实验一薄层色谱和纸色谱课件
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实验一薄层色谱和纸色谱
实验目的
1. 学习色谱法的原理 2. 掌握使用薄层色谱和纸色谱对化合物进 行分离和鉴定
色谱法的一般原理
利用混合物各组分在固定相和流动相中的分配平衡常数 的差异进行分离。当带有样品的流动相流经固定相时， 由于固定相对各组分的吸附或溶解性能的不同，使吸附
力较弱获溶解度较小的组分在固定相中移动速度较快，
5、要求在原始记录中画出板的真实展开情况并计算Rf值
TLC是有机化学实验室中使用的非常多实验操作，常常
用来检测反应和柱色谱前药品： 偶氮苯，苏丹红，混合物（自配），环己烷/乙酸乙酯 9:1
仪器： TLC板，毛细管，广口瓶，铅笔
1. 准备TLC板
0.5cm
0.5 cm
2. 展开
展开剂：环己烷/乙酸乙酯 9:1
经过多次反复平衡，将混合物中各组分分离。
薄层色谱
薄层色谱：薄层色谱（Thin Layer Chromatography），
常用TLC表示，是一种微量，快速和简便的色谱方法。
一般是将固定相，如硅胶和三氧化铝，负载在一张薄层 板上，将样品置于固定相之后，流动相通过毛细管效应 从下往上流动而使样品分开。
的影响，产生分配现象，亲脂性强的流动相中分配的多，
移动速度快。
纸色谱实验药品和仪器
药品：
甘氨酸，亮氨酸，混合物（自配），展开剂（水/正丁
醇/醋酸 5:4:1，取上层液体）
仪器： 滤纸，大试管，带钩塞子，铅笔
实验操作类似于TLC
两张色谱滤纸，分别点上甘氨酸， 混合物，以及亮氨酸，混合物 使用茚三酮乙醇溶液进行显色 通过比较Rf值确定混合物中各 组分。
3. 干燥、显色
自身有颜色 有共轭体系的使用紫外灯 各种显色剂
4. 计算Rf值
1. 学习色谱法的原理 2. 掌握使用薄层色谱和纸色谱对化合物进 行分离和鉴定
色谱法的一般原理
利用混合物各组分在固定相和流动相中的分配平衡常数 的差异进行分离。当带有样品的流动相流经固定相时， 由于固定相对各组分的吸附或溶解性能的不同，使吸附
力较弱获溶解度较小的组分在固定相中移动速度较快，
5、要求在原始记录中画出板的真实展开情况并计算Rf值
TLC是有机化学实验室中使用的非常多实验操作，常常
用来检测反应和柱色谱前药品： 偶氮苯，苏丹红，混合物（自配），环己烷/乙酸乙酯 9:1
仪器： TLC板，毛细管，广口瓶，铅笔
1. 准备TLC板
0.5cm
0.5 cm
2. 展开
展开剂：环己烷/乙酸乙酯 9:1
经过多次反复平衡，将混合物中各组分分离。
薄层色谱
薄层色谱：薄层色谱（Thin Layer Chromatography），
常用TLC表示，是一种微量，快速和简便的色谱方法。
一般是将固定相，如硅胶和三氧化铝，负载在一张薄层 板上，将样品置于固定相之后，流动相通过毛细管效应 从下往上流动而使样品分开。
的影响，产生分配现象，亲脂性强的流动相中分配的多，
移动速度快。
纸色谱实验药品和仪器
药品：
甘氨酸，亮氨酸，混合物（自配），展开剂（水/正丁
醇/醋酸 5:4:1，取上层液体）
仪器： 滤纸，大试管，带钩塞子，铅笔
实验操作类似于TLC
两张色谱滤纸，分别点上甘氨酸， 混合物，以及亮氨酸，混合物 使用茚三酮乙醇溶液进行显色 通过比较Rf值确定混合物中各 组分。
3. 干燥、显色
自身有颜色 有共轭体系的使用紫外灯 各种显色剂
4. 计算Rf值
经典色谱法分析技术—薄层色谱法(分析化学课件)
小
极性
大
薄层色谱固定相和流动相选择
2. 流动相展开剂的选择要求
薄层色谱分离中一般要求各斑点的Rf值在0.2～0.8之间，Rf值之 间应相差0.05以上.
3. 流动相展开剂的选择方法
如果单一展开剂分离效果不好，可用两种或两种以上的单一溶剂按 照一定比例混合而成的溶剂展开,可以达到较好的分离效果.
