动物细胞工程PPT课件
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动物细胞工程ppt课件
4.气体环境 ①气体的组成及作用 95%空气（O2）：细胞代谢所必需
5%CO2：维持培养液的pH ②培养装置: 培养皿或松盖培养瓶 置于 CO2培养箱中进行培养
（含有95%空气和5%CO2的混合气体）
培养皿
培养瓶
CO2培养箱
二、动物细胞培养的过程
①培养前用什么方法分散成单个细 胞？ ②体外培养动物细胞有哪些类型？ ③什么是细胞贴壁？什么是接触抑 制？ ④什么是原代培养和传代培养？ ⑤为什么要进行分瓶培养？怎么处 理？ ⑥动物细胞培养与植物组织培养有 什么相同之处与不同之处？
像建立骨髓库一样，有研究团队正在尝试建立HLA（Human Leukocyte Antigen，人类白细胞抗原）多态性丰富的iPS细胞库，可以为 需要的人找到HLA匹配度较高的iPS细胞，这样不仅可以节省时间、成本 ，还能减轻异体干细胞移植后发生的免疫排斥反应。
二、拓展应用 现在关于iPS细胞的研究正在不断深入。请你从以下两个方面来查阅
基本营养：水、无机盐、有机碳源、有机氮源 特殊物质：维生素、血清
血清
含有尚未研究清楚的细胞所需的营养物质 营养基构成：合成培养基 + 血清等一些天然成分
将细胞所需的营养物质按种类和所需量严格配制而成 的培养基。
培养基的类型：固体培养基 or 液体培养基（培养液）
一、动物细胞培养的条件 2.无菌、无毒的环境 措施1: 灭菌处理——对象？ 培养液和所有培养用具 措施2: 操作在无菌环境下进行。 措施3: 培养液中适量添加 抗生素 。——抑制细菌生长 措施4：定期更换培养液——目的？清除代谢物，防止细胞代谢物积累对
【思考】动物细胞的整个培养过程中可能多次用到胰蛋白酶或胶原蛋白酶？
第一次使用的目的是使组织细胞分散开；
5%CO2：维持培养液的pH ②培养装置: 培养皿或松盖培养瓶 置于 CO2培养箱中进行培养
（含有95%空气和5%CO2的混合气体）
培养皿
培养瓶
CO2培养箱
二、动物细胞培养的过程
①培养前用什么方法分散成单个细 胞？ ②体外培养动物细胞有哪些类型？ ③什么是细胞贴壁？什么是接触抑 制？ ④什么是原代培养和传代培养？ ⑤为什么要进行分瓶培养？怎么处 理？ ⑥动物细胞培养与植物组织培养有 什么相同之处与不同之处？
像建立骨髓库一样，有研究团队正在尝试建立HLA（Human Leukocyte Antigen，人类白细胞抗原）多态性丰富的iPS细胞库，可以为 需要的人找到HLA匹配度较高的iPS细胞，这样不仅可以节省时间、成本 ，还能减轻异体干细胞移植后发生的免疫排斥反应。
二、拓展应用 现在关于iPS细胞的研究正在不断深入。请你从以下两个方面来查阅
基本营养：水、无机盐、有机碳源、有机氮源 特殊物质：维生素、血清
血清
含有尚未研究清楚的细胞所需的营养物质 营养基构成：合成培养基 + 血清等一些天然成分
将细胞所需的营养物质按种类和所需量严格配制而成 的培养基。
培养基的类型：固体培养基 or 液体培养基（培养液）
一、动物细胞培养的条件 2.无菌、无毒的环境 措施1: 灭菌处理——对象？ 培养液和所有培养用具 措施2: 操作在无菌环境下进行。 措施3: 培养液中适量添加 抗生素 。——抑制细菌生长 措施4：定期更换培养液——目的？清除代谢物，防止细胞代谢物积累对
【思考】动物细胞的整个培养过程中可能多次用到胰蛋白酶或胶原蛋白酶？
第一次使用的目的是使组织细胞分散开；
动物细胞工程(课件)-高二生物人教版(2019)选择性必修3
已成功的动物细胞融合实例：
生物种类 酵母菌—鸡 人—胡萝卜 人—小鼠
细胞来源
成功年代
原生质体—血红细胞
1975年
