硝酸甘油疗效基因检测
揭开药物基因检测的神秘面纱
揭开药物基因检测的神秘面纱作者：赵莹来源：《家庭百事通·健康一点通》2016年第10期基因是传递生命的遗传密码，它控制着人的生老病死，参与几乎所有生命的活动，决定着人体的毛发、肤色、身高、体质、性格、健康等一切生命表象。
从我们一出生，基因就像个“先知”一样指导着我们的人生。
如今，以往被认为“高大上”的药物代谢相关基因检测已经悄然走进我们的生活。
基因决定人对药物的反应不同，药物基因检测只需抽几毫升的血，做一次就能让患者获益终身，这种检测可以避免用药的盲目性和大量药物不良反应事件的发生。
药物敏感性检测——氯吡格雷、硝酸甘油今年65岁的王先生在接受了心脏支架手术后开始服用一种抗血小板凝集的药物——氯吡格雷。
氯吡格雷是一种常用的血小板聚集抑制剂，广泛应用于急性冠状动脉综合征（ACS）和经皮冠状动脉介入治疗（PCI）的抗栓治疗，是最普遍被使用的抗凝药物。
正常情况下，王先生服用氯吡格雷可以大大减少血栓形成的危险。
然而在支架术后的4年间，他却多次发生血管狭窄和血栓等不良事件，不得不又做了支架手术。
在我们身体中有一种基因叫CYP2C19，它参与氯吡格雷的代谢。
通过药物基因检测发现，王先生的CYP2C19基因发生了突变，使得此类药物在他体内难以起效，这就解释了为何王先生术后复发的原因。
主治医生根据药物基因检测结果改用另一种药物，王先生情况逐渐转好。
广为人知的“救命药”硝酸甘油，患心绞痛的人都会随身携带，以备不时之需。
然而，硝酸甘油药效的发挥也与人体内一种名为ALDH2的基因有关。
ALDH2是一种酶，其活性因人而异，对于活性低的人，硝酸甘油的药效就很难发挥。
如果这类人把硝酸甘油当作救命药，很可能会误了大事。
同样是ALDH2基因，还能产生另一种酶。
这种酶是人体酒精代谢的关键物质，活性高的人，代谢酒精的能力强；活性低的人，代谢酒精的能力就差。
换句话说，酒量是受基因影响的。
这就可以解释为什么有人千杯不醉，有人一杯就倒。
线粒体乙醛脱氢酶2_基因多态性对健康受试者硝酸甘油效应的影响
·临床研究·线粒体乙醛脱氢酶2基因多态性对健康受试者硝酸甘油效应的影响张怡，赵鹏飞，胡怡*，贾秀娟，张仲义，章政摘要目的：探讨线粒体乙醛脱氢酶2（ALDH2）基因多态性对健康受试者舌下含服硝酸甘油的药物效应的影响。
方法：使用Taqman探针检测试剂盒(C_11703892_10) 检测450名我院体检中心健康志愿者的ALDH2基因型，分为野生型(GG）和突变型(GA/AA)，其中，野生型227例，突变型223例。
单次舌下含服硝酸甘油0.5 mg，用无创血流动力学监测仪测定两组受试者服药前(0 min)及服药后不同时间点(5 min, 15 min)的无创血流动力学指标，并对两组指标中的心输出量(CO)及血管外周阻力(SVR)的变化进行分析比较。
结果：ALDH2野生型及突变型受试者，含服硝酸甘油后突变型的CO在0 min、5 min、15 min三个时间点比较差异有统计学意义 (P=0.025)，其中CO 15 min 较0 min降低显著，差异有统计学意义(P=0.008)；野生型的CO在该三个时间点比较差异亦有统计学意义(P=0.019)，其中CO在5 min 较0 min升高显著(P=0.005)；突变型的SVR在该三个时间点比较差异无明显统计学意义 (P=0.404)。
野生型的SVR在该三个时间点比较差异有统计学意义(P均<0.001)，其中SVR在5 min及15 min较0 min 下降，差异均有统计学意义(P均<0.001)。
结论：健康受试者含服硝酸甘油后无创血流动力学参数CO及SVR的变化与ALDH2基因型有关。
关键词 硝酸甘油；乙醛脱氢酶；基因多态性；无创血流动力学Effect of Mitochondria Aldehyde Dehydrogenase 2 Gene Polymorphismon Sublingual Tablet Nitroglycerin Reaction in Healthy VolunteersZHANG Yi, ZHAO Peng-fei, HU Yi, JIA Xiu-juan, ZHANG Zhong-yi, ZHANG Zheng.Geriatrics Department, Qingdao University Medical College Affiliated Hospital,Qingdao (266003), Shandong, ChinaCorresponding Author：ZHANG Zheng, Email:163zhangz@AbstractObjective：To investigate the effect of mitochondria aldehyde dehydrogenase 2 (ALDH2) gene polymorphism on sublingual tablets nitroglycerin reaction in healthy volunteers.Methods: ALDH2 gene polymorphism was measured in 450 healthy volunteers and the subjects were divided into2 groups as Wild type (GG) group, n=227 and Mutant type group (GA/AA), n=223, different genotypes were measured byTaqman probe detection kit. All subjects took sublingual tablets nitroglycerin for 0.5mg, and the non-invasive hemodynamic parameters of cardiac output (CO) and systemic vascular resistance (SVR) were monitored and compared between 2 groups at 0 minute (before medication) and 5, 15 minutes after medication.Results: ①For CO condition, in Mutant type group, the CO values were different at 0, 5, 15, minutes, P=0.025, and the CO value in 15 minutes obviously decreased than that in 0 minute, P=0.008; in Wild type group, the CO values were also different at 0, 5, 15, minutes, P=0.019, and the CO value in 5 minutes significantly increased than that in 0 minute, P=0.005. ②For SVR condition, in Mutant type group, the SVR values were similar at 3 time points, P=0.404; in Wild type group, the SVR values were different at each time point, P=0.000, and the SVR value in 5, 15 minutes were lower than that in 0 minute, both P<0.001.Conclusion: The non-invasive hemodynamic parameters of CO and SVR varies from ALDH2 gene polymorphism in healthy subjects for sublingual tablets nitroglycerin reaction.Key words Nitroglycerin; Aldehyde dehydrogenase 2; Gene polymorphism; Non-invasive hemodynamic(Chinese Circulation Journal, 2013,28:528.)作者单位：266003 山东省青岛市，青岛大学医学院附属医院 特需保健科(张怡、胡怡、贾秀娟、张仲义、章政)；山东省胸科医院（赵鹏飞）作者简介：张怡 硕士研究生 主要从事老年医学心脑血管病的临床研究 Email：cnzhangyi@ 通讯作者：章政Email：163zhangz@ *胡怡为并例第二作者中图分类号： R54 文献标识码：A 文章编号： 1000-3614（2013）07-0528-04 doi：10.3969/j.issn.1000-3614.2013.07.014线粒体乙醛脱氢酶2(aldehyde dehydrogenase, ALDH2)是硝酸甘油(GTN)的有效代谢物一氧化氮(NO)形成的关键酶。
硝酸甘油代谢能力测定
谢谢
硝酸甘油作用分子机制
硝酸甘油 乙醛
一氧化氮
乙酸
环磷鸟苷
血管舒张
乙醛脱氢酶（ALDH2）基因
ALDH2基因位于人类第12号染色体（12q24.2）具有催化活性的野生型称为G等 位基因(ALDH2*1) ,催化能力失活的变异型称为A 等位基因(ALDH2*2) 。
ALDH2基因型及表示方法
野生型 突变型
野生纯合子
突变杂合子
突变纯合子
ALDH2 *1/*1
ALDH2 *1/*2
ALDH2 *2/*2
Glu504Glu
Glபைடு நூலகம்504Lys
Lys504Lys
ALDH2基因第12外显子内存在一个单核苷酸多态(single nucleotide polymorphisms, SNPs)——rs671,出现碱基 置换：鸟嘌呤(G)→腺嘌呤(A),故导致密码子改变：GAA→AAA,进而发生该酶第504个氨基酸的改变,谷氨酸 (Glu)→赖氨酸(Lys)。所以,ALDH2有两个等位基因：野生型(ALDH2*1,*504Glu),突变型(ALDH2*2,*504Lys)。
