实验一显微镜油镜的使用及微生物基本实验技术
微生物学实验一 微生物制片及形态观察
实验一微生物制片及形态观察一、显微镜油镜的使用显微技术是微生物检验技术中最常用的技术之一。
显微镜的种类很多，在实验室中常用的有：普通光学显微镜、暗视野显微镜、相差显微镜、荧光显微镜和电子显微镜等。
1. 结构光学显微镜是由光学放大系统和机械装置两部分组成。
光学系统一般包括目镜、物镜、聚光器、光源等；机械系统一般包括镜筒、物镜转换器、镜台、镜臂和底座等（图1－1）。
图1－1 光学显微镜结构图标本的放大主要由物镜完成，物镜放大倍数越大，它的焦距越短。
焦距越小，物镜的透镜和玻片间距离（工作距离）也小。
油镜的工作距离很短，使用时需格外注意。
目镜只起放大作用，不能提高分辨率，标准目镜的放大倍数是十倍。
聚光镜能使光线照射标本后进入物镜，形成一个大角度的锥形光柱，因而对提高物镜分辨率是很重要的。
聚光镜可以上下移动，以调节光的明暗，可变光栏可以调节入射光束的大小。
显微镜用光源，自然光和灯光都可以，以灯光较好，因光色和强度都容易控制。
一般的显微镜可用普通的灯光，质量高的显微镜要用显微镜灯，才能充分发挥其性能。
有些需要很强照明，如暗视野照明、摄影等，常常使用卤素灯作为光源。
2. 原理显微镜的放大效能（分辨率）是由所用光波长短和物镜数值口径决定，缩短使用的光波波长或增加数值口径可以提高分辨率，可见光的光波幅度比较窄，紫外光波长短可以提高分辨率，但不能用肉眼直接观察。
所以利用减小光波长来提高光学显微镜分辨率是有限的，提高数值口径是提高分辨率的理想措施。
要增加数值口径，可以提高介质折射率，当空气为介质时折射率为1，而香柏油的折射率为1.51，和载片玻璃的折射率（1.52）相近，这样光线可以不发生折射而直接通过载片、香柏油进入物镜，从而提高分辨率。
显微镜总的放大倍数是目镜和物镜放大倍数的乘积，而物镜的放大倍数越高，分辨率越高。
3. 使用方法1）低倍镜观察先将低倍物镜的位置固定好，然后放置标本片，转动反光镜，调好光线，将物镜提高，向下调至看到标本，再用细调对准焦距进行观察。
实验一 显微镜油浸系物镜的使用
9.用左眼观察目镜，并慢慢转动细调节器至物象清晰为止。
如果不出现物象或者目标不理想要重找，在加油区之外 重找时应按：低倍→高倍→油镜程序。在加油区内重找 应按：低倍→油镜程序，不得经高倍镜，以免油沾污镜 头。
10.油镜使用完毕，先用擦镜纸沾少许二甲苯将镜头上和 标本上的香柏油擦去，然后再用干擦镜纸擦干净。
实验一 显微镜油浸系物镜的使用
一、实验目的和内容 目的 学习油浸系物镜的基本原理，掌握其使用方法。 内容 1.学习油浸物镜的工作原理和使用方法。 2.用油镜观察枯草芽孢杆菌、四链球菌、白色链球菌、 放线菌染色装片。
二、实验原理 油镜是普通光学显微镜所配置的物镜中放大倍数最大的 一种物镜，与其它物镜相比，它的使用比较特殊，需在 载波片与镜头之间滴加香柏油，这主要有两个原因：
培养基是按照生物生长繁殖所需要的各种营养，用 人工方法配制而成的营养基质。其中含有碳源、氮源、 无机盐、维生素以及水分等。微生物在培养基上生长繁 殖还必须在最适pH范围内才能生长得更好，因此对不 同种类的微生物应将培养基调节到一定的pH值范围。
培养基的种类很多，不同的微生物所需要的培养基不 同。依物理性状可分为液体的、固体的和半固体的三种。 固体培养基是在液体培养基中加入1.5～2%的琼脂，半 固体培养基是加入0.2～0.5%的琼脂。
３.放置玻片标本：把要观察的玻片标本放在镜台上，用 推片器弹簧夹夹住，然后旋转推片器螺旋，将所要观察 的部位调到通光孔的正中。
4.调节焦距：转动粗调节器，使镜台缓慢地上升至物镜距 标本片约5-6mm处，应注意在上升镜台时，切勿在目镜 上观察。一定要从右侧看着镜台上升，以免上升过多， 造成镜头或标本片的损坏,然后，两眼同时睁开，用左 眼在目镜上观察，左手缓慢转动粗调节器，使镜台缓慢 下降，直到视野中出现清晰的物象为止;如果物象不在 视野中心，可调节推片器将其调到中心(注意移动玻片 的方向与视野物象移动的方向是相反的)。如果视野内 的亮度不合适，可通过升降集光器的位置或开闭光圈的
实验一 显微镜油镜的使用和细菌的革兰氏染色
实验一显微镜油镜的使用和细菌的革兰氏染色陈宝莲2010级生态学040212010002一、实验目的1 学习显微镜油镜的使用方法2 学习微生物的无菌操作技术3 学习细菌的革兰氏染色法二、实验原理1 显微镜及油镜物镜的使用原理1) 油镜头的标志油镜头上常刻有OI（oil immersion）或HI（homogeous immersion）字样，有的还刻有一圈红线或黑线标记。