腹水癌细胞—原生质体
1976年
纤维肉瘤细胞—畸胎瘤细胞 1978年
一、动物细胞融合
概念： 指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞 的过程。
结果： 形成单核的杂交细胞 原理： 细胞膜的流动性
4、气体环境 O2和CO2（95%空气和5% CO2 ）
维持培养液的pH
植物组织培养和动物细胞培养的比较
比较项目 原理
培养基性质 培养基特有成分
培养结果 培养目的
植物组织培养
细胞的全能性
固体培养基
蔗糖 植物激素
植物体
快速繁殖、培育 无病毒植株
动物细胞培养 细胞增殖
液体培养基
葡萄糖 动物血清
细胞株、细胞系 获得细胞或细胞
2、保护濒危物种；
3、医药卫生领域生产 医用蛋白质及组织器官 的移植；
4、了解胚胎发育和衰 老过程；追踪研究疾病 的发展过程和治疗疾病；
体细胞核移植技术存在的问题：
1、成功率比较低（平均不到10%）； 2、大多存在健康问题； 3、克隆动物食品安全问题。
此外，体细胞核移植后的重组细胞直接发育成新个体 属于无性繁殖，产生的后代无更大变异性，而环境是 多变的，易造成该个体适应能力降低，易被淘汰。
细胞群
产 生
化学性质单一、 特异性强的抗体 （单克隆抗体）
二、单克隆抗体
1975年，两位科学家创 造性地解决了这个问题
1984年两人因此获得诺 贝尔生理学﹠医学奖
科勒
米尔斯坦
一个(免疫过的)B细胞 一个骨髓瘤细胞
第二章细胞工程第2节动物细胞工程 教学课件人教版高中生物选择性必修3
旁栏边角想一想 动物细胞培养时,除了添加糖类、氨基酸等必要的营养成分外,往往还需添 加血清等一些天然成分,原因是什么? 提示 人们对细胞所需的营养物质尚未全部研究清楚,血清等一些天然成分 的营养成分比较齐全,可以弥补人工培养基的不足。
结论语句辨一辨
1.在25 ℃的实验条件下可顺利完成人神经细胞的培养。( × )
结论语句辨一辨 1.胚胎干细胞可以来源于早期胚胎,也可以来源于成熟个体。( × ) 2.成体干细胞没有组织特异性,可以分化成特定的细胞或组织,不具有发育 成完整个体的能力。( × ) 3.由iPS细胞产生的特定细胞,可以在新药的测试中发挥重要作用。( √ ) 4.体外培养胚胎干细胞可以不断增殖而不发生分化。( √ )
第2章细胞工程
第2节 动物细胞工程
第1课时 动物细胞培养 第2课时 动物细胞融合技术与单克隆抗体 P34 第3课时 动物体细胞核移植技术和克隆动物 P63
课程标准
1.认同动物细胞培养是模拟体内生理条件在体外进行的培养, 分析动物细胞培养需要的基本条件。 2.尝试构建动物细胞培养的基本流程,比较动物细胞培养和植 物组织培养的异同。 3.概述干细胞的分类,探讨干细胞在临床上的应用及面临的风 险,理性看待生物技术。
(2)培养条件 ①营养条件:将细胞所需的营养物质按种类和所需量严格配制而成的培养 基,称为合__成__培__养__基__,在使用时,通常需要加入___血__清____等一些天然成分。 ②无菌、无毒的环境:在体外培养细胞时,需要对培养液和所有培养用具进 行灭菌处理以及在无菌环境下进行操作。培养液还需要定期更换,以便 清__除__代__谢__物__,防止其积累对细胞自身造成危害。 ③适宜的温度、pH和渗透压:维持细胞生存必须有适宜的温度。哺乳动物 细胞培养的温度多以_3_6_._5_±__0_.5__ ℃为宜。多数动物细胞生存的适宜pH为 __7_._2_~_7_.4___。 ④适宜的气体环境:通常采用培养皿或_松_盖__培__养__瓶__,并将它们置于含有95% 空气和5%CO2的混合气体的_C_O_2_培__养__箱__中进行培养。O2是细胞代谢所必 需的,CO2的主要作用是__维__持__培__养__液__的__p_H___。
