催化生物化学反应。
在许多生物工艺和工业生产中,酶已经成为不可或缺的工具。
最近,固定化酶技术也逐渐在医疗和环境中广泛应用。
一、固定化酶技术是什么固定化酶技术的基本思想是将酶固定在一定的载体上,使得酶能够长时间稳定地保存在固定状态下,并能够在环境中起到合适的催化作用。
这种技术以酶的活性稳定性和生物相容性能力作为关键指标,以聚合物材料、微生物或生物大分子材料为载体,利用化学或物理交联的方法将酶硬化在载体中,从而形成固定化的酶催化剂。
二、固定化酶技术在医疗中的应用固定化酶技术在医疗领域中有着广泛的应用。
如近年来广泛用于医疗检测中的糖尿病检测。
糖尿病是一种常见的代谢性疾病,目前以测定人体血液中的葡萄糖含量为常规诊断方法。
固定化酶技术可以将酶嵌入生物传感器中,将它们固定到微小的芯片上,作为一种“传感器”来检测葡萄糖。
这使得检测更加简便、快捷、准确。
同时,固定化酶技术还被广泛应用于脂肪肝和心血管疾病的检测中,使得医学检查和诊断更加科学和精确。
三、固定化酶技术在环境中的应用除了医疗领域,固定化酶技术在环境保护中也有广泛的应用。
例如,我们可以利用过硫酸盐法固定化酶来处理环境污染中的水质问题。
对于一些环境中存在的有机物,通过将其与固定化酶进行作用,能够有效地去除水质中的有机污染物,同时避免了传统化学法对环境的影响和损害,有机地促进了水质的净化和环境的保护。
四、前景展望固定化酶技术在医疗和环境中已经取得了一定的成果。
人们已经发现了很多潜在的应用,但也面临着一些困难和挑战。
例如酶质稳定性、载体材料的选择和制备等问题。
但随着科技的不断进步和经验的不断积累,这些困难将逐步得到解决,固定化酶技术的应用前景非常广阔,这将使得我们在医疗治疗和环境保护方面有更加优秀的选择和手段,让我们生活得更加健康、环境更加清洁和美丽。
简述固定化酶的应用及前景
简述固定化酶的应用及前景一、固定化酶的应用1。
食品工业:将酶直接添加到果汁,奶制品,肉制品等食品中,既保留了原有的营养成分又提高了产品质量。
目前,酶制剂已被广泛应用于各类食品行业中,尤其是在软饮料行业中得到了最好的利用。
2。
发酵工业:酶具有多样性和专一性,可以实现酶的固定化和工业化生产,其中包括了传统工业菌株的固定化,酶反应器的固定化,以及微生物细胞固定化等。
在固定化酶的基础上可以实现微生物的快速发酵,节约人力资源的同时,也降低了发酵设备的要求。
3。
医学领域:固定化酶在疾病诊断和治疗方面有很大的潜力。
利用固定化酶可以诊断出体内不同的疾病,如癌症、糖尿病等,也可以进行病毒的检测。
同时,在蛋白质的表达,纯化及工业生产中有重要作用。
4。
日用化学工业:目前,市场上大部分洗涤产品都采用高效活性酶,如脂肪酶、蛋白酶、淀粉酶等。
高效活性酶能够去除皮肤表面多余油脂和污垢,具有较强的杀菌消毒能力,因而有广泛的应用价值。
以自动加药为例,目前的加药方式是先把水或药液配成适宜浓度后再加入原料,这种方式比较麻烦,而且经常会出现因浓度过高而影响产品质量,造成浪费的现象,甚至还会对环境产生一定的污染。
另外,传统的固定化技术只限于小规模生产,仅用于特殊需要的地方,限制了酶固定化技术的进一步发展。
以上所说的全是新的思路和工艺,它们并非取代传统的工艺,但它们确实存在着很多优点。
固定化酶能够帮助我们解决许多难题,使我们的工作效率得到很大的提高,节约了成本,这是毋庸置疑的。
另外,酶的应用还拓宽了其他的领域,有很大的发展前景。
二、固定化酶的前景1。
能源工业。
这主要是利用微生物代谢过程中产生的糖类,脂类等发酵生产生物燃料,它属于二次能源,未来可充分利用纤维素、淀粉、蛋白质等大分子物质进行发酵。
同时,由于固定化酶反应器所需要的发酵底物种类少,处理量大,易于回收,因此固定化酶还可以用于大规模发酵生产生物燃料,解决交通运输过程中的能源紧缺问题。
