花粉生活力测定19页PPT
花粉生活力测定
解决办法：通过多媒体结合案例讲解后学生动手操作，教师指导。
教学方法及手段
演示、学做
教学准备
多媒体课件、植物花粉、载玻片、盖玻片、解剖针、毛笔、干燥器、TTC
教学过程及内容
讲解花粉生活力测定的原理和方法
实际操作蔗糖琼脂培养法和染色法
教学过程
教师活动
学生活动
教案设计说明
（2）发芽床的设置和播撒花粉：在盖玻片上滴一滴培养基，用棉耳棒蘸上花粉少许，均匀撒于培养基表面，但应防止花粉埋入培养基中而影响花粉发芽。播撒花粉后，要在显微镜下检查花粉是否分布均匀，再将载玻片置入用湿纱布或湿滤纸垫底以保湿的大培养皿中，盖上皿盖。在各载玻片上贴上标签，注明花粉种类、采集时间、蔗糖浓度、播粉时间和操作者，然后置于25～28℃的温箱中。
时间分配
教学内容
讲解实训原理演示实训过程，布置实训任务
观看多媒体
结合实训过程讲解
20min
教学内容
指导实训
蔗糖琼脂培养法
学生练习思考
90min
教学内容
指导实训
染色法
学生练习思考
45min
教学内容
检查实训内容的掌握
记录实训结果完成实训报告
25min
教学反思
湖北生物科技职业学院教案附页
一、花粉生活力测定的意义
②试液的配制
Ⅰ.磷酸盐缓冲液。在100ml的蒸馏水中，溶解0.832g的Na2HPO4·2H2O和0.273g的KH2PO4，调整pH值为7.17。
Ⅱ.TTC溶液。称取0.02～0.05g的TTC，溶解在10ml的磷酸盐缓冲溶液中，放入棕色滴瓶内，置于暗处。TTC为有毒性物质，操作时应注意安全。
花粉生活力测定
实验九花粉生活力测定一、实验目的1．学习和了解植物花粉生活力测定方法及原理。
2．初步掌握稻、麦的花粉生活力测定方法。
二、内容说明农业常规育种工作中，为了进行人工辅助授粉和杂交授粉，尤其是杂交育种工作，为解决亲本花期不一致和远距离杂交的问题，通常需要早期采集和储藏花粉。
不同类群植物花粉在自然条件下的寿命，花粉的储藏条件，以及花粉生活力的测定有所区别，这一是由花粉本身的特征决定的，二是由贮藏条件决定的。
一般来说，禾谷类作物花粉的寿命较短，自花授粉植物花粉的寿命尤其短，如小麦在花药开裂后30min，花粉即由鲜黄色变为深黄色，此时己有大量花粉丧失活力。
在许多特殊条件下，花粉生活力的差异对于研究花粉-柱头的相互作用，作物改良与育种操作，基因库的保持，不亲和性与受精关系，生理调节对花粉萌发的影响和基因流等，均有非常重要的实践意义。
因此，对于外地采集来的花粉的短暂贮藏、花粉的生物学研究、自交或远缘杂交分析结实率或不结实原因、鉴定雄性不育系时，花粉生活力的测定显得很重要。
花粉生活力有很多表述法，为了方便起见，现将各种表述方法列表如下(表9-1)，以供参考。
表9-1 花粉生活力的各种表述法花粉生活力的测定方法较多，通常可分为萌发测定和不萌发测定两大类，常用的有：（1）形态鉴定法是一种简便的鉴定新采集花粉的方法。
可通过直接观察花粉在形态上有明显差异来鉴定花粉有无生活力。
发育不正常的花粉，内含物不充实而空秕，形状也不规则，大小参差不齐。
而正常花粉内含物充实饱满，形状规则，大小整齐。
因内部含有较多淀粉粒而遇1%I-IK溶液呈深紫色反应，遇水易涨而破裂。
一般适用于不育系及远缘杂交后代花粉形态和育性的鉴定。
（2）染色鉴定法（FCR法）用不同的化学试剂如双乙酸荧光素(fluorescein diacetate)、联苯胺茶酚等快速鉴定花粉生活力。
双乙酸荧光素是一种荧光染料，其本身不产生荧光，无极性，可以自由地透过完整的原生质膜。
花粉生活力测定方法
花粉生活力测定方法