《动物细胞工程》课件
1
2
3
利用动物细胞工程可以将外源基因导入动物细胞，培育出转基因动物，提高其生产性能和抗病能力。
转基因技术
动物细胞工程可用于生产疫苗，通过培养动物细胞并表达病毒抗原，制备出高效、安全的动物疫苗。
动物疫苗
动物细胞工程可以用于构建生物反应器，通过大规模培养动物细胞生产各类蛋白质和生物活性物质。
生物反应器
选择适当的细胞
通过物理、化学或生物方法诱导细胞融合。常用的物理方法有电融合和激光融合，化学方法有聚乙二醇（PEG）诱导融合，生物方法有病毒诱导融合。
诱导细胞融合
通过特定的筛选和鉴定方法，从大量细胞中筛选出融合细胞，并进行鉴定。常用的筛选和鉴定方法有荧光染色法、免疫学检测法和分子生物学检测法等。
筛选和鉴定融合细胞
技术难度大
动物细胞工程的实施需要高超的技术水平和精细的操作技巧，如何提高技术成熟度和降低成本是亟待解决的问题。
伦理和法律问题
动物细胞工程的实践涉及到伦理和法律问题，如人道关怀、动物权益保护等，需要在实践中严格遵守相关法规和伦理准则。
安全性和有效性问题
动物细胞工程产品的安全性和有效性需要经过严格的评估和验证，以确保其不会对人类健康和生态环境造成不良影响。
1970年代
随着技术的不断进步和应用领域的拓展，动物细胞工程在医学、农业、工业等领域得到广泛应用。
1990年代至今
02
动物细胞培养技术
细胞具有增殖和分化的能力
动物细胞具有自我复制和分化的能力，可以在适宜的环境下生长和繁殖。
03
动物细胞融合技术
选择要进行融合的细胞，通常选择同种或同种的细胞进行融合。
感谢观看
THANKS
基因转移技术
02
2.2动物细胞工程课件-高二下学期生物人教版(2019)选择性必修3
iPS诱导方法？ 细胞发 1、转录因子转化法
生转化
干细胞中有一些特殊的转录因 子，对于有重要作用 转录因子基因导入动物体细胞
iPS细胞
2.化学诱导法 分化 通过特定的化学小分子组合的
作用，诱导动物体细胞转化为 干细胞
二 动物细胞融合技术与单克隆抗体
1.传统方法？缺陷？ 2.若要得到大量的单一抗体，我们该如何去做？
②成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种 培育等的重要手段。 ③利用细胞融合技术而发展起来的杂交瘤技术，为制 造单克隆抗体开辟了新途径。
二 动物细胞融合技术与单克隆抗体 2.单克隆抗体制备过程
获得能产生特定抗
体的B淋巴细胞
多种
选择性培养基 第一次筛选
一个B淋巴细胞
克隆化 培养
B淋巴细胞群
产生
单克隆抗体
存在什么问题？ 浆细胞不能增殖
单克隆抗体（纯度高、特异性强、可大量制备）
1975年，英国科学家米尔斯坦和德国科学 家科勒设计实验获得了单克隆抗体。 1984年获得诺贝尔生理学或医学奖。
要实现这一方案，需要解决哪些困难？
细胞融合、筛选、大规模培养
二 动物细胞融合技术与单克隆抗体 1.动物细胞融合技术
个体的能力
官甚至_个___体__
分化成心肌细胞、神经元和 造血干细胞等
造血干细胞用于治疗白 血病；神经干细胞用于 治疗帕金森病、阿尔茨 海默病；精原干细胞
治疗小鼠的镰状细胞 贫血、阿尔茨海默病、 心血管疾病等
转入相关因子
取成纤维细胞等
病 人
移植
神经元 胰岛细胞
血细胞
肝细胞
肠上皮细胞 心肌细胞
iPS细胞用于治疗人类疾病示意图
种类
动物细胞工程(完整ppt课件
.
动物细胞培养过程
动物胚胎或幼龄动
胰蛋白酶
加培养液
单个细胞
细胞
物的组织、器官 剪碎
制成 悬浮
液
细胞部系分细胞“癌变”，细胞株
遗传物质改变，无 限传代
养原 代 培
壁细 胞 贴
细胞
50代细胞 剥离、分瓶
10代 细胞
动物细胞培养不能 最终培养成动物体
传代培养
.