在低倍物镜、高被物镜和油镜3种物镜中，油镜的放大倍数和数值孔径（numerical aperture）最大，而工作距离最短。
2 ) 显微镜的分辨率显微镜性能的优劣不单是看它的总放大倍数，更重要的是看它的分辨率的大小。
分瓣率是指显微镜能分辨出物体两点间最小距离（D）的能力。
D值愈小表明分辨率愈高。
D值与光线的波长（λ）成正比，与物镜的数值孔径（NA）成反比：D=λ/2NA从上式可看出，缩短光波长和增大数值孔径都可提高分辨率。
数值孔径指光线投射到物镜上的最大角度（称镜口角，α）的一半正弦与介质折射率（n）的乘积：NA=n×Sinα/2影响数值孔径大小的因素－是镜口角，二倍介质的折射率。
当物镜与玻片之间的介质为空气时，由于空气（n=1.0）与玻璃（n=1.52）的折射率不同，光线会发生折射，不仅使进入物镜的光线减少，降低了视野的照明度，而且会减少镜口角。
当以香柏油（n=1.515）为介质时，由于它的折射率与玻璃的相近，光线经过玻片后可直接通过香柏油进入物镜而不发生折射，不仅增加了视野的照明度，更重要的是通过增加数值孔径达到提高分辨率的目的。
2 细菌的革兰氏染色原理革兰氏染色法是1884年由丹麦病理学家C.Gram创立的。
作为细菌学上最常用最重要的鉴别染色法，革兰氏染色法可将所有的细菌区分为革兰氏阳性菌（G+）和革兰氏阴性菌（G－）两大类.G－菌的细胞壁中含有较多易被乙醇溶解的类脂质，而且肽聚糖层较薄、交联度低，故用乙醇或丙酮脱色时溶解了类脂质，增加了细胞壁的通透性，使初染的结晶紫和碘的复合物易于渗出，结果细菌就被脱色，再经番红复染后就成红色。
实验01油镜的使用及细菌形态的观察（可编辑）
实验一油镜的使用及细菌形态的观察普通光学显微镜是一种精密的光学仪器。
以往最简单的显微镜仅由几块透镜组成,而当前使用的显微镜由一套透镜组成。
普通光学显微镜通常能将物体放大1500?2000倍。
一显微镜的构造普通光学显微镜的构造可分为两大部分:一为机械装置,一为光学系统,这两部分很好的配合,才能发挥显微镜的作用。
1、显微镜的机械装置显微镜的机械装置包括镜座、镜筒、物镜转换器、载物台、推动器、粗动螺旋、微动螺旋等部件1镜座 ?镜座是显微镜的基本支架,它由底座和镜臂两部分组成。
在它上面连接有载物台和镜筒,它是用来安装光学放大系统部件的基础。
2镜筒 ?镜筒上接接目镜,下接转换器,形成接目镜与接物镜装在转换器下间的暗室。
从物镜的后缘到镜筒尾端的距离称为机械筒长。
因为物镜的放大率是对一定的镜筒长度而言的。
镜筒长度的变化,不仅放大倍率随之变化,而且成像质量也受到影响。
因此,使用显微镜时,不能任意改变镜筒长度。
国际上将显微镜的标准筒长定为160mm,此数字标在物镜的外壳上。
3物镜转换器 ?物镜转换器上可安装3?4个接物镜,一般是三个接物镜低倍、高倍、油镜。
Nikon显微镜装有四个物镜。
转动转换器,可以按需要将其中的任何一个接物镜和镜筒接通,与镜筒上面的接目镜构成一个放大系统。
4载物台? 载物台中央有一孔,为光线通路。
在台上装有弹簧标本夹和推动器,其作用为固定或移动标本的位置,使得镜检对象恰好位于视野中心。
5推动器? 是移动标本的机械装置,它是由一横一纵两个推进齿轴的金属架构成的,好的显微镜在纵横架杆上刻有刻度标尺,构成很精密的平面座标系。
如果我们须重复观察已检查标本的某一部分,在第一次检查时,可记下纵横标尺的数值,以后按数值移动推动器,就可以找到原来标本的位置。
6粗动螺旋 ?粗动螺旋是移动镜筒调节接物镜和标本间距离的机件,老式显微镜粗螺旋向前扭,镜头下降接近标本。
新近出产的显微镜如Nikon显微镜镜检时,右手向前扭载物台上升,让标本接近物镜,反之则下降,标本脱离物镜。
实验一显微镜油镜的使用和细菌形态的观察
护的基本知识
使用油镜观察细菌的几种基本形态 用悬滴法在高倍镜或油镜下观察细菌的
运动
显微镜油镜使用的原理
普通光学显微镜 欧林巴斯（OLYMPUS）生物显微镜
欧林巴斯（OLYMPUS）相差显微镜
普通光学显微镜Ⅰ
显微镜的构造 1.光学部分:接目镜 、
接物镜 、 照明装置(聚光镜、 虹彩光圈、 反光镜等). 它 使检视物放大,造成物象. 2.机械部分:镜座、镜 臂、镜筒、物镜转换器、 载物台、载物台转移器、 粗调节器、细调节器等部 件.它起着支持 调节 固定 等作用.
