植物组织总蛋白提取(粗提)
植物总蛋白提取演示教学
植物总蛋白提取精品文档一提取植物总蛋白（以植物花粉为例）：1.三氯乙酸法（TCA）/丙酮(acetone)提取花粉总蛋白质花粉在liquid nitrogen中研磨成粉末，用含10%TCA和1%DTT的acetone沉淀蛋白质，-20度 2个小时(必要时过夜)，4度 25000g离心20min后去上清，用含1%DTT的acetone溶液悬浮沉淀，-20度 1个小时,再次离心去上清，将真空干燥的沉淀在等电聚焦缓冲液中(8M urea，20mmDTT,4%CHAPS,2%ampholyte,PH:3-10) 20度震荡1小时，20度25000g离心20min，收集上清，沉淀再次用IEF缓冲液离心收集上清，可为后续试验做准备。
2．苯酚（phenol）提取法花粉在liquid nitrogen中研磨成粉末，添加1ml的phenol（tris 8.8 缓冲液）继续研磨5min,加提取缓冲液（0.1mol/L 8.8 Tr i s –HCl，5mmEDTA,20mmDTT,30%sucrose）。
将样本转移至离心管中，4度震荡30min，25000g离心10min，将上层的phenol层转移进另一个试管，将下边的水相层加1ml的phenol（tris 8.8 缓冲液）及提取缓冲液，震荡，离心，将再次收集到的phenol与前边收集的混合，加5倍体积的0.1 M ammonium acetate in 100%methanol，在-20度震荡沉淀蛋白质，必要时过夜，4度 25000g离心10min，将沉淀用0.1 M ammonium acetate in 100%methanol及80% acetone各洗两次, 含10mmDTT的80% acetone再洗一次，在每一步中蛋白沉淀都要完全重悬— -20度震荡30min，4度 25000g离心20min，洗剂完成后，沉淀真空干燥，IEF buffer提取蛋白质，如方法1。
植物蛋白质的提取和加工 ppt课件
便于灭酶脱腥 灭酶：专用加热处理器内，器内温度: 150-160℃，豆心
温度：100-110 ℃ 脱皮：撞击和摩擦脱皮 研磨：锤式粉碎机粗磨，辊磨精磨 筛理：过200目筛，筛下物
（1）首先用弱碱溶液浸泡低温脱溶豆粕，使可 溶性蛋白质、碳水化合物等溶解（而油脂和不 溶性糖类被排斥在溶液外）；
（2）利用离心机除去溶液中不能溶解的纤维及 残渣。
（3）在已经溶解的蛋白质溶液中，加入适量的酸液， 调节溶液的 pＨ值达到4.5，使大部分的蛋白质从溶 液中沉析出来,再离心除去乳清液。
（4）然后将酸沉析出的蛋白质凝聚体进行破碎、水洗、 中和、闪蒸灭菌后，再干燥脱除水分，制成高纯度的 大豆分离蛋白质。
精品资料
• 你怎么称呼老师？
• 如果老师最后没有总结一节课的重点的难点，你 是否会认为老师的教学方法需要改进？
• 你所经历的课堂，是讲座式还是讨论式？ • 教师的教鞭
• “不怕太阳晒，也不怕那风雨狂，只怕先生骂我 笨，没有学问无颜见爹娘 ……”
• “太阳当空照，花儿对我笑，小鸟说早早早……”
营养价值：
1、水溶性
（1）水溶性是充分发挥大豆蛋白功能特性的先 决的条件。
（2）影响因素： pH值、离子强度、温度有关。
2、吸水性 （1）定义
