生化实验基本原理及技术
生化中的化学实验原理
生化中的化学实验原理
生化学实验是通过化学反应、分离纯化、鉴定结构等手段研究生物大分子结构和功能的一种实验方法。
它的基本原理有以下几点：
1. 化学反应：生化学实验利用化学反应来改变或转化生物大分子的结构和性质。
例如，通过酶的催化作用，可以加速化学反应的进行。
2. 分离纯化：生物体内的分子混合复杂，生化学实验通过分离纯化的方法将目标分子与其他组分分离开来，从而研究其性质和功能。
常用的分离纯化方法包括离心、层析、电泳等。
3. 鉴定结构：生化学实验可以通过各种分析技术对分离纯化后的生物大分子进行鉴定和结构分析。
例如，质谱技术可以确定生物大分子的分子量和结构；核磁共振技术可以解析分子的原子结构。
4. 测定活性：生化学实验可以通过测定生物大分子的活性来研究其功能。
常用的测定方法包括酶活测定、抗体结合实验等。
总之，生化学实验通过化学手段研究生物大分子的结构和功能，从而揭示生物体内化学过程的机理和规律。
生化实验
实验一：分光光度法一：定义：分光光度法是根据物质对不同波长的光波具有选择性吸收的特性---即可以产生吸收光谱，而建立起来的一种定量，定性分析的方法。
分类：根据波长范围可分为紫外，可见和红外分光光度法。
特点：1，与其它光谱分析方法相比，起仪器设备和操作都比较简单，费用少，分析速度快，2，灵敏度高3，选择性好4，精密度和准确度较高5，用途广泛。
二：分光光度法基本原理：物质对光的选择性吸收1：光的基本性质：波动性，微粒性2：物质对光的选择性吸收：一种物质呈现何种颜色，是与入射光的组成和物质本身的结构有关。
溶液呈现不同的颜色是由溶液中的质点（离子或分子）对不同波长的光具有选择性吸收而引起的。
能复合成白光的两种颜色的光也称为互补色光。
3：吸收曲线（光谱）物质的分子内部存在状态：电子能级，振动能级，转动能级组成：紫外--可见吸收光谱，红外吸收光谱，远红外吸收光谱4、透光率和吸光度当一束单色光通过均匀的溶液时，入射光强度为I0，吸收光强度为Ia，透射光强度为It，反射光强度为Ir，则I0 = Ia + It + Ir 透光率(transmittance)T：透射光的强度It与入射光强度I0之比。
透光率愈大，溶液对光的吸收愈少；透光率愈小，溶液对光的吸收愈多。
吸光度A:透光率的负对数。
A愈大，溶液对光的吸收愈多。
5、Lambert-Beer定律Lambert定律：当一适当波长的单色光通过一固定浓度的溶液时，其吸光度与光通过的液层厚度成正比。
式中b为液层厚度，k1为比例系数，它与被测物质性质、入射光波长、溶剂、溶液浓度及温度有关，Lambert定律对所有的均匀介质都是适用的。
三：分光光度计的基本组成(1)光源光源的作用：发出所需波长范围内的连续光谱，有足够的光强度，稳定。
可见光区：钨灯，碘钨灯(320～2500 nm)紫外区：氢灯，氘灯(180～375 nm)(2) 单色器单色器的作用：从光源的连续光谱中，分出某一波长范围的光，作为吸光光度分析的光源。
生物化学实验原理与方法
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2020/11/26
生物化学实验原理与方法
二、有机溶剂沉淀法
n 原理：有机溶剂对许多溶于水的小分子生化物质以及核酸、 多糖、蛋白质等生物大分子都能发生沉淀作用。有机溶剂 的沉淀作用主要是降低溶液的介电常数从而 增强分子之 间的相互作用，使其溶解度降低。对于具有表面水层的生 物大分子来说，有机溶剂可破坏溶质分子表面的水膜，使 这些大分子脱水而相互聚集析出。不同溶质要求不同浓度 的有机溶剂，因此可用有机溶剂进行分步沉淀。
n 提取是在分离纯化前期，将样品研磨，把被破碎的细胞置于一定的溶剂（提 取液）中，使某一类分子目的物释放到提取液中的过程。提取液应具备的条 件：对有效成分溶解度大，破坏作用小；对杂质溶解度小或不溶解；来源广 泛、价格低廉、操作安全等。
n 生物分子可以分为生物大分子和生物小分子。生物小分子的结构由较强的共 价键决定；生物大分子中除共价键外，还含有较弱的共价键和次级键，故需 温和的条件才能保证生物大分子的活性不被破坏。因此，这两类生物分子的 提取液成分和操作条件差别很大。
n 1、生物小分子的提取 n 2、生物大分子的提取
蛋白质和酶的提取 核酸的提取
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生物化学实验原理与方法
溶剂提取法
n 原理:利用溶剂的溶解作用把所需物质从细胞中转移出来 n 影响溶剂提取效率的因素（影响溶解度的的因素）
1、溶剂的性质：（根据相似相溶原理） 2、离子强度：离子强度是影响物质溶解度的主要因素，但离子强度 对不同物质溶解度的影响不同，如高离子强度下DNA-核蛋白溶解度增 加，而低离子强度下RNA-核蛋白溶解度增加；绝大多数蛋白质和酶， 在稀盐溶液中溶解度增加（盐溶）。 3、PH值：溶剂的PH值影响溶质分子的解离状态，离子状态的物质， 不能是阳离子还是阴离子都易溶于水，而非离子状态的物质易溶于有 机溶剂。 4、温度：温度的升高可以增加物质的溶解度。 5、去垢剂：去垢剂是一类既有亲水基又有疏水基的物质，可以分为 阴离子、阳离子和中性去垢剂等，如SDS，Tween20，Triton X-100。
普通生化实验总结
普通生化实验总结一、引言普通生化实验（General biochemistry experiments）是生物化学课程中的重要内容之一，通过实验操作和数据分析，帮助学生巩固理论知识，培养实验技能和科学思维能力。
本文将总结普通生化实验的主要内容，包括实验的目的、原理、实验操作步骤以及实验结果的分析和讨论。
二、实验目的普通生化实验的目的在于深入理解生物化学的基本原理和实验技术，培养学生的实验操作能力和数据分析能力。
