盐酸水苏碱在兽药中代替缩宫素的可行性研究
盐酸水苏碱在兽药中代替缩宫素的可行性研究
（作者：张永四川广汉市本草植化有限公司618300）
随着现代集约化养殖的不断发展,猪牛羊等母畜各种产后病发生率一直居高不下,难产，产后出血，母畜胎衣不下，子宫内膜炎，产后恶露不尽成为严重危害养殖业发展的一种现象。在实际应用中，用神经垂体激素缩宫素可以很好的解决这些问题，效果非常明显。但实际上，缩宫素的滥用现象引发了一系列的危害，造成养殖户经济效益下降。
首先，缩宫素主要适用于单胎动物，牛羊是可以的，但猪这样的多胎动物就不行。因为使用缩宫素后，造成子宫平滑肌和产道括约肌强烈收缩，后续的仔猪生产就困难，容易造成死胎和胎衣不下。
其次，很多养殖户发现，用了缩宫素以后，母猪全身发抖。显然，缩宫素显著增加了母猪疼痛，母猪分娩以后不容易恢复。
再次，使用缩宫素以后，由于仔猪脐带在子宫里面就发生了断裂，以及一部分仔猪过度在子宫里面挤压，造成弱仔增多，所以猪场普遍会出现黄白痢明显增多的现象。
怎么解决缩宫素使用上的不足和滥用缩宫素的问题，各科研院所和兽药厂家以及养殖户都各出奇招，有效的解决和缓解了这个问题。他们都不约而同的瞄上了妇科圣药：益母草。
湖南农大的一项技术，有效地缓解母猪难产问题，也就是发生仔猪间隔30分钟以上没有产出胎儿的情况下，向子宫里面灌注“宫炎净”100mL，能够很快的缓解母猪的难产症状。其中，宫炎净灌注液的主要成份就是益母草。
各大兽药厂纷纷推出中兽药产品：益母生化散，益母产后康，产后金针，产前产后康，复方益母草注射液，子宫清洗液等，其中，主要成份也是益母草。甚至个别的成品兽药如某品牌的产安康处方里面直接就有缩宫素和益母草并用。
各养殖户在当地畜牧局技术人员的帮助下，自行配制的①治产后恶露不尽：益母草150克，香附子100克，当归80克；②治母畜胎衣不下：益母草100克、黄芪100克、车前子200克；③治子宫内膜炎：益母草500克，鸡冠花200克
的验方，其主要成份也是益母草。
综上所述，益母草在现代养殖业中起着重大的作用。益母草中起到上述作用的主要是其中的生物碱--盐酸水苏碱。研究表明：盐酸水苏碱具有松驰平滑肌的作用；对子宫有引起节律性收缩和兴奋子宫的作用，使子宫振幅，收缩力，紧张度均有增强，持续时间颇久；有破瘀生新，活血调经的作用，广泛应用于母畜产后瘀血不净，恶露不尽。这些作用都和缩宫素相同或近似，在相关文献中有大量论述，但在兽药的使用中鲜见报道。
在现在的中兽药制剂中，很多处方都是处方中含有益母草。但是，很少有人去研究益母草里面到底含多少水苏碱，需要多少水苏碱才能起作用，以及起作用的机制。并且随着产地的不同，采收季节的不同，炮制工艺的不同，益母草中生物碱含量不尽相同，甚至被大量破坏，造成厂家产品质量不稳定，良莠不齐。只有少数几个厂家在产品上直接标明了含量（【规格】10ml(含益母草总生物碱200mg)），经HPLC测定，含量还不够。
笔者曾联合几个养殖户做了如下一些实验：（1）将宫炎净，净宫促孕液等灌注液中益母草用纯盐酸水苏碱代替，配成1mg/ml的溶液，用于母猪产后灌注清宫，结果效果好得出奇，产仔顺利，母畜无不良反应。（2）将含缩宫素的中兽药产安康中的缩宫素用盐酸水苏碱代替，配成含盐酸水苏碱20mg/ml的注射液，和原药作对照试验，结果效果无明显区别。但从用药成本上来说，盐酸水苏碱具有明显的经济价值。（3）将纯盐酸水苏碱配成20mg/ ml的注射液，和5支10单位的缩宫素作对比试验，结果，见效不如缩宫素快，但连续作用持久性却远远高于缩宫素，并且未见母畜痛苦，生产顺利。
综上所述，以中药西化，用药量化的思路来进行母畜产后用药的探索，可以发现：用益母草主要有效成份盐酸水苏碱代替益母草投料，并且准确量化，可以取得明显效果。用盐酸水苏碱代替缩宫素或部份代替，可取得巨大的实际效果和经济效益（缩宫素要近20万/kg,而盐酸水苏碱才几百元/kg）。进行中药西化，有效成份量化，或是相同功效的药品替代也是值得广大畜牧兽医工作者深入研究的一个方向。笔者现在正在和一些科研院所和兽药厂合作，做相关的药效学和毒理方面的实验，希望不久的将来，可以为母畜保健提供一种新的思路。
（参考文献5篇略）
Q_HGDY 006-2017饲料原料液态益母草粗体物
Q/HGDY 河南官渡兽药制造有限公司企业标准 皮 Q/HGDY006-2017天然植物饲料原料液态益母草粗提物 2017-07-16发布2017-07-22实施河南官渡兽药制造有限公司发布
Q/HGDY006-2017 前言 本标准按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。 本标准由河南官渡兽药制造有限公司提出并负责起草。 本标准主要起草人：韩红霞、董炎超、徐超军、高李强、张珍、陈晓丽。
天然植物饲料原料液态益母草粗提物 1范围 本标准规定了天然植物饲料原料液态益母草粗提物的要求、试验方法、检验规则、标签、包装、运输与贮存。 本标准适用于以天然植物饲料原料益母草经过水粗提、浓缩加工而成的天然植物饲料原料液态益母草粗提物。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T603化学试剂试验方法中所用制剂及制品的制备。 GB/T6682分析实验室用水规格和实验方法。 GB10648饲料标签。 GB13078饲料卫生标准。 GB/T13079饲料中总砷的测定。 GB/T13080饲料中铅的测定原子吸收光谱法。 GB/T13091饲料中沙门氏菌的检测方法。 GB/T14699.1饲料采样。 GB/T18823饲料检测结果判定的允许误差。 GB/T20195动物饲料试样的制备。 JJF1070定量包装商品净含量计量检验规则。 中华人民共和国质量监督检验检疫总局令（2005年）第75号《定量包装商品计量监督管理办法》。 中华人民共和国农业部公告（2013）第1773号《天然植物饲料原料目录》及（2013）第2038号《天然植物饲料原料目录》修订列表。 3要求 3.1原料 应符合《天然植物饲料原料目录》的要求。 3.2感官 色泽均一的液体。 3.3pH值 应为4.0～7.0。 3.4理化、卫生指标 理化、卫生指标应符合表1的规定。 3.5净含量 符合标签标注，偏差符合《定量包装商品计量监督管理办法》之规定。
