高密度脂蛋白测定

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高密度脂蛋白胆固醇检测作业指导书

高密度脂蛋白胆固醇检测作业指导书1 检验目的规范高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）检测试验，确保检测结果准确性和重复性。

2 测定方法直接酶法。

3 检测原理第一反应中，样本与试剂中的聚阴离子及聚离子反应，在表面活性剂的作用下于脂蛋白周围形成稳定的保护层。

第二反应中，另一表面活性剂迅速释放HDL，并在酶作用下单一催化HDL-CHOL，与4-氨基安替比林和酚发生显色反应，显色的深浅与血清中HDL-CHOL含量成正比。

4 样本血清、肝素或EDTA抗凝血浆，处理方法见生化标本采集程序。

5 仪器和试剂5.1 仪器：美国贝克曼-库尔特DXC800、AU5811全自动生化仪、迈瑞BS800M生化分析仪。

5.2 试剂：由武汉元景商贸公司提供原装贝克曼-库尔特试剂及迈瑞公司提供的生化试剂（详见试剂说明书），超过失效期的试剂不能使用。

5.3 校准物：Rodan混合校准品，符合WHO标准，贮存、准备严格遵照其说明书。

5.4 质控物：Rodan正常值及病理值质控品，符合WHO 标准，贮存、准备严格遵照说明书。

6 校准6.1 仪器校准：每年由该仪器维修工程师参照厂方的技术规范对仪器进行一次校准。

6.2 项目校准：试剂盒在仪器上放置稳定期后；试剂批号更换后；由质控结果随时决定。

7 操作步骤上机操作，操作程序、质量控制程序见相应生化仪操作程序。

8 参考范围1.1～1.6mmol/L。

9 警告/危急值未规定。

10 性能指标10.1 线形上限：3.9mmol/L。

10.2 精密度：≤5%。

10.3 准确度:不准确度≤10%。

11 干扰因素及变异的潜在来源11.1.溶血对本法有干扰作用，且避免反复冻融。

11.2.血红蛋白（9.2g/L）,胆红素(116µmol/L)均不影响结果。

12 临床意义HDL是一种抗动脉硬化的脂蛋白,是冠心病的保护因素,冠心病的发病率与血清HDL水平呈负相关,HDL-C低于0.9 mmol/L是冠心病的危险因素,其增高被认为是冠心病的“负”危险因素。

高密度脂蛋白检验方法学

高密度脂蛋白检验方法学
本文介绍了高密度脂蛋白 (HDL-C) 的检验方法学，包括检验原理、标本采集、检验方法、结果分析等内容。

一、检验原理
高密度脂蛋白 (HDL-C) 是一种抗动脉粥样硬化的脂蛋白，其主
要功能是将血管内的胆固醇转运至肝脏代谢。

HDL-C 水平的升高能够降低冠心病的风险。

因此，HDL-C 的检测在临床诊断和治疗中具有重要的意义。

二、标本采集
HDL-C 的检测需要采集空腹血清标本。

采血前应避免摄入高脂肪、高胆固醇食物，保持空腹状态 12 小时以上。

采血时需采用血清标本，避免使用全血标本。

三、检验方法
HDL-C 的检测方法主要有两种：酶法和化学法。

1. 酶法
酶法是利用 HDL 中的胆固醇酯转移酶 (CETP) 将 HDL-C 中的
胆固醇酯转移至低密度脂蛋白 (LDL-C) 中，通过测定 LDL-C 的胆固醇含量来计算 HDL-C 的水平。

