真核生物RNA聚合酶
真核RNA聚合酶及其启动子
表位标签法
• 表位标签法(epitope tagging):利用遗 传学方法将一小段氨基酸残基(表位标签) 融合到目的蛋白上,由此可使目的蛋白通 过抗体识别表位标签而进行免疫沉淀并纯 化蛋白
• 沉淀与纯化的蛋白质(或蛋白复合体)可 通过SDS-PAGE进行分离分析
10-10
酵母RNA pol II的亚基
WT转录起始位点
箭头长度表示缺失片段长度
SV40早期启动子缺失突变效应
10-17
近端启动子元件
• GC框(GC box):具有GGGCGG序列的近端启动子元件,存在于许 多哺乳动物结构基因的启动子中,通常位于TATA box上游,无方向依 赖性,但有位置依赖性。转录因子Sp1结合GC box后可增强转录效率。
• CCAAT框(CCAAT box)具有CCAAT序列的近端启动子元件,存在 于 许 多 RNA pol II 识 别 的 真 核 生 物 启 动 子 中 。 转 录 因 子 CTF 结 合 CCAAT框后可增强转录效率。
10-18
I类启动子
不同物种的I类启动子只有2个保守元件: • 核心元件:在转录起始位点附近(-45~+20),为转录所必须;上游启
10-20
10.3 增强子和沉默子
• 增强子(enhancer):与一个或多个激活因子结合而促进一个或多个 基因转录的DNA元件。增强子一般位于其调控基因的上游,但也可以 在下游
SV40病毒早期基因调控区结构
• 沉默子(silencer):可以在远距离降低基因转录水平的DNA元件 • 增强子和沉默子经常是组织特异性的,都可以在数千碱基之外对基因
• 酵母RNA pol II的Rpb1、Rpb2和Rpb3为核心亚基 • Rpb1亚基存在2种形式(IIAO、IIAA),分别执行转录起始与起始
rna聚合酶组成
rna聚合酶组成RNA聚合酶是一类重要的酶,它在细胞中起着关键的作用。
RNA聚合酶是一种酶类蛋白质,由多个亚基组成。
不同类型的RNA聚合酶在组成和功能上有所不同。
在真核生物中,有三种主要类型的RNA聚合酶:RNA聚合酶Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ。
它们分别负责转录不同类型的RNA分子。
RNA聚合酶Ⅰ主要负责转录核糖体RNA(rRNA),这些rRNA是构成细胞核糖体的重要组成部分。
RNA聚合酶Ⅰ由多个亚基组成,其中最重要的亚基是RPA1、RPA2和RPA3。
这些亚基共同形成了一个复杂的结构,使得RNA聚合酶Ⅰ能够识别并结合到rDNA (rRNA基因组)上,并开始转录过程。
RNA聚合酶Ⅱ是真核生物中最复杂和最重要的一类RNA聚合酶。
它负责转录mRNA(信使RNA),这些mRNA将DNA中的遗传信息转化为蛋白质。
与其他两种类型的RNA聚合酶相比,RNA聚合酶Ⅱ由更多的亚基组成。
其中最重要的亚基是RPB1、RPB2、RPB3和RPB11。
这些亚基共同形成了一个大型的酶复合物,能够识别和结合到DNA上,并开始转录过程。
RNA聚合酶Ⅲ主要负责转录tRNA(转运RNA)和一些其他小型非编码RNA。
它由多个亚基组成,其中最重要的亚基是RPC1、RPC2和RPC3。
这些亚基共同形成了一个复杂的结构,使得RNA聚合酶Ⅲ能够识别并结合到特定的DNA序列上,并开始转录过程。
总之,RNA聚合酶是由多个亚基组成的复杂蛋白质酶。
不同类型的RNA聚合酶在组成和功能上有所不同,但它们都起着关键的作用,参与了细胞中的转录过程。
对于理解细胞功能和遗传信息传递机制来说,对RNA聚合酶组成和功能的研究至关重要。
真核生物基因表达调控的多种方式
真核生物基因表达调控的多种方式真核生物基因表达包括转录、翻译和蛋白修饰等复杂过程,其中涉及多种调控方式。
以下是真核生物基因表达的各种表达调控方式的简述:1. 转录前调控转录前调控是指在 DNA 复制后被转录成 RNA 的过程中,通过调控 RNA 聚合酶 (RNA polymerase) 的亲和力、移动速度和活性等方式来控制基因的表达。
其中一些调控因子可以与启动子区域中的特定序列结合,从而抑制或增强 RNA 聚合酶的活性。
此外,一些转录因子还可以与 RNA 聚合酶结合,促进 RNA 聚合酶的移动,从而加快转录速率。
2. 转录调控转录调控是指通过调控 RNA 聚合酶结合到特定基因的启动子上,来控制基因的表达。
转录调控可以通过调节转录因子的数量、亲和力和活性等方式来实现。
一些转录因子可以与启动子区域中的特定序列结合,从而抑制或增强 RNA 聚合酶的活性。
此外,一些转录因子还可以与 RNA 聚合酶结合,促进 RNA 聚合酶的活性,从而加快转录速率。
3. 转录后调控转录后调控是指在基因被转录后,通过调控 RNA 剪接、RNA 编辑、RNA 降解等方式来控制基因的表达。
这些调控方式可以影响 RNA 的稳定性、可用性和转录本的多样性。
例如,一些调控因子可以与 RNA 剪接因子结合,从而改变 RNA 剪接的速率和方向。
一些 RNA 编辑酶可以编辑 RNA,改变基因表达。
此外,RNA 降解酶可以降解 RNA,从而抑制基因的表达。
4. 翻译调控翻译调控是指通过调控 mRNA 的稳定性、可用性和翻译速率等方式来控制基因的表达。
例如,一些调控因子可以与 RNA 聚合酶结合,从而抑制或增强 RNA 聚合酶的活性。
此外,一些翻译调控因子可以与 mRNA 结合,从而改变 mRNA 的稳定性和翻译速率。
5. 蛋白修饰调控蛋白修饰调控是指通过调控蛋白质的修饰方式来控制蛋白质的活性、稳定性和可用性等方式来控制基因的表达。
例如,一些修饰因子可以与蛋白质结合,从而改变蛋白质的修饰方式。
DNA聚合酶、RNA聚合酶等分子生物学6种酶
DNA聚合酶、RNA聚合酶等分子生物学6种酶1 DNA聚合酶DNA polymeraseDNA聚合酶:主要是连接DNA片段与单个脱氧核苷酸之间的磷酸二酯键,在DNA 复制中起做用。
DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核酸片段的3′末端的羟基上,形成磷酸二酯键;而DNA连接酶是在两个DNA片段之间形成磷酸二酯键,不是在单个核苷酸与DNA片段之间形成磷酸二酯键。
DNA聚合酶是以一条DNA链为模板,将单个核苷酸通过磷酸二酯键形成一条与模板链互补的DNA链;而DNA连接酶是将DNA 双链上的两个缺口同时连接起来。
因此DNA连接酶不需要模板。
DNA聚合酶(DNA polymerase)是细胞复制DNA的重要作用酶。
DNA聚合酶, 以DNA为复制模板,从将DNA由5'端点开始复制到3'端的酶。
DNA聚合酶的主要活性是催化DNA的合成(在具备模板、引物、dNTP等的情况下)及其相辅的活性。