微生物固定化技术的应用
微生物固定化技术的应用
微生物固定化技术是一种将微生物细胞或酶固定在载体上的技术,可以用于生物催化、废水处理、食品加工等领域。
这种技术的应用已经得到了广泛的关注和研究。
在生物催化方面,微生物固定化技术可以用于生产生物柴油、生物酒精、生物酸等。
通过将微生物固定在载体上,可以提高微生物的稳定性和活性,从而提高生产效率和产量。
此外,微生物固定化技术还可以用于生产生物降解剂,用于处理有机废水和固体废弃物。
在废水处理方面,微生物固定化技术可以用于处理含有高浓度有机物的废水。
通过将微生物固定在载体上,可以提高微生物的附着能力和生长速率,从而提高废水处理效率。
此外,微生物固定化技术还可以用于处理含有重金属的废水,通过微生物的吸附和生物转化作用,将重金属离子转化为无害的物质。
在食品加工方面,微生物固定化技术可以用于生产酸奶、酒精饮料、酱油等。
通过将微生物固定在载体上,可以提高微生物的稳定性和活性,从而提高产品的品质和口感。
此外,微生物固定化技术还可以用于生产发酵剂,用于加速食品的发酵过程。
微生物固定化技术是一种非常有前途的技术,可以用于生产、环保、食品等多个领域。
随着技术的不断发展和完善,相信微生物固定化技术的应用前景会越来越广阔。
环境工程中固定化酶与固定化微生物的应用
环 境 工程 中 固定 化 酶 与 固定 化 微 生物 的应用
运 艳 霞
( 邯郸市环境保 护局 河北
邯郸
0 60 ) 5 02
摘 要 : 微 生物 的酶 可 以 从微 生 物体 内提 取 出来 , 成 多种 酶 制 剂 , 制 固定 化 酶 是 从微 生 物体 内提 取 生 物 酶 , 同 固 连 定 化微 生 物 一 起 成 为微 生 物 新技 术之 一 , 而在 环 境 工 程 中得 到 应用 。 从 关 键 词 : 固定 化 酶 固定 化微 生 物 环 境 工 程
培养他们 团结协作勇于攀登的精神。 效果自然不一样。其次教学手段要灵活 , 课堂组织形式要多样化 , 身的协调性 , 语言要生动活泼。例如 : 在教学中多采用以教师为中心的两个同 () 2 奉献精神的培养
大学是学生的人生观 世界观 、 价值观形成的重要阶段 , 应进 可通过组织观看大型体育赛事 , 发 学生 在快乐 中多方位地观察新动作 、 认识新技术 , 便于缩短运动 行正确的引导。我们在教学中 , 技能的掌握时间 , 达到 良好的教学效果。另外 , 在教学中要运用各 扬祖国荣誉感和民族精神; 可采用武术等项 目对学生进行爱 国主 采用接力赛 、 攀岩 、 游戏等方式 , 培养他们不怕 困难 、 勇于 种诱导手段 、 辅助练习, 通过变换环境条件 , 改变练习难度和要求 义教育; 奋斗、 敢于拼搏的精神 ; 使他们在运动中学会协调人际关系 , 培养 等手段提高学生的参与意识 , 培养学生的学习兴趣。
环境工程中固定化酶与固定化微生物的应用初探
环境工程中固定化酶与固定化微生物的应用初探
固定化酶和固定化微生物在环境工程中应用广泛,可用于生物处理、废水处理、废气
处理、土壤修复等多种领域。
固定化酶是指将酶固定在某种材料上,使其形成一种固体催化剂。
固定化酶具有以下
优点:稳定性好、重复使用次数多、催化效率高、可以进行回收等。
固定化酶可以运用于
环境工程中的领域包括但不限于:废水处理、生物修复、生物降解和废气处理等。
固定化酶在废水处理中的一种应用是利用其对废水中的有机物进行降解。
将工业废水
中的有机物经过固定化酶处理后,大量的有机物被分解成无害物质,废水的水质得到明显
提高。
固定化酶在生物修复中的另外一种应用是用于土壤修复。
由于油污、重金属等污染物
质的存在,会给土壤造成一定的损害,导致土壤的生机受到破坏。
固定化酶可以降解这些