该方法操作简便，结果可靠，是临床
常规检测方法。

2. 化学法
化学法是利用 HDL-C 中胆固醇酯的特性，通过化学反应将其转化为胆固醇，然后测定胆固醇的含量来计算 HDL-C 的水平。

该方法操作复杂，结果稳定性较差，现已逐渐被酶法取代。

四、结果分析
HDL-C 的正常参考范围因实验室和检测方法而异，一般参考范围为 1.0~1.5mmol/L。

HDL-C 水平升高可降低冠心病的风险，降低程度与 HDL-C 水平的升高程度呈正相关。

均相酶法测定高密度脂蛋白（HDL—C）的方法评价

均相酶法测定高密度脂蛋白（HDL—C）的方法评价青海医药杂志2001年第3l卷第7期均相酶法测定高密度脂蛋白(HDL—C)的方法评价山东省即墨市人民医院(266200)扬旭平流行病学研究已确认I-IDL—c浓度与冠心病(cHD)之间存在明确的关系,即I-iI3L—c浓度越低,则CHD危险度越高.目前临床上测定HDI一C方法主要有3类:超速离心法,电泳法,沉淀法,其中以沉淀法为临床常规使用.德国BM公司研究开发的均相酶法HDL—C试剂盒,无需沉淀分离,可直接测定血清中的HDI一c,方法简便,易于自动化.材料与方法1材料1.1仪器德国BM公司SUPERZ818全自动生化分析仪.1.2试剂HDL—c(均相酶法)试剂盒,BM公司产品.甘油三酯试剂盒为BM公司产品.HDI一c(磷钨酸镁沉淀法)试剂盒,中生公司产品.2方法2.1HDL—C直接测定法(以F简称本法)参数如下:两点终点法,温度37"C,主波长597nm,副波长697nm,样品用量5ul,RT试剂225ul,反应5分钟,加RII试剂75ul,反应5分钟.MISTR4mOs,MISTR4w20s,M2S,rR9m20s,M2STP9m40s.2.2沉淀法参照中生公司Hf3L—C试剂盒说明书进行.结果1反应进程曲线将生理盐水,标准液及样品分别上机测定,然后打印反应进程图谱.结果表明:生理盐水空白加RI和RII后光度接近0, 无甚变化,呈一条平坦的直线.标准液和样品反应过程相同,加人RII试剂后显色急速增加, 至20点时基本达到平衡.高脂标本前5分钟表现为初始吸光度明显增加(与盐水空白比较) 且不稳定,后5分钟曲线变化基本正常,与非高脂标本基本一致,因此不影响本法测定.452线性关系取HDI一C浓度为2.98mmol/L的样本,用生理盐水作梯度稀释,使含血清1]5, 2/5,3/5,4[5及原血清,直接上机测定,结果显示在298mmol/L范围内线性良好.3回收率取HDI一C浓度为0.97tr~nol/L和1.78nmlol/L的血清样本2份,分别以1:2,2:l和3:1混匀,作回收实验.回收率在98培%～102.6%之间.回归方程(x为浓度,Y为吸光度)为Y=00016+0.0835X.r=09999,P<001.4精密度4.1批内变异取HDL—C浓度加75rm~l/l, 173mmo1]L和1.89mmo1]I.的样品各一份.用本法同时测定10次,CV分别为!.85%,l02%和0.87%.4.2批间变异取低,中,高浓度HDL—C混合血清标本各一份,I-1DL—C分别为0.81nm~ol/L,1.35mmol/L和1.97mmol/L,置4"C冰箱保存,每天测定一次,连续1n天,批间CV分别为388%,321%和3O7%.5对比实验取无黄疸,无溶血标本lO份,外观明显脂血l0份(TG在856rrm~ol/L～19.40mmol/L)分别以本法和离心沉淀测定HDL—C,高脂标本沉淀后上清液均呈混浊或部分沉淀浮在表面,此时按要求用生理盐水1:1稀释后重复沉淀步骤,CHO测定结果乘以2,结果见表1.表1对比实验结果《±.retool/L】每组2种方法测定结果进行配对￡检验结果均为P>O.05,差异无显着性.讨论硫酸葡聚糖镁(DS—M)沉淀法测定血清HDL—C是美国Wamiek…提出的推荐方法+现已为临床广泛使用,但该法应用中常常遇到的难题是VLDL沉淀不完全,以致沉淀后上层液混浊.高德路1虽然改进了Warnick推荐方法+在TG为8.10mmol/L时,标本沉淀后,上清仍会出现混浊,因此仍需用生理盐水稀释,重新沉淀.操作费时,不能自动化.本法则不需沉淀离心,且不受高TG的干扰影响,我们的实青海医药杂志2001年第3l卷第7期验证明:即使血中TG浓度达19.70nmr~I/L,本法仍能准确的测定HDL—C.在有条件的医院可以推广使用.参考文献lWarnickGR,Bende~nJ,,41betsJJ.Dextramsulfate—Mgprecitationprceedrueforquanfirationnfhigh denaitgiipogroleinchoiotemipropolsedseiemedmeth- od.CiinCherrt,1982,28:13792高德路,谢声扬,李紫阳,等.硫酸葡聚糖500一镁法洳定血清高密度脂蛋白胆固醇.中华医学检验杂志.1996.】9:22冠心病与血清胆红素浓度关系的分析西宁铁路医院c810007)孙宇焱冠心病在我国的发病率近年逐渐上升,通常认为它是一种多因素参与发病过程的疾病,高血脂,高血压,糖尿病等危险目素已日益受到人们重视.近年来有人通过流行病学调查,认为血清胆红素浓度降低是冠状动脉性疾病的独立因素.现对40倒冠心病患者和正常对照者的血清胆红素浓度进行对比,将它们之间的关系分析如下.对象与方法l研究对象4f】例冠心病患者均为我院心内科住院患者,其中男性3O例,女性l0例,年龄为45_岁～74 _岁,平均年龄(6O±2)岁.正常对照者来自本院同期健康体检者,男性30例,女性l0倒,年龄为45岁～75 岁,平均年龄(59±3)岁.全部病倒均排除胆道系统疾病,重度心衰和血液系统疾病.2方法全部病例均于清晨空腹时采肘静脉血,采用重氮法,日本7020全自动生化分析仪测定.正常血清总胆红素值为5.1/mao1]L--20.0r.nn~l/L,直接胆红素为(0--7.5)umo~t.3统计方法采用X-±s表示,比较用f检验.结果结果见表1,两组比较有显着统计学差异.讨论低密度脂蛋白(LDL)是促进动脉粥样硬化的关键表l冠心病组与正常对照组血清胆红象比较【i±,L)步骤.氧化的LDL通过对血管内皮细胞的毒性作用渗^内膜,在氧自由基的作用下,lJI1L中脂肪酸发生氧化反应使脂质过氧化,促进动脉粥样硬化,导致冠心病. 而胆红素是人体内的一种天然抗氧化剂,通过与清蛋白为主的结合形式阻止IJI]L,产生氧自由基化,保护脂质和脂蛋白不被氧化.本例研究表明冠心病组血清胆红素明显低于正常对照者(P<0.01).说明血清胆红素的浓度与冠心病的发病率呈负相关.临床上可通过血清胆红素预测冠心病,同时,在冠心病的治疗中应用抗氧化剂治疗抑制LDL在体内的氧化,可能对冠心病的预防及预后有重要的意义.参考文献1陈兴璋低血清胆红素与冠心病易患因素的关系国外医学心血管疾病分册.1995,22(1):46。

高密度脂蛋白胆固醇测定标准操作规程

高密度脂蛋白胆固醇测定标准操作规程(总6页)-CAL-FENGHAI.-(YICAI)-Company One1-CAL-本页仅作为文档封面，使用请直接删除血清高密度脂蛋白胆固醇测定标准操作规程1 检验申请单独检验项目申请：血清高密度脂蛋白胆固醇(缩写HDL-C)测定；组合项目申请：血脂测定。

