分子生物学名词解释

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第一章名词解释1.基因(gene)是贮存遗传信息的核酸(DNA或RNA)片段,包括编码RNA和蛋白质的结构基因以及转录调控序列两部分。

2. 结构基因(structural gene)指基因中编码RNA和蛋白质的核苷酸序列。

它们在原核生物中连续排列,在真核生物中则间断排列。

3. 断裂基因(split gene 真核生物的结构基因中,编码区与非编码区间隔排列。

4. 外显子(exon)指在真核生物的断裂基因及其成熟RNA中都存在的核酸序列。

5. 内含子(intron)指在真核生物的断裂基因及其初级转录产物中出现,但在成熟RNA 中被剪接除去的核酸序列。

6. 多顺反子RNA(polycistronic/multicistronic RNA)一个RNA分子上包含几个结构基因的转录产物。

原核生物的绝大多数基因和真核生物的个别基因可转录生成多顺反子RNA。

7. 单顺反子RNA(monocistronic RNA)一个RNA分子上只包含一个结构基因的转录产物。

真核生物的绝大多数基因和原核生物的个别基因可转录生成单顺反子RNA。

8. 核不均一RNA(heterogeneous nuclear RNA, hnRNA)是真核生物细胞核内的转录初始产物,含有外显子和内含子转录的序列,分子量大小不均一,经一系列转录后加工变为成熟mRNA。

9. 开放阅读框(open reading frame, ORF)mRNA分子上从起始密码子到终止密码子之间的核苷酸(碱基)序列,编码一个特定的多肽链。

10. 密码子(codon)mRNA分子的开放读框内从5' 到3' 方向每3个相邻的核苷酸(碱基)为一组,编码多肽链中的20种氨基酸残基,或者代表翻译起始以及翻译终止信息。

11. 反密码子(anticodon)指tRNA分子反密码环中间3个相邻的核苷酸(碱基),它们与mRNA上的三联体密码子互补配对,确保蛋白质合成时氨基酸按照密码子对号入座。

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一. 名词解释1. C值及C值反常反应:所谓C值,通常是指一种生物单倍体基因组DNA的总量。

真核细胞基因的最大特点是它含有大量的重复序列,而且功能DNA序列大多被不编码蛋白质的非功能DNA所隔开,这就是C值反常现象。

2. 半保留复制:DNA生物合成时,母链DNA解开分为两股单链,各自为模板按碱基互补规律,合成与模板互补的子链。

子代细胞的DNA,一股从亲本完全接受过来,另一股则完全从新合成。

两个子细胞的DNA碱基序列一致。

3. 复制叉:复制中的DNA分子,末复制的部分是秦代双螺旋,而复制好的部分是分开的,由两个子代双螺旋组成,复制正在进行的部分呈丫状叫做复制叉。

4. 冈崎片段:在DNA复制过程中,后滞链的合成先按5’-3’合成若干不连续的小片段,然后再连接成完整的链。

这些小片段最早由冈崎发现。

5. 单链DNA结合蛋白:结合单链DNA的蛋白,在复制中维持模板处于单链状态并保护单链完整。

6. 半不连续复制:前导链连续复制而随从链不连续复制,就是复制的半不连续性。

7. 引发体:复制的起始含有解螺旋酶.DNA C蛋白.引物酶和DNA复制起始区域的复合结构称为引发体。

8. DNA损伤:在复制过程中发生的DNA突变体称为DNA损伤。

9. AP位点:能识别受损核酸位点的糖苷水解酶,它能特异性切除受损核苷酸上的N-B 糖苷键,在DNA链上形成去嘌呤或去嘧啶的位点,统称为AP位点。

10. 转座子:是存在于染色体DNA上可自主复制和位移的基本单位。

11. 端粒酶:在真核生物复制终止后,催化染色体端粒延伸的酶。

由端粒酶RNA端粒酶协同蛋白,端粒酶逆转录酶等几部分组成。

12. 基因突变:基因结构改变而引起的遗传信息的改变,从分子水平上来看,突变就是DNA碱基序列的改变。

13. 错义突变:由于碱基对的取代,使原来可以翻译某种氨基酸的密码子变成了另外一种氨基酸密码子的突变。

14. 无义突变:在蛋白质的结构基因中,一个核苷酸的改变可能使代表某个氨基酸的密码子变成终止密码子,使蛋白质合成提前终止,合成无功能的或无意义的多肽,这种突变称为无义突变。

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2. 基因(gene)是一段携带功能产物(多肽,蛋白质,tRNA和rRNA和某些小分子RNA信息的DNA片段,是控制某种性状的的遗传单位。

3. 密码子偏爱 ( codon bias ):指在不同物种的基因中经常为某种氨基酸编码的只是其中的一个密码子。

4. 基因的剪接位点 ( splice sites ): 一般有特定的序列特征,计算机程序利用这种序列特征可预测将近50%的外显子及20%的完整基因。

值佯谬( C value paradox ):生物体的进化程度与基因组大小之间不完全成比例的现象。

N 值佯谬( N value paradox ):基因组中基因数目与生物进化程度或复杂程度的不对称性6. 基因组(genome :是指一个细胞或生物体的一套完整的单倍体遗传物质.()7. 基因家族(genefamily): 指核苷酸序列或编码产物的结构具有一定同源性的一些基因。

(04)8. 基因超家族( gene superfamily ):结构上具有一定的相似性,但功能不一定相似,且进化上的亲缘关系较远。

如免疫球蛋白基因超家族、丝氨酸蛋白酶基因超家族等( 05)9. 基因组学(genomics):发展和应用基因作图、DNA测序、基因定位等新技术以及计算机程序,分析生命体(包括人类)全部基因组结构及功能10. 微卫星DNA(microsatellite DNA:或称简短串连重复,由2~6个核苷酸的重复顺序组成,如(CA)n、(GA)n、(TA)n,n 为15~30具有多态性,卫星长度常小于1OObp,大量分布每条染色体11. 小卫星DNA(minisatellite DNA): 由6~12个核酸的重复顺序组成,位于染色体端粒及其附近,长度数十~数千bp12. 大卫星DNA(macrosatellite DNA ):即经典的卫星DNA由数十个核苷酸的重复单位构成,主要存在于异染色区和着丝粒。

13. 蛋白质组(proteome) 是指细胞或组织表达的全部蛋白质14. 蛋白质组学(proteomics): 是从整体上采取高通量/ 大规模手段研究所有蛋白组成及其活动规律.15. 单核苷酸多态性( single nucleotide polymorphism, SNP ) : 指发生在基因组序列中单个碱基的改变引起的DNA序列的变化16. 限制性片段长度多态性( restriction fragment length polymorphism ,RFLP:DNA位点的多态性导致限制性内切酶切割位点的差异,即RFLP是第一代DNA遗传学标记()17. 顺式作用元件(cis-acting element) :真核生物中能够被基因调控蛋白特异性识别和结合,并对自身基因转录起始有调节作用的DNA序列18. 核心启动子(Core promoter):常由TATA盒、位于TATA盒上游的的上游启动子元件、以转录点为中心的起始子和下游启动子元件, 4 个元件组合而成。

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中心法则:生物体遗传信息流动途径。

现包括反转录和RNA复制等内容。

复制:是指遗传物质的传代,以母链DNA为模板合成子链DNA的过程。

转录:以DNA的一条链的一定区段为模板,按照碱基配对原则,合成一条与DNA链互补的RNA链的过程。

翻译:以mRNA为模板,氨酰-tRNA为原料直接供体,在多种蛋白质因子和酶的参与下,在核糖体上将mRNA分子上的核苷酸顺序表达为有特定氨基酸顺序的蛋白质的过程。

翻译的基本要素:tRNA、核糖体和mRNA顺式作用元件:指调控真核生物结构基因转录的DNA序列,包括启动子、上游启动子元件、增强子、加尾信号和反应元件等。

它们通过与反式作用因子相互作用来发挥转录调控作用。

反式作用因子:指真核基因的转录调节蛋白,包含DNA结合结构域和转录激活结构域。

它们与顺式作用元件、RNA聚合酶相互作用,以及转录因子之间相互协同或者拮抗,反式调控另一基因的转录。

操纵子:原核生物绝大多数基因按照功能相关性成簇串联排列,与启动子、操纵基因等调控元件共同组成一个转录单位,实现协调表达。

(原核生物中控制蛋白质合成的功能单位,包括结构基因和调控部分。

)乳糖操纵子:控制β半乳糖苷酶诱导合成的操纵子。

包括调控元件P(启动子)和O(操纵基因),以及结构基因lacZ、lacY和lacA。

在没有诱导物时,调节基因lacI编码阻遏蛋白,与操纵基因O结合后抑制结构基因转录;乳糖的存在可与阻遏蛋白结合诱导结构基因转录,以代谢乳糖。

色氨酸操纵子:控制色氨酸合成的元件之一。

大肠杆菌的色氨酸操纵子有启动子和操纵基因控制一个多顺反子mRNA的转录,控制编码色氨酸生物合成需要的各种酶,另外,还有前导区和衰减区。

当培养基中有足够的色氨酸时,操纵子关闭,,缺乏色氨酸时,操纵子开启。

诱导与阻遏:若调节蛋白和操纵基因结合后,抑制其所调控的基因转录,称阻碍物,反之诱导。

(与调节蛋白结合的效应小分子,辅诱导物)基因表达:指将来自基因的遗传信息合成功能性基因产物的过程。

(完整版)分子生物学名词解释

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Central dogma (中心法则):DNA 的遗传信息经RNA 一旦进入蛋白质就不能再输出了。

