血清前白蛋白测定标准规程
血清前白蛋白(PA)—生化检测项目
血清前白蛋白(PA)
一、检测原理
试剂中的抗前白蛋白抗体与样品中的前白蛋白抗原进行抗原—抗体反应,形成不溶性复合物,而产生浑浊,浊度的高低与样品中前白蛋白的浓度成正比,在415nm或694nm波长处进行终点比浊法测定,而求得前白蛋白的浓度。
二、参考区间
血清:150—350mg/L
三、临床意义
1、血清前白蛋白是肝脏合成的一种糖蛋白。
2、血清前白蛋白测定可反映肝脏合成和分泌蛋白质的功能,可作为肝功能损害的早期指标以及提示一些疾病的变化及预后。
3、升高:急性肝炎恢复期、有肝损害者戒酒后、霍奇金病、肾病综合征
4、降低:重症肝炎、急性肝炎、慢性活动性肝炎、非代偿性肝硬化、肝癌、阻塞性黄疸、溃疡性结肠炎、甲状腺功能亢进、营养不良等。
血清白蛋白标准操作规程,1200字
血清白蛋白标准操作规程血清白蛋白是一种重要的血液蛋白,其浓度的检测对于评估肝功能和营养状况等方面具有重要意义。
以下是血清白蛋白标准操作规程的详细步骤和注意事项。
一、试剂和仪器准备1. 检测血清白蛋白的试剂包括:白蛋白测定试剂盒、标准品、去离子水等。
2. 仪器包括:分光光度计、细管离心机等。
二、标本的取样和处理1. 选取新鲜、无血液溶血和降脂等异常的血清样本作为检测对象。
2. 血样采集后,立即置于无菌离心管中,以4,000转/分钟离心10分钟,将血浆分离。
3. 将血浆分装在无菌离心管中,分别标注,冷藏保存。
三、试剂的使用及准备1. 将试剂盒中的白蛋白测定试剂平均摇匀,按每次检测的样本数量和所需要的试剂量计算,避免过量使用试剂。
2. 准备好所需标准品的稀释液,按照试剂盒说明书中建议的浓度稀释标准品。
四、试验操作步骤1. 均衡室温为20-25摄氏度。
2. 试剂和样本准备:a. 在试验前半小时,将试剂和样本从冰箱中取出,适应室温。
b. 将待测样本和标准品平均搅拌均匀,避免生成气泡。
3. 试剂预热:取足够的试剂和样本,在试剂的使用温度下预热15分钟。
4. 光度计的调整:a. 打开分光光度计,选择合适的检测波长,适用于试剂盒中所使用的测量波长。
b. 将白色比色杯放入试槽中,调零,使显示屏上的光吸收值为0。
5. 基线测定:a. 将预热的白色比色杯置于试槽中,按下基线的按钮,待显示屏上的光吸收值稳定后,即可进行下一步操作。
b. 注意每次操作前都要进行基线测定,确保测量结果的准确性。
6. 样本和标准品的检测:a. 在预热的白色比色杯中,加入1.0mL的试剂,再加入0.01mL的样本,立即搅拌均匀。
b. 取45秒后的吸光度值作为测量值。
c. 重复上述步骤,测量标准品的吸光度值,并根据标准曲线计算样本中的白蛋白浓度。
7. 结果的记录计算:a. 将吸光度值记录在结果表格中。
b. 根据标准曲线的结果,计算样本中的白蛋白浓度。
前白蛋白检测方法
前白蛋白检测方法前白蛋白(prealbumin)是一种血浆中的蛋白质,通常用作评估患者的营养状态和炎症程度。
以下是一些常见的前白蛋白检测方法:1.免疫测定法(Immunoassay):免疫法是一种常用的前白蛋白检测方法,包括酶联免疫吸附试验(ELISA)、放射免疫测定法(RIA)和发光免疫测定法(CLIA)等。
这些方法利用特异性抗体与前白蛋白结合,并通过测量信号的强度或产生的荧光或放射性计数来 quantification 。
2.免疫电泳法(Immunoelectrophoresis):免疫电泳法通过将样品在电场作用下与抗体反应,然后根据免疫沉淀带(precipitin arcs)的相对迁移位置来定量前白蛋白。
