基底膜染色
光波-微波辐射技术在肾小球基底膜六胺银快速染色中的应用研究
一
微波辐射原理 【 ２ － ５ ３ ， 对 传统六 胺银 染色方 法 进行 了改进 ， 明
肾穿刺活检技术对 肾脏疾病 的诊 断 、 治疗 和预后判 断具有 片放入 ５ ０ ｍｌ 带盖的立式染 色缸 中染液 ， ６ ２℃ ， １ 、 ５ ｈ左右 （ 组
， 蒸馏 水洗３ ｍｉ ｎ ×３次 ； （ ４ ） ０ ． ２ ％氯化 金 重要意义 ， 有关 资料 报道 ， 肾活检前后诊 断对 比分 析 ， 证 实肾脏 织变成棕褐色 时即可） 蒸馏水 洗 ３ ｍｉ ｎ×３次 ； （ ５ ） ５ ％硫 代 疾病临床诊断的修正率达 ３ ９ ％～６ ３ ％， 治疗方 案 的修 正 、 预后 显微镜下控制 调色 至满 意 ， ｍｉ ｎ ， 水洗 ； （ ６ ） 苏木素复染 ０ ． ５ ａｉ ｒ ｎ ， 自来水 冲洗 ； 估计修正率达 １ ７ ％－ －３ ６ ％。 肾穿刺 活检 推动 了肾脏病 理的迅 硫 酸钠 固定 ５ （ ７ ） 盐酸酒精快速分化 、 氨水返兰 ， 自来 水冲洗 ； （ ８ ） 常规 乙醇脱 速发展 ， 使肾脏病理学整体 知识 不断 更新 和提 高 ， 尤 其 是 六 胺
为５ 档 调节 ． 即高档 １ ０ ０ ％： ９ ０ ０ Ｗ， 中高 档 ８ ０ ％： ７ ２ ０ Ｗ， 中 档 ６ ０ ％： ５ ４ ０ Ｗ， 中低 档 ４ ０ ％： ３ ６ ０ Ｗ， 低档 ２ ０ ％： １ ８ ０ ｗ； 光 波 输 出 为单一光波管发光 ； 光 波／ 微 波 组 合 Ｉ为 ３ ０ ％ 的时 间微 波 输 出 ，
微波技术在肾小球基底膜六胺银染色中的应用
微 波是 一 种特 殊 的 电磁 波 ， 能提 高 分 子运 动速 度 ， 从
１２ 试 剂 与 设 备 ．
而 加 快和 促 进染 液 中银与 组 织 的结 合 ，形 成 稳 定 的络 合 物 。用传 统 方 法 六 胺 银 染 色需 在 ６ ｑ ０Ｃ烤箱 水 浴 ６ ｉ左 ０ ｍｎ
右 ， 色 温 度 不 好 掌 握 ， 片 常 染 色浅 或 过 染 ， 用 微 波 染 切 应
它具 有 更新 、 快 、 准确 、 方便 的特 点 ， 医院急诊 、 区 医疗服 务 以及慢 性病 患者 的 自我检 测 中发 挥 了重 要作 用 。 更 更 更 在 社
【 关键 词 】 床 旁 即 时检 验 ； 质量 控 制 ； 量 管理 质
Ｐ Ｃ （ｏｎ—ｆｅｒ ｔ ｔ ｇ 即 床 旁 即 时 检 验 也 称 现 场 Ｏ Ｔ ｐｉｔｏ＿ａｅ ｅ ｉ ） ｓｎ
验 结 果 的 报 告 ， 应 做 全 程质 量 控 制 。 都 ２ １ 检 验 前 的 控 制 ① 标 本 采 集 ： 目 前 快 速 检 验 的 标 ． 本 多 为 血 液 及 尿 液 。 该 注 意 检 测 项 目 所 需 血 液 是 否 需 应
１ Ｐ Ｔ操 作 者 的 技 术 培 训 及 认 可 ＯＣ
量 控 制 的 要 求 和 做法 ，包 括 出现 差 错 时 的 纠 正 措 施 。 检 验 失 效 时 的 应 急 措施 和办 法 。 在 对 操 作 者 进行 培 训 后 ④
应 进 行 书 面 考 核 ， 至 要 求 获 得 相 应 的 上 岗证 ， 可 进 甚 方
快 速 检 验 ， 近几 年 悄 然 兴 起 的 一 种 极 具 潜 力 的 检 测 技 是
中 国 疗 养 医 学 ２１ ０ ０年 ６月 第 １ ９卷 第 ６期
病理制片技术――常用特殊染色
病理制片技术――常用特殊染色1．第一步准备工作：配制六胺银染液，将10％硝酸银2．5ml倒入干净的染色缸内，加入2％硼砂5ml，液体呈乳白色，再加入3％乌洛托品40ml，染液逐渐呈透明状。
2．第二步染色过程：事先把温箱调至60℃备用，切片经脱蜡至水，用1％过碘酸氧化10 min，水洗，然后切片放人六胺银染液放置60℃温箱1 h，染真菌时间要相对短一些，一般情况下肉眼看到染液变色，切片呈棕色时从温箱取出染色缸，倒掉染液，自来水冲洗1min，用0．25％氯化金调色1 min，水洗后，用3％硫代硫酸钠染5 min,水洗，用苏木精染液浅染，水洗、分化、冲水返蓝，伊红染10 s，最后经脱水、透明、封固。
3．图示结果：基底膜与毛细血管间质性物质、真菌呈棕黑色，核呈蓝色。
4．注葸事项(1)掌握染色温度和时间，如60℃染1 h，80℃染30～40 min。
(2)真菌类染色时间相对要短，染色时间过长，切片染色过深，可用分色剂处理。
二、黏液卡红染色1．第一步准备工作：配制黏卡染液，将称好的胭脂1 g、氢氧化铝1 g倒入瓶内，加入50％L醇100 rnl混合摇匀，再加入氯化铝0．5g，水浴加温逐渐煮沸并搅动液体，使其充分溶解(注意染液容易外溅)，数分钟后，染液由红色变成透明深紫红色，冷却后将液体倒入量筒，再加入50％乙醇至原量，过滤，放人冰箱备用。
