生化实验基本操作 PPT
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生化检验PPT课件
中毒、肾后性因素引起的排尿障碍、库欣综合征等 • 减低主要见于严重的呕吐、腹泻、消化液大量丢失、
糖尿病性昏迷、肺炎、肠梗阻、幽门梗阻爱迪生病等
35
• 血清钙 • 增高:主要见于摄入过多、原发性甲亢、原发
性甲状旁腺功能亢进、转移性骨癌、多发性骨 髓瘤、肾上腺功能不全、急性肾性肾功能不全 等 • 减低:摄入和吸收不足、甲减、甲亢术后、恶 性肿瘤骨转移、佝偻病、软骨病、急慢性肾衰 竭、肾病综合征、肾小管性酸中毒等
• 生理性低血糖:饥饿和剧烈运动。病理性低血糖 1 胰岛素B细胞增生或瘤等。2 对抗胰岛素的激素分泌 不足,如垂体前叶机能减退肾上腺皮质机能减退和 甲状腺机能减退等。3 严重肝病患者。
17
葡萄糖耐量试验OGTT 适应证:1、空腹血糖水平在临界值(6-7mmol/L)而 又疑糖尿病患者;2、空腹或餐后血糖浓度正常,但有 发展为糖尿病可能的人群;3、以前耐量实验异常的危 险人群;4、妊娠性糖尿病的诊断;5、临床上出现肾 病、神经性病变和视网膜病而又无法做出合理性解释 者;6、作为流行病学研究的手段。
6
AST谷草转氨酶 在心肌细胞内含量较多,当心肌梗塞时,血清 中活力增高,在发病后6-12小时之内显著增高, 在48小时达高峰,3-5天恢复正常。也来源于肝 细胞,各种肝病可引起血清的升高,有时可达 1200IU/L,中毒性肝炎还可更高。
7
• ALP碱性磷酸酶 1 肝胆疾病:阻塞性黄疸 急性或慢性黄疸性肝 炎肝癌等。 2 骨骼疾病:由于骨的损伤或疾病使成骨细胞内 所含高浓度的ALP释放入血液中,引起ALP活力 增高。
18
• 0.5-1小时在7.78-8.89之间,2小时恢复正常 • (实验前三天受试者每日食物中含糖量不低于150g,且正常活动。
糖尿病性昏迷、肺炎、肠梗阻、幽门梗阻爱迪生病等
35
• 血清钙 • 增高:主要见于摄入过多、原发性甲亢、原发
性甲状旁腺功能亢进、转移性骨癌、多发性骨 髓瘤、肾上腺功能不全、急性肾性肾功能不全 等 • 减低:摄入和吸收不足、甲减、甲亢术后、恶 性肿瘤骨转移、佝偻病、软骨病、急慢性肾衰 竭、肾病综合征、肾小管性酸中毒等
• 生理性低血糖:饥饿和剧烈运动。病理性低血糖 1 胰岛素B细胞增生或瘤等。2 对抗胰岛素的激素分泌 不足,如垂体前叶机能减退肾上腺皮质机能减退和 甲状腺机能减退等。3 严重肝病患者。
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葡萄糖耐量试验OGTT 适应证:1、空腹血糖水平在临界值(6-7mmol/L)而 又疑糖尿病患者;2、空腹或餐后血糖浓度正常,但有 发展为糖尿病可能的人群;3、以前耐量实验异常的危 险人群;4、妊娠性糖尿病的诊断;5、临床上出现肾 病、神经性病变和视网膜病而又无法做出合理性解释 者;6、作为流行病学研究的手段。
6
AST谷草转氨酶 在心肌细胞内含量较多,当心肌梗塞时,血清 中活力增高,在发病后6-12小时之内显著增高, 在48小时达高峰,3-5天恢复正常。也来源于肝 细胞,各种肝病可引起血清的升高,有时可达 1200IU/L,中毒性肝炎还可更高。
7
• ALP碱性磷酸酶 1 肝胆疾病:阻塞性黄疸 急性或慢性黄疸性肝 炎肝癌等。 2 骨骼疾病:由于骨的损伤或疾病使成骨细胞内 所含高浓度的ALP释放入血液中,引起ALP活力 增高。
18
• 0.5-1小时在7.78-8.89之间,2小时恢复正常 • (实验前三天受试者每日食物中含糖量不低于150g,且正常活动。
生化实验基本操作ppt课件
.
5.废弃液体(强酸强碱溶液必须先用水稀释) 可倒入水槽内,同时放水冲走。废纸及其他 固体废物和带有渣滓沉淀的废液都应倒入指 定的垃圾筐内,不得倒入水槽或到处乱扔。
.
6.对实验的内常现象 应进行讨论,并大胆提出自己的看法,做到 生动、活泼、主动地学习。
.
9.使用浓酸、浓碱,必须极为小心地操作, 防止溅失。用吸量管取这些试剂时,必须使 用橡皮球,绝对不能用口吸。若不慎溅在实 验台或地面,必须及时用湿抹布擦洗干净。 如果触及皮肤,应立即治疗。
.
10.如果不慎倾出了相当量的易燃液体,则 应按下法处理:(1)立即关闭室内所有的火 源和电加热器。(2)关门,开启小窗及窗户。 (3)用毛巾或抹布擦拭洒出的液体,并将液 体拧到大的容器中,然后再倒入带塞的玻璃 瓶。
.
3.注意保持实验室的整洁。实验完毕,须 将药品试剂排列整齐,仪器要放好,将实验 台面抹拭干净。使用后的玻璃仪器要清洗干 净放好。
.
4.要爱护实验仪器,节约使用各种试剂、 物品。使用仪器时,应小心仔细,防止损坏 仪器。使用贵重精密仪器时,应严格遵守操 作规程,发现故障立即报告教师,不要自己 动手检修。仪器损坏时,应如实向教师报告。
实验一 生化实验基本操作
临床生物化学与分子生物学教研室
.
生物化学基本技术及应用
一、实验常识 (一)、实验室规则及安全及防护知识 1.自觉地遵守课堂纪律,维护课堂秩序,
保持室内安静。必须穿白大褂,不能穿背心、 拖鞋进入实验室。
.
