实验一薄层色谱和纸色谱课件

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实验目的
1. 学习色谱法的原理 2. 掌握使用薄层色谱和纸色谱对化合物进 行分离和鉴定
色谱法的一般原理
利用混合物各组分在固定相和流动相中的分配平衡常数 的差异进行分离。当带有样品的流动相流经固定相时, 由于固定相对各组分的吸附或溶解性能的不同,使吸附
力较弱获溶解度较小的组分在固定相中移动速度较快,
TLC是有机化学实验室中使用的非常多实验操作,常常
用来检测反应和柱色谱前判断使用展开剂的极性。
薄层色谱实验药品和仪器
药品: 偶氮苯,苏丹红,混合物(自配),环己烷/乙酸乙酯 9:1
仪器: TLC板,毛细管,广口瓶,铅笔
1. 准备TLC板
0.5cm
0.5 cm
2. 展开
展开剂:环己烷/乙wenku.baidu.com乙酯 9:1
展开装置图
注意事项
1、制板和活化:铺板厚度0.25-1mm且均匀;晾干;一块
一块铺;活化时烘箱要从低温开始 2、点样:画线时不能将板划破;点样斑点直径小于2mm, 斑间距1-1.5cm,标准左样品右;点样结束干燥后再 进行下一步 3、展开:展开剂用9:1的环己烷和乙酸乙酯混合溶剂, 一般原则:根据样品的极性、溶解度和吸附剂的活性等 因素考虑。溶剂的极性越大对样品的洗脱力越强。 4、显色:照原样画出斑点形状
的影响,产生分配现象,亲脂性强的流动相中分配的多,
移动速度快。
纸色谱实验药品和仪器
药品:
甘氨酸,亮氨酸,混合物(自配),展开剂(水/正丁
醇/醋酸 5:4:1,取上层液体)
仪器: 滤纸,大试管,带钩塞子,铅笔
实验操作类似于TLC
两张色谱滤纸,分别点上甘氨酸, 混合物,以及亮氨酸,混合物 使用茚三酮乙醇溶液进行显色 通过比较Rf值确定混合物中各 组分。
经过多次反复平衡,将混合物中各组分分离。
薄层色谱
薄层色谱:薄层色谱(Thin Layer Chromatography),
常用TLC表示,是一种微量,快速和简便的色谱方法。
一般是将固定相,如硅胶和三氧化铝,负载在一张薄层 板上,将样品置于固定相之后,流动相通过毛细管效应 从下往上流动而使样品分开。
5、要求在原始记录中画出板的真实展开情况并计算Rf值
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3. 干燥、显色
自身有颜色 有共轭体系的使用紫外灯 各种显色剂
4. 计算Rf值
Rf = D1/D2
5. 分析结果
通过比较Rf值,确定混合物中各组分分别是什么物质
纸色谱
纸色谱(Paper Chromatography):纸色谱法是以纸作
为载体的色谱法。按分离原理属于分配色谱法的范畴。 固定相一般为滤纸纤维上吸附的水分,流动相(展开剂) 为有机溶剂。由于滤纸纤维的毛细管现象,溶剂在含水 的滤纸上缓慢上升,流动相各组分在滤纸上受两相溶剂
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