大豆蛋白质的肽链结构中含有极性的侧链， 能够吸收水分并保留水分。 （2）影响因素 水分活度Aw：随Aw的增加吸水性增强， Aw=1.0时，大豆蛋白可吸水0.6g/g蛋白。 pH：大于或小于等电点4.5，吸水性会急剧增加。
一、生产原理
大豆浓缩蛋白质(SPC)主要是指以低温脱溶豆 粕为原料，除去粕中的可溶性糖分、灰分以 及其他可溶性的微量成分，使蛋白质的含量 从45％-50％提高到70％左右而获得的制品。
植物组织蛋白提取
蛋白提取方法：1、液氮研磨成粉2、转移粉末（0.1-0.3g）到2ml离心管中，加10%TCA/丙酮至满管，涡旋混匀；4°；16000g；离心3min；弃上清。
3、用含0.1M醋酸铵的甲醇加满离心管，混匀；4°；16000g离心3min；弃上清。
4、用丙酮加满离心管，涡旋混匀；4°；16000g离心3min；弃上清。
5、室温晾干，去除残余丙酮。
6、按0.4-0.8ml/0.1g比例的起始材料加SDS extraction buffer混匀30min；4°；16000g离心3min；保留上清。
加与上清等体积的苯酚（ph8.0）彻底混匀30min；4°；16000g离心3min；转移酚相，加与酚相等体积的水，水洗一次，保留酚相至一新的离心管中，加0.1M乙酸铵的甲醇至满管；-20°过夜；4°16000g 离心5min；小心地移除上清，可见沉淀。
7、用甲醇清洗沉淀一次，丙酮清洗至沉淀为白色（5-6次）每次混匀都要涡旋混匀如上离心。
将蛋白空气晾干（不要太干，丙酮挥发完即可否则蛋白干粉不好溶）。
溶液配比：1、TCA/丙酮（10%TCA；0.07%巯基乙醇）：10g TCA（三氯乙酸）70ul巯基乙醇丙酮定容至100ml2、丙酮（含0.07%巯基乙醇）：140ul巯基乙醇加入200ml丙酮中。
3、SDS extraction buffer：30%蔗糖；2%SDS；0.1M Tris-HCl(Ph8.0)5%巯基乙醇；即：30g蔗糖；2g SDS；5ml巯基乙醇；用[0.1M Tris-HCl(ph8.0)]定容至100ml。
4、0.1M Tris-HCl(ph8.0)：Tris:1.21g溶于80ml的超纯水，浓HCl调ph8.0，定容至100ml。
5、0.1M乙酸铵/甲醇：乙酸铵1.54g；甲醇定容至200ml。
6、甲醇7、Tris饱和的苯酚（ph8.0）。
一种植物总蛋白的提取方法及其专用提取液
一种植物总蛋白的提取方法及其专用提取液
高效蛋白提取是生物学研究中许多生物活性蛋白质的重要技术，同时是天然植物来源高效产出有效复合成制剂的有效技术。
近年来，微生物静电纺丝已成为一种快速、有效和经济的植物总蛋白提取方法，可以有效地提取出植物中的多种活性蛋白，并使其得到有效的应用。
专用总蛋白提取液由水、醇类和有机酸组成，使得植物蛋白质更容易溶解，有效降低蛋白质的结构及生物活性，从而可以获得植物总蛋白，并提高抽取特定集合体的活性蛋白。
此外，专用植物总蛋白提取液还可以采用无纤维素或低纤维素方法进一步提高植物总蛋白的抽取效率，节省时间成本。
专用提取液能够提取植物总蛋白，也有助于保护植物总蛋白，具有抗氧化特性和抗酶水解性，还可以促进蛋白质的活性和高纯度纯化。
同时，专用提取液具有高灵敏度、快速性和无毒性，因此几乎所有的植物级别都可以采用此种专用提取液提取总蛋白。
综上所述，静电纺丝专用植物总蛋白提取液具有许多独特的优点，包括快速、有效、低成本、抗酶水解性和抗氧化性，是生物学研究中活性蛋白质的一种重要技术，也是植物来源高效产出有效复合剂的一种有效技术。