ALDH2 SNP对硝酸甘油代谢的影响
基因型 野生纯合子 突变杂合子 突变纯合子
ALDH2 *1/*1
ALDH2 *1/*2
ALDH2 *2/*2
硝酸甘油代谢能力
100%
8-15%
6-7%
中国人频率
61%
32%
7%
25%无效人群风险！
冠状动脉闭塞20～30分钟后，受其供血心 肌即因严重缺血而发生坏死，称为急性心 肌梗死。 无发病速度快，无法在送医急救过程中进 行ALDH2检测并得到结果。 医院常规使用硝酸甘油进行急救和后续治 疗。 药物无效导致严重后果。
维生素C改善硝酸甘油耐受性的实验研究
维生素C改善硝酸甘油耐受性的实验研究研究背景1867年Brunton在爱丁堡研究证实硝酸甘油(nitroglycerin，NTG)可以用于心绞痛的治疗，至今为止NTG用于治疗缺血性心脏病和充血性心力衰竭(congestive heartfailure，CHF)的历史已经有130多年了。
硝酸甘油主要通过扩张外周血管降低心脏前后负荷，扩张冠状动脉减少心肌耗氧而发挥作用但如果长期使用该药物必须增加剂量才能维持其疗效。
相继又有很多学者在临床上利用超声学和监测血压等手段发现了这种现象，也就是后来称为的“硝酸甘油耐受”。
实验目的:1.学习硝酸甘油耐受动物模型的建立2. 探究VitC对家兔硝酸甘油耐受性的影响，为临床改善耐药提供新的途径。
实验原理：硝酸甘油(NTG)通过释放NO，使cGMP和cAMP生成增加，分别激活cGK-Ⅰ和cAK-Ⅰ，可以使血管扩张性磷蛋白磷酸化，调节细胞内钙离子浓度而产生舒血管作用，而硝酸甘油耐受性是限制NTG临床应用的主要因素，目前尚无一种理想的解决方法。
硝酸甘油耐受机制尚未完全阐明, 涉及多种代谢酶活性、内源性活性物质水平以及受体活性变化。
新近的研究表明，持续应用NTG时，血管组织中的超氧阴离子含最显著增加并参与了NTG耐受性的形成。
维生素C可作为自由基清除剂，能迅速与超氧阴离子反应，生成抗坏血酸自由基。
实验对象、药品与器材家兔32只,体重2～3kg药品：肝素，生理盐水，硝酸甘油贴膜( 16 mg/片,贴保宁R 5)，1μmol/L 的去甲肾上腺素NE， Krebs 液， 10-9～10-4mol/ L的NTG，Vit C粉剂，丙二醛(MDA)试剂盒、一氧化氮(NO)试剂盒和环磷酸鸟苷(cGMP)试剂盒器材：BL-410生物信号记录分析处理系统，手术台，注射器，烧杯，纱布，棉线，塑料导管，婴儿秤，张力换能器，恒温浴槽、镊子、灌流系统、供氧装置设计思路家兔32只，随机分为正常对照(NC)组、NTG组、NTG+VitC组及VitC组。
CYP3A5基因检测技术在肾移植术后精准化用药的指导意义
·论著·CYP3A5基因检测技术在肾移植术后精准化用药的指导意义董塬，邵笑笑，秦彦，杨栋丽，周华（山西省第二人民医院肾移植中心，山西 太原 030012）【摘要】 目的 通过CYP3A5基因检测技术，指导临床对肾移植术后患者精准用药以达到最佳治疗效果同时减少药物不良反应、减少患者经济负担。
方法 回顾性分析山西省第二人民医院2018年8月— 2019年 8月150例公民逝世后捐献肾脏肾移植患者的临床资料，经CYP3A5基因检测分组，采取不同的给药方案，比较各组患者他克莫司血药浓度、肾功能恢复情况、移植肾排斥反应发生率等指标。
结果 各组患者他克莫司均达到有效暴露浓度（各组比较不同时期他克莫司血药浓度，P ＞0.05，无统计学差异），各组比较术后受者血肌酐水平、肾小球滤过率（glomerular filtration rate ，GFR ）水平均无统计学差异（P ＞0.05）。
结论 针对不同基因型患者，采取个体化治疗方案，保证了肾移植术后患者使用他克莫司的安全性和有效性，提高患者生活质量，减轻患者经济负担。
【关键词】 CYP3A5； 基因检测；肾移植； 精准医疗； 他克莫司Guiding significance of CYP3A5 gene detection technology in precise drug use after renal transplantation Dongyuan ，Shao Xiaoxiao ，Qin Yan ，Yang Dongli ，Zhou Hua. The second people's Hospital of Shanxi Province ，Kidney transplant center ，Taiyuan 030012，Shanxi ，China.Corresponding author ：Shao Xiaoxiao ，Email ：**************** 【Abstract 】 Objective Through the CYP3A5 gene detection technology, we can guide the clinical