溶液各种配制

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常用溶液的配制方法

常用溶液的配制方法

分析化学常用溶液的配制方法乙醇制氢氧化钾试液可取用乙醇制氢氧化钾滴定液0.5mol/L。

乙醇制氨试液取无水乙醇加浓氨溶液使每100ml中含NH3 911g即得。

本液应置橡皮塞瓶中保存。

乙醇制硝酸银试液取硝酸银4g加水10ml溶解后加乙醇使成100ml即得。

乙醇制溴化汞试液取溴化汞2.5g加乙醇50ml微热使溶解即得。

本液应置玻璃塞瓶内在暗处保存。

一氯化碘试液取碘化钾0.14g与碘酸钾90mg加水125ml使溶解再加盐酸125ml即得。

本液应置玻璃瓶内密闭在凉处保存。

N乙酰L酪氨酸乙酯试液取N乙酰L酪氨酸乙酯24.0mg加乙醇0.2ml使溶解加磷酸盐缓冲液取0.067mol/L磷酸二氢钾溶液38.9ml与0.067mol/L磷酸氢二钠溶液61.6ml混合pH值为7.02ml加指示液取等量的0.1甲基红的乙醇溶液与0.05亚甲蓝的乙醇溶液混匀1ml用水稀释至10ml即得。

乙醇制对二甲氨基苯甲醛试液取对二甲氨基苯甲醛1g加乙醇9.0ml与盐酸2.3ml使溶解再加乙醇至100ml即得。

二乙基二硫代氨基甲酸钠试液取二乙基二硫代氨基甲酸钠0.1g加水100ml溶解后滤过即得。

二硝基苯试液取间二硝基苯2g加乙醇使溶解成100ml即得。

二硝基苯甲酸试液取35二硝基苯甲酸1g加乙醇使溶解成100ml即得。

二硝基苯肼试液取24二硝基苯肼1.5g加硫酸溶液1→220ml溶解后加水使成100ml滤过即得。

二乙基二硫代氨基甲酸银试液取二乙基二硫代氨基甲酸银0.25g加氯仿适量与三乙胺1.8ml加氯仿至100ml搅拌使溶解放置过夜用脱脂棉滤过即得。

本液应置棕色玻璃瓶中密塞置阴凉处保存。

二苯胺试液取二苯胺1g加硫酸100ml使溶解即得。

二氨基萘试液取23二氨基萘0.1g与盐酸羟胺0.5g加0.1mol/L盐酸溶液100ml必要时加热使溶解放冷滤过即得。

本液应临用新配避光保存。

稀二硝基苯肼试液取24二硝基苯肼0.15g加含硫酸0.15ml的无醛乙醇100ml使溶解即得。

实验室溶液配制

实验室溶液配制

实验室所需溶液配制1.费休氏试液,购买;2.氢氧化钠溶液,C=0.01mol/l;氢氧化钠分子量40.0,准确称取氢氧化钠固体0.4g溶于200ml蒸馏水中,并在1L容量瓶中定容,即得到上述浓度溶液;3.中性红溶液,C=1%;准确称取中性红固体1g溶于50ml蒸馏水中,并在100ml容量瓶中定容,即得到上述浓度溶液;4.溴百里香酚蓝溶液,C=1%;准确称取溴百里香酚蓝固体1g溶于50ml蒸馏水中,并在100ml容量瓶中定容,即得到上述浓度溶液;5.碘化钾溶液,C=10%;准确称取KI固体50g溶于50ml蒸馏水中,并在500ml容量瓶中定容,即得到上述浓度溶液;6.硫代硫酸钠溶液,C=0.1mol/l;硫代硫酸钠分子量158.11,准确称取硫代硫酸钠固体15.811g溶于200ml蒸馏水中,并在1000ml容量瓶中定容,即得到上述浓度溶液;7.硫酸溶液,C=2mol/l,硫酸分子量98.08,浓度98%时密度约1.84g/ml,准确量取硫酸液体108.78ml稀释与500ml蒸馏水中,向水中加入硫酸而非向硫酸中加水,冷却后在1000ml容量瓶中定容即可得到上述浓度溶液;8.淀粉溶液,C=0.5%;准确称取可溶性淀粉0.5g,溶于50ml水中,并在100ml容量瓶中定容,即得到上述浓度溶液;9.铬酸钾溶液,C=50g/L;准确称取铬酸钾固体50g,溶于500ml水中,并在1000ml容量瓶中定容,搅拌下逐滴加入10%的硝酸银溶液,直至溶液出现棕红的悬浮物为止.静置1昼夜,用干净的滤纸漏斗过滤即可,不一定用饱和硝酸银溶液,用10%硝酸银溶液即可.配制方法:1克硝酸银+10毫升纯水溶解,置于棕色瓶中;10.氯化钠基准试剂,C=0.1mol/l,氯化钠分子量58.5,准确称取氯化钠固,5.85g溶于500ml蒸馏水中,并在1000ml容量瓶中定容,即得到上述浓度溶液;11.硝酸银溶液,C=0.1mol/l,硝酸银分子量169.87,准确称取硝酸银固体8.49g溶于200ml蒸馏水中,并在500ml容量瓶中定容,即得到上述浓度溶液,用前采用基准氯化钠试剂10标定,需保存于棕色试剂瓶中;12.酚酞指示剂,C=0.1%,准确称取酚酞固体0.1g溶于50ml蒸馏水中,并在100ml容量瓶中定容,即得到上述浓度溶液;13.氯化钡溶液,C=10%,准确称取氯化钡固体10g溶于50ml蒸馏水中,并在100ml容量瓶中定容,即得到上述浓度溶液;14.乙醇溶液,C=1%,准确移取乙醇AR1ml与100ml容量瓶中定容,即可得到上述浓度溶液;15.盐酸标准溶液,C=1mol/l,分子量36.46,D154=1.2039.11%,1.1529.57%、1.1020%、1.0510.17%;准确量取39.11%盐酸77.68ml或称取93.216g,稀释与500ml蒸馏水中,向水中加入盐酸而非向盐酸中加水,冷却后在1000ml容量瓶中定容即可得到上述浓度溶液;16.甲基橙指示剂,C=0.1%,准确称取甲基橙固体0.1g溶于50ml蒸馏水中,并在100ml容量瓶中定容,即得到上述浓度溶液;17.邻苯二甲基二辛酯DOP标准液C=100ppm配制:用1ml移液管移取1mlDOPAR加入250ml容量瓶中,并用二氯甲烷稀释至250ml定容,摇匀即可得DOP浓度为4000ppm溶液;用5ml移液管移取浓度为4000ppmDOP溶液2.5ml,加入100ml 容量瓶中,用二氯甲烷稀释至100ml,摇匀即可得浓度为100ppmDOP溶液;18.钼酸铵溶液的配制,C=5%,准确称取钼酸铵固体5g,溶于50ml蒸馏水中,并在100ml容量瓶中定容,即可得到上述浓度溶液;19.硫酸溶液,C=10mol/l,硫酸分子量98.08,浓度98%时密度约1.84g/ml,准确量取硫酸液体543.9ml稀释与300ml蒸馏水中,向水中加入硫酸而非向硫酸中加水,冷却后在1000ml容量瓶中定容即可得到上述浓度溶液;20.氢氧化钠溶液,C=5%,准确称取氢氧化钠固体5g,溶于50ml蒸馏水中,并在100ml容量瓶中定容,即可得到上述浓度溶液;21.氯化亚锡溶液,C=10%,准确称取氯化亚锡固体5g,溶于50ml蒸馏水中,并在100ml容量瓶中定容,即可得到上述浓度溶液,溶液配置完成后向其中投入锡粒一颗并保存于大口瓶中;22.二氧化硅贮备液,1ml相当于1.0mg二氧化硅:准确称取分析纯硅酸钠4.730g分子式Na2SiO3·9H2O,分子量284.22溶于200ml蒸馏水中,并与1L容量瓶中定容,保存于塑料瓶中;23.二氧化硅工作液,C=20ppm,用移液管移取二氧化硅贮备液20ml与1L容量瓶中定容,即可得上述浓度溶液,保存于塑料瓶中;24.硫酸溶液,C=1mol/l,硫酸分子量98.08,浓度98%时密度约1.84g/ml,准确量取硫酸液体54.4ml或称取100.096g稀释与500ml蒸馏水中,向水中加入硫酸而非向硫酸中加水,冷却后在1000ml容量瓶中定容即可得到上述浓度溶液;25.硫代硫酸钠溶液,C=0.05mol/l,硫代硫酸钠分子量158.11,准确称取硫代硫酸钠固体7.9055g溶于200ml蒸馏水中,并在1000ml容量瓶中定容,即得到上述浓度溶液;26.硼酸溶液,C=2%,准确称取硼酸固体2g,溶于50ml蒸馏水中,并在100ml容量瓶中定容,即可得到上述浓度溶液,保存于塑料大口瓶中;27.氢氧化钠溶液,C=40%,准确称取硼酸固体40g,溶于50ml蒸馏水中,冷却后在100ml容量瓶中定容,即可得到上述浓度溶液,保存于塑料大口瓶中或胶塞玻璃瓶中;=1.2039.11%,1.1529.57%、28.盐酸溶液,C=0.05mol/l,分子量36.46,D1541.1020%、1.0510.17%;准确量取39.11%盐酸3.884ml或称取4.661g,稀释与500ml蒸馏水中,向水中加入盐酸而非向盐酸中加水,冷却后在1000ml容量瓶中定容即可得到上述浓度溶液;29.甲基红乙醇溶液,C=1%,准确称取甲基红固体1g,溶于50ml蒸馏水中,并在100ml容量瓶中定容,即可得到上述浓度溶液;30.溴甲酚绿乙醇溶液,C=1%,准确称取溴甲酚绿固体1g,溶于50ml蒸馏水中,并在100ml容量瓶中定容,即可得到上述浓度溶液;31.甘油水溶液,C=2%,准确移取甘油AR2ml与100ml容量瓶中定容,即可得到上述浓度溶液;32.盐酸溶液,C=6mol/l,分子量36.46,D15=1.2039.11%,1.1529.57%、1.1020%、41.0510.17%;准确量取39.11%盐酸466.08ml或称取559.296g,稀释与300ml蒸馏水中,向水中加入盐酸而非向盐酸中加水,冷却后在1000ml容量瓶中定容即可得到上述浓度溶液;33.氢氧化钠溶液,C=6mol/l,氢氧化钠分子量40.0,准确称取氢氧化钠固体240g溶于500ml蒸馏水中,并在1L容量瓶中定容,即得到上述浓度溶液;34.氢氧化钠溶液,C=1mol/l,氢氧化钠分子量40.0,准确称取氢氧化钠固体40g溶于500ml蒸馏水中,并在1L容量瓶中定容,即得到上述浓度溶液;。