真核细胞有5种DNA聚合酶,分别为DNA聚合酶α(定位于胞核,参与复制引发,不具5'-3'外切酶活性),β(定位于核内,参与修复,不具5'-3'外切酶活性),γ(定位于线粒体,参与线粒体复制,不具5'-3',有3'-5'外切活性),δ(定位核,参与复制,具有3'-5',不具5'-3'外切活性),ε(定位于核,参与损伤修复,具有3'-5',不具5'-3'外切活性)。
原核细胞:在大肠杆菌中,到目前为止已发现有5种DNA聚合酶,分别为DNA聚合酶Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ,都与DNA链的延长有关。
DNA聚合酶I是单链多肽,可催化单链或双链DNA 的延长,于1956年发现;DNA聚合酶II则与低分子脱氧核苷酸链的延长有关;DNA聚合酶III在细胞中存在的数目不多,是促进DNA链延长的主要酶。
DNA聚合酶Ⅳ和Ⅴ直到1999年才被发现。
生物化学试题 RNA的生物合成
第十三章RNA的生物合成..三。
典型试题分析(一)A型题1. 识别转录起点的是(1992年生化考题)A. 6因子B,核心酶C.ρ因子D. RNA聚合酶的α亚基E,RNA聚合酶的β亚基[答案] A2. 对于RNA聚合酶的叙述,不正确的是A. 核心酶和6因子构成B.核心酶由a2ββ’组成C. 全酶与核心酶的差别在于β亚单位的存在D. 全酶包括6因子E,6因子仅与转录起动有关[答案] C3.RNA的剪接作用(1999年生化试题)A.仅在真核发生B.仅在原核发生 C. 真核原核均可发生D.仅在rRNA发生E,以上都不是(答案) A4.以下关于转录终止子结构及转录终止的叙述,正确的是(2000年生化试题)A.由终止因子RF参与完成终止B.DNA链上的终止信号含GC富集区和AA富集区C.终止信号含GC富集区和AT富集区D. 终止信号需ρ因子辅助识别E.以上描述均不正确(答案) C四、测试题(一)A型题1.以下对tRNA合成的描述,错误的是A.RNA聚合酶Ⅲ参与tRNA前体的生成B.tRNA前体在酶作用下切除5’和3’末端处多余的核苷酸C. tRNA前体中含有内含子D,tRNA3’末端需加上ACC-OHE.tRNA前体还需要进行化学修饰加工2.以下对rRNA的转录加工的描述错误的是A.染色体DNA中rRNA基因是多拷贝的B,真核生物的5SrRNA自成独立的体系,不进行修饰和剪切C. 真核生物45SrRNA前体中包括16S,5.8S及28SrRNAD,原核生物30SrRNA前体中含有16S,23S及5SrRNAE,真核生物45SrRNA前体经一次剪切成为41SrRNA中间前体3.酶RNA是在研究哪种RNA的前体中首次发现的A.hnRNA B.tRNA前体 C. SnRNA D.ScRNA E.rRNA前体4.生物体系下列信息传递方式中尚无证据的是A.DNA→RNA B.RNA→蛋白质C.蛋白质→RNA D.RNA→DNA E.以上都不是5。
[常识]真核生物三种rna聚合酶的特色
1.简述真核生物三种RNA聚合酶的特点?下边是详细的RNA聚合酶Ⅰ的转录产物是45SrRNA,经剪接修饰后生成除5SrRNA 外的各种rRNA。
rRNA与蛋白质组成的核糖体是蛋白质合成的场所。
RNA聚合酶Ⅱ在核内转录生成hnRNA,经剪接加工后生成的mRNA被运送到胞质中作为蛋白质合成的模板。
RNA聚合酶Ⅲ的转录产物是tRNA,5SrRNA,snRNA,其中snRNA参与RNA的剪接。
24.简述乳糖操纵子的调控原理?答:答:(1)乳糖操纵子的组成:大肠杆菌乳糖操纵子含Z、Y、A三个结构基因,分别编码半乳糖苷酶、透酶和半乳糖苷乙酰转移酶,此外还有一个操纵序列O,一个启动子P和一个调节基因I.(2)阻遏蛋白的负性调节:没有乳糖存在时,I基因编码的阻遏蛋白结合于操纵序列O处,乳糖操纵子处于阻遏状态,不能合成分解乳糖的三种酶;有乳糖存在时,乳糖作为诱导物诱导阻遏蛋白变构,不能结合于操纵序列,乳糖操纵子被诱导开放合成分解乳糖的三种酶。
所以,乳糖操纵子的这种调控机制为可诱导的负调控。
(3)CAP的正调节:在启动子上游有CAP结合位点,当大肠杆菌从以葡糖糖为碳源的环境转变为以乳糖为碳源的环境时,cAMP浓度升高,与CAP结合,使CAP发生变构,CAP结合于乳糖操纵子启动序列附近的CAP结合位点,激活RNA聚合酶活性,促进结构基因转录,调节蛋白结合于操纵子后促进结构基因的转录,对乳糖操纵子实行正调控,加速合成分解乳糖的三种酶。
(4)协调调节:乳糖操纵子中的I基因编码的阻遏蛋白的负调控与CAP的正调控两种机制,互相协调、互相制约。
25.简述DNA聚合酶和DNA连接酶在DNA复制中的作用?答:DNA聚合酶(DNA polymerase)是细胞复制DNA的重要作用酶。
DNA聚合酶 , 以DNA为复制模板,从将DNA由5'端点开始复制到3'端的酶。
DNA聚合酶的主要活性是催化DNA的合成(在具备模板、引物、dNTP等的情况下)及其相辅的活性。
RNA聚合酶Ⅱ转录生成hnRNA和mRNA,是真核生物中最活跃的RNA聚
RNA聚合酶Ⅱ转录生成hnRNA和mRNA,是真核生物中最活跃的RNA聚合酶。
RNA聚合酶Ⅲ转录的产物都是小分子量的RNA,tRNA的,5SrRNA的和snRNA。
RNA聚合酶Ⅰ转录产物是45SrRNA,生成除5SrRNA外的各种rRNA。
下面小结真核生物的RNA聚合酶,见表。
(三)启动子及终止信号1 启动子启动子或启动部位是指在转录开始进行时,RNA聚合酶与模板DNA分子结合的特定部位。
这特定部位在转录作用的调节中是有作用的。
每一个基因均有自己特有的启动子。
(1)原核生物的启动子。
原核生物的启动子大约有55个碱基对长,其中包含有转录的起始点和两个区——结合部位及识别部位。
起始点是DNA模板链上开始进行转录作用的位点,标以+1,转录是从起始点开始向模板键的5′末端方向即编码链3′末端方向进行。
在DNA模板上,从起始点开始顺转录方向的区域称为下游;从起始点逆转录方向的区域称为上游。
结合部位是指在DNA分子上与RNA聚合酶核心酶紧密结合的序列。
结合部位的长度大约是7个碱基对,其中心位于起始点上游的-10bp处。
因此将此部位称为-10区。
多种启动子的-10区具有高度的保守性和一致性;它们有一个共有序列或共同序列,为5′TA TAAT-3′。
又称为Pribnow盒。
由于在Pribnow 盒中碱基组成全是A-T配对,缺少G-C配对;而前者的亲和力只相当于后者的十分之一,所以Tm值较低。
因此此区域的DNA双链容易解开,利于RNA聚合酶的进入而促使转录作用的起始。
在DNA分子上还有一段识别部位,是RNA聚合酶的σ因子识别DNA分子的部位。
识别部位约有6个碱基对,其中心位于上游-35bp处。
所以称为-35区,其共有序列5′-TTGACA-3′。
其示意图见图。
(2)真核生物的启动子。
一个真核基因按功能可分为两部分,即调节区和结构基因。
结构基因的DNA序列指导RNA转录;如果该DNA序列转录产物为mRNA,则最终翻译为蛋白质。
真核生物与原核生物转录与复制的区别
