不同动物肝脏中脂肪酸成分分析_刘安军

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2)本试验采用 SephadexG- 200 柱(1.1 cm×100 cm) 层析法测定多糖的分子量,为了评价该法的精确性,我
们将标准分子量葡聚糖 T- 70 和 T- 40 混合后上柱,在 前述柱层析条件下获得了很好的分离效果。PAVF Ⅰ、 PAVF Ⅱ- a、PAVF Ⅱ- b 分子量分别为 107 ku,500 ku, 170 ku。
动物肝脏:鲫鱼、草鱼、鸡肝、鸭肝、羊肝和猪肝购 计算出脂肪酸各组分的相对含量得到定量结果,结
于超市;鹅肥肝由天津宝鹅园提供。
果见表 2。
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食品研究与开发
2.1 脂肪酸(FA)标准品图谱及保留时间(Ret.T)(见图 1、表 1)
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图 5 鸭肝脂肪酸 GC 图 Fig.5 The chr omatogr am of fatty acid of the dar k’s liver by GC
脂肪酸,重复此操作 2 次。然后用无水 Na2SO4 干燥、 保存。
不饱和脂肪酸。然而这部分重要资源的价值尚未被完 1.2.2 盐酸甲酯化
ห้องสมุดไป่ตู้
全发掘出来,目前只零星对少数几种动物肝脏进行报
取上述脂肪酸混合物放入 100 mL 烧瓶中,旋转蒸
道[1,6],本文系统的对各种肝的脂肪酸成分进行分析对 发去除石油醚,加入 4 %的 HCl—甲醇 30 mL,60 ℃水
酸组成进行系统的分析检测,为其应用开发提供了必 要的数据,为人们科学选用和利用动物肝脏作为营养
Na2SO4 干燥,并通入氮气吹干得总脂。去除适量的溶 剂,浓缩到用 GC 测定时能得到较高的灵敏度为止。密
素源和保健药物的开发提供有效的依据。
封冷冻保存,留待进行气相色谱分析。
1.3 GC 分析检测条件
1 材料和方法
气 相 色 谱 分 析 条 件 :岛 津 GC- 2010 气 相 色 谱
1.1 材料
仪 ;色 谱 柱 :CBP 石 英 毛 细 管 柱 ,50 mm×0.25 mm×
仪器:GC- 2010 气相色谱 (岛津);RE- 52AA 旋 0.25 μm;检测器为 FID;进样口温度 250 ℃;检测器
转蒸发器 (上海亚荣生化仪器厂);XMTB 恒温水浴 温度 250 ℃;色谱柱升温程序:120 ℃保留 5 min,以
2 结果与分析
试剂:氢氧化钾、石油醚、盐酸、甲醇、乙醇、正己
按 上 述 条 件 对 鲫 鱼 、草 鱼 、鸡 、鸭 、羊 、猪 和 鹅 的
烷、氯仿、无水硫酸钠,均为分析纯;生理盐水为医用试 肝脏进行皂化和甲酯化,将各种脂肪酸甲酯的标准
剂;去离子水;氮气(纯度为 99.999 %);氯仿∶甲醇 样品的标准液与样品甲酯化后的溶液在相同条件下
3)理化分析表明 4 种均一多糖均含有糖醛酸,且 均为酸性多糖类物质。PAVF Ⅲ中可能含有酚类物质 和蛋白质。
参考文献:
[1] 李时珍.本草纲目[M].北京:人民卫生出版社,1957:908 [2] 谭仁样.植物成分分析[M].北京:科学出版社,2002: 76- 78 [3] 周蓉,齐莉,王雅芬.甘草多糖的分离纯化及高效毛细管电泳分
检测分析
食品研究与开发
2007.Vol.28.NO.07 121
不同动物肝脏中脂肪酸成分分析
刘安军,史建超 *,刘有志,张国蓉,刘玉江 (天津科技大学食品工程与生物技术学院,天津 300457)
摘 要:采用气相色谱法对 7 种动物肝脏中脂肪酸组成进行分析。以猪、羊、鸡、鸭、鲫鱼、草鱼和鹅的肝脏为材料,采 用 KOH- 乙醇皂化,HCl- 甲醇酯化的方法进行样品处理。实验结果表明,猪肝中有 16 种脂肪酸,鸡肝中有 12 种脂肪 酸,羊肝中有 18 种脂肪酸,鸭肝中有 14 种脂肪酸,鲫鱼肝中有 20 种脂肪酸,草鱼肝中有 22 种脂肪酸,鹅肝中有 19 种脂肪酸。能快速、准确、可靠的满足动物肝中脂肪酸检测分析要求。 关键词:动物肝脏;脂肪酸;气相分析