盐酸水苏碱在兽药中代替缩宫素的可行性研究
盐酸水苏碱在兽药中代替缩宫素的可行性研究 （作者：张永四川广汉市本草植化有限公司618300） 随着现代集约化养殖的不断发展,猪牛羊等母畜各种产后病发生率一直居高不下,难产，产后出血，母畜胎衣不下，子宫内膜炎，产后恶露不尽成为严重危害养殖业发展的一种现象。在实际应用中，用神经垂体激素缩宫素可以很好的解决这些问题，效果非常明显。但实际上，缩宫素的滥用现象引发了一系列的危害，造成养殖户经济效益下降。 首先，缩宫素主要适用于单胎动物，牛羊是可以的，但猪这样的多胎动物就不行。因为使用缩宫素后，造成子宫平滑肌和产道括约肌强烈收缩，后续的仔猪生产就困难，容易造成死胎和胎衣不下。 其次，很多养殖户发现，用了缩宫素以后，母猪全身发抖。显然，缩宫素显著增加了母猪疼痛，母猪分娩以后不容易恢复。 再次，使用缩宫素以后，由于仔猪脐带在子宫里面就发生了断裂，以及一部分仔猪过度在子宫里面挤压，造成弱仔增多，所以猪场普遍会出现黄白痢明显增多的现象。 怎么解决缩宫素使用上的不足和滥用缩宫素的问题，各科研院所和兽药厂家以及养殖户都各出奇招，有效的解决和缓解了这个问题。他们都不约而同的瞄上了妇科圣药：益母草。 湖南农大的一项技术，有效地缓解母猪难产问题，也就是发生仔猪间隔30分钟以上没有产出胎儿的情况下，向子宫里面灌注“宫炎净”100mL，能够很快的缓解母猪的难产症状。其中，宫炎净灌注液的主要成份就是益母草。 各大兽药厂纷纷推出中兽药产品：益母生化散，益母产后康，产后金针，产前产后康，复方益母草注射液，子宫清洗液等，其中，主要成份也是益母草。甚至个别的成品兽药如某品牌的产安康处方里面直接就有缩宫素和益母草并用。 各养殖户在当地畜牧局技术人员的帮助下，自行配制的①治产后恶露不尽：益母草150克，香附子100克，当归80克；②治母畜胎衣不下：益母草100克、黄芪100克、车前子200克；③治子宫内膜炎：益母草500克，鸡冠花200克
盐酸水苏碱在中药生产过程中的含量变化及影响因素研究
盐酸水苏碱在中药生产过程中的含量变化及影响因素研究 【摘要】目的探讨盐酸水苏碱在中药生产过程中的含量变化及影响因素。方法建立盐酸水苏碱HPLC含量测定方法，考察提取、浓缩、干燥工艺中各影响因素对盐酸水苏碱保留率的影响，分析益母草药材储藏过程中的各主要影响因素。结果水提取工艺中提取时间、提取温度、提取次数、水用量对盐酸水苏碱的影响较小；浓缩过程中盐酸水苏碱有一定损失，但浓缩温度、浓缩时间、真空度并非主要影响因素；干燥过程中的温度、真空度、时间等参数对盐酸水苏碱的影响较小。在益母草储藏过程中，见光降解是盐酸水苏碱含量下降的主要原因。结论光对盐酸水苏碱的稳定性有重大影响。 【关键词】盐酸水苏碱益母草高效液相色谱见光降解 Abstract：ObjectiveTo explore the content change of stachydrine hydrochloride in Chinese medicine production process.MethodsAn HPLC method was established stachydrine hydrochloride to determine the content of retention rate of stachydrine hydrochloride was applied as the parameters to investigate the processes of extraction, concentration and drying and the main factors in the storage of herba leonuri was investigated by factorial analysis.ResultsThe influence of time, temperature, frequency, and water volume in extraction process to stachydrine hydrochloride was weak. There is a little loss of stachydrine hydrochloride in concentration process; the influence of temperature, time, and vacuum value to stachydrine hydrochloride was weak. Decompose by light was the most important factor to content decline of stachydrine hydrochloride in the storage of herba leonuri. ConclusionLight showed a marked influence on the stability of stachydrine hydrochloride. Key words：Stachydrine hydrochloride；Herba leonuri；HPLC；Decompose by light 益母草为唇形科植物益母草Leonurus japonicus Houtt.的新鲜或干燥地上部分，主治月经不调、胎漏难产、行经腹痛及产后瘀阻等症，有“血家圣药”“经产良药”之称。近年来其逐步被应用于心脑血管疾病的防治，临床效果较好，疗效甚至超过复方丹参注射液［1］。现代药理研究表明［2］，益母草中的益母草碱、盐酸水苏碱等多种生物碱具有较强的兴奋子宫、抗血小板聚集、降低血液黏度、抑制血栓形成等作用。 据统计，药典及部颁标准中含益母草的多数中成药，其盐酸水苏碱的理论保留率［理论保留率（％）＝成品中待测成分的标示总量/处方中待测成分的药典规定最低总量×100%］均低于40％。在产后逐瘀胶囊及妇血安片的成品检验中同样发现，两者的盐酸水苏碱理论保留率均低于20％，部分批次甚至不合格。同时，在对益母草药材进行筛选的过程中发现，各产地的药材盐酸水苏碱含量差异较大，且同一产地新上市药材的含量明显高于去年上市的老药材。为了考察其原因，本研究探讨了中药生产中提取、浓缩、干燥工艺过程对盐酸水苏碱含量的影响，并对益母草药材的稳定性影响因素进行了初步研究。 1 仪器与试药
