冠瘿病

农业防治： 选用未感染根癌病、土壤疏松、排水良好的砂壤 土育苗。如圃地已被污染，用不感病树种轮作或 用硫酸亚铁、硫磺粉进行土壤消毒。 生物防治： 利用放射土壤杆菌Agrobacterium radiobacter K84菌株，产生了一种细菌素Agrocin84(简称为 A84)，它能够选择性抑制致病性的放射土壤杆菌 而对非致病性的菌株没有影响，可对核果类果树 根癌病进行生物防治。
适生性
冠瘿病菌为土壤习居菌，寄主范围广，可 侵染331个属的640多种植物。 寄主：苹果属、梨属、山楂属、李属.、蔷 薇属、丁香属、柑橘属、柿树属、山茶属、 杨属、柳属、核桃属、板栗属、悬钩子属、 葡萄属、菊属、冷杉属、铁觅菜属、槭属、 猕猴桃属、山茶属、臭椿、油橄榄、无花 果、油梨等植物。

2007年3月30日，吉木萨尔县林业局工 作人员销毁了一批带疫苗木。日前，新疆 科技发展有限责任公司从山东省济南市平 阴县调运了5万株玫瑰种苗，吉木萨尔县林 业局工作人员对这批苗木进行检验时发现， 其中4000株带有冠瘿病。根据《中华人民 共和国植物检疫条例实施细则》的规定， 工作人员对带疫苗木进行了现场销毁。
检测冠瘿碱
植物界中只有受到土壤杆菌侵染的植物才产生冠 瘿碱。
常压纸电泳检测法：取0.5g(鲜重)瘤组织 加0.5ml蒸馏水研磨，匀浆后经10000转／ min离心，取5－10ml用微量注射器点样。 电泳纸用Whatman No.3滤纸(32cm×10cm)， 在离阴极3.5cm处为点样线，每点相隔 1.5cm，点样后用吹风机吹干。
侵染循环
病原菌在病瘤中、土壤中或土壤中的寄主 残体内越冬。存活1年以上，2年内得不到 侵染机会即失去生活力。 由伤口侵人，在寄主细胞壁上有一种糖蛋 白是侵染附着点，嫁接、害虫和中耕造成 的伤口均可引起此病侵染。只有携带Ti质 粒的菌株才具有致病性。
好气性，需氧呼吸， 最适生长温度为 22℃ ，最适pH7.3。 在微碱性、土壤黏重、排水不良的圃地以 及切接苗木、幼苗上发病多亦重。病害在 22℃左右发展较快，从侵入到显现症状约 需2～3个月。
分离培养检验 1、 取样 2、 检验 用接种环蘸取上述分离材料的组织液， 接种在培养基上划线分离。检查培养基上 是否形成有光泽、隆起、边缘完整、半透 明、呈灰白色至淡灰棕色的黏稠圆形菌落。
染色检验 1、革兰氏染色 采用结晶紫草酸胺染色法。经固定涂片 → 染色 1min→ 水洗数秒吸干 → 碘液处理1min→ 水洗数 秒吸干 → 褪色 30s → 水洗数秒吸干 → 复染 10s → 水洗吸干后镜检。土壤杆菌属为革兰氏阴性， 呈红色。 2、鞭毛染色 经染媒剂 5～7min 处理 → 水洗干燥 → 苯酚品红 染色5min → 水洗干燥后镜检。 土壤杆菌属镜检 菌体和鞭毛为阴性反应，呈红色，
历史及分布范围
亚洲：印度尼西亚、马来西亚、日本等
非洲：阿尔及利亚、埃及、肯尼亚、利比亚、马拉维、埃塞 俄比亚等
欧洲：奥地利、比利时、英国、保加利亚、塞浦路斯、捷克、 斯洛伐克等
大洋洲：澳大利亚、新西兰等
美洲：加拿大、美国、墨西哥、古巴等
国内：辽宁、河北、山西、陕西、甘肃、 河南、山东、浙江、湖北、四川、福建、 新疆
所致病害症状
发生部位：幼苗和幼树干基部和根部，有时也发 生其他部分。 初期在被害处形成乳白色瘤状物，难以与愈伤组 织区分，但它较愈伤组织发育快，从初期表面光 滑、质地柔软的小瘤逐渐增大成不规则状，表面 由乳白色变成褐色至暗褐色的大瘤。瘤表面粗糙 并龟裂，质地坚硬，可轻轻将瘤掰掉。
草本瘤小而软，肉质。 木本瘤大而硬，表层细胞枯死，内部木质 化，并在瘤的周围或表面产生一些细根。 瘤的直径最大可达30cm。