临床医生根据需要提出检验申请。

2 标本采集与处理标本采集常规静脉采血约2 ml，不抗凝，置普通试管中。

或采用含分离胶的真空采血管。

检验申请单和血标本试管标上统一且唯一的标识符。

急诊标本采集后，在检验申请单上填写标本采集时间。

标本采集后与检验申请单一起及时运送至检验科。

专人负责标本的接收并记录标本的状态，对不合格标本予以拒收。

下列标本为不合格标本标本量不足：少于的全血标本，或少于的血清或血浆。

对反应吸光度有干扰的标本，包括严重溶血、严重浑浊的标本。

无法确认标本与申请单对应关系的。

其他如标识涂改、标本试管破裂等。

标本保存接收标本后在30min内将标本离心分离出血清。

标本保存时间：室温（15～25℃）下可稳定1天，普通冰箱中（2～8℃）稳定7天。

-20℃可保存数月；-70℃至少可保存半年；应避免标本反复冻溶。

为避免标本中水分挥发使血清浓缩，对保存时间超过1天的标本均加塞密闭或覆盖湿巾。

已完成测试的标本保持完整的识别号，置4～8℃冰箱内保存7天。

标本采集的注意事项采血前使受检者保持平静、松弛和空腹状态。

抽血前3天内避免高脂饮食，24小时内不饮酒，(1mg不建议采集抗凝血标本，如果必须使用血浆，推荐的抗凝剂是肝素。

EDTANa2／mL)抗凝抽血前最好停用影响血脂的药物（如调脂药、避孕药、某些降压药、激素等）数天或数周，否则应记录用药情况。

妊娠后期各项血脂都会增高，应在产后或终止哺乳后3个月查血才能反映基本血脂水平。

3 方法原理1.试剂1使血清中低密度脂蛋白和极低密度脂蛋白经化学反应被消除。

胆固醇酯酶胆固醇酯 + H2O -------------------- 胆固醇 + 脂肪酸胆固醇氧化酶胆固醇 + O2 ------------------------- 胆淄烯酮+ H2O2过氧化氢酶H2O2 ------------------ O2+H2O2.试剂2中的变性剂释放出高密度脂蛋白后，对HDL进行测量。

高密度脂蛋白检验方法学

高密度脂蛋白检验方法学概述高密度脂蛋白（High-density lipoprotein，HDL）是一种血液中的脂质颗粒，它起着运载和代谢胆固醇的重要作用。

HDL水平与心血管疾病的发生风险密切相关，因此对HDL进行检验是评估心血管健康状况的重要手段之一。

本文将介绍高密度脂蛋白检验的方法学，包括样本采集、常见检测方法及其原理、结果解读等内容。

样本采集高密度脂蛋白检验通常需要抽取静脉血样本进行分析。

样本采集前应告知患者相关注意事项，如空腹时间、停止服用某些药物等。

一般建议在早上空腹状态下进行采集。

采集步骤如下：1.患者应坐于舒适的位置。

2.清洁采血部位，通常选择患者的前臂内侧。

3.使用无菌针头抽取适量静脉血液。

4.用无菌棉球或纱布轻轻按压采血点，防止出血。

5.将血液转移到采血管中，并标记好样本信息。

常见检测方法及其原理加速凝胶电泳法加速凝胶电泳法是一种常用的高密度脂蛋白检测方法。

它基于电泳原理，通过对样本进行电泳分离，进而测定HDL的含量。

具体步骤如下：1.准备样品：将采集到的血液样本离心分离得到血清。

2.电泳分离：将样品施加在凝胶上，通电使得不同成分的蛋白质在凝胶中迁移。

3.固定染色：使用染色剂对凝胶上的蛋白质进行固定染色。

4.显影和测量：使用特定的显影试剂使染色的蛋白质显现出来，并通过光密度计或图像分析系统测量各带的光密度。

5.分析结果：根据HDL带的位置和光密度，判断HDL含量及其组成情况。

免疫浊度法免疫浊度法是另一种常用的高密度脂蛋白检测方法。

它基于免疫学原理，利用特异性抗体与HDL结合形成浊度反应，通过光密度测量来评估HDL的含量。

具体步骤如下：1.准备样品：将采集到的血液样本离心分离得到血清。

2.免疫反应：将特异性抗体与样品中的HDL结合，形成免疫复合物。

3.生成浊度：加入适量的试剂，使得免疫复合物沉淀形成浊度。

4.光密度测量：使用光密度计或图像分析系统测量样品中的光密度。

5.分析结果：根据光密度值，计算出HDL的含量。

检验科生化高密度脂蛋白胆固醇HDL测定的标准操作规程

高密度脂蛋白胆固醇测定的标准操作规程【目的】体外检测血清高密度脂蛋白胆固醇(HDL)含量。

【职责】1.实验室工作人员均应熟知并严格遵守本SOP，室负责人监督落实。

2.本SOP的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：室负责人、科主任。

【标本类型及实验前准备】1.受检者的准备病人空腹12h，不饮酒24h后采集血样。

体检对象抽血前应有两周的的正常状况记录。

注意有无应用影响测试项目的药物。

此外，对于体检者，采血的季节都应做相关记录，因为样本中各项目的含量有季节性变动，为了前后比较应在每年同一季节检验。

对于体检对象抽血前应有2周时间保持平时的饮食习惯，应嘱体检对象在抽血前24小时内不做剧烈运动。

2.静脉采血除非是卧床的病人，一般在采血时取坐位。

体位影响水分在血管内外的分布，会影响测试项目的浓度。

在采血前至少应静坐5分钟，一般从肘静脉取血，使用止血带的时间不超过1分钟，穿刺成功后立即松开止血带。

【仪器设备】东芝TBA-FX8全自动生化分析仪，低速离心机一、检测原理本试剂采用化学修饰酶法，其反应原理如下：CHER表面活性剂HDL-胆固醇^胆固醇+游离脂肪酸胆固醇+O2™D(化学修饰)胆甾烯酮+H2O22H 2O2 + 4-AA+TOOS+H 3+O POD红色苯醍色素+5H2OTOOS: N-己烷基-N-硫羟基-丙烷基-M-二甲苯胺钠盐在上述反应中，红色苯醍色素的生成量与样本中高密度脂蛋白胆固醇浓度成正比，通过在6nm处测定吸光度的变化值，即可测得样本中高密度脂蛋白胆固醇的浓度。

二、试剂1.试剂本科使用上海复星长征医学科学有限公司HDL-C试剂盒，为液体双试剂，各组分如下：试剂1（R1）TOOS0.3g/L过氧化物酶0.65KU/LMES 缓冲液0.05mol/L试剂2（R2）胆固醇氧化酶2.1KU/L胆固醇酯酶3KU/LMES 缓冲液0.05mmol/L4-氨基安替比林0.6g/L2.校准要求2.1校准品：使用与试剂配套使用的复星长征高低密度脂蛋白胆固醇校准品对测定进行校准。