比,将有利于其价值的开发。本研究采用甲酯化较完全 浴加热 30 min~60 min,反应后静置至冷。再加入正己
的盐酸甲酯化的方法处理样品,利用气相色谱法对鲫 烷 15 mL 和水 5 mL,摇匀,3 000 r/min 离心 10 min,水
鱼肝、草鱼肝、猪肝、羊肝、鸡肝、鸭肝和鹅肥肝的脂肪 洗至中性 (分液分层) 将上层正己烷抽出,用无水
作用,具有降血脂、软化血管,延缓衰老,防止心脑血管 10 min,取下层氯仿相,旋转蒸发除去氯仿。加入 1 mol/L
疾病发生的功效[3]。其中油酸,亚油酸和亚麻酸(C18:1, C18:2 和 C18:3)是广泛分布于动物体内的主要不饱和脂肪 酸,亚油酸是一些动物生长中不可缺少的一种脂肪酸,
的 KOH—乙醇溶液 15 mL,水浴加热,回流 1 h。皂化后 再次旋转蒸发,去除乙醇,生成的肥皂溶于 20 mL 水 中,加入乙醚 20 mL。用分液漏斗提取下层不皂化物,
及各种活动中发挥重要的调节作用,人体自身不能合 1.2.1 脂类皂化及分离
成多不饱和脂肪酸,只能从食物中摄取[2]。而不饱和脂
分别称取鲫鱼、草鱼、猪、羊、鸡、鸭、鹅肝脏 3 g 加
肪酸对降低人体血液中的胆固醇水平, 减少胆固醇在 入 15 mL 体积的氯仿∶甲醇(2∶1,体积比),再加入生
心血管壁上的沉积,减轻与延缓动脉粥样硬化有重要 理盐水 3 mL,充分匀浆。静置 30 min,3 000 r/min 离心
4 结论 1)采用 DE- 52 离子交换纤维柱和 sephadexG- 200
凝胶柱层析分离纯化酸浆宿萼多糖,具有较好的分离 效果,共得到 PAVF Ⅰ、PAVF Ⅱ- a、PAVF Ⅱ- b、PAVF Ⅲ 、PAVF Ⅳ - a 和 PAVF Ⅳ - b 6 种 级 分 ,由 SephadexG- 200 柱层析结果可 看出,此分离过程对 PAVF Ⅰ、PAVF Ⅱ- a、PAVF Ⅱ- b、PAVF Ⅲ的分离作 用更好。
图 1 脂肪酸标准品 GC 图 Fig.1 The chr omatogr am of the standar d fatty acid by GC
表 1 脂肪酸标准品保留时间 Table 1 Ret.Time of the standar d fatty acid
FA Ret.T/min FA Ret.T/min FA Ret.T /min FA Ret.T/min FA Ret.T /min
析[J].分析化学,1998:27(2):245 [4] 向东,金鑫,赖凤英. 南瓜多糖的分离与纯化[J]. 食品与发酵工
业,2002,30(8):130- 133 收稿日期:2006- 12- 12
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食品研究与开发
检测分析
必需脂肪酸与维生素、蛋白质一样重要,必需脂肪
THE ANALYSIS OF FATTY ACID COMPOSITION IN THE DIFFERENT ANIMALS’LIVERS LIU An- jun, SHI Jian- chao*, LIU You- zhi, ZHANG Guo- rong, LIU Yu- jiang
(College of Food Engineering and Biotechnology, Tianjin Science and Technology University, Tianjin 300457, China) Abstr act:The analysis, on fatty acid of 7 kinds of animals’livers, was carried through GC. The sample livers which are originally from pig, sheep, chicken, duck, crucian carp, grass carp and goose was saponified by using KOH- ethanol and esterified by HCl- methanol. The result shows that there are 16 kinds fatty acid in pig’s