薄层色谱固定相和流动相选择 被测组分、吸附剂和展开剂的选择原则
常用溶剂的极性顺序为：
常用吸附剂的极性顺序为：
增
增
大
大
薄层色谱固定相和流动相选择
多糖、蛋白质等大分子、生物碱盐
极 性
苷类（皂苷、黄酮苷、蒽醌苷）
渐 黄酮、蒽醌等苷元、有机酸
小
香豆素、萜类、挥发油等亲脂性成分
烷烃＜烯烃
＜二甲胺＜酯类＜酮
＜醚＜硝基化合物
类＜醛类＜硫醇＜胺 类
＜酰胺类＜醇 类＜酚类＜羧 酸类
分离原理
吸附薄层色谱分离原理
展开（分离）
分离过程：
制板→点样→展开→显色→定性定量分析
固定相--吸附剂
薄层色谱的固定相所用的吸附剂
流动相---展开剂
薄板的底端浸入到适当的流动相溶剂
吸附薄层色谱分离原理
薄 层 色 谱
点样
展开剂
吸附薄层色谱分离原理
分离原理：
展开剂在毛细管的 浸润作用下，带着 各组分沿着薄板向
薄层色谱固定相和流动相的选择
薄层色谱固定相和流动相选择
一、固定相（吸附剂）的选择
1. 选择原则 根据被分离组分的极性选择吸附剂：
被分离组分的极性强——弱极性吸附剂； 被分离组分的极性弱——强极性吸附剂；
薄层色谱固定相和流动相选择
实验1-薄层色谱和纸色谱
薄层色谱
薄层色谱：薄层色谱 (Thin Layer Chromatography)，常用 TLC 表
示，是一种微量，快速和简便的色谱方法。一般是将固定相，如硅
胶和三氧化铝，负载在一张薄层板上，将样品置于固定相之后，流 动相通过毛细管效应从下往上流动而使样品分开。
TLC 是有机化学实验室中使用的非常多实验操作，常常用来检测 反应和柱色谱前判断使用展开剂的极性。
干板 薄层板 平铺法—简易平铺法
湿板
浸渍法 (1) 二块 15×3cm 玻片，洗净，控水 (2) 调糊：3g硅胶G和8mL0.5%羧甲基纤维素钠水溶液在小烧杯中搅匀 (3) 用小勺取适量于玻片上粗铺平，手指轻弹玻片，反复数次，使糊
状物均匀地铺在玻片上于室温下晾干，每人铺二块
(4) 活化：将晾干的薄层板放在烘箱中，待烘箱温度升至 105-110oC，
计时30分钟
Rf = D1/D2
5. 分析结果
通过比较 Rf 值，确定混合物中各组分分别是什么物质
纸色谱
(Paper Chromatography) ：纸色谱法是以纸作为载体的色谱法。按分
离原理属于分配色谱法的范畴。固定相一般为滤纸纤维上吸附的水 分，流动相 (展开剂) 为有机溶剂。
纸色谱实验药品和仪器
药品：
基础有机化学实验
实验一 纸色谱和薄层色谱
杨俊
致知楼 #1574/1531 Email:junyang@
实验目的
1.学习色谱法的原理 2.掌握薄层色谱和纸色谱分离和鉴定化合物操作
色谱法的一般原理
利用混合物各组分在固定相和流动相中的分配平衡常数的 差异进行分离。当带有样品的流动相流经固定相时，由于固 定相对各组分的吸附或溶解性能的不同，使吸附力较弱获溶 解度较小的组分在固定相中移动速度较快，经过多次反复平 衡，将混合物中各组分分离。 按操作分：薄层色谱、柱色谱、纸色谱、气相色谱和高效液相色谱 按原理分：吸附色谱、分配色谱、离子交换色谱和凝胶渗透色谱
色谱法薄层色谱和纸色谱
薄层色谱法
将固定相涂布在玻璃板或塑料 板上形成薄层，然后用合适的 溶剂展开，实现组分的分离和
分析。
纸色谱法
将固定相吸附在滤纸上，然后 用合适的溶剂展开，实现组分 的分离和分析。
气相色谱法
适用于气体和挥发性液体的分 析，通过气体流动相将样品带 入色谱柱进行分离。
高效液相色谱法
一种高效、高分辨率的色谱方 法，广泛应用于化学、生物和
相之间的分配系数不同，因此会以不同
的速度在薄层板上移动，从而实现分离。
薄层色谱法的操作步骤
点样
将待分离的样品溶液点在薄层 板的起点处。
显色
在紫外灯下观察各组分的斑点， 或者用显色剂进行染色。
制备薄层板
将固定相涂布在玻璃板、塑料 板或铝箔上，形成一层均匀的 薄层。
展开
将薄层板放入展开槽中，用适 当的流动相展开。
色谱法薄层色谱和纸色谱
目 录
• 色谱法简介 • 薄层色谱法 • 纸色谱法 • 色谱法薄层色谱和纸色谱的比较 • 色谱法薄层色谱和纸色谱的发展趋势
01 色谱法简介
定义与原理
定义
色谱法是一种分离和分析复杂混 合物中各组分的方法，通过不同 物质在固定相和流动相之间的分 配平衡实现分离。
原理