Reductionism (还原论):把问题分解为各个部分,然后再按逻辑顺序进行安排的研究方法.Genome (基因组):单倍体细胞的全部基因。

transcriptome(转录组):一个细胞、组织或有机体在特定条件下的一组完整基因。

roteome (蛋白质组):在大规模水平上研究蛋白质特征,获得蛋白质水平上的关于疾病的发生、细胞代谢等过程的整体而全面的认识。

Metabolome (代谢组):对生物体内所有代谢物进行定量分析并寻找代谢物与生病理变化的相关关系的研究方法。

Gene (基因):具有遗传效应的DNA 片段。

Epigenetics (表观遗传学现象):DNA 结构上完全相同的基因,由于处于不同染色体状态下具有不同的表达方式,进而表现出不同的表型。

Cistron (顺反子):即结构基因,决定一条多肽链合成的功能单位。

Muton(突变子):顺反子中又若干个突变单位,最小的突变单位被称为突变子。

recon(交换子):意同突变子.Z DNA(Z型DNA) :DNA 的一种二级结构,由两条核苷酸链反相平行左手螺旋形成。

Denaturation (变性):物质的自然或非自然改变.Renaturation (复性):变形的生物大分子恢复成具有生物活性的天然构想的现象。

egative superhelix (负超螺旋):B-DNA 分子被施加左旋外力,使双螺旋体局部趋向松弛,DNA分子会出现向右旋转的力的超螺旋结构。

C value paradox (C值矛盾):生物overlapping gene(重叠基因):不同的基因公用一段相同的DNA序列。

体的大C值与小c值不相等且相差非常大.interrupted gene (断裂基因):由若干编码区和非编码区连续镶嵌而成的基因。

splitting gene(间隔基因):意思与断裂基因相同。

分子生物学-名词解释

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名词解释:核酸结构,性质与功能分子生物学:是从分子水平研究生命现象、生命的本质、生命活动及其规律的科学。

医学分子生物学:是从分子水平研究人体在正常和疾病状态下生命活动及其规律的一门科学。

它主要研究人体生物大分子和大分子体系的结构、功能、相互作用及其同疾病发生、发展的关系。

基因:是核酸分子中贮存遗传信息的遗传单位,是指DNA特定区段,是RNA和蛋白质相关遗传信息的基本存在形式。

大部分生物中构成基因的核酸是DNA, 少数生物(如RNA病毒)是RNA。

核酸的一级结构:核酸中核苷酸的排列顺序。

组成DNA分子的脱氧核糖核苷酸(dAMP, dGMP, dTMP, dCMP)的排列顺序。

组成RNA分子的核糖核苷酸(AMP, GMP, UMP, CMP)的排列顺序。

由于核苷酸间的差异主要是碱基不同,所以也称为碱基序列。

DNA的一级结构:四种脱氧核糖核苷酸(dAMP, dGMP, dTMP, dCMP)或四种碱基的排列顺序。

DNA三级结构:DNA分子在形成双螺旋结构的基础上,进一步折叠成超螺旋结构(supercoil) (原核细胞),或在蛋白质的参与下,进行精密的包装(真核细胞),所形成的空间结构。

超螺旋结构(superhelix 或supercoil):DNA双螺旋链再盘绕即形成超螺旋结构。

正超螺旋(positive supercoil)盘绕方向与DNA双螺旋方同相同;负超螺旋(negative supercoil)盘绕方向与DNA双螺旋方向相反。

结构基因:在基因片段中,贮存着一个特定的转录RNA分子的DNA序列,这段序列决定该RNA分子的一级结构,就称为结构基因。

外显子(exon):结构基因中在成熟RNA分子中保留的相对应的序列内含子(intron):是指RNA分子剪接时删除部分相对应的结构基因序列基因转录调控序列:与转录相关的、结构基因以外的序列启动子(promoter):是RNA聚合酶特异性识别和结合的DNA序列,位于结构基因转录起始点的上游,偶见位于转录起始点的下游。

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分子生物学名词解释分子生物学名词解释1. 基因(顺反子)(gene(cistron)):指能产生一条肽链的DNA 片段。

包括编码区和其上下游区域(引导区和尾部),以及在编码片段间(外显子)的割裂序列(内含子)。

2. DNA聚合酶(DNA polymerase):合成子代DNA链(在DNA模板的指导下)的酶。

任何独特的酶可在修复或复制(或两者都有)中发挥作用。

3. RNA聚合酶(RNA polymerase):使用DNA作为模板合成RNA的酶(正式应为DNA依赖性RNA聚合酶)。

4. 反转录酶(reverse transcriptase):以单链RNA为模板合成双链DNA的酶。

5. A deoxyribonuclease(DNAase)is an enzyme that attacks bonds in DNA. It may cut onlyone strand or both strand.DNA酶:攻击DNA之间化学键的酶。

(第二句自译:它可能仅仅切断单链或双链。

)6. RNA酶(ribonucleases(RNAase)):底物为RNA的酶,它可对双链或单链RNA特异性作用,它可为核酸内切酶或核酸外切酶。

7. 核酸外切酶(exonuclease):每次可从核酸链一头切割一个核苷酸的酶,可能特异性切割DNA或者RNA的5‘或者3’端。

8. 核酸内切酶(endonuclease):切割核酸链内的化学键。

可特异性地切割RNA或者单链或双链DNA。

9. A hotspot is a site in the genome at which the frequencyof mutation (or recombination)is very much increased, usually by at least an order of magnitude relative to neighboring sites.热点:突变或重组频率显著增加的位点。

分子生物学名词解释

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分子生物学名词解释分子生物学考试重点一、名词解释1、分子生物学(molecular biology):分子生物学是研究核酸、蛋白质等所有生物大分子的形态、结构特征及其重要性、规律性和相互关系的科学。

2、C值(C value):一种生物单倍体基因组DNA的总量。

在真核生物中,C值一般是随生物进化而增加的,高等生物的C值一般大于低等生物。

3、DNA多态性(DNA polymorphism):DNA多态性是指DNA序列中发生变异而导致的个体间核苷酸序列的差异。

4、端粒(telomere):端粒是真核生物线性基因组DNA末端的一种特殊结构,它是一段DNA序列和蛋白质形成的复合体。

5、半保留复制(semi-conservative replication):DNA在复制过程中碱基间的氢键首先断裂,双螺旋解旋并被分开,每条链分别作为模板合成新链,产生互补的两条链。

这样形成的两个DNA分子与原来DNA分子的碱基顺序完全一样。

一次,每个子代分子的一条链来自亲代DNA,另一条链则是新合成的,所以这种复制方式被称为DNA的半保留复制。

6、复制子(replicon):复制子是指生物体的复制单位。

一个复制子只含一个复制起点。

7、半不连续复制(semi-discontinuous replication):DNA复制过程中,一条链的合成是连续的,另一条链的合成是中断的、不连续的,因此称为半不连续复制。

8、前导链(leading strand):与复制叉移动的方向一致,通过连续的5ˊ-3ˊ聚合合成的新的DNA链。

9、后随链(lagging strand):与复制叉移动的方向相反,通过不连续的5ˊ-3ˊ聚合合成的新的DNA链。

10、AP位点(AP site):所有细胞中都带有不同类型、能识别受损核酸位点的糖苷水解酶,它能特异性切除受损核苷酸上N-β糖苷键,在DNA链上形成去嘌呤或去嘧啶位点,统称为AP位点。

11、cDNA(complementary DNA):在体外以mRNA为模板,利用反转录酶和DNA聚合酶合成的一段双链DNA。

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分子生物学名词解释名词解释:1、分子生物学 (molecular biology)是从分子水平上研究生命现象、生命本质、生命活动及其规律的科学。

解释:分子一般指生物大分子(核酸和蛋白质),即以生物大分子的结构与功能为研究基础,来研究生命活动的本质与规律。

2、医学分子生物学(medical molecular biology)是分子生物学的一个重要分支,是从分子水平上研究人体和疾病相关生物在正常和疾病状态下的生命活动及其规律,从分子水平上开展人类疾病的预防、诊断和治疗研究的一门科学。

3、载体(vector ):是能携带靶DNA(目的基因)片段进入宿主细胞进行扩增或表达的DNA分子。

4、克隆载体(cloning vector):仅适于外源基因在宿主细胞中复制和扩增。

5、表达载体(expression vector):能使外源基因在宿主细胞中进行转录和翻译的载体。

6、质粒的复制子:质粒DNA中能自主复制并维持正常拷贝数的一段最小的核酸序列单位。

7、噬菌体(phage)是比细菌还小得多的微生物,和病毒侵犯真核细胞一样,噬菌体侵犯细菌,也可以认为它是细菌里的“寄生虫”。

它本身是一种核蛋白,核心是一段DNA,结构上有一个蛋白质外壳和尾巴,尾巴上的微丝可以把噬菌体的DNA注入细菌内。

8、溶菌生长:λ噬菌体感染细菌后,λDNA通过粘性末端而环化,并在宿主中多次复制,合成大量基因产物,装配成噬菌体颗粒,最后裂解宿主菌。

9、溶源生长:λDNA整合到宿主染色体基因组DNA中与之一起复制并遗传给子代,但宿主细胞不被裂解。

10、插入型载体(insertion vector):每种酶只有一个酶切位点。

如λgt系列,适用cDNA克隆。

λ噬菌体载体11、置换型载体(replacement vector ):有两组(成对)反向排列的多克隆位点,其间DNA序列可被外源基因取代。

如EMBL系列,适用基因组克隆12、穿梭载体:是一类既能在原核细胞中复制又能在真核细胞中复制表达的载体。

分子生物学名词解释

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一、名词解释1、分子生物学(狭义):研究核酸和蛋白质等大分子的形态、结构特征及其重要性、规律性和相互关系的科学,主要研究基因的结构和功能及基因的活动。