普通光学显微镜Ⅱ
显微镜的放大倍数和分辨率 1.放大倍数=接物镜放大倍数× 接目镜放大倍数 2. 显微镜的分辨率 是表示显微 镜辨析物体（两端）两点之间距 离的能力，可用公式表示为： D=λ/2n·sin(α/2 ) 式中D：物镜分辨出物体两点间 的最短距离。 ：可见光的波长（平均0.55m) n: 物镜和被检标本间介质的折 射率。 ：镜口角（即入射角）。
2. 打开主开关。 3. 移动电压调整旋，使亮度 适中。 4. 把标本固定在再物台上。 5. 放松粗调锁挡。 6. 用低倍物镜，旋转粗调和 微控制钮来进行对焦。 7. 调节双目镜筒间距和视度 差。 8. 再适当调节照明度。 9. 使焦点正确地对准标本。
11. 调节孔径光栏。 12. 依次用低、中、高倍镜 观察。 13. 油镜观察：与普通光学 显微镜方法一致。 14. 观察完毕，复原：先将 电压调节旋钮复原，关闭主 开关，切断电源，放开粗调 锁挡。油镜的处理与普通光 学显微镜方法一致。 15. 放入保存箱中。
实验程序III
细菌三种基本形态的观察：
菌落形态观察和个体形态观察，这里主要指 个体形态的观察。 1. 结合油镜的使用，观察三张细菌染色片（球 状菌、杆状菌、和螺旋状菌），边观察边绘图。 2. 看示范镜：观察双球菌、四联球菌察（示范）： 一般采用水浸片法、悬滴法、 半固体培养法，常用水浸法 和悬滴法来观察细菌的运动 性。 1. 水浸片法 2. 悬滴法
实验一-光学显微镜的使用与微生物观察
实验一光学显微镜的使用与微生物观察第一节普通光学显微镜的使用一、实验目的1、了解普通光学显微镜的基本构造和工作原理。
2、学习并掌握普通光学显微镜，重点是油镜的使用技术和维护知识。
3、在油镜下观察微生物的几种基本形态。
二、基本原理（一）普通光学显微镜的构造普通光学显微镜由机械系统和光学系统两部分组成（图1-1）。
1、机械系统机械系统包括镜座、镜臂、镜筒、物镜转换器、载物台、调节器等。
（1）镜座：它是显微镜的基座，可使显微镜平稳地放置在平台上。
（2）镜臂：用以支持镜筒，也是移动显微镜时手握的部位。
（3）镜筒：它是连接接目镜（简称目镜）和接物镜（简称物镜）的金属圆筒。
镜筒上端插入目镜，下端与物镜转换器相接。
镜筒长度一般固定，通常是160mm。
有些显微镜的镜筒长度可以调节。
（4）物镜转换器：它是一个用于安装物镜的圆盘，位于镜筒下端，其上装有3～5个不同放大倍数的物镜。
为了使用方便，物镜一般按由低倍到高倍的顺序安装。
转动物镜转换器可以选用合适的物镜。
转换物镜时，必须用手旋转圆盘，切勿用手推动物镜，以免松脱物镜而招致损坏。
（5）载物台：载物台又称镜台，是放置标本的地方，呈方形或圆形。
载物台上装有压片夹，可以固定被检标本；有标本移动器，转动螺旋可以使标本前后和左右移动。
有些标本移动器上刻有标尺，可指示标本的位置，便于重复观察。
（6）调节器：调节器又称调焦装置，由粗调螺旋和细调螺旋组成，用于调节物镜与标本间的距离，使物像更清晰。
粗调螺旋转动一圈可使镜筒升降约10mm，细调螺旋转动一圈可使镜筒升降约0.1mm。
图1-1 普通光学显微镜的构造1. 镜座2. 镜臂3. 镜筒4. 转换器5. 载物台6. 压片夹7. 标本移动器8. 粗调螺旋9. 细调螺旋10. 目镜11. 物镜12. 虹彩光阑（光圈） 13. 聚光器 14. 反光镜2、光学系统光学系统包括目镜、物镜、聚光器、反光镜等。
（1）目镜：它的功能是把物镜放大的物像再次放大。
实验一 显微镜油浸系的使用及细菌形态观察
实验一显微镜油浸系的使用及细菌基本形态观察一、几点说明（五个方面）1、点名、分组、确定每组的负责人。
第一次微生物实验，点名认一下人，点到谁的名字，举手答一个到。
每人有一个实验编号，编号都写在桌子上，是几号就坐在几号座位上。
分发实验物品时由每组的负责人分发。
另外一共30个人，共分成五组，分组情况写在黑板上。
2、值日安排。
实验结束后值日的组打扫卫生，一次轮一组，今天是第一组值日。
3、预习实验内容：上课前预习实验内容，要求至少提前十分钟到实验室，抄写板书（实验内容和作业），并为上课做准备。
4、本学期的微生物学试验的内容：共分七次试验分别为：实验一（油镜使用及细菌基本形态观察），实验二：细菌抹片染色。
实验三：培养基制备。
实验四、五：细菌分离培养、结果观察。
实验六：青贮料微生物或病料采集、包装和运送。
实验七：主要病原菌的认识。
5、交实验报告：学习委员每次收作业的时间是实验后的第二天，确认在第二天下午上班时间交到畜牧楼212许老师办公室，如果办公室没有人，就放在门头上，稍微露出一点儿以便老师及时发现。
二、实验须知。
1、防病原微生物传播。
咱们这间实验室有一点儿是跟其它实验室是不同的，就是安全要求特别严格，咱们这里是微生物实验室，由于实验需求，里面存在一定的病原微生物是难免的，也是必要的，所以同学们每次上课都要穿上白大褂，进入实验室以后，不要吃东西，不要用手揉眼，有咬笔杆儿习惯的同学在这里头也要控制一下自己。
这不是对咱同学们要求苛刻，而是为同学们自身的安全着想。
