糖化血红蛋白实验室检测基础及标准化进展
糖化血红蛋白标准化和检测准确度现状(续)
糖化血红蛋白标准化和检测准确度现状(续)冯仁丰【摘要】糖化血红蛋白A1c(HbA1c)是诊断糖尿病和监测其治疗效果的重要指标.在国际临床化学与检验医学联合会(IFCC)定义了HbA1c的被测量之后,经过各方的努力,全球各临床实验室HbA1c检测结果间的差异正逐步减小.所有提供HbA1c检测产品的厂商都不会客观地描述自己产品的弱点,只会强调其优点和临床价值.面对HbA1c检测的现状,临床实验室必须充分了解每个产品的特性及其不足之处,在将产品用于临床检测前必须验证产品的分析性能.只有确认其分析性能能够用于临床检测时,才能使用.一个实验室内必须具备2种不同检测方法的产品,这样才能识别患者样品内有无异常血红蛋白.目前,尽管人们认为免疫学方法检测HbA1c时无异常血红蛋白的干扰,但国际上尚未从临床上对各种异常血红蛋白的影响作出客观的判断.为了患者的利益,临床实验室一定要充分了解更多的信息.【期刊名称】《检验医学》【年(卷),期】2016(031)006【总页数】5页(P437-441)【关键词】糖化血红蛋白;标准化;准确度【作者】冯仁丰【作者单位】上海市临床检验中心,上海200126【正文语种】中文【中图分类】R446.11968年，RAHBAR等[1-2]首次发现糖尿病患者HbA1c升高。
40余年以后，HbA1c已成为糖尿病诊断和治疗一个不可或缺的指标。
自从DCCT、UKPDS等临床试验开展以来，HbA1c检测的标准化工作获得了相当大的进展，明确了糖尿病患者血糖控制（由HbA1c检测确定）与其并发症之间的关系[3]。
由于HbA1c检测方法的发展，各大厂商在其产品特点和检测准确度宣传上有很多针对异常血红蛋白影响HbA1c检测结果的介绍。
尤其是我国，在厂商刻意夸大宣传的情况下，临床实验室对其产品优点和缺点的了解很模糊。
其实，任何一个检测方法都有其特点和优点，也一定有不足之处。
（一）血红蛋白病血红蛋白病是由于血红蛋白分子结构异常（异常血红蛋白病）或珠蛋白肽链合成速率异常（珠蛋白生成障碍性贫血，又称地中海贫血）所引起的一组遗传性血液病。
糖化血红蛋白概论及其临床检验标准化进展
糖化血红蛋白概论及其临床检验标准化进展廖远泉【摘要】糖基化血红蛋白（glycosylated hemoglobin）是伊朗科学家Ranbar等应用琼脂糖凝胶电泳分析率先从糖尿病患者血液中发现的一种血红蛋白组分，且研究表明，是血液葡萄糖对HbA的非遗传修饰产生了糖化血红蛋白A1c （haemoglobinA1c,HbA1c）[1,2]。
从此，他们与糖尿病的相关性得到确认，这一发现奠定了HbA1c检测用于糖尿病的初筛和诊断的基础。
美国糖尿病控制及并发症试验（Diabetes Control and Complications Trial,DCCT）和英国前瞻性糖尿病研究（UK Prospeetive Diabetes Study,UKPDS）历时多年的糖尿病流行病学研究表明糖尿病患者通过治疗，控制平均血糖水平和HbA1c，能够有效地得到治疗，显著降低视网膜病变、肾脏疾病以及神经病变等并发症的发生及其严重程度。
【期刊名称】《临床检验杂志(电子版)》【年(卷),期】2017(006)001【总页数】5页(P1-5)【关键词】糖化血红蛋白;生物化学;标准化;临床检验【作者】廖远泉【作者单位】[1]安徽省宣城市泾县医院检验科,泾县242500【正文语种】中文【中图分类】R446.11糖基化血红蛋白（glycosylated hemoglobin ）是伊朗科学家Ranbar等应用琼脂糖凝胶电泳分析率先从糖尿病患者血液中发现的一种血红蛋白组分，且研究表明，是血液葡萄糖对HbA的非遗传修饰产生了糖化血红蛋白A1c（haemoglobinA1c,HbA1c）[1,2]。
从此，他们与糖尿病的相关性得到确认，这一发现奠定了HbA1c检测用于糖尿病的初筛和诊断的基础。
美国糖尿病控制及并发症试验（Diabetes Control and ComplicationsTrial,DCCT）和英国前瞻性糖尿病研究（UK Prospeetive DiabetesStudy,UKPDS）历时多年的糖尿病流行病学研究表明糖尿病患者通过治疗，控制平均血糖水平和HbA1c，能够有效地得到治疗，显著降低视网膜病变、肾脏疾病以及神经病变等并发症的发生及其严重程度。
糖化血红蛋白检测标准化及方法学进展 共28页
糖化 (HbA1c) N-端六肽
* Used in our Penzberg facilities
HPLC*
mass spectrometer*
卫生部临检中心HbA1c室间数据（2019年）
罗氏检测平台的室间CV为 2.5％和3.17％
CAP HbA1c 室间比对用户方法学统计（2019.10）
4. If the ongoing “average plasma glucose study” fulfills its a priori–specified criteria, an A1C-derived average glucose (ADAG) value calculated from the A1C result will also be reported as an interpretation of the A1C results.