动物细胞生长特性
细胞贴壁：
悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上， 称为细胞贴壁。
3、体细胞核移植方法生产的克隆动物是对体细 胞供体动物进行了100%的复制吗？为什么？
不是，克隆动物绝大部分DNA来自供体细胞 核，但核外还有少部分DNA（如线粒体DNA） 来自受体卵母细胞
4.动物克隆实例很多，为何多莉就举世闻名呢？
在1997年2月英国罗斯林研究所维尔穆特博士科研组 公布体细胞克隆羊“多莉”培育成功之前，胚胎细胞核 移植技术已经有了很大的发展。实际上，“多莉”的克 隆在核移植技术上沿袭了胚胎细胞核移植的全部过程， 但这并不能减低“多莉”的重大意义，因为它是世界上 第一例经体细胞核移植出生的动物，是克隆技术领域研 究的巨大突破。这一巨大进展意味着：在理论上证明了，
程
妊娠、出生
克隆羊多利
.
思考题
１、在体细胞的细胞核移植到受体卵母细胞之 前，为什么必须先去掉受体卵母细胞的核？
为使核移植动物的遗传物质全部来自有利用 价值的动物提供的细胞。 ２、用于核移植的供体细胞一般都选用传代10 代以内的细胞，为什么？ 10代以内的细胞一般保持正常二倍体的核型， 未发生突变
.
脱组 分织
化
植物细胞B
胞 促进融合 壁
的方法？
动物细胞培养过程
动物胚胎或幼龄动
胰蛋白酶
加培养液
单个细胞
细胞
物的组织、器官 剪碎
制成 悬浮
液
细胞部系分细胞“癌变”，细胞株
遗传物质改变，无 限传代
养原 代 培
壁细 胞 贴
细胞
50代细胞 剥离、分瓶
10代 细胞
动物细胞培养不能 最终培养成动物体
传代培养
.
动物细胞生长特性
细胞贴壁：
悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上， 称为细胞贴壁。
3、体细胞核移植方法生产的克隆动物是对体细 胞供体动物进行了100%的复制吗？为什么？
不是，克隆动物绝大部分DNA来自供体细胞 核，但核外还有少部分DNA（如线粒体DNA） 来自受体卵母细胞
4.动物克隆实例很多，为何多莉就举世闻名呢？
在1997年2月英国罗斯林研究所维尔穆特博士科研组 公布体细胞克隆羊“多莉”培育成功之前，胚胎细胞核 移植技术已经有了很大的发展。实际上，“多莉”的克 隆在核移植技术上沿袭了胚胎细胞核移植的全部过程， 但这并不能减低“多莉”的重大意义，因为它是世界上 第一例经体细胞核移植出生的动物，是克隆技术领域研 究的巨大突破。这一巨大进展意味着：在理论上证明了，
程
妊娠、出生
克隆羊多利
.
思考题
１、在体细胞的细胞核移植到受体卵母细胞之 前，为什么必须先去掉受体卵母细胞的核？
为使核移植动物的遗传物质全部来自有利用 价值的动物提供的细胞。 ２、用于核移植的供体细胞一般都选用传代10 代以内的细胞，为什么？ 10代以内的细胞一般保持正常二倍体的核型， 未发生突变
.