（1）实验室中宜着工作衣帽，如沾有可传染的材料，应脱下浸于消毒药水中（如5%石炭酸等）过夜或高压灭菌后再进行清洗。
如果出现菌液污染实验台的情况，也要用四层次5%石炭酸纱布盖住过夜。
（2）沾有病原微生物的器皿及废弃培养物，应置于指定的地点，先消毒后再进行洗涤；检查用过的动物尸体、脏器、血液等，应严加高压灭菌消毒、掩埋处理，防止病原微生物的散播。
（3）接种环、接种针用前用后必须置火焰中灼烧灭菌以免使用过程中的不同种细菌之间的混杂，导致试验操作的污染。
微生物学实验报告
微生物学实验报告实验一普通光学显微镜的使用及细菌染色与形态观察第一部分：显微镜的使用一、目的要求1．熟悉普通光学显微镜的构造、油镜的使用原理和显微镜的维护方法。
2．学会正确使用油镜观察细菌的基本形态和特殊构造。
3．了解各种显微镜的主要特征。
二、实验原理（一）光学显微镜的构造微生物实验室中最常用的是普通光学显微镜，它的构造可分为机械部分和光学部分。
1、机械部分普通复式光学显微镜的机械部分通常包括以下几个部分：目镜、镜筒、基座回转器、物镜、载物台、光圈、聚光器、光源、镜臂、细调节器、粗调节器等。
2、光学部分：目镜、物镜、聚光器、光圈、光源。
（二）放大倍数标本首先经物镜放大，在目镜的焦距平面上形成一个实像，再经过目镜放大成最终的虚像。
总的放大倍数是物镜放大倍数与目镜放大倍数的乘积。
物镜的放大倍数愈大，其工作距离（物镜镜头到标本片之间的距离）愈短，这时光圈就要打开得愈大。
显微镜的性能受物镜的分辨距离或分辨力所限制。
分辨距离即透镜所能分辨的两个物点之间的最小距离，分辨距离愈小，透镜的分辨力愈高，物像也就愈清晰。
因此常以分辨距离来衡量显微镜的分辨力。
R=0.61λ/N.A式中：R-----分辨距离；λ------作用光的波长；N.A------数值口径。
一些介质的折射率介质折射率空气水玻璃香柏油1 13 55 1.56三、实验内容（一）材料：显微镜，香柏油，擦镜纸。
（二）方法：细菌很小，须使用油镜方可观察到。
油镜是显微镜上最重要的部件之一，观察时与玻片非常接近，稍不小心即可压碎玻片，更严重的是损坏镜头，故必须极其仔细地学习油镜的使用方法：1、为使低倍镜取得最适之光源，可将低倍镜头调节到离载物台约1cm的高度，将聚光器提高，光圈完全打开，然后调节电压旋钮至视野最合适。
2、滴一滴香柏油，固定于载物台上，用推动器调节到载物台正中。
在双目侧视下，下旋粗调节器，使油镜头浸入油中几乎与标本片相接触。
然后眼睛从目镜观察（如光线不足，可适当增大电源电压），徐徐上旋粗调节器至看到模糊物像之后，再用细调节器调节以使物像清晰。
实验一_显微镜油镜的使用
实验步骤 9 用过的标本片，于涂面上滴一滴乙醚乙醇，用吸水 纸擦去油污至洁净后，放入标本盒中。
普通光学显微镜
注意事项 1 使用油镜必须按先用低倍镜和高倍镜观察，再用 油镜观察。 2 下降镜头时，一定要从侧面注视，切忌用眼睛对 着目镜，边观察边下降镜头的错误操作，以免压碎 玻片而损坏镜头。 3 使用乙醚乙醇擦镜头时，注意乙醚乙醇不能过多， 以防溶解固定透镜的树脂。 4 注意保持显微镜的洁净，对金属部分要用软布擦 拭，擦镜头必须用擦镜纸，切勿用手或用普通布、 纸等，以免损坏镜头。
5. 遇意外发生，应立即报告教师，不可自己随意处理。
实验室注意事项：
1. 每次实验前必须认真预习，课堂上注意聆听教师对实验内容 的讲解，注意观察教师的示范操作。 2. 实验时应仔细认真，严格按操作规程进行，注意改变生活中 的习惯动作，以掌握微生物学实验的科学操作方法。 3. 使用贵重仪器应先事先熟知操作规程，遇仪器故障时请教师 帮助解决。 4. 实验中如遇菌液外溢、皮肤划伤或菌液吸入等意外，应立即 报告老师及时进行处理，不得隐瞒，以免酿成后患。 5. 注意安全，易燃物品如二甲苯、酒精等应远离火源。 6. 实验完毕，必须将仪器放到指定地点，带菌工具应先进行消 毒。
普通光学显微镜 利用光学原理把人眼所不能分辨的 微小物体放大成像，以供人们提取微细结构信息。 在油浸镜与标本之间滴加香柏油后，调整光源做检 查，即为油镜。油镜的使用原理是，因香柏油具有 与玻璃相似的折射率（香柏油为1.515，玻璃为 1.52）。所以镜检时，滴加的香柏油使光源尽可能 多的进入物镜中，避免光线通过折射率低的空气 （折射率1.0）而散失光线，因而能提高物镜的分 辨力，使物象更明亮清晰。
普通光学显微镜
显微镜的保养（了解） 1 显微镜不能在阳光下曝晒和靠近热源放置。以避免透镜破裂 或脱落。 2 显微镜勿于腐蚀性、挥发性化学试剂放在一起 3 显微镜应注意防潮，箱内防潮硅胶布带要定期烘烤干燥，以 避免失效。 4 显微镜不可随意拆卸，机械部分应加润滑油，以减少摩擦。 5 显微镜要安置于洁净的室内，注意防尘。再次使用前后，应 用绸布或绒布擦去机械部分和反光镜上的灰尘。镜头则须用擦镜 纸擦拭，做到不污染任何油渍、污迹和灰尘。 6 每次使用完毕，各部件还原呈存放状态，即下降聚光镜，开 大光圈，反光镜垂直于镜座，下降镜筒并使物镜呈八字形状态。
显微镜油镜的使用实验报告(共3篇)
显微镜油镜的使用实验报告(共3篇)
实验目的：学会使用显微镜油镜，观察显微图像。