三、实验一：蛋白质的定性实验1. 实验原理蛋白质是生物体内重要的有机物质，通过蛋白质的定性实验可以初步判断样品中是否含有蛋白质。
定性实验的原理是基于蛋白质的特性，在特定条件下，蛋白质与某些试剂发生反应产生显色或沉淀。
2. 实验操作步骤1.取一定量的样品溶液，分别加入Biuret试剂和Millon试剂，观察颜色变化。
2.根据颜色变化结果判断样品中是否含有蛋白质。
3. 实验结果分析根据实验结果，如果样品与Biuret试剂发生变色反应，由淡蓝变为紫色，可以初步判断样品中含有蛋白质；如果样品与Millon试剂发生变色反应，由白色变为红色，也可以确定样品中存在蛋白质。
四、实验二：酶的性质与活性测定1. 实验原理酶是生物体内的催化剂，能够加速生物化学反应的进行。
了解酶的性质和活性测定方法对于研究生物体内的代谢过程非常重要。
通过测定酶活性，可以确定酶对底物的催化效果和酶的活化或抑制情况。
2. 实验操作步骤1.准备一定浓度的酶底物和辅酶溶液。
2.将一定量的酶底物加入试管中，分别加入辅酶溶液。
分别设立对照组和实验组。
3.在一定时间内测量酶底物与辅酶溶液反应的光吸收度。
3. 实验结果分析通过测量实验组和对照组的光吸收度差异，可以计算出单位时间内的酶活性。
根据酶活性的测定结果，可以初步评估酶的催化效果和活性。
五、实验三：核酸的分离与纯化1. 实验原理核酸是生物体内的遗传物质，对于研究生物体的遗传信息和进化规律具有重要意义。
生化反应鉴定实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 了解生化反应在微生物鉴定中的重要性。
2. 掌握常见生化反应的原理和方法。
3. 通过实验，对给定的微生物进行鉴定。
二、实验原理生化反应是指微生物在生长过程中，通过酶的催化作用，将营养物质转化为自身所需的物质，同时产生一些代谢产物。
这些代谢产物可以用来鉴定微生物的种类。
常见的生化反应包括糖发酵试验、吲哚试验、甲基红试验等。
三、实验材料与仪器1. 材料：- 菌种：大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、变形杆菌等。
- 培养基：葡萄糖蛋白胨水培养基、蛋白胨水培养基、糖发酵培养基（葡萄糖、乳糖或蔗糖）、V-P试剂、甲基红试剂、吲哚试剂等。
- 试剂：卢戈氏碘液、乙醚、吲哚试剂、甲基红试剂、蒸馏水等。
- 仪器：酒精灯、接种针、培养皿、试管、试管架、烧杯、量筒、德汉氏小管等。
2. 仪器：- 酒精灯- 接种环- 超净工作台- 恒温培养箱- 高压灭菌锅- 试管- 移液枪- 滴管四、实验方法1. 菌种培养：将菌种接种于葡萄糖蛋白胨水培养基，置于恒温培养箱中培养24小时。
2. 糖发酵试验：- 将培养好的菌种接种于糖发酵培养基（葡萄糖、乳糖或蔗糖），置于恒温培养箱中培养24小时。
- 观察培养基颜色变化，记录发酵结果。
3. 吲哚试验：- 将培养好的菌种接种于蛋白胨水培养基，置于恒温培养箱中培养24小时。
- 加入吲哚试剂，观察颜色变化，记录结果。
4. 甲基红试验：- 将培养好的菌种接种于蛋白胨水培养基，置于恒温培养箱中培养24小时。
- 加入甲基红试剂，观察颜色变化，记录结果。
五、实验结果与分析1. 糖发酵试验：- 大肠杆菌：发酵葡萄糖、乳糖，不发酵蔗糖。
- 金黄色葡萄球菌：不发酵葡萄糖、乳糖、蔗糖。
- 枯草芽孢杆菌：不发酵葡萄糖、乳糖、蔗糖。
- 变形杆菌：发酵葡萄糖、乳糖、蔗糖。
2. 吲哚试验：- 大肠杆菌：吲哚试验阳性。
- 金黄色葡萄球菌：吲哚试验阴性。
- 枯草芽孢杆菌：吲哚试验阴性。
- 变形杆菌：吲哚试验阳性。
生化检验的方法及原理
生化检验的方法及原理生化检验是一种通过检测血液、尿液、体液等体内物质的变化来评估人体健康状况的方法。
它通过测定体内化学物质的浓度或活性，可以提供有关内脏功能、营养状况、代谢情况以及某些疾病的信息。
下面将介绍一些常用的生化检验方法及原理。
1. 血常规检验：血常规检验是对血液中红细胞、白细胞、血小板等的数量、形态和功能状态进行检查的方法。
该检验方法主要包括测定血红细胞计数、血红蛋白浓度、红细胞体积分布宽度、白细胞计数、血小板计数等项目。
常用的测定方法包括血细胞自动分析仪、涂片染色和显微镜观察等。
血常规检验可以评估机体的贫血程度、血液的凝血功能以及炎症反应等。
2. 肝功能检验：肝功能检验主要包括测定血清谷丙转氨酶（ALT）、血清谷草转氨酶（AST）、总胆红素、直接胆红素、白蛋白、球蛋白等指标。
ALT和AST是血液中常用的肝细胞损伤指标，其升高提示肝细胞受到损伤。
总胆红素和直接胆红素可以评估肝脏排泄胆红素的功能，其升高可说明肝功能异常。
血清蛋白水平可以反映肝脏合成功能的变化。
3. 肾功能检验：肾功能检验常用的指标有血尿素氮（BUN）、肌酐、尿酸等。
BUN是肾脏排泄代谢废物的指标，其升高可以反映肾脏排泄功能的下降。
肌酐是肌肉代谢废物，其浓度增高可提示肾小球滤过功能减退。
尿酸是嘌呤代谢产物，尿酸增高可与痛风等疾病相关。
4. 血糖检测：血糖检测是评估糖代谢情况和糖尿病诊断的常用方法。
常用的检测方法有空腹血糖、餐后血糖、糖化血红蛋白等。
其中空腹血糖是指在至少8小时禁食后测定的血糖浓度，可以鉴别糖尿病和糖尿病前期。
餐后血糖是指进食后2小时的血糖浓度，可以评估胰岛功能及胰岛素敏感性。
糖化血红蛋白是反映血糖控制情况的指标，其浓度升高可预测糖尿病的并发症。
5. 血脂检测：血脂检测是为了评估血液中脂质成分的含量和分布，以及心脑血管疾病的风险。
常用的检测指标有总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇等。