accurate drug use for patients after renal transplantation accurately ，so as to achieve the best therapeutic effect, alleviate the side effects of drugs, and reduce the economic burden of patients. Methods A retrospective analysis of 150 casesof kidney transplantation patients after citizen death in our hospital from August 2018 to August 2019 was conducted. The patients were divided into different groups by CYP3A5 gene detection, and different administration schemes wereadopted. The blood concentration of tacrolimus, the recovery of renal function, the incidence of renal allograft rejectionand other indicators of the patients in each group were compared. Results Tacrolimus in all groups reached theeffective exposure concentration〔there was no significant difference in the plasma concentration of tacrolimus in different periods between the groups（P ＞ 0.05）〕, and there was no significant difference in the serum creatinine level and glomerular filtration rate（GFR ） level between different groups （P ＞0.05）. Conclusion Individualiz ed treatment for patients with different genotypes can ensure the safety and effectiveness of tacrolimus, improve the quality of life and reduce the economic burden of patients after renal transplantation.【Key words 】CYP3A5 gene detection ； Kidney transplantation ； Precision medicine ； Tacrolimus DOI ：10.3969/j.issn.2095-5332.2021.03.006 基金项目：山西省卫生健康委科研课题（201601087） 通讯作者：邵笑笑，Email ： ****************随着科技水平的提高，基因测序技术广泛应用，越来越多的科技成果应用于临床，2020年爆发的新型冠状病毒感染疫情，我国迅速进行病毒基因测序，利用基因技术进行诊断、病毒同源性分析及溯源追踪、病毒序列突变追踪等，基因技术在这次疫情中发挥了至关重要的作用。
硝酸甘油、酒精基因检测用药指导
药物 预测内容 送检标本 检测项目
硝酸甘油、酒精 疗效及毒副作用 外周血/口腔拭子
ALDH2 *2
基因型
*2/*2
*1/*2
*1/*1
表型
突变纯合子
突变杂合子
指标意义
硝酸甘油疗效下降↓ 硝酸甘油疗效下降↓
酒精毒副作用↑
酒精毒副作用↑
野生型 疗效正常√中国卫计委指南：ALDH2代谢活化硝酸甘油成其活性代谢产物一 氧化氮。携带突变等位基因（ALDH2*2）的个体ALDH2酶活性下 降，杂合子个体酶活性仅为野生型个体的10％，突变纯合子个体 酶活性缺失。
反相高效液相色谱法测定硝酸甘油溶液及其制剂的有关物质_伍良涌
色谱图（ 批号： 0802110）
色谱图（ 批号： 080201）
3. 12ng / ml。
2． 9 破坏性实验 取硝酸甘油对照品适量，加 1mol / L 盐酸溶
液制成每毫升中含 0． 5mg 的溶液，置 100℃ 水浴中加热 30min，
放冷至室温，用 1mol / L 氢氧化钠溶液调至中性，作为酸性破坏
杂质 1 －
0． 9 －
0． 2 0． 2
杂质 2 －
0． 2 －
0． 08 0． 06
杂质 3 1． 6 1． 2 1． 3 1． 3 1． 9
杂质 4 － － －
0． 08 －
杂质总量 1． 6 2． 3 1． 3 1． 7 2． 2