三种高密度脂蛋白胆固醇检验方法的比较

三种高密度脂蛋白胆固醇检验方法的比较目的對比分析高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）的检验中聚阴离子多聚物/表面活性剂（PPD）法和PEG修饰酶/硫酸α-环糊精（PEGME）法及沉淀法的准确性和特异性。

方法分别将已知浓度为1.0～2.0、2.0～4.0 mmol/L的HDL-C、LDL-C在生化分析仪上进行测试，运用两点终点法对参数进行分析，主、辅波长分别为600、700 nm，在3 μl标本量中加入240 μl R1，288 s后读取吸光度A1，反应5 min后再将80 μl R2加入其中，600 s后读取吸光度A2。

依据参考品的HDL-C、LDL-C浓度值计算其含量。

结果PPD法试剂对HDL-C具有相对缓慢的作用，对LDL的非特异性反应较为显著，达到10%～20%；PEGME法试剂对HDL-C具有相对较快的作用，对LDL-C基本不具有非特异性反应，仅为5%以下。

HDL-C、LDL-C、Trig的正常值分别为1.1～1.7、1.7～2.9、0.4～1.8 mmol/L，PPD法的结果高于沉淀法7%～15%。

将参照设定为沉淀法结果，如果血清标本在正常胆红素浓度范围内，则PPD法测定结果就具有假性增高的表现，而如果血清标本胆红素浓度>20 μmol/L，则PPD法测定结果就具有明显降低的表现，达到参照值的60%；胆红素浓度变化极少干扰PEGME法测定结果。

将参照设定为沉淀法结果，PPD法测定结果受到三酰甘油的影响显著提升了20%以上，而三酰甘油浓度的提升使其进一步假性增高；PEGME法较少受到三酰甘油的影响。

两者均与三酰甘油浓度成负性关系。

PPD法的结果显著高于沉淀法（t=4.303，P ＜0.05）。

结论HDL-C的检验中PEGME法优于PPD法，临床实验室应谨慎应用PPD法，值得临床重视。

[Abstract]Objective To compare and analyze the accuracy and specificity of polyanionic polymer/surfactant （PPD）method and PEG-modified enzyme/sulfate α-cyclodextrin method （PEGME）and precipitation method in high-density lipoprotein cholesterol （HDL-C）inspection.Methods The known concentration 1.0 to 2.0，2.0 to 4.0 mmol/L of HDL-C，LDL-C were tested on biochemical analyzer，the parameters were analyzed by two point end method，the primary and secondary wavelength were 600 nm，700 nm，respectively，240 μl R1 were joint to 3 μl sample，288 s absorbance A1 volume was readed out，the reaction for 5 min before the 80 μl R2 added，600 s absorbance A2 after reading it.values were calculated its content according to the reference product of HDL-C，LDL-C concentration.Results PPD reagent had relatively slow effect on HDL-C，nonspecific response to LDL-C was up to 10% to 20%；PEGME reagent had relatively high effect on HDL-C，the LDL-C did not have a nonspecific response，only 5%.The normal values of HDL-C，LDL-C and 1.1 to 1.7 mmol/L were respectively Trig，1.7 to 2.9，0.4 to 1.8，and the result of PPD method was higher than that of precipitation method 7% to 15%.The reference set for precipitation results，if the serum samples in normal bilirubin concentration range，so the test results of the PPD method with false increase performance，and if the serum bilirubin concentration of >20 mol/L，then PPD assay results had significantly lower performance，reached the reference value of 60%；the change of bilirubin concentration little interference PEGME determination results.The reference set for precipitation results，PPD determination results were influnced by the triglyceride，and was significantly improved more than 20%，while raising the concentration of triglyceride increased further pseudo PEGME method；less triglyceride effect.The two were negatively correlated with triglyceride concentration.The result of PPD method was significantly higher than that of precipitation method （t=4.303，P＜0.05）.Conclusion The PEGME method is better than PPD method in HDL-C inspection，the clinical laboratory should prudent application of PPD method，so is worthy of the clinical′s attention.[Key words]High density protein cholesterol；Precipitation method；PPD method；PEGME method在临床陆续普及高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）直接测定法后，沉淀法已经发展成为临床采用的重要比较方法[1]。

血清高密度脂蛋白HDL测定

血清高密度脂蛋白HDL测定1 检验目的指导本室工作人员规范操作本检测项目，确保检测结果的准确。

2 实验原理表面活性剂HDL ————————→ HDL（可溶）胆固醇酯化酶HDL-胆固醇————————→胆固酮 + H2O2胆固醇氧化酶PODH2O2 + DSBMT + 4-氨基安替比林—————→红紫色色素3 标本：3.1 病人准备:应禁食12小时抽血.3.2 类型：血清3.3 标本存放留取标本后请尽快分离血清。

在冰箱保存的条件下（2～8℃）稳定3天，-20℃保存至少可以稳定3个月。

3.4 标本运输室温条件下运输3.5 标本拒收标准细菌污染的不能做测定。

4 实验材料4.1 试剂：宁波美康生物科技股份有限公司血清高密度脂蛋白胆固醇(HDL)测定试剂盒（浙械注准20142400141）4.1.1 试剂组成试剂1（R1）：哌嗪-1,4-双(2-乙磺酸) 缓冲液pH 7.0 50mmol/L胆固醇脂酶（CE） 800U/L胆固醇氧化酶（CO） 400U/L过氧化氢酶 20KU/LTriton X-100 2ml/L 试剂2（R2）：哌嗪-1,4-双(2-乙磺酸) 缓冲液pH 7.0 50mmol/L过氧化物酶（POD） 1000U/L4-氨基安替比林（4-APP） 1.0mmol/LN,N-双(4-磺丁基)-3-甲基苯胺（DSBMT）0.5mmol/L4.1.2 试剂准备：试剂为即用式。

