生物化学：实验教学课程

即在两相溶剂中不断进行分配。由于它们的
分配系数不同，不同的溶质随流动相移动的
速率不等，于是就将这些溶质分离出来，形
成距原点不等的层析点。
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纸层析
GZHTCM
❖ 溶质在滤纸上的移动速率用Rf值表示；
原点到层析点中心的距离
Rf
=
————————————— 原点到溶剂前沿的距离
❖ 只要条件（如温度、展开溶剂的组成、 滤纸的质量等）不变，Rf值是常数。
❖操作：参考操作说明书（相应型号）
❖注意事项：
平衡！！
▪ 离心管和套管/吊篮一起用天平平衡
▪ 空的套管/吊篮也要放回转子中
▪ 离心管相对轴对称放置
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分配层析
GZHTCM
❖原理：分配层析是利用不同物质在两种不同溶
剂中的分配系数不同而得到分离的。
❖ 分配系数：是指一种溶质在两种溶剂中的溶解
达到平衡时，该溶质在两种溶剂中
所具有的浓度之比。通常用a表示。
α=Cs/Cm （Cs: 固定相浓度，Cm: 流动相浓度）
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分配层析
GZHTCM
❖ 一种物质在某溶剂系统中的分配系数，在一
定的温度下是一个常数。
分配系数是层析中分离纯化物质的主要依据。
不同物质在不同溶剂中的溶解度不同，因而也
就有不同的分配系数。
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纸层析
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实验室规章制度
GZHTCM
❖预习实验内容，明确目的，弄清操作步骤
❖未经许可，不准操作仪器 （移液器）
❖要特别注意安全、认真仔细操作
❖保持实验室清洁，严禁在实验室内饮食
❖实验完毕及时洗刷器皿，整理试剂、仪器、 擦净实验桌
❖轮流做值日
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离心机
❖原理：
GZHTCM
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离心机
GZHTCM
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纸层析
GZHTCM
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呈色反应
❖ 氨基酸 + 茚三酮
GZHTCM
蓝紫色络合物
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广州中医药大学
Guangzhou University of Chinese Medicine
生物化学
实验教学课程
厚德 博学 精诚 济世
主要内容
实验室规章制度
安全、卫生
仪器使用
原理、操作、维护
实验报告
书写格式、注意事项
GZHTCMபைடு நூலகம்
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实验报告格式要求
❖内容格式
题目 原理 操作 结果
讨论
LGZHTCM
GZHTCM
❖ 纸层析是以纸作为惰性支持物的分配层 析，纸纤维上的羟基具有亲水性，因此 以滤纸吸附的水作为固定相，而通常把 有机溶剂作为流动相。有机溶剂沿着滤 纸自下而上流动的，称为“上行法”； 自上而下流动的，称为“下行法”。
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纸层析
GZHTCM
❖ 将样品点在滤纸上（此点称为原点），进行
展开，样品中的种种溶质（如各种氨基酸）