花粉生活力是指花粉颗粒的活力和生长能力，是衡量植物繁殖成功的重要指标。
花粉生活力测定方法是一种用来评估花粉质量和活力的技术手段，对于植物繁殖和种子生产具有重要意义。
传统的花粉生活力测定方法主要包括花粉染色观察法、花粉萌发率测定法和花
粉活力染色法。
花粉染色观察法是将花粉染色后在显微镜下观察其形态和数量，从而评估花粉的活力和质量。
花粉萌发率测定法则是将花粉培养在适宜的培养基上，观察其萌发情况以评估花粉的活力。
花粉活力染色法则是利用染色技术来观察花粉内部的活力指标，如线粒体和细胞核的活跃程度。
随着科学技术的发展，现代的花粉生活力测定方法也在不断完善和创新。
比如，利用生物技术手段对花粉进行基因测序和分析，可以更准确地评估花粉的生活力和遗传信息。
同时，利用先进的显微镜和成像技术，可以对花粉的微观结构和形态进行更精细的观察和分析。
花粉生活力测定方法的发展不仅有助于科学家和植物育种者更好地了解植物的
繁殖机制和生长规律，也为农业生产和生态保护提供了重要的技术支持。
通过准确评估花粉的生活力，可以选择出高质量的花粉进行人工授粉或者种子生产，从而提高植物的繁殖成功率和产量。
此外，对花粉生活力的准确测定也有助于保护植物遗传资源，促进植物多样性的保护和利用。
总之，花粉生活力测定方法是一项重要的植物科学技术，它为我们深入了解植
物繁殖机制和提高农业生产效率提供了重要的技术手段和支持。
随着科学技术的不断进步，相信花粉生活力测定方法将会在未来发挥更加重要的作用。
花粉贮藏及花粉生活力的测定
实验四花粉贮藏及花粉生活力的测定花期不遇给杂交工作造成困难，有的园林植物可通过调整花期来解决，有的则不得不进行花粉贮藏，或者从外地寄运花粉。
为了避免杂交工作失误，在使用外地寄来的花粉或经过一段时间贮藏的花粉之前，必须对花粉的生活力进行检测，以便对杂交结果进行分析与研究。
因此我们必须掌握花粉贮藏及花粉生活力测定的原理和技术。
（为什么贮藏花粉？）一、实验目的掌握花粉贮藏及花粉生命力鉴定的方法和原理。
二、实验材料油松、辣椒、一串红、矮牵牛、油茶、油菜等植物的花粉。
三、仪器及药品载玻片、盖玻片、解剖针、镊子、毛笔、干燥器、小指形管、标签、记号笔、显微镜、天平、烧杯、培养皿、滴管、玻璃棒、量筒、电炉、石棉网、冰箱；凡士林、无水氯化钙、蔗糖、琼脂、蒸馏水、硼酸、磷酸二氢钾、磷酸氢二钠、碘、碘化钾、氯化二苯基四氮唑（TTC ）。
四、实验原理花粉在低温（0 ～ 2 ℃）、干燥、黑暗等条件下代谢强度降低，花粉贮藏的原理就是要创造这样低代谢的环境条件，从而延长花粉的寿命。
花粉的形态、花粉中酶的活性以及积累淀粉的多少（淀粉质花粉）通常与其生活力密切相关，因此可以利用花粉的形态观察、过氧化物酶、脱氢酶的活性高低（呼吸）、淀粉的含量以及在人工培养基上花粉管萌发的情况作为鉴定花粉生活力高低的标准。
鉴定花粉生活力的方法很多，概括起来主要有如下几种：1 ．直接测定法将待测花粉直接授粉，然后统计结实情况。
此法最准确，但需时较长，且实验结果易受气候条件的影响。
也可在授粉后隔一定时间切下柱头，在显微镜下压片检查花粉的萌发情况，根据萌发率的高低来鉴定花粉的生活力。
2 ．形态观察法直接在显微镜下观察花粉的形态，根据品种花粉的典型性（如具有正常的大小、形状、色泽等）判断花粉的生活力，即形态正常的花粉有生活力，而一些小的、皱缩的、畸形的花粉不具有生活力。
此法简便易行但准确性差，一般只用于测定新鲜花粉的生活力。
3 ．染色观察法1 ）碘－碘化钾染色法：以碘－碘化钾溶液（0.3g 碘＋1.3g 碘化钾溶于100ml 蒸馏水）染色后于显微镜下观察，花粉被染成蓝色者表示具有生活力，花粉呈黄褐色者不具有生活力（不太准，比如刚死的花粉）。