4.1.3 试剂稳定性与贮存：试剂保存于2～8℃，若无污染，可稳定至失效期。

试剂不可冰冻。

试剂可避光保存可稳定12个月；试剂开口稳定1个月。

4.1.4 变质指示：当试剂有看得见的微生物生长，有浊度，或者未开盖的液体有沉淀时，表明试剂已变质，不能继续使用。

4.1.5 注意事项：试剂中含叠氮钠（0.95g/L）为防腐剂。

不可入口！避免接触皮肤及粘膜。

应采取必要的预防措施使用试剂4.2 校准品：建议使用宁波美康生物科技有限公司提供的脂类标准品进行全点校准操作。

hdl-c测定的参考方法 -回复

hdl-c测定的参考方法-回复hdlc测定的参考方法Hdlc测定是一种衡量人体心血管系统健康状况的常见方法。

Hdlc（高密度脂蛋白胆固醇）是一种血液中的脂质分子，被认为是“好胆固醇”，能够清除动脉血管中的坏胆固醇，并对心血管疾病发展起到保护作用。

本文将详细介绍hdlc测定的参考方法和步骤。

第一步：准备实验材料和设备进行hdlc测定需要准备一些实验材料和设备，包括血液采集器、试剂盒、离心机、微量吸管、离心管、显微镜和计时器等。

确保所有材料和设备都是干净的，并遵守实验室安全操作规范。

第二步：准备被测血液样品在进行hdlc测定之前，需要采集被测者的血液样品。

使用血液采集器从被测者的指尖或静脉中采集约5毫升的血液样品，并将其转移到离心管中。

注意避免任何外部污染物进入血液样品，避免血液凝结。

第三步：离心分离血液成分将采集的血液样品放入离心机中进行离心分离。

通常在3000-5000转/分钟的速度下离心10-15分钟。

离心后，血液样品会分成三个部分：上层是血浆，中层是细胞元素，下层是血细胞。

第四步：提取血浆使用微量吸管将血浆从离心管中提取出来，转移到一个新的离心管中。

确保不混入任何细胞元素。

第五步：准备试剂和控制样品根据试剂盒说明书操作，准备好所需的试剂并制备合适浓度的控制样品。

控制样品中的胆固醇浓度已知，并用于校准测定。

第六步：进行反应取一定量的血浆样品和试剂，将其混合在一起，并按照说明书上的反应条件进行反应。

反应时间可以根据试剂盒不同而有所差异，一般为几分钟到几小时。

第七步：测定反应结果将反应后的样品放入显微镜中，观察是否有沉淀或颜色变化。

颜色的变化与胆固醇含量相关，深颜色表示较高的胆固醇含量。

同时，使用计时器记录反应时间。

第八步：测量样品吸光度使用显微镜测量样品的吸光度。

根据试剂盒中的标准曲线，将吸光度值与hdlc浓度进行定量关联。

标准曲线用于将吸光度与胆固醇浓度进行对应，从而计算出样品中的hdlc浓度。

高密度脂蛋白中胆固醇测定的原理

高密度脂蛋白中胆固醇测定的原理高密度脂蛋白（HDL）是一种血液中的脂蛋白，它被称为“好胆固醇”，因为它有助于清除动脉中的低密度脂蛋白（LDL）胆固醇，从而降低心血管疾病的风险。

因此，测定HDL中胆固醇的浓度对于评估心血管疾病的风险以及指导治疗非常重要。

测定HDL中胆固醇的原理主要基于两种方法：直接法和间接法。

直接法是通过分析样品中HDL颗粒中的胆固醇含量来测定HDL中胆固醇的浓度。

这种方法通常使用化学反应来测定胆固醇浓度，其中一种常用的方法是酶法。

在这种方法中，样品中的HDL颗粒被加入一种特定的试剂，该试剂能够与胆固醇反应生成一种可测定的化合物，如氧化胆固醇。

然后，通过测量产生的化合物的光吸收度或荧光强度来确定胆固醇的浓度。

这种方法的优点是准确性高，但需要专业的实验室设备和技术。

间接法是通过测量样品中总胆固醇和LDL胆固醇的浓度，然后计算出HDL胆固醇的浓度。

这种方法通常使用化学分析仪器，如自动生化分析仪，来测定总胆固醇和LDL胆固醇的浓度。

然后，通过减去LDL胆固醇的浓度和总胆固醇的浓度，得到HDL胆固醇的浓度。

这种方法的优点是简单易行，不需要专业实验室设备，适用于临床常规检测。

然而，这种方法的准确性可能会受到其他因素的影响，如血浆中的其他脂蛋白浓度等。

无论是直接法还是间接法，测定HDL中胆固醇的浓度都需要注意一些因素。

首先，样品的质量和处理过程对测定结果至关重要，因为血液中的脂质可以受到氧化和降解的影响。

因此，样品的收集和储存应遵循特定的操作规范，以确保测定结果的准确性和可重复性。

其次，某些药物和疾病状态可能会影响HDL中胆固醇的浓度，如胆固醇降低药物和肝疾病。

因此，在解释胆固醇浓度时，需要考虑这些因素的影响。

总之，测定HDL中胆固醇的浓度是评估心血管疾病风险的重要指标，可以通过直接法或间接法进行。

不同的方法有各自的优缺点，需要根据实际需要和可用资源进行选择。

无论采用何种方法，都需要注意样品的质量和处理过程，以及其他因素对测定结果的影响。

高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)定量测定标准操作程序

高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C ）定量测定标准操作程序1. 摘要本试剂盒适用于体外临床检验，用于测定人血清或血浆中HDL-C 的含量。

众多流行病学研究证实，血清中的高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C ）水平与冠心病的发生几率呈负相关，即HDL-C 是冠心病的负危险因素。

2. 适用范围程序适用于日立7600自动生化分析仪检测血清、血浆中高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C ）的浓度。

3. 职责使用日立7600自动生化分析仪进行测定高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C ）浓度的工作人员要严格按照本SOP 程序进行,室负责人监督管理；本SOP 的改动，可由任一使用本SOP 的工作人员提出，并报经生化室负责人、科主任签字批准生效。

4. 检测方法上海科华生物工程股份有限公司生产的高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C ）试剂盒采用的是酶法。

5. 原理上海科华生物工程股份有限公司生产的高密度脂蛋白胆固醇试剂盒（直接法）采用两步法测定：1. 用胆固醇酯酶、胆固醇氧化酶、过氧化氢酶去除低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C ）和极低密度脂蛋白胆固醇（VLDL-C ）。