利用不同物质在两相之间的吸附 、溶解等分配平衡的差异，使不 同物质在色谱柱上移动速度不同 ，从而实现各组分的分离。
薄层色谱法的分离效率高于纸色谱法。薄层色谱法使用涂布在玻璃板或塑料板 上的固定相，能够快速、有效地分离复杂的混合物，而纸色谱法则需要较长的 时间进行分离。
分辨率
薄层色谱法的分辨率也更高，能够更好地分离出组分相近的物质，而纸色谱法 的分辨率相对较低。
操作难度的比较
操作简便性
将固定相涂布在玻璃板或塑料 板上形成薄层，然后用合适的 溶剂展开，实现组分的分离和
分析。
纸色谱法
将固定相吸附在滤纸上，然后 用合适的溶剂展开，实现组分 的分离和分析。
气相色谱法
适用于气体和挥发性液体的分 析，通过气体流动相将样品带 入色谱柱进行分离。
高效液相色谱法
一种高效、高分辨率的色谱方 法，广泛应用于化学、生物和
相之间的分配系数不同，因此会以不同
的速度在薄层板上移动，从而实现分离。
薄层色谱法的操作步骤
点样
将待分离的样品溶液点在薄层 板的起点处。
显色
在紫外灯下观察各组分的斑点， 或者用显色剂进行染色。
制备薄层板
将固定相涂布在玻璃板、塑料 板或铝箔上，形成一层均匀的 薄层。
展开
将薄层板放入展开槽中，用适 当的流动相展开。
色谱法薄层色谱和纸色谱
目 录
• 色谱法简介 • 薄层色谱法 • 纸色谱法 • 色谱法薄层色谱和纸色谱的比较 • 色谱法薄层色谱和纸色谱的发展趋势
01 色谱法简介
定义与原理
定义
色谱法是一种分离和分析复杂混 合物中各组分的方法，通过不同 物质在固定相和流动相之间的分 配平衡实现分离。
原理
利用不同物质在两相之间的吸附 、溶解等分配平衡的差异，使不 同物质在色谱柱上移动速度不同 ，从而实现各组分的分离。
薄层色谱法的分离效率高于纸色谱法。薄层色谱法使用涂布在玻璃板或塑料板 上的固定相，能够快速、有效地分离复杂的混合物，而纸色谱法则需要较长的 时间进行分离。
分辨率
薄层色谱法的分辨率也更高，能够更好地分离出组分相近的物质，而纸色谱法 的分辨率相对较低。
操作难度的比较
操作简便性
实验一薄层色谱和纸色谱课件
5、要求在原始记录中画出板的真实展开情况并计算Rf值
人有了知识，就会具备各种分析能力， 明辨是非的能力。 所以我们要勤恳读书，广泛阅读， 古人说“书中自有黄金屋。 ”通过阅读科技书籍，我们能丰富知识， 培养逻辑思维能力； 通过阅读文学作品，我们能提高文学鉴赏水平， 培养文学情趣； 通过阅读报刊，我们能增长见识，扩大自己的知识面。 有许多书籍还能培养我们的道德情操， 给我们巨大的精神力量， 鼓舞我们前进。
移动速度快。
纸色谱实验药品和仪器
药品：
甘氨酸，亮氨酸，混合物（自配），展开剂（水/正丁
醇/醋酸 5:4:1，取上层液体）
仪器： 滤纸，大试管，带钩塞子，铅笔
实验操作类似于TLC
两张色谱滤纸，分别点上甘氨酸， 混合物，以及亮氨酸，混合物 使用茚三酮乙醇溶液进行显色 通过比较Rf值确定混合物中各 组分。
滤纸大试管带钩塞子铅笔实验操作类似于tlc?两张色谱滤纸分别点上甘氨酸混合物以及亮氨酸混合物色谱滤纸分别点上甘氨酸混合物以及亮氨酸混合物展开装置图?使用茚三酮乙醇溶液进行显色?通过比较rf值确定混合物中各组分
实验目的
1. 学习色谱法的原理 2. 掌握使用薄层色谱和纸色谱对化合物进 行分离和鉴定
色谱法的一般原理
仪器： TLC板，毛细管，广口瓶，铅笔
1. 准备TLC板
0.5cm
0.5 cm
2. 展开
展开剂：环己烷/乙酸乙酯 9:1
3. 干燥、显色
自身有颜色 有共轭体系的使用紫外灯 各种显色剂
4. 计算Rf值
Rf = D1/D2
5. 分析结果
通过比较Rf值，确定混合物中各组分分别是什么物质
展开装置图
注意事项
1、制板和活化：铺板厚度0.25-1mm且均匀；晾干；一块
人有了知识，就会具备各种分析能力， 明辨是非的能力。 所以我们要勤恳读书，广泛阅读， 古人说“书中自有黄金屋。 ”通过阅读科技书籍，我们能丰富知识， 培养逻辑思维能力； 通过阅读文学作品，我们能提高文学鉴赏水平， 培养文学情趣； 通过阅读报刊，我们能增长见识，扩大自己的知识面。 有许多书籍还能培养我们的道德情操， 给我们巨大的精神力量， 鼓舞我们前进。
移动速度快。
纸色谱实验药品和仪器
药品：
甘氨酸，亮氨酸，混合物（自配），展开剂（水/正丁