2、分子生物学(广义):在分子的水平上研究生命现象的科学,涵盖了分子遗传学和生物化学等学科的研究内容。

3、基因:是具有特定功能、能独立发生突变和交换的、“三位一体”的、最小的遗传单位。

4、顺反子:基因的同义词,是一个具有特定功能的、完整的、不可分割的最小遗传单位。

5、增色效应:当进行DNA热变性研究时,温度升高单链状态的DNA分子不断增加而表现出A260值递增的效应。

6、变性温度:DNA双链在一定的温度下变成单链,将开始变性的温度至完全变性的温度的平均值称为DNA的变性温度。

7、DNA的复性:DNA在适当的条件下,两条互补链全部或部分恢复到天然双螺旋结构的现象。

8、C值:一种生物中其单倍体基因组的DNA总量。

9、C值悖论:C值和生物结构或组成的复杂性不一致的现象。

10、重叠基因:共有同一段DNA序列的两个或多个基因。

11、重复基因:基因组中拷贝数不止一份的基因。

12、间隔基因(断裂基因):就是基因的编码序列在DNA分子上是不连续的,为不编码的序列所隔开。

13、转座子:在基因组中可以移动的一段DNA序列。

14、转座:一个转座子从基因组的一个位置转移到另一个位置的过程。

15、假基因:基因组中存在的一段与正常基因非常相似但不能表达的DNA序列。

16:、DNA 复制:亲代双链的DNA分子在DNA聚合酶等相关酶的作用下,别以每条单链DNA为模板,聚合与模板链碱基对可以互补的游离的dNTP,合成两条与亲代DNA分子完全相同的子代双链DNA分子的过程。