重要变革：2019年ADA糖尿病诊治指南
增加糖化血红蛋白 (HbA1c)≥6.5%作为糖尿病的诊断标准
source：
HbA1c标准化的目的
• 电荷差异 – 离子层析法：HPLC – 电泳法
• 结构特异性 – 免疫法 – 亲和层析法
标准化
不同方法测定 结果具有可比性
各国糖化血红蛋白标准化计划
同一个样本，结果差异大
美国
瑞典
NGSP和IFCC的区别
NGSP
IFCC
级别
国家—美国糖化血红蛋白标准化计划 国际糖化血红蛋白标准化计划
目的
使临床实验室的HbA1c检测结果与DCCT的 建立全球HbA1c参考系统，使各种常规检测方
结果具有可比性
法标准化
原理
HbA1c由色谱图上的色谱峰决定，非特异 性
糖化血红蛋白检测技术和质量控制管理
糖化血红蛋白检测技术和质量控制管理糖化血红蛋白检测技术是一项重要的临床检验技术，用于评估糖尿病患者的血糖控制情况，指导临床治疗及预后预测。
糖化血红蛋白检测技术的发展对于糖尿病的诊断和管理起到了非常重要的作用，而质量控制管理则是确保检测结果的准确性和可靠性的关键环节。
糖化血红蛋白（HbA1c）是一种由血红蛋白与葡萄糖发生非酶催化的糖基化反应而生成的化合物，其生成速率与血糖的浓度成正比。
糖化血红蛋白的浓度可以反映出近3个月内的平均血糖水平，是评估糖尿病患者血糖控制情况的重要指标。
目前临床上常用的方法包括离心法、高压液相法、免疫测定法、毛细管电泳法等，其中免疫测定法是应用最为广泛的一种。
免疫测定法是通过特异抗体与糖化血红蛋白结合的原理来进行检测的，其具有操作简便、时间短、灵敏度高等优点，因而被广泛应用于临床检验中。
在进行糖化血红蛋白检测时，质量控制管理是不可或缺的环节，对于保证检测结果的准确性和可靠性具有重要意义。
糖化血红蛋白检测中需进行的质控管理包括人员培训和规范操作。
检测人员需要接受专业的培训，熟悉仪器操作流程、掌握样本的处理方法及检测步骤，确保能够按照标准操作程序进行检测。
实验室需要建立标本采集、保存和运输的规范，确保样本的质量符合检测要求。
实验室需要建立健全的质控方案，包括内部质控和外部质控等。
内部质控是指实验室在进行糖化血红蛋白检测时，应每日使用质控品进行质控，以监控仪器的稳定性和反映分析过程的准确性。
内部质控应选择符合检测范围的质控品，每天测定2-3个不同浓度的质控品，进行定量检测，然后计算其平均值和标准差，以评价当前的分析数据是否处于控制状态。
如果质控结果超出了预设的控制限，则需要立即对仪器进行调整或排除异常数据，以确保测试结果的准确性。
外部质控是指实验室定期参加由相关部门组织的外部质量评价活动，通过与其他实验室的比对，评估实验室的检测水平和结果的可靠性。
外部质控项目包括参加国家或地区的质量评价计划，以及参加与其他实验室的比对活动。
糖化血红蛋白检测标准化进程
பைடு நூலகம்
HbA1c的检测方法
▪ 免疫法
HbH1c的单克隆抗体与胶乳颗粒交 联，形成致敏颗粒，遇HbH1c发生结合 而进行凝集反应，其浊度与HbH1c量成 正比，通过测定吸光度（透射比浊） 计算 HbA1c 量。 主要应用在大型生化分析仪。
HbA1c的检测方法
系,间接反映一段时间内血糖浓度的改变,及机 体糖代谢的状态.