这种方法结合了免疫学和电泳技术,对于前白蛋白的定量具有较高的特异性和敏感性。
3.免疫柱层析法(Immunoaffinity Chromatography):免疫柱层析法是一种高效的前白蛋白检测方法,利用蛋白质与柱中特定抗体的亲和性进行分离和富集。
样品通过免疫柱后,前白蛋白与抗体结合,其他蛋白质被洗去,并通过洗涤后的柱洗脱前白蛋白进行定量分析。
4.质谱法(Mass Spectrometry):质谱法是一种高分辨率分析技术,可用于前白蛋白的定量和定性分析。
质谱法将样品蛋白质分离并离子化,然后通过质谱仪来测量离子的质量和相对丰度,从而确定前白蛋白的存在和浓度。
这些方法中,ELISA 是最常见和常用的前白蛋白检测方法之一。
选择合适的方法需要考虑其准确性、可靠性、灵敏度、特异性、成本和实验室设备的可用性等因素。
具体应用时,建议根据样本类型、实验需求和实验室资源选择合适的方法。
前白蛋白测定SOP_PALB临床意义_检验科生化项目SOP
3.4仪器
SIEMENS DIMENSION Xpand Plus/RxL Max全自动生化分析系统。
4操作程序
4.1检测过程流程
签收样品→离心→上机检测→审核报告→签发报告→标本保存。
前白蛋白测定
文件编号:
版本号:
页码:第页共页
4.2样品签收
严格按照标本接收程序签收标本。
4.3标本处理
Product和批号Lot,以及最低值校准液在样品架上的位置Start at Position,最后把校准液各个水平的值按照由低到高的顺序输到对应位置,按F4:ASSIGN CUPS指定样品杯,校准液按顺序排列在样品架上,按F7:LOAD/RUN→F4:RUN或“RUN”运行键运行校准程序。
6质量控制程序
3.1.1试剂组成
试剂船1~3孔为抗-前白蛋白,抗体包被的颗粒,缓冲液,微生物抑制物,液体;5~8孔为聚乙二醇,缓冲液,表面活性剂1.1 mmol/L,微生物抑制物,液体。
3.1.2试剂准备
直接使用。
3.1.3试剂保存
试剂2~8℃保存,有效期内稳定。
3.2质控品
美国BIORAD多项免疫类质控液。
3.3校准品
4.4.2双向条形码标本分离血清后直接运行仪器。
4.4.3运行:输入完毕后按F3:LOAD LIST,确认样品已经装载在样本盘上,按Run键,仪器开始进行样品检测。
4.4.4检验后标本保存
标本检验完成后用采血管原盖盖紧,保存于标本冷藏库内,按日期放好,保存期为7天。
5校准程序
5.1校准品准备和储存
直接使用,2~8℃保存。
6.1质控品准备和储存
质控品为液体,可以直接使用。原包装质控品-10~-70℃可保存至有效期,未开启2-8℃可保存90d,开启后2-8℃可保存30d。
前白蛋白(PA)测定
1 测定方法免疫比浊法。
2 测定原理血清前白蛋白(Prealbumn,PA)与试剂中包被有抗PA抗体的胶乳颗粒相结合,与之发生凝集形成不溶性免疫复合物,使反应液产生混浊,PA的浓度与胶乳颗粒的凝集形成的浊度成正比。
3 标本血清及肝素-Li,Na,K/EDTA-K抗凝血浆,处理方法见标本准备。
稳定性:2 - 8℃ 3天-20℃ 6个月4 试剂4.1试剂来源:ROCHE配套试剂(详见试剂说明书)。
贮存条件及稳定性:未打开试剂盒:2-8℃储存至效期末R1:打开后机上稳定90天R2:打开后机上稳定90天准备:直接使用。
4.2 校准物来源:ROCHE配套校准物,符合WHO标准,具体如下:S1:0.9%NaClS2:C.f.a.s批特异的定标液的靶值乘以下列的转换因子,用来计算定标曲线。