醇/醋酸 5:4:1，取上层液体）
仪器： 滤纸，大试管，带钩塞子，铅笔
实验操作类似于TLC
两张色谱滤纸，分别点上甘氨酸， 混合物，以及亮氨酸，混合物 使用茚三酮乙醇溶液进行显色 通过比较Rf值确定混合物中各 组分。
滤纸大试管带钩塞子铅笔实验操作类似于tlc?两张色谱滤纸分别点上甘氨酸混合物以及亮氨酸混合物色谱滤纸分别点上甘氨酸混合物以及亮氨酸混合物展开装置图?使用茚三酮乙醇溶液进行显色?通过比较rf值确定混合物中各组分
实验目的
1. 学习色谱法的原理 2. 掌握使用薄层色谱和纸色谱对化合物进 行分离和鉴定
色谱法的一般原理
仪器： TLC板，毛细管，广口瓶，铅笔
1. 准备TLC板
0.5cm
0.5 cm
2. 展开
展开剂：环己烷/乙酸乙酯 9:1
3. 干燥、显色
自身有颜色 有共轭体系的使用紫外灯 各种显色剂
4. 计算Rf值
Rf = D1/D2
5. 分析结果
通过比较Rf值，确定混合物中各组分分别是什么物质
展开装置图
注意事项
1、制板和活化：铺板厚度0.25-1mm且均匀；晾干；一块
实验一 薄层色谱法
实验一薄层色谱法（TLC）一、实验目的掌握薄层色谱法的基本原理，进而掌握色谱分离、纯化、定性、定量的理论基础，掌握TLC在农药残留分离中的定性应用二、实验原理1、TLC分离原理残留农药中各组分本身分子结构不同，极性、溶解度大小也不同，各组分对吸附剂的吸附能力也就不同。
当展开剂流经吸附剂时，各组分会发生无数次的吸附—解吸附的过程，吸附力弱的组分随流动相迅速向前，而吸附力强的组分则滞后，由于各组分之间的迁移速度不同而实现分离。
组分被分离后在TLC上的位置，常用比移值R f表示。
R f=原点至被测组分斑点中心的距离原点至溶剂前沿的距离2、TLC显色方法（1）紫外显色（2）显色剂（参考文献）➢通用型显色剂：碘熏、高锰酸钾、重铬酸钾、磷钼酸等➢专属型显色剂：硝酸银、氯化铁、香草醛等三、实验试剂、材料薄层层析板（硅胶）、层析缸、点样毛细管、紫外分析仪、碘熏缸（自制碘熏）、乙酸乙酯、石油醚四、实验步骤1、取一薄层层析板，在距离上、下边缘0.5 cm处，用铅笔各画一水平直线，然后在下方直线上等距离标记三个点，作为原点。
（注意：标记点不要紧靠薄层板两侧，以防止产生边缘效应。
）2、用点样毛细管在标记的原点处，依次点入测试样品A、AB、B。
然后，紫外灯照射，观察各样品斑点的初始形态特征，并记录1。
（注意：毛细管不可混用；垂直点样，不可戳破硅胶薄层；点样斑点直径尽可能小，斑点之间不可交叉。
）3、层析缸中倒入一定体积的溶剂A，然后将点好样品的薄层板放入，待溶剂前端展开到薄层板上方直线以后，取出。
待溶剂挥发完全后，紫外灯照射，观察各样品斑点在薄层板上的迁移情况，并记录2。
（注意：层析缸中溶剂不可加入过多，溶剂面不可高于薄层板下方所画直线，以防止点样样品解吸附到溶剂中。
）4、将上述层析缸中的溶剂A更换为溶剂B，然后将溶剂已经挥发完全的薄层层析板放入，按照上述方法，待溶剂前端展开至薄层板上方直线后，取出。
紫外灯照射，观察各样品斑点迁移情况，并记录3。
第十一章薄层色谱法
（一）概述
１.概念
固定相被涂布在玻璃板上，形成
薄薄的平面涂层。干燥后在涂层的一
端点样，用合适的流动相借毛细作用
向上移动，经过在两相之间的多次吸
附-溶解作用，将混合物中各组分分离
成孤立的样点。
一、薄层色谱法（TLC)
2. 特点
（1）设备简单，操作方便。 （2）分析原理与经典柱上色谱相同、但是在敞开
5、定性定量：
பைடு நூலகம்
Rf值
目视比较法
标 准
洗脱法
品
薄层扫描
溶剂前沿
bc a
起始线
薄层扫描
W
λR
D
λS
双波长薄层扫描
PMR PMT
一、薄层色谱法（TLC)
薄层色谱应用特点：
⑴可用于判断两个化合物是否相同（同一展开条件下是否 有相同的移动值）；
⑵可用于确定混合物中含有的组分数；
⑶可用于为柱色谱选择合适的展开剂，监视柱色谱分离状 况和效果；
⑷可用于检测反应过程。
薄层色谱法在各个学科中的应用
⑴食品和营养
食品中的营养成分是蛋白质、氨基酸、糖类、油和脂肪、 维生素、食用色素等。与食品和营养有害的物质则有残留 农药、致癌的黄曲霉素等。这些成分都可用薄层色谱法定 性和定量。
⑵药物和药物代谢 ⑶化学和化工