污染物质,恢复土壤的活力和生命力。
同时,也可被应用于生物降解领域。
固定化微生物在废水处理中主要用于生物处理,被广泛应用于污水、废水的生化处理。
通过将微生物固定化在载体上,使其在污水处理系统中发挥长效性和高效性。
同时还可以
降低对生态环境的影响,减少有毒有害物质的排放和传播。
固定化微生物在废气处理中的一种应用是利用其对有害气体的生物降解。
采用固定化
微生物进行有害气体处理的优点在于:降解效率高、稳定性好、成本低等。
综上所述,固定化酶和固定化微生物的应用在环境工程中是十分广泛的,其优点使得
它们在环境治理中拥有极大的潜力。
未来的研究应当继续挖掘固定化酶和固定化微生物的
优点,使它们在环境工程中的应用更加普及和深入。
第五章:微生物工程的固定化技术
(3)载体与酶结合后,酶虽不失活,但酶与底物间 的相互作用受到空间位阻,从而使活力下降。
固定化酶的活力:
指固定化酶催化某一特定反应的能力, 其大小以该酶在一定条件下催化某一反应的 速度来表示。
常用:umol/(min ·mg) umol/(min ·cm)
六、固定化酶的应用
1、固定化酶在发酵工业中的应用 L — Ala +乙酸
5、先决条件: 底物和产物应容易透过微生物细胞膜; 没有产物的分解系统或副反应系统,或者虽然 具有这两种系统,但用热处理或控制pH等简单方 法可使其失效。
三、固定化细胞的目的
微生物菌体不需多次培养、扩大,从而缩 短了发酵生产周期 ; 发酵稳定性好,可以较长时间反复使用或 连续使用,有希望在反应柱进行连续生产。 发酵液中菌体少,有利于产品的分离纯化。
一般的制备过程如下:将1ml溶于适当缓冲液的酶溶液加入含 有750mg丙烯酰胺(单体)和40mg N,N’—甲叉双丙烯酰胺 (交联剂)的3ml溶液中,再加0.5ml 15%的二甲氨基丙腈(加速 剂),同时,加入1%过硫酸钾(引发剂),混合,于23T,保温 10min,便得含酶凝胶。
缺点: 酶容易漏失,以低分子量蛋白质为甚,如果调 整交联剂浓度与交联程度可以得到克服。
2、吸附固定法 主要通过载体与细胞间的静电引力,即细 胞表面与载体之间范德华作用力,离子键 和氢键作用力,使细胞固定在载体上的。
影响吸附法的主要因素
(1)Z-电位: Z-电位能近似地代表表面 电荷密度的大小; (2)细胞的性质和细胞壁的组成:细胞 壁的电荷性质; (3)载体的性质:特别是玻璃、陶瓷等 无机材料。
探究固定化微生物技术
探究固定化微生物技术【摘要】固定化微生物技术是是应用于环境处理的一项新技术,本文通过总结专家学者的研究概述了固定化微生物技术的载体种类及固定化小球的制备方法。
【关键字】固定化微生物技术;载体材料;制备方法固化微生物技术是20世纪70年代末发展起来的一项现代生物、环境等领域中的新兴技术。
该技术是运用物理或者化学等方法,将游离的细胞或酶与固态的非溶性载体相结合,将其限制于有限的空间区域内,使其不溶于水但保持活性,并可反复和连续的使用。
它主要包括固定化酶技术和固定化微生物技术。
固定化微生物技术与传统的活性污泥法相比,存在着明显的优势,主要体现在:(1)生产工艺连续化和自动化;(2)污泥产量少,减轻了后期处理污泥的负担,降低工程投资成本和造价;(3)生物密度高,有利于降解有毒有害物质;(4)耐受能力强且易于回收再利用,大多数载体材料市场价格低廉;(5)固液分离效果好,可纯化和保持高效菌种;(6)不会造成环境二次污染;(7)微生物被固定后,细胞内相当于一个反应器,酶系保存完整。
1 固定化载体材料1.1 固定化材料的性能要求固定化小球载体材料的选择是固定化微生物技术中的关键步骤之一。
其要求成本低廉、易于制成各种形状、抗冲击能力强、性质稳定、对固定的微生物无毒、在常温下固化快、传质性能好、寿命长、小球的基质具有通透性,单位体积的载体固定的微生物的数量多等。