S2:0.125 S5:1.000 S3:0.250 S6:2.276 S4:0.500定标频率:A 试剂批号更换后 B 由质控结果决定4.3 质控物来源:Precinorm protein (罗氏蛋白正常值质控)Precipath protein (罗氏蛋白病理值质控)其它适合的质控品贮存条件:置2-8℃冰箱至有效期。
准备:质控品应该进行1+7倍稀释后使用。
5 仪器ROCHE MODULAR P生化分析仪。
6 上机操作见仪器作业指导书。
7 参考范围20-40mg/ml8 性能指标本法线性范围为3-80mg/dl ,灵敏度为1.5mg/dl。
9临床意义前白蛋白是一种富含色氨酸的蛋白质,它在肝脏细胞中合成,分子量约为55 000道尔顿。
当PH为8.6时,虽然相对于Albumin的含量只有2.5%,,但是因为其阳极扩散率较高,在电泳后Prealbumin 的条带要先于白蛋白。
前白蛋白的功能是结合和转运低分子量的视黄醇结合蛋白(分子量低于21 000道尔顿),阻止其进行肾小球的率过。
循环中前白蛋白中的30-50%于视黄醇-结合蛋白形成复合物。
血清前白蛋白的测定方法
血清前白蛋白的测定方法《血清前白蛋白测定方法指南》嘿,朋友们!今天咱来聊聊血清前白蛋白的测定方法。
这血清前白蛋白啊,就像是身体里的一个小“情报员”,能告诉我们很多身体的状况呢。
要知道怎么测定它,咱先得了解一下它的“脾气秉性”。
血清前白蛋白在人体内可是有着重要作用的,它能反映肝脏的合成功能,还和营养状况密切相关。
那怎么才能抓住这个“小情报员”呢?常用的方法有免疫比浊法。
这就好比是一场“捕捉游戏”,通过特定的试剂和仪器,让血清前白蛋白现形。
具体怎么做呢?先把血清样本准备好,就像给“小情报员”搭好了舞台。
然后加入专门的抗体,这抗体就像是敏锐的“侦探”,专门去寻找血清前白蛋白。
当它们相遇后,就会发生一些奇妙的反应,仪器就能检测到这些变化,从而确定血清前白蛋白的含量啦。
还有一种电泳法,这就像是给血清前白蛋白来了一场“赛跑比赛”。
把血清放在电场中,不同的蛋白质会根据各自的特点跑向不同的位置,我们就能从中找到血清前白蛋白啦。
在测定的时候,可得注意一些小细节哦。
样本的采集要规范,可不能随随便便弄。
就像做饭一样,食材准备不好,做出来的菜味道可就差了。
而且仪器要校准好,不然就像近视眼没戴眼镜,看啥都模糊。
我记得有一次啊,在实验室里,有个小伙伴就是因为样本采集的时候不小心弄混了,结果测出来的数据那叫一个乱啊,大家都哭笑不得。
所以啊,做这个事情一定要细心细心再细心。
另外,不同的测定方法可能会有一些小小的差异,就像不同的厨师做同一道菜,味道可能会有点不一样。
但不管用哪种方法,我们的目的都是为了准确地了解血清前白蛋白的情况。
总的来说呢,血清前白蛋白的测定方法虽然听起来有点专业,但只要我们认真对待,就像对待一个重要的任务一样,还是能很好地掌握的。
希望大家都能通过这些方法,更好地了解自己的身体状况,让我们的身体一直健健康康的呀!这就是我对于血清前白蛋白测定方法的一些看法和经验啦,大家觉得怎么样呢?。
血清前白蛋白(PA)
血清前白蛋白(PA)是肝脏合成的一种糖蛋白,由4个相同的亚基组成,半衰期为0.5天,其参与T3、T4、维生素和视黄醇蛋白的合成。
血清前白蛋白测定可反映肝脏合成和分泌蛋白质的功能,可作为肝功能损害的早期指标以及提示一些疾病的变化及预后。