夺取植物蛋白质的提取和加工技术
第九章植物蛋白质的提取和加工技术本章重点和学习目标了解植物蛋白的种类和主要特征，掌握主要蛋白的制取原理和加工方法；主要植物蛋白的性质和主要用途。
蛋白质是人类生命活动的重要物质基础。
随着世界人口的不断增长，蛋白质供给出现了严重不足。
为了解决这一问题，世界各国尤其是不发达国家和地区，积极采取措施，试图从可以得到的食物中获得有营养和廉价的蛋白质。
在世界范围的蛋白质资源供给中，大部分为植物蛋白，占蛋白质总量的70％，而动物蛋白仅占30％。
另外，具有经济性、营养性、功能性等优点的植物蛋白在建立健康的饮食结构方面所起的作用也越来越受人们重视。
本章将着重介绍各种植物蛋白的特点和相关的利用技术。
第一节植物蛋白质的基本特征食品中的蛋白质具有3个方面的特性，既营养性、加工特性及有益于人体健康的功能特性。
蛋白质的营养价值，主要是取决于其所含必需氨基酸是否平衡。
一般来说，动物蛋白质中的必需氨基酸比较平衡，而植物蛋白往往是赖氨酸、苏氨酸、色氨酸和蛋氨酸的含量相对不足。
谷物蛋白一般缺乏赖氨酸，而油料蛋白主要是蛋氨酸不足。
例如小麦蛋白主要是赖氨酸和苏氨酸不足；玉米蛋白主要是色氨酸和赖氨酸不足；棉子蛋白主要是蛋氨酸不足；花生蛋白主要是缺乏蛋氨酸；大豆蛋白除蛋氨酸和半胱氨酸含量稍低于FA0(联合国粮农组织)推荐值外，氨基酸组成基本平衡，接近于全价蛋白，是仅次于动物蛋白的理想蛋白质资源。
加工特性主要是指食品在加工过程中和加工后所表现出的物理性质，如物料或制品的保水性、乳化性、弹性和黏结性等。
这些物性指标是进行食品品质评价的重要内容。
植物性蛋白质，特别是油料蛋白质具有较好的加工特性，既可以单独制成食品，也可以与蔬菜或肉类等相组合加工成各种各样的食品。
它们在加工过程中，赋予制品保水性和保型性，防止加热调理收缩变形，使制品有较好的物性品质。
动物性蛋白质主要来源于肉、鱼、奶、蛋等食物，这些食物一方面由于价格较贵，另一方面由于肉制品含有较多的易导致心血管疾病的饱和脂肪酸和胆固醇，因而不利于健康。
植物蛋白质组研究技术
植物蛋白质组研究技术（内部使用）一、蛋白质提取方法：直接研磨法：将植物材料剪碎于加有一定量的样品缓冲液（材料g：缓冲液ml＝1:4）的预冷的研钵中，冰上进行研磨至匀浆。
4o C下15000 rpm离心15 min，上清夜即为蛋白质抽提液。
电泳前将该提取液在相同条件下再离心一次即可。
该方法适用于极幼嫩的植物组织或幼苗以及白化、黄化苗等。
TCA/丙酮沉淀法：A）植物组织在液氮中研磨成精细的粉末后加入10％TCA（丙酮为溶剂）在－20o C下沉淀1 h以上（可以过夜）。
溶液在4o C下15000 rpm离心15 min。
沉淀用丙酮清洗三次（至丙酮为无色止），相同条件下离心后，沉淀真空干燥（约5 min 即可）。
真空干燥后所得的干粉按每30 mg加1ml样品缓冲液进行溶解（室温下1 h以上）。
可以进行振荡或超声波助溶。
溶解后的样品4o C下15000 rpm离心15 min后取上清液即为蛋白质提取液。
B）植物组织在匀浆缓冲液中4o C下研磨至匀浆【样品于缓冲液之比（g/ml）随样品的不同而有所不同，一般幼嫩或含水量比较丰富的组织为1：3－4，而生理年龄较老的组织约为1：8－10】。