总胆固醇和甘油三酯是评估血液脂质紊乱的指标，高密度脂蛋白胆固醇被认为是“好胆固醇”，低密度脂蛋白胆固醇是“坏胆固醇”，两者浓度高低与心脑血管疾病的发生相关。
生化项目检测原理
生化项目检测原理
生化项目检测原理是通过分析和测量生物体内特定分子或化学反应产物的变化来判断生物体内某种物质的存在或水平。
下面将介绍几种常见的生化项目检测原理。
1. 光度法：利用物质对特定波长的光吸收或透射的特性来测量物质的浓度。
通常会使用比色皿、分光光度计等仪器进行测量。
2. 电化学法：利用物质在电势差作用下的氧化还原反应特性来测量物质的浓度。
常见的电化学方法包括电解法、电极反应法、电化学免疫法等。
3. 发光法：利用物质在特定条件下发生化学反应产生光的特性来测量物质的浓度。
常见的发光方法有化学发光、酶标仪法等。
4. 色谱法：通过样品在固定相和流动相间相互作用的特性来进行物质分离和测定。
常见的色谱方法有气相色谱法、液相色谱法等。
5. 免疫学原理：利用抗原和抗体之间的特异性结合反应来检测物质的存在或水平。
常见的免疫学方法有酶联免疫吸附测定法、放射免疫测定法、荧光免疫测定法等。
以上是几种常见的生化项目检测原理，通过不同的检测方法可以实现对不同物质的快速、准确测量，从而为临床诊断提供有力支持。
生化实验报告全文
一、实验目的1. 了解葡萄糖氧化酶（GOD）的催化作用原理。
2. 掌握测定葡萄糖氧化酶活性的方法。
3. 分析不同条件下葡萄糖氧化酶活性的变化。
二、实验原理葡萄糖氧化酶（GOD）是一种氧化还原酶，它催化葡萄糖与氧反应生成葡萄糖酸和过氧化氢。
在实验中，通过测定过氧化氢的生成量来间接反映葡萄糖氧化酶的活性。
过氧化氢在特定条件下会分解生成水和氧气，利用氧气的生成量可以计算出过氧化氢的浓度，从而推算出葡萄糖氧化酶的活性。
三、实验材料与仪器1. 试剂：- 葡萄糖标准溶液- 氧气电极- 氢氧化钠溶液- 酚酞指示剂- 水浴锅2. 仪器：- 721分光光度计- 恒温培养箱- 移液枪- 试管- 烧杯四、实验步骤1. 准备工作：- 将葡萄糖标准溶液配制成不同浓度的系列溶液。
- 配制好氢氧化钠溶液和酚酞指示剂。
2. 实验操作：- 将葡萄糖标准溶液加入试管中，加入适量的氢氧化钠溶液和酚酞指示剂。
- 使用移液枪将氧气电极插入溶液中，开始计时。
- 观察溶液颜色变化，记录溶液从粉红色变为无色所需的时间。
3. 数据处理：- 根据溶液颜色变化所需时间，计算出过氧化氢的生成量。
- 以葡萄糖浓度为横坐标，过氧化氢生成量为纵坐标，绘制标准曲线。
- 根据待测样品的浓度，从标准曲线上查得对应的过氧化氢生成量。
- 计算出待测样品的葡萄糖氧化酶活性。
五、实验结果与分析1. 标准曲线绘制：- 以葡萄糖浓度为横坐标，过氧化氢生成量为纵坐标，绘制标准曲线。
2. 待测样品的葡萄糖氧化酶活性：- 根据待测样品的浓度，从标准曲线上查得对应的过氧化氢生成量。
- 计算出待测样品的葡萄糖氧化酶活性。
3. 不同条件下葡萄糖氧化酶活性的变化：- 在不同温度、pH值和酶浓度下，观察葡萄糖氧化酶活性的变化。
六、实验结论通过本实验，我们成功测定了葡萄糖氧化酶的活性，并分析了不同条件下葡萄糖氧化酶活性的变化。
实验结果表明，葡萄糖氧化酶活性受温度、pH值和酶浓度等因素的影响。
微生物鉴定之生化实验大全
(一）碳水化合物代谢实验糖(醇、苷）类发酵实验（1)原理：细菌分解糖得能力与该菌就是否含有分解某种糖得酶密切相关,故分解糖得能力各不相同，细菌分解糖类后得终产物亦不一致，在含糖培养基中加入指示剂，若细菌分解糖则产酸或产酸产气,使培养基颜色改变，从而判断细菌就是否分解某种糖或其她碳水化合物。
（2)基本培养基：在培养基中加入0、5％-1％得糖类(单糖、双糖、或者多糖）、醇类（甘露醇、肌醇）苷类(水杨苷、菊糖等）、培养基可为液体、半固体、固体或微量生化管几种类型.（3)实验方法：取某一种细菌得２4h纯培养物分别接种到葡萄糖、乳糖、麦芽糖、甘露醇、蔗糖等培养基内,37℃培养2４h，观察结果并记录.（4)结果判定：如果接种进去得细菌可以发酵某种糖或醇,则可产酸,使培养基由紫色变成黄色,如果不发酵,则仍保持紫色。
如发酵得同时又产生气体,则在微量发酵管顶部积有气泡。
（5)应用:就是鉴定细菌最主要最基本得实验,特别就是对肠杆菌科细菌得鉴定尤为重要。
氧化型与发酵型（Ｏ/F）得测定（1）原理:细菌在分解葡萄糖得过程中，必需有氧得参加，称为氧化型(O),细菌在分解葡萄糖过程中可以进行无氧降解得,称为发酵型(F）。
发酵型细菌无论在有氧无氧得环境中都能分解葡萄糖。
不分解葡萄糖得细菌称为产碱型（-)。
这在区别微球菌与葡萄球菌、肠杆菌科成员中尤其有意义.（2）培养基：培养基蛋白胨2g，氯化钠5ｇ,磷酸氢二钾0、３g,葡萄糖10g,琼脂3g，1％溴麝香草酚蓝3mL，蒸馏水10００mL。
将蛋白胨、盐、琼脂与水混合,加热溶解，校正PH至7、2，然后加葡萄糖与指示剂，加热溶解,分装试管，３-4ｍL/管；115℃,高压蒸汽灭菌20m ｉn,取出冷却成琼脂柱。
（3）试验方法：挑取18—2４h得幼龄斜面培养物,穿刺接种,每种细菌接种两管，于其中一管覆盖1ｍL液体石蜡，3７℃培养２4h或更长时间。
（4）结果判定:(５)应用:O／F试验主要适用于G—肠道杆菌得鉴别。
生化仪检测原理及应用
湿化学常见的比色分析反应类型：
• 直接测量：具有特征性的吸收峰，不经过任何反应直接在指定波长测 量； • 单一反应：待测反应本身有特征性吸收峰的底物或产物量的变化；如 ALB测定原理：白蛋白+BCG-----白蛋白-溴甲酚绿复合物 • 溴甲酚绿复合物在波长为570nm处吸光度最强，固此法ALB主波长应 设定在570nm； • 偶联反应：底物或产物无特征性吸收峰，需经过其他反应生成有特征 性的吸收峰测量的化合物，这种反应称为指示反应。如ALT测定原理： • L-丙氨酸+α—酸戊二酸 丙酮酸+L-谷氨酸 • 丙酮酸+NADH+H+ 乳酸+ NAD • NADH在340nm处吸光度最强，其吸光度与NADH的浓度成正比，固 ALT此法检测主波长应设定在340nm处。