试验三糖浆剂煎膏剂的制备
实验三糖浆剂、煎膏剂的制备 3．糖浆剂的制备 （1）单糖浆 【处方】蔗糖42.5g 蒸馏水适量 全量50mL 【制法】取蒸馏水20mL煮沸，加入蔗糖搅拌溶解后，继续加热至沸，用多层纱布或脱脂棉趁热过滤，自滤器上添加适量蒸馏，使其冷至室温时为50mL，搅匀，即得。 【用法与用量】本品含糖量为85%(g/mL)或65%(g/g)，可用于制备其他含药糖浆，或作为液体口服制剂的矫味剂。也可作片剂、丸剂的粘合剂。作包糖衣物料时，浓度应为74%（g/g）左右。 （2）远志糖浆 【处方】远志流浸膏（Extractum Polygalae Liquidum）5mL 浓氨溶液（Ammonia Water）0.1mL 苯甲酸钠（Sodium Benzoate）0.05g 单糖浆（Simple Syrup）加至25mL 【制法】将浓氨溶液稀释成10%稀氨水，与远志流浸膏混合均匀，静置1天～2天备用，再将单糖浆在60℃以下加入远志流浸膏中至规定体积，混合均匀，即得。 【作用与用途】同远志流浸膏。 【用法与用量】口服，一日三次，每次2 mL～5mL。 【贮藏】密封。 4.煎膏剂的制备 益母草膏 【处方】益母草（小段）50g 红糖50g
【制法】取益母草加水煎煮两次，第一煎沸后1小时，第二煎沸后30分钟，用纱布过滤，挤压残渣，滤液合并，浓缩，不断捞去泡沫，浓缩成清膏（比重为1.21～1.25，80~85℃热测），通常浓缩至1:1〈mL:g〉）。另将红糖置小烧杯中，加入1/2量的开水，加热至全溶，用纱布滤过，置蒸发皿中，继续用文火炼至糖成深红色时，停止加热，慢慢将清膏加入其中，搅拌均匀，继续用文火加热收膏，待取少许能平拉成丝，或滴于纸上不见水迹，即得。 【性状】本品为棕黑色稠厚的半流体，气微，味苦、甜。 【鉴别】取本品10g，加水20ml，搅匀，加稀盐酸调节pH值至1～2，离心，取上清液，通过001′7型（732）Na－型强酸性阳离子交换树脂柱（内径0.9cm，柱高12cm）上，以水洗至流出液近无色，弃去水液，再以2mol/L氨溶液40ml洗脱，收集洗脱液，水浴蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液。另取盐酸水苏碱对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液，照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各4m l，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以正丁醇－盐酸－乙酸乙酯（8:3:1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以稀碘化铋钾试液。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。 【检查】相对密度取本品10g，加水20ml稀释后，依法测定，应为1.10～1.12。 其他应符合煎膏剂项下的各项规定（附录IF）. 【含量测定】取本品3g，置烧杯中，精密称定，加水10ml使溶解，加稀盐酸调节pH值至1～2，通过001′7型（732）Na－型强酸性阳离子交换树脂柱（内径2cm，柱高15cm）上，用水洗至流出液近无色，弃去洗脱液，再用2mol/L氨溶液150ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣用甲醇溶解并转移至10ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，静置，取上清液作为供试品溶液。另取在105℃干燥3小时的盐酸水苏碱对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含2mg 的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法试验，精密吸取供试品溶液8m l、对照品溶液3m l 与8m l，分别交叉于同一硅胶G薄层板上，以正丁醇－盐酸－乙酸乙酯（8:3:1）为展开剂，展开，取出，晾干，在105℃加热15分种，放冷，喷以1％三氯化铁乙醇溶液－稀碘化铋钾试液（1:10）混合溶液至斑点显色清晰，晾干，在薄层板上覆盖同样大小的玻璃板，周围用胶布固定，照薄层色谱法进行扫描，波长：λs＝510nm，测量供试品吸光度积分值与对照品吸光度积分值，计算，即得。 本品每1g含盐酸水苏碱不得少于3.6mg。 【功能与主治】活血调经。用于经闭，痛经及产后瘀血腹痛。 【用法与用量】口服，一次9 g～15g，一日2次～3次。 四、思考题 1．煎膏剂、糖浆剂、合剂均为含糖制剂，三者有何区别？
双水相体系萃取分离_分光光度法测定益母草中水苏碱
