体外诊断试剂分类和常见产品技术原理及应用概要

多肿瘤标志物检测试剂盒（蛋白芯片法）
（第五类） 单抗类试剂

血型定型类试剂：血型定型试剂盒（单克隆抗体）
免疫组化：ImmuChem免疫组化试剂盒（单抗） 免疫比浊：血清载脂蛋白A1免疫比浊试剂盒 乳胶凝集：D-dimer二聚体乳胶凝集试剂盒



（第六类） 多抗类试剂

血型定型类试剂：血型定型试剂盒（人血清/马血清）
胶体金免疫层析法反应示意图
包被C线
上样垫
胶体金垫 N C 膜
吸样垫
包被T线
支撑物
HIV胶体金类快速诊断试剂检测结 果
第三类） 免疫印迹试剂

免疫印迹试剂盒: 风湿病自身抗体检测试剂盒（免疫 印迹法）
免 疫 印 迹 法 示 意 图
（第四类） 蛋白芯片（微阵列）类试剂

蛋白芯片（微阵列）：丙型肝炎病毒抗体检测试剂盒 （蛋白芯片法）；
体外诊断试剂的分类（三）
按照技术方法分： 1.比色法（颜色反应）；2.分光光度法； 3.凝集法；4.散射法（沉淀反应）； 5.透射比浊法（沉淀反应）； 6.速率法、终点法（产物或底物量）； 7.标记技术；8.生物亲和；9.免疫技术； 10.发光技术；11.荧光技术；12. 放射技术； 13.形态分析； 14.流式细胞；15.电泳技术；

bDNA类：HIV-1 bDNA 检测试剂盒； mRNA检测试剂盒(生物素原位杂交法)

探针放大类试剂--支链DNA技术
病毒的RNA释放后加入微孔板中——板孔中包被有可与病毒特异结合的一 系列靶探针（Target Probe），另一系列靶探针的一端可标记在游离的病毒 核酸链上，另一端可与bDNA结合——bDNA信号放大——加入酶标记物对结 合的bDNA进行标记——经过清洗后加入底物进行反应，测定反应强度。

一般化学试剂：无机离子（铝、镉等）测定试剂盒； 白蛋白测定试剂盒（BCG法）； 总胆固醇测定试剂盒（COD-CE-PAP法） 血气电解质 : 电解质分析仪随机试剂；生化分析仪用稀释 液、冲洗液 血液分析仪用试剂: 血液分析仪用稀释液、溶血剂

普通生化类试剂（清洁环境）
★原理：与普通生化试剂（十万级要求）类相同。 ★产品涉及：无机离子检测、血气电解质类、血 液分析仪用试剂类等试剂。
常见的体外诊断产品技术原理及应用
在实际应用中，单一技术往往不能满足检测需要，因此， 诊断试剂会联合使用多种技术。常见的体外诊断产品： 1.生化分析仪、生化试剂； 2.酶标仪、酶免试剂； 3.免疫化学发光仪及试剂； 4.胶体金（乳胶、荧光）免疫层析试剂； 5.血细胞分析仪、细胞检测试剂； 6.尿液分析仪、尿液检测试剂（试纸）； 7.（血气）电解质分析仪、电解质试剂； 8.细菌、微生物培养及鉴定试剂； 9.免疫组化染色液、液基细胞试剂、免疫印迹试剂 10.PCR仪及试剂； 11.血型试剂； 12.流式细胞仪。 12.微量元素（原子吸收法）
体外诊断试剂的分类（三）
按照技术方法分：
16.克隆技术；17.酶技术；18.基因技术；
19.聚合酶链反应-PCR（分子生物技术）； 20.杂交技术（分子生物技术）； 21.印迹技术； 23.色谱技术； 22.层析技术； 24.质谱技术；
25.溶出法；
26.伏安法；
27.多技术联合应用，如：酶联免疫、免疫比 浊、放射免疫、免疫化学发光、免疫层析、荧光 杂交、免疫组化、Байду номын сангаас式荧光、电极溶出伏安法等。
第一类产品：
1．微生物培养基（不用于微生物鉴别和药敏试验）； 2．样本处理用产品，如溶血剂、稀释液、染色液等。
*注：第二类产品中的某些产品，例如蛋白质、糖类、激素、酶类等的检测，如 果用于肿瘤的诊断、辅助诊断、治疗过程的监测，或用于遗传性疾病的诊断、 辅助诊断等，则按第三类产品注册管理。在药物及药物代谢物检测的试剂中， 如果该药物属于麻醉药品、精神药品或医疗用毒性药品范围，则按第三类产 品注册管理。
抗体

宿主对体内存在的外来分子，微生 物或其他因子的应答而产生的蛋白 质（免疫球蛋白，丙种球蛋白） 根据抗体性质：多克隆抗体，单克 隆抗体 根据抗体分子结构：IgA, D, E, G, M


抗体模式图
IgM
IgG
单克隆抗体

由一株淋巴细胞产生，针对一种抗原决定族 抗原免疫小鼠 -取脾脏-与瘤细胞融合 -克隆筛选 -单克 隆抗体细胞株 扩增细胞-注射入小鼠腹腔-采腹水-纯化抗体
第三类产品：
1．与致病性病原体抗原、抗体以及核酸等检测相关的试剂； 2．与血型、组织配型相关的试剂； 3．与人类基因检测相关的试剂； 4．与遗传性疾病相关的试剂； 5．与麻醉药品、精神药品、医疗用毒性药品检测相关的试剂； 6．与治疗药物作用靶点检测相关的试剂; 7．与肿瘤标志物检测相关的试剂; 8．与变态反应（过敏原）相关的试剂。