5：反渗透纯水系统：
• 原水为自来水，首先经过机械过滤器，去除混在 水中的铁锈、砂、红虫、胶体等大颗粒杂质；首 级过滤后的水进入活性碳滤器，活性炭对水中的 余氯、有机物及异味有极高的去除效果；然后经 过软水处理器去除水中造成结垢的钙、镁等离子， 变成软水。经过处理后出来的水，再经过5μm保 安过滤器，防止预处理滤料微粒及5μm以上的杂 质进入反渗透系统，再经高压泵增压1.0MPa或 1.5MPa，在此压力下，反渗透析出纯水，然后送 到纯水箱。
化学发光技术基本原理：
• 1：电化学发光分析技术（ECL）：是一种 在电极表面由电化学引发的特异性化学发 光反应。包括了两个过程，发光底物二价 的三联吡啶钌及反应参与物三丙胺在电极 表面失去电子而被氧化。氧化的三丙胺失 去一个H成为强还原剂，将氧化型的三价钌 还原成激发态的二价钌，随即释放光子恢 复为基态的发光底物。 （发光标记物-三联 吡啶钌） • 代表仪器品牌----德国罗氏Cobas E601
植物生理生化实验原理和技术
植物生理生化实验原理和技术植物生理生化实验旨在研究植物生命过程中的生理和生化相关現象，改进对植物的了解及应用。
以下是实验原理和常用技术。
1. 光合作用测定：光合作用是植物生理的重要过程之一，可使用光合速率仪测量光合速率。
原理是通过测量植物叶片释放或吸收的氧气量，来间接测定光合速率。
2. 蒸腾作用测定：蒸腾作用是植物水分代谢的关键环节。
可利用蒸腾速率仪测量植物叶片释放的水蒸气量，从而确定植物的蒸腾速率。
3. 细胞呼吸测定：细胞呼吸是植物细胞产能的主要途径，可以通过测量释放的二氧化碳量来测定细胞呼吸速率。
常用的测定方法有测量呼吸速率的气体分析仪或密闭系统测定二氧化碳的累积。
4. 酶活性测定：酶是植物生物化学过程中的重要催化剂。
酶活性的测定可以通过测量糖类、蛋白质、核酸等底物的代谢速率，或通过测量底物与产物之间的光学、电化学变化来实现。
常用的方法有光谱法、酶促反应连续监测法等。
5. 色素提取：植物体内的色素对光合作用和其他生化过程至关重要。
常用的色素提取方法包括酒精提取、乙醚提取等。
提取后的色素溶液可以通过紫外-可见光谱仪进行定量测定。
6. 蛋白质测定：蛋白质是植物细胞内的重要有机物。
常用的蛋白质测定方法包括巴雷特试剂法、劳氏试剂法、比色试剂法等。
通过测定样品和标准溶液的吸收值，可以计算出蛋白质的含量。
7. 酶动力学测定：酶动力学是研究酶催化作用速度的科学。
可以通过测定底物浓度、酶浓度、反应时间等因素对酶活性的影响来研究酶的催化机理。
常用的测定方法有Michalis-Menten曲线法、双倒数法等。
8. 膜透性测定：膜透性是指物质穿过细胞膜的能力。
可以通过测定溶液中离子浓度的变化，来评估膜透性的改变。
常用的测定方法有电导率法、吸光度法等。
9. RNA/DNA提取和定量：RNA/DNA是植物遗传信息的主要表达形式。
可以使用相关试剂盒从植物样品中提取RNA/DNA，然后通过紫外-可见光谱仪或荧光定量仪测定其浓度。
植物生理生化实验原理与技术
植物生理生化实验原理与技术植物生理生化实验是研究植物生命周期、生长发育、代谢物质合成与分解等生理生化过程的重要手段。
通过实验可以揭示植物对外界环境的适应性和调节机制，探究植物体内的生化反应和代谢途径，为植物科学研究提供实证依据。
本文将从植物生理和生化两个方面介绍相关实验原理与技术。
一、植物生理实验原理与技术1. 光合作用实验光合作用是植物体内最重要的代谢过程之一，通过光合作用，植物能够将光能转化为化学能，合成有机物质，并释放出氧气。
光合作用实验可以通过测定氧气释放量、二氧化碳吸收量、光合速率等指标来评估植物的光合能力。
实验中常用的技术包括测气法、光合速率仪等。
2. 呼吸作用实验呼吸作用是植物体内的一种氧化代谢过程，通过呼吸作用，植物能够将有机物质分解为二氧化碳和水，并释放出能量。
呼吸作用实验可以通过测定二氧化碳释放量、氧气消耗量等指标来评估植物的呼吸能力。
实验中常用的技术包括测气法、呼吸速率仪等。
3. 水分逆境实验水分是植物生长发育的重要因素之一，水分逆境实验可以模拟干旱或水浸等环境条件，研究植物对水分胁迫的响应机制。
常用的实验方法包括干旱处理、水浸处理、土壤水分测定等。
4. 盐胁迫实验盐胁迫是植物生长发育中常见的逆境因素之一，盐胁迫实验可以研究植物对盐胁迫的耐受性和适应性。
常用的实验方法包括盐溶液处理、盐浓度测定、生长指标测定等。
二、植物生化实验原理与技术1. 酶活性测定实验酶是植物体内生化反应的催化剂，酶活性测定实验可以评估酶的活力和功能。
常用的实验方法包括酶活性测定试剂盒法、酶底物转化法等。
2. 叶绿素含量测定实验叶绿素是植物体内的一种重要色素，可以吸收光能进行光合作用。
叶绿素含量测定实验可以评估植物的叶绿素合成和光合能力。
常用的实验方法包括乙醇提取法、叶绿素荧光法等。
3. 蛋白质含量测定实验蛋白质是植物体内的重要代谢产物，蛋白质含量测定实验可以评估植物的蛋白质合成和分解能力。
常用的实验方法包括布鲁氏试剂法、Lowry法等。
[实验六细菌的生化试验]细菌的生化实验
![[实验六细菌的生化试验]细菌的生化实验](https://img.taocdn.com/s3/m/1967ad89f01dc281e43af093.png)
[实验六细菌的生化试验]细菌的生化实验实验六细菌的生化试验目的要求1．通过本试验加深对细菌生化反应原理和意义的理解；2．掌握常规细菌生化试验操作方法。
操作步骤一、糖类发酵（分解）试验原理：细菌含有分解不同蔗糖（醇、苷）类的酶，因而分解各种糖（醇、苷）类的能力也不必一样。