表 3 硝酸甘油注射液测定结果 （ % ）
批号 080101 080102 071209 20080114 20080127 07073001 08012401 080201 080202
【Abstract】 Objective To discuss the method of determine nitroglycerin solution and its related substances． Methods Using RP-HPLC method and self-control solution，determine nitroglycerin solution and its related substances． Diamonsil C18 （ 4． 6mm × 150mm，5μm） column was used，with acetonitrile-water as mobile phase （ 50 ∶ 50 ） ，the detection wavelength was 215nm． The concentration was quantified self-contrasted method． Results The regression equation for related substances of nitroglycerin was 0． 5 ～ 11． 7μg / ml（ A = 15262C + 1358． 9，r = 1，n = 8） and the instrument precision was RSD = 1． 5% （ n = 6） ， the minimum detectable concentration was 3. 12ng / ml． Conclusion RP-HPLC is convenient，quick and reproducible for the quantitative determination of the related substances of nitroglycerin solution and its preparation．
硝酸甘油的研究进展
硝酸甘油的研究进展薄志伟硝酸甘油的研究进展薄志伟宝坻区新开口医院内科摘要：硝酸甘油(Nitroglycein，简称NTG)作为一种血管舒张剂，因其扩张冠状动脉和静脉血管作用出现及消退迅速，在心血管疾病的治疗中得到广泛应用，已有百余年历史；特别是，在防治冠心病心绞痛方面，成为特效药，被称为冠心病患者的“救命药”。
硝酸甘油片剂较为人知，通常采取舌下给药，应用方便，发生作用快，疗效可靠。
但硝酸甘油不但一种剂型，随着硝酸甘油临床应用范围的扩展，为适应临床治疗要求，不竭出现了硝酸甘油的其他剂型。
本文简单介绍了硝酸甘油的药理作用，主要综述了分歧剂型硝酸甘油的研究进展、临床应用状况，最后探讨了硝酸甘油现存的问题以及发展前景。
关键词：硝酸甘油；剂型；不良反应硝酸甘油(NTG)为硝酸酯类药物，主要通过扩张外周血管进而降低心脏前后负荷，扩张冠状动脉，减少心肌耗氧量而发挥治疗心脏疾病的作用，且作用迅速，其有效性深受好评。
为适应临床需要，拥有更加广泛的应用范围，国内外研究人员做了大量工作研究硝酸甘油剂型，现在不但有硝酸甘油的舌下片。
本文对硝酸甘油的药理作用进行了一下简介，之后将对分歧剂型硝酸甘油的特点，临床应用状况等方面做综述。
1硝酸甘油简介硝酸甘油属于硝酸酯类药物，可以通过扩张血管，降低心脏前后负荷，且心肌耗氧量降低，应用于临床心血管疾病的治疗已经具有很长的历史，如用于心绞痛、高血压急症、心肌梗死等心血管疾病的治疗。
硝酸甘油经粘膜吸收迅速，但口服硝酸甘油有较强的肝脏首过效应，故硝酸甘油片一般采纳舌下含服方式。
众所周知，同一种药物的分歧剂型或给予分歧剂量，可能发生分歧的药理作用，也可能发生分歧的副作用，如有研究发现分歧剂型硝酸甘油预防内镜下逆行胰胆管造影术(ERCP)术后胰腺炎(PEP)的作用分歧，舌下含服硝酸甘油片组PEP发生相对风险要低于其他剂型组（透皮贴剂、注射剂）[1]。
又如，硝酸甘油可以松弛平滑肌，舒张全身静脉或动脉，对毛细血管后静脉（即容量血管）的舒张作用比小动脉明显，且对冠状血管的舒张作用也较明显[2]。
硝酸甘油疗效基因检测
硝酸甘油疗效基因检测：ALDH2基因多态性硝酸甘油是治疗心绞痛的一线药物，一般来说在舌下含服5-10分钟之内症状缓解。
但中国汉族人含服硝酸甘油无效比例高达25%以上。
这主要是由于线粒体乙醛脱氢酶（ALDH2）基因突变而引起，对于携带该基因有突变的个体不应该把硝酸甘油当做救命药品。
因此通过检测ALDH2的基因型，可预知硝酸甘油的疗效。
另外，饮酒脸红的人也是因为此酶活性的降低或缺失，不能将酒精充分代谢，导致乙醛在肝脏内大量累积，引起酒精中毒，并且此类人群若服用硝酸甘油的效果可能不好甚至无效。
ALDH2是体内催化硝酸甘油生物转化的主要途径，其酯酶活性可以通过将硝酸甘油脱硝形成一氧化氮扩血管。