2．第二步染色方法：染液使用时原液与蒸馏水比例为1：4稀释.切片厚5 um，脱蜡至水，经苏木精染色2 min、水洗、分化、返蓝后进人黏卡液染色2 h以上，染液可以重复使用多次，但要适当延长染色时间．切片水洗后，脱水、透明、封固。
3．图示结果：黏液为红色，胞核为蓝色．4．注意事项(1)染液使用时比例为1份黏卡原液，4份蒸馏水。
(2)用酶消化对照染色特异性很大，消化时间为20 min。
(3)配制黏卡染液时要防止液体溅出。
三、石碳酸品红染色1．第一步准备工作(1)配制盐基性品红饱和液：盐基性品红溶于乙醇内。
各种组织染色方法大全主要内容结缔组织多色染色法胶原纤维染色
各种组织染色方法大全主要内容：结缔组织多色染色法胶原纤维染色法网状纤维染色法弹力纤维染色法第一节结缔组织多色染色法一、Mallory三色染色法1. 试剂配制（1）重铬酸钾液重铬酸钾2.5g，醋酸5ml，蒸馏水95ml （2）苯胺蓝桔黄G液苯胺蓝0.5g，桔黄G2g，磷钨酸1g，蒸馏水100ml（3）酸性复红液酸性复红0.5g，蒸馏水100ml2.染色步骤（1）中性甲醛液固定组织，石蜡切片，常规脱蜡至水。
（2）重铬酸钾液10min。
（3）蒸馏水冲洗2min，蒸馏水2次。
（4）酸性复红液2min，蒸馏稍洗。
（5）苯胺蓝液20min，95%乙醇快速分化。
（6）直接用无水乙醇脱水，二甲苯透明，中性树胶封固。
3.结果胶原和网状纤维呈蓝色，软骨、粘液、淀粉样变物质呈淡蓝色，神经胶质纤维、肌纤维和酸性颗粒呈红色，髓鞘和红色呈桔红色。
4.注意事项（1）酸性复红液易溶解于水，肉眼观察切片上保留一定的红色。
（2）苯胺蓝液染色后，用95%乙醇分化时，须用显微镜观察掌握。
（3）对陈旧的固定标本，其染色效果较差，可增加染色时间。
（4）另张切片，可同时作胶原纤维对照染色而进行鉴别组织成分。
二、Masson三色染色法1.试剂配制（1）Masson复合染色液酸性复红1g，丽春红2g，桔黄G2g，0.25%醋酸300ml。
（2）亮绿染色液高绿SF0.1g，0.2%醋酸100ml。
2.染色步骤中性甲醛液固定组织，石蜡切片，常规脱蜡至水。
（1）Masson复合染色液5min。
（2）0.2%醋酸水溶液稍洗。
（3）5%磷钨酸5-10min。
（4）0.2%醋酸水溶液浸洗2次。
（5）亮绿染色液5min，0.2%醋酸水洗2次。
（6）无水乙醇脱水，二甲苯透明，中性树胶封固。
3.结果胶原纤维呈绿色，肌纤维呈红色，红细胞呈桔红色。
4.注意事项（1）Masson复合染色液，经磷钨酸分化时须用显微镜控制肌纤维清晰为止。
（2）亮绿染料可用苯胺蓝替换，可用来作为对比观察染色的效果。
实用文档之肾活检病理组织染色
实用文档之"一、常规染色技术（HE 染色）"苏木素-伊红染色简称HE 染色，是最常用的染色方法，苏木素是一种碱性染料，可将细胞核和细胞内核糖体染成蓝紫色，伊红是一种酸性染料，能将细胞质染成红色或淡红色。
HE 染色可以显示肾小球的细胞增生、炎细胞浸润。
还能很好的显示肾小管上皮细胞的损伤和肾间质水肿情况。
（一）需要试剂①苏木素染液；② 1% 盐酸乙醇液；③氨水；④ 1% 伊红液。
（二）具体染色步骤1.切片常规脱蜡入水。
2.苏木素染细胞核1 ～2 min，水洗。
3.入1% 盐酸乙醇分化数秒，水洗。
4.氨水返蓝数秒。
5.流水冲洗，镜下观察细胞核成蓝色。
6.1% 伊红染数秒，水洗。
7.梯度乙醇脱水，二甲苯透明，树胶封片。
染色结果：胞核呈蓝色，胞浆呈红色，红细胞呈橘红色，其他成分呈深浅不同红色。
（三）注意事项1.组织切片的脱蜡步骤应彻底，否则组织无法着色，影响观察。
2.伊红染色的时间需严格控制。
过长胞浆染色红色过深。
3.染色后的组织切片要将组织四周的污染物痕迹擦掉。
二、特殊染色技术（一）过碘酸- 希夫氏染色（PAS 染色）PAS 染色可以显示肾小球内的细胞增生、浸润和系膜基质等，并能很好地显示基底膜，是显示糖原和糖蛋白的基本染色。
1.需要试剂① 1% 过碘酸；② schiff 氏液染；③苏木素染液；④氨水。
2.具体染色步骤（1）切片常规脱蜡入水。
（2）入1% 过碘酸氧化10 ～15 min，水洗。
（3）入schiff 氏液染10 ～30 min，水洗。
（4）苏木素染细胞核1 ～2 min，水洗。
（5）入1% 盐酸乙醇分化数秒，水洗。
（6）氨水返蓝数秒。
（7）流水冲洗，镜下观察细胞核成蓝色，基底膜染成粉红色。
（8）梯度乙醇脱水、二甲苯透明、树胶封片。
3.染色结果PAS 阳性物质（多糖和糖原）呈红色，核呈蓝色。
4.注意事项（1）组织切片的脱蜡步骤应彻底，否则组织无法着色。