liver, 12 kinds fatty acid in chicken’s liver, 18 kinds fatty acid in sheep’s liver, 14 kinds fatty acid in duck’s liver, 20 kinds fatty acid in crucian carp’s liver, 22 kinds fatty acid in grass carp’s liver, 19 kinds fatty acid in goose’s liv- er. This is a rapid, accurate, confirmed method for analyzing the fatty acid of animal’s liver. Key wor ds:animal’s liver; fatty liver; GC analysis
C4∶0 6.336 C6∶0 7.421 C8∶0 9.854 C10∶0 13.861 C11∶0 16.226 C12∶0 18.686 C13∶0 21.124
C14∶0 23.730 C14∶1 24.910 C15∶0 26.681 C15∶1 28.108 C16∶0 30.297 C16∶1 31.546 C17∶0 34.787
亚麻酸及该系列的其他不饱和脂肪酸是生物体膜的重 重复此操作 2 次。
要组成,也是一些酶活性必不可少的,同时亚油酸 C18:2 在油脂转运中也起到重要作用[4]。
在下层水相中加入稀盐酸,调整 pH 值至 2.0, 使脂肪酸从肥皂中游离。用石油醚 20 mL 提取上相
目前,市场商品不饱和脂肪酸的来源以深海鱼类 为主[5]。其实,陆生动物尤其是其内脏组织也含有丰富
作者简介:刘安军(1963- ),男(汉),教授,博士,博士生导师,主要从事畜产(副产)品高附加值的开发利用及功能性食品研究等。 * 通讯作者
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质;PAVF Ⅲ的三氯化铁反应呈阳性,表明其中可能含 有酚类物质;茚三酮反应和紫外吸收光谱表明 PAVF Ⅲ中含蛋白质。PAVF Ⅲ的碘- 碘化钾反应成阳性,说 明它含淀粉类多糖。
=2∶1 (v∶v);1 mol/L KOH- 乙醇 (5.6 g KOH 溶解在 分别进样,进行气相色谱分析。得到标准品与各样品
100 mL 乙醇);4 %HCl- 甲醇 (4 mL 盐酸溶于 100 mL 的脂肪酸 GC 图,见图 1~图 8。脂肪酸的确定参照标
甲醇)。
准品和保留时间来进行[9],见表 1。采用面积归一化法
脂肪酸标准品(SIGMA)。
酸的缺乏和不平衡会破坏机体调节机制,其失衡正是 1.2 样品处理方法
导致慢性疾病高发的原因之一[1]。人类临床试验已证明
目前,对脂肪酸的处理方法有很多皆比较陈旧,本
多不饱和脂肪酸能缓解慢性和急性炎症疾病,可在体 试验根据物质的状态、性质,通过对比采用了盐酸甲酯
内转变为一系列重要生理活性物质,它们在细胞代谢 化的方法[7-8],使样品甲酯化较完全。
锅(上海德兆仪器仪表有限公司);超速生物冷冻离 5 ℃/min 升至 200 ℃,保留 140 min;载气为 N2,流速 心 机 Heraeus (Kendro Laboratory Products GmbH); 为 30 mL/min。
ESJ205—4 型电子天平 (沈阳龙腾电子称量仪器有
限公司)。
C17∶1 36.423 C18∶0 40.700 C18∶1 42.385 C18∶2 46.178 C20∶0 48.960 C20∶1 52.170 C18∶3 58.700
C21∶0 C20∶2 C22∶0 C20∶3(n6) C22∶1 C20∶3(n3) C20∶4
61.383 C23∶0 95.859 68.170 C22∶2 108.356 72.578 C24∶0 112.142 76.676 C20∶5 116.218 79.151 C24∶1 150.617 89.608 C22∶6 159.288 91.144
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