1.2 固定化材料的种类固定化材质分为三大类:(1)有机高分子载体,分为天然高分子载体材料和合成有机高分子载体材料。
其中天然高分子载体材料包括琼脂、角又莱胶、海藻酸钠、无烟煤、卡拉胶、海藻酸钙、葡萄糖、纤维素、明胶、胶原蛋白等,合成有机高分子载体材料包括离子交换树脂、塑料、聚丙烯酰铵、聚乙烯醇、光硬化树脂、聚丙烯酸凝胶等。
天然高分子材料具有无毒性、传质性好、固定化微生物密度高等特点,但是其强度低、抗微生物分解能力较差。
可以通过交联剂对其进行稳定化处理。
而有机高分子材料抗微生物分解性能好、强度高、性质稳定、对微生物无毒且价格低廉,因而具有很高的利用价值。
环境工程中固定化酶与固定化微生物的应用初探
环境工程中固定化酶与固定化微生物的应用初探固定化技术是一种将酶或微生物固定化在载体上的技术,可以改善它们使用时的稳定性、重复性、操作性和密度。
由于其具有的许多有益特性,固定化技术在环境工程中越来越受到重视。
固定化酶在环境污染治理中的应用酶可以用于环境中某些化学物质的生物转化。
特别是对于一些难以处理的污染物,如多环芳香烃和氨氮等,采用固定化酶的方法更为有效和便捷。
如用固定化酶催化板蓝根降解四氯化碳,实验中发现,用悬浮酶体系处理4 h后,4C的降解率仅为0.1%;而用交联酶固体系统处理4 h后,4C的降解率达到了65%。
同样,在处理有机物污染方面,固定化酶也表现出了明显的优势。
固定化酶技术在饮用水净化中的应用饮用水中的有机化合物和毒素是人类健康的重要威胁之一。
科学家们研究发现,使用固定化酶可以有效地进行饮用水的净化。
例如,采用聚苯乙烯和肝脏酶固体共存系统,能够在水中降解的多环芳香烃等污染物。
另外,用于处理含镉和铅的水的过程中,固定化酶又起到了积极的作用。
微生物在环境治理领域已经有广泛应用,用固定化技术固定微生物可以提高它们的活性和生命力,使其长时间保持稳定性,更容易在环境污染治理中实现生物转化。
例如,固定化微生物在废水处理、土壤修复与净化、气体净化等方面都具有很好的应用潜力。
固定化微生物技术在油污染解决方案中的应用油污染是现代社会面临的严重问题之一,解决方案之一是采用生物方法。
当微生物固定化技术应用于油污染解决方案中时,大大提高了微生物响应时间和响应性能。
微生物固定化技术已经被广泛使用在渗透成像、油田油藏强化采油、地下水处理等领域中。
结论总的来说,通过固定化酶和微生物技术的应用,生态环境保护各方面的需求得到了满足,同时也有效地促进了生物技术的进步。
预计,将来这种技术将会得到应用中进一步的发展和改良。
但同时也需要更多的努力,来加强现有技术和开发新技术,以更完美地适应不断变化的环境保护需求。
微生物固定化技术
包埋法
总结词
通过凝胶或聚合物等介质将微生物完全包裹在其中,实现微生物与外界环境的 隔离。
详细描述
包埋法能够保护微生物不受外界环境的影响,提高微生物的存活率和稳定性, 但制备过程较为复杂,成本较高。常用的凝胶材料有琼脂、卡拉胶等。Fra bibliotek交联法
总结词
通过化学反应将微生物细胞相互连接,形成网状结构,再将 其固定在载体上。
。
酶的固定化
利用微生物固定化技术将酶固定在 载体上,提高酶的稳定性和催化效 率,降低生产成本,有助于药物的 合成和生产。
细胞培养
通过固定化微生物细胞,进行大规 模细胞培养和发酵,生产具有生物 活性的物质,如抗生素、疫苗等。
在食品工业中的应用
总结词
微生物固定化技术在食品工业中具有广泛的应用前景,能提高食 品质量和安全性。
和有毒物质的影响。
优化固定化过程
通过优化固定化过程,简化操作步骤 ,降低生产成本,提高固定化微生物 的活性。
拓展应用领域
将微生物固定化技术应用于更广泛的 领域,如污水处理、生物制药等,发 挥其独特的优势和作用。