（2）Schiff 氏液染色的时间需严格控制。
基底膜染色方法比较及在胃粘膜异型增生与胃腺癌中的应用
基底膜染色方法比较及在胃粘膜异型增生与胃腺癌中的应用郑伟;胡志坚;张春梁;林建忠;林少敏【摘要】目的探讨胃粘膜上皮基底膜有效、便捷、直观的实验方法,及基底膜、Ki67免疫组织化学、粘液多重染色在胃腺癌组织染色中的可行性.方法用过碘酸希夫(periodic acid Schiff,PAS)反应、六胺银法(methenamine silver method,PASM)、网状纤维染色、苦味酸-天狼猩红(Picrosirius red,SR)和Ⅳ型胶原免疫组织化学5种染色方法对多种胃粘膜异型增生及胃腺癌病理标本基底膜进行染色,并利用Friedman检验、Wilcoxon检验定量分析、比较基底膜阳性区域面积.此外,在同一张胃腺癌组织切片上进行显示基底膜、蛋白质、粘液的多重染色.结果 5种基底膜染色方法中,Ⅳ型胶原免疫反应阳性面积与SR染色阳性面积(胃粘膜中-重度异型增生标本除外)无显著性差异、PAS与PASM染色阳性面积无显著性差异、网状纤维染色阳性面积最大.多重染色实验结果显示胃腺癌Ki-67、阿尔新蓝(Alcian blue,AB)-PAS二重染色和Ki-67、AB、SR三重染色,分别显示对应结构,效果良好.结论观察基底膜,胃粘膜中-重度异型增生标本中Ⅳ型胶原免疫组织化学与SR染色要分别选用;胃粘膜轻度异型增生及胃腺癌标本中Ⅳ型与SR染色可相互替代;PAS与PASM染色法可相互替代,我们推荐较为便捷的SR和PAS染色;网状纤维染色观察比较直观,可选用.此外,SR、PAS也可分别应用于胃腺癌Ki67免疫组织化学与AB的多重染色中,效果良好.【期刊名称】《中国组织化学与细胞化学杂志》【年(卷),期】2016(025)002【总页数】5页(P169-173)【关键词】异型增生;胃腺癌;基底膜;定量分析;多重染色【作者】郑伟;胡志坚;张春梁;林建忠;林少敏【作者单位】福建医科大学病理学系,福州350004;福建医科大学公共卫生学院,福州350004;福建医科大学病理学系,福州350004;福建医科大学药学院,福州350004;福建医科大学病理学系,福州350004【正文语种】中文【中图分类】R329;R322.44在胃粘膜异型增生、胃腺癌的临床检验与研究中，基底膜形态的改变及表达程度、细胞增殖指数（ki-67）、p53蛋白的检出率、粘液的性质等常是关注点［1-3］。
豚鼠耳蜗基底膜硝酸银染色铺片法的改良与观察
豚鼠耳蜗基底膜硝酸银染色铺片法的改良与观察蔡琴芳;蒋立薪【摘要】目的探讨改良硝酸银染色铺片法对豚鼠耳蜗基底膜的观察效果.方法 20只正常豚鼠分为对照组和改良组,每组10只.对照组采用传统的基底膜硝酸银染色铺片法,改良组采用直接曝光显色及逆向剥离的硝酸银染色铺片方法 (即改良法),观察基底膜毛细胞及听纤毛簇,比较两组的铺片效果.结果两组动物耳蜗基底膜均剥离完整,毛细胞和听纤毛簇显色清晰,但改良组较对照组制片所需时间明显缩短,且操作更为简便.结论改良耳蜗基底膜硝酸银染色铺片法操作简便,效果满意.【期刊名称】《听力学及言语疾病杂志》【年(卷),期】2010(018)003【总页数】2页(P282-283)【关键词】豚鼠;耳蜗;毛细胞;银染色法【作者】蔡琴芳;蒋立薪【作者单位】暨南大学附属第一医院耳鼻咽喉头颈外科,广州,510630;暨南大学附属第一医院耳鼻咽喉头颈外科,广州,510630【正文语种】中文【中图分类】R764.35耳蜗基底膜硝酸银染色铺片法是耳科学基础研究和内耳疾病研究应用较广泛的的一种方法，其特点是染色后毛细胞及其表面纤毛显示清晰且易于观察和计数等[1]。
但该方法在铺片过程中存在一些难点和不稳定因素，如硝酸银染色不均匀，基底膜剥离不完整等。
本研究在常规耳蜗基底膜硝酸银染色铺片法的基础上提出一些改进，取得了比较满意的观察效果，现报告如下。
1 材料与方法1.1 实验试剂与材料试剂：0.5%硝酸银、蒸馏水和10%甲醛。
材料：止血钳、眼科剪、小尖镊、小剥离子、1毫升注射器、玻璃皿、离心管、解剖显微镜和电子显微镜。
1.2 实验动物选择体重250～300 g、耳廓反射灵敏的健康白色红目豚鼠20只，随机分为对照组10只，用常规方法行基底膜硝酸银染色，改良组10只，用改良法行基底膜硝酸银染色。
1.3 基底膜硝酸银染色铺片1.3.1 取材每组动物迅速断头后即刻经颅骨背侧快速取出双侧听泡。
1.3.2 灌注染色小号止血钳咬开听泡，暴露耳蜗，修剪掉耳蜗周围多余的的骨壁，在解剖显微镜下放大10倍，用1毫升注射器针头在蜗尖处挑开小孔，挑开圆窗膜，去除镫骨，使耳蜗的前庭阶和鼓阶开放后，抽取0.5%硝酸银溶液，经蜗顶小孔缓慢灌注，每只耳蜗约灌注2～3 ml，然后抽取蒸馏水同法灌注以冲洗耳蜗，一般2次即可。