HbA1c 的特点
▪ HbA1c的形成是不可逆的，其浓度与红细胞寿命、 血红蛋白的结构和该时期内血糖平均浓度有关。
▪ 不受每天葡萄糖波动影响，作为实验室指标是优于 血糖的。
▪ 不受运动与饮食的影响 ▪ 半衰期为35天 ▪ 反映过去6-8周平均血糖浓度 ▪ 评价血糖控制情况的可靠实验室指标
三 HbA1c的检测原理
▪ GHb与非GHb的电荷差异:
离子交换色谱(HPLC) 电泳
▪ 血红蛋白糖化基团的结构差异：
亲和层析 免疫法
HbA1c的检测方法
HPLC (1)离子交换层析 (2)硼酸亲和层析
◆ 免疫分析 (1)放射免疫法、酶免疫法 (2)乳胶免疫凝集法
◆ 电泳法
离子交换高效液相色谱
▪ 血糖控制目标——达标！
IDF 2005:
HbA1c FPS
PBS
< 6.5% <6.0 <7.0mmol/L
二 HbA1c的临床意义
1、增高：过去一段时间血糖高于正常范围，测 定HbA1c可以了解糖尿病人在2～3个月的血糖 控制情况。
2、降低：溶血性及失血性贫血，慢性肾衰，慢 性持续性低血糖症等。
▪
一马当先，全员举绩，梅开二度，业 绩保底 。21.3.3121.3.3104:0204:02:1404:02:14Mar- 21
糖化血红蛋白的检测进展
2 测定方法 [3 ]
211 离子交换高效液相色谱分析法 用弱酸性阳离子交换 树脂 ,在选定低浓度洗脱液的离子强度及 pH 条件下 ,由于
综合常用的 GHb测定方法 ,因为不同原理 ,同一标本得 到的测定值也不相同 。这就涉及到一个标准化的问题 ,此外 GHb的定义尚不统一 ,其标准物质及标准测定法也没有明确 的确立 。还有待于进一步研究解决 [5 ] 。
3 GHb的临床评价 [ 6, 7 ]
红细胞的平均寿命为 120d,在红细胞存活的过程中血中 葡萄糖浓度会有一定的波动 ,红细胞越接近死亡 ,其血红蛋 白与葡萄糖的接触时间也就越长 ,则 GHb含量就越高 ,在红 细胞平均寿命一半时段中所测得的平均血糖值与 HbA lc最 吻合 ,所以 HbA lc值能反映过去 1～2个月间的平均血糖值 , 至于血糖的某一时点 ,或某一时段与 HbA lc相关性最佳尚未 得到统一 。HbA lc和血糖的关系仍然是临床上存在的争论 点。
参考文献 [ 1 ] 周永昌 ,郭万学. 超声医学 [M ]. 第 2 版. 北京 :科学
技术文献出版社 , 1996. 1508. [ 2 ] 王共先. 经尿道气化术联合高能聚焦超声体外聚焦治
1 GHb的发现和结构 [2 ]
用琼脂法分析血红蛋白物理化学性质时在 pH7. 0 的条 件下电泳 ,向阳极泳动速度最快的是血红蛋白的主要成分 HbA。结果在糖尿病患者标本中发现了过于浓集 HbA 电泳 区带 ,于是在 1962 年提出了糖尿病性血红蛋白一词 。其他 的研究者也发现了这一现象 。
糖化血红蛋白测定标准化
糖化血红蛋白测定标准化糖尿病(Diabetes Mellitus)是一种多病因的代谢疾病，特点是慢性高血糖，伴随因胰岛素分泌不足或/和作用无效引起的糖、脂肪和蛋白质代谢紊乱，可导致不同脏器的(长期) 损伤、功能障碍和衰竭。
2003年全球糖尿病患者数量接近2亿，预测2005年将再增加1倍，人群患病率将从0.67%上升到2.3%。
中国现有糖尿病患者4000万，占全球总数的1/5。
我国每年用于治疗糖尿病的直接医疗成本超过180亿，占医疗总费用的4%。
监测血糖水平，对糖尿病的诊治是非常重要的，监测结果可用于评价治疗效果、调节饮食、活动和治疗，以达到最好的血糖控制效果。
血、尿葡萄糖和尿酮体测定对糖尿病的日内管理提供了有用的信息，但无法评价一段时期内的平均血糖控制水平。
糖化蛋白测定，主要是糖化血红蛋白和血清蛋白测定，进一步完善了糖尿病的实验室检测手段，其检测结果可以定量过去数月和数星期的血糖平均水平。
糖化血红蛋白(Glycated hemoglobin, GHB)实验通常是检测由血红蛋白和葡萄糖经缓慢过程且非酶促反应所形成的稳定部分，其合成速率与红细胞所处环境中糖的浓度成正比，积累并持续于红细胞120天生命期中。
由于红细胞允许葡萄糖自由渗透，血液样本中糖化血红蛋白水平反应过去120天内的平均血糖水平。
GHB检测用于常规实验室始于二十世纪七十年代末期，且稳定发展至今，成为评价血糖控制水平的重要指标。