实验原理：显微镜油镜是在显微镜物镜与被观察物之间加透镜的一种装置。
使用油镜时，将一滴油放在被观察物上，再将镜头放到油滴上方观察。
实验仪器：显微镜、油镜。
操作步骤：
1、调节显微镜至适当倍数。
2、在玻片上放置一滴油。
3、将显微镜物镜调至与油相邻。
4、将眼睛贴近目镜，调整焦距，观察显微图像。
实验结果：通过调节焦距，我们看到了比普通显微镜更清晰的图像。
实验二：显微镜油镜在生物学研究中的应用
实验原理：显微镜油镜的油滴可以缩短物镜和被观察物之间的距离，可以提高生物样品的透明度和分辨率，使细胞结构更清晰。
实验材料：细胞样品、油。
1、将细胞样品放在载玻片上。
实验结果：使用显微镜油镜观察细胞样品，可以看到更清晰的细胞结构。
实验三：显微镜油镜的维护和注意事项
实验原理：显微镜油镜在使用时应注意器材的保养和清洁。
1、使用前检查油镜是否干净，如有杂质应用棉签或纸巾清洁。
2、使用后应清洗，先用纸巾擦去多余油，再用棉签沾清洁剂轻轻擦拭油镜，清理干净后再擦干。
3、储存时应放置干燥、阴凉的地方，避免阳光直射和高温。
4、使用时应避免碰撞和重压。
实验结果：正确使用和维护油镜，可以延长器材寿命并提高显微镜观察质量。
实验一 显微镜油镜的使用和细菌形态的观察
实验一显微镜油镜的使用和细菌形态的观察本次实验主要介绍了显微镜油镜的使用以及细菌形态的观察。
显微镜是生物科学中最基本最必要的仪器，也被称为生命科学研究的窗口。
而观察细菌形态则是微生物学重要的研究内容之一，对于深入了解微生物的特性和分类十分关键。
一、显微镜油镜的使用1、准备工作在使用显微镜前，需要对仪器做一些准备工作，具体如下：（1）检查显微镜是否清洁干净。
使用棉花棒和无水酒精擦拭镜头和接口。
（2）插入镜片，拧紧螺丝。
注意，平光镜的凹面朝上。
（3）透镜的高度应调整至最高点，油镜周围涂上润滑油。
（4）在准备好玻片后，使用无菌针将样本划到玻片上。
2、操作步骤（1）将玻片插入载置物台。
调整光源，使其在镜片下方成圆形状。
（2）使用低倍放大的物镜，在载置物台下调整样本位置，然后转动焦点，调整到最清晰的位置。
（3）切换到高倍物镜。
在不移动载置物台的情况下，调整焦距直至视野内的细胞详细可见。
（4）将油镜轻轻接触载置物台上的镜片，调节光源以得到最佳观察效果。
（5）旋转调节管，使细胞从上到下等比例进入视野，观察细菌的形态、大小、数量等。
二、细菌形态的观察1、细菌分类根据细菌的细胞形态、大小、结构和移动方式等特征，可以将细菌分为不同的分类。
细菌形态既包含单细胞长条状物、圆球体等基本形态，又包括复杂的细胞、菌株组成的群体等。
常见的细菌形态有以下几种：（1）球菌（cocci）：球形或椭圆形的细胞。
（2）杆菌（bacilli）：棒状或柱状的细胞。
在实验过程中，使用显微镜观察样本，发现细菌形态上虽然存在一定的差异，但一般表现为以下情况：（1）球菌或细圆菌：呈球形，直径一般在0.5-2μm之间。
（3）螺旋菌：呈螺旋形，长度几乎无限制，直径0.5-1μm左右。
然而，即使细菌大小、形态有所不同，它们的细微结构也存在着明显的相似性，这种结构相似性在分类学上具有相当的意义。
细菌形态的观察是微生物学中非常重要的基础工作，通过观察细菌的形态、大小、数量等，能够更好地了解微生物的生长繁殖规律，对于深入研究微生物的特性、分类以及对环境的影响等方面具有非常重要的价值。
油镜使用实验报告范文
油镜使用实验报告范文微生物学实验报告微生物学实验报告实验一普通光学显微镜的使用及细菌染色与形态观察第一部分：显微镜的使用一、目的要求1．熟悉普通光学显微镜的构造、油镜的使用原理和显微镜的维护方法。
2．学会正确使用油镜观察细菌的基本形态和特殊构造。
3．了解各种显微镜的主要特征。
二、实验原理（一）光学显微镜的构造微生物实验室中最常用的是普通光学显微镜，它的构造可分为机械部分和光学部分。
1、机械部分普通复式光学显微镜的机械部分通常包括以下几个部分：目镜、镜筒、基座回转器、物镜、载物台、光圈、聚光器、光源、镜臂、细调节器、粗调节器等。
2、光学部分：目镜、物镜、聚光器、光圈、光源。
（二）放大倍数标本首先经物镜放大，在目镜的焦距平面上形成一个实像，再经过目镜放大成最终的虚像。
总的放大倍数是物镜放大倍数与目镜放大倍数的乘积。
物镜的放大倍数愈大，其工作距离（物镜镜头到标本片之间的距离）愈短，这时光圈就要打开得愈大。
显微镜的性能受物镜的分辨距离或分辨力所限制。
分辨距离即透镜所能分辨的两个物点之间的最小距离，分辨距离愈小，透镜的分辨力愈高，物像也就愈清晰。
因此常以分辨距离来衡量显微镜的分辨力。
R=0.61λ/N.A式中：R-----分辨距离；λ------作用光的波长；N.A------数值口径。
一些介质的折射率介质空气水玻璃香柏油折射率1 13 55 1.56三、实验内容（一）材料：显微镜，香柏油，擦镜纸。
（二）方法：细菌很小，须使用油镜方可观察到。
油镜是显微镜上最重要的部件之一，观察时与玻片非常接近，稍不小心即可压碎玻片，更严重的是损坏镜头，故必须极其仔细地学习油镜的使用方法：1、为使低倍镜取得最适之光源，可将低倍镜头调节到离载物台约1cm的高度，将聚光器提高，光圈完全打开，然后调节电压旋钮至视野最合适。