溶液配置

溶液配置

实验常用试剂配置1.铜标准贮备溶液:称取1.000±0.005g金属铜(纯度99.9%)置于150ml烧杯中,加入20ml1+1硝酸,加溶解后,加入10ml1-1硫酸并加热至冒白烟,冷却后,加水溶解并转入1L容量瓶中,用水稀释至标缓。

此溶液每毫升含1.00mg铜。

2.铜标准溶液:吸取5.00ml铜标准贮备溶液于1L容量瓶中,用水稀至标线。

此溶液每毫升含5.0μg铜。

3.二乙基二硫代氨基甲酸钠0.2%(m/v)溶液:称取0.2克二乙基二硫代氨基甲酸钠三水合物(C5H10NS2Na •3H2O,或称铜试剂cupral)溶于水中并稀释至100ml,用棕色玻璃瓶贮存,放于暗处可用两星期。

4.EDTA-柠檬酸铵-氨性溶液:取12g乙二胺四乙酸二钠二水合物(Na-EDTA•2H2O)、2.5g柠檬酸铵[(NH4)3•C6H5O7],加入100ml水和200ml浓氨水中溶解,用水稀释至1L,加入少量0.2%二乙基二硫代氨基甲酸钠溶液,用四氯化碳萃取提纯。

4.1EDTA-柠檬酸铵溶液:将5g乙二胺四乙酸二钠二水合物(Na2-EDTA•2H2O)20g柠檬酸铵[(NH4)3•C6H5O7]溶于水中并稀释至100ml,加入4滴甲酚红指示液,用1+1氨水调至PH=8~8.5(由黄色变为浅紫色),加入少量0.2%二乙基二硫代氨基甲酸钠溶液,用四氯化碳萃取提纯。

5.氯化铵-氢氧化铵缓冲溶液将70g氯化铵(NH4Cl)溶于适量水中,加入570ml浓氨水,用水稀释至1L。

6.甲酚红指示液0.4g/L:称取0.02克甲酚红(C21H18O5S)溶于50ml195%(v/v)乙醇中。

7.碘溶液C=0.05mol/L:称12.7g碘片,加到含有25g碘化钾+少量水中,研磨溶解后用水稀释至1000mL。

8.丁二酮肟[(CH3)2C2(NOH)2]溶液5g/L:称取0.5g丁二酮肟溶解于50mL浓氨水中,用水稀释至100mL9.丁二酮肟乙醇溶液,10g/L:称取1g丁二酮肟,溶解于100mL乙醇(3.4)中。