不同点真核生物和原核生物复制的不同点:1.真核生物DNA的合成只是在细胞周期的S期进行,而原核生物则在整个细胞生长过程中都可进行DNA合成2.原核生物DNA复制是单起点的,而真核生物染色体的复制为多起点的。
真核生物中前导链的合成并不像原核生物那样是连续的,而是以半连续的方式,由一个复制起点控制一个复制子的合成,最后由连接酶将其连接成一条完整的新链。
3.真核生物DNA的合成所需的RNA引物及后随链上合成的冈崎片段的长度比原核生物要短。
4.原核生物中有DNA聚合酶Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ三种聚合酶,并有DNA聚合酶Ⅲ同时控制两条链的合成。
真核生物中有α、β、γ、ε、δ五种聚合酶。
聚合酶α、δ是DNA合成的主要酶,分别控制不连续的后随链以及前导链的生成。
聚合酶β可能与DNA修复有关,聚合酶γ则是线粒体中发现的唯一一种DNA聚合酶.5.染色体端粒的复制不同。
原核生物的染色体大多数为环状,而真核生物染色体为线状。
末端有特殊DNA序列组成的结构成为端粒。
真核生物和原核生物转录的不同点:1.真核生物的转录在细胞核内进行,原核生物则在拟核区进行。
2.真核生物mRNA分子一般只编码一个基因,原核生物的一个mRNA分子通常含多个基因。
3.真核生物有三种不同的RNA聚合酶催化RNA合成,而在原核生物中只有一种RNA聚合酶催化所有RNA 的合成。
4.真核生物的RNA聚合酶不能独立转录RNA,三种聚合酶都必须在蛋白质转录因子的协助下才能进行RNA的转录,其RNA聚合酶对转录启动子的识别也比原核生物要复杂得多。
原核生物的RNA聚合酶可以直接起始转录合成RNA。
真核生物和原核生物翻译的不同点:氨基酸的活化:原核起始氨基酸是甲酰甲硫氨酸,真核是从生成甲硫氨酰-tRNAi开始的。
翻译的起始:原核的起始tRNA是tRNA fMet,30s小亚基首先与mRNA模板相结合,再与tRNA fMet结合,最后与50s大亚基结合。
真核中起始tRNA是tRNA Met,40s小亚基首先与tRNA Met相结合,再与模板mRNA结合,最后与60s大亚基结合生成起始复合物。
分子生物学习题
(一)选择题1、RNA聚合酶的核心酶由以下哪些亚基组成(ACD )。
A. αB. σC. βD. β’E. δ2、原核生物RNA聚合酶中负责模板链的选择和转录起始的是(C )。
A、α和β亚基B、β’ 和ω亚基C、σ亚基D、α亚基3、真核生物RNA聚合酶II的功能是(C )。
A、转录tRNA和5S rRNAB、只转录rRNA 基因C、转录蛋白质基因和部分snRNA基因D、转录多种基因4、以下关于原核生物RNA聚合酶的核心酶的叙述,哪一项是正确的(C )。
A、核心酶可以与DNA结合,但不能催化以DNA为模板合成RNAB、核心酶能够在正确的位置起始转录,但效率比RNA聚合酶全酶低C、核心酶能催化以DNA为模板合成RNA,但不能在正确的位置起始转录D、核心酶不能与DNA模板结合5、真核生物pre-mRNA splicing过程中,下列不正确的是(D )。
A、供体端的G碱基与分支点(branch point)的A碱基形成2’,5’-磷酸二脂键B、U1 snRNA与Intorn5’序列形成碱基配对C、剪接后Intorn形成一个Lariat(套索)结构D、任何情况下,所有的Intorn都会被剪接掉6、以下关于大肠杆菌转录的叙述,哪一个是正确的(B )A、-35区和-10区序列间的间隔序列是保守的B、-35区和-10区序列的距离对于转录效率非常重要C、转录起始位点后的序列对于转录效率不重要D、-10区序列通常正好位于转录起始位点上游10bp处7、以DNA为模板,RNA聚合酶作用时,不需要(B )。
A、NTPB、dNTPC、ATPD、Mg2+/Mn2+8、在正常生长条件下,某一细菌基因的启动子-10序列由TCGACT突变为TATACT,由此引起该基因转录水平的变化,以下哪一种描述是正确的( A )。
A、该基因的转录增加B、该基因的转录减少C、该基因的转录不能正常进行D、该基因的转录没有变化9、关于内含子的叙述,哪一条是正确的(B )。
2021年分子生物学模拟试卷与答案(3)
2021年分子生物学模拟试卷与答案3一、单选题(共30题)1.有关细胞器基因组结构特点的描述,错误的是A:基因组为环状B:有基因表达功能C:有多个转录起始点D:为单顺反子【答案】:D【解析】:2.DNA变性过程中断开的化学键是A:磷酸二酯键B:肽键C:糖苷键D:氢键【答案】:D【解析】:3.与RNA聚合酶结合的,启动转录的是A:调节基因B:操纵基因C:启动基因D:结构基因【答案】:C4.逆转录酶是依赖于的DNA聚合酶A:DNAB:RNAC:氨基酸D:蛋白质【答案】:B【解析】:5.有关一个DNA分子的T。
值,下列说法正确的是()A.G+C比例越高,值也越高A:A+T比例越高,值也越高B:(A+T)%+(G+C:%D:值越高,DNA越易发生变性【答案】:A【解析】:6.组成原核生物DNA聚合酶III的亚基有A:3个B:6个C:9个D:12个【答案】:C7.DNA双螺旋结构模型的描述中不正确的是A:腺嘌呤的摩尔数等于胸腺嘧啶的摩尔数B:同种生物体不同组织中的DNA碱基组成极为相似C:DNA双螺旋中碱基对位于外侧D:二股多核苷酸链通过A与T或C与G之间的氢键连接【答案】:C【解析】:8.tRNA中的稀有碱基不包括A:AB:IC:TD:ψ【答案】:C【解析】:9.限制性核酸内切酶切割DNA后产生【答案】:A【解析】:10.不属于tRNA的一级结构的特点是A:看‘A位和P位B:二级结构呈三叶草形C:三级结构为“倒L”形D:有反密码子环【答案】:A【解析】:11.能够使DNA碱基发生转换或颠换的突变类型为A:点突变B:碱基插入C:碱基缺失D:移码突变【答案】:A【解析】:12.1957年,实验证实了半保留复制的研究者是A.Watson和Crick A:Meselson和StahlB:C:MiescherD:ThomasKomber9和MalcolmGefter【答案】:B【解析】:13.染色质结构中表述正确的是()A.核小体由DNA和非组蛋白共同构成B.核小体由RNA和H1,H2,H3,H4各二分子构成A:组蛋白有5种:H1,H2B:H2C:H3和H4D:组蛋白是由组氨酸构成的【答案】:C【解析】:14.下列哪一种酶在DNA复制述程中具有校读作用A:DNA聚合酶IB:DNA聚合酶IIC:DNA聚合酶IIID:DNA解旋酶【答案】:A【解析】:15.下列不属于转座的遗传效应的是A:引起插入突变B:可产生新的基因C:可形成共整合体D:使靶位点减少【答案】:D【解析】:16.实现PCR技术自动化的关键因素是()A:模板B:特异性引物C:耐热DNA聚合酶D:缓冲液【解析】:17.与pCAGCT互补的DNA序列是()A:pAGCTGB:pGTCGAC:pGUCGAD:pAGCUG【答案】:A【解析】:18.