2、滴一滴香柏油，固定于载物台上，用推动器调节到载物台正中。
在双目侧视下，下旋粗调节器，使油镜头浸入油中几乎与标本片相接触。
微生物实验实验一显微镜的使用及微生物形态观察
• 实验一 显微镜的使用及微生物形态观察 • 实验二 活性污泥生物相及藻类形态观察 • 实验三 微生物的染色 • 实验四 微生物细胞数的计数 • 实验五活性污泥不同微生物种群的分离培养与鉴别
1
实验一 显微镜的使用及微生物形态观察
一. 目的 1. 了解普通光学显微镜的构造，学习显微镜 的使用方法和保养。（高、低倍镜的使用） 2. 观察蓝细菌、霉菌、酵母菌、放线菌的 个体形态，学会生物图的绘制。
血球计数板正面结构图
计数室放大图
23
计数：
数出5个中方格中的总菌数A，若菌液的稀释 倍数为B，则计算公式如下：
(1) 25个中方格的计数板计算公式 总菌数 A 25 104 B 50000 A B（个 / ml）
5 (2) 16个中方格的计数板计算公式
总菌数 A 16 104 B 32000 A B（个 / ml） 5
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三. 实验内容
（一）培养基的制备及灭菌 1. 玻璃器皿的包扎与灭菌
（1） 六套培养皿一组, 用报纸包装。 （2） 取四支吸量管，在其吸端塞少许棉花后用 长报纸条包扎。
（3） 干热灭菌:上述玻璃器皿在160°C烘箱内2小 时。
2.无菌水的制备 在3支试管中各装入9ml自来水，塞上硅胶塞, 同下
述培养基一起用高压蒸汽灭菌。
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2. 区分酵母菌死活细胞基本原理 美蓝是一种无毒性的染料，它的氧化型呈
蓝色，还原型是无色。用美蓝对酵母菌的活细 胞进行染色时，由于细胞的新陈代谢作用，细 胞内具有较强的还原能力，能使美蓝由蓝色的 氧化型变成无色的还原型。因此，具有还原能 力的酵母活细胞是无色的或淡蓝色，而死细胞 或代谢作用的衰老细胞则呈蓝色，借此即可对 酵母菌的死细胞和活细胞进行鉴别。
实验一显微镜油镜的使用及微生物形态观察
精选ppt课件
（镜臂）
（粗调节器） （细调节器） （载物台调节器）
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二、实验原理（二）
2、油镜的工作原理
普通光学显微镜的物镜通常有低倍物镜（10×），高倍 物镜（40×），和油镜（100×）三种。
➢ 油镜的识别：油镜是三者中放大倍数最大的，因使用时必须 浸于香柏油内，故称油镜。油镜与其他物镜有以下区别：
（4）切不可将高倍镜转动经过加有香柏油的区域。
【油镜头的保护】
（1）油镜头使用完结后，必须用擦镜纸滴加少量乙醚与无水
乙醇的混合液或二甲苯，将油擦洗干净（混合液或二甲苯
用量宜少，以免镜片间粘胶溶解）。
（2）将光源灯亮度调至最低后关闭，拔下电源插头，然后把
物镜转成“八”字或将最低放大倍数物镜转到工作位置，
（1）油镜一般是所有物镜中最长的； （2）油镜头上标有其放大倍数 “100×”； （3）不同厂家生产的显微镜，常在不同镜头上标有不同颜色
的线圈以示区别，使用时应先熟悉一下油镜头上的线圈颜色， 以防用错物镜。
➢ 基本原理：用油镜观察标本、是在使用高倍镜的基础上，采 用同玻璃折光率（n=1.52）相似的油状物（如香柏油、液体 石腊等），滴加在标本与油镜头中间，以避免光线散射，提 高显微镜的清晰度和分辨精能选力ppt课。件使观察物象更加清楚明了4 。
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【注意事项】
（1）当油镜头与标本片几乎接触时，不可再用粗调螺旋向上 移动载物台或下降油镜头，以免损坏玻片甚至压碎镜头。
（2）油镜头和玻片只能用擦镜纸擦拭，不能用手、棉布或其 他纸张擦拭。
（3）香柏油的用量以1-2滴、能浸到油镜头的中间部分为宜， 用量太多则浸染镜头，太少则视野变暗不便观察。
显微镜油镜的使用方法
一、显微镜油镜的使用方法；以目前生产中使用较多的电光源显微镜为例1.放置：显微镜使用时应放置在洁净平稳的实验桌或实验台上。
2.调节视野亮度：打开电源开关，尽量升高聚光器，放大光圈，调节亮度调节钮，使射入镜头的光线适中(明亮但不刺眼)。
3.标本片的放置：于标本片的欲检部位，滴加香柏油一滴，将标本片固定于载物台正中，用油镜检查。
4.镜检：首先，眼睛从镜筒右侧注视油镜头，小心转动粗调节器，使载物台上升，直至油镜头浸没油中，与玻片相接触。
然后，一面从目镜观察，一面徐徐转动粗调节器使载物台缓慢下降，待得到模糊物像时，再换用细调节器，直至物像完全清晰为止。
5.油镜的保养：油镜用毕，应以擦镜纸拭去镜头上的香柏油，如油已干或物镜模糊不清，可滴加少量乙醇乙醚于擦镜纸上，拭净油镜头，并随即用擦镜纸拭去乙醇乙醚(以免乙醇乙醚溶解粘固镜片的胶质使其脱胶，致使镜片移位或脱落)，然后，把低倍镜转至中央，高倍镜和油镜转成“八”字形，使载物台和聚光器下降，关上电源，用绸布包好，放入镜箱，存放于阴凉干燥处，避免受潮生锈。