2.要认真、严肃、积极、主动地做实验, 要听从教师的指导。实验过程中要认真做好 观察、记录。完成实验后经教师检查同意, 方可离开。实验完成后要及时的按要求完成 实验报告。
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四、实验室基本操作和常识
5.废弃液体(强酸强碱溶液必须先用水稀释) 可倒入水槽内,同时放水冲走。废纸及其他 固体废物和带有渣滓沉淀的废液都应倒入指 定的垃圾筐内,不得倒入水槽或到处乱扔。
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6.对实验的内常现象 应进行讨论,并大胆提出自己的看法,做到 生动、活泼、主动地学习。
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9.使用浓酸、浓碱,必须极为小心地操作, 防止溅失。用吸量管取这些试剂时,必须使 用橡皮球,绝对不能用口吸。若不慎溅在实 验台或地面,必须及时用湿抹布擦洗干净。 如果触及皮肤,应立即治疗。
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10.如果不慎倾出了相当量的易燃液体,则 应按下法处理:(1)立即关闭室内所有的火 源和电加热器。(2)关门,开启小窗及窗户。 (3)用毛巾或抹布擦拭洒出的液体,并将液 体拧到大的容器中,然后再倒入带塞的玻璃 瓶。
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3.注意保持实验室的整洁。实验完毕,须 将药品试剂排列整齐,仪器要放好,将实验 台面抹拭干净。使用后的玻璃仪器要清洗干 净放好。
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4.要爱护实验仪器,节约使用各种试剂、 物品。使用仪器时,应小心仔细,防止损坏 仪器。使用贵重精密仪器时,应严格遵守操 作规程,发现故障立即报告教师,不要自己 动手检修。仪器损坏时,应如实向教师报告。
实验一 生化实验基本操作
临床生物化学与分子生物学教研室
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生物化学基本技术及应用
一、实验常识 (一)、实验室规则及安全及防护知识 1.自觉地遵守课堂纪律,维护课堂秩序,
保持室内安静。必须穿白大褂,不能穿背心、 拖鞋进入实验室。
.
2.要认真、严肃、积极、主动地做实验, 要听从教师的指导。实验过程中要认真做好 观察、记录。完成实验后经教师检查同意, 方可离开。实验完成后要及时的按要求完成 实验报告。
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四、实验室基本操作和常识
实验一生化实验基本操作(移液管、离心机,分光光度计的使用)
➢ 平衡 两只装有待离心液体的离心管分别放入两个完 整的并且配备了橡皮软垫的离心套管之中,置天平两 侧配平,用滴管在较轻一侧离心管和套管之间加水, 直到平衡。
➢ 放置 检查离心机,机内应无异物和无用的套管,并 且运转平稳。将已配平的两管对称地放入离心机的离 心孔内,做好标记,盖好上盖,开启电源。
➢ 离心 顺时针慢慢旋动转速调节钮,增加离心机转速 。当离心机转速达到要求时,记录离心时间。
B:
• A.选用最大刻度的吸管
• B.应选用取液量最接近的刻度吸管
• C.选用最小刻度的吸管
• 3.离心时平衡好放入离心机时
A:Leabharlann • A.对称放置 B.分开放置 C. 紧挨放置
Lambert 定律 lgI0/I=K1L
Beer 定律 lgI0/I=K2C
Lambert-Beer 定律 lgI0/I=KCL
令A= lgI0/I 则 A= -lgT= KCL T为透光度; A为吸光度; K为消光系数
Fingure 1. The main elements of spectrometer
端旁;用橡皮球吸液体至刻度上,眼睛看着液面 上升;吸完后用食指顶住吸管顶端;吸管保持垂 直,尖端与试剂瓶接触,用食指控制液体下降至 所需体积的刻度处,液体凹面、刻度和视线应在 同一水平面上;吸管移入准备接受溶液的盛器中 ,放开食指,使液体自动流出
二、离心机的使用
➢ 装液 将待离心的液体置于玻璃离心管(刻度离心管 )或短试管中。
➢ 直接计算法: C样=A样/A标*C标
➢ 标准曲线法:浓度为X轴,吸光度为Y轴绘制标 准曲线,在标准曲线上获得未知浓度CoSO4的浓 度。
结果
管号 空白管 1
Abs
0
➢ 放置 检查离心机,机内应无异物和无用的套管,并 且运转平稳。将已配平的两管对称地放入离心机的离 心孔内,做好标记,盖好上盖,开启电源。
➢ 离心 顺时针慢慢旋动转速调节钮,增加离心机转速 。当离心机转速达到要求时,记录离心时间。
B:
• A.选用最大刻度的吸管
• B.应选用取液量最接近的刻度吸管
• C.选用最小刻度的吸管
• 3.离心时平衡好放入离心机时
A:Leabharlann • A.对称放置 B.分开放置 C. 紧挨放置
Lambert 定律 lgI0/I=K1L
Beer 定律 lgI0/I=K2C
Lambert-Beer 定律 lgI0/I=KCL
令A= lgI0/I 则 A= -lgT= KCL T为透光度; A为吸光度; K为消光系数
Fingure 1. The main elements of spectrometer
端旁;用橡皮球吸液体至刻度上,眼睛看着液面 上升;吸完后用食指顶住吸管顶端;吸管保持垂 直,尖端与试剂瓶接触,用食指控制液体下降至 所需体积的刻度处,液体凹面、刻度和视线应在 同一水平面上;吸管移入准备接受溶液的盛器中 ,放开食指,使液体自动流出