临床实验室中应用的GHB 检测方法主要分为两大类，一类方法基于GHB与非GHB的电荷不同，如离子交换色谱、电泳和等电聚焦方法；另一类方法基于血红蛋白上糖化基团的结构特点，如亲和层析和免疫实验，每种方法各有优缺点，对临床实验室而言，尚无“最佳”方法可以选择。
虽然方法不同，结果的表示不同，但在正确操作和解释的情况下，方法间可以有较好的相关性，并能为临床提供有用的信息。
基于在美国进行的糖尿病控制和并发症临床研究(diabetes control and complications trial, DCCT)，表明了糖尿病患者病程的发展和合并症与血糖控制的密切关系，及血浆葡萄糖水平与HbA1c水平间的关系。
糖化血红蛋白实验室检测基础及标准化进展86页PPT
6、最大的骄傲于最大的自卑都表示心灵的最软弱无力。——斯宾诺莎 7、自知之明是最难得的知识。——西班牙 8、勇气通往天堂，怯懦通往地狱。——塞内加 9、有时候读书是一种巧妙地避开思考的方法。——赫尔普斯 10、阅读一切好书如同和过去最杰出的人谈话。——笛卡儿
糖化血红蛋白实验室检测基础及标准 化进展
16、人民应该为法律而战斗，就像为 了城墙 而战斗 一样。 ——赫 拉克利 特 17、人类对于不公正的行为加以指责 ，并非 因为他 们愿意 做出这 种行为 ，而是 惟恐自 己会成 为这种 行为的 牺牲者 。—— 柏拉图 18、制定法律法令，就是为了不让强 者做什 么事都 横行霸 道。— —奥维 德 19、法律是社会的习惯和思想的结晶 。—— 托·伍·威尔逊 20、人们嘴上挂着的法律，其真实含 义是财 富。— —爱献 生
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糖化血红蛋白检测基础与临床意义
糖化血红蛋白检测基础与临床意义中国已成为继印度之后位居第2位的糖尿病国家。
传统的实验诊断方法往往以空腹血糖(FPG)和糖耐量试验(OGTT)作为诊断治疗的依据。
近年来,糖化血红蛋白(HbA1c)的检测,已开始应用于糖尿病的诊断。
由于HbA1c能反映病人2～3个月内糖代谢总体情况和血糖水平的控制程度,有助于从整体上准确地观察病情,了解治疗效果。
糖化血红蛋白的检测方法糖化血红蛋白(HbA1c)检测的方法很多,测定方法主要有四类:色谱法、电泳法、免疫法和化学法[1]。
色谱法主要有离子交换层析法、高效液相色谱法(HPLC)和亲和层析法等。
由于糖化血红蛋白的测定方法众多,还缺乏标准化参考方法,国际上正建立这类参考方法。
目前最常用的HbA1c测定方法是离子交换层析法和电泳法。
前者精密度高、重复性好且操作简单,已被临床广泛采用。
国内主要采用Bio-Rex70阳离子树脂微柱层析法,其微柱可重复使用多次。
正常参考值:HbA1c:X±2s=6.5±1.5%;>8.0%为HbA1c增高。
糖化血红蛋白的临床意义糖化血红蛋白的控制标准:HbAlc能够反映过去2～3个月血糖控制平均水平,它不受偶尔一次血糖升高或降低的影响,因此对HbA1c测定,可以比较全面地了解过去一段时间的血糖控制水平。
世界权威机构对于HbA1c有着明确的控制指标。
ADA(美国糖尿病学会)建议,HbA1c控制在9%:血糖控制很差,是慢性并发症发生发展的危险因素,可能引发糖尿病性肾病,动脉硬化,白内障等并发症并有可能出现酮症酸中毒等急性合并症。
HbA1c是糖尿病辅助诊断指标:大多数DM患者,血糖高于正常。
其HbA1c 增高;对于FPG正常,而OGTT降低的患者HbA1c增高。
DM患者HbA1c值与FPG 往往呈正相关。
日本糖尿病协会(JDS)新增HbA1c≥6.5%作为DM诊断标准。
FPG和HbA1c 的联合作用,可筛查FPG结果正常的DM患者。
糖化血红蛋白检测标准化和实验室操作规范化
临床意义：
◦ HbA1c不受短期的血糖浓度波动 所影响，反映近2～3个月血糖控 制的总体水平。
◦ HbA1c可作为糖尿病患者长期血 糖控制的监测指标。
◦ 与糖尿病慢性并发症的发生及发展 有密切关系，影响患者长期预后。
◦ 血糖控制达标的糖尿病患者每半年 检查一次HbA1c。
◦ 血糖控制未达标或治疗方案调整后， 糖尿病患者应每3个月检查一次 HbA1c。
其反义概念可以用数字表示，分别为不确定度、偏差标准差或 变异系数 。
陈文祥、申子瑜、郭健、杨振华,临床检验量值溯源中的重要术语与概念及有关问题 中华检验医学杂志2005年2月第28卷第2期
日本东曹（TOSOH）HLC-723 G7糖化血红蛋白测定 仪及其配套试剂及校准品（简称G7）。