目前所用的显微镜种类很多，尽管油镜的识别和原理是一致的，但在使用上可能与以上所述有不同，目前生产中使用较多的是电光源显微镜。
- 1 -二、细菌培养物标本片的制备方法、革兰氏染色及结果（一）细菌培养物标本片的制备方法1.抹片根据所用材料不同，抹片的方法亦有差异。
(1)固体培养物。
取洁净的玻片一张，把接种环在酒精灯火焰上烧灼灭菌后，取1～2环的无菌生理盐水，放于载玻片的中央，再将接种环灭菌，冷却后，从固体培养基上挑取菌落或菌苔少许，与水混匀，作成直径1cm的涂面。
接种环用后需灭菌。
(2)液体培养物。
可直接用灭菌接种环钩取细菌培养1～2环，在玻璃片上作直径1cm的涂面。
(3)液体病料：(血液、渗出液、腹水等）。
取一张边缘整齐的玻载片，用其一端醮取血液等液体材料少许，在另一张洁净的玻片上，以45°角均匀推成一薄层的涂面。
试验一显微镜的使用油浸系物镜的使用
实验一 显微镜的使用、油浸系物镜的使用一、实验原理微生物学研究用的显微镜通常有低倍物镜(16mm，10×)高倍物镜(4mm，40-45×)和油镜(1.8mm，95-100×)三种。
油镜常标有黑圈或红圈，它是三者中放大倍数最大的。
使用油镜时，油镜与其他物镜的不同是载玻片与接物镜之间，不是隔一层空气，而是隔一层油质，称为油浸系。
这种油常选用香柏油，因香柏油的折射率n＝1.52，与玻璃基本相同。
当光线通过载玻片后，可直接通过香柏油进入物镜而不发生折射。
如果玻片与物镜之间的介质为空气，则称为干燥系；当光线通过玻片后，受到折射发生散射现象，进入物镜的光线显然减少，这样视野的照明度就减低了(图Ⅰ-1)。
利用油镜不但能增加照明度；更主要的是能增加数值口径。
因为显微镜的放大效能由其数值孔径决定的。
所谓数值孔径，即光线投射到物镜上的最大角度(称镜口角)的一半正弦，乘上玻片与物镜间介质折射率所得的乘积，可用下列公式表示：2sin α⋅=⋅n A N式中 数值孔径=⋅A N介质折射率=n最大入射角，即镜口角=α数值孔径的大小又是衡量一台显微镜分辨力强弱的依据；分辨力是指显微镜能辨别物体两点间最小距离的能力。
A N ⋅=2λ能辨别两点间最小距离式中 λ=光波波长 由上述可知若n 值和α角越大则N ·A 越大或光波波长越短，则显微镜的分辨力越大(图Ⅰ-2)。
一些物质的折射率：水 1.33 玻璃 1.52 空气 1.0 香柏油 1.515。
二、实验器材1、仪器 显微镜；2、材料 巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)等标本片，香柏油，二甲苯，擦镜纸。
三、操作步骤1、取镜 显微镜是光学精密仪器，使用时应特别小心。
从镜箱中取出时，一手握镜臂，一手托镜座，放在实验台上。
在使用时要特别小心。
使用前首先要熟悉显微镜的结构和性能，检查各部零件是否完全合用，镜身有无尘土，镜头是否清洁。
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实验一显微镜油镜的使用及微生物基本实验技
术
实验一显微镜油镜的使用及微生物基本实验技术
一、实验目的
1. 复习显微镜低倍镜和高倍镜的使用技术。
2. 了解油浸系物镜的基本原理，掌握油浸系物镜的使用方法。
3. 掌握微生物实验的操作技能。
二、实验内容：
1．学习油浸系物镜的使用方法。
2．用油镜观察细菌和酵母菌染色装片。
3. 学习微生物实验的操作技能。
三、实验材料和用具
细菌三型、酵母菌染色装片；显微镜、香柏油、擦镜液、擦镜纸；试管、培养皿、移液管、纱布、棉花等。
四、操作步骤
（一）显微镜油浸的使用
1．将显微镜置于平稳的实验台上，镜座距实验台边沿约为4cm，坐正。
2．调节光源：将低倍物镜转到工作位置，把光圈完全打开，聚光器升至与载物台相距约1mm 左右。
转动反光镜采集光源，光线较强的天然光源宜用平面镜，光线较弱的天然光源或人工光源宜用凹面镜，对光至视野内均匀明亮为止。
观察染色装片时，光线宜强；观察末染色装片时，光线不宜太强。
3. 低倍镜观察染色装片
首先下降镜台，将酵母菌染色装片置于载物台上，用标本夹夹住，将观察位置移至低倍镜正下方，镜台升至距装片0.5cm处，适当缩小光圈然后两眼从目镜观察，转动粗调节器使镜台下降至发
现物像时，改用细调节器调节到物像清楚为止。
移动装片，把合适的观察部位移至视野中心。
4. 高倍镜观察染色装片
眼睛离开目镜从侧面观察，旋转物镜转换器，将高倍镜转至正下方，注意避免镜头与玻片相撞。
再由目镜观察，仔细调节光圈，使光线的明亮度适宜。
用细调节器校正焦距使物镜清晰为止。
将最适宜观察部位移至视野中心。
不要移动装片位置，准备用油镜观察。
5. 油镜观察染色装片
提起镜筒约2cm，将油镜转至正下方。
在玻片标本的镜检部位(镜头的正下方)滴一滴香柏油；从侧面注视，小心慢慢降下镜筒，使油镜浸在油中至油圈不扩大为止，镜头几乎与装片接触，但不可压及装片，以免压碎玻片，损坏镜头；