04
微生物固定化技术的应 用实例
在污水处理中的应用
总结词
好氧生物处理
微生物固定化技术在污水处理中发挥 了重要作用,能有效降低污染物含量 ,提高水质。
详细描述
交联法固定后的微生物细胞网络具有较好的稳定性和连通性 ,但交联过程中可能会对微生物活性产生影响。常用的交联 剂有戊二醛、甲醛等。
共价结合法
总结词
通过化学反应将微生物细胞与载体表面进行共价结合,形成稳定的固定化细胞。
详细描述
共价结合法固定化后的微生物细胞不易脱落,稳定性高,但操作过程较为复杂, 成本较高。常用的载体有硅片、玻璃片、聚乙烯膜等。
微生物固定化的方法和应用
微生物固定化的方法和应用
微生物固定化是一种利用生物体系固定化生物体的方法,可以使
微生物与其代谢产物稳定地存在于不同的环境中。
这种方法通常包括
将微生物或其细胞固定在高分子基材上或在一些吸附剂上,以使微生
物能够长期地与环境联系并发挥其活性。
目前已有多种微生物固定化
的方法,如以下几种:
1.凝胶微生物固定化:该方法是将微生物或其代谢产物与聚合物
混合物一起凝胶固定化。
凝胶方法可以令微生物长期固定于材料上,
通过固定化,可以提高微生物的生产效率和活性。
2.包埋法微生物固定化:此方法是将微生物与聚合物混合后,将
混合物包裹在微小气泡中。
包埋法可以保护微生物,使其不受环境影响,可以延长微生物的寿命,并可提高微生物的生产效率。
3.微生物纤维固定化:采用无纺布制备作为基质,将微生物凝胶
固定于无纺布上,以便在生产中使用。
对于过生产季节性的酶类产品,可以使用该方法固定化微生物,以延长生产周期。
4.交联法微生物固定化:用化学交联剂,将微生物与载体进行固定,使微生物不易被抑制和灭活。
交联法在微生物的良好生长条件下,可以提高微生物的耐性和活性。
目前微生物固定化应用非常广泛,在制药、食品工程、环境保护
等领域中均有应用。
例如,在制药领域中,微生物固定化方法可应用
于发酵、代谢产物提取等工序中,以提高产量和纯度;在食品领域,
微生物固定化可以使生产中的微生物更加稳定,以保证产品质量和长
效存储;在环境保护领域中,微生物固定化可用于水处理、废物处理
等领域,如微生物萃取技术可既能高效地去除重金属等有害物质,同
时又能够将废弃物转化成有用的资源。
酶及细胞固定化技术
酶及细胞固定化技术酶及细胞固定化技术是一种将酶或细胞固定在某种材料上,以便进行特定反应的技术。
这种技术可以有效地提高反应速率、稳定性和重复使用性,广泛应用于生物技术、食品工业、环境保护和医药领域。
本文将介绍酶及细胞固定化技术的原理、应用和未来发展方向。
酶及细胞固定化技术的关键在于将酶或细胞固定在一种载体上,以便进行特定反应。
常用的载体材料包括天然材料如海藻酸钠、明胶、聚乙烯醇等,以及合成材料如聚丙烯酸酯、氧化硅、氨基硅烷等。
通过交联、吸附、包埋等方法,将酶或细胞与载体结合在一起,形成固定化的酶或细胞系统。
固定化技术的主要优点在于可以提高酶或细胞的稳定性和重复使用性。
通过固定在载体上,酶或细胞可以更好地抵抗外界因素的影响,如温度、pH值、离子强度等。
固定化的酶或细胞可以通过简单的分离和回收,实现反应产物的纯化和酶的再利用。
二、酶及细胞固定化技术的应用酶及细胞固定化技术在生物技术、食品工业、环境保护和医药领域有着广泛的应用。
1. 生物技术领域在生物技术领域,酶及细胞固定化技术被用于生产化学品、药物和生物燃料。
以葡萄糖氧化酶为例,固定化的葡萄糖氧化酶可以用于葡萄糖检测、生物传感器以及生物燃料电池中。
固定化的工程酶也被用于合成生物材料、精细化学品和医药中间体,以实现高效、环保的生产过程。
2. 食品工业领域在食品工业领域,酶及细胞固定化技术被用于食品加工、酿造和酶制剂制备。
在酿造过程中,固定化的酵母细胞可以实现连续发酵,提高酒精产率和控制发酵过程。