育种实验-花粉生活力的测定2011春
三、方法
（二）花粉生活力试验 经贮存的花粉,在使用之前必须作生活力的测定以鉴 定其量。 测定花粉生活力的方法主要有三种。
活体萌发法
离体萌发法
染色法
1、花粉发芽法
人为的创造适合于花粉发芽的环境条件，以花粉发芽的情况 来鉴定花粉生活力的强弱。
（1）培养基的制作与接种
一般采用5～20%蔗糖或葡萄糖加1～2%琼脂，溶于蒸馏水中。 加热煮沸即可，将已配制好的培养基保持在40℃温度即不凝 固，用玻璃棒点一点培养基敷在载玻片的凹坑内，然后用头 发（接种针或解剖针）沾以少量花粉。条播（轻轻振动，使 花粉均匀地撒在培养基上），将载玻片放在垫有湿润棉花培 养皿内或倒扣在培养皿上，并贴上标签写明处理、种类、播 种日期，将培养皿放于(20_25℃)的恒温箱中培养。
表1 花 粉 生 活 力 观 察 记 载 表
种处 类理
花粉发芽率（或染色后具有生活力的花粉百分率） 时间 重复I 重复Ⅱ 重复Ⅲ 总 计
发 发 发 发 花 未 发 花 未 发 花 未 发 芽 芽 芽 芽 播 检 粉 发 芽 粉 发 芽 粉 发 芽 种 查 率 率 率 率 数 芽 数 数 芽 数 数 芽 数 % % % % 发 芽 法 染 色 法
本实验的主要目的是掌握花粉贮藏和花粉生活力测定的 方法。
二、材料及用具
材料：梨的花粉。 用具：显微镜、盖玻片、载玻片、凹式载玻 片、滴瓶、培养皿、天平、烧杯、 玻璃棒、微波炉
试剂：I-KI溶液、蒸馏水、蔗糖、琼脂等。
三、方法
（一）花粉贮藏 从发育良好的植株上采下将开的花朵、取出花药放 在纸上或培养皿中，放于干燥的室内阴干，令其开裂， 花药裂开后将花粉倒入小玻璃瓶或指形管中，口上塞 以棉花或橡皮塞，贴上写有品种名称的标签。再把花 粉瓶放于干燥器内，使花粉在空气相对湿度较低的条 件下（一般0～40%）保存；为了减少呼吸作用，可以 放在低温（0～4℃）黑暗的地方贮藏。
花粉的形态观察及生活力测定.
实验一花粉贮藏及花粉生活力的测定花期不遇给杂交工作造成困难，有的园林植物可通过调整花期来解决，有的则不得不进行花粉贮藏，或者从外地寄运花粉。
为了避免杂交工作失误，在使用外地寄来的花粉或经过一段时间贮藏的花粉之前，必须对花粉的生活力进行检测，以便对杂交结果进行分析与研究。
因此我们必须掌握花粉贮藏及花粉生活力测定的原理和技术一、实验目的掌握花粉贮藏及花粉生命力鉴定的方法和原理。
二、实验材料百合、金鱼草、菊花等花粉。
三、仪器及药品显微镜、载玻片、盖玻片、镊子、解剖针、吸水纸、TTC（2.3.5—氯化三苯基四唑）、KI-I2、蓝墨水。
四、实验原理花粉在低温（ 0 ～ 2 ℃）、干燥、黑暗等条件下代谢强度降低，花粉贮藏的原理就是要创造这样低代谢的环境条件，从而延长花粉的寿命。
花粉的形态、花粉中酶的活性以及积累淀粉的多少（淀粉质花粉）通常与其生活力密切相关，因此可以利用花粉的形态观察、过氧化物酶、脱氢酶的活性高低、淀粉的含量以及在人工培养基上花粉管萌发的情况作为鉴定花粉生活力高低的标准。
鉴定花粉生活力的方法很多，概括起来主要有如下几种：1 ．直接测定法将待测花粉直接授粉，然后统计结实情况。
此法最准确，但需时较长，且实验结果易受气候条件的影响。
也可在授粉后隔一定时间切下柱头，在显微镜下压片检查花粉的萌发情况，根据萌发率的高低来鉴定花粉的生活力。
2 ．形态观察法直接在显微镜下观察花粉的形态，根据品种花粉的典型性（如具有正常的大小、形状、色泽等）判断花粉的生活力，即形态正常的花粉有生活力，而一些小的、皱缩的、畸形的花粉不具有生活力。