将光线调亮，从目镜观察，用粗调节器将镜台徐徐下降(切忌反方向旋转)，当视野中有物像出现时，再用细调节器校正焦距。
如末找到物像，必须再从侧面观察，将油镜降下，重复操作直至物像看清为止。
仔细观察并绘图；再次观察提起镜筒，换上细菌三型染色装片，依次用低倍镜、高倍镜和油镜观察，绘图。
重复观察时可比第一次少加香柏油。
6. 镜检完毕后的工作
下降镜台，取出装片；清洁油镜，油镜使用完毕后，须用擦镜纸擦去镜头上的香柏油，再用擦镜纸沾少许擦镜液擦掉残留的香柏油，最后再用干净的擦镜纸擦干残留的擦镜液；擦净显微镜，将各部分还原。
将接物镜呈“八”字形，不可使其正对聚光器，同时降下聚光器，转动反光镜使其镜面垂直于镜座。
最后套上镜罩，对号放入镜箱中，置阴凉干燥处存放。
（二）微生物基本实验技术
1．用单层报纸螺旋包扎移液管。
2．用两层报纸包扎培养皿。
3．用四层报纸包扎试管。
4．做棉棉塞
五、注意事项
1．使用油镜必须按先用低倍镜和高倍镜观察，再用油镜观察。
2．上升镜台时，一定要从侧面注视，切忌用眼睛对着目镜，边观察边上升镜台的错误操作，
以免压碎玻片而损坏镜头。
3．使用擦镜液擦镜头时，注意擦镜液不能过多，以防溶解固定透镜的树脂。
4．注意保持显微镜的洁净，对金属部分要用软布擦拭，擦镜头必须用擦镜纸，切勿用手或用普通布、纸等，以免损坏镜头。
六、实验报告
分别绘制油镜下观察到的三类细菌的形态，注明物镜放大倍数和总放大率。
七、问题和思考
1．用油镜便于观察细菌的依据是什么？
2．使用油镜应特别注意哪些问题？
3．当物镜从低倍镜转到高倍镜和油镜时，对照明度有何要求？应如何调节？
油镜的基本原理
一、实验目的
1. 复习显微镜低倍镜和高倍镜的使用技术。
2. 了解油浸系物镜的基本原理，掌握油浸系物镜的使用方法。
3. 掌握微生物实验的操作技能。
二、实验内容：
1．学习油浸系物镜的使用方法。
2．用油镜观察细菌和酵母菌染色装片。
3. 学习微生物实验的操作技能。
三、实验材料和用具
细菌三型、酵母菌染色装片；显微镜、香柏油、擦镜液、擦镜纸；试管、培养皿、移液管、纱布、棉花等。
四、操作步骤
（一）显微镜油浸的使用
1．将显微镜置于平稳的实验台上，镜座距实验台边沿约为4cm，坐正。
2．调节光源：将低倍物镜转到工作位置，把光圈完全打开，聚光器升至与载物台相距约1mm 左右。
转动反光镜采集光源，光线较强的天然光源宜用平面镜，光线较弱的天然光源或人工光源宜用凹面镜，对光至视野内均匀明亮为止。
观察染色装片时，光线宜强；观察末染色装片时，光线不宜太强。
3. 低倍镜观察染色装片
首先下降镜台，将酵母菌染色装片置于载物台上，用标本夹夹住，将观察位置移至低倍镜正下方，镜台升至距装片0.5cm处，适当缩小光圈然后两眼从目镜观察，转动粗调节器使镜台下降至发现物像时，改用细调节器调节到物像清楚为止。
移动装片，把合适的观察部位移至视野中心。
4. 高倍镜观察染色装片
眼睛离开目镜从侧面观察，旋转物镜转换器，将高倍镜转至正下方，注意避免镜头与玻片相撞。
再由目镜观察，仔细调节光圈，使光线的明亮度适宜。
用细调节器校正焦距使物镜清晰为止。
将最适宜观察部位移至视野中心。
不要移动装片位置，准备用油镜观察。
5. 油镜观察染色装片
提起镜筒约2cm，将油镜转至正下方。
在玻片标本的镜检部位(镜头的正下方)滴一滴香柏油；从侧面注视，小心慢慢降下镜筒，使油镜浸在油中至油圈不扩大为止，镜头几乎与装片接触，但不可压及装片，以免压碎玻片，损坏镜头；
将光线调亮，从目镜观察，用粗调节器将镜台徐徐下降(切忌反方向旋转)，当视野中有物像出现时，再用细调节器校正焦距。
如末找到物像，必须再从侧面观察，将油镜降下，重复操作直至物像看清为止。
仔细观察并绘图；再次观察提起镜筒，换上细菌三型染色装片，依次用低倍镜、高倍镜和油镜观察，绘图。
重复观察时可比第一次少加香柏油。
6. 镜检完毕后的工作
下降镜台，取出装片；清洁油镜，油镜使用完毕后，须用擦镜纸擦去镜头上的香柏油，再用擦镜纸沾少许擦镜液擦掉残留的香柏油，最后再用干净的擦镜纸擦干残留的擦镜液；擦净显微镜，将各部分还原。
将接物镜呈“八”字形，不可使其正对聚光器，同时降下聚光器，转动反光镜使其镜面垂直于镜座。
最后套上镜罩，对号放入镜箱中，置阴凉干燥处存放。
（二）微生物基本实验技术
1．用单层报纸螺旋包扎移液管。
2．用两层报纸包扎培养皿。
3．用四层报纸包扎试管。
4．做棉棉塞
五、注意事项
1．使用油镜必须按先用低倍镜和高倍镜观察，再用油镜观察。
2．上升镜台时，一定要从侧面注视，切忌用眼睛对着目镜，边观察边上升镜台的错误操作，以免压碎玻片而损坏镜头。
3．使用擦镜液擦镜头时，注意擦镜液不能过多，以防溶解固定透镜的树脂。
4．注意保持显微镜的洁净，对金属部分要用软布擦拭，擦镜头必须用擦镜纸，切勿用手或用普通布、纸等，以免损坏镜头。
六、实验报告
分别绘制油镜下观察到的三类细菌的形态，注明物镜放大倍数和总放大率。
七、问题和思考
1．用油镜便于观察细菌的依据是什么？
2．使用油镜应特别注意哪些问题？
3．当物镜从低倍镜转到高倍镜和油镜时，对照明度有何要求？应如何调节？
油镜的基本原理。