而在食品加工中,固定化的酶可以用于降解醣类、蛋白质和脂肪,改善食品的口感和营养价值。
3. 环境保护领域在环境保护领域,酶及细胞固定化技术被用于废水处理、土壤修复和污染物降解。
固定化的微生物可以被用于处理含有重金属、有机物和氮、磷等污染物的废水,减少对环境的影响。
固定化的酶也可以用于土壤修复,去除油污和有机污染,改善土壤的质量。
4. 医药领域在医药领域,酶及细胞固定化技术被用于药物的制备、生物传感器和组织工程。
简述固定化酶的应用及前景
简述固定化酶的应用及前景固定化酶技术是微生物学、生物工程和酶工程领域的重要研究课题,是20世纪90年代以来发展起来的新兴科学技术。
固定化酶的应用与前景固定化酶的应用与前景固定化酶技术不仅可以将微生物酶固定在生物材料表面上,还可以通过体外表达或改造宿主细胞内酶的活性来实现酶分子的修饰和再构建,使之具有更高的催化活性。
目前对微生物的固定化已有不少报道,如用聚丙烯酰胺和羧甲基纤维素等非共价结合固定酶的方法,用微生物的细胞膜或质粒载体的“自组装”方式,用细胞器(如圆形质粒)作为固定酶的载体,以及将微生物的特异DNA序列直接导入固定化基因载体上等。
这些方法虽然取得了一定成果,但应用范围受到限制,有待进一步开发和完善。
这种方法最早被用于植物组织培养,现已扩展到其他多种生物体系,包括微生物、植物、动物、人类和酵母等。
1、植物组织培养:细胞悬浮培养已较为成熟,但大量培养操作困难;而且,培养时间长,无法满足生产上快速繁殖的要求。
固定化酶的应用与前景固定化酶的应用与前景固定化酶技术不仅可以将微生物酶固定在生物材料表面上,还可以通过体外表达或改造宿主细胞内酶的活性来实现酶分子的修饰和再构建,使之具有更高的催化活性。
目前对微生物的固定化已有不少报道,如用聚丙烯酰胺和羧甲基纤维素等非共价结合固定酶的方法,用微生物的细胞膜或质粒载体的“自组装”方式,用细胞器(如圆形质粒)作为固定酶的载体,以及将微生物的特异DNA序列直接导入固定化基因载体上等。
这些方法虽然取得了一定成果,但应用范围受到限制,有待进一步开发和完善。
2、动物细胞固定化基因表达在动物细胞固定化的研究中,基因转移是关键的一环,有两种技术可供选择:基因枪转化和微注射。
基因枪技术是将外源DNA注射到含单核细胞的玻璃管中,并封闭在包装管的两端。
整个过程是一次性的,因此特别适合于短期内完成大量的转化。
而且,操作简便,出核效率高,耗能低。
但缺点是所转化的细胞数量少,细胞变异性高, DNA转染率不高, DNA的安全性问题也是值得考虑的问题。
第五章固定化酶及固定化技术
➢ 固定化酶:是指经物理或化学方法处理,限制 在一定的空间范围内,可以反复使用而又能发 挥催化作用的酶制剂。
➢ 酶的固定化技术包括吸附、交联、共价结合( 化学偶联)及包埋等多种方法。
第六页,编辑于星期二:十九点 十一分。
酶生物反应器
✓与固定化酶技术相配套的是酶 生物反应器
✓同一般的化工容器一样,需要对酶反应器 温度和pH等条件进行严格的控制;不同的是, 酶反应器必须进行无菌操作。
选择载体的原则
(1)要有巨大的比表面积 (2) 要有活泼的表面
(3) 便于装柱进行连续反应。
有机载体:纤维素、骨胶原、火棉胶 无机载体:氧化铅、皂土、白土、 高岭土、多孔玻璃、 硅藻土、二氧化钛等
SMS:一种硅酸盐载体
第十六页,编辑于星期二:十九点 十一分。
2. 结合法
离子键结合法
➢ 是指通过离子键将酶结合到具有离子交换基团的非水溶性载体上的 方法。
结果如图所示: 固定化酶的活力基本保持稳定活力损失15% , 由此可见该固定化酶具有良好的操作稳定性
第四页,编辑于星期二:十九点 十一分。
一、固定化酶(immobilized enzyme)
什么是固定化酶?