17、复制子:从复制起点到复制终点的DNA区段称为一个复制子。

18、复制体:在复制叉处装备并执行复制功能的多酶复合体。

19、复制原点(复制起点):DNA分子中能独立进行复制的最小功能单位。

20、端粒:染色体末端具有的一种特殊结构,对维持染色体的稳定起着十分重要的作用。

分子生物学-名词解释

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名词说明:核酸构造,性质与功效分子生物学:是从分子程度研讨性命现象.性命的本质.性命运动及其纪律的科学.医学分子生物学:是从分子程度研讨人体在正常和疾病状况下性命运动及其纪律的一门科学.它重要研讨人体生物大分子和大分子系统的构造.功效.互相感化及其同疾病产生.成长的关系.基因:是核酸分子中贮存遗传信息的遗传单位,是指DNA特定区段,是RNA和蛋白质相干遗传信息的根本消失情势.大部分生物中构成基因的核酸是DNA, 少数生物(如RNA病毒)是RNA.核酸的一级构造:核酸中核苷酸的分列次序.构成DNA分子的脱氧核糖核苷酸(dAMP, dGMP, dTMP, dCMP)的分列次序.构成RNA分子的核糖核苷酸(AMP, GMP, UMP, CMP)的分列次序.因为核苷酸间的差别主如果碱基不合,所以也称为碱基序列.DNA的一级构造:四种脱氧核糖核苷酸(dAMP, dGMP, dTMP, dCMP)或四种碱基的分列次序.DNA三级构造:DNA分子在形成双螺旋构造的基本上,进一步折叠成超螺旋构造 (supercoil) (原核细胞),或在蛋白质的介入下,进行周详的包装 (真核细胞),所形成的空间构造.超螺旋构造(superhelix 或supercoil):DNA双螺旋链再盘绕即形成超螺旋构造. 正超螺旋(positive supercoil)盘绕偏向与DNA双螺旋方同雷同;负超螺旋(negative supercoil)盘绕偏向与DNA双螺旋偏向相反.构造基因:在基因片断中,贮存着一个特定的转录RNA分子的DNA 序列,这段序列决议该RNA分子的一级构造,就称为构造基因.外显子(exon):构造基因中在成熟RNA分子中保存的相对应的序列内含子(intron):是指RNA分子剪接时删除部分相对应的构造基因序列基因转录调控序列:与转录相干的.构造基因以外的序列启动子(promoter):是RNA聚合酶特异性辨认和结合的DNA序列,位于构造基因转录肇端点的上游,偶见位于转录肇端点的下流.启动子本身其实不被转录.终止子:是构造基因3‘段下流的一段DNA序列,个中有GC富集区构成的反向反复序列,转录后在RNA分子中形成特别的构造以终止RNA链的延长.把持元件(operator):把持元件是被隔绝蛋白辨认与结合的一小段DNA序列(隔绝蛋白与操正调控蛋白结合位点:纵元件结合后克制下流构造基因的转录)在弱启动子临近有一些特别的DNA序列,转录激活蛋白可以辨认并结合这种DNA序列,该蛋白可与RNA聚合酶感化,促进转录的启动.顺式感化元件(cis-actingelement):与转录调控有关的DNA序列, 包含启动子.上游启动子元件.加强子.加尾旌旗灯号和一些反响元件等.上游启动子元件:指TATA盒上游的一些特定的DNA序列,与TATA 盒配合构成启动子,是反式感化因子(转录激活蛋白),辨认与结合的位点加强子(enhance):是一种较短的DNA序列,可以或许被反式感化因子辨认与结合.与加强子元件结合后可以或许加强临近基因转录.位于转录肇端点上游 -100~ -300bp处反响元件:一类能介导基因对细胞外的某种旌旗灯号产生反响的特异的DNA序列poly(A)旌旗灯号:真核生物基因除了调控转录肇端的序列外,在构造基因的3’端下流还有加尾旌旗灯号,由AATAA序列和GT丰硕区,或T丰硕区构成.感化:终止mRNA转录和为其加上poly(A)尾把持子(operon):功效上相联系关系的数个构造基因串联在一路,由一套转录调控序列掌握其转录,构成的基因表达单位.帽子构造:m7GpppNm:真核mRNA的5´末尾在转录后加上一个7-甲基鸟苷,同时第一个核苷酸的C´2也是甲基化,形成帽子构造:m7GpppNm-三联体暗码或暗码子(codon):mRNA分子从5-末尾的第一个AUG(肇端暗码子)开端,每3个核苷酸为一组,决议肽链上一个氨基酸,称为三联体暗码或暗码子(codon).位于肇端暗码子和终止暗码子之间的核苷酸序列称为凋谢浏览框(open reading frame,ORF),可读框内的核苷酸序列决议了多肽链的氨基酸序列.非编码RNA(non-coding RNA):专指那些具有调节感化的小RNA,如siRNA.miRNA等非信使小RNA(small non-messenger RNAs, snmRNAs):除了上述三种RNA外,细胞内消失的很多其他种类的小分子RNA等核酶(ribozyme)或催化性RNA (catalytic RNA):一些小RNA分子具有催化特定RNA降解的活性,在RNA合成后的剪接中具有重要感化.这种具有催化感化的小RNA亦被称为核酶(ribozyme)或催化性RNA (catalytic RNA).核酸的变性(denaturation):指DNA双螺旋之间的氢键断裂变成单链.或RNA局部氢键断裂变成线性单链构造的过程.解链曲线:假如在中断加热DNA的过程中以温度对A260值作图,所得的曲线称为解链曲线.Tm又称熔解温度(melting temperature, Tm):变性是在一个相当窄的温度规模内完成,在这一规模内,紫外光接收值达到最大值的50%时的温度称为DNA的解链温度.DNA复性(renaturation):当变性前提迟缓地除去后,两条解离的互补单链可从新配对结合成为双螺旋构造,或恢复局部双螺旋构造.这一现象称为复性.退火(annealing):热变性的DNA经迟缓冷却后才可复性,这一过程称为退火(annealing)杂化双链(heteroduplex):将不合起源的DNA混杂在一路,经热变性后,让其慢慢冷却复性.若这些异源DNA之间在某些区域具有互补的序列,复性时就会形成杂化双链(heteroduplex)核酸分子杂交(hybridization):杂化双链可以在不合的DNA单链之间形成,也可在RNA单链之间形成,还可以在DNA单链和RNA 单链之间形成,其前提前提是两种单链分子之间消失着必定程度的碱基配对关系.基因信息的传递中间轨则(genetic central dogma):是指遗传信息从DNA传递给RNA,再从RNA传递给蛋白质,即完成遗传信息的转录和翻译的过程.也可以从DNA传递给DNA,即完成DNA的复制过程.这是所有有细胞构造的生物所遵守的轨则.半不中断复制:一条链(前导链)中断合成,另一条链(随后链)不中断合成冈崎片断(Okazaki fragment):随后链的合成偏向与复制叉移动偏向相反,先合成很多不中断片断,称冈崎片断.先导链(leading strand):顺着解链偏向(复制叉移动偏向)合成的子链为先导链,其合成是中断进行的.侍从链(lagging strand):复制偏向与解链偏向相反的子链为侍从链 ,其合成是不中断的,由很多冈崎片断 (1000-2000 个核苷酸)构成.端粒(telomere):是指真核生物染色体线性DNA分子末尾的构造部分,反复的DNA序列,平日膨大成粒状.端粒酶(telomerase):是一种RNA-蛋白质复合体,它可以其RNA为模板,经由过程逆转录过程对末尾DNA链进行延长.逆转录 (reverse transcription):在逆转录酶的催化下,以RNA为模板合成DNA的过程,又称反转录.突变 (mutation):是由遗传物资构造转变而引起的遗传信息的转变.从分子程度来看,突变就是DNA分子上碱基的转变.DNA毁伤 (DNA damage):泛指一切DNA构造和功效的变更.包含各类突变类型.碱基的毁伤和DNA链的断裂点突变(point mutation):DNA分子上的碱基错配缺掉:一个碱基或一段核苷酸链从DNA大分子上消掉.拔出:本来没有的一个碱基或一段核苷酸链拔出到DNA大分子中央.框移突变:是指三联体暗码的浏览方法转变,造成蛋白质氨基酸分列次序产生转变.重组或重排:DNA分子内较大片断的交流.修复(repairing) :是对已产生分子转变的抵偿措施,使其答复为原有的自然状况.包含:光修复(light repairing)切除修复(excision repairing)重组修复(recombination repairing)SOS 修复转录(transcription):生物体以DNA为模板合成RNA的过程 .模板链:双链DNA分子中能作为模板转录出RNA的链,又叫有意义链(sense strand)或Watson链.另一条互补链称为编码链,又叫反义链(antisense strand)或 Crick链不合错误称转录(asymmetric transcription) :在DNA分子双链上某一区段,一股链可转录,另一股链不转录;模板链并不是永久在统一单链上.反式感化因子(trans-acting factors):能直接或间接辨认和结合转录上游区段DNA的蛋白质.反式感化因子中,直接或间接结合RNA聚合酶的,则称为转录因子(trans-criptional factors, TF).断裂基因:真核生物构造基因,由若干个编码区和非编码区互相间离隔但又中断镶嵌而成,去除非编码区再衔接后,可翻译出由中断氨基酸构成的完全蛋白质.外显子(exon):在断裂基因及其初级转录产品上消失,并表达为成熟RNA的核酸序列内含子(intron):隔绝基因的线性表达而在剪接过程中被除去的核酸序列.翻译(translation):蛋白质的生物合成过程就是将mRNA分子中由碱基序列构成的遗传信息,经由过程遗传暗码破译的方法转变成为蛋白质中的氨基酸分列次序.顺反子(cistron):遗传学将编码一个多肽的遗传单位称为.多顺反子(polycistron):原核细胞中数个构造基因常串联为一个转录单位,转录生成的mRNA可编码几种功效相干的蛋白质单顺反子(single cistron):真核生物一个mRNA只编码一种蛋白质.翻译肇端复合物(translational initiation complex):指mRNA和肇端氨基酰-tRNA分别与核蛋白体结合而形成的复合物,介入肇端过程的蛋白质因子称肇端因子(initiation factor,IF).S-D序列或核蛋白体结合位点(ribosomal binding site,RBS):在原核生物mRNA肇端暗码AUG上游,消失4~9个富含嘌呤碱的一致性序列,如-AGGAGG-,称为S-D序列.分子伴侣:是细胞中一类保守蛋白质,可辨认肽链的非自然构象,促进各功效域和整体蛋白质的准确折叠.)热休克蛋白(heat shock protein, HSP) 伴侣素(chaperonins)旌旗灯号序列:所有靶向输送的蛋白质构造中消失分选旌旗灯号,重要为N末尾特异氨基酸序列,可引诱蛋白质转移到细胞的恰当靶部位.旌旗灯号肽:各类新生排泄蛋白的N端有保守的氨基酸序列基因表达调控基因表达:基因经由转录.翻译,产生具有特异生物学功效的蛋白质分子的过程基因表达调控:生物体经由过程特定的蛋白质与DNA.蛋白质与蛋白质之间的互相感化来掌握基因是否表达,或调节表达产品的若干以知足生物体的自身需求以及顺应情形变更的过程.基因表达的时光特异性(temporal specificity):按功效须要,某一特定基因的表达严厉按特定的时光次序产生.阶段特异性(stage specificity):多细胞生物基因表达的时光特异性基因表达的空间特异性(spatial specificity):在个别发展全过程,某种基因产品在个别按不合组织空间次序消失. 基因表达陪同时光次序所表示出的这种散布差别,现实上是由细胞在器官的散布决议的,所以空间特异性又称细胞或组织特异性(cell or tissue specificity).管家基因(housekeeping gene):某些基因在一个个别的几乎所有细胞中中断表达, 无论表达程度高下,管家基因较少受情形身分影响,而是在个别各个发展阶段的大多半或几乎全体组织中中断表达,或变更很小.差别于其他基因,这类基因表达被视为构成性基因表达(constitutive gene expression)可引诱基因:在特定情形旌旗灯号刺激下,响应的基因被激活,基因表达产品增长, 可引诱基因在特定情形中表达加强的过程,称为引诱(induction).可隔绝基因:假如基因对情形旌旗灯号应答是被克制.可隔绝基因表达产品程度下降的过程称为隔绝(repression).沉默子或沉默基因 (silencer):结合隔绝物的调控序列;隔绝物与沉默子的结合导致其临近的启动子掉活,靶基因不被转录.RNA 编辑 (RNA editing):mRNA 分子产生核苷酸的拔出.删除或碱基调换,转变 DNA 模板的遗传信息,从而翻译出氨基酸序列不合的多种蛋白质.核酸印迹与分子杂交核酸分子杂交(nucleotide molecular hybridization):以DNA的变性.复性为理论基本;指具有必定同源序列的两条核酸单链(DNA或RNA),在必定前提下按碱基互补配对原则经由复性处理后,形成异源双链的过程.Northern 印迹(Northern blot):是经由过程检测RNA的表达程度来检测基因表达,将RNA从凝胶中转印到硝酸纤维素膜上,定性剖析mRNA的经常运用办法Western blot (蛋白免疫印迹)技巧:是将蛋白质从聚丙烯酰胺凝胶中转印到化学合成膜的支撑物上,运用特异性抗体进行反响,定性剖析蛋白质.原位分子杂交技巧:运用分子杂交技巧来进行基因及其表达产品定位剖析的一种技巧.聚合酶链式反响(polymerase chain reaction, PC):是一种分子生物学技巧,在体外特异地扩增已知基因的办法,用于放大特定的DNA片断.可看作生物体外的特别DNA复制,可用于剖析基因及其产品的程度变更,可进行及时.定量剖析.反转录PCR(reverse transcription PCR,RT-PCR):是将RNA 的反转录和PCR结合运用的一种技巧.RT-PCR是从组织或细胞中获得目标基因及对已知序列的RNA进行定性及半定量剖析的有用办法.及时.定量PCR技巧:在PCR反响系统中参加荧光基团,运用荧光旌旗灯号积聚及时检测全部PCR过程.经由过程尺度曲线对样品中的DNA的肇端浓度进行定量的办法.DNA主动测序:用不合荧光分子标识表记标帜四种双脱氧核苷酸,然落后行Sanger测序反响,反响产品经电泳分别后,经由过程四种激光激发不合大小DNA片断上的荧光分子使之发射出四种不合波长荧光,检测器收集荧光旌旗灯号,并依此肯定DNA碱基的分列次序.DNA芯片(DNA chip)技巧:也称DNA微阵列(DNA microarray),在固相支撑物上有序固化寡核苷酸或DNA探针,与待测荧光标识表记标帜样品进行杂交,经由过程对杂交旌旗灯号的检测.比较和剖析,得出样品的遗传信息,包含cDNA芯片和寡核苷酸微阵列.基因工程基因工程(genetic engineering):特定基因(被称为目标基因或外源DNA片断)的制备.分别.判定.改革及其在不合生物间的转移等多项技巧.限制性核酸内切酶(restriction endonuclease, RE):是辨认DNA的特异序列, 并在辨认位点或其四周切割双链DNA的一类内切酶.限制性核酸内切酶是重组DNA技巧中重要的对象酶.分类:Ⅰ.Ⅱ.Ⅲ型三大类(基因工程技巧中经常运用Ⅱ型)同尾酶:有些限制性内切酶固然辨认序列不完全雷同,但切割DNA 后,产生雷同的黏端,如许的酶彼此互称为同尾酶.这两个雷同的黏端称为配伍末尾(compatible end).载体(vector):为携带外源DNA,实现外源DNA在受体细胞中的无性滋生或表达有意义的蛋白质所采取的一些DNA分子.克隆载体(cloning vector):为使拔出的外源DNA序列被扩增而设计的载体称为克隆载体.如质粒,噬菌体等.表达载体(expression vector) :为使拔出的外源DNA序列可转录和翻译成多肽链而设计的载体,用于在宿主细胞中表达外源基因的载体.原核表达载体(prokaryotic expression vector)真核表达载体(eukaryotic expression vector).标签(tag);编码序列常构建于表达载体,与目标基因位于统一浏览框内,可使所表达的蛋白上带上标签肽.标签肽大小不等,用于表达产品的分别.纯化与判定.人工接头(adaptor/linker ):是借助化学合成[和(或)结合退火的办法]而得到的含有一种或一种以上限制性内切酶切点的平端双链寡核苷酸片断.T-A克隆;在运用Taq DNA聚合酶进行PCR时,扩增产品的3′末尾可加上一个单独的腺苷酸残基(A)而成为黏端,如许的PCR产品可直接与带有3′-T的线性化载体(T载体)衔接,此即T-A克隆.细菌的感触感染态(competent bacterium):细菌易于回收外源物资的一种自然状况.基因工程操纵中,经由过程物理化学的办法也可使细菌处于感触感染态.处于该状况的细菌被称为感触感染态细胞.亚克隆(subcloning):经由过程以上分.择.接.转.筛五个步调,便完成了一次DNA克隆过程.有时为了达到某种新的目标,须要对已克隆的DNA进行再次克隆,该过程称为亚克隆.(真核表达系统分为瞬时.稳固和引诱表达系统)瞬时表达系统:载体DNA不克不及整合到细胞基因组中,其随细胞决裂而逐渐丧掉,目标蛋白的表达时限短暂;稳固表达系统:载体DNA整合到细胞基因组中而稳固消失于细胞内,目标蛋白能持久.稳固表达;引诱表达系统:目标基因的转录受外源小分子引诱后才得以凋谢.转基因动物技巧:是指将外源基因导入到动物的组织细胞内,并使导入的基因经由过程遗传传给子代.基因敲除(gene knock-out):经由过程同源重组掉活或剔除某一基因基因敲入(gene knock-in):经由过程同源重组使突变基因被置换基因组构造与功效基因组(genome):细胞或生物体中,一套完全单倍体的遗传物资的总和.构造:指不合的基因功效区域在核酸分子中的散布和分列情形.质粒(plasmid):是细菌细胞内的,染色体外的共价闭合环状DNA分子.单拷贝序列 (单一序列):在一个基因组中只消失一次或很少几回的碱基序列为单一序列,是构造基因的特色.构造基因编码的蛋白质包含构造蛋白.酶.激素.受体和调节蛋白等反复多拷贝序列 (反复序列) :反复次序是指在一个基因组中有多个拷贝的碱基次序. 根据反复片断的长度及反复的频率分:高度反复序列.中度反复序列基因诊断与基因治疗基因诊断:用分子生物学技巧对生物体的DNA序列及其产品(RNA 和蛋白质)进行定性.定量剖析,为疾病诊断供给根据.基因诊断的前提:已明白疾病表型与基因型的关系.单链构象多态性剖析(single-strand conformation polymorphism, SSCP):DNA的突变造成DNA片断中碱基序列不合,变性为单链后在中性聚丙烯酰胺凝胶中的构象不合(单链构象多态性),运用迁徙率的不同可使各类序列不合的单链分别开来.限制性片断长度多态性剖析(restriction fragment length polymorphism, RFLP):因为DNA变异产生新的酶切位点或原有的酶切位点消掉,在用限制性核酸内切酶消化时产生不合长度或不合数目的片断,并可借助核酸分子杂交或PCR进行检测.基因治疗Gene Therapy:指将目标基因经由过程基因转移技巧(病毒载体介导或者非病毒载体介导的基因转移技巧)导入靶细胞内,目标基因表达产品对疾病起治疗感化.基因置换(gene WordStrment):指将特定的目标基因导入特定细胞,经由过程定位重组,导入的正常基因,以置换基因组内原有的缺点基因.基因添加(gene augmentation):经由过程导入外源基因使靶细胞表达其本身不表达的基因.在出缺点基因的细胞中导入响应的正常基因,而细胞内的缺点基因并未除去,经由过程导入正常基因的表达产品,抵偿缺点基因的功效;向靶细胞中导入靶细胞本来不表达的基因,运用其表达产品达到治疗疾病的目标.基因干涉(gene interference):采取特定的方法克制某个基因的表达,或者经由过程损坏某个基因的构造而使之不克不及表达,以达到治疗疾病的目标.自杀基因治疗(Suicide Gene Therapy):将“自杀”基因导入宿主细胞中,这种基因编码的酶能使无毒性的药物前体转化为细胞毒性代谢物,引诱靶细胞产生“自杀”效应,从而达到消除肿瘤细胞的目标.运用:是恶性肿瘤基因治疗的重要办法之一.基因免疫治疗:经由过程将抗癌免疫加强的细胞因子或MHC基因导入肿瘤组织,以加强肿瘤微情形中的抗癌免疫反响.RNA干扰(RNA interference,RNAi):是一种由双链RNA诱发的基因沉默现象.在此过程中,与双链RNA有同源序列的mRNA被降解,从而克制该基因的表达.。

