实验一细菌形态结构的观察
实验一：细菌基本形态与结构
操作原则：无菌操作（烧灼灭菌）
Aseptic area 10-20cm
外焰 内焰 焰芯
细菌涂片的制备
器具：接种环（上）和接种针（下）
2—5mm
柄约22cm
5—8cm
金属柄约14.5cm
绝缘柄 约7.5cm
安装环(针)的螺口(约8mm)
细菌涂片的制备
菌液采取法
三、实验器材
示教玻片、显微镜、擦镜纸、 香柏油、二甲苯
四、实验步骤
（一）普通光学显微镜 的使用
显微镜的构造 （1）支持部分：镜臂、镜筒、精细调节 （2）放大部分：接目镜、接物镜 （3）照明部分：反光镜、取光器、滤光
镜
（一）普通光学显微镜的使用
1、油镜的使用方法 （1）低倍镜观察 （2）光圈调最大 （3）标本上滴加香柏油0.5-1滴 （4）转换油镜头浸入油滴中
幽门螺杆菌
（三）细菌的特殊结构观察
芽胞示教片：破伤风梭菌。 鞭毛示教片：变形杆菌。 荚膜示教片：肺炎双球菌。
产芽芽孢胞细菌的种类
芽孢 菌体 （营养细胞）
破伤风梭菌×1000
鞭毛
变形杆菌鞭毛×1000
细菌荚膜示意图
荚膜的观察：
负染色
细菌标本染色检查法
细菌染色
活菌染色
死菌染色
（一）普通光学显微镜的使用
2、使用完毕显微镜及标本片的处理 （1）油镜用过后，应立即用擦镜纸
将镜头和玻片擦拭干净 （2）如油渍已干，须用擦镜纸蘸少
许二甲苯溶液拭去油渍，再用干擦镜 纸拭净镜头
油镜的使用与保护
1.原理 2.方法
（二）细菌的三种基本形态
球菌：双球菌、链球菌、葡萄球菌 杆菌：球杆菌、链杆菌、分支杆菌 螺形菌：霍乱弧菌、螺杆菌
实验一细菌形态与结构观察
眼睛在侧方 注视物镜 防止载玻片 碎裂 10
观察后注意 1.玻片放入消毒缸
顺镜头直 径方向擦， 2.擦拭镜头：限取1张擦镜纸 不要旋转 和来回擦
把油镜转离光轴
用二甲苯滴湿的擦镜纸擦1次
3.显微镜载物台下降到最低 ，镜头 呈八字形、罩上防尘罩、放回原处
11
【结果】
葡萄球菌（紫色）——革兰阳性菌（G+）
微镜、香柏油(镜油)、拭镜纸等。
6
【步骤】 涂片
载玻片中央加半滴生理盐水 分别将二种细菌涂布于盐水中
干燥（用试管夹夹住玻片 ）
自然干燥或于火焰高处烘干 固定
将标本以钟表摆动的速度通过火焰三次
7
【步骤】 染色：
初染：结晶紫，1分钟，水洗 媒染：碘液，1分钟，水洗 脱色：95%酒精，0.5~1分钟，水洗
实验室规则
1.实验材料为病原微生物，具有感染性
1）穿好白大衣，除必要的书籍及
文具外，其他个人用品不得带入实验 室；白大衣不能穿或带进食堂！ 2）实验室禁止饮食，未经许可严 禁将实验材料带出实验室
1
2.爱护实验器材，实验用过的器材放置
指定位置；实验示教玻片标本损坏需 赔偿
3.实验完毕后，整理实验台，值日生负
大肠杆菌
霍乱弧菌
4
一、细菌的形态和特殊结构观察
（二）细菌的特殊结构（示教）
1.荚膜
2.芽孢
3.鞭毛
肺炎链球菌
破伤风梭菌
伤寒沙门菌
5
二、革兰染色法 （操作） 【材料】 1.葡萄球菌、大肠杆菌培养物
2.革兰染色液：结晶紫、卢戈氏碘液、
95％乙醇、石炭酸复红。
3.生理盐水、二甲苯、载玻片、试管夹、 接种环、酒精灯、火柴、消毒缸、显
实验一显微镜的使用及细菌形态观察
03
实验时间安排不够合理
本次实验时间安排较为紧张，导致部分同学在规定时间内未能完成实验。
建议合理安排实验时间，确保同学有足够的时间进行实验操作和观察。
对未来实验的展望与计划
拓展观察对象
了解细菌的基本形态
学习识别不同种类的细菌，了解其基 本形态特征，如球形、杆形、螺旋形 等。
通过观察不同细菌的形态，理解其在 生物学和医学领域的应用价值。
学习细菌的观察与识别
掌握细菌的染色和观察方法， 了解常用的染色技术和原理。
学习使用显微镜观察细菌的形 态、大小、排列等特征，提高 实验操作技能和观察能力。
04
革兰氏阳性菌
在显微镜下观察到革兰氏阳性 菌呈圆形或椭圆形的外观，细
胞壁厚，表面光滑。
革兰氏阴性菌
革兰氏阴性菌呈杆状或球状， 细胞壁薄，表面粗糙。
大肠杆菌
大肠杆菌呈杆状，两端钝圆， 无芽孢和鞭毛。
葡萄球菌
葡萄球菌呈葡萄串状排列，无 芽孢和鞭毛。
细菌形态特征的描述与分类
根据革兰氏染色结果，可以将细 菌分为革兰氏阳性菌和革兰氏阴
性菌两类。
根据细菌的形状、大小、排列方 式等特征，可以初步判断细菌的
种类。