二、离心机的使用
➢ 装液 将待离心的液体置于玻璃离心管(刻度离心管 )或短试管中。
➢ 直接计算法: C样=A样/A标*C标
➢ 标准曲线法:浓度为X轴,吸光度为Y轴绘制标 准曲线,在标准曲线上获得未知浓度CoSO4的浓 度。
结果
管号 空白管 1
Abs
0
【优秀版】生化实验基本操作PPT
图D:压住按钮,同时提起加样器,使吸头贴容器壁擦过。 图C:将吸头口贴到容器内壁底部并保持倾斜,平稳地把按钮压到 图A:把按钮压至第一停点, 生物化学与分子生物学实验教学中心
图A:把按钮压至第一停点, 第一停点 。
生物化学与分子生物学实验教学中心
第一停点 。
图E:松开按钮,按吸头弹射器除去吸头。
图C:将吸头口贴到容器内壁底部并保持倾斜,平稳地把按钮压到 生物化学与分子生物学实验教学中心 平稳地松开按钮,吸入液体。 图D:压住按钮,同时提起加样器,使吸头贴容器壁擦过。 生物化学与分子生物学实验教学中心 图B:垂直握持加样器,使吸头浸入液面下3-5毫米处,然后缓慢 平稳地松开按钮,吸入液体。 图C:将吸头口贴到容器内壁底部并保持倾斜,平稳地把按钮压到 图D:压住按钮,同时提起加样器,使吸头贴容器壁擦过。 图E:松开按钮,按吸头弹射器除去吸头。 生物化学与分子生物学实验教学中心 平稳地松开按钮,吸入液体。
图A:把按钮压至第一停点, 图B:垂直握持加样器,使吸头浸入液面下3-5毫米处,然后缓慢
图B:垂直握持加样器,使吸头浸入液面下3-5毫米处,然后缓慢
平稳地松开按钮,吸入液体。
图C:将吸头口贴到容器内壁底部并保持倾斜,平稳地把按钮压到
第一停点 。
图D:压住按钮,同时提起加样器,使吸头贴容器壁擦过。
图E:松开按钮,按吸头弹射器除去吸头。
生化实验基本操作
基本操作技术内容
1 玻璃器皿的洗涤 2 溶液的混匀技术 3 吸量管、加样器的使用
生物化学与分子生物学实验教学中心
图B:垂直握持加样器,使吸头浸入液面下3-5毫米处,然后缓慢 图D:压住按钮,同时提起加样器,使吸头贴容器壁擦过。 平稳地松开按钮,吸入液体。
图B:垂直握持加样器,使吸头浸入液面下3-5毫米处,然后缓慢 图B:垂直握持加样器,使吸头浸入液面下3-5毫米处,然后缓慢 图B:垂直握持加样器,使吸头浸入液面下3-5毫米处,然后缓慢 第一停点 。
图A:把按钮压至第一停点, 第一停点 。
生物化学与分子生物学实验教学中心
第一停点 。
图E:松开按钮,按吸头弹射器除去吸头。
图C:将吸头口贴到容器内壁底部并保持倾斜,平稳地把按钮压到 生物化学与分子生物学实验教学中心 平稳地松开按钮,吸入液体。 图D:压住按钮,同时提起加样器,使吸头贴容器壁擦过。 生物化学与分子生物学实验教学中心 图B:垂直握持加样器,使吸头浸入液面下3-5毫米处,然后缓慢 平稳地松开按钮,吸入液体。 图C:将吸头口贴到容器内壁底部并保持倾斜,平稳地把按钮压到 图D:压住按钮,同时提起加样器,使吸头贴容器壁擦过。 图E:松开按钮,按吸头弹射器除去吸头。 生物化学与分子生物学实验教学中心 平稳地松开按钮,吸入液体。
图A:把按钮压至第一停点, 图B:垂直握持加样器,使吸头浸入液面下3-5毫米处,然后缓慢
图B:垂直握持加样器,使吸头浸入液面下3-5毫米处,然后缓慢
平稳地松开按钮,吸入液体。
图C:将吸头口贴到容器内壁底部并保持倾斜,平稳地把按钮压到
第一停点 。
图D:压住按钮,同时提起加样器,使吸头贴容器壁擦过。
图E:松开按钮,按吸头弹射器除去吸头。
生化实验基本操作
基本操作技术内容
1 玻璃器皿的洗涤 2 溶液的混匀技术 3 吸量管、加样器的使用
生物化学与分子生物学实验教学中心
图B:垂直握持加样器,使吸头浸入液面下3-5毫米处,然后缓慢 图D:压住按钮,同时提起加样器,使吸头贴容器壁擦过。 平稳地松开按钮,吸入液体。
图B:垂直握持加样器,使吸头浸入液面下3-5毫米处,然后缓慢 图B:垂直握持加样器,使吸头浸入液面下3-5毫米处,然后缓慢 图B:垂直握持加样器,使吸头浸入液面下3-5毫米处,然后缓慢 第一停点 。
生物化学检验ppt课件
酶类CK-MB,α-AMY等。
底物/代谢产物类:包括TG,TC,HDL-C,LDL-C,UA, UREA,Cr,Glu,TP,Alb,T-Bil,D-Bil,NH4+,CO2 等。
无机离子类:包括Ca,P,Mg,Cl 等。
认识到了贫困户贫困的根本原因,才 能开始 对症下 药,然 后药到 病除。 近年来 国家对 扶贫工 作高度 重视, 已经展 开了“ 精准扶 贫”项 目
吸收曲线
波长从200nm-400nm 的电磁波,称为紫外光,波长从400nm-760nm 的电磁波,称为可见光。以波长(λ)为横坐标,以吸光度为纵坐标而绘 制出的一条曲线称为吸收曲线,在一段波长范围内,有最大吸收波长 λmax 和最小吸收波长λmin,在最大吸收波长处测定可获得最大的测 定灵敏度。
认识到了贫困户贫困的根本原因,才 能开始 对症下 药,然 后药到 病除。 近年来 国家对 扶贫工 作高度 重视, 已经展 开了“ 精准扶 贫”项 目
二、连续监测法
连续监测法属于动态法检测的一种,适用于酶活性测 定和代谢物检测,多有酶的参与。该法是通过适当的 仪器,连续测定酶促反应过程中某一反应产物或底物 的浓度随时间变化的情况。原理是:在酶反应的最适 条件下,用物理、化学或酶促反应的分析方法,在反 应速度恒定期(零级反应期)来连续观察和记录一定 时间内底物或产物量的变化,以单位时间酶反应初速 度计算出酶活力大小代谢物的浓度。计算方法有:1) 绝对法:酶活力(U/L)=△A×(反应液体积/样品体 积)×(1000/消光系数);2)相对法:酶活力 (U/L)=〔 △A (测定)/ △A (标准) 〕标准物的 活力或浓度。
两点终点法