he染色指标
HE染色是一种常用的组织学和病理学染色技术，主要应用于观察组织结构和细胞形态。
通过HE染色，可以观察到细胞核、细胞质、细胞膜以及细胞外基质的形态和染色特性。
HE染色的主要指标包括：
1.核形态：细胞核的形态和大小，以及染色深浅。
正常的细胞核
呈现圆形或椭圆形，染色深，核仁小。
如果出现核固缩、核碎裂或核溶解等现象，则可能表示细胞处于凋亡或坏死状态。
2.核仁：染色后显示的核仁形态和大小。
在HE染色中，核仁呈
现为蓝色或紫色的圆形区域。
如果核仁增大、增多或形状不规则，可能表示细胞处于增殖状态或存在病变。
3.细胞质染色：细胞质的染色深浅和颗粒状结构。
正常的细胞质
染色均匀，颗粒状结构不明显。
如果出现染色不均、颗粒状结构增多或染色加深等现象，可能表示细胞出现病变或异常。
4.胞膜：细胞膜的完整性和染色特性。
正常的细胞膜染色清晰，
没有明显缺损或增厚。
如果出现胞膜缺损、增厚或染色不均等现象，可能表示细胞病变或异常。
5.细胞外基质：包括胶原纤维、纤维组织和基底膜等结构的染色
特性和形态。
这些结构的染色特性和形态可以反映组织的生理状态和病变情况。
总之，HE染色的指标很多，需要通过观察和比较不同组织、细胞和结构的表现来综合判断和分析。
同时，还需要结合其他病理学技术和实验室检查结果进行综合分析，才能得出准确的诊断结果。
大肠癌组织中基底膜的免疫组织化学染色和电镜观察
大肠癌组织中基底膜的免疫组织化学染色和电镜观察
徐军;张忠;潘晓蔚
【期刊名称】《沈阳医学院学报》
【年(卷),期】1999(001)004
【摘要】目的探讨基底膜的状态与大肠癌生长过程的关系。
方法利用Ⅳ型胶原免疫组化染色和透射电镜技术，对75例不同肠粘膜，包括15例正常肠粘膜、13例肠腺瘤组织和47例大肠癌，进行原位观察。
结果在正常肠粘膜和肠腺瘤组织中，基底膜Ⅳ型胶原分布连续完整；乳头状腺癌和低分化腺癌基底膜Ⅳ型胶原分布间断缺损者明显高于正常肠粘膜（P<0.01）；低分化腺癌基底膜Ⅳ型胶原分布呈片段消失者明显高于乳头状腺癌（P<0.01）。
结论大肠癌癌巢周基底膜Ⅳ型胶原缺损或消失，且随分化程度的降低而加重。
【总页数】3页(P200-202)
【作者】徐军;张忠;潘晓蔚
【作者单位】沈阳医学院医学基础部病理解剖学教研室，沈阳110031
【正文语种】中文
【中图分类】R735.34
【相关文献】
1.NF-kB在大肠腺癌组织中的表达与大肠腺癌浸润及转移关系的研究 [J], 侯峰;郑淑芳;秦晓静;何滔;时丽芳
2.Bcl -2和PD -L1在大肠癌组织中的表达及两者与大肠癌侵袭转移的相关性 [J],
李晓凤;巴彩霞;高辉;张美云;白雪峰
3.p53和EGFR在大肠腺瘤及大肠癌组织中的表达及临床意义 [J], 陈康部
4.鼻腔鳞癌组织中基底膜抗原及增殖活性的表达 [J], 赵文波;张大良;赵文海;东野圣伊
5.垂体肿瘤转化基因在大肠正常黏膜、腺瘤及大肠癌组织中的表达及意义 [J], 申兴斌;段惠佳;赵杨;张古林
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大鼠肾脏组织病理染色方法及结果解读
肾脏组织病理主要的染色方式：HE染色显示各种细胞核呈蓝色，细胞质呈红色，主要用于观察细胞的种类和数量、坏死及管型成分。
观察的病变包括：肾小球的增生、坏死及渗出性病变，肾小管上皮细胞损伤，间质水肿、间质出血、炎细胞浸润、血管炎症等。
PAS染色显示基底膜、系膜基质、糖原及糖蛋白呈紫红色，细胞核呈蓝色，能很好的显示肾小球和肾小管的基底膜，主要用于观察肾组织的基本结构，进而发现病变，判断病变性质、累及部位和轻重程度，同时根据基底膜轮廓还能判断固有细胞种类。
观察的病变包括：肾小球基底膜增厚，毛细血管袢塌陷，包曼囊壁病变，透明滴，硬化，系膜细胞和基质增多，系膜溶解，毛细血管袢内/外增殖；肾小管上皮细胞内蛋白吸收滴，肾小管基底膜增厚，肾小管炎；血管透明变性，动脉内弹力层分层等。
Masson-Trichrome三色染色显示基底膜、系膜基质和型胶原呈绿色（或蓝色，取决于使用亮绿或甲苯胺蓝），免疫复合物、纤维素样坏死、血栓均呈红色，细胞核呈蓝黑色，主要用于观察坏死性病变、免疫复合物沉积。
观察的病变包括：肾小球免疫复合物沉积，血栓，纤维蛋白，血小板；肾小管萎缩，间质纤维化；血管血栓等。
PASM-Masson染色显示基底膜和系膜基质呈棕黑色，细胞质及免疫复合物呈红色，胶原呈绿色/或蓝色（取决于套染中使用亮绿或甲苯胺蓝），该染色对肾小球结构的显示较PAS染色更为精细，主要用于观察基底膜，免疫复合物及特殊沉积物。
观察的病变包括：肾小球基底膜“钉突”和空泡，基底膜双轨，基底膜和包曼囊壁断裂，间质纤维化和动脉内弹力层分层等。