双水相体系萃取分离-分光光度法测定益母草中水苏碱 赵鹂,郭圣荣 第一作者 Te:l (0578)2271458,136********;E -m ai:l xyzhaol@i 126.co m (丽水学院化生学院,丽水323000) 摘要 目的:利用双水相体系分离纯化益母草中的水苏碱,探究萃取机理及效率。方法:利用不同的双水相体系对益母草总生物碱进行提取,研究不同双水相体系、不同析相盐及温度等因素对提取效率的影响。结果:通过实验发现乙醇/磷酸氢二钾双水相体系效果最好。与常规回流提取法相比较,总碱提取率由1 95%提高到3 49%,总碱提取率高出79 5%。结论:按本文方法所形成双水相体系,操作简便,萃取率高,方法重现性好,可适用工业化生产。关键词:益母草;盐酸水苏碱;双水相;提取中图分类号:R 917 文献标识码:A 文章编号:0254-1793(2010)10-1953-04 Extracti on and separation w it h aqueous t wo-phase syste m (ATPS)of t he total al kaloi ds i n leonurus and deter m i ned w it h s pectrophoto m etry Z HAO L,i GUO Sheng-rong (S choo l ofC he m istry and L i fe Sciences ,L i shu iUn i versit y ,L is hu i 323000,Ch i na) Abst ract Objective :To exp l o re the ex traction m echanis m and effecti v e of the separation -purificati o n o f stachydri n e in aqueous t w o-phase syste m s .M ethods :U sing d ifferent aqueous t w o-phase syste m to extract the to tal alka l o ids i n Leonurus ,study t h e affecti o ns of the salts ,te m perature and organic phase .R esults :Co m pari n g w ith conventional m ethods ,the ex traction rate o f total alka l o ids o f l e onurus i n aqueous t w o -phase syste m w as up to 3 49%when using the ethano l /K 2H PO 4/w ater ATPS as so l v ent and w hich is the best resu lt in different aqueous t w o-phase syste m.C onclusion :The t w o aqueous phase syste m for stachydri n e extracti o n is easy to operate ,good reproducti v ity ,and can be app li e d i n m ass pr oducti o n .K ey w ords :leonurus ;stachydri n e hydrochloride ;aqueous t w o-phase syste m ;ex tracti o n 益母草为唇形科植物益母草(Leonurus hetero phy llus Sw eet)的干燥地上部分,是常用中药,主要成分为生物碱类和黄酮类化合物等。临床用其流浸膏或复方制剂治疗月经不调、痛经、阴道炎症等妇科常见病[1~4] 。已知益母草中所含有效成分为总生物碱,主要包括益母草碱(leonuri n e)和盐酸水苏碱(stachydrine hydroch lori d e)等。盐酸水苏碱为益母草中生物碱类含量测定的指标性成分,中国药典 2005年版采用薄层扫描法测定[5] ,用乙醇提取样品,浓缩后通过活性炭一氧化铝柱纯化得到供试品溶液,回流提取方法耗时且提取率较低。其他传统的萃取分离法主要采用与水互不相溶的有机溶剂作萃取溶剂,这种异相萃取的传质速率通常较低,必须经过较长时间振荡或多次萃取才能达到定量萃取,工作量大且溶剂大多有毒性。采用均相萃取、异相 分离的双水相萃取(Aqueous t w o -phase extraction , ATPS)[6~9] 可以较好地克服以上萃取分离的缺点。在研究的双水相萃取体系中,多数是对基于水溶性高聚物的双水相萃取 [6~8] 。普通的能与水互溶的有 机溶剂在无机盐存在下也可生成双水相体系[9~12] 。与基于高聚物的双水相萃取相比,基于水溶性有机溶剂和盐水相的双水相萃取体系具有价廉、低毒、分相清晰、萃取相不含粘度大、难处理的聚合物、对测定干扰小等特点。 用双水相提取益母草中的水苏碱含量目前未见报道,本文研究了水溶性有机溶剂乙醇、丙醇及丙酮在不同无机盐作用下双水相萃取分离水苏碱,建立了乙醇-K 2H P O 4双水相萃取分离水苏碱,用紫外分光光度法测定含量,获得较好实验结果。
中药茺蔚子炮制工艺优化的研究