实验室常用溶液配制

实验室常用溶液配制

实验室常用溶液配制实验室常用溶液的配置Amp+/Kan+:贮存液浓度为50mg/mL称取500mg于10mL超纯水中溶解,抽滤后1mL分装到离心管中,于-30℃冻存X-gal:贮存浓度为20mg/mL称取20mg X-gal溶于1mL二甲基甲酰胺中,-30℃中用锡箔纸包裹后避光保存,不需要过滤除菌IPTG:贮存浓度为0.84mol/L称取2g IPTG溶于8mL超纯水中,用水定容到10mL,用0.22um 的一次性滤过器过滤除菌,1mL分装到离心管中并于-30℃保存CaCl2:贮存浓度为1mol/L称取1.11g CaCl (或者CaCl:2H2O 1.4698g)溶于8mL超纯水中,定容到10mL,用0,22um的一次性滤过器过滤除菌,1mL分装到离心管中,并于-30℃保存LB培养基:胰蛋白胨(Tyrtone)10g/L酵母提取物(Yeast Extraction)5g/L氯化钠10/L根据经验用NaOH调节PH为7.2-7.6,然后高压蒸汽灭菌,注意及时从灭菌锅中取出无DNA酶的RNA酶:将胰RNA酶(RNA酶A)溶于10mmol/L Tris-Cl(PH7.5)、15mmol/L NaCl 中,配成10mg/mL 的浓度,于100℃加热15min,缓慢冷却至室温,分装成小份保存于-20℃Bradford 贮存液95%乙醇100mL88%磷酸200mLG 250 0.35g室温下可储存,一般4℃Bradford 工作液Bradford贮存液30mL双蒸水425mL95%乙醇15mL88%磷酸30mL储存于4℃超声破碎缓冲液KCl 300 mM 22.37 gKH2PO450 mM 6.81 gEDTA 1 mM 0.292 g (EDTA-2Na-2H2O) 0.372 g定容至1 L,调pH至8.0包涵体洗涤液KCl 300 mM 22.37 gKH2PO4 50 mM 6.81 gEDTA 5 mM 1.46 g (EDTA-2Na-2H2O) 1.86 g尿素 2 M 120 gTriton X-100 0.5% 5 ml脱氧胆酸钠盐0.1% 1 g定容到1 L 调pH至8.0匀浆缓冲液(pH=7.5)成分:20mM HEPES 0.002mol=0.476g 加入0.952g1.5mM MgCl20.00015mol=0.0036g 加入0.0072g 0.2mM EDTA 0.00002mol=0.00584g 加入0.01168g 0.1M NaCl 0.01mol=0. 58g 加入1.16g0.5mM 钒酸钠0.00005mol=0.0092g 加入0.0184g 加100mL水进行溶解,NaOH调pH至7.50.2mM DTT 总体积500μL加入0.1μL0.4mM PMSF 总体积500μL加入20μL1%SDS 加入50μL 10% SDS其中DTT和PMSF匀浆之前加入,SDS匀浆之后离心之前加入DTT配成1M母液,溶于0.01M乙酸钠(pH=5.2)中,过滤除菌PMSF配成10mM母液,溶于异丙醇10*PBSNaCl 80.0669 gKCl 2.0129 gNa2HPO414.1960 gKH2PO4 2.4496 g水定容至1L,使用时稀释10倍,用NaOH调pH至7.4Start with 800 mL of distilled water to dissolve all salts. Adjust the pH to 7.4 with HCl. Add distilled water to a total volume of 1 liter. The resultant 1x PBS should have a final concentration of 10 mM PO43?, 137 mM NaCl, and 2.7 mM KClIf used in cell culturing, the solution can be dispensed into aliquots and sterilized by autoclaving (20 min, 121°C, liquid cycle). Sterilization may not be necessary depending on its use. PBS can be stored at room temperature or in the fridge. However, concentrated stock solutions may precipitate when cooled and should bekept at room temperature until precipitate has completely dissolved before use.转膜缓冲液(含有SDS)1L剂量甘氨酸 2.9gTris 5.8gSDS 0.37g甲醇200mL水800mL10×蛋白电泳缓冲液1L剂量Tris 碱(Mr 121.14) 30.2g甘氨酸(Mr 75.07) 188gSDS (Mr 288.38) 10 g加水至1L用时稀释10倍即可30%丙稀酰胺1L 剂量丙烯酰胺290gN,N’-亚甲基双丙稀酰胺10g溶于600ml蒸馏水中,加热至37℃溶解,补足体积至1L,过滤,且pH不大于7.01 M Tris-Cl(pH6.8)60.55 g Tris 碱溶解于400ml 蒸馏水,溶解后调pH值,总体积为500ml1.5 M Tris-Cl(pH8.8)90.83g Tris 碱溶解于400ml 蒸馏水,溶解后调pH值,总体积为500ml。

溶液配制方法

溶液配制方法

溶液配制方法一、指示剂配制1.0.3%二甲酚橙指示剂:称取0.15g二甲酚橙,加5ml无水乙醇,用水稀释至50ml。

2.5g/L液体铬黑T:称取0.5g铬黑T和2.0g氯化羟胺,溶于乙醇,用乙醇稀释至100ml,此使用前配备。

贮存于100ml棕色试剂瓶中。

3.固体铬黑T:称取1.0g铬黑T和100g氯化钠研磨混合均匀,贮存于100ml棕色广口瓶中备用。

4.1%紫脲酸胺:1g紫脲酸胺与100g固体氯化钠混合,研磨,烘干。

5.1g/L酚酞指示剂:称取0.1g酚酞指示剂,加乙醇100ml溶解混合。

6.10 g/L酚酞指示剂:称取1.0 g酚酞指示剂,加乙醇100ml溶解混合。

7.甲基红—溴甲酚绿指示剂:1份2g/L甲基红乙醇溶液与三份1g/L溴甲酚绿乙醇溶液混合。

8.甲基红-亚甲基蓝指示剂:一份甲基红乙醇溶液(1g/L)与两份亚甲基蓝乙醇溶液(1g/L)混合。

9.品红试剂(0.15%):称取0.15g酸性品红,加75ml水,加热到品红溶解,冷却到室温,加4ml盐酸搅拌。

再加15ml10%亚硫酸钠溶液搅匀,放置过夜,加活性炭过滤于100ml容量瓶中。

二、标准溶液的配制1.钴标准溶液:称取3.000g金属钴(99.98%)置于250ml烧杯中,加少量蒸馏水润湿,盖上表面皿,缓慢加入20ml硝酸,加热溶解完全后,洗表面皿及烧杯壁于烧杯中,移入1000ml容量瓶中,用蒸馏水稀释至刻度,摇匀。

此溶液1ml含钴3.000mg。

2.铁氰化钾标准溶液:C﹝K3Fe(CN)6﹞=0.03mol/L,称取9.9g铁氰化钾溶于水中,并稀释至1000ml,摇匀,贮存于棕色瓶中。

3.硫酸钴标准溶液:C(CoSO4)=0.15mol/L,称取4.2g硫酸钴(CoSO4·7H2O)溶于水中,并稀释至1000ml,摇匀,此溶液1ml含钴大约0.9mg。

4.锂标准贮存溶液:称取 5.3228g光谱纯级碳酸锂(预先于110℃、烘2个小时置于干燥器中冷却)置于250ml烧杯中,加少量水润湿,盖上表面皿,沿杯壁缓慢加入15ml盐酸,待溶解后转入1000ml容量瓶中,用蒸馏水定容。

65种溶液与指示剂的配制

65种溶液与指示剂的配制

65种溶液、指示剂配制方法1、淀粉指示液1.1称1g淀粉加入100mL H2O中煮沸完全溶解,冷却后加入几滴氯仿。

1.2称可溶性淀粉0.5g,加5mL H2O搅拌后,缓缓倾入100mL沸水中,边加边搅拌,继续煮沸2分钟,放冷,倾取上层清液。

此指示液应临用新配。

2、酚酞指示液:1g酚酞溶于80mL酒精,以酒精稀释到100mL,变色范围PH8.3-10.0,无色变红色3、靛红指示液:0.5g靛红+50%的酒精,以H2O稀释至100mL。

4、石蕊指示液:称10g石蕊粉末,加40mL乙醇,回流煮沸1小时,静置,倾去上层清液,再用同以方法处理2次,每次用乙醇30mL,残渣用水10mL洗涤,倾去洗液,再加H2O50mL 煮沸,放冷,滤过,即得。

变色范围:PH4.5-8.0,红色变蓝色。

5、间苯二酚指示液:0.2间苯二酚溶于20mL丙酮,以H2O稀释至100mL,摇匀。

6、甲基红指示液5.1称0.1g甲基红溶解于60mL酒精,以H2O稀释至100mL。

5.2称0.1g甲基红,加7.4mL 0.05mol/L氢氧化钠溶液,使溶解,再加H2O稀释至200mL,变色范围:PH4.2-6.3,红色变黄色。

7、甲基橙指示液:称0.1g甲基橙溶解于100mL热H2O中,若有不溶物应过滤,变色范围:PH3.2-4.4,红色变黄色。

8、二甲酚橙指示剂:称0.2g干燥的二甲酚橙,加入100g无碘氯化钠,研匀,可长期保存。

9、二甲酚橙指示液:称0.2g二甲酚橙,以H2O稀释至100mL,摇匀,变色范围:PH3.2-4.4,红色变黄色。

10、溴酚蓝指示液:称0.1g溴酚蓝溶解于3.0mL0.05N氢氧化钠溶液中,使溶解,以H2O稀释至200mL,摇匀,变色范围:PH2.8-4.6,黄色变蓝绿色。

