血红蛋白测定课件ppt

谢

谢
2. 器材和试剂 a. 分光光度计、移液管、微量吸管、试管等 b. 血红蛋白转化液
3. 操作 （1）直接定量测定 a. 取血20ul，加到5ml血红蛋白转化液中，混匀， 静置5分钟。 b. 用分光光度计比色。波长540nm，以空白转化液 调零，测定吸光度“A”。
c.计算
64458
Hb（g/L）=A× 44 ×1000 ×251＝A ×367.7
红细胞计数和血红蛋 白测定的临床意义
红细胞与血红蛋白的增减不一定成比例，如大细胞 性贫血患者的RBC往往较Hb减少显著；而小细胞性贫血 患者则相反。 一、红细胞和血红蛋白增高 标准：成年男性RBC＞6.0 ×1012/L, Hb ＞170g/L 成年女性RBC＞5.5 ×1012/L, Hb ＞160g/L
血红蛋白测定
测定方法：氰化高铁血红蛋白法
由国际血液学标准化委员会（ICSH）推荐，并经 WHO确认为血红蛋白测定的参考方法。 主要优点：操作简单，结果稳定可靠，试剂容易保存， 能测定除SHb以外的所有血红蛋白，并易于建立质控 。
1. 原理 除SHb外，Hb被高铁氰化钾氧化成高铁血红蛋白， 再与CN-结合，生成稳定的棕红色氰化高铁血红蛋白 HiCN，吸收峰为λ540nm毫摩尔消光系数为 44 L· mmol-1 · cm -1 。因此根据标本的吸光度，即可 求得血红蛋白总量（不含SHb）。
4.注意事项： a. KCN为剧毒药品，要小心对待，实验完后要用次氯 酸钠溶液处理后才能弃倒。 b. 血红蛋白转化液不能贮存在塑料瓶中，否则CN-下 降 使结果偏低。
6. 正常参考值
成年男性：1Hale Waihona Puke Baidu0-160 g/L
成年女性：110-150 g/L 新生儿： 170-200 g/L 70岁以上老年男性：94.2-122.2 g/L 70岁以上老年女性：86.5-111.8 g/L
1. 相对增高 因脱水血液浓缩所致。如严重腹泻、大面积烧伤等
2. 绝对增高 Epo 组织缺氧 刺激肾 骨髓幼红细胞有丝分裂
RBC
a. 生理性升高 高原生活和剧烈运动，新生儿 b. 病理性升高 长期组织缺氧 严重的慢性心肺疾病 继发性红细胞增多症 真性红细胞增多症为原发性红细胞增多症，属造血干细胞 疾病
(2).HiCN标准液比色法测定 a.标准曲线绘制和k值计算。以标准品血红蛋白含量为横坐 标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。或求出换算常 数K.K=血红蛋白含量之和/吸光度之和。 b.标本的血红蛋白转化和比色同直接定量测定，得到标本 的A. c.通过标准曲线查出待测样本的血红蛋白浓度或用k值来计 算血红蛋白的浓度，即Hb(g/L)=K*A
二、红细胞和血红蛋白减低 1. 生理性贫血 妊娠中晚期：血容量增加，血液稀释 6个月至2岁：血容量增加速度大于RBC与Hb的生成 有些老年人：摄取、利用营养和造血功能减退 2. 病理性贫血 红细胞的丢失、破坏，造血原料不足，骨髓造血功能 障碍等原因 分级：轻度贫血：成年男性＜ 120g/L 成年女性＜ 100g/L 中度贫血：Hb ＜ 90g/L 重度贫血：Hb ＜ 60g/L 极度贫血：Hb ＜ 30g/L