两点终点法也称因定时间法,它可以用一种试剂或两 种试剂。这种方法是近年来,可加双试剂的生化分析 仪问世后,才被广泛应用。优点是可以消除样品、试 剂的颜色、浊度,以及一些干扰物对测定的干扰。原 理是:加入样品→试剂1 →读取A1 →试剂2 →读取 A2,其中要读取两次吸光度值,第一次相当于读出样 品空白的值,加入试剂2至第二次读数才是实际呈色 反应,因此A=A1-A2。比浊法也是一种终点法,不过 是一种浊度测定,而不是比色测定。比浊法可分为化 学比浊法与免疫比浊法,免疫比浊法又分为透射比浊 法和散射比浊法。免疫比浊法目前主要用于血清特种 蛋白的测定,如载脂蛋白(apoAI,apoB 等)、补体类(C3、
底物/代谢产物类:包括TG,TC,HDL-C,LDL-C,UA, UREA,Cr,Glu,TP,Alb,T-Bil,D-Bil,NH4+,CO2 等。
无机离子类:包括Ca,P,Mg,Cl 等。
认识到了贫困户贫困的根本原因,才 能开始 对症下 药,然 后药到 病除。 近年来 国家对 扶贫工 作高度 重视, 已经展 开了“ 精准扶 贫”项 目
吸收曲线
波长从200nm-400nm 的电磁波,称为紫外光,波长从400nm-760nm 的电磁波,称为可见光。以波长(λ)为横坐标,以吸光度为纵坐标而绘 制出的一条曲线称为吸收曲线,在一段波长范围内,有最大吸收波长 λmax 和最小吸收波长λmin,在最大吸收波长处测定可获得最大的测 定灵敏度。
认识到了贫困户贫困的根本原因,才 能开始 对症下 药,然 后药到 病除。 近年来 国家对 扶贫工 作高度 重视, 已经展 开了“ 精准扶 贫”项 目
二、连续监测法
连续监测法属于动态法检测的一种,适用于酶活性测 定和代谢物检测,多有酶的参与。该法是通过适当的 仪器,连续测定酶促反应过程中某一反应产物或底物 的浓度随时间变化的情况。原理是:在酶反应的最适 条件下,用物理、化学或酶促反应的分析方法,在反 应速度恒定期(零级反应期)来连续观察和记录一定 时间内底物或产物量的变化,以单位时间酶反应初速 度计算出酶活力大小代谢物的浓度。计算方法有:1) 绝对法:酶活力(U/L)=△A×(反应液体积/样品体 积)×(1000/消光系数);2)相对法:酶活力 (U/L)=〔 △A (测定)/ △A (标准) 〕标准物的 活力或浓度。
两点终点法
两点终点法也称因定时间法,它可以用一种试剂或两 种试剂。这种方法是近年来,可加双试剂的生化分析 仪问世后,才被广泛应用。优点是可以消除样品、试 剂的颜色、浊度,以及一些干扰物对测定的干扰。原 理是:加入样品→试剂1 →读取A1 →试剂2 →读取 A2,其中要读取两次吸光度值,第一次相当于读出样 品空白的值,加入试剂2至第二次读数才是实际呈色 反应,因此A=A1-A2。比浊法也是一种终点法,不过 是一种浊度测定,而不是比色测定。比浊法可分为化 学比浊法与免疫比浊法,免疫比浊法又分为透射比浊 法和散射比浊法。免疫比浊法目前主要用于血清特种 蛋白的测定,如载脂蛋白(apoAI,apoB 等)、补体类(C3、
实验室检查生化PPT课件
结合胆红素由胆道排入肠腔,被细菌还原成 尿胆原。 一部分尿胆原被肠粘膜吸收进入体内被肝细 胞摄取,其中一部分进入血循环从肾脏排出。 残留肠腔的尿胆原氧化后,以粪胆素排出 因此,当胆红素生成过多或肝细胞的摄取、 结合、转运、排泄等过程发生障碍,可导致 血中胆红素升高。
1.血清胆红素测定
包括总胆红素(STB),结合胆红素(CB) 和非结合胆红素(UCB)。
参考值: 总胆红素(STB) 1.7-17.1umol/L 结合胆红素(CB) 0-6.8umol/L 非结合胆红素(UCB)1.7-10.2umol/L
临床意义:
(1)根据总胆红素判断有无黄疸及黄疸的程度
STB 17.1—34.2 mol/L 隐性黄疸
34.2—171 mol/L 轻度黄疸
171—342mol/L 中度黄疸
实验室检查之
生化检验
第一节 肝功能检查
一.反映蛋白质代谢功能
1.总蛋白(TP) 60-80 g/L,是血清中所含各种蛋白
的总称,包括白蛋白和球蛋白,。
2.白蛋白(ALB) 40-50 g/L,为血液中的主要蛋白
质由肝脏合成,白蛋白主要维持血浆渗透 压,代谢物质转运,供能作用。
3.球蛋白(GLO) 20-30 g/L,为血清中总蛋白减去
(4) 结合胆红素还有助于早期发现处于隐 性黄疸肝胆疾病。
2.尿胆红素和尿胆原测定
非结合胆红素为脂溶性非极性物质,不能 透过肾小球滤过膜,溶血性黄疸尿胆红素 为阴性;
结合胆红素是水溶性极性物质,可以通过 肾小球滤过膜从尿中排出,肝细胞性和梗 阻性黄疸尿胆红素为阳性。
尿胆原在溶血性黄疸和肝细胞性黄疸时浓 度升高。
白蛋白以外的蛋白质(TP-A=G),主要为免疫 球蛋白和补体,与机体的免疫状态有关。
临床常用血生化检查ppt课件
全、尿路梗阻、心力衰竭、过度换气、呼碱 ▪ 血清氯化物降低:<98mmol/L为低氯血症 ⑴排出过多:严重呕吐、腹泻、胃肠造瘘或引流 ⑵摄入不足:长期饥饿,神经性厌食、无盐饮食
.
血清钙、磷测定
❖ 标本采集方法
▪ 抽取空腹血3ml,单项测定时为2ml,不抗凝 ▪ 切勿混入抗凝剂及杂质 ▪ 测定前避免引起电解质改变的因素,如大量饮
(2)佝偻病与软骨病:体内维生素D缺 乏,使钙吸收障碍,导致钙、磷都偏者。
(3)慢性肾炎尿毒症,严重肝炎时,见 血钙降低。
(4)长期低钙饮食或吸收不良,在严重 乳糜泻时,食物中的钙与未吸收的脂肪酸结合 生成钙皂,排出体外而造成低血钙。
(5)新生儿低.血钙症,可引起惊厥。
血清无机磷
❖ 概述
▪ 血磷系指血清中无机磷酸盐中所含的磷。体内 大部分磷是以磷酸钙的形式存在于骨骼中的, 少部分构成重要的有机化合物,如磷脂、核苷 酸等。而血清中的无机磷酸盐只占极少部分, 它构成血液的缓冲系统。人体所需的磷主要由 食物供给,在小肠上段补吸收,经肾脏和肠排 泄,肾小管又对磷的排泄起控制作用。
(4)多发性骨髓瘤及骨折愈合期血磷也会 增高。
.