有些细菌分解某些糖（醇、苷）产酸（符号：+）、产气（符号：○），培养基由兰变黄（指示剂溴指示剂麝香草酚兰由兰遇酸福兰县的结果），并有气泡；有些产酸，仅培养基变黄；有些不分解糖类（符号：－），培养基仍为兰色。
（一）适用于需氧菌的方法培养基用邓亨氏（Dunham）蛋白胨水溶液（蛋白胨1g，氯化钠0.5g，水100ml，pH7.6按0.5～1％的比例分别加入各种辣椒），每100ml加入1.2ml的0.2％溴麝香草酚蓝（或用1.6％溴甲酚紫酒精溶液0.1ml）作指示剂。
分装于试管（每一个试管事先都加有一枚倒立的小发酵管），10磅高压灭菌10分钟。
如在培养基中加入琼脂达0.5～0.7％，则成半固体，可省去倒立的小失水管。
0.2％溴麝香草酚蓝溶液配法：溴麝香草酚蓝 0.2g0.1N NaOH 5ml蒸馏水 95ml方法：从琼脂斜面的纯培养物上，用接种环取少量被检细菌接种于糖发酵管培养基中（如为半固体，应穿刺），在37℃培养，一般观察2～3天，观察时用上述符号标记之。
（二）适用于厌氧菌的方法培养基：蛋白胨 20g氯化钠 5g琼脂 1g1.6％硫甲酚紫酒精溶液 1ml糖 10g硫乙醇酸钠 1g蒸馏水 1000ml将胨、盐、硫乙醇酸钠、琼脂和水放于水槽内，加热使融化，再加入所需的糖，调整pH到7.0，加入指示剂，分装试管，在10磅高压灭菌15分钟后，做成高层。
方法将厌氧菌的培养物用穿刺接种法接种于上述培养基的深部，于37℃培养。
结果观察同需氧菌。
二、V－P试验（二乙酰试验）原理：某些细菌能从葡萄糖→丙酮酸→乙酰甲基甲醇（Acetymethyl carbinol）→2，3-丁烯二醇（2，3-bytaylene cylycol），在有碱阿提斯鲁夫尔谷存在时氧化成二乙酰，后者和胨中的胍基化合物起作用，会带来粉红色的化合物。
生化检测原理
生化检测原理
生化检测原理：
①样品处理首先需对血液尿液组织匀浆等生物样本进行预处理如离心血清分离蛋白沉淀等以减少干扰；
②酶促反应将待测物与特异性酶底物混合在适宜pH温度条件下让其催化底物转化成易于检测产物；
③光学检测由于多数代谢产物会吸收或发射特定波长光线因此可用分光光度计荧光计等仪器测量吸光度荧光强度；
④电化学传感利用某些物质在电极表面发生氧化还原反应时电流电压会发生变化特点来间接推算其浓度；
⑤质谱分析将样品离子化后送入质量分析器根据质荷比差异将不同分子分开再通过检测器记录峰型峰高；
⑥免疫测定基于抗原抗体特异性结合原理通过标记抗体比色法放射免疫法酶联免疫吸附法等手段定量分析；
⑦核酸扩增针对DNA RNA片段采用PCR RT-PCR等技术使其呈指数级增加便于后续杂交测序检测；
⑧生物芯片将成千上万个探针固定在固相载体上与待测核酸溶液杂交后用扫描仪读取杂交信号强度分布；
⑨数据处理将上述各种方法得到原始数据输入计算机中用专用软件进行滤波拟合回归等运算转换成浓度值；
⑩结果解读根据正常参考范围疾病诊断标准等将计算结果与之对比分析判断受试者健康状况；
⑪质控措施为保证检测准确性需定期用标准品做平行样回收率实验并参加室间质评活动持续改进；
⑫发展趋势随着纳米技术高通量测序等前沿科技融入未来生化检测将更加精准快速便捷。
植物生理生化实验原理和技术
植物生理生化实验原理和技术植物生理生化实验是研究植物生长、发育和代谢过程的重要手段，通过实验可以深入了解植物的生理生化特性，为植物科学研究提供重要数据和理论基础。
本文将介绍植物生理生化实验的原理和技术，帮助读者更好地理解和开展相关实验工作。
一、植物生理生化实验原理。
1. 细胞膜通透性实验原理。
细胞膜通透性是植物细胞内外物质交换的重要途径，可通过测定不同条件下细胞对离子、小分子物质的通透性来研究细胞膜的特性。
实验原理是利用渗透压差测定物质的渗透性，或通过测定不同条件下细胞内外离子浓度的变化来间接反映细胞膜通透性。
2. 光合作用速率测定原理。
光合作用是植物生长发育的重要能量来源，测定光合作用速率可了解植物对光合作用的适应能力和养分利用效率。
实验原理是通过测定单位时间内植物释放的氧气量或二氧化碳的吸收量来反映光合作用速率。
3. 酶活性测定原理。
酶是植物生理生化过程中的重要催化剂，测定酶活性可以了解植物代谢活动的强弱和酶的特性。
实验原理是通过测定单位时间内酶催化反应产物的生成量或底物的消耗量来反映酶的活性。
二、植物生理生化实验技术。
1. 细胞膜通透性实验技术。
（1）渗透压法，将不同渗透压溶液浸泡植物组织，测定不同条件下组织体积的变化，计算渗透系数。
（2）离子浓度法，测定不同条件下细胞内外离子浓度的变化，通过离子选择电极或离子色谱仪进行分析。
2. 光合作用速率测定技术。
（1）氧气释放法，将植物组织置于含有光源的水中，测定单位时间内水中氧气含量的变化。
（2）二氧化碳吸收法，将植物组织置于密闭容器中，测定单位时间内二氧化碳浓度的变化。
3. 酶活性测定技术。
（1）酶促反应法，将酶和底物混合反应一定时间后，通过比色法或荧光法测定反应产物的含量。
（2）酶抑制法，向酶底物混合液中加入不同浓度的抑制剂，测定酶活性的变化。
通过对植物生理生化实验原理和技术的了解，可以更好地开展相关实验工作，为植物科学研究提供可靠的数据和支持。
生化检测原理
生化检测原理生化检测是一种通过检测生物体内部化学成分和代谢产物来评估生物体生理状态和健康情况的技术。
它在医学诊断、生物学研究和食品安全等领域有着广泛的应用。
生化检测原理主要包括样本采集、实验操作和数据分析三个方面。
首先，样本采集是生化检测的第一步。
不同的检测项目需要不同的样本，常见的样本包括血液、尿液、唾液、组织等。
在采集样本的过程中，需要严格遵循操作规程，保证样本的纯净和完整。
样本的质量直接影响后续实验结果的准确性，因此样本采集是生化检测中至关重要的一环。