匀浆液4o C下15000 rpm离心15 min后取上清液，往上清中加入50％TCA（水为溶剂）至TCA浓度为10％，冰上沉淀30 min，相同条件下离心，沉淀用丙酮清洗3次，离心后真空干燥即可得蛋白干粉。
将蛋白干粉按所需的比例溶于样品缓冲液中（振荡助溶1 h）即可。
酚抽提法：植物组织在匀浆缓冲液中4o C下研磨至匀浆【样品于缓冲液之比（g/ml）随样品的不同而有所不同，一般幼嫩或含水量比较丰富的组织为1：3－4，而生理年龄较老的组织约为1：8－10】。
匀浆液4o C下15000 rpm离心15 min后取上清液，往上清夜中加入相同体积的Tris饱和酚（pH 8.0）上下倒置充分混匀后15000 rpm离心5－10 min。
植物蛋白的提取方法
植物蛋白的提取方法
植物蛋白啊，那可是个宝！你知道从植物中提取它都有哪些奇妙的方法吗？咱就拿大豆来说吧，那可是植物蛋白的丰富来源。
可以通过浸泡，让大豆吸饱水，就像人喝足了水一样精神饱满。
然后呢，把它们磨碎，哎呀，这就像是把宝藏给挖掘出来了。
还有啊，像花生，那也是提取植物蛋白的好材料呀！把花生炒熟了，香气扑鼻，然后再去提取蛋白，感觉就像是在烹饪一道美味的大餐。
再说说小麦，通过一些特别的工艺，也能从中获取珍贵的植物蛋白呢。
这就好像是在一堆麦粒中寻找闪闪发光的金子。
提取植物蛋白的过程可不简单呢，需要精心的操作和耐心的等待。
这就跟培养一个优秀的孩子一样，得花费好多心思。
难道不是吗？
在这个过程中，每一个步骤都很关键啊。
从选择合适的植物原料，到运用恰当的提取技术，就像走在一条充满挑战的道路上，但一旦成功，那收获可是满满的呀！想想看，得到了纯净的植物蛋白，那是多么让人兴奋的事情。
而且啊，植物蛋白对我们的身体有那么多好处，能提供能量，让我们活力四射。
这就如同给身体注入了一股强大的力量，让我们能够勇往直前。
不用 animal 蛋白，咱用植物蛋白也能打造出健康又美味的食物，这多厉害呀！这就好像我们有了一把神奇的钥匙，可以打开健康生活的大门。
所以呀，大家可别小看了植物蛋白的提取，这可是一项充满魅力和价值的事情呢！。
植物蛋白质提取方法总汇
植物蛋白质提取方法总汇植物蛋白质提取方法质质一、植物质质蛋白质提取方法、根据质品重量;质品加入提取液～可根据材料不同适加入,～准质提取液放在上。
当冰11g3.5ml、把质品放在质中用液磨～磨后加入提取液中在上置;研氮研研冰静小质,。
23-4 、用心机心离离?或?38000rpm40min411100rpm20min4 、提取上液～质品制质完成。
清4蛋白质提取液,300ml、;, 11Mtris-HClPH845ml、甘油;,2Glycerol75ml、聚乙质质质;吡咯,3Polyvinylpolypyrrordone6g质质方法质质～垂直板质泳,SDS-PAGE二、植物质质蛋白质提取方法质醋酸丙质淀法—沉、在液中磨片氮研叶1、加入质品质体倍的提取液在?的件下质夜～然后心;条离?以上小质,上。
弃清23-2048000rpm1 、加入等质的浴丙质;含体冰的质基乙醇,～质后心;匀离?以上小质,～然后空真30.07%β-48000rpm1干燥淀～质用。
沉、上质前加入裂解液～室放置温分质～使蛋白充分溶于裂解液中～然后心;离?以上小430158000rpm1质或更质质质以有淀质质准,～可质质保存在没沉?待用。
4、用法定量蛋白～然后可分放入装?质用。