具体反应如下：222222222O O H O H O H O +−−−→−+−−−−→−++−−−→−过氧化氢酶胆固醇氧化酶胆固醇酯酶胆甾烯酮胆固醇游离脂肪酸胆固醇胆固醇酯2．在溶液B 中含有特殊的表面活性剂，释放HDL-C ，然后测定，反应如下： O H HDAOS AA O H O H O O 2222222442+−−−→−+-++−−−−→−++−−−→−+醌类化合物胆甾烯酮胆固醇游离脂肪酸胆固醇胆固醇过氧化物酶胆固醇氧化酶胆固醇酯酶在600nm 处，醌类化合物颜色强度的增加与HDL-C 的含量成正比。

6. 仪器日立7600自动生化分析仪7.试剂7.1试剂来源：上海科华生物工程股份有限公司提供7.2试剂瓶内主要成分：Good’s缓冲液、HDAOS,胆固醇酯酶，胆固醇氧化酶，过氧化氢酶，4-AA，过氧化物酶，叠氮钠7.3试剂稳定性：试剂避光保存于2-8℃，若无污染，可稳定至失效期，本试剂有效期为12个月。

高密度脂蛋白测定实验报告

高密度脂蛋白测定实验报告高密度脂蛋白测定实验报告引言：高密度脂蛋白（High-Density Lipoprotein, HDL）是一种血浆中的脂蛋白，对人体健康十分重要。

本次实验旨在通过测定血液中HDL的浓度，了解其与心血管疾病的关系，并探讨一些影响HDL水平的因素。

实验方法：1. 实验材料准备：- 血液样本：从志愿者中采集新鲜全血样本，以避免血液成分的变化。

- 试剂盒：使用经过质量控制的HDL测定试剂盒，以确保测定结果的准确性。

- 实验仪器：使用自动生化分析仪进行测定。

2. 实验步骤：- 样本处理：将采集的全血样本离心，分离血浆，并将血浆保存在低温条件下，以防止HDL的降解。

- 试剂配置：按照试剂盒说明书的要求，准备好所需的试剂和标准品。

- 操作仪器：将标本和试剂按照仪器的操作要求装载，启动自动生化分析仪进行测定。

- 结果记录：记录测定结果，并进行数据分析。

实验结果：通过测定多个样本的HDL浓度，我们得到了如下结果：样本A：1.20 mmol/L样本B：1.05 mmol/L样本C：1.35 mmol/L样本D：0.95 mmol/L样本E：1.25 mmol/L数据分析：根据实验结果，我们可以得出以下结论：1. 样本C的HDL浓度最高，样本D的HDL浓度最低。

这表明不同个体之间HDL水平存在差异，可能受到遗传和生活方式等因素的影响。

2. 样本A、B和E的HDL浓度相对较高，可能与他们的饮食结构和运动习惯有关。

高纤维、低脂肪的饮食和适量的运动有助于提高HDL水平。

3. 样本D的HDL浓度较低，这可能是由于其生活习惯不良，如高脂肪、高糖的饮食和缺乏运动等。

讨论与启示：通过本次实验，我们深入了解了HDL的测定方法以及其与心血管疾病的关系。

HDL被认为是“好胆固醇”，其水平越高，心血管疾病的风险越低。

因此，保持适当的HDL水平对于预防心血管疾病非常重要。

此外，本次实验还启示我们以下几点：1. 饮食结构：合理的饮食结构对HDL水平有重要影响。

高密度脂蛋白指标

高密度脂蛋白指标高密度脂蛋白（HDL）是一种血液中的脂蛋白，被认为对心血管健康具有保护作用。

本文将从不同角度介绍高密度脂蛋白指标的相关知识。

一、高密度脂蛋白的定义和功能高密度脂蛋白是一种复合脂质，包括磷脂、胆固醇和蛋白质等物质。

它的主要功能是从体内组织和血管壁中收集多余的胆固醇，然后将其转运至肝脏进行代谢和排泄。

因此，高密度脂蛋白被视为“好胆固醇”，与低密度脂蛋白（LDL）形成鲜明对比。

二、高密度脂蛋白的测量指标高密度脂蛋白的测量指标主要包括总胆固醇（TC）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）以及TC/HDL-C比值。

其中，HDL-C是反映高密度脂蛋白水平的重要指标，其水平越高，心血管风险越低。

三、高密度脂蛋白与心血管健康的关系高密度脂蛋白具有多种对心血管健康有益的作用。

首先，高密度脂蛋白可以从动脉壁中清除多余的胆固醇，防止动脉粥样硬化的形成。

其次，高密度脂蛋白还具有抗炎和抗氧化作用，可以减少血管内皮损伤和炎症反应，降低心血管疾病的风险。

此外，高密度脂蛋白还能促进血液中的脂质代谢，维持血液中胆固醇的平衡。

四、如何提高高密度脂蛋白水平提高高密度脂蛋白水平对于心血管健康至关重要。

以下是一些提高高密度脂蛋白水平的方法：1. 锻炼身体：适量的有氧运动可以提高高密度脂蛋白水平，如快走、慢跑、游泳等。

2. 戒烟限酒：吸烟和酗酒会降低高密度脂蛋白水平，因此应尽量戒烟限酒。

3. 合理饮食：选择富含健康脂肪的食物，如鱼类、坚果、橄榄油等，可以提高高密度脂蛋白水平。

4. 控制体重：过重和肥胖会降低高密度脂蛋白水平，因此要保持适当的体重。

5. 药物治疗：在一些情况下，医生会根据具体情况开具药物来提高高密度脂蛋白水平。

五、高密度脂蛋白的参考范围高密度脂蛋白的正常参考范围因性别和年龄而异。

一般来说，成年男性的高密度脂蛋白水平应在40-60毫克/分升，而成年女性的高密度脂蛋白水平应在50-70毫克/分升。

六、高密度脂蛋白与其他指标的关系高密度脂蛋白与其他指标，如低密度脂蛋白胆固醇、甘油三酯等，密切相关。

高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)的临床检测

高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)的临床检测摘要】目的探讨高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)的临床检测的方法及其意义。