⑷医学和临床 ⑸毒物分析和法医化学 ⑹农药
第十一章 色谱分析法概述 第四节 平面色谱法
第四节 平面色谱法
薄层色谱( TLC) (thin layer chromatography. TLC
纸色谱 (PC) (paper chromatography. PC)
一、薄层色谱法
（thin layer chromatography; TLC)
纸色谱 PPT
常用的展开剂 水饱和的有机溶剂，如水
饱和的正丁醇、正戊醇、酚等
操作步骤 点样、展开、显色、定性定量
分析
主要内容：
比移值及其与K和k的关系、相对比 移值
吸附薄层色谱法：原理，吸附剂、 展开剂及其选择
薄层色谱定性方法 纸色谱法：原理和实验条件
特点：
快，需十至几十分钟，同时展开多个 试样。
试样预处理简单，对试样限制少。 载样量比较大，适用于制备。 仪器简单，操作方便。 分离能力较强。 灵敏度较高。
一、薄层色谱法的主要类型和原理
吸附薄层色谱法
原理：组分在薄层板上吸附、解吸附、 再吸附、再解吸附的过程。
吸附系数不等实现分离。 一般极性强的组分K大，Rf值小；极性弱 的组分 K小，Rf值大。
碱性氧化铝(pH9.0)——分离中性或碱性化合 物，如生物碱、脂溶性维生素等；
中性氧化铝(pH7.5)——分离酸性及对碱不稳 定的化合物；
酸性氧化铝(pH4.0)——酸性化合物的分离。 活度也与含水量有关。
展开剂(流动相)
同吸附柱色谱 极性强的溶剂洗脱能力强 常用溶剂的极性强弱顺序：
水＞酸＞吡啶＞甲醇＞乙醇＞正 丙醇＞丙酮＞乙酸乙酯＞乙醚＞氯仿 ＞二氯甲烷＞甲苯＞苯＞三氯乙烷＞ 四氯化碳>环己烷>石油醚。
二、吸附薄层色谱的吸附剂和展开剂
吸附剂
硅胶：多孔性微粒，表面带有硅醇基， 呈弱酸性。 原理：硅醇基(吸附中心)与极性基 团形成氢键（吸附性）。 组分与硅醇基形成氢键（被吸附） 的能力不同而分离。 应用：酸性和中性物质的分离，如 有机酸酚类、醛类等
硅胶
活度与含水量的关系：含水量高，活性级高， 活度低。
1.目视比较法（如杂质限度检查方法） 2.薄层扫描法
饱和的正丁醇、正戊醇、酚等
操作步骤 点样、展开、显色、定性定量
分析
主要内容：
比移值及其与K和k的关系、相对比 移值
吸附薄层色谱法：原理，吸附剂、 展开剂及其选择
薄层色谱定性方法 纸色谱法：原理和实验条件
特点：
快，需十至几十分钟，同时展开多个 试样。
试样预处理简单，对试样限制少。 载样量比较大，适用于制备。 仪器简单，操作方便。 分离能力较强。 灵敏度较高。
一、薄层色谱法的主要类型和原理
吸附薄层色谱法
原理：组分在薄层板上吸附、解吸附、 再吸附、再解吸附的过程。
吸附系数不等实现分离。 一般极性强的组分K大，Rf值小；极性弱 的组分 K小，Rf值大。
碱性氧化铝(pH9.0)——分离中性或碱性化合 物，如生物碱、脂溶性维生素等；
中性氧化铝(pH7.5)——分离酸性及对碱不稳 定的化合物；
酸性氧化铝(pH4.0)——酸性化合物的分离。 活度也与含水量有关。
展开剂(流动相)
同吸附柱色谱 极性强的溶剂洗脱能力强 常用溶剂的极性强弱顺序：
水＞酸＞吡啶＞甲醇＞乙醇＞正 丙醇＞丙酮＞乙酸乙酯＞乙醚＞氯仿 ＞二氯甲烷＞甲苯＞苯＞三氯乙烷＞ 四氯化碳>环己烷>石油醚。
二、吸附薄层色谱的吸附剂和展开剂
吸附剂
硅胶：多孔性微粒，表面带有硅醇基， 呈弱酸性。 原理：硅醇基(吸附中心)与极性基 团形成氢键（吸附性）。 组分与硅醇基形成氢键（被吸附） 的能力不同而分离。 应用：酸性和中性物质的分离，如 有机酸酚类、醛类等
硅胶
活度与含水量的关系：含水量高，活性级高， 活度低。
1.目视比较法（如杂质限度检查方法） 2.薄层扫描法
分析化学 薄层色谱和纸层色谱
薄层色谱和纸层色谱 简介
h
1
薄层色谱（Thin Layer Chromatography， TLC）又叫薄层层析，是色谱法的一种。 色谱法是分离提纯和鉴定有机化合物的重 要方法，在有机化学、生物化学和医学领 域中已经得到广泛的应用。
薄层色谱是一种微量（几毫克到几十毫 克）、快速、简单、准确的定性分析分离 方法。可以到应用在精制样品、化合物鉴 定、跟踪反映进程和柱色谱摸索最佳条件 等方面。
h
2