脱组 分织
化
植物细胞B
胞 促进融合 壁
的方法？
动物细胞工程(第二课时)高二生物课件(人教版2019选择性必修3)
实战训练
3.动物和人体内具有分裂和分化能力的细胞称为干细胞。对右 图的相关叙述中，错误的是( ) A.a过程可表示干细胞的自我更新 B.b、c过程表示干细胞具有分化能力 C.a、b、c过程中细胞的遗传信息表达情况不同 D.a、b、c过程中遗传物质发生了定向改变
问题2:胚胎干细胞必须从胚胎中获取，这涉及伦理问题，因而限制了 它在医学上的应用。我们还有其他途径干细胞吗？
A.iPS细胞分化的实质是基因的选择性表达，细胞种类增多 B.iPS细胞分化成的多种细胞中所有核酸均相同，蛋白质却不完全相同 C.若将突变的相关基因替换，或许可以起到治疗该病的作用 D.经体外诱导产生造血干细胞，在小鼠骨髓中能够增殖分化出B细胞
实战训练
11.人体骨髓中的造血干细胞在体内环境下能分裂、分化形成红细 胞、白细胞和血小板。现代科学研究发现,在体外一定条件下培养 造血干细胞,它可以分裂、分化形成神经细胞。下列有关的叙述不 正确的是 ( )
容易发生突变 D.“iPS细胞”分化成人体多种组织细胞，是因为它具有不同于其他细
胞的特定基因
实战训练
9.有一个婴儿在出生后医院为他保留了脐带血,在他的生长发育过程中如果 出现了某种难治疗的疾病,就可以通过脐带血中的干细胞来为他治病,下列关 于这个实例说法正确的是( )
A.用干细胞培育出人体需要的器官用来移植治病,需要激发细胞的所有全能 性
实战训练
4.如图2-2-3是胚胎干细胞潜能示意图,相关叙述错误的是 ( ) A.由细胞形态判断,4种细胞中细胞②最可能连续分裂 B.胚胎干细胞能分化为各种细胞的实质是遗传物质相同 C.分化得到的各种细胞,功能不同的主要差异是特定蛋白不同 D.定向诱导胚胎干细胞分化形成组织或器官,进行自体移植可避免免疫排斥
动物细胞工程复习课件
型的C细胞，因此需用__________培养基筛选出D细3胞用
于培养，D细胞的名称是 选择性，其特点是
________________________________杂__交__瘤__细__胞_。
既能无限增殖又能产生特异性抗体
(4)在培养时通过___有__丝___分裂方式大量繁殖。D细胞体 外培养需要注意的条件是（要求答5项） __________________________________。 无菌、无毒的环境；充足的营养；适宜的温度和pH；适宜 的气（体5）环单境克隆抗体在疾病的诊断、治疗和预防方面，与 常规抗体相比，其特点是_________________。
承了_________双__亲__细___胞__的__遗_ 传物质
，因此不仅能分泌 特__异__性__抗__体___，还
有
大量增殖本领。
（3）该方案的目的是____制__备___单__克__隆__抗___体_______。
方法——抗 原-抗体杂交
法
在单克隆抗 体制备过程 中，两次筛 选的原理和 方法是不相 同的。
鼠体内的
细胞ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ从小鼠体内提取分离该细胞之前，
应给小鼠效注应射B_____________类物质。
（2）d过程是一个_抗__原__________过程，该过程的进 行常用_____________或_细__胞___融__合_____的诱导。
(3)假设聚乙仅二考醇虑某两个细灭胞活的的融病合毒，则可形成 种类
1单克隆抗体的概念
制备原理：将单个B 淋巴细胞和骨髓瘤 细胞细胞融合成杂 交瘤细胞分泌的
单克隆抗体：单
个B细胞克隆产
生的化学性质单
一、特异性强的
抗体
读下面一段资料， 找出单克隆抗体的 概念
于培养，D细胞的名称是 选择性，其特点是
________________________________杂__交__瘤__细__胞_。
既能无限增殖又能产生特异性抗体
(4)在培养时通过___有__丝___分裂方式大量繁殖。D细胞体 外培养需要注意的条件是（要求答5项） __________________________________。 无菌、无毒的环境；充足的营养；适宜的温度和pH；适宜 的气（体5）环单境克隆抗体在疾病的诊断、治疗和预防方面，与 常规抗体相比，其特点是_________________。
承了_________双__亲__细___胞__的__遗_ 传物质
，因此不仅能分泌 特__异__性__抗__体___，还
有
