真核生物RNA聚合酶

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(2)功能:是使RNA 聚合酶正确的定位在起始位 点。
RNA 聚合酶 I 基因转录起始
CTCCGAGTCGNNNNNNTGGGCCGCCGG startpoint
上游控制元件(UCE)
核心启动子(core element)
-170
-110
-40
+1
+20
UBF1
UBF1
TBP
SL1
TAFIs
TBP
Pol III
2、上游因子(Upstream factor)
(1)识别并与启动子上游元件结合 (2)与上游元件结合可增加转录起始的效率
上游元件
Startpoint
UBF1
(五)启动子
RNA 聚合酶Ⅰ的启动子:位于转录起点上游 RNA 聚合酶Ⅱ的启动子:位于转录起点上游 RNA 聚合酶III的启动子:位于转录起点下游
TAFIs
Pol I
三、RNA 聚合酶III 基因的转录
(一)tRNA基因的转录 1、启动子----基因内启动子
(1)启动子的两个保守序列: A框(5’-TGGCNNAGTGG-3’); B框(5’-GGTTCGANNCC-3’)
(2)A框和B框编码的序列: A框----D-loop; B框---- T C-loop
CTCCGAGTCGNNNNNNTGGGCCGCCGG startpoint
上游控制元件(UCE)
核心启动子(core element)
-170
-110
-40
+20
人类RNA Pol I的启动子
(三)RNA Pol I的辅助因子(UBF1 & SL1)
1、上游结合因子(UBF1) (1)可以与UCE结合 (2)可与核心元件的一段序列结合 (3)两个UBF1通过蛋白-蛋白相互作用而相互结
合,导致在两个结合位点间的DNA形成一个环状 结构。
UBF1
UBF1
2、选择因子1(SL1) (1)组成:4个亚基
a、TBP (TATA-binding protein): 是保证RNA pol 准确结合到起始位点的一个 关键因子
b、其他的三个亚基TAF:(TBP 相关因子) 为RNApol I转录所需的亚基称为TAFI
(2)起始子(initiator,Inr) 与转录起始位点重叠的短的较保守序列
附:缺少TATA 盒启动子 (1)无TATA盒,只有一个起始子 (2)既无TATA框,也无起始子,这种基因通常
转录速率很低,起始点不固定。
3、上游启动子(upstream promoter element,UPE) (1)位置:
真核生物基因的转录
一、真核生物基因转录概述
(一)真核生物的转录和原核生物转录的不同点: 1、原核细胞只有一种RNA聚合酶,而真核细胞 有三种聚合酶; 2、启动子的结构特点不同,真核基因有三种不 同的启动子和有关的元件; 3、真核基因的转录有很多蛋白质因子的介入。
(二)真核生物RNA聚合酶(三种)
(B’’, TBP, BRF)
TF III B
TF III A TF III C
Pol III
四、RNA 聚合酶 II 基因的转录
(一)RNA聚合酶 II 的启动子 1、组成:
核心启动子(core promoter): TATA盒(Hogness box): - 25 ~ -35bp
上游启动子(upstream promoter element,UPE) CAAT盒 :-70 ~ -80区 GC盒:-80 ~ -110区
基因内启动子
二、RNA 聚合酶 I 基因的转录
(一)rRNA基因(Ribosomal RNA Genes ) 多拷贝基因
(二)RNA聚合酶Ⅰ启动子
1、核心启动子(core promoter)或核心元件: 位于-45 ~ +20,负责转录的起始。
2、上游控制元件(upstream control element ): 位于-180 ~ -107,可增加转录起始的效率。
1、 5S rRNA 基因: 特点:串连排列,形成基因簇 (是唯一单独被转录的rRNA亚基)
2、启动子: C框 ;A框
3、转录因子:
(1) TFIIIA :结合位点为C box 。 (2) TFIIIC (3) TFIIIB: TBP + BRF + B//
4、5s rRNA 基因转录的起始
boxA boxC
附:真核基因在转录时RNA聚合酶需要多种 转录因子的协助
TBP
TAFIs
Pol I
(四)转录因子
1、通用因子(General factor) (1)是所有启动子起始RNA合成所必须 (2)与RNA 聚合酶在起始位点周围形成复合体,
并决定起始的位置。
TBP
TAFIs
Pol I
TF III B (B’’, TBP, BRF)
源自文库类型
转录产物
对鹅膏蕈碱的反应
Ⅰ rRNA:18s,5.8s,28s
不敏感
Ⅱ hnRNA
高度敏感
Ⅲ tRNA,5srRNA,snRNA 不同物种敏感性不同
(三)真核生物RNA 聚合酶(RNA Pol II)
▪ 由8~14个亚基组成,分子质量为500KDa
250KDa ▪ 与模板结合;与转录起始、延伸有关 130KDa ▪ 与DNA、底物和新生的RNA结合 40KDa 40KDa ▪ 负责酶的装配
CAAT盒 :-70 ~ -80区( -70区) GC盒:-80 ~ -110区(-90区) (2)功能: 控制转录起始的频率
(基本不参与起始位点的精确定位) (3)功能特点:正反方向排列均能发挥作用
(4)上游元件的多样性
SV40 early
2、tRNA基因转录因子
(1)TFⅢC:识别boxB (2)TFⅢB:与A框上游50kb上游序列结合
a、组成: TBP、BRF、B” b、功能:是RNA聚合酶Ⅲ真正的起始因子
3、tRNA基因转录的起始
boxA
boxB
TF III C
TF III B
Pol III
(二)5S rRNA 基因的转录
-100
-80
-60
GC
CAAT
GCCACACCC GGCCAATC
-40
-20
TATA
ATATAA
2、核心启动子(core promoter): (1)TATA盒(Hogness box):
a、位置: - 25 ~ -35bp b、序列特征:富含AT,
5’-TATA(A/T)A(A/T)-3’. c、功能:决定RNApol II的定位与转录精确起始
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