11、铬黑T(简称EBT)10.1 称10g干燥的分析纯氯化钠研细,加入0.1g铬黑T,再研匀,可长期保存。

10.2 称0.5g铬黑T,加入盐酸羟胺4.5g,加酒精100mL溶解。

标准溶液配制

标准溶液配制

标准液配制资料指示剂配制1、PP指示剂的配制:准确称取AR级PP指示剂1g,溶于60ml无水乙醇,加纯水稀释至100ml。

2、0.1%溴甲酚蓝指示剂:称取0.1g溴甲酚蓝于2.88ml, 0.05N NaOH 溶液中,用水稀释至100ml。

3、0.1%甲酚红的配制:准确称取AR级甲酚红指示剂0.1g,溶于50ml无水乙醇中,加纯水稀释至100ml。

4、甲基橙指示剂:称取0.1克甲基橙溶于100ml热水中.如有不溶物应过滤.5、酚酞指示剂:称取1克酚酞溶于80ml乙醇中,溶解加水稀释至100ml.6、淀粉指示剂:称取5克可溶性淀粉,以少量水调成浆,倾入100ml沸水中,搅拌均匀冷却.7、PAN指示剂:称取0.1克PAN用酒精溶解后,加水稀释至100ml.8、MX指示剂:称取0.1克紫尿酸铵和100克氯化钠混合均匀.9、溴酚蓝指示剂:称取1克溴酚蓝,加酒精稀释至100ml.10、铬酸钾指示剂:称取5克铬酸钾,溶于100ml纯水中.11、醋酸铵缓冲液:称取100克醋酸钠,加入50ml醋酸溶解,加水稀释至1L。

12、甲基红指示剂:称取0.1克溶于18.6ml, 0.02L/L氢氧化钠中,用水稀释至250ml.标准溶液配制与标定标准一、1、 0.1N Na2S2O3的配制:a.准确称取分析纯Na2S2O3、5H2O 24.8g,溶于200ml纯水中。

b.将此溶液煮沸10min冷却,用纯水稀释并溶至1L。

2、0.1N Na2S2O3的标定:a.移取标准0.1N I220ml,加50ml纯水b.用配好的0.1N Na2S2O3溶液滴定至淡黄色,再加5ml淀粉,继续用Na2S2O3溶液滴至无色为V。

c.Na2S2O3(N)=(0.1×20)/V二、1、0.1N HCL的配制 :a.移取分析纯HCL 8.6ml于溶量瓶b.加纯水并定溶至1L2、0.1N HCL的标定:a.移取标准0.1N NaOH 20ml,加水200ml,加3~5滴PP指示剂,用配好的HCL溶液滴至无色为V。

常用溶液的配制

常用溶液的配制

常用溶液的配制一、常规溶液(一)1/15mol/L PBS(磷酸缓冲液Phosphate Buffer Solution,PBS)甲液:1/15mol/L Na2HPO4溶液Na2HPO49.465g蒸馏水加至1000ml乙液:l/15mol/L KH2PO4溶液KH2P049.07g蒸馏水加至1000m1分装在棕色瓶内,于4℃冰箱中保存,用时甲、乙两液各按不同比例混合,即可得所需pH的缓冲液,见下表:pH 甲液ml 乙液mI pH 甲液ml 乙液mI5.29 5.595.916.24 6.47 6.64 2.55.010.020.030.040.097.595.090.080.070.060.06.816.987.177.387.738.0450.060.070.080.090.095.050.040.030.020.010.05.0(二)0.3%台盼兰染液称取台盼兰(Trypan blue)粉0.3克,溶于100ml生理盐水中,加热使之完全溶解,用滤纸过滤除渣,装入瓶内室温保存。

(三)0.5%酚红指示剂酚红0.5g0.1N(0.4%)NaOH 15ml双蒸水85ml将0.5克酚红置研钵中,缓漫滴加0.1NNaOH溶液边加边磨,并不断吸出已溶解的酚红液,直至全部溶解,然后加入85ml双蒸水,颜色为深红,经粗滤纸过滤后使用,室温保存。

(四)5.6%NaHCO3溶液称NaHCO35.6克,溶于100ml蒸馏水中,室温保存即可(如需要也可10磅15分钟高压灭菌,4℃冰箱保存)(五)10μg/ml秋水仙素秋水仙素lOmg生理盐水100ml装入茶色瓶中,为贮备液,4℃冰箱中保存。

甩时取贮备液1ml加生理盐水9ml即可。

(六)0.4%KCl-0.4%柠檬酸钠低渗液将0.4%KCl和0.4%柠檬酸钠两液等量混合即可,室温保存。

(七)2%柠檬酸钠称取柠檬酸钠2克,加100ml双蒸水即可,室温保存。

(八)0.2%次甲基兰染液称次甲基兰(Methylene blue)0.2克,加蒸馏水100ml,室温保存。

化学实验中的溶液配制方法有哪些?

化学实验中的溶液配制方法有哪些?