5Brandford-80质品,提取液,含和的质基乙醇的丙质。
裂解液,尿素溶于质菌的10%TCA0.07%β-2.7g0.2gCHAPS3ml去子水中;质质质离体,～使用前再加入的。
5ml1MDTT65ul/ml 质质方法质质向质泳～质质少～子质度小的特点,然质向质泳也同质适用～只是质泳的质质质少,双离当条会减三、质质,质膜黏目的,质质凋亡相质蛋白的表达WESTERN BLOT质用提取蛋白质步质,TRIPURE含蛋白质上液中加入丙醇,;清异每用量,1.5ml1mlTRIPURE倒质混～置室匀温10min心,离～～度～上弃清12000 g10min4加入质酸胍,乙醇,;每用量,0.3M/952ml1mlTRIPURE振质～置室温20min心, 离～～度～上弃清7500g5 min4重质质酸胍,乙醇步次0.3M/952淀中加入沉,乙醇 1002ml充分振质混～置室匀温20 min心, 离～～度～上吹干淀弃清沉7500g5min4,溶解淀沉1SDS心,离～～度10000g10min4取上清度保存;或可直接用于,-20WESTERN BLOT存在的质质,加入,后淀不溶解～质是大的一质～沉很度心后又多了白色定～离沉质晶,质质度～1SDS4SDS含量才左右。
实验七、植物蛋白的提取
实验七、植物蛋白的提取一、实验目的熟悉植物蛋白提取原理和方法，了解其意义及其应用价值。
二、实验原理植物蛋白提取一般遵循如下基本原则：尽可能提高样品蛋白的溶解度，抽提最大量的总蛋白，减少蛋白质的损失；减少对蛋白质的人为修饰；破坏蛋白与其他生物大分子的相互作用，并使蛋白质处于完全变性状态。
根据该原则，植物蛋白制备过程中一般需要有四种试剂①离液剂：尿素和硫脲等；②表面活性剂：SDS、胆酸钠、CHAPS等；③还原剂：DTT、DTE、TBP、Tris-base 等；④蛋白酶抑制剂及核酸酶：EDTA、PMSF、蛋白酶抑制剂混合物等，如为了去除缓冲液中存在的痕量重金属离子，可在其中加入0.1-5mmol/L EDTA，同时使金属蛋白酶失活。
三、仪器和试剂仪器：离心机、移液器、研钵、离心管、冰箱、分光光度计；三角瓶；试管；试管架；移液管；记时器；水浴锅试剂：1. 20mL 样品提取缓冲液：2.5mL 0.5mol/LTris-HCl3. -20℃下预冷丙酮4. （1）标准蛋白质溶液：用0.9%NaCl溶解标准的结晶牛血清清蛋白（BSA）粉末配制成10mg/ml的标准蛋白溶液。
（2）双缩脲试剂：称取1.50克硫酸铜（CuSO4·5H2O）和6.0克酒石酸钾钠（KNaC4H4O6·4H2O），用500毫升水溶解，在搅拌下加入300毫升10% NaOH溶液，用水稀释到1升，贮存于塑料瓶中或内壁涂以石蜡的瓶中。
此试剂可长期保存，若贮存瓶中有黑色沉淀出现，则需要重新配制。
四、实验步骤（改良丙酮沉淀法提取叶蛋白）1、蛋白提取取0.3g 左右的植物叶片，加入4mL 提取缓冲液和适量石英砂，色素多的可按材料鲜重的10%加入PVP，在研钵中研磨充分后转入10 mL离心管中，摇匀并放在4℃条件下提取0.5h，充分溶解蛋白。
4℃6000r/min 离心10min，弃沉淀，上清液中加入2.5～3倍体积的预冷丙酮-20℃条件下放置10min，让蛋白充分沉淀。
植物蛋白质的提取方法及举例