ALDH2第12个外显子发生一个碱基替换，即G突变为A，使其编码的蛋白质第504位氨基酸残基由谷氨酸转换为赖氨酸(Glu504Lys)，导致酶活性降低或缺失，使硝酸甘油无法产生一氧化氮，难以发挥药效。
rs671G突变为A对应的基因型分别为ALDH2*1/1，ALDH2*1/2，ALDH2*2/2。
突变型酶Lys504对硝酸甘油的催化活性较野生型Glu504严重下降，ALDH2*2/2 是ALDH2*1/1活性的 6–7%，ALDH2*1/2 是ALDH2*1/1活性的 8–15%。
在亚洲人群中，30%-50%的个体都携带有ALDH2*2突变。
因此，今后医生在临床使用硝酸甘油的过程中，建议先检测病人的ALDH2基因型，减少用药无效导致的意外死亡。
图1：冠心病示意图图2：ALDH2*2服药无效率占42.4% ，ALDH2*1携带者仅仅14.9%5 温馨提示：如果您有ALDH2基因突变，硝酸甘油对您无效，您需要改服其他药物，方案如下：硝酸异山梨酯（消心痛）舌下含服，或交替使用中成药麝香保心丸、速效救心丸或复方丹滴丸舌下含化。
如为了预防心绞痛发作，还可交替选用硝酸异山梨酯缓释胶囊（长效异乐定）每次1粒（50mg），一日一次口服。
硝酸甘油软膏的无菌检查方法学验证
硝酸甘油软膏的无菌检查方法学验证檀巧婷;严佳;钟桂香;宋洪涛【摘要】目的：建立硝酸甘油软膏的无菌检查方法，并对方法进行验证。
方法取预热至45℃的供试品10支（15 g／支），每支称取1 g ，加至含溶化的司盘80、聚山梨酯80无菌混合物和无菌玻璃珠的锥形瓶中，振摇混匀后，加入45℃的pH7．0无菌氯化钠-蛋白胨水缓冲液至100ml，使供试品充分乳化。
按薄膜过滤法，细菌、真菌每膜用300mlpH7．0氯化钠-蛋白胨缓冲液冲洗，消除抑菌活性。
结果经方法验证，硝酸甘油软膏供试品组、阴性对照组均无菌生长，试验组各滤器中试验菌与相应对照组比较均生长良好，说明供试品在该检验量和检验条件下无抑菌作用或其抑菌作用可以忽略不计。
结论薄膜过滤法有效可行，可用于硝酸甘油软膏的无菌检查。
%Objective To establish and validate a method of sterility test for nitroglycerin ointment and validate this method .Methods Ten nitroglycerin ointments of 1 g were preheated oven to 45 ℃ forsample ,and added to conical flask which containing melted span80 ,polysorbate 80 sterile mixture and sterile glass beads ,and were shake after mixing ,the sample fully emulsified by adding to 100 ml 45 ℃ pH 7 .0 sterile sodium chloride-peptone water buffer .According to the method of mem-brane filtration ,bacteria and fungus in each membrane with 300 ml pH 7 .0 sterile sodium chloride-peptone water buffer flush , the bacteriostatic activity was eliminated .Results By the methodvalidation ,nitroglycerin ointment sample group ,negative control group were sterile growth ,and test group in each filter of the test bacteria compared with control groups were growing well ,so the samples had noinhibitory effect or the antimicrobial effect would not take intoaccount .Conclusion Membrane fil-tration was reliable ,which could be used for sterility test for nitroglycerin ointment .【期刊名称】《药学实践杂志》【年(卷),期】2015(000)003【总页数】2页(P253-254)【关键词】硝酸甘油软膏;无菌检查;方法学验证【作者】檀巧婷;严佳;钟桂香;宋洪涛【作者单位】南京军区福州总医院药学科，福建福州350025;南京军区福州总医院药学科，福建福州350025;南京军区福州总医院药学科，福建福州350025;南京军区福州总医院药学科，福建福州350025【正文语种】中文【中图分类】R943硝酸甘油软膏主要成分为硝酸甘油，能直接松弛平滑肌，对胆碱能及肾上腺素能神经支配的平滑肌均有作用，以松弛血管平滑肌作用最强，尤其是小血管平滑肌。