水溶性酶
水不溶性载体
固定化技术
水不溶性酶 (固定化酶)
第五页,编辑于星期二:十九点 十一分。
第七页,编辑于星期二:十九点 十一分。
简史
1916年,Nelson & Griffin “酶不溶于水而具有活性” 1948年,Sumner 尿素酶制成非溶性酶 1953年,Grubhofer & Schleith 第一次实现了酶的固定化 1960年,千细一郎,开始了氨基酰化酶固定化研究 1969年,千细一郎成功的将固定化氨基酰化酶应用于DL-AA
固定化细胞发酵产酶
固定化细 胞发酵产
酶
202X CIICK HERE TO ADD A TITLE
固定化细胞是指固定在水不溶性载体上,在一定的 空间范围进行生长、繁殖和新陈代谢的细胞。
用于获得细胞的酶和代谢产物的一种方法
01 按固定的细胞类型不同分为三类
一.固定化微生物; 固定化动物; 固定化植物
02 按细胞的生理状态不同分为两大类:
固定化细胞发酵产酶的特点
产酶率高
高稀释率条件下 连续发酵
发酵稳定性好
缩短发酵周期, 提高设备利用率
产品容易分离提 纯
固定化细胞发酵产酶工艺条件
01
预培养 采用生长培养基和适合细胞生长的条件
02
溶解氧的供给 加大通气量
03
温度的控制 培养基进入反应器之前,必须预先调节适宜的温度
04
培养基组分的控制 组分对载体的影响
06
常用的交联剂包括: 戊二醛、甲苯二异氰 酸酯、双重氮联苯胺。
1
吸附法:条件温和、 方法简便、载体可 再生。但操作稳定 性差。
2
共价法:操作稳定 性高。但由于试剂 的毒性,易引起细 胞的破坏。
3
交联法:可得到高 细胞浓度,但机械 强度低,无法再生, 不适于实际应用。
4
包埋法:细胞和载 体间没有束缚,固 定化后,细胞仍保 持较高活力。只适 用于小分子底物。
在发酵中应用
01
提高酶或菌体在发酵过程中的重复使用率,降低经济
成本。
02
制备了相关生物传感器,如葡萄糖生物传感器、微生
物细胞数传感器、代谢试验传感器等
单击添加副标题
谢用于细胞固定化的吸附剂主要有硅藻土、多孔陶瓷、多孔玻璃、 多孔塑料、金属丝网、微载体、和中空纤维等。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
1969年千烟一郎也成功地将固定化氨基酰化酶应用于DL-氨基酸的光学 拆分过程,使其反应实现了连续化
1973年千烟一郎研制成了大肠杆菌(E.coli)的固定化细胞,即所谓固定 化微生物,并将其用于连续生产L-天门冬氨酸过程。
一、固定化的酶与固定化微生物的概念
酶: 是一类由生物细胞产生的具有催化功能的生 物大分子(蛋白质),通常称作生物催化剂
固定化酶(inmobilized enzyme) 是用适当的物理、化学方法把纯化的酶
固定于一定的空间内,使其成为既保持了本 身的特性,又能在连续反应之后可以回收和 重复使用的一种制品
优 点: 酶与载体结合很牢固,使用周期长(该法目前应用较为普遍)。
缺 点: 操作较复杂、条件较剧烈、酶活力丧失较多。
根据偶联反应方式类型的不同,可将共价结合法分为:
共价结合法
重氮法 多肽法 烷化法
叠氮法 卤化氰法
缩合剂法 载体交联法
载体共价交联法
“酶网’’载体法
●重氮法
制备原理: 先将载体(带氨基的芳香族化合物R-Y-NH2)用稀盐酸和亚
酶的活性中心(催化部分)和空间结构(结合部 分)的维持是其具有催化活力的必需条件。因此, 在制备固定化酶时,要尽可能避免采用剧烈的 条件(过高的温度和盐浓度、强酸和强碱,以 及各种有机溶剂等)处理。不然,酶的催化作 用会降低,甚至丧失,或者改变酶对底物的专 一性
(二)酶的固定化方法
固定化酶制备方法,根据制备原理分类:
缺 点:酶与载体的相互作用较弱,二者之间易于分离。
(2)离子结合法
制备原理: 将酶以离子结合的方式固定到具有离子交换基团的非水溶性载 体上制成的固定化酶 。
载体类型: 常为带各种离子基团的硅胶、纤维素、交联葡聚糖和树脂等物质 。