滤纸放在电泳槽上用甲酸、乙酸、水为电泳液， 在400V下电泳5min，再用360V电泳20min，然后取 出滤纸烘干。滤纸用菲醌试剂(A液：2mg菲醌溶于 10ml无水乙醇；B液体：1g NaOH溶于10ml 60％乙 醇。A、B液体混合)喷湿，风干，20min后在紫外 灯下观察，荧光亮点即为冠瘿碱的位臵。不同土 壤杆菌的生物变种所诱导产生的冠瘿碱种类不同， 共有农杆碱(agropine)、胭脂碱(Nopaline)、章 鱼碱(Octo-pine)和Mannopine四类。在纸电泳上， 选择合适缓冲液的pH值可以将其按电泳方向或迁 移率分开，借此也可以鉴定病原菌的种类。
PCR检测
目前对Ti和Ri质粒的T-DNA碱基序列已全部 测定，根据这些序列，选Ti质粒T-DNA中较 保守的碱基序列而且在Ri质粒中又不存在 的序列作为引物，引物对之间的长度以不 小于1.5Kb(千个碱基对)为宜，也可以选TDNA中的某一基因区为扩增靶区
防治措施
加强产地检疫，发现带疫苗木应及时销毁。 在寄主植物生长期间，对初发病的带疫植 株，可采取切除病瘤，并用石硫合剂或波 尔多液涂抹伤口，或拔除销毁。
T-DNA为探针的分子杂交检测。
以若一冠瘿是受土壤杆菌诱导，则其必含有T-DNA。 以P32 标记的T-DNA作探针可检测到冠瘿组织中的 T-DNA。从冠瘿组织中提取总DNA并用限制性内切 酶消化，用琼脂糖凝胶电泳分离这些切开的DNA片 段，用高pH将DNA变性并转移到硝酸纤维素膜上， 将已克隆的并用缺口翻译标记的T-DNA探针与硝酸 纤维素膜冲洗杂交，若冠瘿组织中存在T-DNA，则 膜必然会与标记的T-DNA探针杂交结合，多余的未 结合的探针被冲洗掉，然后用放射自显影来检测 膜中的T-DNA。
月季
扶芳藤
梨
病原Leabharlann Baidu态
冠瘿病菌为革兰氏阴性菌，有荚膜，不形成芽孢， 短杆状，1～4根周生鞭毛，如1根则多侧生
菌落通常为圆形，隆起、光滑、白色至灰白色、 半透明。培养时以氨基酸、硝酸盐和铵盐作为惟 一碳源。在甘露醇硝酸盐甘油磷酸盐琼脂上，具 有晕圈或形成褐色黏性生长物，并常有白色沉淀 物。
传播途径
病原菌栖息于土壤及病瘤的表层，可通过 灌溉水、雨水、地下害虫等自然传播。 主要是通过带病苗木、插条、接穗或幼树 等人为调运进行远距离传播。
检疫方法
直接观察 检查寄主植物的根冠部是否有瘤状突起， 是否有带细根的木瘤，是否有大小不一、 形状不同或互相连结的瘤。 检查寄主植物的根茎和主干上是否有 表面粗糙、龟裂、质地坚硬的木瘤。
受害树木生长衰弱，叶片发黄而早落,植株 矮小，果实变小。此病有继续发展的趋势。
美国三角杨
满天星冠瘿病
受害植株褪绿、萎蔫、 叶片逐渐枯死，病害 从基部向上部扩展蔓 延，畸变组织可能扩 展将茎包围。成熟植 株带瘿尚能存活，幼 小植株带瘿则易死亡。 该冠瘿很软易剥落
树莓根癌病状
桃树幼苗
桃冠瘿病
我省：郑州、洛阳、漯河、开封、安阳、 濮阳、三门峡、许昌市、新乡、焦作、南 阳、平顶山、周口、驻马店、商丘
危害
根癌病对病株生长影响的大小，取决于树龄、病 瘤发生部位、大小、数量等因素。当病瘤发生在 苗木根茎处、主干上并环茎一周时，病株则生长 缓慢，影响干形，甚至枯死；幼树发病后受害也 较大，果树结果不良、降低产量30％以上，品质 降低、甚至毁园。 我国口岸曾多次从日本、美国等国家引进的樱花 苗、栗苗、苹果苗上截获到该种病原菌
杨树冠瘿病
冠瘿病菌
crown gall
国内森林植物检疫性生物
冠瘿病又称根癌病、根瘤病、肿根 病等，通过携带Ti质粒的菌株侵染 植物的根茎部引起过度增生而形成 瘿瘤。
起源及分类地位
1897年Deldott和Cavara首次从葡萄病株肿瘤上分离到 该菌 1907年Smith和townsend发现了针蘸培养菌液接种可传 染此病 学 名 :Agrobacterium tumefaciens(Smith et Townsend)Conn 薄壁菌门Gracilicutes Alphaproteobacteria 根瘤菌目Rhizobiales 根瘤菌科 Rhizobiaceae 土壤杆菌属 Agrobacterium