此法简便易行但准确性差，一般只用于测定新鲜花粉的生活力。
3 ．染色观察法1 ）碘－碘化钾染色法：以碘－碘化钾溶液（ 0.3g 碘＋ 1.3g 碘化钾溶于 100ml 蒸馏水）染色后于显微镜下观察，花粉被染成蓝色者表示具有生活力，花粉呈黄褐色者不具有生活力。
2 ） TTC 染色法：使用TTC测定花粉生命力的原理，主要是无色药液进入花粉遇到活组织里的脱氢酶，接受氢离子，还原成红色三苯基甲腊TTF，还原结果使有生命力的花粉染上红色，死花粉不着色；花粉生活力强弱有异，染色深浅也有不同。
花粉生活力测定方法
花粉生活力测定方法
花粉是植物繁殖的重要媒介，其生活力的测定对于植物繁殖和生长具有重要意义。
近年来，随着科学技术的不断发展，花粉生活力测定方法也得到了不断的改进和完善。
传统的花粉生活力测定方法主要包括离体花粉萌发试验、花粉染色观察、花粉活力染色观察等。
这些方法虽然可以初步判断花粉的生活力，但存在着操作繁琐、结果不稳定、时间周期长等问题，限制了其在实际应用中的发展。
近年来，随着生物技术和显微镜技术的不断进步，新型的花粉生活力测定方法逐渐被引入。
比如，利用荧光显微镜观察花粉萌发情况，结合数字图像处理技术进行分析，可以快速、准确地测定花粉的生活力。
另外，利用生物标记技术对花粉进行标记，然后观察其在植物受精过程中的行为，也可以对花粉的生活力进行评估。
除了显微镜技术和生物标记技术，分子生物学技术在花粉生活力测定中也发挥了重要作用。
通过分析花粉中的基因表达情况、蛋白质组成等，可以更直观地了解花粉的生活力情况，为植物繁殖提供更准确的数据支持。
综上所述，随着科学技术的不断发展，花粉生活力测定方法也在不断完善和创新。
新型的测定方法不仅提高了测定的准确性和稳定性，同时也为植物繁殖和生长研究提供了更多的可能性。
相信随着科学技术的不断进步，花粉生活力测定方法将会更加完善，为植物繁殖和生长研究带来更多的突破和进展。
实验：园艺植物花粉生活力测定
银叶树花粉
瑞士摄影师马丁-奥格里利(Martin Oeggerli) 用扫描电子显微镜拍摄的花粉照片
凤梨科植物的花粉
瑞士摄影师马丁-奥格里利(Martin Oeggerli) 用扫描电子显微镜拍摄的花粉照片
银叶树花粉
瑞士摄影师马丁-奥格里利(Martin Oeggerli) 用扫描电子显微镜拍摄的花粉照片
爵床属植物的花粉
瑞士摄影师马丁-奥格里利(Martin Oeggerli) 用扫描电子显微镜拍摄的花粉照片
桤木(桦树家族成员)的花粉
瑞士摄影师马丁-奥格里利(Martin Oeggerli) 用扫描电子显微镜拍摄的花粉照片
松树的花粉
瑞士摄影师马丁-奥格里利(Martin Oeggerli) 用扫描电子显微镜拍摄的花粉照片
取出花药放在纸上或培养皿中，放于干燥的室内， 花药裂开后将花粉倒入小玻璃瓶中，瓶口上塞以棉 花或橡皮塞，贴上写有品种名称的标签。 把花粉瓶放于干燥器内，使花粉在相对湿度较 低（一般0～40%）、低温（0～4℃）黑暗的条件 下贮藏。 用室温、正常空气湿度贮藏的花粉作对照。
五、方法步骤：
（二）药品配制
三、说明：
父母本花期不一致时，花粉需要经过 一段时间的贮藏；从外地采集花粉做父本 时，花粉要经过运输、邮寄过程。
因此在杂交前应检验花粉的生活力， 以免应用无生活力的花粉而造成杂交工作 的失败。
四、实验原理：
1.碘-碘化钾染色法
正常的花粉积累淀粉较多，而不正常的花粉则
较少。正常花粉用I-KI染色后呈蓝色，而发育不良
花锦葵属植物的花粉