一、血清前白蛋白参考范围:(1)醋酸纤维薄膜电泳法:0.28~0.35g/L。
(2)免疫扩散法:男:233.5~372.7mg/L。
女:217.75~337.65mg/L。
儿童:160.7~327.9mg/L。
(3)散射比浊法:213.0~441.9mg/L。
二、临床意义:(1)肝脏疾病时前白蛋白更敏感,有人认为有30%白蛋白正常的肝病患者的前白蛋白减少,坏死后肝硬化几乎是零。
肝硬化肝细胞坏死较轻,前白蛋白变化不大,预后较好,当病情改善时,前白蛋白亦迅速升高;(2)亚急性肝坏死前白蛋白一直在低值,故前白蛋白可用作判断肝病预后指标。
肝癌以及阻塞性黄疸患者均可降低,其降低程度与病情有密切关系;(3)结合转氨酶、胆红素检测对不同类型肝脏疾病和非肝脏疾病有鉴别意义,如前白蛋白、转氨酶、胆红素均增高,多属急性肝脏疾病,如前白蛋白不增高,仅转氨酶、胆红素增高则应考虑非肝脏本身疾病;(4)肾病综合征前白蛋白不仅不减少,而且在饮食充分时还可以升高。
营养不良负氮平衡时前白蛋白减少;(5)升高:急性肝炎恢复期、有肝损害者戒酒后、霍奇金病、肾病综合征(过食蛋白饮食);降低:重症肝炎、急性肝炎、慢性活动性肝炎、非代偿性肝硬化、肝癌、阻塞性黄疸、溃疡性结肠炎、甲状腺功能亢进、营养不良等。
本篇文章来源于检验在线/ 原文链接:/article/know/yOMDAwMDAwMTcyOQ.html。
血清前白蛋白测定标准规程(知识资料)
血清前白蛋白测定标准操作规程1 检验申请单独检验项目申请:血清前白蛋白(缩写PAB)测定,组合项目申请:血生化中肝功能项目测定。
临床医生根据需要提出检验申请。
2 标本采集与处理2.1标本采集2.1.1常规静脉采血约2 ml,不抗凝,置普通试管中。
或采用含分离胶的真空采血管。
检查体液乳酸脱氢酶的体液标本应用肝素抗凝。
2.1.2检验申请单和血标本试管标上统一且唯一的标识符。
2.1.3急诊标本采集后,在检验申请单上填写标本采集时间。
2.1.4标本采集后与检验申请单一起及时运送至检验科。
专人负责标本的接收并记录标本的状态,对不合格标本予以拒收。
2.1.5下列标本为不合格标本2.1.5.1标本量不足:少于0.3ml的全血标本,或少于0.1ml的血清或血浆。
2.1.5.2对反应吸光度有干扰的标本,包括严重溶血、严重浑浊的标本。
2.1.5.3无法确认标本与申请单对应关系的。
2.1.5.4其他如标识涂改、标本试管破裂等。
2.2标本保存2.2.1接收标本后在30min内将标本离心分离出血清。
2.2.2标本保存时间:室温(15~25℃)下可稳定8h,普通冰箱中(2~8℃)稳定24h。
-20℃保存稳定30天。
为避免标本中水分挥发使血清浓缩,对保存时间超过1天的标本均加塞密闭或覆盖湿巾。
2.2.3已完成测试的标本保持完整的识别号,置4~8℃冰箱内保存7天。
2.3标本采集的注意事项2.3.1采血前使受检者保持平静、松弛、避免剧烈活动,24h不饮酒和12h以上禁食空腹状态。
2.3.2注意有无应用影响测试项目的药物。
2.3.3可以使用肝素抗凝的血液标本。
3 方法原理人血清PA与其相应抗体在液相中相遇,立即形成抗原-抗体复合物,并形成一定浊度。
该浊度的高低在一定量抗体存在时与抗原的含量成正比。
通过与同样处理的校准比较,计算未知样品的PA含量4 试剂及其他用品4.1试剂:前白蛋白试剂盒,由北京利德曼生化技术有限公司出品。
4.2试剂盒保存:未开瓶的试剂储存在2~8℃可稳定至有效期。
前白蛋白检测标准操作规程
9.6使用方法