细胞癌基因A:只在肿瘤细胞中出现B:在正常细胞加入化学致癌物后出现C:在正常人细胞也能检测到D:只在转化的细胞中出现【答案】:C【解析】:19.嘧啶二聚体的解聚方式主要是A:原核生物的切除修复B:重组修复C:光修复酶的作用D:SOS修复【答案】:C20.核矗呙切酶能够识别并切割某种特定核苷酸序列,该序列具有双重旋转对称结构,该结构称为A:发夹结构B:回文结构C:三叶草结构D:帽子结构【答案】:B【解析】:21.下列属于原核细胞基因工程的载体是A:质粒B:SV40病毒C:酵母D:杆状病毒【答案】:A【解析】:22.基因中被转录的非编码序列是A:内含子B:顺式作用元件C:外显子D:沉默子【答案】:A23.用紫外线照射而使DNA受到损伤或使其碱基配对性能发生改变的过程称为A:实变B:诱变C:诱导D:转换【答案】:A【解析】:24.常用质粒载体的特点是()A:为线性双链DNA分子B:为环形单链DNA分子C:具有自我复制能力D:含有同一限制性内切酶的多个切点【答案】:C【解析】:25.两个微溶于水的分子或分子的某些部位之间的相互作用是A:氢键B:疏水相互作用C:离子键D:范德华引力【答案】:B26.同位素标记探针检测NC膜上的RNA分子()A:叫做NorthernBlottingB:叫做SouthernBlottingC:叫做WesternBlottingD:叫做蛋白分子杂交【答案】:A【解析】:27.1953年,Watson和Crick提出A:DNA双链通过氢键连接成一个双螺旋B:DNA的复制是半保留的C:三个连续的核苷酸代表一个遗传密码D:遗传物质通常是DNA【答案】:A【解析】:28.复制中的RNA引物作用是A:使DNA聚合酶Ⅲ活化B:解开DNA双链【答案】:B【解析】:29.核酸变性后,可发生A:减色效应B:增色效应C:溶液的黏度增加D:失去对紫外线的吸收能力【答案】:B【解析】:30.在重组DNA中使用最广泛的限制性核酸内切酶是下列哪一型A:I型B:Ⅱ型C:Ⅲ型D:Ⅳ型【答案】:B【解析】:二、多选题(共5题)31.下列哪些属于RNAi的特点?()A:高度特异性B:高效性C:单基因控制D:需要siRNA介导E:在DNA水平引发基因沉默【答案】:ABD【解析】:32.关于转录的描述正确的有A:基因表达必须通过遗传信息从DNA到RNA,然后从RNA到蛋白质B:RNA分子以DNA分子的一条链为模板在依赖于DNA的RNA聚合酶的催化下合成C:依赖于DNA的RNA聚合酶也简称为RNA聚合酶D:RNA分子被起始.被延长.被终止的过程叫转录E:DNA变成单链的过程【答案】:ABCD【解析】:33.哪些因素可引起DNA突变?A:DNA复制错误B:射线辐射C:碱基类似物掺入D:DNA插入剂E:碱基修饰剂【答案】:ABCDE【解析】:34.下列属于原核生物基因组的特点是A:含有操纵子结构B:只有一个复制起始点C:基因中不含有内含子D:存在大量的重复序列E:编码蛋白质的基因通常以单拷贝形式存在【答案】:ABCE【解析】:35.原核生物中mRNA与rRNA、tRNA比较下列哪些是正确的B.mRNA的初级转录产物要经过一系列加工过程才变为成熟的C.所有tRNA除了含有A.A:U外还含有稀有碱基,这些稀有碱基在初级转录物中是没有的B:rRNA和tRNA分子比mRNA初级产物小得多C:所有mRNA都有polyD:尾巴【答案】:ACD【解析】:三、填空题(共5题)36.离子交换层析是根据物质自身所带________的不同进行分离的层析技术。
真核生物rna聚合酶的种类和功能
真核生物rna聚合酶的种类和功能
真核生物RNA聚合酶是一类存在于细胞中的酶,其作用是将RNA和接头核苷酸(NTP)结合,使RNA可以形成键合特定模板的双链。
真核生物RNA聚合酶由不同类型的蛋白质组成,可以分为五类:
一、商业的RNA聚合酶。
这类RNA聚合酶具有可常用于分子生物学研究的高度纯度和通量,可以在多种类型的实验条件下使用。
它们同时具有较差的热稳定性和输出率。
二、野生型RNA聚合酶。
这类RNA聚合酶主要分布于真核细胞核仁中,比商业的RNA聚合酶更长,热稳定性较好。
它们能够以更快的速度合成RNA。
三、甲基化后的RNA聚合酶。
这类RNA聚合酶通常可以用于分析和识别RNA剪接产物,可以有效降低从RT-PCR产物中分离RNA所需要的时间。
四、功能型RNA聚合酶。
这类RNA聚合酶能够精准地介导RNA复制过程,主要是由多个结构原子组成的翻译复制和抗原都可以担任的职位。
此外,它可以帮助合成某些特定类型的RNA,并且可以结合RNA折叠现象。
五、被动型RNA聚合酶。
这类RNA聚合酶携带大量伴侣蛋白质,可以合成更大规模的RNA。
它能够在高温或低温下抗衡,能够分解多种不同大小、形状和结构的RNA。
总的来说,真核生物RNA聚合酶是生物体细胞结构的重要组成部分,它们在复杂的基因组中起着重要的作用,可以有效地分解、重新复原和调节DNA和RNA。
分子生物学-10
分子生物学-10(总分:100.00,做题时间:90分钟)一、问答题(总题数:20,分数:100.00)1.比较真核生物RNA聚合酶Ⅱ识别的启动子和原核生物RNA聚合酶所识别的启动子的结构特点,并解释为什么原核生物的一种RNA聚合酶能识别不同的结构基因?(分数:5.00)__________________________________________________________________________________________ 正确答案:()解析:原核生物RNA聚合酶所识别的启动子由上游增强元件、-35区、-10区以及转录起始位点构成;真核生物RNA聚合酶Ⅱ识别的启动子由TATA盒、转录起始位点、TFIIB识别位点以及下游启动子元件构成。
由于原核生物的RNA聚合酶含有能特异性识别启动子的σ因子,所以不需要其他辅助蛋白就能识别不同的结构基因。
2.比较真核生物rRNA、mRNA以及tRNA合成的特点。
(分数:5.00)__________________________________________________________________________________________ 正确答案:()解析:核仁是28S rRNA、18S rRNA以及5.8S rRNA合成的场所,这三种rRNA共享一个启动子,由RNA聚合酶Ⅰ合成,45S rRNA是它们的共同前体,通过转录后加工产生各自成熟的终产物。
核质是mRNA和tRNA、5SrRNA合成的场所,分别由定位于细胞核质的RNA聚合酶Ⅱ和Ⅲ合成,产生的前体均要经过转录后加工才能成为终产物。
3.简述真核生物rRNA基因(不含5S rRNA基因)和tRNA基因的转录起始机制。
(分数:5.00)__________________________________________________________________________________________ 正确答案:()解析:真核生物28S rRNA,18S rRNA以及5.8S rRNA基因由RNA聚合酶Ⅰ负责转录,首先组装因子UBF分别与上游控制元件UCE和核心启动子结合,随后招募定位因子SL1与启动子结合,SL1引导RNA pol Ⅰ正确定位到启动子上,起始转录。