日本爱科来（Arkray）ADAMSTMA1c HA-8160 糖化 血红蛋白测定仪及其配套试剂及校准品（简称8160）。
65%
免疫比浊法 离子交换层析法 亲和层析法 电泳法
2011年
1% 28%
71%
美国伯乐质控品（Lyphochek Diabetes Control，批 号：33810，冻干粉，两个浓度水平），用于验证各系统 的精密度；复溶混匀后分装，-80℃保存。
JCTLM 认证的标物JCCRM411-2（日本JDS Lot4，新鲜
The Diabetes Control and Complications Trial Research Group. N Engl J Med 1993;329:977-86 UK Prospective Diabetes Study Group. Lancet 1998; 352: 837-53
释比例，使用各系统的稀释液对样本进行稀释混匀后，再
糖化血红蛋白的标准化
亲和层析法
其它 电泳法10%1%9%11%1%
54%
11%
从室间质评回报统计的在不同时间使用不同的GHB测定方法的实验室比例
目录
1
HbA1c常规测定方法
2
HbA1c检测的标准化
3
HbA1c检测的规范化
标准化
目的:实现检验结果的可比性—是保证检验 质量手段 意义（益处）
可以建立起普遍接受（可用）的参考区间 可以合并分析、比较不同医学中心的研究资 料,促进医学研究和研究成果的转化 能够有效地应用询证医学和检验医学实践指 南
1993 CAP SURVEY(mean± 2SD)
10
50%实验室 报告 HbA1c 21%实验室 报告HbA1 29%实验室 报告GHB 多数实验室结 果与靶值偏倚 很大，不具有 可比性
NGSP （National Glycohemoglobin Standardisation
Program：美国国家糖化血红蛋白标准化计划）
我国201111样本结果 (mean± 2SD）
靶值：6.6 % HbA1c
组 Abbott Architect System/Aeroset组 Bio-Rad HPLC组 TOSOH G7组 Drew DS5/Bio-Rad Diastat组 其它仪器组 实验室数 14 167 69 28 58 平均值 6.55 6.53 6.71 7.21 6.49 中位数 6.59 6.60 6.70 7.05 6.57 标准差 变异系数（%） 最大值 最小值 0.73 0.29 0.42 0.67 0.69 11.15 4.51 6.31 9.30 10.64 7.74 7.10 8.10 8.45 8.00 5.20 5.80 5.00 6.20 4.70
糖化血红蛋白检测技术和质量控制管理
糖化血红蛋白检测技术和质量控制管理1. 引言1.1 研究背景现代医学科技的飞速发展，使得糖化血红蛋白检测技术逐渐成为临床诊断和治疗中的重要手段。
糖化血红蛋白是指血红蛋白与葡萄糖发生非酶促反应后形成的复合物，是糖尿病患者血糖控制程度的重要指标之一。
糖化血红蛋白的检测可以反映出患者近期的血糖控制情况，有助于医生及时调整治疗方案，预防并发症的发生。
在过去的几十年里，糖化血红蛋白检测技术不断进步，从最初的离心法、色谱法，到目前广泛应用的高效液相色谱法和毛细管电泳技术，检测速度和准确性得到了极大提升。
随着糖化血红蛋白检测技术的不断完善，质量控制管理也变得至关重要。
建立有效的质控体系可以确保检测结果的准确性和稳定性，为临床诊疗提供可靠依据。
本文将对糖化血红蛋白检测技术和质量控制管理进行深入探讨，旨在为医疗机构提供指导，提高糖尿病患者的诊疗水平和生活质量。
1.2 研究目的糖化血红蛋白检测技术和质量控制管理是临床实验室中非常重要的一环，对于糖尿病患者的诊断、治疗和监测起着关键作用。
本研究的目的是探讨糖化血红蛋白检测技术的原理和方法，并分析质量控制管理在其中的作用。
通过建立有效的质控体系，我们希望能够提高糖化血红蛋白检测的准确性和稳定性，保障患者的健康和治疗效果。
我们将总结常见的质量控制管理措施，为临床实验室提供参考和指导。
最终，本研究旨在强调糖化血红蛋白检测技术和质量控制管理在临床诊疗中的重要性，并探讨未来的发展方向，为改进糖尿病管理提供更多有益的建议和优化方案。
2. 正文2.1 糖化血红蛋白检测技术介绍糖化血红蛋白（HbA1c）是一种反映血糖控制情况的重要生化指标，通常用于评估糖尿病患者血糖的长期控制情况。