中药茺蔚子炮制工艺优化的研究 目的改进中药茺蔚子的炮制工艺，考察影响中药茺蔚子的炮制因素。方法设计正交试验，考查中药茺蔚子的酒炒工艺，并对其进行多因素分析。考察标准以茺蔚子中盐酸水苏碱为指标，采用高效液相色谱结合蒸发光散射检测器（HPLC-ELSD）对其进行含量测定，采用方差分析等统计学方法分析数据，找出最佳的优化方案。结果水煎煮提取的最佳工艺为A1B3C3，即加水煎煮3次，第1次加8倍量水，浸泡1 h，煎煮1.5 h；第2次加6倍量水，煎煮1.5 h，第3次加6倍量水，煎煮1.5 h，滤过，合并滤液。炮制最佳工艺为A3B2C1D3，即使用25%加酒量浸润茺蔚子药材10 min后，将其在150℃下炒制5 min后即得。结论炮制的方法直接影响中药茺蔚子中盐酸水苏碱的含量，本研究为改进中药茺蔚子的最佳炮制工艺提供了参考依据。 [Abstract] Objective To improve the processing technology of the Chinese traditional medicine Motherwort fruit，and investigate the factors influencing for the processing of Chinese traditional medicine Motherwort fruit. Methods The orthogonal experiment was designed to investigate the fried wine processing of Chinese traditional medicine Motherwort fruit，and the multiple-factor analysis was given.Standard for Motherwort fruit was used Hydrochloric acid stachydrine as the index，which was used HPLC-ELSD to determine the content and the data were analyzed statistically by analysis of variance to find out the optimal scheme. Results Optimum water decoction was extracted for A1B3C3，was decocted three times，the first with 8 times amount of water，soaked for 1 h，boiled for 1.5 h；second times with 6 times amount of water，boiled for 1.5 h，third times with 6 times amount of water，decocted for 1.5 h，and then filtered and merged filtrate.The best processing technology for A3B2C1D3 was infiltrated 25% for liquor 10 min and under 150℃fried for 5 min to obtain. Conclusion The processing methods is a direct impact on the content of stachydrine hydrochloride in Motherwort fruit，this study provides reference for optimizing the best processing method of Motherwort fruit. [Key words] Motherwort fruit；Optimal processing method；Hydrochloric acid Stachydrine；HPLC-ELSD 中药茺蔚子又名益母草子，为唇形科植物益母草（Leonurus japonicus Houtt.）的干燥成熟果实[1]。药材多秋季果实成熟时采割地上部分，晒干，打下果实，除去杂质。该中药首载于《神农本草经》，味辛、苦，性微寒。归心包、肝经，具有活血调经、清肝明目的功能，用于目赤肿痛或目生翳膜，酒炒品治疗头目之疾最佳[2-4]。“炒制”和“净制”两种炮制方法是目前中药茺蔚子的主要炮制方法。为传承其炮制理论和优化其炮制方法，进一步使中药茺蔚子更好地发挥功效，本研究以酒炒法为主要方法，考察影响酒炒工艺的因素和水平，采用正交试验的方法进一步优化和改进炮制工艺方法，对不同炮制方法制得的炮制样品进行试验比较。
益母草药材中水苏碱成分应用高效液相色谱法的检测结果分析
益母草药材中水苏碱成分应用高效液相色谱法的检测结果分析 发表时间：2018-11-02T10:58:43.390Z 来源：《中国误诊学杂志》2018年第25期作者：宋妍 [导读] 结论高效液相色谱法检测方式快捷简便，专属性强，检测结果精准，能够对益母草颗粒质量进行有效的控制。天津医科大学第二医院天津 300211 摘要：目的对于益母草药材中水苏碱成分采取高效液相色谱法进行检测的具体方法以及检测结果开展分析与总结。方法色谱条件选取AgilentSB-C18柱，流动相选取乙腈-冰乙酸，流速调整为每分钟0.3ml，质谱检测选取正离子电喷雾离子源，受到多反应监测模式下开展监测。结果盐酸水苏碱浓度处于0.2μg/ml到10.0μg/ml范围中和峰面积表现为良好线性关系，回收率为102.6%。结论高效液相色谱法检测方式快捷简便，专属性强，检测结果精准，能够对益母草颗粒质量进行有效的控制。 关键词：益母草药材；水苏碱成分；高效液相色谱法 益母草颗粒主要是由益母草、木香、当归以及川芎四味中药所组成，通过加工提取制作而成，益母草颗粒存在行气止痛以及活血调经的作用，临床中一般用来治疗月经不调、气滞血瘀、产后淤血腹痛以及调经，其中益母草中药材属于君药，具有良好的活血化瘀效果，所以临床中对于益母草药材开展有效的质量控制十分关键。益母草药材质量控制方式主要包括高效液相色谱法以及薄层色谱扫描法对盐酸水苏碱含量进行检测，高效液相色谱法对于盐酸水苏碱含量进行检测选取氨基柱与C18柱与离子交换色谱柱为色谱柱，此外利用蒸发光检测器施行分析[1]。本文对于益母草药材中水苏碱成分采取高效液相色谱法进行检测的具体方法以及检测结果开展分析与总结，现汇报如下。 1资料与方法 1.1一般资料 选取美国高效液相色谱仪，电子天平，超声波清洗器，盐酸水苏碱对照品进行含量测定使用，益母草颗粒，乙腈属于色谱纯，水选取市面所售娃哈哈纯净水，冰乙酸属于优级纯，剩余检测试剂属于分析纯。 