化学实验中的溶液配制方法有哪些?
在化学实验中,溶液的配制是一项常见的操作。

下面列举了化学实验中常用的溶液配制方法:
1. 直接溶解法:将固体试剂直接加入溶剂中,并充分搅拌使其溶解。

这种方法适用于溶解度较高的固体试剂,如盐类、糖类等。

2. 加热溶解法:对于溶解度较低的固体试剂,可以使用加热溶解法。

首先将溶剂加热至适当温度,然后慢慢将固体试剂加入,并充分搅拌直至溶解。

3. 体积配制法:对于需要较精确配制浓度的溶液,可以使用体积配制法。

首先确定所需浓度和体积,然后按照比例将相应的溶质和溶剂加入中,最后补足至目标体积。

4. 稀释法:当需要配制低浓度溶液时,可以使用稀释法。

首先配制高浓度溶液,然后再将其逐渐稀释至目标浓度。

5. 混合法:某些溶液需要多个试剂的配制,可以使用混合法。

首先将其中一个试剂溶解,然后再逐渐加入其他试剂,并充分搅拌
直至溶解。

在进行溶液配制时,还需要注意以下几点:
- 选择适当的溶剂:根据试剂的性质和溶解度选择合适的溶剂,确保试剂能够完全溶解。

- 控制溶液的pH值:对于具有酸碱性质的试剂,需要通过添
加酸或碱调节溶液的pH值,以达到所需的条件。

- 精确称量试剂:在进行体积配制或稀释法时,需要精确称量
试剂和溶剂,以确保配制出准确的浓度。

总之,化学实验中的溶液配制方法多种多样,根据具体实验要
求选择合适的配制方法,并严格遵循相应的操作步骤,在实验中保
证安全和准确性。

溶液的配制

溶液的配制

1%酚酞指示剂溶液:10g的酚酞加少量无水乙醇溶解,加乙醇定容至1L ,配制好了之后只需摇匀,使之形成均匀溶液。

中性无水乙醇;乙醇对于酚酞显示酸性,中性乙醇就是用氢氧化钠滴定让他对酚酞显示中性。

碘化钾溶液(100g/L):不含碘酸盐或游离碘;称取100g碘化钾,加入适量的水容解,定容至1L。

0.5%淀粉溶液:将5g可溶性淀粉在30mL水中混合,加此混合液于1000mL 沸水中煮沸3min并冷却。

溶剂:环己烷和冰乙酸等体积混合液。

氯仿-冰乙酸混合液:取氯仿40ml加冰乙酸60ml,混匀。

饱和碘化钾溶液:取碘化钾10g,加水5ml,贮于棕色瓶中。

0.01mol/L硫代硫酸钠标准溶液:吸取约0.1mol/L的硫代硫酸钠溶液10ml,注入100ml容量瓶中,加水稀释至刻度。

氢氧化钠(400g/l):称取400g氢氧化钠,加入适量的水容解,定容至1L。

硼酸(20g/l):称取20g硼酸,加入适量的水容解,定容至1L。

甲基红乙醇(1g/l):称取1g甲基红,加入适量的乙醇容解,用乙醇定容至1L。

嗅甲酚绿乙醇(1g/l):称取1g嗅甲酚绿,加入适量的乙醇容解,用乙醇定容至1L。

盐酸(1+1):量取5000ml盐酸缓慢加入500ml的水。

20%盐酸:量取550ml盐酸,加入450ml水。

10%氨水:量取100ml氨水,加入900ml水中。

5g/L铬黑T指示剂:量取5g铬黑T加入少量的水溶解,加水定容至1L。

PH≈10氨-氯化铵缓冲液:20%硫酸:5%铬酸钾:量取50g的铬酸钾溶加少量水溶解,加水定容至1L。

海砂:取用水洗泥土的海砂或河砂,先用盐酸(1+1)煮沸0.5h,用水洗至中性,再用氢氧化钠溶液(240g/l)煮沸0.5h,用水洗至中性,经100℃±5℃干燥备用。

磷脂饱和丙酮溶液的配制取经丙酮洗除油脂等丙酮可溶物的磷脂约2g,在50ml烧杯中用10ml石油醚溶解,加25ml丙酮使磷脂析出。

通过G3玻璃过滤坩埚抽滤,用80ml丙酮分四次洗涤磷脂,最后尽量抽除残留丙酮。

常用溶液及其配制

常用溶液及其配制

常用溶液及其配制1.非电解质溶液常用5%~10%葡萄糖液,前者为等渗液,后者为高渗液。

但由于葡萄糖输入体内后被迅速代谢成二氧化碳和水同时释放能量,或转化糖原储存,不能维持有效渗透压,故输液时不计算其张力,只用于供给水分及能量。

2.电解质溶液(1)0.9%氯化钠(生理盐水):每升含Na+和Cl-各为154mmol,与血浆离子渗透压相似为等渗液,但钠、氯之比为1:1,与人体血浆钠(142mmol)、氯(103mmol)的比例不同(血浆钠、氯比例约3:2),若大量或长期单独补给可使血氯增高,造成高氯性酸中毒。

若用2份生理盐水和1份1.4%碳酸氢钠,配成2:1溶液,则钠氯之比为3:2较符合血浆。

(2)碱性液体:常用于纠正酸中毒也可配置其他溶液。

①1.4%(1/6M)碳酸氢钠是等渗液,成品为5%,用5%~10%葡萄糖稀释3.5倍后,即为等渗液。

1.4%碳酸氢钠4ml/kg或5%碳酸氢钠1ml/kg,可提高二氧化碳结合力1mmol/L,此为小儿纠酸的首选。

②11.2%乳酸钠,稀释6倍,浓度1.87%(1/6M)时为等渗液。

乳酸钠需在有氧情况下,经肝脏分解产生HCO3-而发挥作用,故小儿期纠酸不宜作为首选。

(3)10%氯化钾:纠正低血钾用。

3.混合溶液将几种液体按不同比例配制成各种混合溶液,使之更适合于不同性质脱水补液的要求。

(1)2:1等渗液:为2份生理盐水与1份1.4%碳酸氢钠或1.87%乳酸钠。

该液体有利于补充血容量,常用于低渗性脱水或重度脱水的扩容。

(2)4:3:2液:为4份生理盐水、3份5%~10%葡萄糖液、2份1.4%碳酸氢钠或1.87%乳酸钠。

2/3张液。

常用于中度以上或低渗性脱水。

(3)2:3:1液:为2份生理盐水、3份5%~10%葡萄糖液、1份1.4%碳酸氢钠或1.87%乳酸钠。

1/2张液。

常用于轻、中度等渗性脱水。

(4)维持液:为4份5%~10%葡萄糖液、1份生理盐水,并含0.15%氯化钾的混合液。

各种化学试剂标准溶液的配制

各种化学试剂标准溶液的配制

常用试剂的配制一、标准溶液的配制1、硫酸(H 2SO 4)溶液的配制:1000mL 浓度c (1/2H 2SO 4)=0.1mol/L ,即c (H 2SO 4)=0.05mol/L 的硫酸溶液的配制:取3mL 左右的浓硫酸缓缓注入1000mL 水中,冷却,摇匀。

新配制的硫酸需要标定,其标定方法如下:称取于270-300 ℃高温炉中灼烧至恒重的工作基准试剂无水碳酸钠0.2g ,溶于50mL 水中,加10滴溴甲酚绿-甲基红指示液,用配制好的硫酸溶液滴定至溶液由绿色变为暗红色,煮沸2min ,冷却后继续滴定至溶液再呈暗红色。

同时做空白试验(取50mL 水,加10滴溴甲酚绿-甲基红指示液,同样用硫酸溶液滴定至溶液由绿色变为暗红色,煮沸2min ,冷却后继续滴定至溶液再呈暗红色)。

计算公式为:()M V V m SO H c 2142100021-⨯=⎪⎭⎫ ⎝⎛ 式中:m :无水碳酸钠的质量,g ;V 1:滴定时所用的硫酸的体积,mL ;V 2:空白滴定时所用的硫酸的体积,mL ;M :无水硫酸钠的相对分子质量,g/mol ,[M (1/2Na 2CO 3)=52.994)]。

测定氨氮时,氨氮含量的计算:()V M V V 10001401⨯⨯⨯-=氨氮式中:氨氮:氨氮含量,mg/L ;V 1:滴定水样时所用的硫酸的体积,mL ;V 2:空白滴定时所用的硫酸的体积,mL ;M :硫酸溶液的浓度,mol/L ;V :水样的体积, mL 。

2、重铬酸钾(K 2Cr 2O 7)溶液的配制1000mL 浓度c (1/6K 2Cr 2O 7)=0.2500mol/L ,即c (K 2Cr 2O 7)=0.0417 mol/L 的重铬酸钾溶液的配制:称取12.258g 于120 ℃下干燥2h 的重铬酸钾溶于水中,并移入容量瓶中,定容至1000mL ,摇匀,备用。

3、硫酸亚铁铵标准溶液的配制:1000mL 0.1 mol/L 硫酸亚铁铵标准溶液的配制:称取39.5g 硫酸亚铁铵溶于水中,边搅拌边缓慢加入20mL 浓硫酸,冷却后移入1000 mL 容量瓶中,加水稀释至刻度线,摇匀。