薄层色谱是一个微量分析的分离过程，它将样品 点在以玻载片或铝、塑料等片材为载体的多孔吸 附剂薄层的固定相上，固定相必须经干燥、活化。 用是适当极性的有机溶剂作为展开剂在展开室中 展开。当展开剂在吸附剂上展开时，由于样品中 各组分的吸附能力不同，发生无数次吸附和解吸 的过程，吸附能力弱的组分随流动相迅速向前移 动，吸附能力强的组分移动较慢。利用各组分在 展开剂中的溶解能力和被吸附能力的不同，最终 将各组分彼此分开，薄层板上将出现各种有色斑 点（若本身无色则还需加显色剂显色以确定斑点 位置。）许多组分可以在日光或紫外灯光下检视。 色谱可以用肉眼或使用光密度计和照相机或影像 系统来评价。
1.薄层板的制备与活化 2.点样 3.展开 4.计算Rf
h
5
Байду номын сангаас h
6
h
3
比移值：在薄板上混合物的各个组分上升
的高度与展开剂上升的前沿之比称为该化 合物的Rf值，又称比移值
比移值Rf在一定条件下和溶剂的分子结构、 性能有关，不同的溶质在层析过程中的比
移值不同。对同一溶质在相同条件下进行
层析时，比移值是一个特有的常数，这是 比移值可以作为定性分析的依据。
h
4
实验步骤与注意事项
h
1
薄层色谱（Thin Layer Chromatography， TLC）又叫薄层层析，是色谱法的一种。 色谱法是分离提纯和鉴定有机化合物的重 要方法，在有机化学、生物化学和医学领 域中已经得到广泛的应用。
薄层色谱是一种微量（几毫克到几十毫 克）、快速、简单、准确的定性分析分离 方法。可以到应用在精制样品、化合物鉴 定、跟踪反映进程和柱色谱摸索最佳条件 等方面。
h
2
薄层色谱是一个微量分析的分离过程，它将样品 点在以玻载片或铝、塑料等片材为载体的多孔吸 附剂薄层的固定相上，固定相必须经干燥、活化。 用是适当极性的有机溶剂作为展开剂在展开室中 展开。当展开剂在吸附剂上展开时，由于样品中 各组分的吸附能力不同，发生无数次吸附和解吸 的过程，吸附能力弱的组分随流动相迅速向前移 动，吸附能力强的组分移动较慢。利用各组分在 展开剂中的溶解能力和被吸附能力的不同，最终 将各组分彼此分开，薄层板上将出现各种有色斑 点（若本身无色则还需加显色剂显色以确定斑点 位置。）许多组分可以在日光或紫外灯光下检视。 色谱可以用肉眼或使用光密度计和照相机或影像 系统来评价。
1.薄层板的制备与活化 2.点样 3.展开 4.计算Rf
h
5
Байду номын сангаас h
6
h
3
比移值：在薄板上混合物的各个组分上升
的高度与展开剂上升的前沿之比称为该化 合物的Rf值，又称比移值
比移值Rf在一定条件下和溶剂的分子结构、 性能有关，不同的溶质在层析过程中的比
移值不同。对同一溶质在相同条件下进行
层析时，比移值是一个特有的常数，这是 比移值可以作为定性分析的依据。
h
4
实验步骤与注意事项
色谱法薄层色谱和纸色谱
原理
色谱过程的本质是待分离物质分子在固定相和流 动相之间分配平衡的过程，不同的物质在两相之间的 分配会不同， 这使其随流动相运动速度各不相同，随着 流动相的运动，混合物中的不同组分在固定相上相 互 分离。根据物质的分离机制，又可以分为吸附色谱、分 配色谱、离子交 换色谱、凝胶色谱、亲和色谱等类别。
薄层色谱
薄层色谱法是应用非常广泛的色谱方法，这 种色谱方法将固定相图布在金属或玻璃薄板上形 成薄层，用毛细管、钢笔或者 其他工具将样品点 染于薄板一端，之后将点样端浸入流动相中，依 靠毛细作用令流动相溶剂沿薄板上行展开样品。 薄层色谱法成本低廉操作简单，被用于对样品的 粗 测、对有机合成反应进程的检测等用途。
色高斯噪声中信号的检测
• 卡亨南－洛维（Karhunen-Loove)展开
– 正交函数和卡亨南－洛维展开:
色高斯噪声中信号的检测
• 平稳色高斯噪声干扰下的确知信号检测
– 问题和假设:
色高斯噪声中信号的检测
• 平稳色高斯噪声干扰下的确知信号检测
– 最优检测器与判决规则:
按分离原理
按色谱法分离所依据的物理或物理化学性质的不同，又可将其分为： ·吸附色谱法( adsorption chromatography ) 利用吸附剂表面对不同组分物理吸附性能的差别而使之分离的色谱法称为吸附色谱法。 ·分配色谱法( partition chromatography ) 利用固定液对不同组分分配性能的差别而使之分离的色谱法称为分配色谱法。 ·离子交换色谱法 ·尺寸排阻色谱法 ·亲和色谱法