结论 HDL的浓度和冠心病发生率之间成负相关，它可以促进和加速胆固醇从细胞和血管壁清除以及将它们运送到肝脏。

HDL是一种和总胆固醇浓度无关的危险因素，而且有很高的预期价值。

HDL胆固醇浓度的测定对冠心病危险的评估是必需的。

HDL胆固醇的浓度受吸烟、锻炼、药物、性别和年龄的影响。

【关键词】高密度脂蛋白胆固醇临床检测意义高密度脂蛋白(HDL)是血清中颗粒数最多而且很不均一的一组脂蛋白，按其密度高低主要分为HDL2与HDL3两个亚组分，临床一般只测定总HDL，也可以分别测定其亚类。

因为HDL组成中含蛋白质与脂质各半，脂质中主要是胆固醇与磷脂，磷脂测定比较麻烦，通常以测定胆固醇含量(HDL-C)代表HDL水平。

HDL-C测定参考方法为用超速离心分离HDL，然后用化学法(ALBK法)或酶法测定其胆固醇含量。

20世纪70年代出现不少多阴离子沉淀法，称直接测定法，有肝素Mn法、磷钨酸(PTA)-镁离子法、硫酸葡聚糖(DS)-镁离子法和聚乙二醇(PEG)6 000法等。

此类方法操作相对简便，被临床实验室用作常规测定。

其中硫酸葡聚糖(DS)-镁离子法和聚乙二醇(PEG)6 000法应用最为广泛。

1临床资料1.1一般资料选用本院住院门诊病人的样品，早晨空腹取血，自行凝固后离心分离血清，当天或1周内完成(标本－20℃保存)。

现将检验分析报告如下。

2方法2.1磷钨酸-镁沉淀法2.1.1．原理血清HDL不含apoB，临床检验中大都用大分子多阴离子化合物与两价阳离子沉淀含apoB的脂蛋白[包括LDL、 VLDL、IJP(a)]，本法中用磷钨酸与镁离子作沉淀剂，其上清液中只含HDL，其胆固醇含量用酶法测定(同酶法测TC)。

2.1.2．试剂(1)沉淀剂：称取PTA 0．44 g与MgCl2?6H2O 1．10 g(均用分析纯试剂)，溶于80 ml蒸馏水中，以1 mol／L NaOH液校pH至6．15(约用1．3ml)，然后以蒸馏水加至100 ml，此试剂至少稳定1年。

3种高密度脂蛋白胆固醇检测方法的比较

3种高密度脂蛋白胆固醇检测方法的比较郭林潘逸茹v熊菁孙仁勇v v(上海医科大学肿瘤医院检验科上海200032;v华东医院检验科上海200040;v v上海复旦张江生物医学有限公司上海201203)近年来国内外对H DL-C的测定方法均进行了广泛的研究[1~3]。

国内临床上普遍所用的是磷钨酸钠-镁沉淀法或聚乙二醇沉淀法,该方法准确度、稳定性均较好,试剂价格低廉,但操作步骤多,在血清中需加入沉淀剂,使血清LDL和VLDL发生沉淀,然后再用酶法测定血清中的HDL-C。

而酶修饰法、多聚阴离子遮蔽法等避免了沉淀步骤,样品无需处理,可以直接测定血清中的H DL-C,这些方法简便了实验室的常规工作[4~6]。

为了对新的HDL-C方法进行临床评价,我们对磷钨酸钠-镁沉淀法(PAT/MgCl2)、多聚阴离子遮蔽法(PPD)和酶修饰法(PGME)进行了比较,对其准确性、稳定性、线性范围、特异性进行了分析,并对此3种方法对甘油三酯、胆红素和血红蛋白的干扰影响进行了测评。

材料和方法样品临床常规检测血清标本。

血标本在室温中静置1~2h,在室温下离心10min(1500r/ min),收集血清。

试剂总胆固醇和甘油三酯测定试剂、HDL-C磷钨酸沉淀法试剂,由上海复旦张江生物医药有限公司出品;化学遮蔽法H DL-C测定试剂,由日本第一化学株式会社出品;酶修饰法HDL-C测定试剂,由德国宝灵曼公司出品。

仪器日立-7060全自动生化分析仪。

甘油三酯和胆固醇测定方法具体操作按厂家说明书进行(酶法终点法)。

磷钨酸沉淀法取血清200与500L l沉淀剂混合,在室温静置10min,然后以6000r/min离心10 min,取上清液按胆固醇酶法终点法在日立-7060上测定。

酶修饰法该试剂盒为双试剂,试剂1含有表面活性剂和硫酸葡聚糖,能减少乳糜微粒和VLDL 对胆固醇试剂的反应;试剂2含有经PEG修饰过的胆固醇脂酶和胆固醇氧化酶,以及过氧化物酶、4-氨基安替比啉及D H BS。

高密度脂蛋白测定

实验25 高密度脂蛋白测定【实验目的】（1）、掌握高密度脂蛋白测定的基本原理。

（2）、熟悉722S分光光度计使用。

【实验原理】空腹血浆脂蛋白主要为低密度脂蛋白（LDL）和高密度脂蛋白（HDL），PTA-Mg2+具有选择性沉淀载脂蛋白为apoB的脂蛋白LDL，则上清液为HDL，HDL以HDL-C表示含量。

胆固醇酯酶胆固醇酯+H2O————→胆固醇+RCOOH胆固醇氧化酶胆固醇+O2————→△4-胆甾烯酮+H2O2过氧化氢酶H2O2+4-AA+ESPAS————→醌亚胺染料+H2O【实验步骤】1、取三只试管，分别标号为空白管B、标准管S和测定管T2、按照下表向试管中加入试剂并处理试管内的液体空白管B标准管S测定管T蒸馏水/μl200——血清/μl——200标准液/μl—200—沉淀剂/μl200200200混匀，置于室温保温10min，再以3000r/min离心15min，吸取上清液上清液/μl150150150工作液/μl1500150015003、试剂添加完毕后，混匀，置于37℃保温10min。