糖化血红蛋白检测技术就是通过测量血液中HbA1c的含量来评估糖尿病患者的血糖水平。
在临床实践中，糖化血红蛋白检测技术已经成为评估糖尿病患者血糖控制情况的金标准之一。
糖化血红蛋白检测技术主要通过离体测定和非离体测定两种方法来实现。
糖化血红蛋白测定标准化
糖化血红蛋白测定标准化糖尿病（Diabetes Mellitus）是一种多病因的代谢疾病，特点是慢性高血糖，伴随因胰岛素分泌不足或/和作用无效引起的糖、脂肪和蛋白质代谢紊乱，可导致不同脏器的（长期）损伤、功能障碍和衰竭。
2003年全球糖尿病患者数量接近2亿，预测2005年将再增加1倍，人群患病率将从0.67%上升到2.3%。
中国现有糖尿病患者4000万，占全球总数的1/5。
我国每年用于治疗糖尿病的直接医疗成本超过180亿，占医疗总费用的4%。
监测血糖水平，对糖尿病的诊治是非常重要的，监测结果可用于评价治疗效果、调节饮食、活动和治疗，以达到最好的血糖控制效果。
血、尿葡萄糖和尿酮体测定对糖尿病的日内管理提供了有用的信息，但无法评价一段时期内的平均血糖控制水平。
糖化蛋白测定，主要是糖化血红蛋白和血清蛋白测定，进一步完善了糖尿病的实验室检测手段，其检测结果可以定量过去数月和数星期的血糖平均水平。
糖化血红蛋白（Glycated hemoglobin, GHB）实验通常是检测由血红蛋白和葡萄糖经缓慢过程且非酶促反应所形成的稳定部分，其合成速率与红细胞所处环境中糖的浓度成正比,积累并持续于红细胞120天生命期中。
由于红细胞允许葡萄糖自由渗透，血液样本中糖化血红蛋白水平反应过去120天内的平均血糖水平。
GHB 检测用于常规实验室始于二十世纪七十年代末期，且稳定发展至今，成为评价血糖控制水平的重要指标。
临床实验室中应用的GHB检测方法主要分为两大类，一类方法基于GHB与非GHB的电荷不同，如离子交换色谱、电泳和等电聚焦方法；另一类方法基于血红蛋白上糖化基团的结构特点，如亲和层析和免疫实验，每种方法各有优缺点，对临床实验室而言，尚无“最佳”方法可以选择。
虽然方法不同，结果的表示不同，但在正确操作和解释的情况下，方法间可以有较好的相关性，并能为临床提供有用的信息。
基于在美国进行的糖尿病控制和并发症临床研究（diabetes control and complicationstrial, DCCT），表明了糖尿病患者病程的发展和合并症与血糖控制的密切关系，及血浆葡萄糖水平与HbA1c水平间的关系。
中国糖化血红蛋白检测标准化
中国糖化血红蛋白检测标准化
中国糖化血红蛋白（HbA1c）检测标准化主要包括以下几个方面：
1. 制定行业标准：2015年，国家卫生健康委发布了《糖化血红蛋白检测》行业标准，对糖化血红蛋白检测的方法、质量控制、结果报告等方面进行了规范。
2. 开展教育培训：自2009年以来，中国糖化血红蛋白标准化计划（CGHSP）在全国范围内开展医师培训和大众患者科普教育，培训医务工作者和大众患者，提高糖化血红蛋白检测的认知和应用水平。
3. 推广质控体系：国家卫生健康委临床检验中心带领全国各地区临床检验中心及相关学术机构开展多种区域性的糖化血红蛋白EQA/PT计划（室间质评计划），实验室检测质
量得到显著提升。
4. 发布教材和指南：2010年，人民卫生出版社发行《糖化血红蛋白》教材；2020年，中华医学会糖尿病学分会将HbA1c作为诊断标准正式写入《中国2型糖尿病防治指南（2020年版）》。
5. 加强国际合作：中国积极参与国际糖化血红蛋白检测标准化活动，与世界各国分享经验，推动检测技术的发展和应用。
尽管我国在糖化血红蛋白检测标准化方面已取得显著进展，但仍然面临一些挑战，如检测结果的标准化和一致性程度不够等问题。
为进一步推进糖化血红蛋白检测标准化，我国将继续加大政策支持、教育培训和质控体系建设等方面的力度，提高糖尿病的诊疗管理水平，为患者提供更好的医疗服务。
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电荷会增加
5
HbA1c 的主要检测方法
基于电荷 • 离子交换高压液相色谱法（HPLC） • 电泳法 • 毛细管电泳
基于结构
• 硼酸亲和层析法 • 酶法 • 免疫法
6
各检测方法的分析物
HbA (2b2)
HbA1 HbA1a HbA1b HbA1c HbA0 非糖化成分 糖化成分
硼酸亲和色谱检测物
17