气相色谱法 ·气固色谱法 ·气液色谱法 液相色谱法
·液固色谱法 ·液液色谱法
按固定相的几何形式
·柱色谱法 柱色谱法是将固定相装在一金属或玻璃柱中或是 将固定相附着在毛细管内壁上做成色谱柱，试样从柱 头到柱尾沿一个方向移动而进行分离的色谱法。 ·纸色谱法 纸色谱法是利用滤纸作固定液的载体，把试样点 在滤纸上，然后用溶剂展开，各组分在滤纸的不同位 置以斑点形式显现，根据滤纸上斑点位置及大小进行 定性和定量分析。 ·薄层色谱法 薄层色谱法是将适当粒度的吸附剂作为固定相涂 布在平板上形成薄层，然后用与纸色谱法类似的方法 操作以达到分离目的。
薄层色谱鉴别介绍ppt课件
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E 温度的影响
温度影响物质的分配系数KD，同时也影 响纤维的水合作用，改变固定相的量。
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F 展距的影响
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❖ 薄层色谱法---跑板
❖ 点样
❖ 用微量进样器进行点样。点样前，先用铅笔在层 析上距末端2cm 处轻轻画一横线，然后用毛细管 吸取样液在横线上轻轻点样，点的斑点较小，展 开的色谱图分离度好，颜色分明。如果要重新点 样，一定要等前一次点样残余的溶剂挥发后再点 样（用电吹风的热风吹干再点），以免点样斑点 过大。一般斑点直径大于2mm，不宜超过5mm。 点好样的薄层板用电吹风的热风吹干。底线距基 线1～2．5cm，点间距离为lcm左右，样点与玻 璃边缘距离至少lcm，为防止边缘效应，
却后使用。
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固定相（吸附剂）的选择
纤维素、淀粉
硅酸镁
硫酸钙
硅胶 佛罗里硅土 氧化镁 氧化铝
对极性有机物的吸附作用增强
活性最炭新课件
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❖2 供试品的制备：按照各药品质量标准规
定的方法进行提取分离。制得的供试品应放 置于密塞的小瓶中，防止溶剂挥发影响点样 量。
3 对照品溶液的制备：可按质量标准规定
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B 溶剂系统的影响
溶剂系统不同，组分的分配系数不同， 故Rf值不同。
在平面电泳中，溶液的离子强度增大， 组分的泳动速度减小。
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5、要求在原始记录中画出板的真实展开情况并计算Rf值
人有了知识，就会具备各种分析能力， 明辨是非的能力。 所以我们要勤恳读书，广泛阅读， 古人说“书中自有黄金屋。 ”通过阅读科技书籍，我们能丰富知识， 培养逻辑思维能力； 通过阅读文学作品，我们能提高文学鉴赏水平， 培养文学情趣； 通过阅读报刊，我们能增长见识，扩大自己的知识面。 有许多书籍还能培养我们的道德情操， 给我们巨大的精神力量， 鼓舞我们前进。
TLC是有机化学实验室中使用的非常多实验操作，常常
用来检测反应和柱色谱前判断使用展开剂的极性。
薄层色谱实验药品和仪器
药品： 偶氮苯，苏丹红，混合物（自配），环己烷/乙酸乙酯 9:1
仪器： TLC板，毛细管，广口瓶，铅笔
1. 准备TLC板
0.5cm
0.5 cm
2. 展开
展开剂：环己烷/乙酸乙酯 9:1
实验目的
1. 学习色谱法的原理 2. 掌握使用薄层色谱和纸色谱对化合物进 行分离和鉴定
色谱法的一般原理
利用混合物各组分在固定相和流动相中的分配平衡常数 的差异进行分离。当带有样品的流动相流经固定相时， 由于固定相对各组分的吸附或溶解性能的不同，使吸附
力较弱获溶解度较小的组分在固定相中移动速度较快，
经过多次反复平衡，将混合物中各组分分离。
薄层色谱
薄层色谱：薄层色谱（Thin Layer Chromatography），
常用TLC表示，是一种微量，快速和简便的色谱方法。