瑞士摄影师马丁-奥格里利(Martin Oeggerli) 用扫描电子显微镜拍摄的花粉照片
实验：园艺植物花粉生活力测定
三、说明：
父母本花期不一致时，花粉需要经过 一段时间的贮藏；从外地采集花粉做父本 时，花粉要经过运输、邮寄过程。
因此在杂交前应检验花粉的生活力， 以免应用无生活力的花粉而造成杂交工作 的失败。
四、实验原理：
1.碘-碘化钾染色法
正常的花粉积累淀粉较多，而不正常的花粉则
较少。正常花粉用I-KI染色后呈蓝色，而发育不良
勿忘草花粉在花瓣上的放大镜头
花粉生活力测定技术
一、目的和要求
学习花粉采集、干燥方法，掌握花粉贮藏和 花粉生活力测定的技术。
Leabharlann 二、材料和用具材料：果树、蔬菜或花卉的花粉。 用具：显微镜、天平、镊子、载玻片、盖玻片、 培养皿、干燥器、滴瓶、滤纸、纱布。 药品：联苯胺、α-萘酚、碳酸钠、过氧化氢、碘、 碘化钾、乙醇等。
取出花药放在纸上或培养皿中，放于干燥的室内， 花药裂开后将花粉倒入小玻璃瓶中，瓶口上塞以棉 花或橡皮塞，贴上写有品种名称的标签。 把花粉瓶放于干燥器内，使花粉在相对湿度较 低（一般0～40%）、低温（0～4℃）黑暗的条件 下贮藏。 用室温、正常空气湿度贮藏的花粉作对照。
五、方法步骤：
（二）药品配制
银叶树花粉
瑞士摄影师马丁-奥格里利(Martin Oeggerli) 用扫描电子显微镜拍摄的花粉照片
凤梨科植物的花粉
瑞士摄影师马丁-奥格里利(Martin Oeggerli) 用扫描电子显微镜拍摄的花粉照片
银叶树花粉
瑞士摄影师马丁-奥格里利(Martin Oeggerli) 用扫描电子显微镜拍摄的花粉照片
花粉生活力测定
不同时间萌发率图
时间 冰箱保存 3 6 65.60% 49.60%
平均萌发率
常温保存 48.90% 39.40%
9 12
15 18 21 24 27 30
47% 45.40%
37% 30.10% 26.90% 22% 16.20% 10.20%
33.20% 29.50%
29.30% 21.50% 15.20% 10.30% 9.60% 8.23%
三、实验用品
1、材料 正在开花的植株花粉（大樱桃 美早） 2、器具 盖、载玻片 凹式载玻片 培养皿 滴管 镊子 吸 水纸 恒温箱 天平 烧杯 玻棒 电炉 普通显微镜 3、药品 蒸馏水 硼酸 蔗糖 琼脂 六偏磷酸钠
四、内容与方法（花粉萌发）
（一）培养法： 1、配置培养基 取100ml蒸馏水中，加1~2g（即1%~2%）琼脂煮开， 使之溶解，然后再加入一定量的蔗糖或葡萄糖和0.01g 硼酸，制成不同浓度（5%、10%、15%、20%）的蔗 糖琼脂培养基。 2、制片 用玻棒蘸少许培养基，趁热滴入凹形载玻片，放置片 刻，待凝固后，撒上少许花粉粒。注意要均匀，不可 过多，否则，在显微镜下，不易分清数目。 3、培养 将制好的玻片放于培养皿，下面垫有滤纸，加入少量 水，以保持湿度。将培养皿盖好，置于20~25℃恒温 箱中。22 ℃
谢谢大家！
六 结论
柱状图：不同温度保存相同时间下，冰箱 保存的萌发率高于常温保存 随时间增长两者萌发率都呈下降趋势 折线图：3-6天内冰箱保存萌发率下降较快 出现平缓的趋势，可能是实验存在误差 没有达到预期的效果，冰箱保存应该生活 力时间更长
六 实验的不足之处
文献查阅检准率和检全率不够 试验方案不完备 存放花粉时存在外围环境影响 试验时散花粉太多，计数时误差太大 数据记录不规范
花粉生活力测定
谢谢大家！
三、实验用品
1、材料 正在开花的植株花粉（大樱桃 美早）
2、器具 盖、载玻片 凹式载玻片 培养皿 滴管 镊子 吸 水纸 恒温箱 天平 烧杯 玻棒 电炉 普通显微镜