将每瓶质控品用子弹头分装,每支分装100ul,每天取出1支进行检测。每天做标本前取出质控品恢复至室温,进行一次质控品检测。查看质控结果,对于失控结果按要求查找失控原因,重新检测。每日标本量超过150加做一次质控。
10.检验方法的局限性
10.1干扰物质:非结合胆红素≦29mg/dl、结合胆红素≦29mg/dl、血红蛋白≦5g/l、维生素C≦50mg/dl时对测定无影响。
美康生物
8.2校准品名称
前白蛋白校准品
8.3校准品规格
1×1ml
8.4校准程序
8.4.1用1ml移液管吸取1ml蒸馏水加入校准品瓶中复溶,混匀备用。
8.4.2按照日立生化分析仪操作规程中的校准程序进行操作,使用复溶好的校准品进行自动校准。生化分析仪可根据校准结果自动绘制校准曲线。
8.5校准周期
至少每月校准1次
7.4主要组成成分
试剂
成分
终浓度
试剂1
磷酸盐缓冲液
0.05
试剂2
羊抗人PA血清
20-30ML/L
7.5储存条件有效期
试剂在2-8℃密封保存可稳定1年,开瓶后2-8℃保存可稳定1个月。严禁冷冻。
7.6参数设置
主波长
340nm
辅助波长
700nm
反应方法
两点法
反应方向
向上反应温度37℃来自试剂1210ul
样本
8.6校准注意事项
当发生以下情况时需要进行校准:
变更试剂批号;质控值发生显著偏移;生化分析仪进行了较大维护。
9.质控
9.1质控品来源
上海昆涞生物科技有限公司
9.2质控品名称
特种蛋白液体非定值质控品
9.3质控品浓度水平
人前白蛋白(PA)检测试剂盒(透射比浊法)
人前白蛋白(PA)检测试剂盒(透射比浊法)简介:前白蛋白(prealbumin ,PA)相对分子量54000万,由肝细胞合成,电泳时迁移在白蛋白之前,故得此名。
测定血清前白蛋白(prealbumin ,PA)大多采用免疫化学技术,常用的方法有免疫单扩散法、散射比浊法、透射比浊法。
免疫单扩散法虽然简便易行不需要特殊设备,但费时,精密度和准确性不佳。
散射比浊法灵敏度高,但需要特殊蛋白分析仪。
Leagene 人前白蛋白(PA)检测试剂盒(透射比浊法)其检测原理是PA 与抗PA 抗体在液相中反应生成PA 抗原抗体复合物,使反应液呈一定浊度。
当一定量抗体存在时,浊度与PA 的含量呈正比,利用透射浊度法与相同处理的PA 标准比较,求得样本中PA 的含量。
本试剂盒专门用于人血清、血浆、组织样本中的前白蛋白含量测定,特别适用血清和血浆样本。
本试剂盒仅用于科研领域,不宜用于临床诊断或其他用途。
组成:自备材料:1、 分光光度计或酶标仪2、 离心管、小试管或96孔板3、 恒温箱操作步骤(仅供参考):1、 TP 测定操作:分光光度计手工或半自动生化分析仪检测,按下表依次加入试剂:2、 混匀,孵育。
3、 分光光度计测定吸光度。
以空白管调零,读取标准管和各待测管的吸光度。
编号 名称TC068550T Storage试剂(A): PA 标准液(400mg/L) 0.2ml -20℃ 试剂(B): PA 抗体工作液 50ml -20℃ 试剂(C): PA 生理盐水 1mlRT 使用说明书1份空白管 标准管 待测管 PA 生理盐水(μl) 20 PA 标准液(400mg/L)(μl) 20 待测样本(μl) 20 PA 抗体工作液(ml)1.01.01.0计算:PA(mg/L)=(待测管吸光度/标准管吸光度)×PA标准液浓度(mg/L)参考区间:健康正常人PA为250~400mg/L,儿童约为成人一半。
注意事项:1、上述试剂避免反复冻融,以免失效或效率下降。