优 点: 操作较简便、条件较温和、酶活力不易丧失。 缺 点: 酶与载体的结合力不高,且易受缓冲液类型和pH值高低的影响。
固定化微生物
是用适当的物理、化学方法把纯,又能在连续反应之后可以回 收和重复使用的一种制品
固定化酶和固定化微生物的研究历史:
1916年Nelson和Griffin发现 :有些酶虽然不溶于水,但是仍存在催化活 性现象
1953年Grubhofer和Schleith真正开始固定化酶的研究
制备固定化酶的模式图:
1.载体结合法 (1)物理吸附法
制备原理:是将酶蛋白吸附到水不溶性的惰性载体(它是以共价或非共价 键结合其他物质的一种基质)上制成固定化酶的过程。
载体类型:常为疏松多孔的吸附材料;如:多孔玻璃、活性炭、酸性白土、 羟基磷灰石、磷酸钙凝胶以及淀粉等物质。
优 点:酶活力不易丧失,蛋白质的空间结构不发生明显变化。
常用载体:
氯乙酰纤维素、溴乙酰纤维素、碘乙酰纤维素、聚乙二 醇碘乙酰纤维素和二氯-S-三嗪基纤维素等。其中二氯-S三嗪基纤维素是带正电荷的,它对中性或碱性的酶蛋白、 或作用于带负电荷底物的酶蛋白进行固定化较为有利, 用其制备的固定化酶活力较高。
●缩合剂法
制备方法: 将酶(含-COOH和-NH2)与含-NH2和-COOH 的载体(R- NH2 或 R- COOH )在缩合剂碳化 二亚胺(R1-N=C=N-R2)或伍德沃德试剂K(N乙基-5-苯异口恶唑-3′-磺酸)作用下进行缩合反应, 制成固定化酶
R Y NH2 NaNO2 HCl R Y N2 R Y N N Epro
弱酸性环境
●多肽法
利用肽的合成原理,使酶蛋白和载体之间以肽键连 接而制成固定化酶的过程。它又分叠氮法和卤化氰法 等
◆叠 氮 法 先用羧甲基纤维素甲酯与水合肼作用形成酰肼,然后再
与亚硝酸反应得到叠氮化合物,再在低温条件下,该化 合物和酶的游离-NH2、-OH和-SH反应形成肽键,即偶联 成固定化酶
固定化微生物的特点:
固定化微生物虽然仅较适用于催化小分子物质 的转化,并伴随发生分解生成物等副反应,但它工 序简单、稳定性好、酶活力丧失少、成本低廉,以 及利用其固有的多酶系统可对有机体的代谢途径进 行研究
本章将就固定化的酶与微生物的制备方法及其 制品的性质和应用进行讨论
三、固定化酶的制备
(一)酶固定化的前提条件
◆卤化氰法 此法与第七章“亲和层析”中亲和吸附剂的制备原理相似。
先用卤化氰(常用的是溴化氰CNBr)活化纤维素、交联葡聚 糖和琼脂糖等多糖类载体,然后在偏碱性环境条件下,使 载体(基质)与酶(配体)进行偶联,即可制成固定化酶
●烷基化法
制备原理: 利用蛋白质N末端游离-NH2、Tyr 的Ph –OH 、Cys的–OH等与 含卤族功能团的非水溶性载体发生烷基化反应(由酶蛋白取 代卤族功能团)制成固定化酶
硝酸钠(相当于亚硝酸)处理生成重氮盐化合物,然后与酶 蛋白的酚基、咪唑基发生偶联反应(游离氨基也能发生十分缓 慢的反应),制成固定化酶(形成偶氮化合物)
常用载体: 有对氨苄基纤维素、聚氨基聚苯乙烯、3-对-氨苯氧基-2-羟丙
酰纤维素、氨基酸共聚物、交联葡聚糖-氨茴香酸酯等
加入酶蛋白,低温(0~5℃)
●载体交联法
这种制备固定化酶的方法有的地方把它归到交联法。 因为它们都是通过一个中间工具“交联剂”(如戊二醛 等)将酶固定化的。载体交联法是在酶与载体之间进行 交联,使酶固定化;而交联法是在酶分子与酶分子之间 进行交联,制成网状结构的固定化酶
2、交联法
交联法是酶分子之间在双功能基团交联剂作用下, 相互交联呈网状结构的固定化酶过程。最常用的交 联剂是戊二醛,它和酶蛋白中的游离氨基形成希夫 氏(Schiff)碱,从而使酶分子之间相互交联成固定化 酶。
应用这种固定化酶反应时,溶液的pH值、离子强度、温度和底 物浓度发生变化,往往可引起酶的脱落。 。
(3)共价结合法
制备原理:是将酶的非必需基团(α-氨基,ε-氨基,α、β、γ-羧基,羟基, 咪唑基等)通过共价键或整合剂偶联于固相载体上而制成固定 化酶。
载体类型: 有硅胶、纤维素、琼脂糖和交联葡聚糖,以及聚丙烯酰胺凝胶 等物质。