血清无机磷降低
(1)甲状旁腺机能亢进,尿磷排泄量增加 而使血清磷降低。
(2)肾小管变性病变,如范可尼综合症, 肾小管重吸收磷功能障碍。
(3)佝偻病或软骨病时,伴有继发性甲状 旁腺增生,肾脏排磷增加。
(4)长期腹泻或吸收不良,使血磷的来源 减少。
.
血清总胆固醇测定
3.血糖增高见于( ) A.钾排泄障碍 B.大量输入葡萄糖和胰岛素 C.糖皮质功能亢进 D.急性碱中毒 4.总胆固醇下降见于 A、冠状动脉粥样硬化 B、肾病综合征 C、重症糖
尿病D、严重肝细胞受损如重症肝炎E、高血压
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血清钙、磷测定
❖ 标本采集方法
▪ 抽取空腹血3ml,单项测定时为2ml,不抗凝 ▪ 切勿混入抗凝剂及杂质 ▪ 测定前避免引起电解质改变的因素,如大量饮
(2)佝偻病与软骨病:体内维生素D缺 乏,使钙吸收障碍,导致钙、磷都偏者。
(3)慢性肾炎尿毒症,严重肝炎时,见 血钙降低。
(4)长期低钙饮食或吸收不良,在严重 乳糜泻时,食物中的钙与未吸收的脂肪酸结合 生成钙皂,排出体外而造成低血钙。
(5)新生儿低.血钙症,可引起惊厥。
血清无机磷
❖ 概述
▪ 血磷系指血清中无机磷酸盐中所含的磷。体内 大部分磷是以磷酸钙的形式存在于骨骼中的, 少部分构成重要的有机化合物,如磷脂、核苷 酸等。而血清中的无机磷酸盐只占极少部分, 它构成血液的缓冲系统。人体所需的磷主要由 食物供给,在小肠上段补吸收,经肾脏和肠排 泄,肾小管又对磷的排泄起控制作用。
(4)多发性骨髓瘤及骨折愈合期血磷也会 增高。
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血清无机磷降低
(1)甲状旁腺机能亢进,尿磷排泄量增加 而使血清磷降低。
(2)肾小管变性病变,如范可尼综合症, 肾小管重吸收磷功能障碍。
(3)佝偻病或软骨病时,伴有继发性甲状 旁腺增生,肾脏排磷增加。
(4)长期腹泻或吸收不良,使血磷的来源 减少。
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血清总胆固醇测定
3.血糖增高见于( ) A.钾排泄障碍 B.大量输入葡萄糖和胰岛素 C.糖皮质功能亢进 D.急性碱中毒 4.总胆固醇下降见于 A、冠状动脉粥样硬化 B、肾病综合征 C、重症糖
尿病D、严重肝细胞受损如重症肝炎E、高血压
第三章生化检验实验室基本知识ppt课件
二、普通玻璃仪器的清洗
使用过的玻璃仪器的清洗
1. 容器类玻璃仪器 如试管、烧杯、锥 形瓶等。先用自来水洗刷至无污物,再选用 大小合适的毛刷蘸取去污粉(掺入肥皂粉) 或浸入肥皂水内。将器皿内外(特别是内壁) 细心刷洗,用自来水冲洗干净后,蒸馏水冲 洗2~3次,烤干或倒置在清洁处,干后备用。
使用过的玻璃仪器的清洗
一、普通玻璃仪器的使用
(一)量筒 用于不太精确的液体计量。不能用做反 应容器,不能装热的液体。 (二)容量瓶 用于把精确称量的物质配置成准确浓度 的溶液或是将准确容积及浓度的浓溶液稀释 成准确浓度及容积的稀溶液。 容量瓶与瓶塞要配套使用,使用时不要 一次性将溶液加至刻度。容量瓶不能烘烤。
(三)移液管、吸量管
二、水的纯度检查
水的纯度检查包括用电导仪测定其电导 率或电阻率,用特定试剂检测水中残留的 Ca2+、Mg2+、Cl-、SO42-等成分,细菌培养 计数菌落。
1. 电阻率 用电导仪或兆欧表测定,用电 导仪测得的电导率,可与电阻率进行换算。 电导单位为西门子(s),电导是电阻的倒数, 即1s=1Ω-1;每cm长的电导为电导率(s·cm- 1)。
4. 实验用纯水标准及用途 1976年,CAP 提出了实验用水的三级标准,1985年,NCCLS 又提出了新标准。
第二节 实验用玻璃仪器
实验用玻璃仪器分为容器类和量器类。 容器类玻璃仪器为常温或加热条件下,物质 的反应容器和贮存容器,如试管、烧杯、锥 形瓶、试剂瓶等。量器类玻璃仪器用于计量 溶液体积,不能作为实验容器,如量筒、容 量瓶、移液管、吸量管、滴定管等。
移液管和吸量管是用于准确量取一定体 积液体的量出式的玻璃量器。
移液管用于吸取固定量的溶液。最精确。
吸量管是具有分刻度的玻璃管,用于吸 取非固定量的溶液。
生化检验实验室基本知识PPT医学课件
三、生化检验项目
(二)急诊生化检验项目
急诊项目:指对临床危急、重症病人的诊断、 抢救和治疗有重要指导意义的检验项目。一 般要求从“标本采取”到“检验报告”发出 控制在2h内。如血气分析、肾功、电解质、 心功等
急 诊 项 目
危 急 值
常 规 项 目
检验项目
三、生化检验项目
(三)特殊项目 指标本采集技术高,或标本数量少,或含有
转动后,方可打开离心机盖,取出样品
(二)电解质分析仪
溶液中被测离子接触电极时 ,在离子选择电极基质的含 水层内发生离子迁移,迁移 离子的电荷改变存在电势, 使膜面间的电位发生变化, 在测量电极与参比电极间产 生一个电位差,测量电位差 大小可求得待测离子浓度
(三)血气分析仪
血气分析仪不仅能在几分钟 内检测出病人血液中的氧气、 二氧化碳等气体的含量和血 液酸碱度及相关指标的变化, 还能快速反映血液中钾、钠、 钙的含量,为危重病人抢救 中快速、准确的检测提供了 有利的保障。