免疫荧光、免疫组化冰冻切片较好，足细胞标志物如（nephrin WT-1, podocin 等，查看足细胞病变、肾小球硬化病理观察（电镜）肾小球：1.肾小球总数、球性、节段硬化的肾小球、缺血性肾小球2.病变分布：局灶或弥漫，节段或球性3.增生：系膜增生、毛细血管内增生或渗出性，浸润细胞类型或数量4.K-W结节5.毛细血管袢基底膜断裂、增厚、病变（钉突、空泡）肾小管间质1.肾小管急性损伤2.肾小管上皮细胞凝固性坏死3.肾小管基底膜异常4.肾小管炎5.间质炎细胞浸润6.间质出血水肿7.间质纤维化、肾小管萎缩血管动脉炎、动脉内皮细胞病变、动脉栓塞、管周毛细血管炎细胞浸润；动脉TMA病变、动脉硬化和小动脉硬化（透明变性和内膜增厚）HE 染色图解对于肾脏的观察要看肾小球、肾小管、肾间质及肾小动脉的病变，肾小球的病变又要观察肾小囊、系膜细胞及基质、毛细血管基底膜、足细胞等等等等，而且糖尿病不等于糖尿病肾病，如果是糖尿病肾病最典型的标志性病变是系膜基质无细胞性增生，形成K-W结节片子质量没有问题。
图示PAS染色法
PAS（PeriodicAcidSchiff）染色方法PAS染色步骤结果：糖原，粘液，基底膜和纤维素-红色/粉红色, 霉菌-红色/粉红色，背景-蓝色。
未经淀粉酶消化的切片，糖原被PAS染成洋红色，经淀粉酶消化的切片消失。
图片显示中性粘多糖为红色图片显示肾脏组织基底膜-红色/粉红色图片显示霉菌-红色/粉红色试剂配制1.0.5%过碘酸水溶液过碘酸 2.5g蒸馏水500ml2.Schiff试剂Schiff试剂碱性复红（CI42500）6g蒸馏水1200ml1N盐酸60ml偏重亚硫酸氢钠12g用600ml蒸馏水溶解6g碱性复红，煮沸几分钟，冷却到50℃加入1N盐酸60ml，冷却到25℃加入12g偏重亚硫酸氢钠（高纯度化学试剂）。
液体放于暗处24小时。
加5～6g活性炭，摇动大约1分钟。
通过粗过滤纸过滤，液体应该清亮，如果液体有颜色重复加入活性炭。
蒸馏水加到液体到总量600ml，放入棕色瓶中冰箱内保存。
3.Mayer改良苏木精夜苏木精2g硫酸铝钾100g蒸馏水600ml碘酸钠0.4g冰醋酸20ml硫酸铝钾加入蒸馏水中稍加热，同时将苏木精溶于无水乙醇中，再将两种液混合，加入碘酸钠，充分溶解。
此液是一种进行性苏木精液，染色时一般不需要分化，但染色过深可以进行适当分化。
注意事项：关键是碘酸钠的使用量1)根据气候季节温度的改变，适当调整碘酸钠的使用量，配方中给出的量适合夏季（温度大约25℃）随着温度下降每降1℃碘酸钠的使用量增加0.01g，最多不能超过配方使用量的50%，过量的碘酸钠可是苏木精氧化，不仅有效时间短，还会出现核浆共染。
2)称量一定要准确，碘酸钠尽量使用精确度高的天平称量。
3)碘酸钠有有限期，除了注意有效期，还应注意有无潮解，质量不保险的碘酸钠最好不用，为了保险使用有效的碘酸钠。
现代病理学技术条件下特殊染色的应用价值
现代病理学技术条件下特殊染色的应用价值鞠学萍【摘要】特殊染色主要是通过对相应的成分进行染色，以便了解与明确组织或细胞中正常结构或病理过程中出现的异常物质、病变或病原体等。
特殊染色主要现代病理学技术范畴，对病态状态下的细胞、组织与器官结构与功能的改变情况具有较好的显示与明确作用，并且可以通过特殊染色为临床诊断、治疗与预防提供科学的依据。
因此，在现代病理学技术中应重视特殊染色，加强应用，充分发挥出其应有的作用与价值。
%Special staining is mainly through the components of the corresponding staining, in order to understand and clear tissues or cells in normal festival or in pathological process of abnormal substances and disease or pathogen. Special staining was mainly modern pathology study technology category, the morbid state of cells, tissues and organs of the structure and function of change has a better display and a clear role, and by special staining for clinical diagnosis, treatment and prevention to provide a scientiifc basis. Therefore, we should pay special attention to the special dyeing, strengthen the application and give full play to its proper function and value in the modern pathological technology.【期刊名称】《中国继续医学教育》【年(卷),期】2016(008)012【总页数】2页(P35-36)【关键词】病理学;特殊染色;应用价值【作者】鞠学萍【作者单位】黑龙江省大庆市第四医院病理室，黑龙江大庆163316【正文语种】中文【中图分类】R446特殊染色是机组化学染色技术中的基础内容，该种技术通过长期的发展与改进，逐渐成熟与完善。
