亚硝酸盐检测

亚硝酸盐检测

一、溶液的配制

1、亚铁氰化钾溶液：

称取106.0g亚铁氰化钾[K4Fe6(CN)·3H20]，用蒸馏水溶解后，稀释至1000mL

2、乙酸锌溶液：

称取22.0g乙酸锌[Zn(CH3COO)2·2H2O]，再加3mL冰乙酸，用蒸馏水溶解后，稀释至100mL

3、饱和硼砂溶液：

称取5.0g硼酸钠（Na2BO7·10H2O），用热蒸馏水溶解后，稀释至100mL，冷却

4、对氨基苯磺酸溶液（4g/L）：

称取0.4g对氨基苯磺酸，溶于100mL 20%的盐酸中，混合均匀后置于棕色试剂瓶中，避光保存

5、盐酸萘乙二胺溶液（2g/L）：

称取0.2g盐酸萘乙二胺，用蒸馏水溶解后，稀释至100mL，避光保存。

6、亚硝酸钠标准溶液（0.2g/L或200μg/mL）

准确称取0.1000g于硅胶干燥器中干燥24h的亚硝酸钠，加蒸馏水溶解后移入500mL 容量瓶中，并稀释至刻度。

7、亚硝酸钠标准使用液（5μg/mL）：

临时使用前，吸取亚硝酸钠标准溶液5.00mL，置入200mL容量瓶中，加水稀释至刻度。

二、实验步骤

（1）取样：

取适量样品，放入搅碎机搅碎；再准确称取5.0g经搅碎、混匀的样品，置于50mL烧杯中。

（2）沉淀蛋白质：

①向烧杯中加12.5mL饱和硼砂溶液，混合均匀后，用70℃左右的水约300mL将样品洗入500mL容量瓶中，置于沸水浴中加热15min，取出后冷却至室温。

②一边转动一边加入5mL亚铁氰化钾溶液，摇匀，再加入5mL乙酸锌溶液，以沉淀蛋白质。

（3）过滤：

加水定容，放置0.5h，除去上层脂肪，清液用滤纸过滤，弃去初滤液30mL，滤液备用。

（4）标准曲线的绘制

精确吸取0.00，0.20，0.40，0.60，0.80，1.00，1.50，2.00，2.50mL亚硝酸钠标准使用液（相当于0、1、2、3、4、5、7.5、10、12.5μg亚硝酸钠），分别置于50mL比色管

中，各加2mL 对氨基苯磺酸溶液（4g/L ），混匀，静置3-5min 后各加入1mL 0.2%盐酸萘乙二胺溶液，加水至刻度，混匀，静置15min ，以零管调节零点，于538nm 的波长处测吸光度A ，绘制标准曲线。

（5）试样的测定

准确吸取40.0mL 试样液于50mL 比色管中。以下按标准曲线测定方法依次加入其它试剂。加水稀释至刻度，混匀，静置15min ，以零管调节零点，于波长538nm 处测吸光度A 。同时做空白实验。

三、数据记录

四、数据处理

按下式计算：

；

盐的质量，：试样测定液中亚硝酸；

：试样质量，；：试样处理液总体积，；，：测定时所取溶液体积；量，：试样中亚硝酸盐的含g g m m m /mg 212

1

μA L V L V kg X V V m A X ⨯=

五、亚硝酸盐测定的意义

亚硝酸盐被吃到胃里后，在胃酸作用下与蛋白质分解产物二级胺反应生成亚硝酸胺。胃内还有一类细菌叫硝酸还原菌，也能使亚硝酸盐与胺类结合成亚硝酸胺。胃酸缺乏时，此类细菌生长旺盛。故不论胃酸多少均有利于亚硝酸胺的产生。亚硝酸胺具有强烈的致癌作用，主要引起食管癌、胃癌、肝癌和大肠癌等。

六、盐酸萘乙酸二铵法测定亚硝酸盐的原理

样品经过沉淀蛋白质、去除脂肪后，在弱酸性条件下亚硝酸盐与对氨基苯磺酸重氮化后，再与盐酸萘乙二胺偶合形成紫红色染料，其最大吸收波长为538nm ，且色泽深浅在一定范围内与亚硝酸盐含量呈正比，可与标准系列比较定量。