前白蛋白(PA)测定
1 测定方法免疫比浊法。
2 测定原理血清前白蛋白(Prealbumn,PA)与试剂中包被有抗PA抗体的胶乳颗粒相结合,与之发生凝集形成不溶性免疫复合物,使反应液产生混浊,PA的浓度与胶乳颗粒的凝集形成的浊度成正比。
3 标本血清及肝素-Li,Na,K/EDTA-K抗凝血浆,处理方法见标本准备。
稳定性:2 - 8℃ 3天-20℃ 6个月4 试剂4.1试剂来源:ROCHE配套试剂(详见试剂说明书)。
贮存条件及稳定性:未打开试剂盒:2-8℃储存至效期末R1:打开后机上稳定90天R2:打开后机上稳定90天准备:直接使用。
4.2 校准物来源:ROCHE配套校准物,符合WHO标准,具体如下:S1:0.9%NaClS2:C.f.a.s批特异的定标液的靶值乘以下列的转换因子,用来计算定标曲线。
S2:0.125 S5:1.000 S3:0.250 S6:2.276 S4:0.500定标频率:A 试剂批号更换后 B 由质控结果决定4.3 质控物来源:Precinorm protein (罗氏蛋白正常值质控)Precipath protein (罗氏蛋白病理值质控)其它适合的质控品贮存条件:置2-8℃冰箱至有效期。
准备:质控品应该进行1+7倍稀释后使用。
5 仪器ROCHE MODULAR P生化分析仪。
6 上机操作见仪器作业指导书。
7 参考范围20-40mg/ml8 性能指标本法线性范围为3-80mg/dl ,灵敏度为1.5mg/dl。
9临床意义前白蛋白是一种富含色氨酸的蛋白质,它在肝脏细胞中合成,分子量约为55 000道尔顿。
当PH为8.6时,虽然相对于Albumin的含量只有2.5%,,但是因为其阳极扩散率较高,在电泳后Prealbumin 的条带要先于白蛋白。
前白蛋白的功能是结合和转运低分子量的视黄醇结合蛋白(分子量低于21 000道尔顿),阻止其进行肾小球的率过。
循环中前白蛋白中的30-50%于视黄醇-结合蛋白形成复合物。
血清前白蛋白测定检验程序(new)
16.5 血液标本在离心过程中,应将所有标本加盖。离心后,开启试管盖时应 防止气雾胶污染环境。
16.6 与血液标本接触的一切器皿、仪器组装/拆卸组合零件都应视为污染源, 因此操作人员应采取必要的保护性措施如穿戴保护性外套、手套等。不小心接触 了这种污染源时,应立即用清水冲洗被污染区域并用0.2%过氧乙酸溶液或75%酒精 溶液进行消毒处理。
16 安全性预警措施
16.1 实验室及工作人员一般安全防护措施见《实验室安全管理程序》(PLA301LJK-CX-030)。
16.2 血液标本溢出后,由工作人员立即用0.2%过氧乙酸溶液或75%酒精溶液 对污染的环境进行消毒。
16.3 如果操作人员的皮肤或衣物上沾到了血液、废液或试剂,应立即用0.2% 过氧乙酸溶液或75%酒精溶液消毒处理,再用肥皂水、清水进行冲洗。如果眼睛被 溅入血液、废液或试剂,用大量的清水冲洗并采取必要的医疗措施。
16.7 对突发传染性疾病的血液标本的防护应启动特殊的安全防护程序。
17 变异的潜在来源
标本、反应液中的颗粒微粒、微小团块可影响结果分析。
18 报告时间
免疫学前白蛋白检测8小时出结果。
19 参考文献
①叶应妩, 王毓三主编. 全国临床检验操作规程. 中华人民共和国卫生部医政 司. 南京. 第二版. 1997。
9.2 室间质控措施 每年参加卫生部临床检验中心的室间质量控制。
10 干扰因素
严重溶血或脂血的标本会影响测定,使结果不稳定导致结果测不出来。 反应溶液中的灰尘颗粒或其他颗粒物质,会造成非特异性的散射信号,从而 影响样本分析结果的准确。