分子生物学名词解释

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分子生物学名词解释名词解释:1、分子生物学 (molecular biology)是从分子水平上研究生命现象、生命本质、生命活动及其规律的科学。

解释:分子一般指生物大分子(核酸和蛋白质),即以生物大分子的结构与功能为研究基础,来研究生命活动的本质与规律。

2、医学分子生物学(medical molecular biology)是分子生物学的一个重要分支,是从分子水平上研究人体和疾病相关生物在正常和疾病状态下的生命活动及其规律,从分子水平上开展人类疾病的预防、诊断和治疗研究的一门科学。

3、载体(vector ):是能携带靶DNA(目的基因)片段进入宿主细胞进行扩增或表达的DNA分子。

4、克隆载体(cloning vector):仅适于外源基因在宿主细胞中复制和扩增。

5、表达载体(expression vector):能使外源基因在宿主细胞中进行转录和翻译的载体。

6、质粒的复制子:质粒DNA中能自主复制并维持正常拷贝数的一段最小的核酸序列单位。

7、噬菌体(phage)是比细菌还小得多的微生物,和病毒侵犯真核细胞一样,噬菌体侵犯细菌,也可以认为它是细菌里的“寄生虫”。

它本身是一种核蛋白,核心是一段DNA,结构上有一个蛋白质外壳和尾巴,尾巴上的微丝可以把噬菌体的DNA注入细菌内。

8、溶菌生长:λ噬菌体感染细菌后,λDNA通过粘性末端而环化,并在宿主中多次复制,合成大量基因产物,装配成噬菌体颗粒,最后裂解宿主菌。

9、溶源生长:λDNA整合到宿主染色体基因组DNA中与之一起复制并遗传给子代,但宿主细胞不被裂解。

10、插入型载体(insertion vector):每种酶只有一个酶切位点。

如λgt系列,适用cDNA克隆。

λ噬菌体载体11、置换型载体(replacement vector ):有两组(成对)反向排列的多克隆位点,其间DNA序列可被外源基因取代。

如EMBL系列,适用基因组克隆12、穿梭载体:是一类既能在原核细胞中复制又能在真核细胞中复制表达的载体。

分子生物学名词解释

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1、增强子:就是远离转录起始点、决定组织特异性表达、增强启动子转录活性的特异DNA序列,其发挥作用的方式与方向、距离无关。

2、增强子: 位于真核基因中远离转录起始点,能明显增强启动子转录效率的特殊DNA序列。

它可位于被增强的转录基因的上游或下游,也可相距靶基因较远。

3、同位酶:识别相同的序列但切割位点不一样的酶。

4、顺反子:产生一条多肽链或功能RNA所必需的全部核苷酸序列。

5、回复突变:一个等位基因可以突变为其相对的另一个等位基因,反之,另一个等位基因也可以突变为原来的基因,这种突变叫作回复突变。

6、衰减子:在色氨酸操纵子中的一个区域,此区域以形成不同二级结构的方式,利用原核生物转录与翻译的偶联对转录进行调节。

此区域只存在于原核生物合成代谢的操纵子中。

7、切刻平移:用DNA聚合酶I在有缺刻的DNA双链上一面进行5′→3′的外切,一面进行DNA合成,使缺刻在DNA上发生平移的过程。

此过程也是制备放射性探针的一种方法。

8、减色效应:变性DNA复性后,在260nm的吸收值减少的现象称为减色效应。

9、核受体:细胞内受体分布于胞浆或核内,本质上都是配体调控的转录因子,均在核内启动信号转导并影响基因转录,统称核受体。

10、增色效应:当核酸变性后,其260nm的紫外吸收增加的现象。

11、负超螺旋:两股以右旋方向缠绕的螺旋在外力向松缠的方向捻转时,产生一个右旋的超螺旋以解除外力捻转造成的胁迫,这样形成的超螺旋为负超螺旋。

12、限制性内切核酸酶:是一类能识别和切割双链DNA分子中特定碱基顺序的核酸内切酶。

13、复制子:含有一个起点的复制单位。

其长度等于相邻两个复制起点间的距离。

14、半保留复制:在DNA复制过程中亲代DNA分子的两条链首先解螺旋和分离,然后以每条链为模板,按碱基互补配对原则,合成两条与模板链互补的新链。

这样从亲代的一个双螺旋DNA分子形成了两个与原先的碱基序列完全相同的两个子代DNA分子。

每个子代DNA分子中有一条链来自亲代,另一条链是新合成的,这种的复制方式称为半保留复制。

分子生物学名词解释

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分子生物学名词解释1、广义的分子生物学:是研究核酸、蛋白质等生物大分子的结构与功能,并从分子水平阐述蛋白质与核酸、蛋白质与蛋白质之间相互作用的关系及基因表达调控机理的学科,是人类从分子水平上真正揭开生物世界的奥秘,即从分子水平阐明生命现象和生物学规律的学科。

2、狭义的分子生物学:人们常采用狭义的概念,将分子生物学的范畴偏重于核酸的分子生物学(核酸的结构、DNA的复制、基因的转录、表达和调控),当然也涉及与这些过程相关的蛋白质和酶的结构与功能的研究。

3、蛋白质组:指的是一个基因组所表达的全部蛋白质。

蛋白质组学:是以蛋白质组为研究对象,研究细胞内所有蛋白质及其动态变化规律的科学。

4、生物信息学:对DNA和蛋白质序列资料中各种类型信息进行识别、存储、分析、模拟和传输。

5、蛋白质(protein)是由许多氨基酸(amino acids)通过肽键(peptide bond)相连形成的高分子含氮化合物。

蛋白质的化学组成:1、主要元素:C、H、O、N和S,有些蛋白质还含有少量磷和金属元素。

2、特点:各种蛋白质的含氮量很接近,平均含氮量为16%。

3、凯氏定氮法测定蛋白质含量:蛋白质含量=6.25×样品含氮量6、等电点:在某一pH的溶液中,氨基酸上的-NH2和-COOH解离成度完全相等,即氨基酸所带净电荷为零,呈电中性,此时溶液的pH值称为该氨基酸的等电点。

7、结构域( Domain):球状蛋白质的折叠单位。

相邻的超二级结构紧密联系,形成二个或多个空间上明显突出的局部区域。

它与分子整体以共价键相连,不易分离,具有不同的生物学功能。

8、电泳:带电粒子在电场中向着与其本身所带电荷相反的电极移动的过程称为电泳。

9、DNA的呼吸作用:正常情况下,DNA双螺旋结构中的氢键处于不断的断裂和重新形成的平衡状态(特别是稳定性较低的富含A-T的区段,氢键的断裂和再生更加明显),这种现象称为DNA的呼吸作用。

10、DNA的变性:DNA双链间的氢键断裂,空间结构破坏,形成单链无规线团状态的过程叫做DNA的变性,或解链。

分子生物学名词解释

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回文序列:在双链DNA序列中,按确定的方向阅读双链中每条单链的序列都相同的DNA结构。