肾小球基底膜改良PASM染色法
肾小球基底膜改良PASM染色法肾活检组织的PASM染色（六氨银染色法）对于观察肾小球系膜、基底膜的各种形态改变具有极重要的诊断价值，特别是对于观察膜性肾病基底膜的钉突形成、淀粉样变性肾病基底膜的双轨和多轨改变等是其他特殊染色所不可替代的。
新月体形成中的基底膜断裂、血管炎中的动脉内膜和弹力纤维的变化也应用PASM染色[1]。
目前PASM染色存在多种不同的方法，我们采用的是1%过碘酸和8%重铬酸钾双重氧化法，且在染液浓度、染色时间和染色温度上做了调整改良，取得了较好的效果，总结经验如下，供同行交流与参考。
1 材料与方法1.1 标本本院肾内科2010-2012年送检的肾穿刺活检组织标本674例，10%中性福尔马林溶液固定，全自动组织脱水机按活检小标本程序处理，石蜡包埋，切片厚3μm，70℃烤片30-40min。
1.2 试剂配制⑴贮备液：3%六次甲基四胺液500ml和2%硝酸银液100ml储存于4℃冰箱；5%四硼酸钠溶液100ml储存于室温。
⑵六胺银工作液：取3%六次甲基四胺液（乌洛托品）50ml加入2%硝酸银液6ml，此时溶液产生乳白色悬浊液，稍搅拌溶液变澄清，最后加入5%硼砂（四硼酸钠）4ml。
⑶1%过碘酸：高碘酸1ml；蒸馏水99 ml。
⑷8%重铬酸钾：重铬酸钾8g；蒸馏水100ml。
⑸0.5%偏重亚硫酸钠：偏重亚硫酸钠0.5g；蒸馏水100ml。
⑹0.2%绿化金溶液：市售氯化金1g/支，溶解于500ml蒸馏水。
⑺5%硫代硫酸钠：硫代硫酸钠5g；蒸馏水100ml。
1.3 染色方法⑴石蜡切片脱蜡至蒸馏水；⑵1%过碘酸溶液氧化20min；⑶蒸馏水洗30s；⑷8%重铬酸钾溶液氧化20 min；⑸蒸馏水洗30s；⑹0.5%偏重亚硫酸钠1min；⑺蒸馏水洗30s；⑻切片浸入六胺银工作液，置于62℃水浴箱内并逐渐升温至68℃，时间大约15-30min（光镜下控制染色强度）；⑼蒸馏水洗30s；⑽0.2%氯化金溶液调色1 min；⑾蒸馏水洗30s；⑿5%硫代硫酸钠溶液1min；⒀蒸馏水洗30s；⒁稍水洗，用Gill苏木素液淡染细胞核3-5min；⒂用自来水洗3-5min；⒃梯度乙醇脱水，二甲苯透明，中性树胶封固。
基底膜jones六胺银
基底膜- JONE'S 六胺银目的：用于鉴别肾小球的基底膜。
是肾活检组织的常规染色。
原理：基底膜组织的粘多糖成份经高碘酸氧化后暴露醛基，醛基能把六胺银还原成可见的金属银。
对照：正常肾小球组织。
固定方法：酒精Bouin's液, 10%甲醛技术：石蜡切片1µm-2µm设备：酸洗玻璃器皿；染色缸(不能使用带有金属边)，量筒，Teflon 镊子(非金属)，微波炉，水浴箱。
试剂：1% 高碘酸：高碘酸 5.0 gm蒸馏水500.0 ml混合溶解，标签，日期和签名。
保存期6个月。
警告：避免接触和吸入六胺银原液：3% 六次甲基四胺400.0 ml5% 硝酸银20.0 ml使用酸液清洗玻璃器皿。
保存于冰箱，保存期6个月。
警告：腐蚀性，可能致癌。
5% 硼砂液：四硼砂钠 5.0 gm蒸馏水100.0 ml使用酸液清洗玻璃器皿。
保存于冰箱，保存期6个月。
六胺银工作液：六胺银原液50.0 ml5% 硼砂 6.0 ml新鲜配制。
用后丢弃。
警告：腐蚀性，刺激性。
0.2% 氯化金：1% 氯化金 1.0 ml蒸馏水50.0 ml使用酸液清洗玻璃器皿。
保存于冰箱，保存期6个月。
警告：避免接触和吸入。
5% Hypo:详见备用液。
常规HE染液。
安全：穿戴手套、护目镜和白大衣。
保持所有打开盖的热溶液于通风橱中。
避免接触和吸入染料和化学品。
硝酸银：剧烈的皮肤和眼睛刺激，氧化剂。
摄入将导致严重的胃肠道不适。
可能致癌：可疑的肿瘤发生因素。
硫代硫酸钠：摄入毒性。
能引起胃刺激，接触对皮肤、眼睛和呼吸系统有刺激性。
亮绿SF Yellowish：可能致癌。
程序：1. 常规脱蜡至蒸馏水。
2. 1% 高碘酸，60°C水浴15 minutes。
3. 蒸馏水洗3次。
4. *六胺银工作液和一缸蒸馏水：微波高火60 seconds，先将玻片放入热的蒸馏水中。