植物蛋白质提取关键点：a、种子研磨充分 b、蛋白质尽量溶解 c、蛋白质尽量沉淀所需药品：NaCl、C2H5OH、(NH4)2SO4、NaOH、H Cl、CH3COOH﹑Na2SO4﹑冰水注：Na2SO4,芒硝，禁与强酸、铝、镁相配。
药品溶解度：NaCl，36g[20℃]; (NH4)2SO4，76.7g[25℃]; Na2SO4, 19.5g[20℃]其中溶解蛋白质的常用中性盐是NaCl、(NH4)2SO4、Na2SO4、Mg2SO4等①、盐析法﹕原理：蛋白质在水溶液中的溶解度取决于蛋白质分子表面离子周围的水分子数目，亦即主要是由蛋白质分子外周亲水基团与水形成水化膜的程度以及蛋白质分子带有电荷的情况决定的。
蛋白质溶液中加入中性盐后，由于中性盐与水分子的亲和力大于蛋白质，致使蛋白质分子周围的水化层减弱乃至消失。
同时，中性盐加入蛋白质溶液后由于离子强度发生改变，蛋白质表面的电荷大量被中和，更加导致蛋白质溶解度降低，之后蛋白质分子之间聚集而沉淀。
由于各种蛋白质在不同盐浓度中的溶解度不同，不同饱和度的盐溶液沉淀的蛋白质不同，从而使之从其他蛋白中分离出来。
简单的说就是将硫酸铵、硫化钠或氯化钠等加入蛋白质溶液，使蛋白质表面电荷被中和以及水化膜被破坏，导致蛋白质在水溶液中的稳定性因素去除而沉淀。
步骤：溶解蛋白质→离心→取上清液，盐析（低温）→离心沉淀蛋白质→透析②﹑等电点法（本方法中最好不要用Na2SO4）：原理：在等电点时，蛋白质分子以两性离子形式存在，其分子净电荷为零(即正负电荷相等)，此时蛋白质分子颗粒在溶液中因没有相同电荷的相互排斥，分子相互之间的作用力减弱，其颗粒极易碰撞、凝聚而产生沉淀，所以蛋白质在等电点时，其溶解度最小，最易形成沉淀物。
等电点时的许多物理性质如黏度、膨胀性、渗透压等都变小，从而有利于悬浮液的过滤。
步骤：溶解蛋白质→离心→取上清液，调节PH，析出蛋白质→离心沉淀蛋白质→ 透析③、有机溶剂法：原理：有机溶剂能降低溶液的电解常数，从而增加蛋白质分子上不同电荷的引力，导致溶解度的降低；另外，有机溶剂与水的作用，能破坏蛋白质的水化膜，故蛋白质在一定浓度的有机溶剂中的溶解度差异而分离的方法，称“有机溶剂分段沉淀法”，它常用于蛋白质或酶的提纯。
植物组织蛋白质提取方法
植物组织蛋白质提取方法•相关推荐植物组织蛋白质提取方法用200毫摩每升的tris-cl 和62.5毫摩每升的tris-cl,我们研究室一般用１００毫摩每升的tris-cl，pH 8.0 ．另外，最好加１５０毫摩每升的ＮaCl，用来分离以弱电荷结合到多糖上的蛋白。
2我提的蛋白难溶，请问怎么解决？1、请问这是为什么呢？怎么解决？2、溶解时是先在100℃沸水浴后在涡旋吗？3、涡旋时产生大量泡沫，对蛋白有影响吗？4、是在常温溶解还是在4℃？或-20℃？5、一般溶解需要多长时间？怎样才算溶解充分了？我也是做植物叶片的.，建议你可以用TCA-丙酮沉淀，方法如下：1、在液氮中研磨叶片30min，加PVP，和石英砂2、加入样品体积3倍的提取液(丙酮溶液1)在-20℃的条件下过夜，然后离心（4℃10000rpm以上1小时）弃上清。
3. 每份加入9ml丙酮溶液II，捣碎沉淀，常温振动混匀，-20℃沉淀1h；10000rpm，4℃离心15min，弃上清.4. 每份加入9ml丙酮溶液II，常温振动混匀，-20℃沉淀1h；10000rpm，4℃离心15min，弃上清.5. 每份加入9ml 80%丙酮溶液III, 常温振动混匀，-20℃沉淀1h, 10000rpm，4℃离心15min，弃上清6．干燥成硬块，磨成粉磨-20℃保存待用。