药物基因检测位点及意义
病，高血压、脑卒中、偏头痛、痴 呆、动脉硬化、静脉血栓、精神疾
病，胎儿发育异常等。
01CYP2C19*2(G>A) 细胞色素氧化酶 2C19*2 型，代谢酶
02CYP2C19*3(G>A) 细胞色素氧化酶 2C19*3 型，代谢酶
1、 治疗胃食管反流、胃溃疡、根 除 H.pylori 等，PM 、IM 疗效好；
胰岛素 霉酚酸酯 他克莫司 环孢素 A
126IRS1(C>T) 胰岛素受体底物 1，靶点
T 等位基因者，胰岛素抵抗 检测胰岛素抵抗
85IMPDH2(7766A>G) 肌苷 5'-单磷酸脱氢酶 2，靶点 （用免疫抑制剂，需测）
98UGT1A8*2(518C>G) UDP 葡萄糖醛酸转移酶 1家族，多 肽 A8 的 *2 型，代谢酶 （脏器移植患者，可选择性检测） 94TNF- α (308G>A) 肿瘤坏死因子基因 308位点，药物 效应基因 （脏器移植患者，选择检测）
硝酸甘油注射液含量检验方法验证(++定量限)
验证方案编号：Z-V-AQ004-03硝酸甘油注射液含量检验方法验证方案目录1、起草、审核与批准 (2)2、目的 (2)3、范围 (2)4、职责 (2)5、概述 (3)6、执行标准和规范 (3)7、验证前的支持性确认 (3)8、验证内容 (5)9、数据分析 (9)10、偏差 (9)11、确认结果评定与结论 (9)12、再验证周期 (9)1、起草、审核与批准：所属部门职务签名日期起草年月日审核年月日审核年月日批准年月日2、目的：硝酸甘油注射液在产品生产过程中，需用高效液相色谱法测定其含量，为确定其对含量测定检验方法的适用性，特制定本验证方案。
3、范围：本方案适用于硝酸甘油注射液含量检验方法的验证。
4、职责：组长姓名职务/职称部门职责QC主管质量检验室1.负责组织起草确认方案。
2.负责协调、组织确认工作。
成员经理质量管理部1.负责确认方案的审核和监督。
2.负责确认方案的审核与批准。
主管质量管理部1.负责确认方案、报告的审核。
2.负责起草确认合格证书。
主管设备工程部1.负责仪器仪表均已校准合格，且在有效期内。
2.执行安装、运行和性能确认。
确认专员质量管理部1.负责相关确认项目的测试。
2.保证测试数据的真实性。
确认专员质量管理部1.负责相关确认项目的测试。
2.保证测试数据的真实性。
5、概述：高效液相色谱法(High Performance Liquid Chromatography，HPLC)系采用高压输液泵将流动相泵入到装有填充剂的色谱柱，对供试品进行分离测定的色谱方法。
注入的供试品，由流动相带入注内，各组分在柱内被分离，并依次进入检测器，由积分仪或数据处理系统记录色谱图并进行数据处理，得到测定结果。
由于应用了各种特性的微粒填料和加压的液体流动相，本法具有分离性能高、分析速度快的特点。
硝酸甘油注射液的质量标准中规定，在产品生产过程半成品和成品检验，需用高效液相色谱法测定其含量。
6、执行标准与规范：本方案以《LC-20A高效液相色谱仪标准操作规程》、《PC-2001高效液相色谱仪标准操作规程》、《硝酸甘油注射液质量标准》为依据，制定了硝酸甘油注射液验证方案。
市售硝酸甘油片及注射液的有关物质考察
市售硝酸甘油片及注射液的有关物质考察郝桂明;华莲;王卫;唐素芳【期刊名称】《天津药学》【年(卷),期】2009(021)002【摘要】目的:建立反相高效液相色谱法(RP-HPLC)测定硝酸甘油片及注射液有关物质的方法.方法:采用DikmaDiamonsilTM C18(250 mm×4.6 mm,5 μm)色谱柱,乙腈-水(50:50)为流动相,流速1 ml/min,检测波长210 nm,柱温40 ℃.结果:硝酸甘油在0.125～6.25 μg/ml浓度范围内呈良好的线性关系(r=0.999 6,n=6),精密度试验RSD为0.5%(n=5),最低检出量为0.5 ng.结论:该方法简便、灵敏、准确,能满足硝酸甘油片及注射液质量控制的要求.【总页数】3页(P1-3)【作者】郝桂明;华莲;王卫;唐素芳【作者单位】天津市药品检验所,天津,300070;天津市药品检验所,天津,300070;天津市药品检验所,天津,300070;天津市药品检验所,天津,300070【正文语种】中文【中图分类】R927.11【相关文献】1.滁州市卷烟品牌培育的环境考察——以滁州市卷烟消费者和零售客户的调研为例[J], 李晓春;孙敬国2.注射用阿莫西林钠克拉维酸钾在0.9％氯化钠注射液中有关物质的考察 [J], 张红梅; 王桂英; 魏永涛3.注射用阿莫西林钠克拉维酸钾在0.9%氯化钠注射液中有关物质的考察 [J], 张红梅; 王桂英; 魏永涛4.50批市售中药材中汞含量考察及结果分析 [J], 叶静;马长宏;赵龙山5.羟基喜树碱脂自制质体注射液与市售注射液家兔体内药代动力学行为的比较 [J], 黄毅;刘松青;林彩;穆海川;王昆;周桃莉因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