3、药品 蒸馏水 硼酸 蔗糖 琼脂 六偏磷酸钠
四、内容与方法（花粉萌发）
（一）培养法： 1、配置培养基
取100ml蒸馏水中，加1~2g（即1%~2%）琼脂煮开， 使之溶解，然后再加入一定量的蔗糖或葡萄糖和0.01g 硼酸，制成不同浓度（5%、10%、15%、20%）的蔗 糖琼脂培养基。 2、制片 用玻棒蘸少许培养基，趁热滴入凹形载玻片，放置片 刻，待凝固后，撒上少许花粉粒。注意要均匀，不可 过多，否则，在显微镜下，不易分清数目。 3、培养 将制好的玻片放于培养皿，下面垫有滤纸，加入少量 水，以保持湿度。将培养皿盖好，置于20~25℃恒温 箱中。22 ℃
4、镜检 在显微镜下隔一定时间检查一次（花粉发芽快的经过
几个小时即可观察到已经发芽，慢的需24小时以上）， 若发现花粉已发芽时，就随机地在显微镜下取5个视野， 记录花粉粒总数和发芽数，算出平均值，将观察结果填入 表内。
花粉发芽的标准，以花粉管伸长超出花粉直径为准。 若花粉发芽率在5%以下，为极弱，不能采用。 （花粉发 芽率=发芽花粉总数\花粉总数）培养过程要密切观察，不 可使花粉管萌发的太长，否则难以计数。
★简便，但是一般用于要求不严格新采集的花粉
花粉发芽鉴定：配制一定浓度的蔗糖溶液
等作培养基，在人工控制条件下进行花粉发 芽试验，根据花粉发芽率的高低衡量花粉生 活力。也可以在授粉数小时后直接观察柱头 花粉萌发伸长情况。
染色鉴定：用不同的化学试剂如氯化三苯
基四氮唑（2，3，5-triphenyl tetrazolium chloride、C12H15N4Cl，简称TTC或四唑）、 联苯胺茶酚等快速鉴定花粉生活力。
花粉活力的测定 PPT
4、计算有生活力种子的百分率。
活种子 死种子
二、实验材料、试剂及用具
1.仪器设备：培养皿、刀片、烧杯、镊子。 2.试剂：5%红墨水 3.材料：小麦种子
三、实验步骤
1、浸种：将待测小麦种子在 30 ～ 35 ℃温水中浸种6 小时左右，以 增强种胚的呼吸作用。
2、染色：取已吸胀的种子100粒，沿胚的中线切为两半，将一半置于 培养皿中（不能仅取50粒），加入 5% 红墨水（以淹没种子为度 ），染色 10 ～ 15 min （温度高时间可短些）（时间不宜太长，为 什么？）。
花粉活力的测定
实验目的
1、学会运用I2-KI染色法测定花粉活力； 观察花粉管的萌发。
2、掌握用红墨水法测定种子活力的原理 和方法。
Ⅰ花粉活力的测定及花粉管萌发的观察
一、实验原理
成熟花粉粒中积累有淀粉，用I2-KI可将其染 成蓝色，而发育不良的花粉常呈畸形，不积累淀粉， 不能被染色或着色较浅；成熟花粉具有较强的活力， 在适宜的条件下就能萌发出花粉管。多种植物花粉 能在含10％蔗糖、100ppm硼酸的花粉培养基上萌 发，在显微镜下可观察花粉管的伸长。
二、环境因素对花粉ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ萌发影响很大
例如：小麦 10℃时，传粉后2h开始受精。 20℃时，萌发最好，30 min开始受精， 30℃时，萌发率比20℃低，花粉管生长快，
只需15min就受精了。 当温度再升高时，大量花粉不萌发。
Ⅱ 种子生活力的快速测定
一、实验原理
有生活力的种子其胚细胞的原生质具有半透 性，有选择吸收外界物质能力，某些染料如红墨 水中的大红 G 不能进入细胞内，胚部不着色。而 丧失生活力的种子其胚部细胞原生质膜丧失了选 择吸收的能力，染料进入细胞内是胚部染色，所 以可根据种子胚部是否染色来判断种子的生活力。