其次，实验操作是生化检测的核心环节。
在实验操作中，常用的技术包括光度法、比色法、电化学法、质谱法等。
这些技术能够对样本中的化学成分进行定量或定性分析，从而得出相关的生化指标。
实验操作需要严格控制各项条件，包括温度、pH值、反应时间等，以确保实验结果的准确性和可靠性。
最后，数据分析是生化检测的最后一步。
在实验操作得到的数据中，通常会有大量的信息需要整理和分析。
数据分析的方法包括统计学方法、生物信息学方法、机器学习方法等。
通过对数据的分析，可以得出样本的生化指标，比如血糖浓度、蛋白质含量、酶活性等，从而评估生物体的生理状态和健康情况。
总的来说，生化检测原理涉及了样本采集、实验操作和数据分析三个方面，每个环节都至关重要。
只有严格按照操作规程进行样本采集，精确进行实验操作，合理进行数据分析，才能得到准确可靠的生化检测结果。
生化检测技术的不断发展和完善，为人类健康和生命安全提供了重要的保障。
希望未来能够有更多的科研人员投入到生化检测技术的研究和应用中，为人类健康事业做出更大的贡献。
生化研究技术——生物化学实验原理-蛋白质(酶)、核酸的分
室温下，这些有机溶剂不仅能使蛋白质沉淀， 而且伴随着变性。若预先将有机溶剂冷却，然 后在不断搅拌下将其逐渐加入蛋白质溶液中， 防止有机溶剂局部浓度过高，则在很大程度上 解决变性问题。
▪ 不同的蛋白质由于水化层厚度不同，发生沉淀 需要的有机溶剂浓度不同，因此可利用不同浓 度的有机溶剂分离不同的蛋白质。
分段盐析
不同的蛋白质分子，由于其分子表面的极 性基团的种类、数目以及排布的不同，其水 化层厚度不同，故盐析所需要的盐浓度也不 一样，因此调节蛋白质中盐的浓度，可以使 不同的蛋白质分别沉淀。如：
(NH4)2SO4
血清
球蛋白
50%饱和度
析出
饱和
清蛋白
析出
（2）等电点沉淀
蛋白质是两性电解质，其溶解度与其净电荷数 量有关，随溶液pH变化而变化。在溶液pH值 等于蛋白质等电点时，蛋白质的溶解度最小。
一般动物组织和细胞可用电动捣碎机或匀浆器破碎或用 超声波处理破碎；
植物组织和细胞由于具有纤维素、半纤维素和果胶等物 质组成的细胞壁，一般常用与石英砂和适当的提取液一 起研磨的方法破碎或用纤维素酶处理也能达到目的；
细菌细胞的破碎比较困难，因为整个细菌细胞壁的骨架 实际上是一借共价键连接而成的肽聚糖囊状大分子，非 常坚韧。破碎的方法常有超声波震荡、与石英砂研磨、 高压挤压或溶菌酶处理（以分解肽聚糖）。
三、细胞器的分离
细胞器包括细胞核、线粒体、核糖体、内质网，植物细胞 还有叶绿体。
如果要分离制备分布在这些细胞器中的生物大分子，为了 防止其他细胞组分中的物质对制备物的干扰或污染，还需 先将细胞器分离出来，然后在某一细胞器中分离某一物质。
细胞器的分离一般采用差速离心法，即将破碎后的细胞在 适当的介质中进行离心，常用的介质有蔗糖、甘露醇、柠 檬酸、聚乙二醇等。各种细胞组分按质量大小的不同，经 过不同速度的离心后，沉降于离心管的不同部位，经多次 分步离心后，即可获得所需组分。
生化分离实验总结
生化分离实验总结1. 引言生化分离实验是一种常用的实验方法，用于分离和纯化生物分子，如蛋白质、核酸等。
本文将总结生化分离实验的基本原理和常用方法，并介绍实验过程中可能遇到的问题及解决方法。
2. 基本原理生化分离实验的基本原理是利用样品中不同分子的物理性质差异，通过一系列分离步骤，将目标分子从其他组分中分离出来。
常见的生化分离方法包括离心、电泳、层析、过滤等。
•离心：利用样品中不同分子的密度差异，通过旋转离心机使分子沉淀或上漂。
•电泳：利用分子在电场中的迁移速度差异，将目标分子从复杂混合物中分离出来。
•层析：利用样品中不同分子在固相材料上的亲和力差异，通过流动相使分子在固相上进行逐步分离。
•过滤：利用膜孔大小的差异，通过过滤膜将目标分子分离出来。
3. 常用方法3.1 离心离心是一种常见的生化分离方法，适用于分离沉淀物和上清液。
实验需要使用离心机，操作步骤如下：1.将待分离的样品放入离心管中。
2.调整离心机参数，如离心速度、离心时间等。
3.开始离心，分离出沉淀物和上清液。
4.将上清液转移至新离心管中，即可得到纯净物质。
3.2 电泳电泳是一种基于分子在电场中的迁移速度差异进行分离的方法。
常见的电泳方法有蛋白质电泳、核酸电泳等。
操作步骤如下：1.准备电泳仪和电泳槽，加入凝胶和电泳缓冲液。
2.将待分离的样品与电泳缓冲液混合，加入电泳槽中。
3.设置电压和电泳时间，开始电泳。
4.根据目标分子的特性，通过观察凝胶上的条带来确定目标分子的位置。
5.切下目标条带，进行后续实验操作。
3.3 层析层析是一种利用物质在固相材料上的亲和力差异进行分离的方法。
常见的层析方法有凝胶过滤层析、离子交换层析等。
操作步骤如下：1.准备层析柱和流动相。
2.将待分离的样品与流动相混合，加入层析柱中。
3.通过缓慢加入流动相，使样品分子在柱中逐步分离。
4.收集目标分子的洗脱液，并进行后续实验操作。
3.4 过滤过滤是一种利用膜孔大小差异进行分离的方法，适用于分离固体颗粒、细胞等。
生化检测原理
生化检测原理生化检测是一种通过分析生物体内的化学成分来了解生物体健康状况的方法。
生化检测原理主要包括样品处理、试剂反应、测定方法和结果分析等几个方面。
首先，样品处理是生化检测的第一步。
对于不同的样品，需要采取不同的处理方法，以便提取出需要检测的化学成分。
比如，血液样品需要离心分离血清或血浆，尿液样品需要去除杂质等。
样品处理的目的是为了保证后续的试剂反应能够准确地测定出目标化学成分的含量。
其次，试剂反应是生化检测的关键环节。
不同的化学成分需要不同的试剂来进行反应，产生可测定的信号。
常见的试剂反应包括酶促反应、免疫反应、光谱分析等。
通过试剂反应，可以将目标化学成分转化为可以测定的信号，为后续的测定方法提供数据支持。