杂交瘤技术
流 程
多克隆抗体

针对多个抗原决定族 抗原免疫动物-采集动物血清 纯化抗体
（第七类） 诊断血清（菌液）

诊断血清：侵袭性大肠埃希氏菌诊断血清； 志贺氏菌属四种混合多价血清 诊断菌液：伤寒沙门菌菌体（ O）抗原、鞭毛（ H）抗 原诊断菌液


（第八类） 血球凝集类试剂

抗体致敏血球：破伤风抗体诊断试剂（血凝法）； 白喉抗体诊断试剂（血凝法）
体外诊断试剂的分类和基本原理
洛阳惠尔纳米科技有限公司
概念
体外诊断试剂和器械在国外统一称为体外诊断医疗器械。 属于 医疗器械的一部分。 在我国，体外诊断试剂是指：可单独使用或与仪器、器具、设 备或系统组合使用, 在疾病的预防、诊断、治疗监测、预后观察、健 康状态评价以及遗传性疾病的预测过程中, 用于对人体样本( 各种体 液、细胞、组织样本等) 进行体外检测的试剂、试剂盒、校准品 ( 物) 、质控品( 物)等。
免疫组化：癌胚抗原检测试剂盒（多抗） 免疫比浊：β-微球蛋白测定试剂盒（免疫比浊法） 乳胶凝集：沙门氏菌乳胶凝集试剂盒



抗原

抗原：指进入有免疫活性的组织 （宿主）而引发免疫应答的物质。 或虽不能引发免疫，但可以同抗体 结合的物质。 蛋白质，多糖，核酸，糖脂，青 霉素

全抗原性具有多个抗原决定族
★产品涉及： 1、酶类：含酶、辅酶与牛血清白蛋白等、剂型为干粉或液体。
2、血凝类：试剂组分中含有其他活性类组分（如兔脑粉等）。 ★生产工艺：原材料称量、溶解、定容、中试、分装、组装、成品 检验。 ★关键控制点：原料称量、配制、物料平衡。
《细则》要求：应在10万级净化环境中进行生产操作。
（第十三类） 普通生化类试剂（清洁环境）（包括 一般化学试剂、血气电解质类、血液 分析仪用试剂类等）
体外诊断试剂的分类（二）
二、 按医疗器械受理和审评的体外诊断试剂 ：
1、临床血液学和体液学检验试剂
2、临床化学检验试剂 3、临床免疫学检验试剂 。 4、微生物学检验试剂 5、组织细胞学检验试剂 6、变态反应、自身免疫诊断检验试剂（盒） 7、遗传性疾病检验试剂 8、分子生物学检验试剂
9、其它检验试剂（盒）
◆生产工艺主要环节：
特定试剂的配制、试剂条的浸润、干燥、切割、分包 装等；
（第十五类） 药敏类试剂
药敏纸片（卡）：抗生素药敏纸片；随机专用药敏试 剂（盒）（卡）

药敏类试剂
●原理：是将抗菌药物吸收到特定的纸片中，然后置于已接种待测 定菌的固体培养基上，抗菌药物通过向培养基内的扩散，抑制敏 感细菌的生长，从而出现抑菌环（带）。由于药物扩散的距离越 远，达到该距离的药物浓度越低，故可以根据抑菌环的大小，判 断细菌对药物的敏感度。通过药物敏感试验，我们可以找出针对 于某些致病菌的敏感药物，从而对临床中的细菌性疾病的治疗提 供指导。
胶体金（乳胶、荧光）层析试剂
胶体金免疫层析法：将特异性的抗原或抗体以条带状固定在膜上，胶体金标记试剂 （抗体或单克隆抗体）吸附在结合垫上，当待检样本加到试纸条一端的样本垫 上后，通过毛细作用向前移动，溶解结合垫上的胶体金标记试剂后相互反应， 当移动至固定的抗原或抗体的区域时，待检物与金标试剂的结合物又与之发生 特异性结合而被截留，聚集在检测带上，可通过肉眼观察到显色结果。该法现 已发展成为诊断试纸条，使用十分方便。
（第十二类） 普通生化类试剂（十万级要求） （包括酶类化学试剂、凝血试剂类 等试剂）

酶类化学试剂:丙氨酸氨基转移酶（ALT）测定试剂盒； 碱性磷酸酶（ALP）测定试剂盒 凝血试剂:凝血酶原时间（PT）测定试剂盒；



组织纤溶酶原激活物（t-PT）测定试剂盒
普通生化类试剂(十万级要求)（1）
★原理： 临床普通生化类试剂是一类用于测定人血液、尿液等中各项生 化指标的试剂。含有各种非特异性蛋白成分，要求在十万级洁净 环境中生产。检测方法均为比色法，方法学原理均为显色反应。
第二类产品：
除已明确为第三类、第一类的产品，其他为第二类产品，主要包括：
1．用于蛋白质检测的试剂； 2．用于糖类检测的试剂；
3．用于激素检测的试剂；
4．用于酶类检测的试剂； 5．用于酯类检测的试剂； 6．用于维生素检测的试剂；
7．用于无机离子检测的试剂；
8．用于药物及药物代谢物检测的试剂； 9．用于自身抗体检测的试剂； 10．用于微生物鉴别或药敏试验的试剂； 11．用于其他生理、生化或免疫功能指标检测的试剂。
螺旋金刚烷环氧化物苯磷酸酯（AMPPD)
非酶促化学发光及电化学发光

非酶促化学发光：以吖啶酯、过氧化氢为发
光系统，不需要酶的催化。仪器成本高，技术复杂， 尚未国产化（Abbott)

电化学发光：氧化反应是通过电极上的电化学
反应产生，标记物为三氯联吡啶钌。仪器成本高，技 术复杂，尚未国产化。（Roche）