标准溶液、试液的配制

标准溶液、试液的配制

附:标准溶液、试液等的配制方法1、溴试液取溴2~3ml,置用凡士林涂塞的玻璃瓶中,加水100ml,振摇使成饱和的溶液,即得。

本液应置暗处保存。

2、标准氯化钠溶液称取氯化钠0.165g,置1000ml置瓶中,加水适量使溶解并稀释至刻度,摇匀,作为储备液。

临用前,精密量取贮备液10ml,置100ml量瓶中,加水稀释至刻度,摇匀,即得。

3、标准硫酸钾溶液称取硫酸钾0.181g,置1000ml量瓶中,加水适量使溶解并稀释至刻度,摇匀,即得。

4、氯化钙试液取氯化钙7.5g,加水使溶解成100ml,即得。

5、氨试液取浓氨溶液400tnl,加水使成1000ml,即得。

6、碱性酒石酸铜试液液1:取硫酸铜结晶6.93g,加水使溶解成100ml;液2:取酒石酸钾钠结晶34.6g与氢氧化钠10g,加水使溶解成100ml。

用时将两液等量混合,即得。

7、草酸铵试液称取草酸铵3.5g,加水使溶解成100ml,即得。

8、标准铁溶液称取硫酸铁铵0.863g ,置1000ml量瓶中,加水溶解后,加硫酸2.5ml,用水稀释至刻度,摇匀,作为贮备液。

临用前,精密量取贮备液10ml,置100ml 量瓶中,加水稀释至刻度,摇匀,即得。

9、酚酞指示液取酚酞1g,加乙醇100ml使溶解,即得。

10、标准铅溶液称取硝酸铅0.1599g,置1000ml量瓶中,加硝酸5ml与水50ml溶解后,用水稀释至刻度,摇匀,作为贮备液。

精密量取贮备液10ml,置100ml量瓶中,加水稀释至刻度,摇匀,即得。

本液仅供当日使用。

配制与贮存用的玻璃容器均不得含铅。

11、醋酸盐缓冲液(pH3.5)取醋酸铵25g,加水25ml溶解后,加7mol/L盐酸溶液38ml,用2mol/L盐酸溶液或5mol/L氢氧化钠溶液准确调节p H值至3.5(电位法指示),用水稀释至100ml,即得。

12、标准砷溶液称取三氧化二砷0.132g,置1000ml量瓶中,加20%氢氧化钠溶液5ml溶解后,用适量的稀硫酸中和,再加稀硫酸10ml,用水稀释至刻度,摇勻,作为贮备液。

溶液的配制(要点)

溶液的配制(要点)

溶液的配制钻采院钻井液公司溶液的配制1.亚甲基蓝溶液:c=0.01mol/L称取 1.0000g亚甲基蓝在93±3℃下烘至恒重,冷却,称重。

配制1000mL溶液所需要的亚甲基蓝按下式计算取样重量=3.74×0.855÷干样重量2.双氧水:φ(H2O2)=3%市售双氧水(30%)500mL定容至5000mL水中。

3.硫酸溶液:c(1/2H2SO4)=2.5mol/L量取150mL浓硫酸溶于850mL水中。

4.硝酸银溶液:c(AgNO3)=0.282mol/L称取硝酸银47.9g溶于水中,定容1000mL,储存于棕色瓶中。

5.四苯硼酸钠溶液称取四苯硼酸钠8.75g溶于水中,加入10~12gAI(OH)3搅拌10min,过滤,滤液中加2mL2%NaOH,加水定容1000mL。

6.QAS溶液称取1.165g溴化十六烷基溴化铵,加水定容1000mL。

7.NaOH溶液:w(NaOH)=20%称取20gNaOH加80mL水。

8.氯化钡-氯化镁混合液称取 2.4g二水合氯化钡和 2.0g六水合氯化镁溶于水中,定容至1000mL。

9.次氯酸钠溶液:w(NaClO)=5.25%)按市售浓度重新配制成 5.25%。

用500mL10%氯酸钠(又名安替福民)+452mL水配制而成。

10.三乙醇胺溶液(1:2)按体积比1:2的三乙醇胺、水混合。

11.氨缓冲溶液(pH=10)称取67.5g氯化铵溶于570mL氨水中,用水定容至1000mL。

pH=12 用20%或4%NaOH调pH=12~13。

12.酚酞指示剂(5g/L)称取0.5g酚酞溶于95%的乙醇中,稀释至100mL。

13.甲基橙指示剂(1g/L)称取0.1g甲基橙溶于70℃水中,冷却,稀释至100mL。

14.铬黑T指示剂(5g/L)称取0.5g 铬黑T,溶于40mL三乙醇胺,加水稀释至100mL。

15.钙指示剂钙指示剂与氯化钠以1:100(w/w)混合研磨均匀,配成固体试剂。

常用溶液的配制方法

常用溶液的配制方法

常用溶剂的配制方法1.磷酸缓冲液:0.15M,pH=7.4磷酸缓冲液:KH2PO4:2.041g+100ml水K2HPO4·3H2O:10.3g+300mL水两液混合即成400mL,0.15M,pH=7.4的磷酸缓冲液0.2mol/L 不同pH的磷酸缓冲液:先配制0.2 mol/L的磷酸二氢钾溶液和0.2 mol/L的磷酸二氢钾溶液,然后按下表配制:2.硼酸缓冲液0.15M,pH=8.2硼酸缓冲液:四硼酸钠溶液:2g+35 mL水硼酸溶液:3.246g硼酸+350 mL水两液混合即成700 mL,0.15M,pH=8.2的硼酸缓冲液0.2 mol/L(硼酸根),不同pH的硼酸缓冲液:先配制0.2 mol/L的硼酸溶液和0.05 mol/L的四硼酸钠溶液,然后按下表配制:3.甘氨酸-盐酸缓冲液:0.2 mol/L0.2 mol/L甘氨酸溶液(15.01g/L)4.柠檬酸缓冲液:0.1mol/LC6H8O7·H2O:0.1mol/L 溶液为21.01g/LNa3C6H5O7·2H2O:0.1mol/L溶液为29.41g/L5.Tris-HCl缓冲液:0.1mol/L100mL0.1mol/L三羟甲基氨基甲烷(Tris)溶液与一定量的0.1mol/L盐酸混匀,可得0.1mol/L,不同pH的缓冲液。

200mL 0.1M Tris(2.42g)加入0.1M HCl 24mL→pH=9,0.1M Tris-HCl buffer 6.醋酸缓冲液:0.2mol/L0.2mol/L醋酸钠:27.22g三水醋酸钠(无水的为16.4g)+1L水0.2mol/L醋酸:11.55mL冰醋酸+1L水7.碳酸缓冲液:0.1 mol/L(Ca2+、Mg2+存在时不得使用)0.1 mol/L MES缓冲液:1.921gMES+100mL水,pH=4.098.电泳溶液:电泳缓冲液:3gTris碱、14.4g甘氨酸和1gSDS溶于水中,调pH至8.3左右,加水定容至1L。

溶液配制

溶液配制

所有溶液配制方法1、氢氧化钠(钾)标准滴定溶液1.1配制称取氢氧化钠110g或氢氧化钾154g,溶于100 mL无二氧化碳的水中,摇匀,注人聚乙烯容器中,密闭放置至溶液清亮。

按下表的规定,用塑料管量取上层清液,用无二氧化碳的水稀释至1000mL,摇匀。

1.2标定按表2的规定称取于105℃~110℃电烘箱中干燥至恒重的工作基准试剂邻苯二甲酸氢钾,加无二氧化碳的水溶解,加2滴酚酞指示液(10g/L),用配制好的氢氧化钠溶液滴定至溶液呈粉红色,并保持30s。