1.2方法 色谱条件选取AgilentSB-C18柱，流动相选取乙腈-冰乙酸，流速调整为每分钟0.3ml，柱温30摄氏度，进样量5μl，离子源选取大气压电喷雾离子源，扫描方式选取正离子，施行全扫描、离子扫描和二级全扫描，干燥气温度300摄氏度，辅助气流速每分钟8L，毛细管电压为4000V，采取多反应监测模式进行含量检测。 严格称取盐酸水苏碱对照品，称取量为12.55mg，放置到量瓶中，置入乙醇进行溶解，摇匀，选取对照品储备液1ml，放置到量瓶中，置入乙醇稀释，摇匀作为对照品使用溶液。 选取5包颗粒内容物，进行研磨，称取5g置入量瓶中，放置乙醇进行超声处理20分钟，放置到室温之后置入乙醇进行稀释，摇匀并且过滤，选取2ml放置到量瓶，置入乙醇，摇匀，通过微孔滤膜进行过滤。 选取上述对照品溶液，阴性对照对照溶液分别5μl，置入高效液相色谱仪，根据上述色谱和质谱条件进行测定，对于色谱图进行记录，盐酸水苏碱保留时间3.5分钟，溶液中其他杂质不会对样品中盐酸水苏碱测定进行干扰，阴性样品在盐酸水苏碱色谱峰保留时间没有出现干扰峰，代表专属性良好[2]。 2结果 盐酸水苏碱浓度处于0.2μg/ml到10.0μg/ml范围中和峰面积表现为良好线性关系，回收率为102.6%，详见表1。表1 样品检测情况比较 3讨论 制备供试品溶液方面，本次实验对于不同超声提取时间，分别为10分钟、20分钟、30分钟以及40分钟施行考察，结果表明，超声提取20分钟可以完全提取样品中盐酸水苏碱。对于选择流动相方面，流动相中的乙腈和冰乙酸比例通过多次配比，当其比例为70比30期间，样品中其他成分对于盐酸水苏碱检测不会产生干扰，同时盐酸水苏碱出峰时间比较适当，峰形以及理论塔板数最佳，所以建议保持此种比例开展测定[3]。对于质谱条件考察方面，为确保盐酸水苏碱各子离子峰信号表达处于最强，施行正离子模式与负离子模式加以检测，开展二级质谱扫描，对裂解电压和碰撞能压进行优化，通过多次试验发挥最理想的质谱条件。益母草颗粒原质量标准中含量检测，利用薄层色谱扫描法施行检测，处理方式较为繁琐，检测所需时间比较长，数据的重现性比较差，采取高效液相色谱法，对于色谱柱的要求比较高，样品提取程序复杂，部分方式通过检测的灵敏度不佳[4]。本文通过高效液相色谱法对益母草颗粒中盐酸水苏碱含量加以检测，存在理想的选择性与专业性，检测灵敏度比较高，色谱柱选择十分普通并且常用，操作方法简单，重复性佳[5]。根据本文的研究显示，色谱条件选取AgilentSB-C18柱，流动相选取乙腈-冰乙酸，流速调整为每分钟0.3ml，质谱检测选取正离子电喷雾离子源，受到多反应监测模式下开展监测，结果表明，盐酸水苏碱浓度处于0.2μg/ml到10.0μg/ml范围中和峰面积表现为良好线性关系，回收率为102.6%。综上所述，对于益母草药材中水苏碱成分采取高效液相色谱法检测效果理想，具有临床推广价值。
Venusil HILIC丙基酰胺亲水作用液相色谱柱
Venusil HILIC丙基酰胺亲水作用液相色谱柱，键合相为中性的酰胺基团。在处理强极性化合物方面，Venusil HILIC色谱柱比反相C18色谱柱表现出更大的优势，利用亲水作用色谱原理，可保留或分离强极性、水溶性碱性有机化合物。 HILIC是一种亲水作用色谱模式，其洗脱是以化合物亲水性/极性增加的次序排列，典型的流动相是乙腈（40%--97%）－水（或挥发性缓冲盐），所以HILIC色谱具有和反相色谱互补的选择性，同时它可以使用更高挥发性的流动相，增加了HILIC色谱的LC/MS分析灵敏度，降低了分离的压力。同时HILIC色谱摒弃了离子对试剂，极大的方便了制备色谱方法的开发。Venusil HILIC色谱柱与传统的氨基柱和硅胶柱相比，Venusil HILIC色谱柱具有更好的重现性和寿命。Venusil HILIC是是替代氨基柱和硅胶柱的最佳选择。 硅胶纯度>99.999%；pH适用范围2.0-8.0；孔径100? 水溶性维生素分析（与硅胶柱比较） 另外，Venusil HILIC 由于其出色的亲水性用于测益母草中的盐酸水苏碱已经被中国药典所收录。 从化学结构上看，盐酸益母草碱和盐酸水苏碱由于含有较多的极性基团（-OH、-NH2、-COOH）和孤对电子，水溶性特别强，因此普通的C18反相色谱柱已不能满足此类化合物的分析要求，最重要的原因即亲水性成分在C18柱上没有保留。而丙基酰胺键合硅胶（HILIC)克服了传统正相色谱柱在水相条件下不稳定的缺点,其常使用流动相是和反相色谱相同的水相缓冲液(< 40%)及有机溶剂,但是其梯度条件通常是初始为高比例有机相，逐步加大水相含量;极性丙基酰胺键合硅胶的HILIC色谱柱在反相条件下，可以有效的保留极性化合物，是一种崭新的极性化合物HPLC分离解决方式. 可用于奶粉中双氰胺检测！
复方益母口服液中水溶性生物碱-盐酸水苏碱的HPLC法测定研究
复方益母口服液中水溶性生物碱-盐酸水苏碱的HPLC法测定研究目的建立复方益母口服液中水溶性生物碱-盐酸水苏碱的含量测定方法。 方法用雷氏盐沉淀法处理样品，对提纯出的盐酸水苏碱采用HPLC法测定含量。色谱柱为Agela Venusil XBP NH2柱（4.6 mm×250 mm，5 μm），以乙腈-醋酸溶液（用少量醋酸调节溶液的pH值至3.00±0.15）（77∶23）为流动相，流速为1.0 mL/min，柱温为35℃，检测波长200 nm。结果复方益母口服液中盐酸水苏碱的进样量在1.083 1～32.491 8 μg范围内线性关系良好（r = 0.999 9），平均回收率为91.1%，RSD = 3.7%（n = 6）。结论该方法精确可靠，专属性强，可作为复方益母口服液中盐酸水苏碱的质量控制方法。 [Abstract] Objective To establish a method for the content determination of water soluble alkaloids-stachydrine hydrochloride in Complex Yimu Oral Liquid. Methods The sample solution was prepared with the method of Reinecke salt precipitation and was determined the content by HPLC. The column was Agela Venusil XBP NH2 column (4.6 mm×250 mm，5 μm) and CH3CN-H2O (pH was adjusted to 3.00±0.15 by acetic acid) (77∶23) was used as the mobile phase, with the flow rate of 1.0 mL/min. The column temperature was at 35℃and the detection wavelength was 200 nm. Results The good linear ranges were between 1.083 1-32.491 8 μg for stachydrine hydrochloride (r = 0.999 9, n = 6) and the average rate of recovery was 91.1% with RSD = 3.7% (n = 6). Conclusion The method is accurate, reliable, specific and with good reproducibility. It can be used for the quality control of stachydrine hydrochloride in Complex Yimu Oral Liquid. [Key words] Complex YimｕＯｒａｌLiquid; Stachydrine hydrochloride; HPLC; Reinecke salt precipitation 复方益母口服液是由益母草、当归、川芎等药经加工制成的口服液，具有活血行气，化瘀止痛的功能，用于气滞血瘀所致的痛经，原为国家药品标准新药转正标准第19册收载品种[1]。益母草是君药，其指标性成分是盐酸水苏碱，原标准采用薄层扫描法（TLCS）测定水苏碱含量，由于方剂中并存其他的生物碱，TLCS法对水苏碱的选择性和专属性均差，含量不准确。为此，特研究起草了HPLC法测定复方益母口服液中盐酸水苏碱的含量，专属性强，准确性好，可为标准提高提供修订依据。 1 仪器与试药 戴安高效液相色谱仪UltiMate3000系列。盐酸水苏碱对照品（中国药品生物制品检定所，批号：110712-200709，供含量测定用）；复方益母口服液由河南太龙药业股份有限公司生产，批号为10121512、10072011、10031315，水为纯化水，甲醇为色谱纯，醋酸等均为分析纯。 2 方法与结果 2.1 色谱条件及系统适应性试验 色谱柱：Agela Venusil XBP NH2柱（4.6 mm×250 mm，5 μm）；流动相：A∶B=乙腈-醋酸溶液（用少量醋酸调接溶液的pH值至3.00±0.15）（77∶23），柱温：35℃；检测波长：200 nm；流速：1.0 mL/min；进样量：20 μL。理论板数按盐酸水苏碱峰计算应不低于5 000。 2.2 对照品溶液的制备
益母草饮片中盐酸水苏碱_盐酸益母草碱含量测定
73 第15卷 第2期 2013 年 2 月 辽宁中医药大学学报 JOURNAL OF LIAONING UNIVERSITY OF TCM Vol. 15 No. 2 Feb .，2013 益母草（Leonurus japonicus Houtt.）为唇形科 植物科植物益母草的新鲜或干燥地上部分，具有活血调经、利尿消肿、清热解毒之功效，用于月经不调、痛经经闭、恶露不尽、水肿尿少、疮疡肿毒，全国各地均有野生或栽培，其主要成分包括盐酸水苏碱、盐酸益母草碱等。为了保证益母草饮片质量稳定可控，本研究采用高效液相色谱法对益母草盐酸益母草含量进行研究，为益母草饮片质量标准研究提供依据。 1 仪器、药品与试剂1.1 仪器 Agilent 1200型高效液相色谱仪，包括1200系列 四元梯度泵、1200系列 DAD 检测器、1200化学工作站（美国Agilent 公司），超声波清洗器，分析天平，具塞锥形瓶、漏斗滤纸、蒸发皿、水浴锅、容量瓶等。 1.2 试剂与药品盐酸水苏碱对照品，盐酸益母草碱对照品（成 都曼思特生物科技有限公司），益母草饮片，乙腈（色谱纯），水为重蒸馏水，磷酸、辛烷磺酸钠、冰醋酸、无水乙醇为分析纯。 2 方法与结果 2.1 对照品溶液的制备 2.1.1 盐酸水苏碱对照品储备液的制备 精密称取盐酸水苏碱对照品50 mg，置10 mL 容量瓶中，加70%乙醇制成每毫升含5 mg 的溶液，摇匀，即得。 2.1.2 盐酸益母草碱对照品储备液的制备 精密称取盐酸益母草碱对照品6 mg 置10 mL 容量瓶中，加70%乙醇制成每毫升含0.6 mg 的溶液，摇匀，即得。 2.2 供试品溶液的制备 取益母草粉末（过三号筛）约1 g，精密称定，置 具塞锥形瓶中，精密加入70%乙醇25 mL，称定重量，加热回流2 h，放冷，再称定重量，用70%乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，供试品溶液使用前均以0.45 μm 微孔滤膜过滤，进样。 2.3 色谱条件与系统适用性试验 SCX 强阳离子柱（4.6 mm×250 mm，5 μm）；流动相：0.5 mol 磷酸二氢钾-三乙胺（1000∶1.5）（磷酸调pH 值2.25~2.3）；检测波长：192 nm ；流速 益母草饮片中盐酸水苏碱、盐酸益母草碱含量测定 张玉萌，项菲菲 （解放军总医院海南分院药剂科，海南 三亚 572004） 摘 要：目的：建立益母草饮片中盐酸水苏碱、盐酸益母草碱的含量测定方法，为其质量控制提供依据。