Pathology Consultation on HbA1c Methods and Interferences, Am J Clin Pathol 2014;141:5-16
国内免疫分析法/酶法厂家仪器平台及试剂盒
厂家 Roche 仪器 Cobas生化系列机型 Hitachi生化系列机型 Siemens Dimension等生化系列机型 ADVIA生化分析系统 DCA Vantage（POCT） Beckman AU生化系列机型 Beckman其他生化系列 Abbott Randox(朗道） 德国胡曼 JEOL Ltd（希森美 康代理） Sekisui（积水） Medical Audit Diagnostics （北京欧迪代理） 国产厂商 国产生化分析系统 ARCHITECT生化仪系列 糖化血红蛋白测定试剂盒(化学发光微粒子免疫检测法) 血红蛋白A1c检测试剂盒(乳胶增强免疫比浊法) 糖化血红蛋白(HbA1c)测定试剂盒 糖化血红蛋白检测试剂盒(酶法) 糖化血红蛋白检测试剂盒(酶法) 糖化血红蛋白测定试剂盒(直接法) 国产生化试剂 试剂盒 糖化血红蛋白检测试剂盒(免疫比浊法)Tina-quant系列试剂盒 开放或罗氏试剂 糖化血红蛋白测定试剂盒(免疫比浊法) 糖化血红蛋白A测定试剂盒(乳胶凝集法) 糖化血红蛋白检测试剂盒(免疫乳胶凝集抑制法) 糖化血红蛋白检测试剂盒(比色法)
图E是一种简化的色谱图（蓝线），显示了非糖化和糖
化血红蛋白组分的分离。
13
Pathology Consultation on HbA1c Methods and Interferences, Am J Clin Pathol 2014;141:5-16
硼酸亲和色谱法特点
硼酸亲和色谱法直接检测的是总糖化血红蛋白，报告结果是 计算出来的 HbA1c。 硼酸亲和色谱法不能分离出血红蛋白变异体
B: 患者红细胞裂解液中的HbA1c与抗HbA1c抗体结合，形成可溶
性抗原抗体复合物，从而减少光散射（浊度降低）。通过比浊测定可
检测出该样本中的HbA1c的量
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Pathology Consultation on HbA1c Methods and Interferences, Am J Clin Pathol 2014;141:5-16
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Diabetes Care Volume 37, Supplement 1, January 2014 “中国糖化血红蛋白教育计划”教材
HbA1c检测用于糖尿病筛查诊断的全球现状
HbA1c有早期提示的价值，可作为糖尿病的诊断指标
2010年ADA率先正
式推荐HbA1c诊断 DM, 推荐原因之一
1969年Rahbar 使用琼脂电泳，
1970年代中期， 弄清楚了是葡
1980年中期， GHb(糖化血红
DCCT研究发 表后，1996年 起，美国正式 启动了NGSP 项目，推动糖 化血红蛋白检 测的标准化。 2010年达成了 全球标准化共 识
报告糖尿病患
者的这些小血 红蛋白组升高
萄糖对血红蛋
白HbA的非遗 传修饰，产生 了HbA1c
蛋白）检测被
广泛应用，但 当时结果可比 性很差
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糖化和非糖化的血红蛋白
Hb
血红蛋白
成人血红蛋白分三种， HbA为主要成人Hb
HbA (ß ß )
HbA2 ()
HbF ()
95%
1-3.5% HbA1
6-8%
<2% 糖化Hb
HbA1a: ß链NH2端与其它糖成 分结合的产物 HbA1b: HbA1c进一步代谢的产 物 HbA1c: ß链NH2端与葡萄糖结 合的产物
酶法检测原理
A： 图示是糖化的HbA的β链的前8个氨基酸，
患者的红细胞裂解液在蛋白酶存在的情况下，
氨基酸和小段肽链被释放, 包括HbA1c的氨基 酸末端糖化的缬氨酸
B： 糖化缬氨酸的酶促去糖化反应
C：缬氨酸去糖化过程产生H2O2.H2O2的形成 可以用比色法测定. 产生的信号与样本中的 HbA1c成正比
非糖化Hb
HbA0
87-89%
HbA1a
<1%
4
HbA1b
<1%
HbA1c
4%-6%
胎儿血红蛋白HbF在胎儿及出生6个月以内的新生儿体内为高浓度，6 个月后基本降为成人水平
HbA1c是血红蛋白HbA的糖基化产物
1.