真核生物rna聚合酶的转录_解释说明
真核生物rna聚合酶的转录解释说明1. 引言1.1 概述真核生物是一类具有细胞核的生物,包括动物、植物和真菌等。
在真核生物细胞内,转录是基因表达的重要过程之一,它通过将DNA中的遗传信息转录成RNA 分子来实现。
这一过程主要依靠一类特殊的酶——RNA聚合酶。
1.2 文章结构本文旨在对真核生物RNA聚合酶的转录进行解释说明。
文章将从以下几个方面展开讨论:首先,我们将介绍RNA聚合酶的定义和功能;其次,阐述转录的基本过程;然后,详细探讨真核生物RNA聚合酶的分类与特点;接着,我们会深入研究RNA聚合酶II的转录机制;最后,介绍转录后修饰与成熟mRNA生成过程,并总结真核生物RNA聚合酶转录过程中的重要要点。
1.3 目的通过对真核生物RNA聚合酶转录的解释说明,本文旨在帮助读者了解这一重要过程的具体机制,并认识到其在基因表达调控中扮演着至关重要的角色。
同时,我们也希望为未来的研究提供一些启示,并引起更多对这一领域的兴趣。
以上是文章“1. 引言”部分的内容,旨在提供概述、结构和目的等信息,为读者打下良好的阅读基础。
2. 真核生物RNA聚合酶的转录2.1 RNA聚合酶的定义和功能RNA聚合酶是一类在细胞内负责将DNA模板转录成RNA分子的酶。
它们在基因表达过程中起着关键作用,通过将DNA上的信息转录成RNA分子,从而实现了基因的表达和调控。
在真核生物中,存在三种不同类型的RNA聚合酶,分别被称为RNA聚合酶I、II和III。
其中,RNA聚合酶II主要负责将DNA中编码蛋白质的基因转录成mRNA前体。
2.2 转录的基本过程转录是指通过RNA聚合酶将DNA转录成RNA的过程。
这个过程由一系列步骤组成,包括识别和选择适当的启动位点、建立转录泡泡并进行链延伸、以及终止转录并释放产物。
首先,在真核生物中,外激活因子会结合到特定区域上,并吸引RNA聚合酶II 靠近DNA。
接下来,该复合体会准确地定位到所需区域上的启动位点,并解开DNA双链以形成一个小型螺旋形结构,即转录泡泡。
真核生物RNA聚合酶
(B’’, TBP, BRF)
TF III B
TF III A TF III C
Pol III
四、RNA 聚合酶 II 基因的转录
(一)RNA聚合酶 II 的启动子 1、组成:
核心启动子(core promoter): TATA盒(Hogness box): - 25 ~ -35bp
上游启动子(upstream promoter element,UPE) CAAT盒 :-70 ~ -80区 GC盒:-80 ~ -110区
TF II B —— 覆盖靠近起始点的启动位置,C端与TFIID和DNA 的复合物结合,N-端与TFⅡF协同作用募集RNA聚 合酶II。
TF II F ——结合Pol II并带向启动子;RAP74(ATP依赖性解 旋酶),RAP30(与细菌因子有同源性)
TF II E —— 扩大DNA覆盖区至+30
(2) TFIIA
▪ 含有至少3个亚基 ▪ 与TFIID结合,稳定TFIID-DNA复合体;可能通过解除
TAFs的抑制而激活TBP
TF II A
(3) TFIIB ▪ 覆盖靠近起始点的启动位置,C端与TFIID和DNA的复
合物结合,N-端与TFⅡF协同作用募集RNA聚合酶II
▪ TFIIB与TFIID结合,并为RNA聚合酶结合起一个桥梁
Pol III
2、上游因子(Upstream factor)
(1)识别并与启动子上游元件结合 (2)与上游元件结合可增加转录起始的效率
上游元件
Startpoint
UBF1
(五)启动子
RNA 聚合酶Ⅰ的启动子:位于转录起点上游 RNA 聚合酶Ⅱ的启动子:位于转录起点上游 RNA 聚合酶III的启动子:位于转录起点下游
细菌和真核生物转录机制的差异
细菌和真核生物转录机制的差异
1不同的转录机制
细菌和真核生物的转录机制存在一定的差异。
这些差异主要体现在以下几个方面:
1.1启动子
首先,启动子是转录反应开始的地方,其作用是连接RNA聚合酶与DNA模板上。
细菌只有一种RNA聚合酶,它能识别相对简单的DNA 启动子。
而真核生物有三类不同的RNA聚合酶,它们能够识别不同的DNA启动子。
1.2转录调节
其次,细菌的转录调节主要依赖启动子及其上游的启动子元件,而真核生物的调节除了启动子以外,还受到基因间まゝ数距离,和内部及外部环境因素的影响。
1.3转录加工
最后,细菌转录后不会经过加工就会被进行翻译,而真核生物经过mRNA加工后再被翻译,包括5'修饰(5'cap)、流式处理(polyA tail)、剪切(splicing)、转录本结构调节(RNA stability)等。
总之,细菌和真核生物的转录机制的主要差异体现在启动子的多样性、转录调节的复杂性及转录加工的必要性上。
RNA聚合酶
在细菌等原核生物中,相同的RNA聚合酶催化三种RNA的合成:信使RNA (mRNA)、核糖体RNA (rRNA)及转运RNA (tRNA)。
细胞RNA聚合酶是相对大的分子。
细菌RNA聚合酶是相对大的分子。
核心酶有5个亚基(~400 kDa):核心酶有5个亚基(~400 kDa):α2:这两个α亚基组合成酶及辨认调节因子。
每个亚基有两个区,αC末端区及αN末端区,分别与启动子结合及与聚合酶的其他部份结合。
每个亚基有两个区,αC末端区及αN末端区,分别与启动子结合及与聚合酶的其他部份结合。
β:有着聚合酶的活动,负责催化RNA的合成。
β':与DNA结合。
ω:还未清楚它的功能。
但是它在耻垢分枝杆菌中似乎是提供保护功能予β'亚基。
但是它在耻垢分枝杆菌中似乎是提供保护功能予β'亚基。
为着与启动子的特定区域结合,核心酶须有其他亚基,称为σ。
为着与启动子的特定区域结合,核心酶须有其他亚基,称为σ。
σ因子大大减低RNA聚合酶与非特定的DNA的关系,视乎σ因子本身而增加对某些启动子区域的独特性。
σ因子大大减低RNA聚合酶与非特定的DNA的关系,视乎σ因子本身而增加对某些启动子区域的独特性。
所以完整的全酶有着6个亚基:α 2 、β、β'、σ及ω(~480 kDa)。
所以完整的全酶有着6个亚基:α 2 、β、β'、σ及ω(~480 kDa)。
RNA聚合酶的结构就有一个长约55Å(即5.5奈米)的沟道及直径为25Å(2.5奈米)。
RNA聚合酶的结构就有一个长约55Å(即5.5奈米)的沟道及直径为25Å(2.5奈米)。
这个沟道正好适合20Å(2奈米)的DNA双股。
这个沟道正好适合20Å(2奈米)的DNA双股。
55Å的长度可以接受16核苷酸。
55Å的长度可以接受16核苷酸。
当不使用时,RNA聚合酶会与弱结合部位结合,等待活性启动子的位点开启并快速转换。
真核生物rna聚合酶分类