4、以空白管调零，在546nm波长下比色读取各管A值。

【实验结果】HDL-C含量（mmol/L）=AT/AS*(标准液浓度）=L【实验讨论】高密度脂蛋白为血清蛋白之一。

缩写为HDL。

亦称为a1脂蛋白。

比较富含磷脂质，在血清中的含量约为300mg/dl。

其蛋白质部分，A－Ⅰ约为75%，A－Ⅱ约为20%。

由于可输出胆固醇促进胆固醇的代谢，所以现在作为动脉硬化预防因子而受到重视。

高密度脂蛋白运载周围组织中的胆固醇，再转化为胆汁酸或直接通过胆汁从肠道排出，动脉造影证明高密度脂蛋白胆固醇含量与动脉管腔狭窄程度呈显著的负相关。

所以高密度脂蛋白是一种抗动脉粥样硬化的血浆脂蛋白，是冠心病的保护因子。

俗称“血管清道夫”。

(注意事项)（1）沉淀后上清液必须清澈，上清液浑浊时，不得分析测定，应以生理盐水1:1稀释后再重新离心测定，结果乘以2。

血清高密度脂蛋白胆固醇测定

血清高密度脂蛋白胆固醇测定1.实验原理α-环糊精硫酸盐为一种多价聚阴离子化合物，具有肝素样作用，能降低与乳糜微粒和极低密度脂蛋白的反应，这些脂蛋白不必反应。

硫酸右旋葡萄糖，降低LDL 的聚合作用。

聚乙二醇修饰酶仅与起反应。

通过测定复合产物的吸光度，样品中HDL-C的浓度就可计算而来。

2. 标本：2.1 病人准备：12小时禁食。

2.2 类型：血清，肝素抗凝血浆。

3. 标本存放：稳定性：4～6℃保存可稳定4天；-20℃保存至少可稳定2周。

4. 标本运输：常温条件下保存运输。

5. 标本拒收标准：细菌污染的标本。

6. 实验材料6.1 试剂欧泰克HDL-C测定试剂盒6.1.1 试剂组成试剂1（R1）：DSS 0.5 mmol/LGood’s缓冲液pH 7.0 31mmol/L 4-AA0.60mmol/LEMSE 32 mmol/L POD 30 mmol/L CEH 0.8 mmol/Lα-环式糊精硫酸盐5mmol/L COD0.5mmol/L6.1.2 试剂准备：试剂为即用式。

6.1.3 试剂稳定性与贮存：试剂保存于2～8℃，若无污染，可稳定至失效期。

试剂不可冰冻。

开盖后放于仪器的冰箱中可以稳定30天。

6.1.4 变质指示：当试剂有看得见的微生物生长，有浊度，或者未开盖的液体有沉淀时，表明试剂已变质，不能继续使用。

6.1.5 注意事项：试剂中含叠氮钠（0.95g/L）为防腐剂。

不可入口！避免接触皮肤及粘膜。

应采取必要的预防措施使用试剂6.2 校准品：使用罗氏复合校准品对自动分析仪进行校准，具体参见生化检验校准品和质控品.SOP文件。

6.3 质控品：具体参见生化检验校准品和质控品.SOP 文件。

7. 仪器：日立7060生化分析仪8. 操作步骤8.1 项目基本参数：参见7060生化分析仪项目测定参数.SOP文件8.2 仪器操作步骤：参见7060生化分析仪操作规程.SOP文件9. 检验结果的判断与分析10. 质量控制：在每一批标本中都应把非定值血清水平I与II质控做为未知标本进行分析，以2S为质控警告限，3S为失控限，绘制质控图，判断是否在控。

高密度脂蛋白胆固醇测定

高密度脂蛋白胆固醇测定
高密度脂蛋白胆固醇测定(HDL-C)：HDL是体积最小的脂蛋白，且含量
最大(>50%)。

组织中的卵磷脂胆固醇酰基转移酶(LCAT)可以将游离的
胆固醇转变为胆固醇酯，同时HDL也可将蓄积在组织中的游离的胆固醇
运送到肝，减少血浆中游离的胆固醇浓度，形成胆固醇从细胞膜流向
血浆脂蛋白的浓度梯度，降低组织胆固醇的沉积，从而限制动脉粥样
硬化的发生、发展，起到抗动脉粥样硬化作用。

所以，血浆中HDL和动
脉硬化的发生成负相关。

HDL-C是和HDL结合的总胆固醇(包括游离的胆固醇和胆固醇酯两者)，以其量来估计HDL水平。

参考值：许多因素影响HDL-C的水平，包括年龄、性别、遗传、吸烟、运动、饮食习惯、肥胖和某些药物等。

多项健康人群HDL-C水平研
究显示：男性HDL-C为1.16-1.42mmol/L(45-55mg/dl);女性为1.29-1.5
5 mmol/L(50-60mg/dl)。

我国血脂异常防治建议将HDL-C分为2个水平：≥1.04 mmol/L(40mg/dl)为适合范围;≤0.91 mmol/L(35mg/dl)为减低。

临床意义：流行病学研究表明HDL-C与冠心病的发展成负相关，所
以HDL-C值低的个体患CHD的危险性增加;相反HDL-C水平高者，患 CHD
的可能性小。

所以HDL-C可用于评价患CHD的危险性。

HDL-C降低可见于急性感染、糖尿病、慢性肾功能衰竭、肾病综合
征等。

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实验25 高密度脂蛋白测定
【实验目的】
（1）、掌握高密度脂蛋白测定的基本原理。

（2）、熟悉722S分光光度计使用。

【实验原理】
空腹血浆脂蛋白主要为低密度脂蛋白（LDL）和高密度脂蛋白（HDL），PTA-Mg2+具有选择性沉淀载脂蛋白为apoB的脂蛋白LDL，则上清液为HDL，HDL以HDL-C表示含量。

胆固醇酯酶
胆固醇酯+H2O————→胆固醇+RCOOH
胆固醇氧化酶
胆固醇+O2————→△4-胆甾烯酮+H2O2
过氧化氢酶
H2O2+4-AA+ESPAS————→醌亚胺染料+H2O
【实验步骤】
1、取三只试管，分别标号为空白管B、标准管S和测定管T
2、按照下表向试管中加入试剂并处理试管内的液体
空白管B 标准管S 测定管T
蒸馏水/μl 200 ——
血清/μl ——200
标准液/μl —200 —
沉淀剂/μl 200 200 200 混匀，置于室温保温10min，再以3000r/min离心15min，吸取上清液
上清液/μl 150 150 150
工作液/μl 1500 1500 1500
3、试剂添加完毕后，混匀，置于37℃保温10min。