测定方法是生化检测的核心内容。
常见的测定方法包括光度法、电化学法、质谱法等。
这些方法可以根据试剂反应产生的信号来测定目标化学成分的含量。
不同的测定方法具有不同的灵敏度、准确度和操作简便性，可以根据具体的检测需求选择合适的方法进行测定。
最后，结果分析是生化检测的最终目的。
通过对测定结果的分析，可以了解样品中目标化学成分的含量，从而判断生物体的健康状况。
结果分析需要考虑到样品处理、试剂反应和测定方法等各个环节对结果的影响，以确保结果的准确性和可靠性。
总的来说，生化检测原理涉及到样品处理、试剂反应、测定方法和结果分析等几个方面。
通过这些环节的有机结合，可以准确地测定出生物体内的化学成分，为健康状况的评估提供重要依据。
生化检测原理的深入理解和应用，对于临床诊断、科研实验和环境监测等领域具有重要意义。
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生物化學實習1緒論(一) 原理1. 光依據其波長來分類：(1) 200nm~400nm 短波屬於紫外光(2) 400nm~700nm 可見光波長(3) 700nm~900nm 長波屬於近紅外光2. 光通過溶液時，特定波長的光被吸收，眼睛察覺到的是沒有被吸收的波長。
核黃素會吸收450nm 的光，紅光與黃光會通過溶液而被肉眼所見。
第一單元 生化實驗基本原理及技術2圖1-1光譜儀光譜儀可用來鑑定及定量純或不純的溶液中所含有的特定化合物，主要原理是基於兩個物理定律：1.柏朗定律；2.比爾定律 。
1. 柏朗定律：每單位厚度溶液其吸收入射光的比率為定值，被溶液吸收的入射光量與入射光強度無關。
被每單位厚度溶液吸收的入射光比率為定值，每一單位厚度溶液若吸收10%的光，則光經過每一單位厚度溶液時，其強度即減少10%。
I ＝I 0 • e -αιI ：穿透光強度I 0：入射光強度α ：溶液吸光係數ι：光路徑長度柏朗定律中以對數為底轉換公式，將吸光係數α轉換成比例常數K→ log 10 I 0 / I ＝K ιlog 10 I 0 / I ＝ 吸光值(absorbance ；A)或光密度值(optical density ；OD)生物化學實習32. 比爾定律：光經過吸光物質所產生的吸光值，與溶液中每單位面積所含的吸光物質數目成比例。
比爾定律描述比例常數K 與待測吸光溶液中溶質的濃度有關。
K ＝εcε：消光指數c ：吸光物質濃度I ＝ I 0• 10-εc ιlog 10 I 0 / I ＝ A ＝log 1010εc ι＝ εc ι當ι（光路徑長度）＝1 cm 時log 10 I 0 / I ＝ A ＝log 1010εc ＝ εc特定溶質在特定波長下，消光係數ε為一常數。
因此，當吸光物質的濃度變成兩倍，於相同的光路徑下，被吸收的光量也會變成兩倍。
圖1-2 22 µM 溶於0.1M 磷酸鈉，pH 7.06，1公分光路徑(light path)的條件下測定 波長吸光值第一單元 生化實驗基本原理及技術4(二) 光譜儀的應用1. 呈色反應：如果分子沒有吸光性，可將此分子與其他分子反應，產生具吸光性的有色化合物。
2. 色度定量法：(1) 呈色劑必須過量。
(2) 必須在吸光值與該化合物濃度呈現線性下，得出標準曲線，亦即該化合物濃度之改變必須與吸光值改變成正比。
(3) 色度定量法之最大誤差來源：通常發生在化合物高濃度時，由於其產生數據為非線性反應所致。
應該將未反應之未知溶液重新稀釋後再做一次，切勿直接稀釋已呈色之反應溶液。
(三) 呈色定量：線性反應之標準曲線圖1-3呈色定量反應的標準曲線(四) 光譜儀的構造與性質1. 光源 (Light Source)(1) 鎢絲燈：340~900 nm生物化學實習5(2) 氫-氘燈：200~360 nm2. 波長選擇器 (Wavelength Selector)(1) 單色光純度越高，其靈敏度也越高。
(2) 濾光片 (absorption filters)：能夠將高於及低於特定波長的光遮蔽住。
(3) 較為先進的光譜儀會使用稜鏡 (prism) 或繞射柵欄來產生單色光以克服濾片的缺點。
(4) 狹縫 (slit)：光的路徑中置放一對調節板行成狹縫調整入射光的強度。
(5) 樣品管或比色槽 (sample tubes or cuvettes)：盛裝樣品與空白對照組溶劑的容器必須是相同的。
(五) 光伏特電池或測光光電管-偵測系統中穿透光1. 光伏特電池：硒的電子流其靈敏度很低，且對小於270 nm 及大於700 nm 的波長不敏感。
2. 真空電光管：有兩個電極維持一個電位差，當入射的輻射光投至陰極引起電子的反射(光電效應)，電子會在陽極(正極)被收集，光電流可立即被放大偵測。
3. 光電倍增管(photomultiplier tube ，PMT) ：是一般光電管的衍生物。
有數個中間電極(倍增電極，dynodes) 。
(一) 基本原理：利用分子經過多孔性介質時會有不同移動速度而將其分離的實驗技術稱為層析法。
層析法基本原理為利用各種物質對吸附用的靜相（stationary phase ；固體材料或基質）和流過靜相的動相（mobile phase ；緩衝溶液或溶劑）有不同的親和力而將其分離。
第一單元 生化實驗基本原理及技術6(二) 基礎理論：分配係數及相對移動速度，分離的過程中，分子會被固體材料（靜相）所吸附，需要先定出該分子對靜相及（或）動相的親和力。
圖1-4管柱層析系統1. 分配係數（partition coefficient ；α）：表示一個物質對靜相的親和力。
分配係數數值介於0與1之間。
分配係數α值越大表示該成分對靜相的親和力越大。
數學公式：被靜相吸附的分子數 α＝在靜相與在動相的分子總數生物化學實習72. 相對移動速度：表示分子對動相之親和力，其定義為：分子與動相通過固體材料的相對移動速度。