同时做空白试验。

氢氧化钠标准滴定溶液的浓度[c(NaOH)],数值以摩尔每升(mol/L)表示,按式(1)计算:式中:m—邻苯二甲酸氢钾的质量的准确数值,单位为克(g);V1—氢氧化钠溶液的体积的数值,单位为毫升(mL) ;V2—空白试验氢氧化钠溶液的体积的数值,单位为毫升(mL) ;M—邻苯二甲酸氢钾的摩尔质量的数值,为204.22 g/mol。

注意事项:1.蒸馏水一定要煮沸,以确保CO2被除净,否则所配的溶液不稳定,浓度易变化;2.溶液不能放入玻璃瓶保存,因为二氧化硅会溶于碱,浓度同样会变;3.市售KOH试剂大多纯度较低,而且吸收了二氧化碳,所以KOH要多称量一点(理论5.6g,实际可能要7~8g),并用少量水洗去表面的碳酸盐.这样配制的溶液就很稳定,浓度长期不会改变。

2、盐酸标准滴定溶液2.1配制按表3的规定量取盐酸,注人1 000mL水中,摇匀。

2.2标定按表4的规定称取于270℃~300℃高温炉中灼烧至恒重的工作基准试剂无水碳酸钠,溶于50mL水中,加10滴溴甲酚绿—甲基红指示液,用配制好的盐酸溶液滴定至溶液由绿色变为暗红色,煮沸2 min,冷却后继续滴定至溶液再呈暗红色。

同时做空白试验。

盐酸标准滴定溶液的浓度[c(HCl)],数值以摩尔每升(mod/L)表示,按式(2)计算:式中:m—无水碳酸钠的质量的准确数值,单位为克(g);V1—盐酸溶液的体积的数值,单位为毫升(mL) ;V2—空白试验盐酸溶液的体积的数值,单位为毫升(mL)M—无水碳酸钠的摩尔质量的数值,为52.994g/mol。

常见实验用溶液的配制方法

常见实验用溶液的配制方法

常见实验用溶液的配制方法1、1mol/L亚精胺(Spermidine): 溶解2.55g亚精胺于足量的水中,使终体积为10ml。

分装成小份贮存于-20℃。

2、1mol/L精胺(Spermine):溶解3.48g精胺于足量的水中,使终体积为10ml。

分装成小份贮存于-20℃。

10mol/L乙酸胺(ammonium acetate):将77.1g乙酸胺溶解于水中,加水定容至1L后,用0.22um孔径的滤膜过滤除菌。

3、10mg/ml牛血清蛋白(BSA):加100mg的牛血清蛋白(组分V或分子生物学试剂级,无DNA酶)于9.5ml水中(为减少变性,须将蛋白加入水中,而不是将水加入蛋白),盖好盖后,轻轻摇动,直至牛血清蛋白完全溶解为止。

不要涡旋混合。

加水定容到10ml,然后分装成小份贮存于-20℃。

4、1mol/L二硫苏糖醇(DTT):在二硫苏糖醇5g的原装瓶中加32.4ml水,分成小份贮存于-20℃。

或转移100mg的二硫苏糖醇至微量离心管,加0.65ml的水配制成1mol/L二硫苏糖醇溶液。

5、8mol/L乙酸钾(potassium acetate):溶解78.5g乙酸钾于足量的水中,加水定容到100ml。

6、1mol/L氯化钾(KCl):溶解7.46g氯化钾于足量的水中,加水定容到100ml。

7、3mol/L乙酸钠(sodium acetate):溶解40.8g的三水乙酸钠于约90ml水中,用冰乙酸调溶液的pH至5.2,再加水定容到100ml。

8、0.5mol/L EDTA:配制等摩尔的Na2EDTA和NaOH溶液(0.5mol/L),混合后形成EDTA的三钠盐。

或称取186.1g的Na2EDTA•2H2O和20g的NaOH,并溶于水中,定容至1L。

9、1mol/L HEPES:将23.8gHEPES溶于约90ml的水中,用NaOH调pH(6.8-8.2),然后用水定容至100ml。

10、1mol/L HCl:加8.6ml的浓盐酸至91.4ml的水中。

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附录:常用试剂配制及应用一、常用缓冲液、试剂的配制碳酸盐缓冲液(Carbonate-Bicarbonate Buffer)由于碳酸盐pH值偏碱,因此,常用于pH>9的缓冲液配制(附表1)。

附表1. 0.2 mol/L碳酸盐缓冲液(pH9.2~10.7)磷酸缓冲液(Phosphate Buffers,PB)磷酸盐是使用最广泛的一种缓冲剂,由于它们是二级解离,有二个pKa 值,PO4:pKa1=2.12,pKa2=7.21;所以用它们配制的缓冲液,pH 范围最宽。

NaH2HPO4:pKa1=7.21,pKa2=12.32。

Na2另外,磷酸盐还有钾盐分子形式,一般来说,低温时钠盐难溶,钾盐易溶,因此,配制细胞培养用试剂时常常添加钾盐试剂,但若配制十二烷基硫酸钠(SDS)-聚丙烯酰胺凝胶电泳的缓冲液时,只能用钠盐而不能用钾盐,因为SDS会与磷酸钾生成难溶的十二烷基硫酸钾。

磷酸缓冲液的优点为:①可配制成不同离子强度的缓冲液;②适用pH缓冲范围较宽;③受温度影响缓冲液pH值变化较小;④离子强度对缓冲液pH影响较小,如0.1mol/L缓冲液稀释10倍其pH变化小于0.1。

磷酸缓冲液的缺点是:①磷酸盐易与钙离子(Ca2+)、镁离子(Mg2+)及重金属离子结合生成不溶的沉淀物;②可能干扰某些化学反应过程,如对某些酶的催化活性具有一定程度的抑制作用。

NaH2PO4的pH值偏酸性,可用作pH<4的缓冲液。

Na2HPO4的pH值偏碱性,可用作pH>10的缓冲液。

而pH=6~8的中性缓冲液是更常用的缓冲液,需要NaH2PO4与Na2HPO4两种磷酸盐混合配制(附表2)。

附表2. 0.2 mol/L磷酸盐缓冲液(pH5.7~8.2)磷酸盐缓冲溶液(Phosphate-buffered saline, PBS)磷酸盐缓冲液是在磷酸缓冲液基础上添加NaCl以维持溶液的渗透压,因此,PBS适用于做细胞缓冲液,常用PBS配制如下。

NaCl 8gKCl 0.2gNa2HPO41.44gKH2PO40.24g在800ml蒸馏水中溶解,用HCl调节溶液的pH值至7.2~7.4加水定容至1L,15psi(1.05kg/cm2)高压灭菌20min,室温保存备用。

Tris缓冲液(Tris-HCl Buffer, TB)Tris的pH值偏于碱性,因此,通过添加HCl调节pH至所需值,Tris-HCl 缓冲液的离子强度(mol/L)是专指Tris的浓度,如某一特定pH的0.05 mol/L Tris缓冲液的配制是将50ml 0.1 mol/L Tris碱溶液与附表3所示相应体积(ml)的0.1 mol/L HCl混合,加水至将体积100ml,即为0.05 mol/L Tris缓冲液。

另外,按附表3制备的缓冲液,由于试剂来源的不同,缓冲液pH可能与所需略有差异,此时可通过稍许减少或增加HCl用量,精细调节pH至所需值。

附表4. 0.05 mol/L Tris缓冲液Tris盐缓冲液(TBS):Tris盐缓冲液是在Tris缓冲液基础上添加NaCl以维持溶液的渗透压,因此,TBS也适用于做细胞缓冲液,常用TBS配制如下。

8g NaCl、0.2g KCl以及3g Tris溶解于800ml蒸馏水中,加入0.015g酚红并用HCl调pH至7.4用蒸馏水定容至1L,分装后在15psi(1.05kg/cm2)高压灭菌20min,室温保存。