真核生物rna聚合酶分类真核生物是指细胞内有真核核膜包围的生物,其基因表达是通过转录过程将DNA转录成RNA来实现的。
而RNA聚合酶是参与转录过程的关键酶类。
根据其功能和结构特点,真核生物RNA聚合酶可以分为三类:RNA聚合酶Ⅰ、RNA聚合酶Ⅱ和RNA聚合酶Ⅲ。
一、RNA聚合酶ⅠRNA聚合酶Ⅰ是真核生物细胞中最大的一类RNA聚合酶。
它主要负责转录rRNA(核糖体RNA)的合成。
在真核生物细胞核中,rRNA是构成核糖体的重要组成部分,参与蛋白质合成的核糖体合成过程依赖于rRNA的合成。
RNA聚合酶Ⅰ的活性主要集中在核仁中,核仁是真核生物细胞中与核糖体合成相关的重要细胞器。
二、RNA聚合酶ⅡRNA聚合酶Ⅱ是真核生物细胞中最重要的一类RNA聚合酶。
它主要负责转录mRNA(信使RNA)的合成。
mRNA是真核生物细胞中的一种重要RNA类型,它携带着DNA上的遗传信息,通过核糖体翻译成蛋白质。
RNA聚合酶Ⅱ具有高度特异性,只能识别和结合到具有启动子序列的基因上,从而实现对mRNA的合成。
三、RNA聚合酶ⅢRNA聚合酶Ⅲ是真核生物细胞中最小的一类RNA聚合酶。
它主要负责转录tRNA(转运RNA)和部分小RNA(如5S rRNA、7SL RNA等)的合成。
tRNA是真核生物细胞中的一种重要RNA类型,它参与蛋白质的翻译过程,将氨基酸运送到正在合成的多肽链上。
RNA聚合酶Ⅲ也参与转录其他一些小RNA,这些小RNA在真核生物细胞中具有重要的功能。
真核生物细胞中的RNA聚合酶可以分为三类:RNA聚合酶Ⅰ、RNA聚合酶Ⅱ和RNA聚合酶Ⅲ。
它们分别负责转录rRNA、mRNA和tRNA等不同种类的RNA。
这些RNA在真核生物细胞中具有重要的功能,参与蛋白质合成、核糖体合成以及其他生物学过程。
RNA聚合酶的分类和功能研究对于理解真核生物基因表达调控机制具有重要意义,也为疾病的发生和治疗提供了重要的理论基础。
【练习题】生物化学练习题RNA的转录
【关键字】练习题生物化学练习题——RNA的转录生物化学练习题——RNA的转录(单选题)1.对于RNA聚合酶的叙述,不正确的是A.由核心酶和σ因子构成B.核心酶由α2ββ’组成C.全酶与核心酶的差别在于β亚单位的存在D.全酶包括σ因子E.σ因子仅与转录起动有关2.以RNA为模板合成DNA的过程是A.DNA的全保留复制机制B.DNA的半保留复制机制C.DNA的半不连续复制D.DNA的全不连续复制E.反转录作用3.以RNA作模板,催化合成cDNA第一条链的酶是A.反转录酶B.端粒酶C.末端转移酶D.反转录病毒E.噬菌体病毒4.关于反转录酶的叙述错误的是A.作用物为四种dNTPB.催化RNA水解反应C.合成方向3’→5’D.催化以RNA为模板进行DNA合成E.可形成DNA-RNA杂交体中间产物5.在DNA生物合成中,具有催化RNA指导的DNA聚合反应,RNA水解及DNA指导的DNA聚合反应三种功能的酶是A.DNA聚合酶B.RNA聚合酶C.反转录酶D.DNA水解酶E.连接酶6.真核细胞中经RNA聚合酶Ⅲ催化转录的产物是A.hnRNAB.tRNAC.mRNAD.U4,U5snRNA,18S,28SrRNA前体7.真核细胞中经RNA聚合酶I催化转录的产物是A.hnRNAB.tRNAC.5SrRNAD.U4,U5snRNA,18S,28SrRNA前体8.转录过程中需要的酶是A.DNA指导的DNA聚合酶B.核酸酶C.RNA指导的RNA聚合酶ⅢD.DNA指导的RNA聚合酶E.RNA指导的DNA聚合酶9.下列关于rRNA的叙述错误的是A.原核rRNA由RNA聚合酶催化合成B.真核rRNA由RNA聚合酶Ⅲ转录合成C.rRNA转录后需进行甲基化修饰D.染色体DNA中rRNA基因为多拷贝的E.rRNA占细胞RNA总量的80%~85%10.下列关于σ因子的叙述正确的是A.参与识别DNA模板上转录RNA的特殊起始点B.参与识别DNA模板上的终止信号C.催化RNA链的双向聚合反应D.是-种小分子的有机化合物E.参与逆转录过程11.催化真核mRNA的转录的酶是A.RNA聚合酶IB.MtRNA聚合酶C.RNA聚合酶ⅢD.RNA复制酶E.RNA聚合酶Ⅱ12.催化原核mRNA转录的酶是A.RNA复制酶B.RNA聚合酶C.DNA聚合酶D.RNA聚合酶ⅡE.RNA聚合酶I13.催化真核tRNA转录的酶是A.RNA聚合酶IB.DNA聚合酶C.RNA聚合酶ⅡD.RNA复制酶E.以上都不是14.真核生物RNA聚合酶Ⅱ在核内转录的产物是A.hnRNAB.线粒体RNAsC.U6snRNA前体,5SrRNA前体,28SrRNA前体E.ScRNA15.RNA聚合酶中促进磷酸二酯键生成的亚基是A.原核RNA聚合酶亚基δB.原核RNA聚合酶亚基αC.原核RNA聚合酶亚基βD.原核RNA聚合酶亚基βE.原核RNA聚合酶亚基σ16.RNA聚合酶中识别模板转录起始部位的亚基是A.原核RNA聚合酶亚基δB.原核RNA聚合酶亚基αC.原核RNA聚合酶亚基βD.原核RNA聚合酶亚基βE.原核RNA聚合酶亚基σ17.下列关于反转录酶作用的叙述哪一项是错误的?A.以RNA为模板合成DNAB.需要一个具有3’-OH的引物C.催化链的延长,其方向为3’→5’D.底物是四种dNTPE.需要Mg2+或Mn2+18.DNA上某段碱基顺序为5’ACTAGTCAG3’,转录后mRNA上相应的碱基顺序为A.5’-TGATCAGTC-3’B.5’-UGAUCAGUC-3’C.5’-CUGACUAGU-3’D.5’-CTGACTAGT-3’E.5’-CAGCUGACU-3’19.现有一DNA片断,它的顺序为3’……ATTCAG……5’,转录从左向右进行,生成的RNA顺序应是A.5’……GACUUA……3’B.5’……AUUCAG……3’C.5’……UAAGUC……3’D.5’……CTGAAT……3’E.5’……ATTCAG……3’20.下列关于DNA指导的RNA合成的叙述中哪一项是错误的?A.只有在DNA存在时,RNA聚合酶才能催化生成磷酸二酯键B.转录过程中RNA聚合酶需要引物C.RNA链的合成方向是从5’→3’端D.大多数情况下只有一股DNA作为RNA的模板E.合成的RNA链没有环状的21.原核生物DNA指导的RNA聚合酶由数个亚单位组成,其核心酶的组成是A.α2ββ’B.α2ββ1σC.ααβD.ααβE.αββ22.下列关于σ-因子的描述哪一项是正确的?A.RNA聚合酶的亚基,负责识别DNA模板上转录RNA的特殊起始点B.DNA聚合酶的亚基,能沿5’→3’及3’→5’方向双向合成C.核糖体50S亚基,催化肽键形成D.核糖体30S亚基,与mRNA结合E.是50S和30S亚基组成70S核蛋白体的桥梁23.下列关于RNA聚合酶和DNA聚合酶的叙述哪一项是正确的?A.利用核苷二磷酸合成多核苷酸链B.RNA聚合酶需要引物,并在延长的多核苷酸链5’-末端添加碱基C.DNA聚合酶能同时在链两端添加核苷酸D.DNA聚合酶只能以RNA为模板合成DNAE.RNA聚合酶和DNA聚合酶只能在多核苷酸链的3’-OH末端添加核苷酸24.DNA复制和转录过程具有许多异同点,下列关于DNA复制和转录的描述中哪项是错误的?A.