搅拌银液，再放入玻片。
5. 将银液染色缸放入60°C 水浴, 每2-5 minutes检查一次。
小鼠 小肠he染色形态描述
小鼠小肠he染色形态描述
小鼠小肠是小鼠消化系统中的一个重要器官，其内部结构复杂，包括了许多不同的细胞类型和组织结构。
其中，小肠上皮细胞是小肠内最主要的细胞类型，其表面上有许多微绒毛，这些微绒毛有助于增加小肠的表面积，从而提高小肠对营养物质的吸收效率。
在小鼠小肠中，常用的染色方法是HE染色。
HE染色是一种组织学染色方法，可以同时染色细胞核和细胞质，从而使细胞和组织的结构更加清晰可见。
通过HE染色，我们可以观察到小鼠小肠的细胞和组织结构，进而了解其生理和病理状态。
在HE染色下观察小鼠小肠，我们可以看到小肠上皮细胞排列有序，形成了小肠绒毛。
小肠绒毛上有许多微绒毛，这些微绒毛可以增加小肠表面积，从而提高小肠对营养物质的吸收效率。
此外，小肠绒毛上还有一些小肠腺，这些小肠腺可以分泌消化酶和黏液，帮助消化和吸收食物。
在小肠绒毛下方，我们可以看到一层称为基底膜的结构。
基底膜是一层由胶原蛋白和其他分子组成的薄膜，它可以支持小肠上皮细胞的生长和分化。
基底膜下方是肌层，肌层由平滑肌细胞组成，可以帮助小肠进行蠕动，从而促进食物的消化和吸收。
除了上述结构外，我们还可以看到一些免疫细胞，如淋巴细胞和浆细胞。
这些免疫细胞可以帮助小肠对病原体和其他外来物质进行免疫防御。
总之，小鼠小肠是一个复杂的器官，其内部结构包括了许多不同的细胞类型和组织结构。
通过HE染色，我们可以清晰地观察到小鼠小肠的细胞和组织结构，从而了解其生理和病理状态。
肾小球基底膜PASM染色方法的改进
肾小球基底膜PASM染色方法的改进
郑晖;颜亚晖
【期刊名称】《中国组织化学与细胞化学杂志》
【年(卷),期】2003(12)4
【摘要】在临床肾穿标本的病理诊断中，Gomori六胺银(PASM)染色是显示肾小球基底膜常用染色方法，在实际工作中，我们发现按常规的PASM染色法操作，染色时间长，肾小球毛细血管基底膜不易着色，且结构不清晰，背景欠干净，影响观察和诊断。
为此，我们对几种方法进行比较，经反复摸索，发现利用超声波进行PASM染色具有操作简便、方法稳定、时间短、结构清晰和背景干净等优点，对提高制片质量和诊断很有帮助，现介绍如下。
【总页数】2页(P443-444)
【作者】郑晖;颜亚晖
【作者单位】中南大学湘雅医学院病理学教研室,长沙,410078;中南大学湘雅医学院病理学教研室,长沙,410078
【正文语种】中文
【中图分类】R586.9
【相关文献】
1.PAS—M／PASM—M显示肾小球基膜,红细胞和细胞核的复合染色方法 [J], 龚志锦;李全华
2.微波技术在肾小球基底膜六胺银染色中的应用 [J], 周敏;杨琪;潘涛
3.提高肾小球基底膜PASM染色法质量的技巧 [J], 田玉旺;李琳;朱红艳;苗金红;邢宜
4.微波在肾小球基底膜PASM染色方法中的应用改进 [J], 张伟;田野;陈敬文
5.肾基底膜六胺银染色方法的改进 [J], 辛榕;卞修武;张树辉
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组织学技术特殊染色
组织学技术特殊染色组织学技术是研究生物学和医学中的一门重要学科，它主要研究各种生物组织的结构、形态和功能。
组织学技术中的特殊染色技术是一种重要的方法，可以帮助科学家们更好地观察和分析组织中的微细结构。
本文将介绍几种常见的组织学技术特殊染色方法。
PAS染色PAS（Periodic Acid-Schiff）染色是一种广泛应用的组织学技术特殊染色方法。
通过对组织样本进行一系列处理，使得组织中的多糖物质、甘油脂和一些蛋白质能够被染色剂染色。
PAS染色对于检测肝细胞内糖原、胆囊内黏液和肾小管内基底膜等有重要意义。
Silver染色Silver染色是一种用于染色神经元轴突和树突的特殊染色方法。
Silver染色通过将组织中的银离子还原为固态银，使得神经元的轴突和树突得以显现。
这种染色方法在神经科学研究中有广泛的应用，可以帮助科学家们观察神经元的形态和连接方式。
Giemsa染色Giemsa染色是一种用于染色细胞核和染色体的特殊染色方法。
Giemsa染色可以使得染色体在显微镜下呈现出黑色、灰色和蓝色的带状条纹，有助于研究染色体的形态和结构。
这种染色方法也常用于检测血液细胞的形态和数量，是临床血液学和病理学中常用的染色方法之一。
Masson染色Masson染色是一种用于染色胶原纤维的特殊染色方法。
Masson染色通过在组织中染色三种颜色的染料，将组织中的胶原纤维、细胞核和细胞质进行区分染色。
这种染色方法在研究纤维组织中的胶原纤维含量和排列方式时，特别有用。