硝酸甘油体外实验及其耐受机制探讨
硝酸甘油体外实验及其耐受机制探讨叶志彬;甘丽卿;魏文树【期刊名称】《海峡药学》【年(卷),期】2011(023)004【摘要】目的观察体外给药葛根素,谷胱甘肽和硝酸甘油合用对NTG耐受性的影响,探讨O1/2水平与硝酸甘油耐药性的关系.方法将实验兔取出胸主动脉环,处理后分为正常对照(NC)组,峭酸甘油(NTG)组,研酸甘油+葛根素(NTG+Pur)组.硝酸甘油+谷胱甘肽(NTG + GSH)组.造模后进行硝酸甘油的量效关来,及测定胸主动环中丙二醛(MDA)水平和超乳化物歧化峰(SOD)活力.结果持续浸泡NTG90min后,NTG 组,NTG+GSH组及NTG+Pur组对NTG均产生了耐受,然而Pur及GSH对NTG 耐受的预防没有显芳效果.浸泡NTG组的主动脉环中MDA含量升高,SOD活力降低.结论体外浸泡NTG90min血管环产生耐受,Pur,GSH分别与NTG合用,对NTG 受的预防没有足著作用.【总页数】4页(P31-34)【作者】叶志彬;甘丽卿;魏文树【作者单位】福建省永春县医院,永春,362600;福建省永春县中医院,永春,362600;福州总医院药理科,福州,350001【正文语种】中文【中图分类】R969.4【相关文献】1.鱼肝油酸钠治疗肝癌的实验研究及其机制探讨--体外细胞培养及经皮瘤内注射实验 [J], 张武;崔立刚;王金锐2.硝酸甘油耐受性机制探讨及卡维地洛的预防作用 [J], 魏文树;盖晓波;魏炜明;曾昭全;刘锡钧3.维生素C对实验兔硝酸甘油耐受性影响的研究 [J], 李涛;谭安雄;封芬;李明娟;贺印旎4.超氧阴离子清除剂对家兔硝酸甘油耐受性影响的实验研究 [J], 李涛;谭安雄;封芬;李明娟;贺印旎5.维生素C和硝酸甘油合用对硝酸甘油耐受性的影响 [J], 崔志敏;王三宝因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
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硝酸甘油疗效基因检测：ALDH2基因多态性
硝酸甘油是治疗心绞痛的一线药物，一般来说在舌下含服5-10分钟之内症状缓解。
但
中国汉族人含服硝酸甘油无效比例高达25%以上。
这主要是由于线粒体乙醛脱氢酶（ALDH2）基因突变而引起，对于携带该基因有突变的个体不应该把硝酸甘油当做救命药品。
因此通过检测ALDH2的基因型，可预知硝酸甘油的疗效。
另外，饮酒脸红的人也是因为此酶活性的降低或缺失，不能将酒精充分代谢，导致乙醛在肝脏内大量累积，引起酒精中毒，并且此类人群若服用硝酸甘油的效果可能不好甚至无效。
ALDH2是体内催化硝酸甘油生物转化的主要途径，其酯酶活性可以通过将硝酸甘油脱硝形成一氧化氮扩血管。
ALDH2第12个外显子发生一个碱基替换，即G突变为A，使其编码的蛋白质第504位氨基酸残基由谷氨酸转换为赖氨酸(Glu504Lys)，导致酶活性降低或
缺失，使硝酸甘油无法产生一氧化氮，难以发挥药效。
rs671G突变为A对应的基因型分
别为ALDH2*1/1，ALDH2*1/2，ALDH2*2/2。
突变型酶Lys504对硝酸甘油的催化活性较野生型Glu504严重下降，ALDH2*2/2 是ALDH2*1/1活性的 6–7%，ALDH2*1/2 是ALDH2*1/1
活性的 8–15%。
在亚洲人群中，30%-50%的个体都携带有ALDH2*2突变。
因此，今后医生在临床使用硝酸甘油的过程中，建议先检测病人的ALDH2基因型，减少用药无效导致的意外死亡。
图1：冠心病示意图
图2：ALDH2*2服药无效率占42.4% ，ALDH2*1携带者仅仅14.9%
5 温馨提示：
如果您有ALDH2基因突变，硝酸甘油对您无效，您需要改服其他药物，方案如下：
硝酸异山梨酯（消心痛）舌下含服，或交替使用中成药麝香保心丸、速效救心丸或复方丹滴丸舌下含化。
如为了预防心绞痛发作，还可交替选用硝酸异山梨酯缓释胶囊（长效异乐定）每次1粒（50mg），一日一次口服。
也可用单硝酸异山梨酯（异乐定、新亚丹消），每次1片（20mg），一日1-2次。
对冠脉痉挛引起的心绞痛有效，但心动过缓者慎用。
对心率较快、血压偏高、心绞痛发作预防，也可选用β-受体阻滞药，如美托洛尔（倍他乐克），每次12.5mg，一日两次。
6 采样要求：
使用EDTA抗凝管采集静脉血4-6ml，采集时严格按标准静脉采集规程。
参考文献：
1.Yifeng Li, Dandan Zhang.J Clin Invest. Feb 1, 2006; 116(2): 506–511.
2.赵吉,孙爱军.中国分子心脏病学杂志,2010.92-97.
3. Mackenzie IS. Arteriosclerosis Thrombosis and Vasoular Biology,2005.1891-1895.。