R f ＝1-α3. 解析度 (Resolution;R) 最大化是任何層析想要達成之目標。
圖1-5層析解析度第一單元 生化實驗基本原理及技術8(三) 層析法動相：等梯度流析 vs.梯度動相流析1. 等梯度流析方式(isocratic)：全程動相特性相同。
2. 梯度動相流析(gradient)：過程中連續改變動相的離子強度、pH 值、配位體濃度或者是有機溶劑雨水溶液的比例。
(四) 層析的種類常用的層析的種類包括：膠體過濾或分子篩、離子交換層析法、疏水性作用層析法、親和性層析法、分配層析法、高效能（高壓）液相層析法。
1. 膠體過濾法(Gel Filtration) 或分子篩(Size Exclusion)(1) 原理：基於特定大小的分子是否有能力進入具有許多孔洞的固體材料或介質，通常使用等濃度的動相。
(2) 膠體過濾層析過程圖1-6膠體過濾層析過程(3) 膠體過濾層析結果生物化學實習9圖1-7 膠體過濾層析結果2. 離子交換層析法(Ion Exchange Chromatography)(1) 原理：利用分子表面帶的電荷對帶電的靜相或固體材料有不同的靜電吸引力來分離物質。
(2) 種類：A. 陽離子交換法(cation ion-exchanger)：靜相帶有負電荷，對溶液帶有正電的分子（陽離子）具有親和性。
最常使用的陽離子交換樹脂是CM 纖維素。
B. 陰離子交換法(anion ion-exchanger)：最常使用的陰離子交換樹脂是DEAE 纖維素。
C. 緩衝溶液：離子交換層析中選擇適合的緩衝溶液，所用的緩衝溶液需能以儘量低的濃度，在所欲使用的pH 值下，提供足夠的緩衝能力，以免影響溶液的離子強度。
在其pK a 處會有最大的緩衝能力。
第一單元 生化實驗基本原理及技術103. 疏水性作用層析法(Hydrophobic Interaction)(1) 原理：用來增進蛋白質與疏水性吸附劑結合的動相條件剛好與增進離子交換樹脂相反：低pH 值和高離子強度。
(2) 高離子強度會消弱蛋白質與吸附劑的靜電作用力，卻會增進疏水性交互作用。
(3) 高離子強度會比低pH 值更為重要，在高離子強度的狀況下，含有極大疏水性的蛋白質只要以C 4管柱就可以吸附，含有較小疏水性的蛋白質則需要C 8或C 10管柱才能吸附。
(4) 要將蛋白質析出，要破壞蛋白質分子與吸附劑之間的疏水性交互作用，只要降低動相的離子強度就可以輕易地將其流析。
4. 親和性層析法(Affinity Chromatography)親和性層析法是發展最迅速的層析法，獲得最大產率及最大純度。
(1) 種類：A. 受質親和性層析法：酵素、配位體。
B. 染料配位體層析法： Cibacron Blue 會和酵母菌中的兩種酵素有極大的親和性；丙酮酸激(p y r u v a t e k i n a s e )和磷酸果醣激 (phosphofructokinase)。
C. 免疫親和性層析法：抗原-抗體交互作用之解離常數（K d ）範圍為10-8至10-10M ，而最高可達到10-12M ，使用單株抗體來進行免疫親和性層析的效果最好。
D. 固定化金屬離子親和性層析法 (IMAC)：以二價金屬陽離(Zn 2+, Fe 2+, Ni 2+,Cu 2+)純化表面含有組胺酸(histidine)的蛋白質，最後以下列三種方式之生物化學實習11一將藉由組胺酸與樹脂結合的蛋白質流析出來：(a) 降低動相的pH 值(b) 添加比在IMAC 樹脂上還強的金屬崁合劑（例如：EDTA ）(c) 增加動相中與蛋白質競爭金屬鍵結之物質的濃度(例如：咪唑imidazole)或組胺酸(histidine)。
5. 分配層析法( Partition Chromatography)通常是應用在定性分析方面（而非應用在製備方面），分配層析法係使用薄板形式來進行層析，其靜相通常是塗抹在玻璃板（硬式）或聚酯膠片（軟式）上的吸附薄層。
(1) 分配層析法靜相/動相分類：A. 正相(normal-phase)分配層析法，靜相帶有極性，而展開用的動相則不帶帶有極性。
B. 逆相(reverse-phase)分配層析法，靜相不帶有極性，而展開用的動相則帶有極性。
(2) 展開樣品的動相溶液：A. 有機溶液－乙醇(alcohol)、t-戊醇(t-amyl alcohol)、乙(acetonitrile)、甲醇(Methanol)。
B. 水性溶劑－醋酸(acetic acid)。
(3) 樣品用相對移動速度(R f )來表示：樣品移動的距離（cm ） 溶劑前緣移動的距離（cm ）R f第一單元 生化實驗基本原理及技術12A. R f 數值越大表示樣品對該動相溶劑有越大的親和性。
B. 分配層析法已經成功地運用在分析蛋白質、荷爾蒙、胺基酸、胺醣類、碳水化合物、核酸、抗生素、脂肪酸、殺蟲劑核一些藥物及代謝的中間產物。
(4) 分配層析法種類A. 使用濾紙當作靜相：濾紙都是由多聚醣所組成的，所以濾紙層析法最常使用在正相模式，及非極性溶液當作動相來展開。
B. 將分子氣化後，再利用其對固體吸附劑的親和性不同來分分子，此方法又稱「氣相層析」(Gas Chromatography)，氣化的樣品送至線圈處的通常是惰性氣體，如氮氣、氦氣、氬氣等。
6. 高效能（高壓）液相層析法(High-Performance （Pressure ）Liquid Chromatography)（HPLC ）(1) 原理：動相流速由HPLC 管柱材質之強度或堅硬度來決定，管柱半徑減少和長度增加都會增加靜相的壓力，在流速固定1 mL/min 狀況下，長度相同的管柱，口徑20 mm 壓力會比口徑5 mm 的管柱少。
目前HPLC 管柱可承受的流速範圍可高至100 mL/min 或低到0.5 mL/min 。