第二个问题：37度水浴第三个问题：涡旋时产生大量泡沫，没有影响第四个问题：37度溶解第五个问题1个小时，中间混匀数次出现这种情况是很正常的，要是全部都溶了倒是不太正常。
用沉淀法浓缩蛋白都存在一个变性的问题，在具体的操作过程中，有一部分蛋白变性了，所以会不溶解。
操作的时候尽量保持低温！溶解的时候可以在常温下，蛋白变成粉末后，立即加1*SDS上样缓冲液，用加样器吹打，大约5分钟就好，可以用来进行下一步的实验了。
也可以在4度溶解过夜。
涡旋时产生大量泡沫，个人认为影响不大一般溶解半个小时就很充分了，但仍会有很多不溶物！可以离心弃掉！丙酮沉淀之后要干燥，这个过程一定不要时间太长，不然样品干燥得过了，就很难溶了。
植物蛋白质的提取和含量测定(精品资料)PPT
〔Na2MoO4•2H2O〕及700毫升蒸馏
水，再加50毫升85%磷酸，100毫升浓
盐酸，充分混合，接上回流管，以小火 量剩余上清液的体积，参加等体积预冷丙酮，先用6mol/L的HCl调pH至6.
2%NaOH 30毫升。 〔先参加调成糊状，再用少量屡次地慢慢地参加〔边加边搅拌〕，室温下搅拌抽提10min，于4000r/min离心7min ,小心留取上清液， 弃脂层和沉淀，如上清液有漂浮物，再经过滤；
回流10小时，回流结束时，参加150克 6M HCl，1M HCl
5克硫酸铜〔CuSO4•5H2O〕溶解100毫升 1%酒石酸钾钠 〔KNaC4H4O6•4H2O〕中。 大豆蛋白主要是酸性蛋白，pI 4. 量剩余上清液的体积，参加等体积预冷丙酮，先用6mol/L的HCl调pH至6. Folin—酚试剂甲〔用前组分一: 组分二 = 50:1〕
及数滴液体溴，开口继续沸腾15分钟， 大豆蛋白主要是酸性蛋白，pI 4.
冷却后溶液呈黄色〔如仍呈绿色，须再重复滴加液体溴的2CO3和0.
以便驱除过量的溴。冷却后溶液呈黄色 大豆蛋白主要是酸性蛋白，pI 4.
分光光度计〔500nm〕，比色皿
植物蛋白质的提取和含量测定
一、实验目的
掌握大豆蛋白的提取及制备大豆蛋白 丙酮干粉的方法。
本实验先利用稀碱提取大豆蛋白， 再利用丙酮结合等电点溶解度最低原 理沉淀蛋白。 2. Folin-酚法测定蛋白质含量
酚试剂由两局部组成，试剂A为双 缩脲试剂，可与肽链发生显色反响， 试剂B中的磷钼酸和磷钨酸在OH-条
〔如仍呈绿色，须再重复滴加液体溴的
经过滤； 2. 留出上清液2毫升稀释50倍做含量
测定〔第二步〕 3.制干粉： 量剩余上清液的体积，参加等体
粗蛋白的组分
粗蛋白的组分
粗蛋白是指提取自食品中的总蛋白质，包括所有不溶于水、酸和碱的蛋白质。
粗蛋白的组分主要包括动物性蛋白质和植物性蛋白质。
动物性蛋白质主要来源于肉类、禽类、鱼类、奶制品和蛋类等，其中含有丰富的必需氨基酸，但也含有较高的饱和脂肪酸和胆固醇。
植物性蛋白质主要来源于大豆、豆制品、谷物和坚果等，其中含有丰富的不饱和脂肪酸和纤维素，但必需氨基酸含量较低。
除此之外，粗蛋白还含有一些非蛋白质氮化合物，如亚硝酸盐、亚硝胺和尿素等，这些物质对人体健康有一定的影响。
因此，在食品中合理选择粗蛋白来源及摄入量对维持身体健康具有重要意义。
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