核小体:是构成真核生物染色质的基本结构单位。

核酶:具有催化活性的RNA分子。

端粒:位于真核生物染色体末端的由DNA和蛋白质组成的一膨出结构。

端粒酶:由蛋白质和RNA组成的一种核糖核蛋白复合体,具有逆转录酶活性,含有引物特异的识别位点,能以自身RNA为模版反复延伸端粒的重复序列。

变性:在某些理化因素作用下,DNA双链氢键断裂,变成单链的过程。

杂交:复性DNA分子为不同来源,只要遵循碱基配对原则,就叫杂交。

Tm:DNA热变性在一个很窄的范围内进行,这个温度范围中点叫解链温度,用Tm值表示。

增色效应:加热变性后的DNA分子溶液在260nm处的之外吸收值增加的现象。

DNA损伤:在生物体生命过程中DNA双螺旋结构发生的任何改变。

基因突变:基因内的遗传物质发生可遗传的结构和数量的变化,通常产生一定的表型。

转换:两种嘧啶或两种嘌呤间的互换。

颠换:发生在嘧啶与嘌呤间的互换。

基因组:指生物体或细胞中一套完整单倍体的遗传物质的总和。

C值:每种真核生物的单倍体基因组中全部的DNA量C值悖论:形态学复杂程度与C值大小不一致的现象。

断裂基因:指基因的编码序列在DNA分子上被不编码序列分隔成不连续的若干区段。

基因家族:指某一主显基因经过重复和变异所产生的结构相似、功能相关的一组基因。

假基因:基因家族中不表达产生有功能的基因产物的某些成员。

复制子:基因组内能独立进行复制的单位。

复制叉:复制区生长点的结构呈Y形或叉形。

操纵子:原核生物功能相关的结构基因串连在一起,连同上游调控区(调节、启动、操纵基因)以及下游的转录终止信息,共同组成一个转录单位。

结构基因:在基因片段中,贮存的一个决定某RNA分子一级结构的转录RNA分子的DNA序列。

质粒:细菌细胞染色体以外,能独立复制并稳定遗传的共价闭合环状DNA分子。

转录:是以DNA为模版合成RNA的过程。

分子生物学名词解释

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一、名词解释1、基因:能够表达和产生蛋白质和RNA的DNA序列,是决定遗传性状的功能单位。

2、基因组:细胞或生物体的一套完整单倍体的遗传物质的总和。

3、端粒:以线性染色体形式存在的真核基因组DNA末端都有一种特殊的结构叫端粒。

该结构是一段DNA序列和蛋白质形成的一种复合体,仅在真核细胞染色体末端存在。

4、操纵子:是指数个功能上相关的结构基因串联在一起,构成信息区,连同其上游的调控区(包括启动子和操纵基因)以及下游的转录终止信号所构成的基因表达单位,所转录的RNA为多顺反子。

5、顺式作用元件:是指那些与结构基因表达调控相关、能够被基因调控蛋白特异性识别和结合的特异DNA序列。

包括启动子、上游启动子元件、增强子、加尾信号和一些反应元件等。

6、反式作用因子:是指真核细胞内含有的大量可以通过直接或间接结合顺式作用元件而调节基因转录活性的蛋白质因子。

7、启动子:是RNA聚合酶特异性识别和结合的DNA序列。

8、增强子:位于真核基因中远离转录起始点,能明显增强启动子转录效率的特殊DNA序列。

它可位于被增强的转录基因的上游或下游,也可相距靶基因较远。

9、基因表达:是指生物基因组中结构基因所携带的遗传信息经过转录、翻译等一系列过程,合成特定的蛋白质,进而发挥其特定的生物学功能和生物学效应的全过程。

10、信息分子:调节细胞生命活动的化学物质。

其中由细胞分泌的调节靶细胞生命活动的化学物质称为细胞间信息分子;而在细胞内传递信息调控信号的化学物质称为细胞内信息分子。

11、受体:是存在于靶细胞膜上或细胞内能特异识别生物活性分子并与之结合,进而发生生物学效应的的特殊蛋白质。

12、分子克隆:在体外对DNA分子按照即定目的和方案进行人工重组,将重组分子导入合适宿主,使其在宿主中扩增和繁殖,以获得该DNA分子的大量拷贝。

13、蛋白激酶:是指能够将磷酸集团从磷酸供体分子转移到底物蛋白的氨基酸受体上的一大类酶。

14、蛋白磷酸酶:是具有催化已经磷酸化的蛋白质分子发生去磷酸化反应的一类酶分子,与蛋白激酶相对应存在,共同构成了磷酸化和去磷酸化这一重要的蛋白质活性的开关系统。

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1, 错义突变:DNA分子中碱基对的取代,使得mRNA的某一密码子发生变化,由它所编码的氨基酸就变成另一种的氨基酸,使得多肽链中的氨基酸顺序也相应的发生改变的突变.2 无义突变:由于碱基对的取代,使原来可以翻译某种氨基酸的密码子变成了终止密码子的突变.3 同义突变:碱基对的取代并不都是引起错义突变和翻译终止,有时虽然有碱基被取代,但在蛋白质水平上没有引起变化,氨基酸没有被取代,这是因为突变后的密码子和原来的密码子代表同一个氨基酸的突变.4移码突变:在编码序列中,单个碱基,数个碱基的缺失或插入以及片段的缺失或插入等均可以使突变位点之后的三联体密码阅读框发生改变,不能编码原来的蛋白质的突变.1转化:指质粒DNA或以它为载体构建的重组DNA导入细菌的过程.2 感染:以噬菌体,粘性质粒和真核细胞病毒为载体的重组DNA分子,在体外经过包装成具有感染能力的病毒或噬菌体颗粒,才能感染适当的细胞,并在细胞内扩增.3转导:指以噬菌体为载体,在细菌之间转移DNA的过程,有时也指在真核细胞之间通过逆转录病毒转移和获得细胞DNA的过程.4转染:指病毒或以它为载体构建的重组子导入真核细胞的过程.5.癌基因:是细胞内控制细胞生长的基因,具有潜在的诱导细胞恶性转化的特性.当癌基因结构或表达发生异常时,其产物可使细胞无限制增殖,导致肿瘤的发生.包括病毒癌基因和细胞癌基因.6., 细胞癌基因:存在于正常的细胞基因组中,与病毒癌基因有同源序列,具有促进正常细胞生长,增殖,分化和发育等生理功能.在正常细胞内未激活的细胞癌基因叫原癌基因,当其受到某些条件激活时,结构和表达发生异常,能使细胞发生恶性转化.7. 病毒癌基因:存在于病毒(大多是逆转录病毒)基因组中能使靶细胞发生恶性转化的基因. 它不编码病毒结构成分,对病毒无复制作用,但是当受到外界的条件激活时可产生诱导肿瘤发生的作用.8. 基因诊断:以DNA或RNA为诊断材料,通过检查基因的存在,结构缺陷或表达异常,对人体的状态和疾病作出诊断的方法和过程.9 RFLP:即限制性片段长度多态性,个体之间DNA的核苷酸序列存在差异,称为DNA多态性.若因此而改变了限制性内切酶的酶切位点则可导致相应的限制性片段的长度和数量发生变化,称为RFLP.10 基因治疗:一般是指将限定的遗传物质转入患者特定的靶细胞,以最终达到预防或改变特殊疾病状态为目的治疗方法.11, 反义RNA:碱基序列正好与有意义的mRNA互补的RNA称为反义RNA.可以作为一种调控特定基因表达的手段.12, 核酶:是一种可以催化RNA切割和RNA剪接反应的由RNA组成的酶,可以作为基因表达和病毒复制的抑制剂.SSCP:单链构象多态性检测是一种基于DNA构象差别来检测点突变的方法.相同长度的单链DNA,如果碱基序列不同,形成的构象就不同,这样就形成了单链构象多态性.13, 管家基因:在生物体生命的全过程都是必须的,且在一个生物个体的几乎所有细胞中持续表达的基因.14, 细胞全能性:指同一种生物的所有细胞都含有相同的DNA,即基因的数目和种类是一样的,但在不同阶段,同一个体的不同组织和器官中基因表达的种类和数目是不同的.15, SD序列:转录出的mRNA要进入核糖体上进行翻译,需要一段富含嘌呤的核苷酸序列与大肠杆菌16S rRNA3,末端富含嘧啶的序列互补,是核糖体的识别位点.16, 反义核酸技术:是通过合成一种短链且与DNA或RNA互补的,以DNA或RNA为目标抑制翻译的反义分子,干扰目的基因的转录,剪接,转运,翻译等过程的技术.17, 核酸探针:探针是指能与某种大分子发生特异性相互作用,并在相互作用之后可以检测出来的生物大分子.核酸探针是指能识别特异碱基顺序的带有标记的一段DNA或RNA分子. 18, 周期蛋白:是一类呈细胞周期特异性或时相性表达,累积与分解的蛋白质,它与周期素依赖性激酶共同影响细胞周期的运行.19, CAP:是大肠杆菌分解代谢物基因活化蛋白,这种蛋白可将葡萄糖饥饿信号传递个许多操纵子,使细菌在缺乏葡萄糖时可以利用其他碳源.20, 端粒:以线性染色体形式存在的真核基因组DNA末端都有一种特殊的结构叫端粒.该结构是一段DNA序列和蛋白质形成的一种复合体,仅在真核细胞染色体末端存在.21 操纵子:是指数个功能上相关的结构基因串联在一起,构成信息区,连同其上游的调控区(包括启动子和操纵基因)以及下游的转录终止信号所构成的基因表达单位,所转录的RNA为多顺反子.22 顺式作用元件:是指那些与结构基因表达调控相关,能够被基因调控蛋白特异性识别和结合的特异DNA序列.包括启动子,上游启动子元件,增强子,加尾信号和一些反应元件等.23 反式作用因子:是指真核细胞内含有的大量可以通过直接或间接结合顺式作用元件而调节基因转录活性的蛋白质因子.24启动子:是RNA聚合酶特异性识别和结合的DNA序列.25 增强子:位于真核基因中远离转录起始点,能明显增强启动子转录效率的特殊DNA序列.它可位于被增强的转录基因的上游或下游,也可相距靶基因较远.26基因表达:是指生物基因组中结构基因所携带的遗传信息经过转录,翻译等一系列过程,合成特定的蛋白质,进而发挥其特定的生物学功能和生物学效应的全过程.27 信息分子:调节细胞生命活动的化学物质.其中由细胞分泌的调节靶细胞生命活动的化学物质称为细胞间信息分子;而在细胞内传递信息调控信号的化学物质称为细胞内信息分子. 28 受体:是存在于靶细胞膜上或细胞内能特异识别生物活性分子并与之结合,进而发生生物学效应的的特殊蛋白质.29 分子克隆:在体外对DNA分子按照即定目的和方案进行人工重组,将重组分子导入合适宿主,使其在宿主中扩增和繁殖,以获得该DNA分子的大量拷贝.二, 问答题(一),病毒,原核,真核基因组的特点答:1,病毒基因组的特点:① 种类单一;②单倍体基因组:每个基因组在病毒中只出现一次;③形式多样;④大小不一;⑤基因重叠;⑥动物/细菌病毒与真核/原核基因相似:内含子;⑦具有不规则的结构基因;⑧基因编码区无间隔:通过宿主及病毒本身酶切;⑨无帽状结构;⑩结构基因没有翻译起始序列. 2,原核基因组的特点:①为一条环状双链DNA;②只有一个复制起点;③具有操纵子结构;④绝大部分为单拷贝;⑤可表达基因约50%,大于真核生物小于病毒;⑥基因一般是连续的,无内含子;⑦重复序列很少.3,真核基因组的特点:①真核生物基因组远大于原核生物基因组,结构复杂,基因数庞大,具有多个复制起点;②基因组DNA与蛋白质结合成染色体,储存于细胞核内;③真核基因为单顺反子,而细菌和病毒的结构基因多为多顺反子;④基因组中非编码区多于编码区;⑤真核基因多为不连续的断裂基因,由外显子和内含子镶嵌而成;⑥存在大量的重复序列;⑦功能相关的基因构成各种基因家族;⑧存在可移动的遗传因素;⑨体细胞为双倍体,而精子和卵子为单倍体.(二),乳糖操纵子的作用机制答:1,乳糖操纵子的组成:大肠杆菌乳糖操纵子含Z,Y,A三个结构基因,分别编码半乳糖苷酶,透酶和半乳糖苷乙酰转移酶,此外还有一个操纵序列O,一个启动子P和一个调节基因I.2,阻遏蛋白的负性调节:没有乳糖存在时,I基因编码的阻遏蛋白结合于操纵序列O处,乳糖操纵子处于阻遏状态,不能合成分解乳糖的三种酶;有乳糖存在时,乳糖作为诱导物诱导阻遏蛋白变构,不能结合于操纵序列,乳糖操纵子被诱导开放合成分解乳糖的三种酶.所以,乳糖操纵子的这种调控机制为可诱导的负调控.3,CAP的正性调节:在启动子上游有CAP结合位点,当大肠杆菌从以葡萄糖为碳源的环境转变为以乳糖为碳源的环境时,cAMP浓度升高,与CAP结合,使CAP发生变构,CAP结合于乳糖操纵子启动序列附近的CAP结合位点,激活RNA聚合酶活性,促进结构基因转录,调节蛋白结合于操纵子后促进结构基因的转录,对乳糖操纵子实行正调控,加速合成分解乳糖的三种酶.4,协调调节:乳糖操纵子中的I基因编码的阻遏蛋白的负调控与CAP的正调控两种机制,互相协调,互相制约.(三),真核生物转录水平的调控机制答:真核生物在转录水平的调控主要是通过反式作用因子,顺式作用元件和RNA聚合酶的相互作用来完成的,主要是反式作用因子结合顺式作用元件后影响转录起始复合物的形成过程. 1, 转录起始复合物的形成:真核生物RNA聚合酶识别的是由通用转录因子与DNA形成的蛋白质-DNA复合物,只有当一个或多个转录因子结合到DNA上,形成有功能的启动子,才能被RNA聚合酶所识别并结合.转录起始复合物的形成过程为:TFⅡD结合TATA盒;RNA聚合酶识别并结合TFⅡD-DNA复合物形成一个闭合的复合物;其他转录因子与RNA聚合酶结合形成一个开放复合物.在这个过程中,反式作用因子的作用是:促进或抑制TFⅡD与TATA盒结合;促进或抑制RNA聚合酶与TFⅡD-DNA复合物的结合;促进或抑制转录起始复合物的形成.2, 反式作用因子:一般具有三个功能域(DNA识别结合域,转录活性域和结合其他蛋白结合域);能识别并结合上游调控区中的顺式作用元件;对基因的表达有正性或负性调控作用.3, 转录起始的调控:⑴反式作用因子的活性调节:①表达式调节——反式作用因子合成出来就具有活性;②共价修饰——磷酸化和去磷酸化,糖基化;③配体结合——许多激素受体是反式作用因子;④蛋白质与蛋白质相互作用——蛋白质与蛋白质复合物的解离与形成.⑵反式作用因子与顺式作用元件的结合:反式作用因子被激活后,即可识别并结合上游启动子元件和增强子中的保守性序列,对基因转录起调节作用.⑶反式作用因子的作用方式——成环,扭曲,滑动.⑷反式作用因子的组合式调控作用:每一种反式作用因子结合顺式作用元件后虽然可以发挥促进或抑制作用,但反式作用因子对基因调控不是由单一因子完成的而是几种因子组合发挥特定的作用.(四),真核生物转录后水平的调控机制答1),5,端加帽和3,端多聚腺苷酸化的调控意义:5,端加帽和3,端多聚腺苷酸化是保持mRNA 稳定的一个重要因素,它至少保证mRNA在转录过程中不被降解.(2),mRNA选择性剪接对基因表达调控的作用(3),mRNA运输的控制(五),受体的特点答:1,高度专一性;2,高度亲和性;3,可逆性;4,可饱和性;5,特定的作用模式(六),表皮生长因子介导的信号传导途径答:表皮生长因子受体是一个典型的蛋白酪氨酸激酶受体,这个信号转导途径的主要步骤是: 1, 受体二聚化的形成及其磷酸化:表皮生长因子与受体的结合使受体发生二聚化,从而改变受体构象,使蛋白酪氨酸激酶活性增强,受体自身的几个蛋白酪氨酸残基在激酶的作用下发生磷酸化.2, 募集接头蛋白Grb2:表皮生长因子受体自身被磷酸化后,不仅其激酶活性增强,而且其构象发生变化,从而适合与含SH2结构域的蛋白分子相结合.Grb2是作为接头蛋白结合到受体上. 3, 调控分子SOS的活化:SOS含有可与SH3结构域相结合的富含脯氨酸基序,当Grb2结合到磷酸化的表皮生长因子受体后,它的两个SH3结构域即可结合SOS,使之活化.4, 低分子量G蛋白Ras的活化:SOS可促进Ras释放GDP,结合GTP的反应,使Ras激活.活化的Ras作用其下游分子Raf,使之活化.Raf是MAPK级联反应的第一个分子,由此启动了MAPK的三级激活过程.5, MAPK的级联激活:Raf是一种MAPKKK,它作用于MEK,使之磷酸化而激活,活化的MEK在作用于MAPK家族的ERK1,使之磷酸化激活由此完成了三级激活.6, 转录因子的磷酸化及转录调控作用:活化的ERK可以转至细胞核内,使某些转录调控因子发生磷酸化,从而影响基因的转录.(七),cAMP信号转导途径答:1,组成:胞外信息分子(主要是胰高血糖素,肾上腺素和促肾上腺皮质激素),受体,G蛋白, AC,cAMP , PKA.2,途径:信号分子与受体结合,引起受体构象变化受体活化G蛋白活化后的G蛋白激活腺苷酸环化酶(AC),AC 催化ATP生成cAMP,cAMP 活化PKA,PKA使目标蛋白磷酸化,调节代谢酶的活性或调节基因的表达(八),IP3-Ca2+信号途径:信号分子与受体结合,引起受体构象变化受体活化G蛋白,活化后的G蛋白激活PLC,PLC 水解PIP2生成IP3 和DG,IP3 使钙通道打开,细胞内Ca2+升高,Ca2+ 与CaM结合,激活Ca2+-CaM依赖的蛋白激酶,Ca2+ -CaM依赖的蛋白激酶使目标蛋白磷酸化.(九),分子克隆中常用的工具酶及良好载体的条件答:(1),常用的工具酶1, 限制性核酸内切酶:是细菌产生的一类能识别和切割双链DNA分子内特定的碱基顺序的核酸水解酶.2, DNA连接酶:将两段DNA分子拼接起来的酶.3, DNA聚合酶:催化单核苷酸链延伸.4, 逆转录酶:依赖于RNA的DNA聚合酶,这是一种有效的转录RNA成为DNA的酶,产物DNA又称互补DNA.5, 末端脱氧核糖核酸转移酶:将脱氧核糖核酸加到DNA的3末端.6, 碱性磷酸酶:催化去除DNA,RNA等的5磷酸基团.7, 依赖DNA的RNA聚合酶:识别特异性启动子,RNA转录.(2),良好载体的条件1,必须有自身的复制子;2,载体分子上必须有限制性核酸内切酶的酶切位点,即多克隆位点,以供外源DNA插入;3,载体应具有可供选择的遗传标志,以区别阳性重组子和阴性重组子;4,载体分子必须有足够的容量;5,可通过特定的方法导入细胞;6,对于表达载体还应具备与宿主细胞相适应的启动子,前导顺序,增强子,加尾信号等DNA调控元件.(十),蓝-白筛选的原理答:某些质粒带有大肠杆菌的半乳糖苷酶基因片段,在半乳糖苷酶基因的基因区外又另外引入了一段含多种单一限制酶位点的DNA序列.这些位点上如果没有克隆外源性DN**段,在质粒被导入lac-的大肠杆菌后,质粒携带的半乳糖苷酶基因将正常表达,与大肠杆菌的半乳糖苷酶基因互补,产生有活性的半乳糖苷酶,加入人工底物X-gal和诱导剂IPTG后,出现蓝色的菌落.如果在多克隆位点上插入外源DN**段,将使lac Z基因灭活,不能生成半乳糖苷酶,结果菌落出现白色.由于这种颜色标志,重组克隆和非重组克隆的区分一目了然.(十一)SANGER双脱氧链终止法的原理答:DNA链中核苷酸以3',5'-磷酸二酯键连接,合成DNA所用的底物是2'-脱氧核苷三磷酸.2',3'ddNTP与普通dNTP不同,它们在脱氧核糖的3'位置缺少一个羟基.在DNA聚合酶作用下通过三磷酸基团掺入到延伸的DNA链中,但由于没有3'羟基,不能同后续的dNTP形成磷酸二酯键,因此,正在延伸的DNA链不能继续延伸.在DNA合成反应混合物的4种普通dNTP中加入少量的一种ddNTP,链延伸将与偶然发生但却十分特异的链终止竞争,产物是一系列的核苷酸链,其长度取决于引物末端到出现过早链终止位置间的距离.在4组独立酶反应中分别采用4种不同的ddNTP,结果将产生4组寡核苷酸,它们将分别终止于模板链的A,C,G或T位置.(十二),核酸分子杂交的原理答:具有互补序列的两条单链核酸分子在一定的条件下(适宜的温度及离子强度等)碱基互补配对结合,重新形成双链;在这一过程中,核酸分子经历了变性和复性的变化,以及在复性过程中个分子间键的形成和断裂.杂交的双方是待测核酸和已知序列.(十三),影响杂交的因素答:1,核酸分子的浓度和长度:核酸浓度越大,复性速度越快.探针长度应控制在50-300个碱基对为好.2,温度:温度过高不利于复性,而温度过低,少数碱基配对形成的局部双链不易解离,适宜的温度是较TM值低25度.3,离子强度:在低离子强度下,核酸杂交非常缓慢,随着离子强度的增加,杂交反应率增加.高浓度的盐使碱基错配的杂交体更稳定,所以进行序列不完全同源的核酸分子杂交时必须维持杂交反应液中的盐浓度和洗膜液中的盐浓度.4,杂交液中的甲酰胺:甲酰胺能降低核酸杂交的TM值.它有以下优点:在低温下探针更稳定;能更好地保留非共价结合的核酸.5,核酸分子的复杂性:是指存在于反应体系中的不同顺序的总长度.两个不同基因组DNA变性后的相对杂交速率取决于样品浓度绝对一致时的相对复杂性(即DNA中的碱基数).6,非特异性杂交反应:在杂交前应对非特异性杂交反应位点进行封闭,以减少其对探针的非特异性吸附作用.(十四),探针的种类和优缺点答:1,cDNA探针:通过逆转录获得cDNA后,将其克隆于适当的克隆载体,通过扩增重组质粒而使cDNA得到大量的扩增.提取质粒后分离纯化作为探针使用.它是目前应用最为广泛的一种探针.2,基因组探针:从基因组文库里筛选得到一个特定的基因或基因片段的克隆后,大量扩增,纯化, 切取插入片段,分离纯化为探针.3,寡核苷酸探针:根据已知的核酸顺序,采用DNA合成仪合成一定长度的寡核苷酸片段作为探针.4,RNA探针:采用基因克隆和体外转录的方法可以得到RNA或反义RNA作为探针.(十五),探针的标记法答:1,缺口平移法:此法是利用适当浓度的DNase Ⅰ在DNA双链上随机切割单链,造成单链切口.切口处产生一个5末端和3末端,3末端就可以作为引物,在大肠杆菌DNA聚合酶Ⅰ的催化下,以互补的DNA单链为摸板,依次将dNTP连接到切口的3末端的羟基上,合成新的DNA单链;同时DNA聚合酶Ⅰ的5→3的核酸外切酶活性在切口处将旧链从5末端逐步切除,新合成链不断延伸,从而使原DNA分子上的部分核苷酸残基被标记的核苷酸所取代.2,随机引物法:随机引物是人工合成的长度为6个寡核苷酸残基的寡聚核苷酸片段的混合物.对于任何一个用作探针的DN**段,随机引物混合物中都会有一些六核苷酸片段可以与之结合,起到DNA合成引物的作用.将这些引物与变性的DNA单链结合后,以4种dNTP(其中一种是标记物标记的dNTP)为底物,合成与探针DNA互补的切带有标记物的DNA探针.3,PCR标记法:在PCR反应底物中,将一种dNTP换成标记物标记的dNTP, 这样标记的dNTP就在PCR反应的同时掺入到新合成的DNA链上.4,末端标记法:只是将DN**段的一端进行标记.(十六),PCR的基本原理答PCR是在试管中进行的DNA复制反应,基本原理是依据细胞内DNA半保留复制的机理,以及体外DNA分子于不同温度下双链和单链可以互相转变的性质,人为地控制体外合成系统的温度,以促使双链DNA变成单链,单链DNA与人工合成的引物退火,然后耐热DNA聚合酶以dNTP为原料使引物沿着单链模板延伸为双链DNA.PCR全过程每一步的转换是通过温度的改变来控制的.需要重复进行DNA模板解链,引物与模板DNA结合,DNA聚合酶催化新生DNA的合成,即高温变性,低温退火,中温延伸3个步骤构成PCR反应的一个循环,此循环的反复进行,就可使目的DNA得以迅速扩增.DNA模板变性:模板双链DNA 单链DNA,94℃.退火:引物+单链DNA 杂交链,引物的Tm值.引物的延伸:温度至70 ℃左右, Taq DNA聚合酶以4种dNTP为原料,以目的DNA为模板,催化以引物3'末端为起点的5'→3'DNA链延伸反应,形成新生DNA链.新合成的引物延伸链经过变性后又可作为下一轮循环反应的模板PCR,就是如此反复循环,使目的DNA得到高效快速扩增.(十七),PCR引物设计的基本要求答:1,引物长度一般为15~30个核苷酸.过短影响PCR的特异性,过长会提高相应退火温度,使延伸温度超过TaqDNA聚合酶最适温度74℃,影响产物的生成.2,引物的碱基尽可能随机,避免出现嘌呤,嘧啶碱基堆积现象.3'端不应有连续3个G和C.否则会使引物和模板错误配对.G+C含量一般占45% -55%.3'端和5'端引物具有相似的Tm值,Tm 值计算公式:Tm=4(G+C)+ 2(A+T)3,引物自身不应存在互补序列以避免折叠成发夹结构.引物的连续互补序列,一般不超过3bp. 4,两个引物之间不应存在互补序列,尤其应避免3'端的互补重叠.5,引物与非特异扩增区的序列的同源性不超过70%,引物3'末端连续8个碱基在待扩增区以外不能有完全互补序列,否则易导致非特异性扩增.6,引物3'端碱基是引发延伸的起点,因此一定要与模板DNA配对.引物3'端最佳碱基选择是G 和C,形成的碱基配对比较稳定.7,引物与模板结合时,引物的5'端最多可以游离十几个碱基而不影响PCR反应的进行.8,引物的5'端可以修饰,如附加限制酶位点,引入突变位点,用生物素,荧光物质,地高辛标记,加入其它短序列包括起始密码子,终止密码子等.(十九),影响大肠杆菌系统外源基因表达的因素答:1,启动子的强弱;2,基因的剂量;3,影响RNA转录和翻译效率的因素:SD序列,mRNA;4,外源基因密码子的选择;5,表达产物的大小;6,表达产物的稳定性.(二十),大肠杆菌系统表达外源基因必须具备的条件答:1,要求外源基因的编码区不能含有内含子;2,表达的外源片段要位于大肠杆菌启动子的下游,并形成正确的阅读框架;3,转录出的mRNA必须有与大肠杆菌16S rRNA3,末端相匹配的SD序列,才能被有效的翻译成蛋白质.4,蛋白产物必须稳定,不易被细胞内蛋白酶快速降解,且对宿主无害.(二十三),基因敲除的基本程序答:通过DNA同源重组,使得胚胎干细胞特定的内源基因被破坏而造成功能丧失,然后通过胚胎干细胞介导得到该基因丧失的小鼠模型的过程称为基因敲除.1, 打靶载体的构建:同源序列要足够长,要含有筛选用的标志基因.2, 胚胎干细胞的体外培养3, 打靶载体导入胚胎干细胞4, 同源重组胚胎干细胞的筛选5, 基因敲除胚胎干细胞注射入胚泡6, 胚泡植入假孕小鼠的子宫中7, 杂交育种获得纯合的基因敲除动物(二十四),DNA芯片的原理答:DNA芯片技术就是一种大规模的集成的固相核酸分子杂交,以大量已知碱基序列的寡核苷酸片段为探针,检测样品中哪些核酸序列与其互补,然后通过定性定量分析得出待测样品的基因序列及表达的信息.其方法包括芯片的制备,样品的准备,分子杂交和检测分子.(二十五),诱变剂的作用机制答:1,碱基的类似物诱发突变2,改变DNA的化学结构3,结合到DNA分子上诱发移码突变4,紫外线及其他射线引起的DNA分子的变化(二十六),突变类型及其遗传效应。

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