以上介绍了几种常见的组织学技术特殊染色方法，它们在生物学和医学研究中起着重要的作用。
通过这些特殊染色方法，科学家们可以更全面地了解组织结构和功能，为疾病诊断和治疗提供有力的支持。
基底膜六胺银染色液
基底膜六胺银染色液简介：基底膜六胺银(methenamine silver)染色是一种经典显示基底膜的方法。
组织经过碘酸氧化，使基底膜内的黏多糖暴露出醛基，醛基把六胺银复原为黑色的金属银。
氯化金可使金属银转变为更稳定的金属金，同时使背景更清晰。
海波可以固定并洗去未复原的银离子。
六胺银染色能清晰地显示基底膜，在肾病变中应用最多，常用来观察肾小球毛细血管基底膜在炎性损伤时如断裂、增生、折叠等形态改变。
组成：自备材料：1、 蒸馏水2、 水浴锅或水浴箱3、 系列乙醇操作步骤(仅供参考)：1、切片脱蜡至水洗。
2、切片入过碘酸溶液氧化15min 。
3、自来水洗、蒸馏水洗。
4、入铁明矾溶液染色。
5、自来水洗、蒸馏水洗。
6、入配制好的六胺银工作液中，水浴染色大约25～30min ，切片呈烟草黄色或黑色为止。
7、入蒸馏水中清洗。
编号 名称DZ0050 6×50ml Storage试剂(A): 过碘酸溶液 50ml 4℃ 避光试剂(B): 铁明矾溶液 50ml RT试剂(C):六胺银工作液C1:六胺银原液 25ml 4℃ 避光 C2:硼酸钠溶液25mlRT临用前，C1、C2等量混合即为六胺银工作液，即配即用。
试剂(D): 氯化金溶液 50ml 4℃ 避光试剂(E): 海波溶液 50ml RT 试剂(F): 淡绿溶液 50mlRT 使用说明书1份8、用氯化金溶液调色1～2min。
9、蒸馏水洗。
10、置于海波溶液1 min。
11、自来水洗。
12、用淡绿溶液复染1 min。
13、自来水洗。
14、乙醇开始脱水，二甲苯透明，中性树胶封封固。
染色结果：肾小球囊基底膜、肾毛细血管球基底膜黑色背景绿色本卷须知：1、实验中所用玻璃器皿，应预先放入洗液浸泡过并冲洗干净，烤干。
2、六胺银工作液配制后可放人温箱中预热，温度要到达60℃时，再放人切片进行染色。
3、配制好的六胺银工作液是一次性的，不能久放。
4、氯化金调色时，一定要在显微镜下观察。
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基底膜染色
一、基底膜的结构
基底膜一般是由纤维的结缔组织，粘多糖和蛋白质所构成，电镜可分为三层，即中间层（电子密度较高的致密层）内层和外层（电子密度较低疏松层）。
基底膜内主要含有IV形胶原蛋白，蛋白多糖和层粘连蛋白，这些物质的存在，给显示基底膜提供了物质基础。
二、显色的方法
(一)．六胺银法（Hexamine silver）Jones六胺银染色法的改良法
I．试剂的配制：
A液：3%乌铬托品（hexamine）
B液：5%硝酸银
C液：5%四硼酸钠（Sodium tetraborate）
II．工作液的配制：
取A液12.5ml，加入B液2.5ml，混合在一起，此时可出现乳白色，搅拌片剂，即可消失，再加入2.5ml 的C液，再加入12.5ml的蒸馏水，即可使用。
操作方法：
①切片脱蜡至水。
②1%的过碘酸氧化切片10min。
③自来水洗，继入蒸馏水洗。
④入工作液于60℃60~90min，于50℃120~180min
⑤蒸馏水洗。
⑥用0.2%的氯化金水溶液调色1min。
⑦自来水洗，蒸馏水洗。
⑧5%硫代硫酸钠固定5min。
⑨自来水流1~2min.
⑩用1%淡绿复染30secd。
⑾脱水，透明，封固。
结果：基底膜呈出深黑色，背景呈现绿色。
(二)．AFOG法
试剂的配制：取苯胺蓝（aniline blue）0.5克溶于100ml的蒸馏水中，煮沸后冷却，再加入桔黄G1克，酸性品红1.5克，用HCC校正pH至1.9，即可使用。
①切片脱蜡至水
②AFOG液染色5min
③自来水洗，95%脱水多采染色
④脱水，透明，封固。
结果：基底膜，胶原纤维显示不同程度的蓝色，红白球及背景呈桔黄色，管型蛋白呈鲜红色。
主要特点：
在一张切片上既可看到深黑色的基底膜和鲜红色的沉淀蛋白，又可看到蓝色的结缔组织，给予某些疾病的诊断和鉴别带来了方便。
三、临床应用：
①可以观察各种疾病的进展和损害程度。
②对膜性肾病可显示增厚的基底膜。
③可以观察某些肿瘤突破基底膜的情况。
④可以对某些疾病作出预后的判断。
⑤可用于卡氏肺囊虫肺炎的诊断。
四、注意事项
①如应用于基底膜的染色，应在切片脱蜡后用苦味酸进行媒染。
②切片浸染时间从染液达60℃算起。
③浸染应以基底膜染色合适为标准。
④浸染液一次性使用。
⑤所用的常备液应于4℃冰箱中存放。
⑥一切器皿须清洁液浸泡。
⑦在六胺银液中的浸染，可用微波加热法。
在银液中的浸染时间为1分钟左右。