一般是将固定相，如硅胶和三氧化铝，负载在一张薄层 板上，将样品置于固定相之后，流动相通过毛细管效应 从下往上流动而使样品分开。
展开装置图
注意事项
1、制板和活化：铺板厚度0.25-1mm且均匀；晾干；一块
一块铺；活化时烘箱要从低温开始 2、点样：画线时不能将板划破；点样斑点直径小于2mm， 斑间距1-1.5cm，标准左样品右；点样结束干燥后再 进行下一步 3、展开：展开剂用9：1的环己烷和乙酸乙酯混合溶剂， 一般原则：根据样品的极性、溶解度和吸附剂的活性等 因素考虑。溶剂的极性越大对样品的洗脱力越强。 4、显色：照原样画出斑点形状
的影响，产生分配现象，亲脂性强的流动相中分配的多，
移动速度快。
纸色谱实验药品和仪器
药品：
甘氨酸，亮氨酸，混合物（自配），展开剂（水/正丁
醇/醋酸 5:4:1，取上层液体）
仪器： 滤纸，大试管，带钩塞子，铅笔
实验操作类似于TLC
两张色谱滤纸，分别点上甘氨酸， 混合物，以及亮氨酸，混合物 使用茚三酮乙醇溶液进行显色 通过比较Rf值确定混合物中各 组分。
3. 干燥、显色
自身有颜色 有共轭体系的使用紫外灯 各 D1/D2
5. 分析结果
通过比较Rf值，确定混合物中各组分分别是什么物质
纸色谱
纸色谱（Paper Chromatography）：纸色谱法是以纸作
为载体的色谱法。按分离原理属于分配色谱法的范畴。 固定相一般为滤纸纤维上吸附的水分，流动相(展开剂) 为有机溶剂。由于滤纸纤维的毛细管现象，溶剂在含水 的滤纸上缓慢上升，流动相各组分在滤纸上受两相溶剂
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TLC是有机化学实验室中使用的非常多实验操作，常常
用来检测反应和柱色谱前判断使用展开剂的极性。
薄层色谱实验药品和仪器
药品： 偶氮苯，苏丹红，混合物（自配），环己烷/乙酸乙酯 9:1
仪器： TLC板，毛细管，广口瓶，铅笔
1. 准备TLC板
0.5cm
0.5 cm
2. 展开
展开剂：环己烷/乙酸乙酯 9:1
实验目的
1. 学习色谱法的原理 2. 掌握使用薄层色谱和纸色谱对化合物进 行分离和鉴定
色谱法的一般原理
利用混合物各组分在固定相和流动相中的分配平衡常数 的差异进行分离。当带有样品的流动相流经固定相时， 由于固定相对各组分的吸附或溶解性能的不同，使吸附
力较弱获溶解度较小的组分在固定相中移动速度较快，
经过多次反复平衡，将混合物中各组分分离。
薄层色谱
薄层色谱：薄层色谱（Thin Layer Chromatography），
常用TLC表示，是一种微量，快速和简便的色谱方法。
一般是将固定相，如硅胶和三氧化铝，负载在一张薄层 板上，将样品置于固定相之后，流动相通过毛细管效应 从下往上流动而使样品分开。
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注意事项
1、制板和活化：铺板厚度0.25-1mm且均匀；晾干；一块
一块铺；活化时烘箱要从低温开始 2、点样：画线时不能将板划破；点样斑点直径小于2mm， 斑间距1-1.5cm，标准左样品右；点样结束干燥后再 进行下一步 3、展开：展开剂用9：1的环己烷和乙酸乙酯混合溶剂， 一般原则：根据样品的极性、溶解度和吸附剂的活性等 因素考虑。溶剂的极性越大对样品的洗脱力越强。 4、显色：照原样画出斑点形状
的影响，产生分配现象，亲脂性强的流动相中分配的多，
移动速度快。
纸色谱实验药品和仪器
药品：
甘氨酸，亮氨酸，混合物（自配），展开剂（水/正丁
醇/醋酸 5:4:1，取上层液体）
仪器： 滤纸，大试管，带钩塞子，铅笔
实验操作类似于TLC
两张色谱滤纸，分别点上甘氨酸， 混合物，以及亮氨酸，混合物 使用茚三酮乙醇溶液进行显色 通过比较Rf值确定混合物中各 组分。
3. 干燥、显色
自身有颜色 有共轭体系的使用紫外灯 各 D1/D2
5. 分析结果
通过比较Rf值，确定混合物中各组分分别是什么物质
纸色谱
纸色谱（Paper Chromatography）：纸色谱法是以纸作
为载体的色谱法。按分离原理属于分配色谱法的范畴。 固定相一般为滤纸纤维上吸附的水分，流动相(展开剂) 为有机溶剂。由于滤纸纤维的毛细管现象，溶剂在含水 的滤纸上缓慢上升，流动相各组分在滤纸上受两相溶剂