方法：采用高效液相色谱法对益母草饮片中盐酸水苏碱的含量进行测定，色谱柱：SCX 强阳离子柱（4.6 mm×250 mm，5 μm）；流动相：0.5 mol 磷酸二氢钾-三乙胺（1 000∶1.5）（磷酸调pH 值2.25~2.3）；检测波长：192 nm ；流速 1.0 mL·min -1；柱温：25℃。结果：盐酸水苏碱的浓度在0.2~ 2.0 mg·mL -1 范围内线性关系良好，RSD=1.7%（n =5） ； 盐酸益母草碱的浓度在0.2~2.0 mg·mL -1 范围内线性关系良好，RSD=0.08%（n =5）。结论：该法简便、灵敏、准确，可用于益母草饮片的质量控制。 关键词：益母草；HPLC ；盐酸水苏碱；盐酸益母草碱 中图分类号：R927.2 文献标志码：A 文章编号：1673-842X (2013) 02- 0073- 02 收稿日期：2012-08-20 作者简介：张玉萌（1978-），女，北京人，主管药师，研究方向：中药临床药学。 Content Determination of Hydrochloric Stachydrine and Hydrochloric Leonurine in Decoction Pieces of Motherwort ZHANG Yumeng，XIANG Feifei （Department of Pharmacy，Hainan Branch of PLA General Hospital，Sanya 572004，Hainan，China） Abstract ： Objective ：To establish a method for content determination of hydrochloric stachydrine and hydrochloric leonurine in decoction pieces of motherwort，and to provide the basis for its quality control. Methods ：An HPLC method was established by using an SCX strong cation exchange column (4.6 mm×250 mm，5 μm) with the mobile phase of 0.5 mol monopotassium phosphate ：triethylamine(1000：1.5)，phosphoric acid adjusting the pH value to 2.25~2.3，with the flow rate of 1 mL?min -1 ，the wavelength of 192 nm and column temperature of 25 ℃. Results ：There was good linear relationship when the concentrations of hydrochloride stachydrine and hydrochloric leonurine were 0.2~2 mg?mL -1 and the values of RSD were 1.7%(n =5) and 0.08%(n =5) respectively. Conclusion ：The method is simple，sensitive and accurate，which can be used for the quality control of motherwort herb pieces. Key words ：motherwort ；HPLC ；hydrochloric stachydrine ；hydrochloric leonurine
水苏碱
水苏碱 【产品名称】水苏碱 【英文名称】stachydrine 【cas号】471-87-4 【来源】益母草leonurus sibiricus 的叶；四川清风藤sabiaschaumanniana diels的根；拓木cudrania tricuspidate(carr.)bur.的根；块茎水苏stachys tuberifera；剌山柑capparis spinosa l.的根；苜蓿medicago sativa l.的全草。 【规格】>70%;>80%;>90%，薄层鉴别只有一个斑点，为单一成份。 【物理性质】白色蜡状固体，超过50℃熔化成液状，分解点235℃，旋光度-40.25°(c=4,水)。易溶于水和醇，稀酸，不溶于乙醚、氯仿。耐高温，酸碱，性质稳定，易吸潮。 分子式：c7h13no2 分子量：179.5 核磁共振氢谱:δ/(×10-6)2.14～2.48 (4h,m,-(ch2)2);3.08(3h,s,n-ch3);3.27(3h,s,n-ch3);3.51～3.71(2h,m,n-ch2);4.13～4.17(1h,m,c-h)。 核磁共振碳谱:δ/(×10-6) 18. 666, 24. 912,46.229，52.296,67.668,75.163，169.919. 【药理药效】本品具有活血调经，利尿消肿，收缩子宫的作用。对肾上腺素所引起心肌缺血有提高冠状动脉和心肌营养性血流量、减少心肌细胞坏死量、降低血黏度、降低血管阻力、改善微循环、减慢心率、减少心输出量及抗血小板凝聚等作用（有望成为良好的心血管系统疾病的治疗药物）；还可改善和增加肾脏的血流量，使肾小球和肾小管得到修良、恢复肾功能的作用。对子宫有引起节律性收缩和兴奋子宫的作用，能抑制乳腺癌和子宫肌腺病的发生；具有祛痰、镇咳、松驰支气管平滑肌的作用；还具有减慢蛙心的收缩频率，对犬、兔能降低出血率和出血时间。