现在常用Tris盐缓冲液通常不加pH指示剂,而且该溶液如果不用于细胞培养,通常不加KCl及酚红。

Hank’s液 (Hank’s Balanced Salt Solution)Hank’s液是一种平衡盐溶液,主要用于细胞培养取材时组织块的漂洗、细胞的漂洗等。

贮存液A液:(I)NaCl 80gKCl 4gMgSO4·7H2O 1gMgCl2·6H2O 1g用双蒸馏水定容至450ml。

(II)CaCl2 1.4g (或CaCl2·2H2O 1.85g)用双蒸馏水定容至50ml。

将I和II液混合,即成A液。

贮存液B液:Na2HPO4·12H2O 1.52g,KH2PO40.6g,酚红 0.2g,葡萄糖 10.0g,酚红应先置研钵内磨细,然后按配方顺序一一溶解,用双蒸馏水定容至500ml。

(3)应用液:A、B储存液分别经112.6℃湿热灭菌20min,取A和B液各25ml,加无菌双蒸馏水至450ml,使用前用无菌的3.5%或5.6% NaHCO3调至所需pH。

注意:药品必须全部用A.R试剂,并按配方顺序加入,用适量双蒸水溶解,待前一种药品完全溶解后再加入后一种药品,最后补足水到总量。

无Ca2+、Mg2+ Hank’s液(Hank’s Solution without calcium, magnesium sulfate)NaCl 80g,KCl 4g,Na2HPO4·12H2O 1.52g,KH2PO40.6g,葡萄糖 10g,用双蒸馏水溶解后,加入0.4%酚红溶液50ml,再加入双蒸水至1000ml,112.6℃湿热灭菌20min,4℃ 冰箱保存。

临用前将原液用无菌双蒸水作1:10倍稀释,用无菌的3.5%或5.6% NaHCO3调至所需pH。

pH7.2柠檬酸盐缓冲液(Citrate Buffer)柠檬酸 0.327g柠檬酸钠 2.63g磷酸氢钠 0.222葡萄糖 0.00255mg蒸馏水加至100ml。

pH3.3枸橼酸-磷酸盐缓冲液(Citric acid- Phosphate Buffer)0.131mol/L citrate acid,0.066mol/L Na2HPO4,等量混合,调节pH至3.3。

0.5 mol/L EDTA, pH 8.0EDTA·2H2O 186.1 gNaOH ~20 g将EDTA·2H2O加入800ml水中,在磁力搅拌器上剧烈搅拌。

用NaOH调节pH 至8.0,EDTA直到接近pH 8.0才完全溶解,定容至1L。

分装后高压蒸汽灭菌。

0.4%酚红溶液取酚红0.4g置于研钵中逐滴加入1mol/L NaOH溶液11.28ml,边研磨边使酚红转变为钠盐溶于水中,加双蒸水至100ml,过滤后,4℃ 冰箱保存。

醋酸钾(Potassium Acetate)在60ml 5mol/L醋酸钾溶液中,加入11.5ml冰醋酸和28.5ml水。

该溶液用于碱性裂解。

3mol/L 醋酸钠(Sodium Acetate),pH5.2和pH7.0在800ml水中溶解408.1g三水醋酸钠,用冰乙酸调pH至5.2或用稀释乙酸调pH至7.0,加双蒸水至1L。

分装后高压灭菌。

柠檬酸钠缓冲液(Sodium Citrate Buffer)柠檬酸钠 1.8gHCl(1mol) 4ml无水乙醇 95ml先用100ml去离子水溶解柠檬酸钠,然后加入HCl和无水乙醇,再补充去离子水至总量200ml。

饱合硫酸铵溶液(Saturated Ammonium Sulfate Solution)取500ml双蒸馏水,加入约400克硫酸铵,水浴加热至70℃,磁力搅拌器充分搅拌,直到加入的硫酸铵不再溶解,以氨水(也可用NaOH)调pH7.2,室温保存。

二、酶免疫检测常用试剂配制包被液(Coating Buffer)(pH9.5碳酸盐缓冲液)Na2CO3·10H2O 8.58gNaHCO35.8g溶于双蒸水至1000ml。

封闭液(Confining liquid)(5%脱脂乳-PBS溶液,pH7.4)脱脂乳 50g加0.02mol/L pH7.4磷酸盐缓冲液(PBS)至1000ml溶解。

洗液(washing liquid)氯化钠 8.0g磷酸二氢钾 0.2g磷酸氢二钠(12H2O) 2.9g吐温-20 0.5ml加去离子水至1000ml溶解即可。

终止液(stop buffer)(2mol/L H2SO4):21.7ml H2SO4加去离子水至200ml。

缓冲甘油(glycerine buffer)甘油 9份PB(pH8.0) 1份将9份甘油与1份PB合并,充分混匀。

0.5%H2O2-甲醇液(Hydrogen Peroxide-Methanol Solution)(总体积120ml)3%H2O220ml甲醇 100mlDAB-H2O2底物缓冲液(DAB- H2O2Substrate Buffer)取6mg二氨基联苯胺(3,3’-Diaminobenzidine Tetrahydrochloride DAB)溶解于10ml 0.05mol Tris-HCl pH7.6。

使用前取0.3%H2O20.1ml加入到DAB溶液中(H2O2的终浓度为0.003%)。

如有沉淀生成,则用滤纸过滤。

5-溴-4-氯-3吲哚磷酸/四唑氮蓝底物显色液(BCIP/NBT Substrate Solution)贮存液配制:NBT:在10ml 70%的乙醇中溶解0.5g NBT。

BCIP:在10ml 100%二甲基甲酰胺中溶解0.5g BCIP。

贮存液4℃保存,可稳定一年。

底物显色液:取66μl NBT贮液与33μl BCIP加入到10ml碱性磷酸酶缓冲液中,充分混匀,底物显色液应在用前1小时内配制。

三、细胞相关试剂配制L-谷氨酰胺(L-G)溶液(L-glutamin Solution)(0.2 mol/L)称2.9 g L-谷氨酰胺(分子量为146.15)用去离子水溶解至100 ml,过滤除菌,分装小瓶,4~5 ml/瓶,-20℃冻存。

100x青-链霉素(双抗)溶液(P/S Penicillin/Streptomycin Solution)取青霉素G(钠盐)100万单位和链霉素(硫酸盐)1 g,溶于100 ml去离子水中,分装小瓶,4~5 ml/瓶,-20℃冻存。

7.5% NaHCO3溶液(NaHCO3Solution)称分析纯NaHCO37.5 g,用去离子水溶解至l00ml,过滤除菌,分装小瓶,4~5 m1/瓶,盖紧瓶塞,4℃保存。

HEPES溶液(HEPES Solution)(1mol/L)称23.83 g HEPES(N-2-Hydroxyethylpiperazine-N'-2-ethanesulfonic acid,N-2-羟乙基呱嗪-N'-2-乙基磺酸,分子量为238.3),用去离子水溶解至100 ml,过滤除菌,分装小瓶,4~5 m1/瓶,4℃保存。

氨基喋呤(A)贮存液(Aminopterin Stocking Solution)(100×, 4×10-5mol/L)称1.76 mg氨基喋呤(Aminopterin, 分子量440.4),溶于90 m1去离子水中,滴加l mol/L NaOH 0.5 m1,并不断搅动,待氨基喋呤完全溶解后,加1 mol/L 的HCl 0.5m1中和,再补加去离子水至100 m1。

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