花粉活力的测定
活种子
死种子
四、注意事项
1、在切种子时，应垫在橡胶垫上，不可直接
在桌面上切，以防切伤桌面； 2、染色时间不可过长，否则不易区别染色与 否； 3、在使用切开的种子时，每粒种子每组只能
使用其中的一半，但两组可以交换使用各自
剩余的另一半。
三、实验步骤
1. 取一花药置于载玻片上，加一滴蒸馏水后，用
镊子将其充分捣碎，再加1~2滴I2-KI，盖上盖 玻片后于低倍镜下观察花粉成熟状况； 2. 取1~2滴花粉培养液于另一凹面载玻片的凹陷处， 再将花粉粒少许撒落于培养液中，盖上盖玻片
后放置30分钟左右，观察花粉管的萌发情况。
有活力的花粉
山茶花花粉管的萌发
二、实验材料、试剂及用具
1.仪器设备：培养皿、刀片、烧杯、镊子。
2.试剂：5%红墨水 3.材料：小麦种子
三、实验步骤
1、浸种：将待测小麦种子在 30 ～ 35 ℃温水中浸种6 小时左右，以 增强种胚的呼吸作用。
2、染色：取已吸胀的种子100粒，沿胚的中线切为两半，将一半置于 培养皿中（不能仅取50粒），加入 5% 红墨水（以淹没种子为度 ），染色 10 ～ 15 min （温度高时间可短些）（时间不宜太长，为 什么？）。 3、观察：染色后倒去红墨水，用水冲洗多次，至冲洗液无色为止。 检查种子死活，凡种胚不着色或着色很浅的为活种子；凡种胚与 胚乳着色程度相同的为死种子。可用沸水杀死的种子作对照观察 。 4、计算有生活力种子的百分率。
不能被染色或着色较浅；成熟花粉具有较强的活力， 在适宜的条件下就能萌发出花粉管。多种植物花粉 能在含10％蔗糖、100ppm硼酸的花粉培养基上萌 发，在显微镜下可观察花粉管的伸长。
二、实验材料、试剂及用具
1.仪器设备：显微镜、载玻片及盖玻片、解
一、目的学习和初步掌握稻、麦或棉的花粉生活力测定方法50922
实验19 花粉生活力测定
3、花粉发芽鉴定
（1）配制培养基 水稻 称取马铃署淀粉 6g、蔗糖20g、H3BO30.01g， 加100ml加蒸馏水 ,煮沸呈糊状，然后置温箱内保 温保湿备用。 小麦 称取蔗糖10g、琼脂3.5g、H3BO30.02g,加蒸馏 水100ml,加热融化后置温箱内保温保湿备用。 棉花 称取蔗糖25g、MnSO40.07g、Ca(NO3)20.04g、 H3BO30.04g,加蒸馏水100ml,加热融化后置温箱内 保温保湿备用。以上培养基pH5.2—6.0。
4、观察花粉在柱头上的萌发
（2）荧光显微镜观察
固定 取水稻开花授粉后10—15分钟、小麦2—4小时
的整个雌蕊，棉花授粉后4—6小时的整个花柱，
用卡诺固定液固定， 2 小时后移入 70% 酒精中保
存备用。
实验19 花粉生活力测定
4、观察花粉在柱头上的萌发
（2）荧光显微镜观察
软化 制片前，水稻、小麦的材料用8N NaOH软化 10分钟（煮沸）。棉花的用10N NaOH软化10小 时，然后水洗去碱。 镜检 将染色的材料置于载玻片上，盖上盖玻片，压 片后置荧光显微镜下观察。以 BG12 为激发光源 （蓝紫光）和0515为激光滤片。在此光源下，花 粉粒呈暗红色，花粉管呈淡黄色荧光，组织背景 黑色。
实验19 花粉生活力测定
一、目的
学习和初步掌握稻、麦或棉的花粉生活力测 定方法。
实验19 花粉生活力测定
二、内容说明
作物杂交工作中，往往会遇到父母本花期 不遇，必须采集花粉短暂贮藏，经贮藏的花粉 及其生活力如何，必须经过测定，以保证杂交 效果。此外，花粉的生物学研究，作物雄性不 育和远缘杂交都要鉴定花粉育性和生活力。 花粉生活力测定的方法较多，常用的有： 形态鉴定、 染色鉴定、 花粉发芽鉴定。