葡萄糖与血红蛋白HbA
发生糖化反应
2.
两步反应：
先快速生成不稳定A1c,
后缓慢生成稳定的A1c。 3. 血红蛋白HbA糖化后，负
糖化血红蛋白实验室检测及 标准化新进展
Hannah Yao
Sep 10, 2014 青岛
HbA1c实验室检测
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糖化血红蛋白的发展历史概述
1958年，Allen
报告，在离子交 换层析上的的 人血红蛋白可 以分离出三个 小组分，他们较 HbA的负电荷 更强，被命名为 HbA1a,HbA1b,H bA1c。
不能发现血红蛋白变 异体，新一代的试剂盒 依然会受到少见变异 体的分析干扰
检测的是总糖化血红 蛋白，而不是 HbA1c, 不能发现血红蛋白变 异体 变异体被共洗脱时易 被干扰 工作流程
硼酸亲和层析法
糖化的血红蛋白被绑定在硼 酸基团树脂时，非糖化的血 红蛋白组分直接流出分析柱 基于电荷分离血红蛋白组分
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国内上市的硼酸亲和色谱法的主要厂家平台
厂家 仪器
Primus
Hb9210
PDQ Plus Ultra2
Bio-Rad Alere In2it Afinion NycoCard
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免疫分析法检测原理-抗原抗体反应
A: 在没有HbA1c时，polyhaptens（包含多个HbA1c表位的合成分 子）与绑定在微粒上的抗HbA1c抗体反应，形成不溶性抗体polyhapten复合物。这导致显著的光散射（浊度增加）
准确性
精密度ห้องสมุดไป่ตู้CV）
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正确度（Bias）
HbA1c分析中的CV对临床判断的影响
0.5%HbA1c是一个“临床上显著变化”的指标
不同室内CV对 A1C 分析的影响（95%的可信区间）
CV %
6.0% A1C
5.76-6.24
5.64-6.36 5.4-6.6
6.5% A1C
6.24 - 6.76
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Pathology Consultation on HbA1c Methods and Interferences, Am J Clin Pathol 2014;141:5-16
国内上市的IE-HPLC方法的主要厂家平台
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MiniCAP 12
Capillary 2
*(Capillary2 with Flex Piercing 为Capillary2
Capillary2 with Flex Piercing 的升级版，只多了可采原始样本管，其他参数一致) with Flex
在第59届美国糖尿病学会年会上，HbA1c监测的重 大影响与胰岛素问世相提并论，并将前者作为血糖 控制的金标准
2014年ADA指南推荐：对于治疗达标（血糖控制稳 定）的患者，每年应该至少进行两次HbA1c检测。对 更改治疗方案或血糖控制未达标患者，应每年进行 四次HbA1c检测
在临床上，无论用什么方法反映血糖的变化，最终 都要以HbA1c的变化作为最终评价一种药物或一个 治疗方案在血糖控制上是否有效的指标
2011年WHO推荐有
条件的地方采用 HbA1c 诊断糖尿病
中国？？？
就是在美国HbA1c
已高度标准化
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最新2013版中国2型糖尿病防治指南
HbA1c临床应
鉴于HbA1c检测在我国尚不普遍，检测方法的标准化程度 不高，测定HbA1c的仪器和质量控制尚不能符合目前糖尿 病的诊断的要求。本指南仍不推荐在我国采用HbA1c诊断
离子交换色谱和免疫法检测物
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离子交换HPLC检测原理
A:患者红细胞裂解物被注入到带有 负电荷的分析柱中
B, C:因为与带负电荷树脂间的离 子相互作用，带正电荷的血红蛋白 分子的移动速度比带负电荷的慢
D:因为HbA1c比HbA0所带负电荷强， 所以首先被洗脱.
E:离子交换HPLC方法能分离并鉴 定其他种类Hb及一些血红蛋白变 异体，在色谱图上将出现相应的分 离峰
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HbA1c 的主要检测方法的特点
方法 酶法 原理 使用特别作用于氨基酸末端 糖化的缬氨酸的酶检测 HbA1c 优势 不受变异体的分析干 扰 挑战 不能发现血红蛋白变 异体
免疫法
使用针对糖化的β链氨基酸 末端的抗体检测HbA1c
在使用新一代的试剂 盒时分析不受大多数 常见变异体的干扰