血清前白蛋白的测定及其临床应用
相 对 或 绝 对 不 足 导 致 蛋 白质 合 成 减 少 , 解 代 谢 亢 进 , 糖 分 且
尿 病 患 者 饮 食 受 控 , 种 营养 摄 入 不 足 , 各 而糖 尿病 肾病 又 导
致 蛋 白质 丢 失 , 出 现负 氮 平 衡 , A 的 测 定 能 评 价 糖 尿 病 故 P 患 者 的 营 养 状 况 , 于糖 尿 病 的治 疗 、 复 、 后 、 归 有 实 对 康 预 转 际 应 用 。妊 娠 或 高 雌 激 素 时 P 下 降 , 生 Ho g i S A 发 d kn 病 时P A上 升 。综 上 所 述 , 清 前 自蛋 白在 临 床 上 有 很 广 泛 血 的 用 途 , 科 患 者 可 以 通 过 测 定 血 清 前 白 蛋 白 观 察 患 者 的 外 营养状态 , 帮助 患 者 及 时 补 充 营 养 , 强 免疫 力 , 快 康 复 , 增 尽
[] Wr h T ,eim nM,o n ,t 1 nem gi ne 1 i t CJ Sh fa Sl m D ea It i u ac g r f o . r d
f eueo hma ai m v u D A t t ga a d o t s f u npp l ai s N e i s la— rh l o r sn l j u t cr c t oy o sr n gO s t yeo,04 o ev ac o g rce i ・ bt ncl 0 , i ly l f e n eG 2 川 [] T 。 h ad e n c ‘ D , i Q KLP J。 a H “pp l i B Qn , 。 , 1 “ Y . ai。 。 l “ Bn kk 1Ⅲ ago.I c 。 Ⅲ“ t 。 “
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检验科生化前白蛋白PA测定的标准操作规程
检验科生化前白蛋白(PA)测定的标准操作规程【目的】体外检测血清前白蛋白(PA)含量。
【职责】1.实验室工作人员均应熟知并严格遵守本SOP,室负责人监督落实。
2.本SOP的改动,可由任一使用本SOP的工作人员提出,并报经下述人员批准签字:室负责人、科主任。
【标本类型及实验前准备】1.受检者的准备病人空腹12h,不饮酒24h后采集血样。
体检对象抽血前应有两周的的正常状况记录。
注意有无应用影响测试项目的药物。
此外,对于体检者,采血的季节都应做相关记录,因为样本中各项目的含量有季节性变动,为了前后比较应在每年同一季节检验。
对于体检对象抽血前应有2周时间保持平时的饮食习惯,应嘱体检对象在抽血前24小时内不做剧烈运动。
2.静脉采血除非是卧床的病人,一般在采血时取坐位。
体位影响水分在血管内外的分布,会影响测试项目的浓度。
在采血前至少应静坐5分钟,一般从肘静脉取血,使用止血带的时间不超过1分钟,穿刺成功后立即松开止血带。
【仪器设备】东芝TBA-FX8全自动生化分析仪,低速离心机一、检测原理样本中的前白蛋白与试剂中的特异性抗人前白蛋白抗体结合,形成不溶性免疫复合物,使反应液产生浊度。
反应产生的浊度与样本中前白蛋白的浓度成正比。
通过在340nm处测定吸光度的变化值,即可得样本中前白蛋白的浓度。