不同种类的细菌具有不同的形态 特征，如球菌、杆菌、螺旋菌等。
实验结论的总结与归纳
通过观察显微镜下细菌的形态特 征，可以初步判断细菌的种类。
革兰氏染色是区分革兰氏阳性菌 和革兰氏阴性菌的重要方法。
了解不同种类细菌的形态特征对 于临床诊断和治疗具有重要意义。
增强团队合作意识
在实验过程中，我与同学们相互协作， 共同完成实验任务，增强了团队合作 意识。
细菌形态结构观察——简单染色革兰氏染色
（1） 为什么必须用培养24 h以内的菌体进行革兰氏 染色？
（2） 要得到正确的革兰氏染色结果，必须注意哪些 操作？哪一步是关键步骤？为什么？
（3） 当你对未知菌进行革兰氏染色时，怎样保证操 作正确，结果可靠？
） “和而不同”，多元发展。近年来 ，中医 药在防 治非典 、禽流 感和艾 滋病方 面发挥 的独特 作用也 证实了 二者的 有机结 合，具 有肯定 的临床 疗效。 编辑本段东西方医学交融（df高血压958心脏 病983u6糖尿 病87fr）
1、简单染色法原理 这是最基本的染色方法，由于细性燃料如美蓝、碱性 复红、结晶紫、孔雀绿、蕃红等进行染色。这类染料解 离后，染料离子带正电荷，故使细菌着色。
2、革兰氏染色法原理 革兰氏染色法是细菌学中广泛使用的重要鉴别染色
法，通过此法染色，可将细菌鉴别为革兰氏阳性菌（G+） 和革兰氏阴性菌（G-）两大类。 革兰氏染色过程所用四种不同溶液的作用：
（5） 复染 蕃红染液复染1 min，水洗。 （6） 吸干并镜检 若研究工作中要确证未知菌的革兰氏反应 时，则需同时用已知菌进行染色作为对照。
五、实验结果
（1） 绘图：画出大肠杆菌、金黄色葡萄球菌的细胞形 态图。 （2） 记录革兰氏染色结果；分辨出革兰氏阳性菌或革 兰氏阴性菌。如果染色结果不理想，请分析原因。
（1） 碱性染料 草酸铵结晶紫液。 （2） 媒染剂 碘液，其作用是增强染料与菌体的亲和力， 加强染料与细胞的结合。
（3） 脱色剂 乙醇将染料溶解，使被染色的细胞脱色。 利用不同细菌对染料脱色的难易程度不同，而加以区分。
（4） 复染液 蕃红溶液，目的是使经脱色的细菌重新染 上另一种颜色，以便与未脱色菌进行比较。
（2） 染色 用草酸铵结晶紫染液染色1 min，用水冲洗。 （3） 媒染 滴加革兰氏碘液冲去残水，并用碘液覆盖1 min， 用水冲去碘液。
实验一细菌的形态结构观察
实验一细菌的形态结构观察引言：细菌属于原核生物，是一类非常小的微生物，其形态结构一直是微生物学领域的重要研究内容。
通过观察细菌的形态结构，可以了解其生物学特性，甚至为细菌的分类和鉴定提供辅助依据。
本实验旨在通过显微镜观察、绘制不同种类细菌的形态特征，并对其进行描述和分析。
材料和方法：1.细菌样本：从环境中采集的细菌样本，使用无菌技术制备细菌涂片；2.显微镜：高性能光学显微镜；3.其他实验工具：无菌培养皿、无菌移液器、无菌盖玻片、无菌镊子等。
实验步骤：1.细菌准备：在无菌实验台上，取一块无菌盖玻片，用无菌镊子取一小滴待观察的细菌悬浮液在盖玻片上；2.细菌涂片制备：将另一块无菌盖玻片，倾斜放在含细菌悬浮液的盖玻片上，使两个盖玻片接触并自然扩散，制备细菌涂片；3.固定细菌：将细菌涂片在微火上加热，使细菌固定在玻片上；4.染色：将固定的细菌涂片浸入甲醇中进行固定，并在甲醇中静置3-5分钟；5.除染：将固定染色的细菌涂片置于水龙头下轻轻冲洗，冲洗到水清澈；6.贴片：将染好的细菌涂片倒置在无菌盖玻片上，用手指轻轻压实；7.观察：将贴好的细菌涂片放在显微镜下，逐个观察细菌的形态结构；8.绘制：选取有代表性的细菌形态，在实验记录本中进行绘制和注释。
结果和讨论：通过以上实验步骤，我们观察到了不同细菌的形态结构，如以下几个典型细菌的形态特征描述。
1. 球菌（cocci）：球形或近球形的单细胞菌，如葡萄球菌（Staphylococcus aureus）。
形态特征：球形，直径约0.5-1微米，聚集在一起呈葡萄状、串珠状。
2. 杆菌（bacilli）：长形的单细胞菌，如大肠杆菌（Escherichia coli）。
形态特征：长棍状，直径约0.5-1微米，长度约2-6微米。
3. 弯曲菌（spirilla）：弯曲或螺旋形的细胞，如鲍曼不动杆菌（Vibrio cholerae）。
形态特征：螺旋形，直径约0.5-1微米，长度约2-6微米。
实验一细菌的形态结构观察及显微镜油镜的...
实验一细菌的形态结构观察及显微镜油镜的使用【目的和要求】1．熟悉微生物实验室规则并xx。
2．掌握细菌基本形态和特殊结构的观察方法。
3．掌握光学显微镜油镜的使用和维护方法，了解荧光显微镜和暗视野显微镜的构造和使用方法。
【试剂与器材】1．示教片：各种球菌、杆菌、弧菌、荚膜、鞭毛、芽胞的示教片。
2．器材及其他：光学显微镜、载玻片、擦镜纸、香柏油、脱油剂等。
【实验内容】一、细菌基本形态和特殊构造的观察1．细菌的基本形态（各种球菌、杆菌、弧菌等）观察要点：注意细菌的染色性、相对大小、形状及排列方式。
2．特殊结构的观察（荚膜、芽胞、鞭毛）观察要点：注意这些特殊结构的大小、形状及其在菌体中的位置，均有助于细菌的鉴定。
二、光学xx油镜的使用1．光学xx的构造光学显微镜是观察细菌形态最常用的一种仪器，其构造分为机械部分和光学部分，机械部分包括：镜座、镜臂、载物台、镜筒、镜头转换器、调焦装置等；光学部分包括：接物镜、接目镜、反光镜、聚光器、光圈等（见图1-1）。
图1-1光学xx的构造显微镜的接物镜有低倍镜、高倍镜、油镜三种，放大倍数依次增高，其识别方法为：（1）低倍镜：镜头标志为10×或，镜头最短，其上常刻有黄色环圈。
（2）高倍镜：镜头标志为40×或，镜头较长，其上常刻有蓝色环圈。
（3）油镜：镜头标志为100×或，镜头最长，其上常刻有白色环圈，或“oil”字样。
2．油镜的使用原理图1-2xx油镜的使用原理油镜的放大倍数高而透镜很小，自标本片透过的光线，因玻片和空气的折光率不同（玻璃n=1.52，空气n=1.0），部分光线经载玻片进入空气后发生折射，不能进入接物镜，致使射入光线较少，物象不清晰。
在油镜和载玻片之间滴加和玻璃折光率相近的香柏油（n=1.515），则使进入油镜的光线增多，视野光亮度增强，物象清晰（见图1-2）。
3．使用方法（1）采光：使用显微镜时必须端坐，将显微镜放在胸前适当位置。
细菌形态观察实验报告
一、实验目的1. 掌握显微镜油镜的使用方法。
2. 观察细菌的基本形态结构，如细胞壁、细胞膜、细胞质、核质体等。
3. 了解细菌的特殊结构，如鞭毛、荚膜、芽孢等。
4. 培养对细菌形态结构的识别能力。
二、实验原理细菌是单细胞微生物，具有多种形态结构。
通过显微镜观察，可以了解细菌的基本形态和特殊结构，为细菌的分类、鉴定和致病性研究提供依据。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：细菌样本、革兰氏染色液、芽孢染色液、水浸片、盖玻片、载玻片等。
2. 仪器：光学显微镜、酒精灯、载物台、切片刀、镊子等。
四、实验步骤1. 观察细菌样本（1）将细菌样本滴在载玻片上，用盖玻片封口。
（2）在显微镜下观察细菌的基本形态结构，如细胞壁、细胞膜、细胞质、核质体等。
2. 革兰氏染色（1）将革兰氏染色液滴在细菌样本上，用酒精灯加热。
（2）观察染色后的细菌，判断其革兰氏分类。
3. 芽孢染色（1）将芽孢染色液滴在细菌样本上，用酒精灯加热。
（2）观察染色后的细菌，判断其芽孢存在与否。
4. 观察细菌特殊结构（1）观察细菌是否有鞭毛、荚膜等特殊结构。
（2）通过水浸片观察细菌的运动。
五、实验结果与分析1. 细菌样本的基本形态结构（1）观察到的细菌具有细胞壁、细胞膜、细胞质、核质体等基本结构。
（2）部分细菌具有鞭毛、荚膜等特殊结构。
2. 革兰氏染色结果（1）部分细菌呈现革兰氏阳性，细胞壁较厚，不易着色。
（2）部分细菌呈现革兰氏阴性，细胞壁较薄，易着色。
3. 芽孢染色结果（1）部分细菌存在芽孢，呈圆形或椭圆形。
（2）部分细菌无芽孢。
4. 细菌特殊结构观察结果（1）部分细菌具有鞭毛，呈螺旋状。
（2）部分细菌具有荚膜，呈透明状。
六、实验总结1. 通过本次实验，掌握了显微镜油镜的使用方法。
2. 观察了细菌的基本形态结构和特殊结构，了解了细菌的生物学特性。
3. 培养了对细菌形态结构的识别能力，为今后的学习和研究奠定了基础。
七、注意事项1. 使用显微镜时，注意调节光圈和焦距，确保观察清晰。
细菌与真菌学实验
细菌与真菌学实验细菌与真菌学实验实验⼀细菌形态结构观察【⽬的】1、了解细菌的基本形态和特殊结构观察法2、明确细菌特殊结构在医疗实践中的意义3、细菌不染⾊标本的观察⽅法4、观察活细菌的形态及运动情况【材料】⾰兰染⾊标本⽚：1、球菌：葡萄球菌、链球菌、脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌。
2、杆菌：伤寒沙门菌、⼤肠埃希菌、炭疽芽胞杆菌、枯草芽胞杆菌。
3、螺形菌：霍乱弧菌或⽔弧菌。
细菌特殊结构标本⽚：1、鞭⽑:变形杆菌、霍乱弧菌2、荚膜:肺炎链球菌、产⽓荚膜杆菌3、芽孢：破伤风杆菌、炭疽杆菌细菌动⼒观察材料：1、菌种：普通变形杆菌、表⽪葡萄球菌。
2、变形杆菌和表⽪葡萄球菌8～12min⾁汤培养物。
3、其他：凹玻⽚、盖玻⽚、凡⼠林、⽛签、接种环、酒精灯、⾹柏油、⼆甲苯、擦镜纸⼀细菌形态结果观察1、使⽤油镜观察上述⾰兰染⾊标本⽚：认识细菌的三种基本形态。
注意观察各菌的形态、⼤⼩、排列⽅式及染⾊性等特点。
2、使⽤油镜观察细菌的特殊结构标本⽚：（1）荚膜：肺炎链球菌经⾰兰染⾊后，呈⽭头状成双排列，菌体四周有不着⾊的透明圈（既荚膜）；肺炎链球菌与产⽓荚膜杆菌的荚膜（荚膜染⾊法），注意观察菌体及荚膜的颜⾊及两者的形态特点。
（2）鞭⽑：变形杆菌与霍乱弧菌的鞭⽑（鞭⽑染⾊法），注意观察菌体和鞭⽑的颜⾊、鞭⽑的长短、数⽬及在菌体上的位置。
（3）芽胞：破伤风梭菌及炭疽杆菌芽胞（芽胞染⾊法），注意观察菌体、芽孢的形态、颜⾊及芽孢在菌体中的位置。
⼆、细菌不染⾊标本观察法（动⼒观察法）1、悬滴法图2－1－1（1）取⼀张洁净盖玻⽚，⽤⽛签涂少许凡⼠林于盖玻⽚的四个⾓处。
（2）⽤接种环取3～4环普通变形杆菌或表⽪葡萄球菌液体培养物于盖玻⽚中央。
（3）把凹玻⽚凹⾯朝下盖在盖玻⽚上，使凹窝中央正对菌液（见图2－1－1）。
（4）迅速翻转凹玻⽚，使粘附在凹玻⽚上的盖玻⽚朝上。
（5）先⽤低倍镜观察，再换⾼倍镜观察。
图2－1－1悬滴法普通变形杆菌有鞭⽑，运动活泼，可向不同⽅向迅速运动。
细菌的形态结构观察实验
How to do
4.油镜观察
在干燥的细菌涂片上滴加香柏油，转到油镜进 行观察。观察内容：
1 细菌的革兰染色性：
细菌被染成紫蓝色——革兰阳性（G+)菌 细菌被染成红色——革兰阴性（G-)菌
2 单个细菌的形态：球菌（C），杆菌（b） 3 细菌的排列：散在排列；葡萄状排列 记录： G+c，葡萄状排列； G-b，散在排列。
Gram Positive Bacteria (Staphylococcus)
Gram Negative Bacteria ( E. coli )
5.细菌特殊结构观察(示教镜)
细菌的荚膜（capsule）
Capsule
（特殊染色法，X1000)
细菌的芽胞（spore） 细 菌的鞭毛(flagellum)
医学微生物学实验 （EXPERMENT OF MICROBIOLOGY）
医学微生物学实验室规则
1.每次进入实验室必须穿白大褂，拒绝穿拖鞋者入内。 2.不准携带食品、饮料和餐具入室，拒绝实验室内吃喝。 3.上课前请不要动桌面上的实验器材，老师介绍完后才能开始
实验。实验完成后统一下课。 4.实验过程中发生意外时，应立即报告老师，不要私自处理。 5.实验完成后要求洗手离开。服从班干部安排，做好实验室
Spore
flagellum
(特殊染色法,x1000)
实验报告 实验名称
一、材料和方法 关键试剂、重要的方法
二、实验结果 文字、图、表描述
三、结论（讨论）
实验报告
一、细菌革兰染色 方法、结果（绘图）、讨论
Байду номын сангаас
二、细菌特殊结构
绘图
？
绘图要求
染色方法、 放大倍数
微生物学实验
微生物学实验
实验一 细菌的形态和结构观察
观察细菌的菌落特征 掌握简单染色法和细菌涂片方法 在油镜下观察细菌个体的形态特征
【一】实验目的
【二】实验的差不多 原理 形态观察要紧包括群体的形态和个体的形态观察。
细菌的差不多形态要紧分为球菌、杆菌、螺旋菌三大类，近年 还发现星状和四方形细菌等。细菌形态受培养时间、培养基成 分、浓度、培养温度、培养时间等发生变化。
【四】实验步骤
思
对各种来源的样品进行对比，如平板菌落数和菌落类型等？ 饭前为何要洗手？ 如何防止培养物的污染与防止细菌的扩散方面？
考
题
实验四 培养基的配制与灭菌
1.熟悉玻璃器皿的洗涤和灭菌前的准备。 2.掌握培养基和无菌水的制备方法。
3.掌握高压蒸气灭菌技术。
【一】实验目的
【二】实验的差不多
3.观察标本时，必须依次用低、中、高倍镜，最后用油镜。
当目视接目镜时，特别在使用油镜时，切不可使用粗调节
器，以免压碎玻片或损伤镜面。
4.观察
时，两眼睁开，养成两眼能够轮换观察的适应，以免眼睛
疲劳，同时能够在左眼观察时，右眼注视绘图。
动物微生物学实验
三、注意事项
当镜头与标本片几乎接触时， 当镜头与标本片几乎接触时，不可再用粗 调节螺旋向上移动载物台或向下移动镜头。 调节螺旋向上移动载物台或向下移动镜头。 镜头与玻片只能用擦镜纸擦拭 香柏油的用量以1-2滴为宜 不可太多。 滴为宜， 香柏油的用量以 滴为宜，不可太多。 为了增强视野亮度，应将聚光器调至最高， 为了增强视野亮度，应将聚光器调至最高， 光圈调至最大。 光圈调至最大。
观察完毕，下降载物台， 4) 观察完毕，下降载物台，取下标本 先用擦镜纸擦去镜头上的油， 片。先用擦镜纸擦去镜头上的油，然 后再用擦镜纸沾少量二甲苯擦去镜头 上残留油迹， 上残留油迹，最后再用擦镜纸擦去残 留的二甲苯。 留的二甲苯。切忌用手或其他纸擦镜 以免损坏镜头。 头，以免损坏镜头。 将各部分还原， 5) 将各部分还原， 将接物镜转成八 字形，再向下旋，罩上镜套。 字形，再向下旋，罩上镜套。
四、实验报告内容
显微镜油镜的使用方法及注意事项。 绘制 细菌镜下图，注意细菌形态结构，两 端形态及颜色等。
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
实验一 显微镜的使用、 显微镜的使用、细菌形态和结构的 观察
一、 目的
学会显微镜特别是油镜的使用方法 认识细菌形态、排列与特殊结构
二、实验材料：
显微镜、细菌标本片、二甲苯、香柏油、 擦镜纸
三、实验内容
（一）显微镜的构造和使用 （二）细菌形态与特殊结构的观察
光 学 显 微 镜
油镜观察
用粗调螺旋提起镜筒， 1) 用粗调螺旋提起镜筒，转动转换器将油镜转至镜筒正 下方。在标本镜检部位滴上一滴香柏油。 下方。在标本镜检部位滴上一滴香柏油。右手顺时针方向 慢慢转动粗调螺旋，上升载物台，并及时从侧面注视使油 慢慢转动粗调螺旋，上升载物台， 浸物镜浸入油中， 浸物镜浸入油中，直到几乎与标本接触时为止 ( 注意切 勿压到标本，以免压碎玻片， 勿压到标本，以免压碎玻片，甚至损坏油镜头 ) 。 双眼看目镜，右手反时针方向微微转动粗调螺旋， 2) 双眼看目镜，右手反时针方向微微转动粗调螺旋，下 注意：此时只准下降载物台， 降载物台 ( 注意：此时只准下降载物台，不能向上调 当视野中有模糊的标本物象时，改用细调螺旋， 动 ) ，当视野中有模糊的标本物象时，改用细调螺旋， 并移动标本直至标本物象清晰为止。 并移动标本直至标本物象清晰为止。 3) 如果向上转动粗调螺旋已使镜头离开油滴又尚未发现 标本时，可重新按上述步骤操作直到看清物象为止。 标本时，可重新按上述步骤操作直到看清物象为止。
实验一细菌形态和结构观察，涂片制作及染色法
实验一 细菌形态和结构观察，涂片制作及染色法 课程名称：兽医微生物学 实验学时： 2学时一、目的要求1．了解、熟悉油镜的使用和使用原理。
2．掌握细菌抹片的制备及美蓝和革兰氏染色方法。
3．能够识别革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌的染色特征。
4．熟悉细菌的基本形态学特征和特殊构造。
二、知识背景细菌个体微小，无色透明，在一般显微镜下不易识别，必须用适当的染料使其着色后，才能看到其形态、排列和结构。
某些细菌因有特殊的染色性，更可借特殊的染色方法加以鉴别。
因此染色技术是细菌鉴定中的基本技术之一。
检查微生物标本，需要使用显微镜。
比较多用的是普通光学显微镜。
根据不同要求，可使用暗视野显微镜、相差显微镜、荧光显微镜和电子显微镜。
前几种显微镜用可见光线或紫外光线作照明光源，它们都属于光学显微镜；电子显微镜则是用电子流代替照明光源，与光学显微镜不同。
［普通光学显微镜的构造和使用］普通光学显微镜（或称生物显微镜）的构造，使用与保护方法，已在《组织学与胚胎学》教材中讲过，这里概述油镜的原理和使用要点：检查细菌标本，多用油镜进行，油镜是一种高倍放大（95-100倍）的物镜，一般都标有放大倍数（如95×；100×等）和特别标记，以便识别。
国产镜多用“油”字表示，国外产品则常用“Oil 或“HI”作记号。
油镜上还常漆有黑环或红环，而且油镜镜身比高倍镜和低倍镜长，镜片最小，这也是识别的另一个标志。
油镜头的晶片细小，进入镜中的光量也较少，其视野比用高倍镜时为暗。
当油镜头和载玻片之间为空气层所隔时，因为空气的折光指数与玻璃的不同，故有一部分光线被折射而不能进入镜头之内，使视野更暗；若在镜头与载玻片之间放上与玻璃的折光指数相似的油类，如香柏油等，使光线不致于因折射而大为损失，则可使视野充分照明，并能使操作者清楚地进行观察和检查（图l ）。
实验室中几种常用物质的折光指数 品名 玻璃 檀香油香柏油 加拿大树胶二甲苯 液体石蜡松节油甘油 水 折光指数 1.52-1.59 1.52 1.51 1.52 1.49 1.48 1.47 1.47 1.33进行油镜检查时，应先对好光线，但不可直对阳光，采取最强亮度（升高集光器，开大光圈，调好反光镜等）。
细菌形态结构观察实验报告
细菌形态结构观察实验报告细菌形态结构观察实验报告引言：细菌是一类微小的单细胞生物，它们存在于我们周围的环境中，有的对人类和其他生物有益，有的则会引发疾病。
了解细菌的形态结构对于研究其生长、繁殖和传播等方面具有重要意义。
本实验旨在通过显微镜观察和分析细菌的形态结构，以便更好地了解细菌的特征和功能。
实验材料和方法：1. 细菌培养物：我们选择了两种常见的细菌，分别是大肠杆菌和金黄色葡萄球菌。
2. 显微镜：使用高倍显微镜观察细菌的形态结构。
3. 准备细菌样品：从培养物中取一小滴，涂抹在玻片上，待其干燥。
4. 染色：将干燥的细菌样品用甲基蓝染色，以增强细菌的对比度。
5. 观察：将染色后的细菌样品放在显微镜下，逐渐增大倍数，观察并记录细菌的形态结构。
实验结果：1. 大肠杆菌：观察到大肠杆菌为一种长而细的细菌，呈现出弯曲的形态。
通过放大倍数，我们可以清晰地看到细菌的细胞壁和胞质。
细胞壁呈现出扁平的形态，胞质则呈现出透明的特征。
2. 金黄色葡萄球菌：与大肠杆菌不同，金黄色葡萄球菌呈现出圆形的形态。
观察到细菌表面有许多小颗粒，这些颗粒是细菌产生的黄色素，使其呈现出金黄色的外观。
讨论：1. 细胞壁结构：大肠杆菌的细胞壁呈扁平形态，而金黄色葡萄球菌则没有明显的扁平特征。
这可能与它们的生长环境和功能有关。
大肠杆菌常生长在肠道中，需要扁平的细胞壁以适应肠道内的环境。
而金黄色葡萄球菌则常生长在皮肤和黏膜表面，其细胞壁结构可能更加圆形以适应不同环境。
2. 胞质特征：通过观察细菌的胞质，我们可以发现大肠杆菌的胞质呈现出透明的特征，而金黄色葡萄球菌的胞质则没有明显的透明度。
这可能与它们的代谢活动有关。
大肠杆菌是一种革兰氏阴性菌，其胞质内含有许多代谢酶，使其呈现出较高的透明度。
而金黄色葡萄球菌是一种革兰氏阳性菌，其胞质内含有较多的蛋白质和核酸，使其胞质较为浑浊。
3. 颗粒特征：金黄色葡萄球菌表面的小颗粒是其产生的黄色素，这种黄色素具有抗菌作用，可以帮助金黄色葡萄球菌抵御外界环境的侵袭。
实验一显微镜的使用、细菌形态和结构观察与革兰氏染色法
实验一显微镜的使用、细菌形态和结构观察与革兰氏染色法一、显微镜的使用普通光学显微镜是一种精密的光学仪器。
以往最简单的显微镜仅由几块透镜组成，而当前使用的显微镜由一套透镜组成。
普通光学显微镜通常能将物体放大1500—2000倍。
（一）显微镜的构造普通光学显微镜的构造可分为两大部分：一为机械装置，一为光学系统，这两部分很好的配合，才能发挥显微镜的作用。
1、显微镜的机械装置显微镜的机械装置包括镜座、镜筒、物镜转换器、载物台、推动器、粗动螺旋、微动螺旋等部件（1）镜座镜座是显微镜的基本支架，它由底座和镜臂两部分组成。
在它上面连接有载物台和镜筒，它是用来安装光学放大系统部件的基础。
（2）镜筒镜筒上接接目镜，下接转换器，形成接目镜与接物镜（装在转换器下）间的暗室。
从物镜的后缘到镜筒尾端的距离称为机械筒长。
因为物镜的放大率是对一定的镜筒长度而言的。
镜筒长度的变化，不仅放大倍率随之变化，而且成像质量也受到影响。
因此，使用显微镜时，不能任意改变镜筒长度。
国际上将显微镜的标准筒长定为160mm，此数字标在物镜的外壳上。
（3）物镜转换器物镜转换器上可安装3—4个接物镜，一般是三个接物镜（低倍、高倍、油镜）。
Nikon显微镜装有四个物镜。
转动转换器，可以按需要将其中的任何一个接物镜和镜筒接通，与镜筒上面的接目镜构成一个放大系统。
（4）载物台载物台中央有一孔，为光线通路。
在台上装有弹簧标本夹和推动器，其作用为固定或移动标本的位置，使得镜检对象恰好位于视野中心。
（5）推动器是移动标本的机械装置，它是由一横一纵两个推进齿轴的金属架构成的，好的显微镜在纵横架杆上刻有刻度标尺，构成很精密的平面座标系。
如果我们须重复观察已检查标本的某一部分，在第一次检查时，可记下纵横标尺的数值，以后按数值移动推动器，就可以找到原来标本的位置。
（6）粗动螺旋粗动螺旋是移动镜筒调节接物镜和标本间距离的机件，老式显微镜粗螺旋向前扭，镜头下降接近标本。
新近出产的显微镜（如Nikon显微镜）镜检时，右手向前扭载物台上升，让标本接近物镜，反之则下降，标本脱离物镜。
微生物形态和结构观察
第二部分微生物形态和结构观察个体形态和细胞结构是微生物的重要特征，也是识别和鉴定微生物的主要依据之一。
微生物个体微小，要研究它们的形态和结构，通常需要显微镜；在许多情况下，还需要对标本进行染色。
学习和掌握形态学观察技术，对于研究、开发和利用微生物具有重要意义。
实验1 细菌染色和形态结构观察细菌的基本形态主要有球状、杆状和螺旋状。
在适宜的生长条件下，细菌细胞一般在幼龄阶段呈现特定形态。
但若培养条件发生变化或培养物老龄化，菌体形态会出现异常。
细菌个体微小且无色透明，对光线的吸收和反射与水溶液差别不大，直接在显微镜下观察，不易看清它们的真实面目。
对菌体进行染色，可以增加反差，显现细菌的一般结构和特殊结构。
染色技术是微生物形态学研究的重要手段，它可分为简单染色、鉴别染色和特殊染色三种类型。
一、简单染色法（一）目的要求1、学习细菌涂片的基本技术。
2、掌握细菌简单染色法。
3、熟练显微镜油镜的使用技术。
（二）基本原理简单染色是采用一种染料使细菌着色的染色方法。
微生物细胞含有蛋白质、核酸等两性电解质，在酸性溶液中离解出碱性基团而带正电荷，在碱性溶液中离解出酸性基团而带负电荷。
细菌的等电点为pH2～5。
在中性（pH7）、碱性（pH>7）或偏酸性（pH6～7）溶液中，细胞的等电点低于溶液的pH值，因此菌体一般带负电荷。
因为电离后碱性染料带正电荷，可与菌体内的负电荷结合，所以在细菌学研究中大多采用碱性染料进行染色。
常用的碱性染料有碱性复红、蕃红、结晶紫、孔雀绿、美蓝等。
（三）实验器材1、菌种：牙垢细菌。
2、染色液(1瓶/组)：石炭酸复红染色液。
3、仪器及相关用品(1套/组)：显微镜，香柏油，二甲苯，擦镜纸。
4、其它用品(1套/组)：蒸馏水，载玻片，盖玻片，吸水纸，酒精灯，火柴，接种环，镊子，无菌牙签。
（四）实验程序简单染色的操作过程如图4-1所示。
图4-1 细菌的简单染色与显微镜观察1、涂片：取一片洁净无油污的载玻片（通常保存于盛有酒精的广口瓶内，用镊子取出载玻片，在酒精灯上引燃载玻片表面的酒精，冷却后即可使用），在中央滴一小滴蒸馏水，用无菌牙签取少许牙垢，与水滴混匀，涂成薄层（直径约为10mm）。
细菌形态结构观察及大小测定实验总结
细菌形态结构观察及大小测定实验总结
实验目的：
观察不同细菌的形态结构，并测定其大小。
实验步骤：
1. 准备工作：准备好显微镜、载玻片、盖玻片、无菌培养基、细菌培养物、无菌移液器、无菌吸管等实验器材。
2. 无菌操作：在实验开始前，确保所有器材都经过无菌处理，以避免外部细菌的污染。
3. 制备细菌涂片：取一滴细菌培养物，滴在载玻片上，用无菌吸管将细菌涂匀，使其形成薄膜。
4. 固定细菌涂片：将涂片在火焰中迅速烘烤，使细菌固定在载玻片上。
5. 染色处理：将固定的细菌涂片放入染色剂中，如甲基蓝或靛蓝溶液，染色时间根据染色剂的要求进行。
6. 洗涤：用蒸馏水轻轻冲洗涂片，以去除多余的染色剂。
7. 干燥：将涂片放在通风处晾干，避免细菌结构的破坏。
8. 观察：将干燥的涂片放在显微镜下，使用低倍镜先进行初步观察，然后切换到高倍镜进行详细观察。
9. 记录：观察细菌的形态结构，包括形状、大小、颜色等特征，并进行记录。
实验结果：
根据观察，不同细菌的形态结构可能会有所不同。
常见的细菌形态包括球菌（如链球菌、葡萄球菌）、杆菌（如大肠杆菌、痢疾杆菌）、螺旋菌（如梅毒螺旋菌）等。
细菌的大小通常在微米级别，具体大小因细菌种类而异。
实验总结：
通过本实验，我们可以观察到不同细菌的形态结构，并测定其大小。
这对于研究细菌的特征和分类具有重要意义。
同时，实验中的无菌操作和染色处理也是非常关键的步骤，确保实验结果的准确性和可靠性。
细菌形态结构的观察和大小测定是微生物学研究的基础，对于了解细菌的生物学特性和病原机制具有重要意义。
细菌形态观察1
螺旋状菌：钩端螺旋体、猪痢疾密螺旋体标本片的显微镜观察。
3、细菌的特殊结构： 荚膜：炭疽杆菌、多杀巴氏杆菌等荚膜标本片的显微镜观察图片。 鞭毛：大肠杆菌、沙门氏杆菌等鞭毛标本片的显微镜观察图片。 芽孢：破伤风梭菌、炭疽杆菌等芽孢标本片的显微镜观察图片。
光学显微镜基本结构和用途； 低倍镜、高倍镜使用方法; 使用显微镜观察微生物的形态；
显微镜构造使用细菌形态结构观察细菌形态观察细菌形态观察细菌形态观察特殊结构specialstructure荚膜capsule鞭毛flagella菌毛pili芽孢spore荚膜鞭毛鞭毛与运动鞭毛与运动flash鞭毛鞭毛与菌毛芽孢
兽医微生物实验教学课件
（动物医学本科专业）
动物医学系
黄良宗 13925923069 Lzhuang1978@
实验一 细菌形态与结构的显微镜观察
(球菌)
（杆菌）
（螺形菌）
实验一：细菌形态结构的微显镜观察
目的要求：1、了解光学显微镜的构造和油镜的使用方法。 2、掌握细菌的基本形态和认识特殊结构。 实验内容：
1、讲解光学显微镜的构造和原理，示范光学显微镜油镜的使用方法。
2、细菌的形态：
球菌：葡萄球菌、链球菌等标本片的显微镜观察观察。
鞭毛
鞭毛与运动
鞭毛与运动 Flash
鞭毛
鞭毛与菌毛
芽孢
使用程序： 取镜 放镜 对光 放片 调焦
光学显微镜
油镜使用
低倍镜
高倍镜
油
镜
实验一：显微镜构造使用细菌形态结构观察
细菌形态观察
细菌形态观察
细菌形态观察
特殊结构（Special structure
荚膜（Capsule） 鞭毛（Flagella） 菌毛（Pili） 芽孢（Spore）
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2.革兰染色
1)方法 初染: 结晶紫和碳酸氢钠各1～3滴,3s-5s，水冲净,甩干。 媒染: 碘液1～3滴,3s-5s秒钟，水冲净,甩干。 脱色: 95%乙醇数滴,5s-10s, 水冲净,甩干。 复染: 稀释石炭酸复红液1～3滴,10s，水冲净,甩干。 关键步骤： 掌握脱色程度。
3.观察 标本片自然干燥或在酒精灯 火焰上烤干后,在涂菌处滴加 1滴香柏油,油镜下观察。
【实验报告示范】 实验一 细菌形态结构的观察
【实验内容】 1.实验室生物安全规则（每人掌握）； 2.细菌标本革兰染色观察（Gram’s Stain)(每人做）； 3.复习显微镜(油镜)的使用(每人做）； 4.细菌特殊结构（荚膜、鞭毛、芽胞）的观察（示教镜）。
【实验材料和方法】
一、细菌标本革兰染色观察 1．细菌涂片的制作 菌种： 葡萄球菌、大肠杆菌斜面培养物 方法：
1）破伤风杆菌的芽胞:
芽胞染色×1000
2)变形杆菌的鞭毛:
鞭毛染色×1000
3)肺炎链球菌的荚膜:
荚膜染色×1000
【实验注意点】
1.生物安全、无菌操作,菌种管清理； 2.显微镜(油镜)的使用——用后擦镜头； 3.用过的载玻片放进有消毒水的玻缸。 4.做好清洁卫生。
【实验报告内容】
1.细菌标本革兰染色观察（方法、结果画图、讨 论）； 2. 细菌特殊结构（荚膜、鞭毛、芽胞）观察（画 图）。
判断；
3.掌握细菌的特殊结构（荚膜、鞭毛、芽孢）的 形态特点。
【实验内容】
1.实验室生物安全规则(P3) ； 2.细菌标本革兰染色观察（Gram’s Stain)(每人做）
(P10) ；
3.复习显微镜(油镜)的使用(每人做）；
4.细菌特殊结构（荚膜、鞭毛、芽胞）的观察（示教镜）
(P104) 。
【实验材料】
4
4 需要 4 4 需要 4 需要
有
有 有 有
临床药学本科实验内容及安排
实验课的带教内容
1 细菌形态观察 细菌的生长现象与消毒灭 2 菌
学时数 显微镜
4 需要 4 有
录像
3 4 5 6
致病性球菌 药物的微生物检测 药物的敏感性实验 四体、真菌、病毒
4 需要 4 4 4 需要
有
有
非临床医学本科实验内容及安排
实验课内容
1 细菌形态结构的观察
学 显微 时 镜 数 4 需要
录像
细菌的生长现象与消 2 毒灭菌 3 四体、真菌、病毒
4
4 需要
有
有
实验一
细菌形态结构的观察
Observe on Morphology and Structure of Bacteria
【目的要求】
1.熟悉实验室生物安全规则,掌握无菌操作技术； 2.掌握细菌标本革兰染色的操作步骤和方法； 显微镜(油镜)下细菌形态的观察; 革兰染色结果
掌握病原生物学的基本方法与基本操作技术；
强化实验室生物安全观念， 掌握无菌操作技术； 加深对病原生物学基本理论知识的理解与认识； 培养独立操作、独立观察和思考、独立分析问题和 解决实际问题的能力； 增强科技创新能力； 培养严谨的作风、科学的方法和严肃认真的工作态 度。
临床医学本科实验内容及安排
实验课的带教内容 1 细菌形态观察 细菌的生长现象与消毒灭 2 菌 3 致病性球菌 4 肠道杆菌 5 白喉杆菌、厌氧菌 6 四体、真菌、病毒 学时数 显微镜 4 需要 录像
3.观察 将标本片在酒精灯火焰上烤干后,在涂菌处滴加1滴香柏油, 油镜下观察。 4.结果 图1:
葡萄球菌: 革兰阳性球菌,成堆或呈葡萄状排列
大肠杆菌: 革兰阴性杆菌,不规则分散排列
图 1：
细菌标本
革兰染色观察结果
Gram’s Stain,×1000
5.讨论 本实验结果表明,通过革兰染色在油镜下 可清楚地观察到标本片上细菌的形态、染色 性和排列状态。革兰染色可将细菌分为2大 类，即染成蓝紫色的革兰阳性菌和染成红色 的革兰阴性菌。其原理是革兰阳性菌和革兰 阴性菌细胞壁结构的差异。 结果不正确的影响因素分析：
医学微生物学实验 Experiment of Medical Microbiology
基础医学院病原生物学教研室 基础医学实验教学中心病原生物学与免疫学实验室 杨致邦
2010.1
教材
高等医学院校基础医学实验教学系列教材 ≪病原生物学实验≫ 科学出版社，2008年6月 主编 杨致邦 叶彬
实验教学的目标
涂片 干燥 固定 1）涂片：在酒精灯火焰旁用接种环无菌操作取生理盐水和葡 萄球菌、大肠杆菌斜面培养物，涂抹、混匀于载玻片上，如 下图：
生理盐水 + 葡萄球菌
生理盐水 + 大肠杆菌
生理盐水 + 葡萄球菌 +大肠杆菌
2）干燥 将涂片在酒精灯火焰上方约20cm高处烤干。 3）固定 将载玻片以均匀的速度通过酒精灯火焰来回3次。 2.革兰染色 1)方法 初染: 结晶紫和碳酸氢钠各1～3滴,3s-5s，水冲净,甩干。 媒染: 碘液1～3滴,3s-5s秒钟，水冲净,甩干。 脱色: 95%乙醇数滴,5s-10s, 水冲净,甩干。 复染: 稀释石炭酸复红液1～3滴,10s，水冲净,甩干。
(1)菌种:
葡萄球菌、大肠杆菌斜面培养物。
(2)试剂:革兰染色液。
(3)其他: 生理盐水、载玻片、酒精灯、接种环、显微镜、香 柏油、擦镜纸、二甲苯等。
【实验方法】
1．细菌涂片的制作
步骤： 涂片 干燥 固定 注意点： 1）无菌操作 2）加生理盐水（固体培养物）
载玻片
生理盐水 + 葡萄球菌
生理盐水 生理盐水 + + 大肠杆菌 葡萄球菌 +大肠杆菌
二、细菌特殊结构（荚膜、鞭毛、芽胞）的观察
结果见图2-4。
图2 变形杆菌的鞭毛
图3 破伤风杆菌的芽胞
图4 肺炎链球菌的荚膜
鞭毛染色×1000
芽胞染色×1000
荚膜染色×1000
请班干部 填写实验运行记录， 安排做好清洁卫生。
谢谢！
【结果观察】
指标: 形态、染色性、排列。
染色性判断：
革兰阳性菌染成蓝紫色, 革兰阴性菌染成红色。
葡萄球菌: 革兰阳性球菌,成堆或呈葡萄状排列。
Gram’s Stain,×1000
大肠杆菌: 革兰阴性杆菌,不规则分散排列。
Gram’s Stain,×1000
4.细菌特殊结构（荚膜、鞭毛、芽胞）的观察 注意点： 观察时只能动显微镜的微调,不要动位置。 要求： 画图记录。