大量增殖本领。
（3）该方案的目的是____制__备___单__克__隆__抗___体_______。
方法——抗 原-抗体杂交
法
在单克隆抗 体制备过程 中，两次筛 选的原理和 方法是不相 同的。
鼠体内的
细胞ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ从小鼠体内提取分离该细胞之前，
应给小鼠效注应射B_____________类物质。
（2）d过程是一个_抗__原__________过程，该过程的进 行常用_____________或_细__胞___融__合_____的诱导。
(3)假设聚乙仅二考醇虑某两个细灭胞活的的融病合毒，则可形成 种类
1单克隆抗体的概念
制备原理：将单个B 淋巴细胞和骨髓瘤 细胞细胞融合成杂 交瘤细胞分泌的
单克隆抗体：单
个B细胞克隆产
生的化学性质单
一、特异性强的
抗体
读下面一段资料， 找出单克隆抗体的 概念
7动物细胞工程(汉水丑生课件)
即细胞产物的工厂化生产。这些细胞产物包括蛋白质、脂肪、糖类、药物、香 料、生物碱等。
动物细胞工程
侯伟（汉水丑生）
汉水丑生微信公众号 专注于生物教学和高考
动物细胞工 程常用技术
动物细胞培养 核移植
动物细胞融合 单克隆抗体技术
一、动物细胞培养 1、概念：从动物机体中取
出相关的组织，将它分散成单 个细胞，然后放在适宜的培养 基中，让这些细胞_生__长__和__增__殖_。
时，细胞要能够贴附于底物上才能生长增殖，这就要求培养瓶或培养皿的内表面 光滑、无毒，易于贴附。以后，细胞进行_有__丝___分裂，数量不断增多，当贴壁细
胞分裂生长到表面相互接触时，细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的 __接__触__抑__制____。人们通常将__动__物__组__织__消__化__后__的__初__次__培__养___称为原代培养。
人工种皮 胚状体 人工胚乳
抗压、保水、透气 具有发育成完整植株的能力 保证胚状体生长发育的必需物质
__胚__状__体___：是指在组织培养过程中，在植物组织块或愈伤组织上产生的一种结构，它与正常 受精卵发育形成的胚有类似的结构和发育过程。
思考1、为了促进胚状体的生长发育，还可以向人工种皮中加入哪些物质？ 分析：可以加入适量的养分、无机盐、有机碳源以及农药、抗生素、有益菌等。为了促进胚 状体的生长发育，还可以向人工种皮中加入一些__植__物__生__长__调__节__剂____。
3、动物细胞培养的条件 ①无菌、无毒的环境：首先应保证被培养的细胞处于无菌、无毒的环境，即对培养液和所有 培养用具进行__灭__菌__处理。通常还要在细胞培养液中添加一定量的__抗__生__素____，以防培养过程中 的污染。此外，应__定__期__更__换__培__养__液____，以便清除代谢产物，防止细胞代谢产物积累对细胞自身 造成危害。 ②营养：细胞体外培养所需营养物质与体内基本相同，例如，需要有糖、氨基酸、 __促__生__长__因__子__、无机盐、微量元素等。将细胞所需的上述营养物质按其种类和所需数量严格配制 而成的培养基，称为_合__成___培养基。由于人们对细胞所需的营养物质还没有完全搞清楚，因此， 在使用合成培养基时，通常需加入__血__浆__、__血__清___等一些天然成分。 ③温度和pH：细胞体外培养的适宜温度一般与动物的__体__温__相近。多数细胞生存的适宜pH为 ___7_._2_—__7_._4__。 ④气体环境：细胞培养所需气体主要有O2和CO2，O2是细胞代谢所必需的，CO2的主要作用是 __维__持__培__养__液__的__p_H____ 。 进 行 细 胞 培 养 时 ， 通 常 采 用 培 养 皿 或 松 盖 培 养 瓶 ， 将 其 置 于 含 __9_5_%_空__气__加__5_%_C_O_2 __的混合气体的培养箱中进行培养。
动物细胞工程
侯伟（汉水丑生）
汉水丑生微信公众号 专注于生物教学和高考
动物细胞工 程常用技术
动物细胞培养 核移植
动物细胞融合 单克隆抗体技术
一、动物细胞培养 1、概念：从动物机体中取
出相关的组织，将它分散成单 个细胞，然后放在适宜的培养 基中，让这些细胞_生__长__和__增__殖_。
时，细胞要能够贴附于底物上才能生长增殖，这就要求培养瓶或培养皿的内表面 光滑、无毒，易于贴附。以后，细胞进行_有__丝___分裂，数量不断增多，当贴壁细