在体内只有一条DNA链转录,而两条DNA链都复制B.在这两个过程中合成方向都为5’→3’C.复制的产物在通常情况下大于转录的产物D.两过程均需RNA为引物E.DNA聚合酶I和RNA聚合酶都需要Mg2+25.DNA复制与转录过程有许多异同点中,描述错误的是A.转录是只有一条DNA链作为模板,而复制时两条DNA链均可为模板链B.在复制和转录中合成方向都为5’→3’C.复制的产物通常大于转录产物D.两过程均需RNA引物E.两过程均需聚合酶和多种蛋白因子26.成熟的真核生物mRNA5’端具有A.多聚AB.帽结构C.多聚CD.多聚GE.多聚U27.起始细菌基因转录的DNA结合蛋白称为:A.增强子B.启动子C.阻遏物D.σ因子E.ρ因子28.DNA双链中,指导合成RNA的那条链称作A.编码链B.有意义链C.模板链D.非编码链E.以上都不对29.以下对tRNA合成的描述,错误的是A.RNA聚合酶Ⅲ参与tRNA前体的生成B.tRNA前体在酶作用下切除5’和3’末端处多余的核苷酸C.tRNA前体中含有内含子D.tRNA3’末端需加上ACC-OHE.tRNA前体还需要进行化学修饰加工30.以下关于转录终止子的叙述,正确的是A.由终止因子RF参与完成终止B.DNA链上的终止信号含GC富集区和AA富集区,C.终止信号含GC富集区和AT富集区D.终止信号需ρ因子辅助识别E.以上描述均不正确31.以下对mRNA的转录后加工的描述错误的是A.mRNA前体需在5’端加m7GpppNmp的帽子B.mRNA前体需进行剪接作用C.mRNA前体需在3’端加多聚U的尾D.mRNA前体需进行甲基化修饰E.某些mRNA前体需要进行编辑加工32.以下RNA转录终止子的结构描述正确的是A.由终止因子RF参与完成终止B.DNA链上的终止信号含有一段GC富集区和AA富集区C.终止信号含有GC富集区和AT富集区D.终止信号需要s因子辅助识别E.以上的描述都不正确33.RNA的转录过程分为A.解链,引发,链的延长和终止B.转录的起始,延长和终止C.核蛋白体循环的启动,肽链的延长和终止D.RNA的剪切和剪接,末端添加核苷酸,修饰及RNA编辑E.以上都不是34.体内核糖核苷酸链合成的方向是A.3’→5’B.C→NC.N→CD.5’→3’E.既可自3’→5’,亦可自5’→3’35.成熟的真核生物mRNA5’末端具有A.聚A帽子B.m7UpppNmPC.m7CpppNmPD.m7ApppNmPE.m7GpppNmP36.原核mRNA转录后需要进行的5’端加工过程是A加帽子B.加聚A尾C.剪切和剪接D.RNA编辑E.不加帽子37.比较RNA转录与DNA复制A.原料都是dNTPB.都在细胞核内进行C.合成产物均需剪接加工D.与模板链的碱基配对均为A-TE.合成开始均需要有引物38.内含子是指A.不被转录的序列B.编码序列C.被翻译的序列D.被转录的序列E.以上都不是39.外显子是指A.DNA链中的间隔区B.被翻译的编码序列C.不被翻译的序列D.不被转录的序列E.以上都不是40.以下反应属于RNA编辑的是A.转录后碱基的甲基化B.转录后产物的剪接C.转录后产物的剪切D.转录产物中核苷酸残基的插入、删除和取代E.以上反应都不是41.DNA复制与RNA转录中的不同点是A.遗传信息均储存于碱基排列的顺序中B.新生链的合成均以碱基配对的原则进行C.RNA聚合酶缺乏校正功能D.合成方向均为5’→3’E.合成体系均需要酶和多种蛋白因子42.tRNA的加工是A.切除部分肽链B.3’末端加-CCAC.3’末端加polyAD.5’末端糖基化E.30S经RNaseⅢ催化切开43.mRNA的加工是A.切除部分肽链B.3’末端加-CCAC.3’末端加polyAD.5’末端糖基化E.30S经RNaseⅢ催化切开44.催化mRNA3’端polyA尾生成的酶是A.限制性内切酶B.鸟苷酸转移酶C.RNasE.PD.RNasEDE.多聚A聚合酶45.基因中有表达活性的编码序列是A.内含子B.外显子C.多顺反子D.单顺反子nRNP46.基因中被转录的非编码序列A.内含子B.外显子C.多顺反子D.单顺反子nRNP47.下列关于启动子的描绘哪一项是正确的?AmRNA开始被翻译的那段DNA顺序B.开始转录生成mRNA的那段DNA顺序C.RNA聚合酶最初与DNA结合的那段DNA顺序D.阻抑蛋白结合的DNA部位E.调节基因结合的部位48.ρ-因子的功能是A.结合阻遏物于启动区域处B.增加RNA合成速率C.释放结合在启动子上的RNA聚合酶D.参与转录的终止过程E.允许特定转录的启动过程49.启动子是A.mRNA上最早被翻译的哪一段核苷酸顺序B.开始转录生成的mRNA的哪一段核苷酸顺序C.RNA聚合酶最早与之结合的那一段核苷酸顺序D.能与阻抑蛋白结合的那一段核苷酸顺序E.引发DNA复制的那一段核苷酸顺序50.下列关于DNA转录的叙述哪一项是正确的?A.因为DNA两条链是互补的,所以以两条链为模板时转录生成的mRNA是相同的B.一条含有一个结构基因的DNA通常可转录两个mRNAC.真核细胞中有些结构基因是不连续的,因为有些基因的顺序并不表达在相应的mRNA中D.从特异基因转录生成的所有的RNA,其顺序可全部或部分翻译出来E.一种蛋白质只能由两个基因决定,这两基因分布在同源染色体上51.下列关于mRNA的描述哪项是错误的?A.原核细胞的mRNA在翻译开始前需加多聚A尾B.在原核细胞的许多mRNA携带着几个多肽链的结构信息C.真核细胞mRNA在5’端携有特殊的"帽子"结构D.真核细胞转录生成的mRNA经常被"加工"E.真核细胞mRNA是由RNA聚合酶II催化合成的52.下列关于RNA分子中"帽子"的叙述哪一项是正确的?A.可使tRNA进行加工过程B.存在于tRNA3’-末端C.是由多聚A组成D.仅存在于真核细胞的mRNA上E.用于校正原核细胞mRNA翻译中的错误53.RNA病毒含有的酶是A.反转录酶B.端粒酶C.末端转移酶D.RNA聚合酶E.DNA连接酶54.RNA的剪接作用A.仅在真核发生B.仅在原核发生C.真核原核均可发生D.仅在rRNA发生E.以上都不是55.酶RNA是在研究哪种RNA的前体中首次发现的AhnRNAB.tRNA前体C.SnRNAD.ScRNAE.rRNA前体56.RNA复制时所需要的原料是A.NMPB.NDPC.dNTPD.NTPE.dNDP57.原核生物经转录作用生成的mRNA是A.内含子B.单顺反子C.多顺反子D.间隔区序列E.插入子58.真核生物经转录作用生成的mRNA是A.内含子B.单顺反子C.多顺反子D.间隔区序列E.插入序列59.真核生物转录生成的mRNA属于A.内含子B.外显子C.多顺反子D.单顺反子nRNP60.原核生物转录生成的mRNA属于A.内含子B.外显子C.多顺反子D.单顺反子nRNP61.某些RNA病毒的复制需要下列何种酶A.核酶B.RNaseⅢC.甲基转移酶D.RNA指导的RNA聚合酶E.核苷酸基转移酶62.四膜虫的rRNA前体具有催化活性又称作A.核酶B.RNaseⅢC.甲基转移酶D.RNA指导的RNA聚合酶E.核苷酸基转移酶63.RNA聚合酶中与利福平结合的亚基是A.原核RNA聚合酶亚基δB.原核RNA聚合酶亚基αC.原核RNA聚合酶亚基βD.原核RNA聚合酶亚基βE.原核RNA聚合酶亚基σ64.下列关于真核细胞核蛋白体的描述中哪一项是错误的?A.由四个不同的rRNA分子及70~80种蛋白质组成B.rRNA约占总量的65%C.核蛋白体分大小亚基,小亚基中有18srRNA,大亚其中有28S、5.8S及5SrRNAE.转录生成的45S前体经加工过程生成三种rRNA65.下列叙述中,哪个是正确的。