2.饮食因素: 下降:Alb、铁、钾、总胆
3.药物因素: 4.溶血因素: 5.储存因素:
受饮食影响的项目
项目:GLU、TG、ALP、血酯、丙酮酸、乳酸、 BUN、UA、转氨酶等
原则:空腹6-12h后采血
受药物影响的项目
药物影响检验结果途径: 1.药物本身对检验方法的影响 2.药物代谢产物对检验方法的影响 3.药物对代谢器官功能的影响 原则:检验受某种药物影响的项目之前3天,
固定相具有离子交换性能。主要用于分离氨基酸、多肽、蛋 白质、核酸、同工酶等
高效液相层 分离能力强、测定灵敏度高、可室温下进行。主要用于分离
析法
蛋白质、核酸、氨基酸等
操作简单、快速、分离效率高,但必须针对某一分离对象, 亲和层析法 制备专一配基和寻求层析的稳定条件,应用范围受到限制。
生化ELISA 实验PPT
手动生化结果
OD值为手动加样酶标仪测值,样本活力是根据计算公式计算出来的结果
手动生化常见问题 1.样本复孔相差较大是怎么回事? 答:一般情况下样本结果相差不会很大,如果结果差异大,先看一下样本OD值 是否很低,样本OD值很低的情况下,即使相差只有0.01,经过计算,会放大误差, 所以导致复孔结果相差较大。 2.有没有试剂盒?指标能不能测?怎么收费? 答:备货的试剂盒只有SOD,MDA和GSH-PX,检测费10块一个样包含试剂费。 其余的指标都需要提供试剂盒不包含试剂费,检测费也是10块一个样。指标能不 能测要看能不能买到该指标的生化试剂盒,一般我们国产试剂盒用的是南京建成 的,可以去官网查。 3.细胞上清能测吗?样本溶血有影响吗? 答:厂家虽然说可以测细胞上清,但是细胞上清有颜色会对OD值又较大影响。 不建议测细胞上清。同理样本溶血红细胞破裂,红细胞里的物质释放可能会影响 结果,且样本溶血颜色也会对OD值造成影响。 4.紫外法能测吗? 答:我们酶标仪为全波长酶标仪,可以测可见光和紫外光,所以可以测紫外法的 试剂盒。但是测紫外光需要用紫外板,紫外板需要额外收费80元。
血常规检测
全自动动物血细胞分析仪
实验要求
• 用EDTA抗凝管采血100ul以上全血,不能有 凝块。
• 血液尽量新鲜,4度保存运输,时间越长效 果越差,超过一周不能用。
• 实验周期为一天
血常规结果
结果以电子档WORD 形式发送
常见问题 1.样本是否异常? 答:样本4°长途运输,时间越长效果越差,肉眼可见的凝块会在实验结 果上标注,有些样本异常肉眼无法判断。 2.血常规报告上的参考范围是哪里来的? 答:血常规为血球仪检测,检测范围为血球仪自带。
实验流程 实验流程(具体步骤以说明书为准): 1.样本准备:血清、血浆、组织匀浆、细胞上清; 2.操作步骤:处理样本配制标准品—加样(标准品及样本)—洗板,加检 测抗体溶液,孵育—洗板,加酶溶液,孵育— 洗板,加TMB底物— 加终 止液50ul,立即450nm读数(双抗夹心法) 处理样本配制标准品—加样(标准品及样本)—加酶溶液—加检测抗体— 混匀孵育— 洗板,加TMB显色— 加终止液50ul,立即450nm读数(竞争 法) 3.实验结果:有样本OD值代入标曲中计算出浓度,结果以EXCEL形式发 出。
临床生化检验基础PPT课件
转速选择:RCF=1.118×L×(r/1000)2 RCF:相对离心力,在生化检验分析中的
标本相对离心力在1500~1800; L:离心半径,以mm计算,即离心管至旋
转轴中心距离; r:转子每分钟转速。
标本的处理
分离注意事项:
转速不够,离心不彻底,不能很好的将 血清分离,在血清中容易夹杂纤维蛋白,在测 试过程中容易堵针,影响测试。
主要内容
生化检验的概述 生化检验的对象 生化检验的手段
生化检验的作用
概述
临床生化检验:主要是运用物理学、化 学、生物学等实验室技术和方法,通过感官、 试剂反应、仪器分析和动物实验等手段,对 病人的血液、体液、分泌液、排泄物等标本 进行检验,以获得反映机体功能状态、病理 变化或病因等的客观资料。
对象
ε ×Vs×d ε ×d
VS
在临床测试中,外界环境因素、试剂本
检测方法
比浊法:
免疫比浊法: 免疫透射比浊法:是在光源的光路方向 测量透射强度,用终 点法测量。 用于血清特种蛋白的检测。 免疫散射比浊法: 常用于血凝仪中。
化学比浊法
校准品
定标:浓度和反应度关系,找K值。
K=C标准/(A标准-A试剂空白) 决定因素:
1、标准液浓度,最好是血清基质,否则 可能会因为基质效应而影响定标效果。
肝功能 胰腺炎 前列腺疾病
肾功能 无机离子 免疫性疾病
血糖
痛风
免疫炎症反应
血脂
中毒
心肌酶谱
检测试剂
常见生化项目之间的关系:
GLO=TP-ALB
A/G=ALB/GLO
O/P=AST/ALT
I-BIL=T-BIL-D-BIL
AⅠ/B=ApoAⅠ/ApoB CK-MM=CK-CK-MB
标本相对离心力在1500~1800; L:离心半径,以mm计算,即离心管至旋
转轴中心距离; r:转子每分钟转速。
标本的处理
分离注意事项:
转速不够,离心不彻底,不能很好的将 血清分离,在血清中容易夹杂纤维蛋白,在测 试过程中容易堵针,影响测试。
主要内容
生化检验的概述 生化检验的对象 生化检验的手段
生化检验的作用
概述
临床生化检验:主要是运用物理学、化 学、生物学等实验室技术和方法,通过感官、 试剂反应、仪器分析和动物实验等手段,对 病人的血液、体液、分泌液、排泄物等标本 进行检验,以获得反映机体功能状态、病理 变化或病因等的客观资料。
对象
ε ×Vs×d ε ×d
VS
在临床测试中,外界环境因素、试剂本
检测方法
比浊法:
免疫比浊法: 免疫透射比浊法:是在光源的光路方向 测量透射强度,用终 点法测量。 用于血清特种蛋白的检测。 免疫散射比浊法: 常用于血凝仪中。
化学比浊法
校准品
定标:浓度和反应度关系,找K值。
K=C标准/(A标准-A试剂空白) 决定因素:
1、标准液浓度,最好是血清基质,否则 可能会因为基质效应而影响定标效果。
肝功能 胰腺炎 前列腺疾病
肾功能 无机离子 免疫性疾病
血糖
痛风
免疫炎症反应
血脂
中毒
心肌酶谱
检测试剂
常见生化项目之间的关系:
GLO=TP-ALB
A/G=ALB/GLO
O/P=AST/ALT
I-BIL=T-BIL-D-BIL
AⅠ/B=ApoAⅠ/ApoB CK-MM=CK-CK-MB
生化实验基本操作
• 4.新购置的玻璃仪器,应先置于1-2%稀盐酸 溶液中浸泡2-6小时,除去附着的游离碱,再 用自来水冲洗干净,最后用蒸馏水冲洗2-3次。
总的原则:凡用过的玻璃仪器,均应立即洗 涤,久置干涸后洗涤十分困难。如不能及时洗 涤,先用流水初步冲洗后浸泡在清水中,待后 按常规处理。
• 3.粘附有血浆的刻度吸量管等,有三种洗涤方 法:
㈡ 混匀的方法通常有以下几种:
1. 颠倒混匀:用玻璃纸堵住管口,上下颠倒混 匀。
2.叩击混匀:左手执试管上端,用右手指轻击试 管下半部,使管内溶液作旋转运动。
3.利用旋涡混合(振荡)器混匀。 4.振荡混匀:右手执试管上部,手腕抖动混匀。 5.不得已时可用干燥清洁的玻璃棒搅匀。
㈢ 混匀的注意事项: • ⒈防止盛器内的液体溅出或被污染。 • ⒉严禁用手指堵塞管口或瓶口震荡混匀。
三. 溶液的混匀
㈠混匀的目的: • ⒈使反应体系内的各种物质分子很好地互相接
触,充分进行反应;
• ⒉使欲稀释的溶液成为浓度均一的溶液。
电动离心机的使用方法:
• 1.将欲离心的液体,置于离心管或小试管内。 并检查离心管或小试管的大小是否与离心机的 套管相匹配。
• 2.取出离心机的全部套管,并检查套管底部是 否铺有软垫,有无玻璃碎片或漏孔(有玻璃碎 片必须取出,漏孔应该用蜡封住)。检查合格 后,将盛有离心液的两个试管分别放入套管中, 然后连套管一起分置于粗天平的两侧,通过往 离心管与套管之间滴加水来调节两边的重量使 之达到平衡。
㈡ 定量吸(移料制成。目前,因产 地厂家不同其质量、价格差异十分悬殊。
• 1.定量吸液器的优点:使用方便,取、加样迅 速,计量准确,不易破损,能吸取多种样品 (只换吸嘴即可)。
2.定量吸液器的类型:有两种类型。
第二章--生物化学检验基本知识PPT课件
2024/10/16
12
二、生物化学检验报告单的发放
即使是临床医护人员能够通过“医院信息系统(HIS)”在医生 工作站直接读取检验结果的临床科室或医疗单位,实验室也 应该用电话向临床报告,这是考虑到临床一线医护人员可能 会忙于抢救而不能及时观察到检测结果需要提醒的缘故。
“危急值”报告不同于“急诊检验”报告,是两个完全不同
4.技术要求高的检测项目 检测系统本身的不稳定因素,影响检验结果可靠性的检
验项目,或者检测系统本身存在着影响检验质量的诸多人
为环节,对检验人员的理论和技能要求较高的检验项目。
(三)急诊生化检验
急诊检验是实验室为了配合临床对危、急、重症患者的诊 断和抢救而实施的一种特需检验。如血气分析、电解质、 淀粉酶、心肌标志物、血糖等。
2.标本难以获得的检测项目
某些检验项目的标本获得比较困难,或者因为标本数 量极少,对标本的处理和保存都不能按规定要求和程序 进行,甚至不能进行复检的检验项目。
2024/10/16
8
一、生物化学检验的项目
3.发病率低或成本高的检测项目 由于某疾病的发病率很低造成标本数量过少或检验成 本过高的检验项目。
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第二节 生物化学检验的标本
一、标本的采集
生物化学检验最常用的标本是血液,其次是尿液,此外还有 脑脊液、浆膜腔积液、羊水等各种体液。 正确采集标本是获得准确、可靠检验结果的关键。
标本采集时应尽可能避免一切干扰因素,选择最佳的采集时 间,减少饮食和药物影响,减少昼夜节律带来的干扰。对于 有创伤性的操作,操作前应先与患者沟通建立互信,消除患 者的恐惧和紧张情绪。
剂及抗凝原理;尿液标本的采集方法;标本收检、分离、储存和转运;生物 化学检验项目类型;危急值、危急值报告的概念;检验报告单的发放方式。
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5.废弃液体(强酸强碱溶液必须先用水稀释) 可倒入水槽内,同时放水冲走。废纸及其他 固体废物和带有渣滓沉淀的废液都应倒入指 定的垃圾筐内,不得倒入水槽或到处乱扔。
6.对实验的内容和安排不合理的地方可提 出改进意见。对实验中出现的一切反常现象 应进行讨论,并大胆提出自己的看法,做到 生动、活泼、主动地学习。
2.实验报告
实验结束后,应及时整理和总结实验结 果,写出实验报告。下面列举实验报告的书 写格式,仅供参考。
实验报告书写要求:实验名称、实验日期、 目的和要求、原理、实验测定的数据、图纸 及结果、结果分析和讨论。
原理:实验原理简要归纳,一些可用化学反 应式表示。
数据、图纸及结果:将一定实验条件下获得 的实验结果和数据进行整理、归纳、分析和 对比,并尽量总结成各种图表,如原始数据 及其处理的表格、标准曲线图以及实验组与 对照组实验结果的比较图表等。
四、实验室基本操作和常识
(一)玻璃仪器的清洗 玻璃仪器是生物化学中不可缺少的器具。实
验中所使用的玻璃仪器清洁与否,直接影响 实验结果,往往由于仪器的不清洁或被污染 而造成较大的实验误差,甚至会出现相反的 实验结果。因此,玻璃仪器的洗涤清洁工作 是非常重要的。
(二)吸量管的使用
吸量管(简称吸管)是生化实验中最常用 的仪器,可分为三类:①奥氏吸管,②移液 管,③刻度吸管。
11.实验中一旦发生火灾切不可惊慌失措, 应保持镇静。首先立即切断室内一切火源和 电源。然后根据具体情况积极正确地进行抢 救和灭火。(二)、实验记录及实验报告
1.实验记录 实验中观察到的现象、结果和数据,应及时
地直接记在记录本上。原始记录必须准确、 简练、详尽、清楚。记录时,应做到如实正 确记录实验结果,不可夹杂主观因素。在定 量实验中观测的数据,如称量物的质量、滴 定管的读数、光度计的读数等,都应设计表 格准确记下读数,并根据仪器的精确度准确 记录有效数字。
3.注意保持实验室的整洁。实验完毕,须 将药品试剂排列整齐,仪器要放好,将实验 台面抹拭干净。使用后的玻璃仪器要清洗干 净放好。
4.要爱护实验仪器,节约使用各种试剂、 物品。使用仪器时,应小心仔细,防止损坏 仪器。使用贵重精密仪器时,应严格遵守操 作规程,发现故障立即报告教师,不要自己 动手检修。仪器损坏时,应如实向教师报告。
刻度吸管的使用:
(1)选择:使用前先根据需要选择适当的 吸量管,刻度吸管的总量最好等于或稍大于 最大取液量。临用前要看清容量和刻度。
(2)执管:用右手拇指和中指(辅以无名 指),拿住吸管的上部,用食指堵住管上口 和控制液流,刻度数字要对向自己。切忌用 大拇指堵住管口,控制流量。
2.使用过的玻璃仪器的清洗
(1)一般玻璃仪器:如试管、烧杯、锥形瓶 等、,先用自来水冲洗至无污物,再选用大 小合适的毛刷沾取去洗衣粉或肥皂水,将器 皿内外(特别是内壁)细心刷洗,再用自来水 冲洗干净,洗至容器内壁光洁不挂水珠为止, 最后用蒸馏水冲洗2~3次,倒置在清洁处晾 干,急用时可用干燥箱烤干。
实验中使用仪器的类型、编号及试剂的规 格、化学式、分子量、准确的浓度等,也应 如实记录,以便在总结实验时进行核对和作 为查找成败原因的参考依据。
如果发现记录的结果有可疑、遗漏、丢失 等,都必须重做实验。因为,将不可靠的结 果当做正确的记录,在实际工作中可能造成 难以估计的损失。所以,在学习期间就应一 丝不苟,努力培养严谨的科学作风。
实验一 生化实验基本操作
生物化学基本技术及应用
一、实验常识 (一)、实验室规则及安全及防护知识 1.自觉地遵守课堂纪律,维护课堂秩序,
保持室内安静。必须穿白大褂,不能穿背心、 拖鞋进入实验室。
2.要认真、严肃、积极、主动地做实验, 要听从教师的指导。实验过程中要认真做好 观察、记录。完成实验后经教师检查同意, 方可离开。实验完成后要及时的按要求完成 实验报告。
大家应该也有点累了,稍作休息
大家有疑问的,可以询问和交流
7.使用电器设备(如恒温水浴、离心机、电 炉等)时,严防触电;绝不可用湿手或在眼 睛旁视时开关电闸和电器开关。检查电器设 备是否漏电应用试电笔或手背触及仪器表面。 凡是漏电的仪器一律不能使用。
8.可燃物,特别是易燃物(如乙醚、丙酮、 乙醇、苯等)时,应特别小心。不要大量放 在桌上,更不应放在近火焰处。低沸点的有 机溶剂不准在火焰上直接加热,只能在水浴 上利用回流冷凝管加热或蒸馏。
9.使用浓酸、浓碱,必须极为小心地操作, 防止溅失。用吸量管取这些试剂时,必须使 用橡皮球,绝对不能用口吸。若不慎溅在实 验台或地面,必须及时用湿抹布擦洗干净。 如果触及皮肤,应立即治疗。
10.如果不慎倾出了相当量的易燃液体,则 应按下法处理:(1)立即关闭室内所有的火 源和电加热器。(2)关门,开启小窗及窗户。 (3)用毛巾或抹布擦拭洒出的液体,并将液 体拧到大的容器中,然后再倒入带塞的玻璃 瓶。
(2)容量仪器:如吸量管、滴定管、量瓶等, 使用后应立即浸泡于凉水中,勿使物质干涸。 工作完毕后用流水冲洗,以除去附着的试剂、 蛋白质等物质,晾干后浸泡在铬酸洗液中 4~6 h(或过夜),再用自来水反复冲洗干净, 最后用蒸馏水冲洗2~3次,晾干备用。
(3)其他:盛装具有传染性样品的容器,如 病毒、传染病患者的血清等沾污过的容器, 应先进行高压(或其他方法)消毒后再进行清 洗。盛过各种毒品,特别是剧毒药品和放射 性同位素物质的容器,必须经过专门处理 (略),确知没有残余毒物存在方可进行清洗。
结果分析和讨论:讨论部分不是对实验结果 的重述,而是关于实验方法(或操作技术)和 有关实验的一些问题,如对实验的正常结果 和异常现象以及思考题进行探讨;对于实验 设计的认识、体会和建议;对实验课的改进 意见等。
1.新购置玻璃仪器的清洗 新购买的玻璃 仪器表面常附着有游离的碱性物质,可先用 肥皂水(或去污粉)洗刷,再用自来水洗净, 然后浸泡在l%~2%盐酸溶液中过夜(不少 于4h),再用自来水冲洗,最后用蒸馏水冲 洗2~3次,在烘箱内 。