胞分裂生长到表面相互接触时，细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的 __接__触__抑__制____。人们通常将__动__物__组__织__消__化__后__的__初__次__培__养___称为原代培养。
人工种皮 胚状体 人工胚乳
抗压、保水、透气 具有发育成完整植株的能力 保证胚状体生长发育的必需物质
__胚__状__体___：是指在组织培养过程中，在植物组织块或愈伤组织上产生的一种结构，它与正常 受精卵发育形成的胚有类似的结构和发育过程。
思考1、为了促进胚状体的生长发育，还可以向人工种皮中加入哪些物质？ 分析：可以加入适量的养分、无机盐、有机碳源以及农药、抗生素、有益菌等。为了促进胚 状体的生长发育，还可以向人工种皮中加入一些__植__物__生__长__调__节__剂____。
3、动物细胞培养的条件 ①无菌、无毒的环境：首先应保证被培养的细胞处于无菌、无毒的环境，即对培养液和所有 培养用具进行__灭__菌__处理。通常还要在细胞培养液中添加一定量的__抗__生__素____，以防培养过程中 的污染。此外，应__定__期__更__换__培__养__液____，以便清除代谢产物，防止细胞代谢产物积累对细胞自身 造成危害。 ②营养：细胞体外培养所需营养物质与体内基本相同，例如，需要有糖、氨基酸、 __促__生__长__因__子__、无机盐、微量元素等。将细胞所需的上述营养物质按其种类和所需数量严格配制 而成的培养基，称为_合__成___培养基。由于人们对细胞所需的营养物质还没有完全搞清楚，因此， 在使用合成培养基时，通常需加入__血__浆__、__血__清___等一些天然成分。 ③温度和pH：细胞体外培养的适宜温度一般与动物的__体__温__相近。多数细胞生存的适宜pH为 ___7_._2_—__7_._4__。 ④气体环境：细胞培养所需气体主要有O2和CO2，O2是细胞代谢所必需的，CO2的主要作用是 __维__持__培__养__液__的__p_H____ 。 进 行 细 胞 培 养 时 ， 通 常 采 用 培 养 皿 或 松 盖 培 养 瓶 ， 将 其 置 于 含 __9_5_%_空__气__加__5_%_C_O_2 __的混合气体的培养箱中进行培养。
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课堂反馈练习
1、在动物细胞培养过程中遗传物质发生改变的细胞是 --------------------（ A ）
A．细胞系 C．原代细胞 B．细胞株 D．传代细胞
讨论
1、动物细胞培养的原理是什么？
2、从动物机体中要取出哪些相关组织？并 解释原因。
3、组织分散成单个细胞的方法是什么？ 其理论依据是什么？
4、动物细胞体外培养需要满足哪些条件？
阅读课本 观察图片， 简述动物 细胞培养 的基本过 程
2、过程
动物胚胎或幼龄动 胰蛋白酶 单个细胞 细胞 制成 悬浮 物的组织、器官 剪碎 液 细胞系 原 细 细胞株 部分细胞“癌变”， 代
如何界定原代培养和传代培养；细胞株和细 胞系？
随细胞增多，细胞就会停止分裂增殖
细胞株 细胞系 遗传物质改变
细胞 悬浮 液
10代 细胞
50代 细胞
传代培养
无限传 代
原代培养
多数组织细胞固定在表面生长和分裂。
思考讨论
1.动物细胞培养取材时，一般是取胚胎组织或幼龄动 物的组织或器官，请解释原因。
细胞的衰老与动物机体的衰老有着密切的关系，细胞的增殖 能力与供体的年龄有关，幼龄动物细胞增殖能力强，有丝分 裂旺盛，老龄动物则相反。所以，一般来说幼年动物的组织 细胞比老年动物的组织细胞易于培养。同样，组织细胞的分 化程度越低，则增殖能力越强，所以更容易培养。
问题： 1、培养基的类型
（1）天然培养基：营养价值高，成分复杂 （2）合成培养基：成分明确，便于控制试验条件
2、动物细胞培养液的主要成分是什么？ 较植物组织培养基有何独特之处？
主要成分：葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生 素和动物血清等。 独特之处有：1、液体培养基（动物体细胞 大都生活在液体的环境） 2、成分中有动 物血清等
细胞贴壁过程
3.有关概念:
• 原代培养：从机体取出后立即培养的细胞为原代细胞。 培养的第1代细胞与传10代以内的细胞称为原代培养。 • 传代培养：将原代细胞从培养瓶中取出，配制成细胞 悬浮液，分装到两个或两个以上的培养瓶中继续培养， 称为传代培养。 • 细胞株：原代细胞一般传至10代左右细胞生长停滞， 大部分细胞衰老死亡，少数细胞存活到40~50代，这 种传代细胞为细胞株。 • 细胞系：细胞株传代至50代后又出现细胞生长停滞状 态，只有部分细胞由于遗传物质的改变，使其在培养 条件下可以无限制传代，这种传代细胞为细胞系。 • 细胞株和细胞系的区别： 细胞系的遗传物质改变，具 有癌细胞的特点，失去接触抑制，容易传代培养。
遗传物质改变，无 限传代
加培养液
培 养
胞 贴 壁
细胞 动物细胞培养不能 最终培养成动物体
50代细胞
剥离、分瓶
10代 细胞
传代培养
动物细胞生长特性
细胞贴壁： 悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上， 称为细胞贴壁。 要求： 培养瓶或培养皿的内表面光滑、无毒、易于贴 附。 细胞的接触抑制： 当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞 就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑 制。
拓展---动物组织或细胞培养的难易程度
幼体组织或细胞 ＞ 老龄组织或细胞 分化程度低的组织或细胞 ＞ 分化程度高的组织或细胞 肿瘤组织或细胞 ＞ 正常组织或细胞
2、人类一般保存的是哪类细胞呢？为什么？
保存10代以内的细胞，因为其生物学特性未发生大 的变化，最接近于体内组织或细胞的生长特性，很适合 用于药物测试、基因表达等实验研究。 3、在动物细胞培养过程中，为什么要用胰蛋白酶对 取出的动物组织进行处理？ 胰蛋白酶处理动物组织，可以使动物组织细胞 间的胶原纤维和细胞外的其他成分酶解，获得单 个细胞;成块的组织细胞靠在一起,彼此限制了细 胞的生长和增殖.
பைடு நூலகம்
课堂小结
动物细胞和组织培养（原理、材料 选择及原因、一般过程、培养条件、 主要应用）
注意： ①概念理解：原代培养、传代培养、细胞株 、 细胞系 ②胰蛋白酶处理的原因、目的和注意事项 ③动物细胞培养和植物组织培养的区别
思考与探究： 如何用细胞培养技术，为烧伤病 人植皮？
取该患者的皮肤进行
细胞培养,获得足量的细 胞后再移植
动物细胞工程
—动物细胞与组织培养
烧伤病人图片
异体皮肤移植图片
动物细胞工程 的基础
动物细胞培养
动物 细胞 工程 技术 动物细胞融合 单克隆抗体制备 细胞核移植 体细胞克隆
动物细胞培养
1、概念（人教版）
动物细胞培养就是从动物机体中取出 相关的组织，将它分散成单个细胞，然后， 放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和 繁殖。
进一步思考：
①.植物组织培养过程将组织分散成单个细胞的吗？
否 ②.胰蛋白酶的作用是什么呢？由此可说明细胞间的物质是什 么成份？ 胰蛋白酶水解蛋白质 蛋白质 ③.细胞膜的主要成份是什么？胰蛋白酶能将细胞消化掉吗？ 蛋白质和磷脂 能
④.既然胰蛋白酶能将细胞消化掉，那将动物组织分散成单个
细胞要注意什么问题呢？能够用胃蛋白酶代替胰蛋白酶吗？ 为什么？ 注意时间的控制 不能，因为两者的最适PH不同，而正常组织细胞的生存环境与 胰蛋白酶的最适PH较接近
多细胞动物和人体的细胞 都生活在内环境中，根据你所 学的知识，认为体外培养细胞 应该模拟内环境的哪些内容呢？
动物细胞培养条件：
1、无菌、无毒的环境 （添加一定量的抗生素，定期更换培养液） 2、必须的营养物质 （葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、核酸、 嘌呤、嘧啶、激素、生长因子、动物血清等。） 3、适宜的温度 36.5+（-）0.5度 4、充足的氧气和适宜的酸碱度 O2和CO2（95%空气和5% CO2 ） 保证细胞顺利的 生长增殖
植物组织和动物细胞培养的比较
比较项目 原理 培养基性质 培养基特有成分 培养结果 培养目的 植物组织培养 动物细胞培养
细胞的全能性 固体培养基 蔗糖、植物 激素 植物体 快速繁殖、培育 无病毒植株等
细胞增殖 液体培养基 葡萄糖、动 物血清 细胞株、细胞系 获得细胞 或细胞产物
动物细胞培养应用
• 大规模培养生产生物制品（病毒疫苗、干扰素、 单克隆抗体） • 获得大量自身的皮肤细胞，用于植皮 • 培养的动物细胞可以用于检测有毒物质，判断 某种物质的毒性 • 为治疗和预防癌症及其他疾病提供理论依据