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CTCCGAGTCGNNNNNNTGGGCCGCCGG startpoint
上游控制元件(UCE)
核心启动子(core element)
-170
-110
-40
+20
人类RNA Pol I的启动子
(三)RNA Pol I的辅助因子(UBF1 & SL1)
1、上游结合因子(UBF1) (1)可以与UCE结合 (2)可与核心元件的一段序列结合 (3)两个UBF1通过蛋白-蛋白相互作用而相互结
(B’’, TBP, BRF)
TF III B
TF III A TF III C
Pol III
四、RNA 聚合酶 II 基因的转录
(一)RNA聚合酶 II 的启动子 1、组成:
核心启动子(core promoter): TATA盒(Hogness box): - 25 ~ -35bp
上游启动子(upstream promoter element,UPE) CAAT盒 :-70 ~ -80区 GC盒:-80 ~ -110区
TAFIs
Pol I
三、RNA 聚合酶III 基因的转录
(一)tRNA基因的转录 1、启动子----基因内启动子
(1)启动子的两个保守序列: A框(5’-TGGCNNAGTGG-3’); B框(5’-GGTTCGANNCC-3’)
(2)A框和B框编码的序列: A框----D-loop; B框---- T C-loop
-100
-80
-60
GC
CAAT
GCCACACCC GGCCAATC
-40
-20
TA子(core promoter): (1)TATA盒(Hogness box):
a、位置: - 25 ~ -35bp b、序列特征:富含AT,
5’-TATA(A/T)A(A/T)-3’. c、功能:决定RNApol II的定位与转录精确起始
合,导致在两个结合位点间的DNA形成一个环状 结构。
UBF1
UBF1
2、选择因子1(SL1) (1)组成:4个亚基
a、TBP (TATA-binding protein): 是保证RNA pol 准确结合到起始位点的一个 关键因子
b、其他的三个亚基TAF:(TBP 相关因子) 为RNApol I转录所需的亚基称为TAFI
(2)功能:是使RNA 聚合酶正确的定位在起始位 点。
RNA 聚合酶 I 基因转录起始
CTCCGAGTCGNNNNNNTGGGCCGCCGG startpoint
上游控制元件(UCE)
核心启动子(core element)
-170
-110
-40
+1
+20
UBF1
UBF1
TBP
SL1
TAFIs
TBP
真核生物基因的转录
一、真核生物基因转录概述
(一)真核生物的转录和原核生物转录的不同点: 1、原核细胞只有一种RNA聚合酶,而真核细胞 有三种聚合酶; 2、启动子的结构特点不同,真核基因有三种不 同的启动子和有关的元件; 3、真核基因的转录有很多蛋白质因子的介入。
(二)真核生物RNA聚合酶(三种)
附:真核基因在转录时RNA聚合酶需要多种 转录因子的协助
TBP
TAFIs
Pol I
(四)转录因子
1、通用因子(General factor) (1)是所有启动子起始RNA合成所必须 (2)与RNA 聚合酶在起始位点周围形成复合体,
并决定起始的位置。
TBP
TAFIs
Pol I
TF III B (B’’, TBP, BRF)
基因内启动子
二、RNA 聚合酶 I 基因的转录
(一)rRNA基因(Ribosomal RNA Genes ) 多拷贝基因
(二)RNA聚合酶Ⅰ启动子
1、核心启动子(core promoter)或核心元件: 位于-45 ~ +20,负责转录的起始。
2、上游控制元件(upstream control element ): 位于-180 ~ -107,可增加转录起始的效率。
类型
转录产物
对鹅膏蕈碱的反应
Ⅰ rRNA:18s,5.8s,28s
不敏感
Ⅱ hnRNA
高度敏感
Ⅲ tRNA,5srRNA,snRNA 不同物种敏感性不同
(三)真核生物RNA 聚合酶(RNA Pol II)
▪ 由8~14个亚基组成,分子质量为500KDa
250KDa ▪ 与模板结合;与转录起始、延伸有关 130KDa ▪ 与DNA、底物和新生的RNA结合 40KDa 40KDa ▪ 负责酶的装配
2、tRNA基因转录因子
(1)TFⅢC:识别boxB (2)TFⅢB:与A框上游50kb上游序列结合
a、组成: TBP、BRF、B” b、功能:是RNA聚合酶Ⅲ真正的起始因子
3、tRNA基因转录的起始
boxA
boxB
TF III C
TF III B
Pol III
(二)5S rRNA 基因的转录
Pol III
2、上游因子(Upstream factor)
(1)识别并与启动子上游元件结合 (2)与上游元件结合可增加转录起始的效率
上游元件
Startpoint
UBF1
(五)启动子
RNA 聚合酶Ⅰ的启动子:位于转录起点上游 RNA 聚合酶Ⅱ的启动子:位于转录起点上游 RNA 聚合酶III的启动子:位于转录起点下游
1、 5S rRNA 基因: 特点:串连排列,形成基因簇 (是唯一单独被转录的rRNA亚基)
2、启动子: C框 ;A框
3、转录因子:
(1) TFIIIA :结合位点为C box 。 (2) TFIIIC (3) TFIIIB: TBP + BRF + B//
4、5s rRNA 基因转录的起始
boxA boxC
CAAT盒 :-70 ~ -80区( -70区) GC盒:-80 ~ -110区(-90区) (2)功能: 控制转录起始的频率
(基本不参与起始位点的精确定位) (3)功能特点:正反方向排列均能发挥作用
(4)上游元件的多样性
SV40 early
(2)起始子(initiator,Inr) 与转录起始位点重叠的短的较保守序列
附:缺少TATA 盒启动子 (1)无TATA盒,只有一个起始子 (2)既无TATA框,也无起始子,这种基因通常
转录速率很低,起始点不固定。
3、上游启动子(upstream promoter element,UPE) (1)位置: