细胞因子溶解分装
融解生长因子配比方法
融解生长因子配比方法融解生长因子配比方法融解生长因子（Recombinant Growth Factors）是一类在生物医学领域中广泛应用的重要生物活性物质，能够促进细胞的增殖、分化和修复。
在临床和实验室研究中，正确的融解生长因子配比方法对于保证实验结果的准确性和可重复性至关重要。
本文将介绍一种常用的融解生长因子配比方法，以帮助读者正确地进行实验操作。
一、材料准备在进行融解生长因子配比之前，首先需要准备以下材料：1. 融解生长因子：根据实验需求选择合适的融解生长因子，确保其纯度和活性。
2. 无菌注射用水：用于稀释融解生长因子。
3. 无菌注射器和注射针头：用于准确地量取融解生长因子和无菌注射用水。
二、融解生长因子配比方法以下是一种常用的融解生长因子配比方法：1. 将融解生长因子的冻干粉末取出，并用无菌注射器量取所需的融解生长因子量。
注意，在操作过程中要保持无菌环境，避免外界污染。
2. 将融解生长因子注入无菌注射用水中。
注射用水的量应根据实验需求和融解生长因子的浓度来确定。
一般情况下，建议按照融解生长因子的说明书中推荐的浓度进行配比。
3. 轻轻摇晃或轻轻旋转混合液，使融解生长因子充分溶解在无菌注射用水中。
避免剧烈摇晃或搅拌，以免损害融解生长因子的活性。
4. 检查混合液的透明度和均匀性。
如果发现有悬浮物或不均匀的现象，应重新配制融解生长因子溶液。
5. 将配制好的融解生长因子溶液分装到无菌试管或其他适合的容器中，尽量避免反复冻融，以保持其活性。
三、注意事项在进行融解生长因子配比的过程中，需要注意以下事项：1. 严格遵守无菌操作规范，确保实验环境的洁净和无菌。
2. 根据实验需求和融解生长因子的浓度来确定配比比例，避免过量或不足。
3. 避免剧烈摇晃或搅拌融解生长因子溶液，以免损害其活性。
4. 配制好的融解生长因子溶液应尽快使用，避免长时间存放。
结论融解生长因子配比方法是进行生物医学实验中的重要步骤，正确的配比方法能够保证实验结果的准确性和可重复性。
细胞因子检测试剂盒的原理与应用
细胞因子检测试剂盒的原理与应用细胞因子是一类可溶性蛋白质分子，能够调节和调控细胞间的通讯，参与调节免疫反应和炎症反应等生理过程。
细胞因子在细胞生物学研究和临床试验中具有重要作用。
细胞因子检测试剂盒是一种常用的实验工具，用于检测和量化细胞因子的含量和活性。
下面将从原理和应用两个方面介绍细胞因子检测试剂盒。
一、细胞因子检测试剂盒的原理细胞因子检测试剂盒的原理主要分为几个步骤：细胞培养、处理样本、荧光标记以及检测。
首先，细胞培养是细胞因子检测试剂盒的基础，可以使用细胞培养技术获得大量的细胞。
不同的细胞因子需要不同的细胞系进行检测。
其次，在处理样本的过程中，需要对样本进行预处理，以提取细胞因子并去除杂质。
对于细胞培养上清液或组织样本，可以通过离心等操作去除细胞和细胞碎片。
对于血液样本，可以通过离心或其他方法去除红细胞和凝块。
然后，荧光标记是细胞因子检测试剂盒中非常重要的一步。
荧光标记可以使用特异性的抗体或荧光染料。
抗体可以与细胞因子发生特异性结合，并用荧光染料进行标记。
荧光标记后的细胞因子可用于检测和定量。
最后，检测是细胞因子检测试剂盒的最后一步。
常用的检测方法有酶联免疫吸附实验（ELISA）、流式细胞术以及生物成像等。
ELISA是一种将细胞因子与特异性抗体结合测定的方法，具有灵敏度高、特异性好等特点。
流式细胞术可用于分析单个细胞的细胞因子含量和产生细胞因子的细胞类型。
生物成像可以通过引入荧光染料或放射性示踪剂进行成像，实现对细胞因子的可视化定量。
二、细胞因子检测试剂盒的应用细胞因子检测试剂盒在许多生物领域有广泛的应用，包括免疫学、癌症研究、炎症反应、药物开发等。
在免疫学研究中，细胞因子检测试剂盒可用于定量分析和表征不同细胞因子的生物学功能。
通过测定细胞因子的含量和活性，可以了解免疫细胞之间的相互作用和调节机制。
同时，在疫苗研究和免疫治疗中，细胞因子检测试剂盒也起到了重要的作用。
通过定量细胞因子的表达水平和作用机制，可以评估和优化免疫治疗的效果。
重组细胞因子溶解稀释液套装说明书
Toll Free: 400 6721 600 (China Only) Website: 重组细胞因子溶解稀释液套装I. 产品信息目录号: PK002 规 格: 1 kit 保 存: 2 - 8℃ 效 期: 一年 II. 产品简介本细胞因子溶解稀释套装外观为无色澄清透明的液体，无明显异物，无菌，适用于细胞因子的溶解和稀释，使用方便，操作简单，可高效溶解并稳定保存相应的细胞因子。
请根据细胞因子说明书选择合适的溶解液和稀释液，并严格按照说明书要求进行溶解、稀释、分装和冻存。
III. 试剂盒组分本套装内包含溶解液和稀释液两个组分：1. 溶解液为下列产品之一，用于相应细胞因子的溶解。
2. 稀释液用于重溶细胞因子的稀释 (瓶标为10 ml ，实验时请以实际量取为准)。
IV.使用方法1. 使用前将套装中的试剂恢复至室温。
2. 细胞因子蛋白开盖前以10,000 - 12,000 rpm 离心30 - 60秒或3,000 rpm 离心5 - 10分钟，加入适量说明书指定的溶解液，严格按照说明书所述方法进行溶解，不可涡旋振荡。
3. 重溶后的细胞因子短期保存：2 - 8℃保存一周；长期保存：加入适量稀释液进行稀释，终浓度不低于10 μg/ml ，轻轻吹吸混匀，分装冻存于-20℃或-80℃。
目录号 产品名称规格PS0021 磷酸钠缓冲液 (Sodium Phosphate) 5 mM pH 7.4 1 ml PS0031 柠檬酸盐缓冲液 (Citric Acid) 10 mM pH 3.0 1 ml PS0041 醋酸溶液 (Acetic Acid) 100 mM 1 ml PS0051 Tris 缓冲液 (Tris) 5mM pH 7.61 ml PS0061 1×PBS 缓冲液 (Phosphate Buffer Solution, PBS) pH 7.2 1 ml PS0071 磷酸钠缓冲液 (Sodium Phosphate) 5 mM pH 7.2 1 ml PS0081 磷酸钠缓冲液 (Sodium Phosphate) 5 mM pH 7.6 1 ml PS0091 磷酸钠缓冲液 (Sodium Phosphate) 5 mM pH 7.8 1 ml PS0101 5 mM HCl (pH 3.0)1 ml PS0111 磷酸钠缓冲液 (Sodium Phosphate)10 mM pH8.0 1 ml PS0121磷酸钠缓冲液 (Sodium Phosphate)10 mM pH7.51 ml目录号 产品名称规格Toll Free: 400 6721 600 (China Only) Website: VI. 注意事项1.不同产品、甚至不同生产批次的同一产品，溶解方法可能有所不同。
细胞因子常识
重组细胞因子概述一、细胞因子的概念细胞因子(cytokine)是由机体多种细胞分泌的小分子蛋白质，通过结合细胞表面的相应受体发挥以调节免疫应答为主的生物学作用。
细胞因子具有非常广泛的生物学活性，包括促进靶细胞的增殖和分化，增强抗感染和细胞杀伤效应，促进或抑制其它细胞因子和膜表面分子的表达，促进炎症过程，影响细胞代谢等。
二、细胞因子的特征1、低分子量；一般为＜60kD的多肽或糖蛋白。
多以单体形式存在，少数为二聚体，三聚体。
2、天然细胞因子由抗原、丝裂原或其他刺激物活化的细胞所分泌，通过旁分泌(paracrine)、自分泌(autocrine)或内分泌(endocrine)方式在局部发挥短暂作用。
3、一种细胞因子可由多种细胞产生，同一种细胞可产生多种细胞因子。
4、需通过与靶细胞表面相应受体结合后发挥其生物学效应。
5、具有高效性、多效性、叠性、拮抗性、协同性和网络性。
三、细胞因子的分类1、白细胞介素(interleukin，IL-s)最初是指由白细胞产生又在白细胞间发挥作用的细胞因子。
2、干扰素（interferon,IFN)最早发现的细胞因子，有干扰病毒感染和复制的能力。
分α、β和g三种类型。
3、肿瘤坏死因子超家族(tumor necrosis factor，TNF)1975年发现的一种能使肿瘤发生出血坏死的物质。
4、集落刺激因子(colony-stimulating factor，CSF)指能够刺激多能造血干细胞和不同造血祖细胞增殖分化，在半固体培养基中形成相应细胞集落的细胞因子。
包括G-CSF（粒细胞）、M-CSF（巨噬细胞）、GM-CSF（粒细胞、巨噬细胞）、Multi-CSF（多重）（IL-3）、红细胞生成素(EPO)、干细胞生长因子(SCF)、血小板生成素(TPO)等。
5、趋化因子(chemokine)主要功能是招募血液中的单核细胞、中性粒细胞、淋巴细胞等进入特定的淋巴器官和组织以及感染发生的部位。
白介素6（IL-6）细胞因子，真的很神奇
⽩介素6（IL-6）细胞因⼦，真的很神奇⽩介素6 ( IL-6) 是⼀种多效细胞因⼦，通过调节免疫和炎症反应在宿主防御中发挥重要作⽤。
IL-6主要由巨噬细胞、T 淋巴细胞、B淋巴细胞产⽣，在机体发⽣炎症反应或感染时，病毒、内毒素、肿瘤坏死因⼦等多种细胞因⼦可诱导机体产⽣IL-6。
IL-6⽣物学作⽤主要体现在诱导B细胞分化产⽣免疫球蛋⽩，促进T细胞增殖⽣长，增强⾎细胞的分化及其抗瘤效应，促进⾻髓造⾎⼲细胞增殖等。
IL-6是细胞因⼦⽹络中的重要成员，在急性炎症反应中处于中⼼地位，IL-6产⽣后诱导产⽣C反应蛋⽩（CRP）和降钙素原（PCT）⽣成，与炎症性疾病及感染程度直接相关。
IL-6能更快的诊断早期炎症及预警脓毒症的发⽣。
另外，IL-6半衰期要短于CRP和PCT，能更快的反应抗⽣素治疗的效果，更好的反应患者的预后。
同时，IL-6可以作为细胞因⼦风暴中疾病严重程度和预后指标的⽣物标志物，其表达优于TNF-α和IL-1。
⼤量的研究结果表明IL-6是⼀种细胞因⼦风暴的合适靶分⼦。
（IL-6在机体中的反应）如果是想将研究IL-6，Abbkine的IL-6细胞因⼦可以考虑：【IL6】重组⼈⽩介素6，PRP100120；【IL6】重组⼩⿏⽩介素6，PRP100371细胞因⼦储存建议：冻⼲粉形式的细胞因⼦⾮常稳定，在-20 ℃ 或-80 ℃ 条件下可保存数年。
冻⼲粉在使⽤前需进⾏溶解，然后以液体形式加到培养基中。
溶解后的细胞因⼦在4℃仅能短期保存 (约 1周)。
如想长期保存，需要先配制成稀释液(其中必须含有载体蛋⽩，如 0.1% BSA，5%HSA，或 10% FBS)，然后分装冻存于-20℃或-80℃。
⼀定要避免反复冻融，因每次冻融均会引起蛋⽩的部分失活。
SDS-PAGE分析结果：。
细胞因子的生产流程_解释说明以及概述
细胞因子的生产流程解释说明以及概述1. 引言1.1 概述细胞因子是一类具有重要调节功能的蛋白质分子，它们在机体内起着介导细胞间相互通讯、调节免疫反应以及参与炎症过程等多种生物学过程的作用。
随着对细胞因子功能的深入研究和相关领域的发展，越来越多的科学家开始关注细胞因子的生产流程，并努力寻找更有效、高纯度的制备方法。
1.2 文章结构本文将从以下几个方面详细探讨细胞因子的生产流程：首先，我们将介绍什么是细胞因子及其分类，以便读者对其有一个基本的认识。
然后，我们将解释细胞因子的作用机制，以揭示其在机体内起到调节与激活免疫反应等方面的关键作用。
接下来，我们将详细说明细胞因子的生产过程，包括其生物合成路径、制备和纯化方法以及质量控制与评价标准。
最后，我们将概述细胞因子在医学上及生物技术和药物研发领域中的应用，并探讨未来发展趋势与挑战。
1.3 目的本文旨在向读者提供关于细胞因子生产流程的全面介绍与解释，帮助读者深入了解细胞因子的制备过程、质量控制以及其在医学和药物研发中的重要性。
同时，本文也将展望细胞因子研究的未来发展方向，为科学家们进一步推动该领域的突破提供参考。
2. 细胞因子的生产流程2.1 什么是细胞因子细胞因子是一类可以在细胞之间传递信号的蛋白质分子，它们在机体中起着调节、调解和传导免疫、炎症等多种生理过程的重要作用。
细胞因子能够调控免疫系统的功能以及各种不同类型的细胞的发育、增殖和分化。
2.2 细胞因子的分类根据其作用方式和效应对象，细胞因子可以被分为多个不同的类别，如干扰素（IFN）、白介素（IL）、肿瘤坏死因子（TNF）以及趋化因子等。
每种细胞因子都有其特定的结构和生物学功能，并参与到调节免疫反应、促进组织修复和抵抗感染等多个生理过程中。
2.3 细胞因子的作用机制细胞因子主要通过与其受体结合来发挥作用。
当一个特定类型的细胞需要接收某种信号时，这种指定类型的受体会与相应的细胞因子结合，并激活一系列信号传导途径。
细胞因子溶解方法
细胞因子溶解方法
PeproTech细胞因子中不含载体蛋白（Carrier Protein）或其他添加剂（如BSA、HAS或蔗糖等），并且通常以最少量的盐来进行冻干处理，因此微量的细胞因子在冻干过程中会沉积于管内，形成很薄或不可见的蛋白层。
所以我们建议在收到产品后，务必在开盖前先离心，使粘在管盖或管壁上的蛋白聚集于管底（此时能否见到白色沉淀均属正常现象）。
1．离心：高速离心 (10, 000 rpm) 20-30 秒，或低速离心 (2, 000 rpm) 5 分钟。
2．溶解（Reconstitution）：用去离子水或其它缓冲液（根据说明书要求进行选择）溶解至说明书要求的浓度 (一般为 0.1-1.0 mg/mL，如10ug的产品，需用10uL-100uL的去离子水或缓冲液溶解)。
溶解时不可振荡，避免因化学键的断裂造成蛋白失活，可加入适当的溶剂轻摇并静置一段时间，待细胞因子完全溶解后使用。
溶剂的选择：
1）要求用去离子水溶解的产品，务必不可用盐溶液，避免过高的盐浓度造成蛋白不可逆的析出；
2) 要求用盐溶液溶解的产品，请依照说明书上的浓度，同样也是为了避免过高的盐浓度。
3．分装和贮存（Aliquot and Storage）：蛋白溶解后可根据自己的实验需要进一步稀释成工作液，稀释可用RPMI 1640、DMEM或PBS等溶液，其中最好含有5-10%的FCS （小牛或胎牛血清）或0.5 %的BSA（牛血清白蛋白）来稳定蛋白。
工作液在4℃可保存1周，如需长期保存，则需分装冻存于-20℃ （注意：不可冻存于-80℃）。
分装时每管中工作液的体积最好是一次实验的用量，以实现每次实验用完一只工作液，避免反复冻融引起蛋白活性的降低。
组织内细胞因子提取_概述及解释说明
组织内细胞因子提取概述及解释说明1. 引言1.1 概述细胞因子是一类在生物体内发挥重要生理功能的蛋白质分子。
它们由多种不同类型的细胞合成并释放，常通过与特定受体结合以调控免疫反应、促进细胞增殖和分化、调节炎症反应等各种生物学过程。
然而，由于细胞因子在体内含量较低且易降解，为了深入研究和应用这些生物活性分子，我们需要运用有效的技术方法来从组织样本中提取并测量这些细胞因子。
1.2 文章结构本文将首先介绍细胞因子提取的原理，包括对细胞因子定义与功能的阐述以及常用的细胞因子提取方法概述和其在各个应用领域中的意义。
接着，我们将详述组织内细胞因子提取的技术过程，包括组织样本采集与处理、提取方法选择与优化以及测量及分析技术。
随后，我们将讨论组织内细胞因子提取过程中遇到的困难与挑战，包括样本污染和损伤问题、技术限制及改进方向以及数据解读与结果验证难题。
最后，我们将总结主要观点和发现，并分析研究的局限性和不确定性，展望未来研究方向和潜在应用价值。
1.3 目的本文旨在全面介绍组织内细胞因子提取的原理、方法和应用，并探讨其中存在的困难与挑战，为相关研究者提供指导和帮助。
同时，通过对该领域的深入了解，我们也希望为未来研究方向提出建议并展望其潜在应用价值。
2. 细胞因子提取的原理:2.1 细胞因子的定义与功能:细胞因子是一类由多种细胞合成和释放的蛋白质信号分子，它们在机体内发挥着调节免疫反应、细胞增殖和分化、炎症反应等重要生物学功能。
细胞因子可以根据其作用机制分为许多不同的类型，如生长因子、凋亡相关因子、细胞黏附分子等。
2.2 细胞因子提取方法概述:细胞因子的提取过程通常涉及到样本采集、组织处理和蛋白质分离纯化。
样本采集应注意使用无菌技术，并尽量避免污染和损伤，以保证得到可靠的结果。
组织处理主要包括细胞破碎（如超声波破碎或冻融法）和蛋白质溶解（如盐溶解或有机溶剂萃取）。
而蛋白质分离纯化则可选择电泳技术、色谱技术或亲和层析等方法。
细胞因子套装（CIK专用）说明书
深圳市达科为生物工程有限公司 地址：深圳市坪山区坑梓街道金辉路14号深圳市生物医药创新产业园区1号楼702、703 518122细胞因子套装（CIK 专用）说明书CIK Activated Agent Kit （CIK-CYT ）Cat#：6141011产品描述：细胞因子套装（CIK 专用）是本公司在对CIK 和T 淋巴细胞培养进行大量摸索和实验的基础上，根据优选出的细胞培养所需要的刺激因子的种类及剂量配制而成，主要作为人CIK 细胞培养的诱导活化剂。
本产品批间质量稳定，可搭配各种无血清或有血清培养基用于诱导活化CIK 细胞，使用时按照1:100的比例加入培养基。
包装规格：使用方法：培养细胞时，将组分I （CIK Activated Agent I ）和组分II （CIK Activated Agent II ）分别按照1:100的比例加入总体系中使用。
培养基总体积组分I组分II 10 mL 100 μL 100 μL 20 mL 200 μL 200 μL 50 mL500 μL500 μL具体培养方法：1. 采血并分离PBMCs 。
2. 使用完全培养基将分离获得的PBMCs 按2-2.5×106个/mL 的浓度接种于T75或T175细胞培养瓶中，按照1:100的比例加入CIK Activated Agent I ，37℃，5%CO 2培养箱中培养。
3. 24hr 后，即第1天按照1:100的比例加入CIK Activated Agent II ，刺激CIK 细胞的生长和增殖。
4. 从第4天开始，每两天取样计数细胞浓度并根据计数结果补充培养基（含1000IU/mL 的重组人IL-2），调整细胞浓度为1.5×106个/mL 。
5. 根据细胞培养悬液体积选择扩瓶或转入细胞培养袋，T75培养瓶最大培养货号 名称组分规格 6141011细胞因子套装（CIK 专用） CIK Activated Agent KitCIK Activated Agent I 500μL CIK Activated Agent II500μL深圳市达科为生物工程有限公司 地址：深圳市坪山区坑梓街道金辉路14号深圳市生物医药创新产业园区1号楼702、703518122 Tel************** Fax************** E-mail:*************体积40mL ，T175培养瓶最大培养体积200mL ，培养基体积超过200mL 时，可转入细胞培养袋中培养。
细胞因子药物分析
电荷等
分子大小、离子交换
分析所需时间 10～120min
分辨力
好
几小时 好
10～30min 好
样品体积 灵敏度范围 定量准确性
10～50ul ng ～ug
+
1～50ul ng～ug
±
1～50nl pg +
分析方式
紫外、荧光、折射 紫外（可见、荧光） 同HPLC
仪器价格
电化学、放射性 中～高
银染、放射自显影
分子排阻HPLC
分子大小
质谱测量法
分子大小
四、蛋白质含量测定
一般采用蛋白质的含量测定。在产品以效价表示时，不 必另测含量。
有时还要证明所得量值直接与生物测定值相关。 如已证实相关性，在生产过程中可测定含量而不测定生
物活性。
可根据物理化学性质采用Folin-酚试剂法（Lowry法 ）、染色法（Bradford法）、双缩脲法、紫外吸收法 、HPLC法和凯氏定氮等方法。
1、概念： 采用DNA重组技术或其他新生物技 术生产的治疗和预防药物。
2、分类 ｛ 重组DNA药物 重组蛋白质药物
1、重组蛋白质或重组多肽药物包括： 细胞因子类：rIFN、IL-2、EPO等；
抗细胞素治疗：CD4可溶性受体等； 重组溶血栓类：rSK、rSAK等； 人源化单克隆抗体制剂； 重组疫苗和菌苗制剂。
（2）HPLC法：分子筛、反相层析，离子交换层析，尽 量采用与SDS-PAGE原理不同的反相或离子交换层析， 不主张用分子筛分析。 （3）毛细管电泳：简便、快速、灵敏度和分辨率高； 价格高、重现性差。
几种检定重组蛋白纯度方法的比较
特性 分离机制
HPLC
SDS-PAGE、IEF CE
MD02 抗体的分装保存和稀释
抗体的分装保存和稀释1、抗体的分装保存做科研实验时用到的免疫组化一抗，多为浓缩液的形式。
对于包装规格较大和预计使用周期较长的一抗浓缩液，建议根据用量进行分装保存，分装后的抗体需根据抗体使用说明书指明的条件，保存在－20℃～－40℃低温冰箱中或2～8℃保存（并非所有的供应商都推荐一抗浓缩液在冷冻条件下长期保存）。
这样可以减少抗体反复开盖平衡至室温和反复冻融引起的效价下降。
抗体分装时的储存容器应由不吸附蛋白质的材料制成，如聚丙烯，聚碳酸酯和硼硅酸玻璃。
即用型抗体工作液可在2～8℃冰箱中保存，无需在低温冰箱中保存。
2、浓缩液抗体的稀释抗原抗体的结合与两者之间的分子比例有密切关系。
如果使用的抗体浓度太高，抗体分子在特异性结合目标抗原后剩余过多，将会造成抗体与组织其他成分的非特异性结合的增加，使背景染色明显增强，甚至出现区域假阳性现象；无论特异性多好的抗体，只要浓度高到一定程度，都会出现非特异性着色或者染色背景。
因此，选择适当的抗体稀释度，不仅能节省抗体，而且还是获得满意染色结果必要条件。
在实际工作中，有很多抗体都从试剂公司购买，厂家所附的说明书上对抗体的稀释度通常已经标明，给了一个适当的参考范围。
第一抗体的使用浓度是免疫组织化学染色的关键之一，在第一次使用某种新的一抗时，有必要对抗体的最佳稀释度进行测定（如在推荐稀释度的上下区域梯度稀释后进行检测）。
浓缩液抗体的稀释是一个相当比较简单的操作，不少研究者会用实验室自己配置的PBS 来进行稀释。
这里需要提出关注的是——稀释后抗体的稳定性。
一般来说，浓缩液稀释成工作液后当天马上用完，不容易出现稳定性的问题。
而有时候由于某些一抗的效价比较高，一次稀释出来的工作液的量比较大，在当天用不完的时候有些研究者会选择就这样保存在冰箱中，等下次再用。
这样的操作可能会对实验带来一定的变数，虽然PBS可以用来稀释抗体浓缩液，但并非稳定保存抗体的有效试剂。
在单纯的PBS中，抗体效价会下降的比较快，那么效价下降前后的实验条件是不一样的，将导致批次实验结果的比较相对困难；例如原本弱阳性的染色结果，在一抗效价下降后，可能会得出阴性的染色结果。
蛋白实验中保存及使用的常见问题说明
蛋白实验中保存及使用的常见问题说明1、蛋白为什么要冻干？冻干对蛋白的影响有哪些？答：蛋白质对热敏感，冻干能使绝大部分蛋白质的活性保留下来，提高蛋白的稳定性并延长保存时间，同时降低运费。
冻干有可能会造成蛋白的活性部分损失，聚集和其它变性问题。
但可以通过添加保护剂（稳定剂，添加剂，辅料）和控制冻干的各种条件来尽可能降低这些负面的影响。
温馨提示：武汉华美提供的蛋白产品一般为冻干粉，它们在室温条件下非常稳定(至少1个月)。
尽管如此，我们还是建议您在收到我们的产品后保存于-20℃，以确保蛋白100%的活性。
2、冻干前为什么向蛋白溶液中加保护剂？一般冻干保护剂有哪几种？你们的产品通常加的保护剂是什么？答：保护剂是用来在冻干和储存过程中保护蛋白的。
常用的保护剂或稳定剂有糖类，多元醇，聚合物，表面活性剂，某些蛋白和氨基酸等。
我们通常加8%（质量比体积）的海藻糖和甘露醇作为冻干保护剂。
海藻糖可明显阻止蛋白质二级结构改变以及冻干过程中蛋白质的伸展和聚集；甘露醇也是一种普遍应用的冻干保护剂和填充剂，可以降低某些蛋白的冻干后聚集情况。
温馨提示：对于大多数蛋白，重悬后在4℃仅能短期保存(约1周)。
如想长期保存，请先配制成稀释液(其中必须含有载体蛋白，如0.1% BSA，5%HSA，或10% FBS)，然后分装冻存于-20℃或-80℃。
一定要避免反复冻融，因每次冻融均会引起蛋白的部分失活。
3、为什么我的管内几乎看不见蛋白产品？答：武汉华美的蛋白产品中不含载体蛋白或其它添加物(如牛血清白蛋白(BSA)，人血清白蛋白(HSA)和蔗糖等，并以最低含盐量的溶液进行冻干时，常常不能形成白色网架结构，而是微量的蛋白在冻干过程中沉积在管内，形成很薄或肉眼不可见的透明蛋白层。
温馨提示：在打开管盖前，我们建议您在小离心机中快速离心20-30秒，使附着在管盖或管壁上的蛋白聚集于管底。
我们的质控步骤保证每管中所含的蛋白量准确无误，虽然有时您无法看到蛋白粉末，但管中的蛋白含量仍是非常精确的。
试剂分装流程
试剂分装流程
试剂分装的一般流程：
1. 准备工作：
清洁环境：在无菌条件下操作，提前对分装区域进行清洁和消毒，确保无尘、无菌、无污染。
个人防护：佩戴实验服、手套、口罩、护目镜等个人防护装备。
工具与耗材：准备经过灭菌的分装器具（如吸头、移液器、离心管、瓶子、标签等）。
2. 试剂准备：
查看试剂特性：了解试剂的性质（如稳定性、毒性、腐蚀性、光照敏感性等），确定合适的储存条件和分装方法。
解冻和混匀：如试剂为冷冻保存，需提前按照规定方法解冻并充分混匀。
3. 分装操作：
使用已校准的移液器或专用器械，严格按照操作规程和剂量要求进行分装。
若试剂对光敏感，应在避光条件下操作，必要时使用棕色瓶分装。
对于生物制品，确保低温操作，减少活性损失，快速完成分装，避免反复冻融。
标签清晰：每一份分装好的试剂上都要立即贴上标签，注明试剂名称、浓度、批号、有效期、配制日期、注意事项等必要信息。
4. 质量检查：
视觉检查：确认分装后试剂无明显杂质、沉淀或颜色变化。
记录确认：在实验记录本上详细记录分装过程，包括分装时间、分装量、操作人员等信息。
5. 废液处理：
分装过程中产生的废弃物和废液应按照实验室废弃物管理制度进行妥善处置。
细胞因子检测试剂盒的原理及实验操作流程
细胞因子检测试剂盒的原理及实验操作流程细胞因子检测试剂盒是一种用于检测细胞因子水平的实验试剂盒。
细胞因子是一类具有调节和介导免疫、炎症和细胞增殖等生物学功能的蛋白质分子，它们在机体免疫应答、疾病发展以及药物研究等领域具有重要的意义。
细胞因子检测试剂盒通过特定的试剂和技术，可以快速、准确地检测细胞因子的水平，为科学研究和临床诊断提供有力的支持。
细胞因子检测试剂盒的原理主要包括两个方面：免疫学方法和酶联免疫吸附测定法（ELISA）。
免疫学方法是通过免疫学反应原理来检测细胞因子的水平。
具体步骤包括：1. 样品收集和预处理：收集需要检测的样品，如血液、血清、血浆或细胞上清等。
对样品进行预处理，例如离心、稀释或加标等，以提高检测的灵敏度和准确性。
2. 抗体结合：将与目标细胞因子相关的抗体加入样品中，通过抗原-抗体结合的方式，形成特异性复合物。
这些抗体通常是特异性识别目标细胞因子的单克隆或多克隆抗体。
3. 洗涤：对于非特异性结合的物质，通过洗涤步骤将其除去，以减少干扰并提高检测的特异性。
4. 信号产生：添加特定的辅助试剂，如酶标记的二抗或荧光标记的二抗等，在免疫结合复合物中形成信号物质。
5. 信号检测：利用光谱设备或荧光显微镜等仪器对信号物质进行检测和定量分析。
检测的方法根据试剂盒的不同而有所差异，常见的包括酶标记法、荧光法、放射免疫法等。
ELISA法是目前最常用的细胞因子检测方法之一，其原理基于酶标记物介导的免疫反应。
ELISA法可以快速、准确地检测细胞因子的水平，并且具有灵敏度高、重复性好的特点。
具体步骤如下：1. 吸附：将经预处理的样品加入包被了特异性抗体的微孔板孔中，目标细胞因子会与抗体结合。
2. 洗涤：将非特异性结合的物质通过洗涤步骤除去，以减少背景干扰。
3. 检测：添加特异性酶标记的二抗，它会与目标细胞因子结合。
通过酶底物的作用，产生可定量测定的颜色反应。
4. 反应终止：通过反应终止剂停止酶反应，阻止进一步的颜色反应产生。
细胞因子静脉治疗方法
因子静脉治疗流程
1．干细胞因子注射液包装为2ml西林瓶装；因子在实验室-20℃低温保存，发放之前室温解冻，并用保温箱低温（0-16℃）运送至治疗中心，避免剧烈震动；
2．严禁强光及放射线照射；
3．正常状态下，因子为无色透明或微黄色液体，治疗前，临床医生检查干细胞因子注射液包装、是否有絮状物、颜色等；
4．使用期间切忌饮酒、浓茶等刺激性食物；
5．细胞因子通过静脉点滴方式注入人体。
具体操作为：第一，取100ml生理盐水一瓶，先滴注50ml，使体内血液循环畅通；
第二，另取100ml生理盐水一瓶，抽掉其中50ml，用一次性无菌包装注射器抽取2ml细胞因子，注入到剩余50ml生理盐水中，充分混匀（如医院有50ml包装生理盐水，即直接用无菌注射器抽出干细胞因子注射液混入盐水中）。
第三，滴注以上细胞因子混合液；
第四，滴注完毕后，继续给予第一步剩下的50ml生理盐水冲管。
移植前，给予50ml生理盐水，
6．根据客户具体状况，调整滴速为20-30滴/分钟；移植过程中，如患者出现强烈不适感，立即停止输液。
细胞因子溶解分装
摘要：我们知道，PeproTech的所有细胞因子和蛋白均为冻干粉，这使得运输非常便捷，只要常温即可。
冻干粉在使用前需进行溶解，然后以液体形式加到培养体系或注射入动物体内。
溶解步骤非常关键，因溶解不好会导致细胞因子或蛋白的失活，这也是很多用户在实际使用中经常遇到的问题。
我们知道，PeproTech的所有细胞因子和蛋白均为冻干粉，这使得运输非常便捷，只要常温即可。
而且，细胞因子和蛋白冻干粉非常稳定，在-20℃或-80℃条件下可保存数年。
冻干粉在使用前需进行溶解，然后以液体形式加到培养体系或注射入动物体内。
溶解步骤非常关键，因溶解不好会导致细胞因子或蛋白的失活，这也是很多用户在实际使用中经常遇到的问题。
那么，应该如何进行正确的溶解呢？下面我们以Recombinant Human IL-4 (重组人IL-4，产品编号：200-04)的说明书为例，对细胞因子或蛋白的溶解方法进行详细的阐述。
拿到重组人IL-4的说明书后，您会发现有一段关于Reconstitution(重悬)的叙述，这段内容含有溶解相关的所有信息。
1. Centrifuge the vial prior to opening.第1步：开盖前离心试剂管PeproTech的细胞因子或蛋白冻干粉装盛在塑料管中，为无菌包装。
冻干粉在运输过程中可能会因颠簸而漂散并粘贴于管壁或管盖上，所以在打开塑料瓶盖前，需将冻干粉通过离心收集到管底，以便用很小体积的液体即可将冻干粉完全溶解。
有很多用户会问一个问题，即应该用多少转速、多长时间离心试剂管，才能达到良好的收集效果？答：有些小型高速离心机(多为进口品牌)的面板上有一个Spin键，按了此键后，离心机会自动快速上升到其最大速度(10000rpm或12000rpm)，上升到最高点后速度即刻下降，直至停止旋转，整个过程大约30s。
这个Spin键足以很好的将细胞因子或蛋白收集到管底。
但有些实验室没有这样的高速离心机，只有最高转速为4000-4500rpm的离心机。
CIK制备细胞因子配制方法
细胞因子配制方法1、IL-1α⑴、厂家来源：PeproT ech；规格：2μg/瓶（2×106 IU/瓶）；使用浓度：10 IU/μl；存放：置-20℃冰箱冻存。
⑵、配制、分装：在超净台内，取1支新包装IL-1α，瞬时离心；取1支50ml离心管，加20 ml DMEM/F-12，取1ml DMEM/F-12充分溶解IL-1α后转移至此离心管内，润洗3次，充分混匀。
1 ml/管分装于EP管内（储存浓度为100 IU/μl），置-20℃冰箱冻存。
使用时取1支解冻，10倍稀释后-20℃保存备用，使用浓度为10 IU/μl；一旦解冻使用后，未使用完的IL-1α置4℃冰箱保存，7日内未用完，则弃去不用，重新解冻新的使用。
2、IL-2⑴、厂家来源：上海华新生物高技术有限公司；规格：20W IU/瓶；使用浓度：100 IU/μl；存放：置-20℃冰箱冻存。
⑵、配制、分装：在超净台内，以2 ml DMEM/F-12充分溶解，配制成浓度为100 IU/μl，4℃保存备用，若长期不用，置于-20℃冰箱冻存。
一旦解冻使用后，未使用完的IL-2置4℃冰箱保存，7日内未用完，则弃去不用，重新配制新的使用。
3、IFN-γ⑴、厂家来源：PeproTech；规格：20μg/瓶（4×105IU/瓶）；使用浓度：100 IU/μl；存放：置-20℃冰箱冻存。
⑵、配制、分装：在超净台内，取1支新包装IFN-γ瞬时离心；取1支50ml离心管，加入4 ml DMEM/F-12，从中取1ml充分溶解IFN-γ，润洗3次，配制成100 IU/μl。
1 ml/管分装至无菌的1.5 ml EP管中，做好标记，-20℃保存。
一旦解冻使用后，未使用完的IFN-γ置4℃冰箱保存，7日内未用完，则弃去不用，重新解冻新的使用。
4、CD3mAb⑴、厂家来源：R&D；规格：500μg/瓶；使用浓度：25ng/μl；存放：置-20℃冰箱冻存。
重组细胞因子蛋白溶解详细步骤及注意事项
重组细胞因子蛋白溶解详细步骤及注意事项为了运输方便，稳定活性，一般细胞因子蛋白均为冻干粉，除非一些特殊的重组蛋白。
冻干粉可以保证细胞因子在室温条件下很稳定（至少一个月），当然，为了你能得到更加准确的实验结果，确保蛋白百分之百的活性，我们建议你在收到产品后应立即保存于-20℃。
对于大多数蛋白质，重悬后在4℃仅能短期保存（约一周）。
如果想长期保存，请先配制成稀释液（其中必须含有载体蛋白，如0.1% BSA，5%HSA，或10% FBS），然后分装成合适的量并冻存于-20℃或-80℃。
一定要避免反复冻融，因每次冻融均会引起蛋白的部分失活。
我们在进行科学研究时，需要将细胞因子按照一定的浓度，以液体的形式加到培养体系或注射入动物体内，因此，在使用前必须将冻干粉进行溶解。
在溶解过程中一定要小心仔细，因为溶解不好会导致细胞因子失活或浓度不准确，进而影响实验结果及研究进度。
这也是我们在实际使用中经常遇到的问题。
那么，怎样的溶解方式才会达到最佳的效果呢？第一步：开盖前一定要离心试剂管。
我们的细胞因子蛋白冻干粉是装在无菌的塑料管中的。
在运输过程中可能会因颠簸而漂散并粘贴于管壁或管盖上，在收到产品时甚至看不到管中有什么东西，所以在打开塑料瓶盖前，一定要将冻干粉进行离心，保证全部产品都在管底，这样用很小体积的液体就可以将冻干粉完全溶解了。
那么，在离心的时候用多少转速、多长时间离心试剂管，才能达到良好的收集效果呢？这个主要看我们实验室离心机配置了。
比如我们一般用的台式小型高速离心机，在其面板上一般会有Spin键的。
使用此功能，离心机会自动快速的达到最大转速（10000rpm或12000rpm），上升到最高点后速度即刻下降，直至停止旋转，整个过程大约30s。
Spin一次就足以将细胞因子蛋白收集到管底。
当然，如果实验室没有这样的高速离心机，只有最高转速为4000-4500rpm的离心机，那么只需要将离心机转速设置为3000-3500rpm离心5min，就能达到如上的效果，放心的用于溶解。
科创生物 细胞因子冻干粉使用说明 aFGF
资料范本本资料为word版本，可以直接编辑和打印，感谢您的下载科创生物细胞因子冻干粉使用说明 aFGF地点：__________________时间：__________________说明：本资料适用于约定双方经过谈判，协商而共同承认，共同遵守的责任与义务，仅供参考，文档可直接下载或修改，不需要的部分可直接删除，使用时请详细阅读内容“美肤肽TM”细胞生长因子冻干粉—产品说明书（Manual of ‘Mei Fu Tai TM’ Cell Growth Factors）版本号:V1.5修订日期：2014/10/16【产品】【配方成分】水、甘露醇、海藻糖、牛奶蛋白提取物、寡肽-5、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠等。
【生产工艺】量取适量的4℃预冷无菌水，依次加入甘露醇、海藻糖、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠，待充分溶解后，加入牛奶蛋白提取物，搅拌均匀；最后加入解冻的活性物，包括寡肽-5，混匀，经0.22μm滤膜过滤除菌，使用自动分装器分装至无菌西林瓶中进行冻干处理，在负压条件下使橡胶盖吸压到西林瓶，保证全过程无菌。
成品放置阴凉处保存。
溶媒为超纯水经高温高压灭菌后冷却至常温经自动分装器分装至西林瓶，经压盖后至阴凉处存放。
【感官指标】应为白色或微黄色疏松体，加溶媒后溶解为澄明液体，不得含有肉眼可见的不溶物。
【卫生化学指标】汞、砷、铅等重金属含量检测合格，不含激素类物质，无防腐剂添加，溶液pH值在6.0-7.0之间。
上述各项指标，参照相关的化妆品标准检验方法进行检验。
【微生物指标】每毫升样品的菌落总数、霉菌和酵母菌检出数均小于10CFU，粪大肠杆菌、铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌均无检出。
上述各项指标，参照相关的化妆品标准检验方法进行检验。
【生物学活性检验方法】本品的主要活性成份是寡肽-5。
主要活性是促进皮肤细胞的生长和增殖，根据这一特性，本品采用MTT法，以成纤维细胞NIH-3T3作为受试细胞，测定细胞生长因子原液对NIH-3T3细胞的促细胞分裂活性，大致过程如下：（1）首先将NIH-3T3细胞进行传代，一定密度接种到96孔细胞培养板中，在5%二氧化碳培养箱中，37℃培养至合适密度。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
摘要：我们知道，PeproTech的所有细胞因子和蛋白均为冻干粉，这使得运输非常便捷，只要常温即可。
冻干粉在使用前需进行溶解，然后以液体形式加到培养体系或注射入动物体内。
溶解步骤非常关键，因溶解不好会导致细胞因子或蛋白的失活，这也是很多用户在实际使用中经常遇到的问题。
我们知道，PeproTech的所有细胞因子和蛋白均为冻干粉，这使得运输非常便捷，只要常温即可。
而且，细胞因子和蛋白冻干粉非常稳定，在-20℃或-80℃条件下可保存数年。
冻干粉在使用前需进行溶解，然后以液体形式加到培养体系或注射入动物体内。
溶解步骤非常关键，因溶解不好会导致细胞因子或蛋白的失活，这也是很多用户在实际使用中经常遇到的问题。
那么，应该如何进行正确的溶解呢？下面我们以Recombinant Human IL-4 (重组人IL-4，产品编号：200-04)的说明书为例，对细胞因子或蛋白的溶解方法进行详细的阐述。
拿到重组人IL-4的说明书后，您会发现有一段关于Reconstitution(重悬)的叙述，这段内容含有溶解相关的所有信息。
1. Centrifuge the vial prior to opening.第1步：开盖前离心试剂管PeproTech的细胞因子或蛋白冻干粉装盛在塑料管中，为无菌包装。
冻干粉在运输过程中可能会因颠簸而漂散并粘贴于管壁或管盖上，所以在打开塑料瓶盖前，需将冻干粉通过离心收集到管底，以便用很小体积的液体即可将冻干粉完全溶解。
有很多用户会问一个问题，即应该用多少转速、多长时间离心试剂管，才能达到良好的收集效果？答：有些小型高速离心机(多为进口品牌)的面板上有一个Spin键，按了此键后，离心机会自动快速上升到其最大速度(10000rpm或12000rpm)，上升到最高点后速度即刻下降，直至停止旋转，整个过程大约30s。
这个Spin键足以很好的将细胞因子或蛋白收集到管底。
但有些实验室没有这样的高速离心机，只有最高转速为4000-4500rpm的离心机。
这种情况下，需3000-3500rpm离心5min，也能达到类似的效果。
2. Reconstitute in water to a concentration of 0.1-1.0 mg/ml. Do not vortex.第2步：用无菌水重悬至0.1-1.0 mg/ml，不可振荡。
这个步骤即为溶解步骤，非常重要。
1) 一定要用推荐的溶液重悬(或溶解)冻干粉用于溶解细胞因子或蛋白的溶液千差万别。
此例中的重组人IL-4需用水溶解，而重组人IL-2 (产品编号：200-02)则需用100mM Acetic Acid (醋酸)溶解，重组人TGF-beta1 (产品编号：100-21)需用10mMCitric Acid (柠檬酸)，pH3.0溶解，重组人FGF-basic(产品编号：100-18B)需用5mMTris，pH7.6溶解，重组人FGF-10(产品编号：100-26)需用5mMSodium Phosphate(磷酸钠)，pH7.4溶解，重组IL-13(产品编号：200-13)需用20mMMHCl溶解。
(注：即使同一重组细胞因子或蛋白，不同批次的溶解方法也可能有所不同，因此上面的叙述仅供参考。
具体应该如何溶解应以相应批次的官方说明书为准)。
经常有用户会问，为什么会有这么多种溶解方法？答：我们知道，蛋白的溶解性与很多因素有关，其中比较重要的是pH值和离子强度。
PeproTech的细胞因子或重组蛋白在出厂前均经严格测试，说明上所标明的溶解液是能够将该细胞因子或重组蛋白完全溶解的液体。
如果您所用的溶解液的pH值和离子强度与说明书中所标明的不符，很多时候会造成细胞因子或重组蛋白不能完全溶解或者根本无法溶解，这样所配得的细胞因子或重组蛋白必然活性不够或丧失。
有不少用户没注意说明书上的描述，而是根据习惯，直接用PBS或培养液(1640或DMEM等)等溶解细胞因子或蛋白的冻干粉。
这样做可以吗？答：有时可以，要看具体情况。
PeproTech的大多数细胞因子或蛋白冻干粉的溶解液不是PBS，此时千万不能用PBS或培养液直接来溶解，具体原因在上面已经叙述过。
而有部分细胞因子，如重组人KGF(产品编号：100-19)和重组人FGF-23(产品编号：100-52)等，说明书上的溶解液即为1x PBS，此时用PBS溶解完全没问题，那么用培养液溶解也是可以的，不过最好还是用先用PBS溶解，然后再用培养液稀释。
2) 一定要溶解到指定的浓度。
蛋白在一定的浓度范围内可以保持良好的稳定性，这个范围就是说明书上所标明的浓度范围，该例为0.1-1.0 mg/ml。
这个浓度范围对于不同的细胞因子或重组蛋白是不同的。
如重组人FGF-6(产品编号：100-30)为0.5-1.0mg/ml，而重组人Activin B(产品编号：120-15)则一定要是0.5mg/ml。
高于或低于该浓度范围会有什么问题呢？答：首先，细胞因子或蛋白会不稳定，即很容易出现活性下降的现象。
其次，高于这个浓度范围，可能会超过该蛋白的最大溶解浓度，即蛋白无法完全溶解。
再者，高于或低于该浓度范围，蛋白可能会出现聚集(aggregation)，最终结果还是部分蛋白未溶解，导致蛋白活性的减弱。
3) 一定不能振荡(vortex)。
这里所说的振荡是指用涡旋仪进行快速振荡。
有用户会问，若想保证溶解液与冻干粉充分混匀，以实现细胞因子或重组蛋白的完全溶解，该怎么办呢？答：多数细胞因子或重组蛋白的冻干粉是非常容易溶解的，一般我们用移液枪的枪头轻吹几下，即可使细胞因子或重组蛋白完全溶解。
对于不易溶解的细胞因子或蛋白，PeproTech会在说明书中进行备注(Note)。
如在重组人IL-13(产品编号：200-13)的说明书中您会看到：Slow to dissolve (缓慢溶解)，在重组人IL-11(产品编号：200-11)的说明中会看到：This solution is slow to dissolve.(该溶液溶解缓慢)。
这种情况下，您最好能将要溶解的细胞因子或重组蛋白放在水平摇床(shaker)上低速摇一段时间，促使细胞因子或重组蛋白完全溶解。
有些蛋白，如重组人IL-13 Variant (产品编号：200-13A)虽然难溶，但却不需用摇床来加速溶解。
其说明书上的备注为：Allow the reconstituted vial to sit at 4℃forat > 2 hours before use. (将重悬液在4℃静置2小时以上)3. This solution can be stored at 2-8℃for up to 1 week.第3步：该重悬液在2-8℃最长可保存1周。
用说明书上推荐的溶液将细胞因子或重组蛋白重悬到推荐的浓度后，细胞因子或重组蛋白可放置在2-8℃，即冰箱的冷藏室。
在这种条件下，细胞因子或重组蛋白的活性最长可保持1周。
这对一个周期为5-7天的实验，如DC(树突状细胞)的诱导成熟是足够的。
在此期间，只要每次从冰箱里吸取一定量的细胞因子或重组蛋白溶液加入到培养体系内即可。
其实，说明书上推荐的浓度对于一般的实验来讲是比较高的。
所以用户通常会将该溶液进一步稀释后再放在4℃保存，待1周内用完。
如进行稀释，必须遵照下面第4步的方法，即需用含载体蛋白的溶液进行稀释，否则稀释后的细胞因子或重组蛋白很容易会粘附在管壁或瓶壁上，使得溶液中的细胞因子或重组蛋白的浓度下降，细胞因子或重组蛋白的总活性则大为减弱。
4. For extended storage, it is recommended to further dilute in a buffer containing a carrier protein (example 0.1% BSA) and store in working aliquots at -20℃to -80℃.第4步：如要长期保存，则需用含载体蛋白(如0.1% BSA，或10% FBS，或5% HSA)的溶液进一步稀释，然后分装冻存于-20℃至-80℃。
如果一个实验周期长于一周，或配制的细胞因子或重组蛋白一次用不完，我们就需对细胞因子或重组蛋白进行长期保存。
方法是：将已重悬的细胞因子或蛋白用含载体蛋白，如0.1% BSA(牛血清白蛋白)，10% FBS(胎牛血清)，5% HSA(人血清白蛋白)的溶液将重悬液进一步稀释，然后分装冻存于-20℃至-80℃，即常规冰箱的冷冻室或超低温冰箱中。
经常有人会在细胞因子或重组蛋白冻干粉用推荐的溶液重悬后直接分装冻存于-20℃至-80℃，这样可以吗？答：不行。
我们知道，塑料管壁对多数蛋白均有很好的吸附作用，也就是说溶液中的蛋白很容易粘附在管壁。
粘附后，蛋白是很难与管壁分离的。
做过ELISA 实验的人都知道，ELISA的包被抗体(Capture antibody)就是通过这种粘附作用包被到酶标板上的。
载体蛋白，如1% BSA，10% FBS (胎牛血清)和5% HSA等的主要作用是预先封闭塑料管壁上的蛋白结合位点，使细胞因子或重组蛋白不会粘附于管壁。
如果在细胞因子或重组蛋白冻干粉用推荐的溶液重悬后不用含载体蛋白的溶液进一步稀释，而直接分装冻存，则溶液中的大部分细胞因子或重组蛋白均会粘附到管壁上，导致溶液中实际溶解的细胞因子或重组蛋白的浓度大为降低，最终表现为细胞因子或重组蛋白活性的下降。
因此，在分装冻存前，一定要用含载体蛋白的溶液将重悬液进一步稀释。
稀释后的细胞因子或重组蛋白可为任意浓度，因大量的载体蛋白可以保证低浓度细胞因子或重组蛋白仍然维持较高的稳定性。
那么，含载体蛋白的溶液指的是什么溶液呢？水可以吗？答：水不可。
该溶液通常是指pH近中性，有一定缓冲能力的缓冲液，如PBS，培养液(RPMI1640, DMEM等)等。
还有一个经常被问及的问题，即在做无血清培养或动物的体内实验时，细胞因子中不能含有BSA，FBS或HSA等动物或人的蛋白，要想长期保存细胞因子或重组蛋白该怎么办呢？答：一种方法是订购PeproTech的小包装(size A)细胞因子或重组蛋白，每次使用一只，用后即废弃。
如觉得该方法过于浪费，则可用海藻糖(Trehalose)作为载体，用含海藻糖的溶液来稀释已重悬的细胞因子或重组蛋白，然后分装冻存。
总之，为保证细胞因子或重组蛋白冻干份在重悬后仍能保持良好的生物活性，必须按照说明书中Reconstitution的方法严格操作。
蛋白有价，实验无价，愿大家珍惜每次实验机会，严谨认真，每次均能得到预期的实验结果！。