二、试剂1.试剂本科使用上海复星长征医学科学有限公司PALB试剂盒,为液体双试剂,各组分如下:试剂R1:Tris 缓冲液 20mmol/L聚乙二醇-60000 3%试剂R2:Tris 缓冲液 20mmol/L羊抗人前白蛋白抗体1.校准要求2.1校准品:使用与试剂配套使用的复星长征校准品对测定进行校准。
2.2校准间隔2.2.1试剂批号变更时,使用与试剂配套使用的复星长征校准品对测定进行校准后再对临床病人样本进行测定。
2.2.2室内质量控制出现问题时使用与试剂配套使用的复星长征校准品对测定进行校准并确认问题得到解决后方可对临床病人样本进行测定。
前白蛋白PA测定标准操作规程
前白蛋白(PA)测定标准操作规程所有相关人员上岗前或文件有变动时均应及时阅读此文件并签字。
1.Intended Use目的通过颗粒增强的免疫散射比浊法定量测定人血清中的前白蛋白含量。
2.Sphere of Application适用范围在检验部BN ProSpec特定蛋白分析系统上进行的前白蛋白定量的检测。
3.Principle of Test检验方法及原理免疫散射比浊法。
在免疫化学反应中,人的血清中的前白蛋白会与特异抗体形成免疫复合物。
这些复合物会使穿过标本的光束发生散射。
散射光的强度与标本中前白蛋白的浓度成正比。
与已知的标准浓度对比就可得出结果。
4.Specimen Collection使用的样本4.1.标本种类:新鲜血清或采样后24小时内即进行冷冻储存的血清。
4.2.收集方法:4.2.1.血清:推荐使用超速离心清除脂血样本。
●收集静脉血于空白试管,并立即分离血清和血细胞。
●血清标本必须彻底凝固,并在离心沉淀后绝不能含有任何颗粒或残存的纤维蛋白。
●脂血标本或溶解后变得浑浊不清的冷冻标本,则必须在测试前通过离心沉淀加以澄清(在大约15000×g下10分钟)。
4.3.病人准备要求:4.3.1.一般要求早晨空腹安静时采血。
4.3.2.采血前一天忌用烟、酒、茶、咖啡,并应尽可能避免服用任何药物,不能停用的药物应予以注明,如抗生素、激素、维生素及其它影响代谢或干扰测试反应的药物,以便解释结果时参考。
4.4.标本容器的要求:洁净干燥的空白试管。
4.5.拒收标本的规定:严重溶血、严重脂血、严重污染标本会导致错误结果,应予以拒收。
4.6.标本的处理方法:4.6.1.血清:血样本应立即离心并分离血清进行检测;冷冻样品应解冻或缓慢升温至室温,此外冷冻过的样本检测前必须很好地加以混合并离心。
4.7.标本的储存规定:4.7.1.血清或血浆:●新鲜样本采集后,在18-25℃的室温环境中,必须在8小时内进行检测。
血浆抽取(血清蛋白分析)操作流程及评分标准
血浆抽取(血清蛋白分析)操作流程及评分
标准
血浆抽取(血清蛋白分析)操作流程及评分标准
1.操作流程
1.1 准备工作
确保工作台面整洁干净,并准备所需的实验器材和试剂。
戴上口罩、手套和实验室服,以确保操作环境无菌。
1.2 血浆抽取
1.将采血器插入被试者的外周静脉,注意确保穿刺点无菌。
2.通过采血器抽取足够的血液,通常为20-30毫升。
3.将采集到的血液倒入抗凝剂预处理的试管中,并轻轻颠倒混匀,确保血液与抗凝剂充分接触。
1.3 血浆分离
1.将预处理的血液试管放入离心机中,以3000rpm的速度离心10分钟。
2.离心后,使用移液器将上清液(血浆)小心地转移至新的干
净试管中。
3.将血浆离心管保持垂直,避免将红细胞或沉淀物带入血浆中。
2.评分标准
根据操作的准确性和无菌程度,对血浆抽取操作进行评分。
评
分标准如下:
优秀(10分):操作高度准确,且操作过程中保持严格的无菌和安全措施。
良好(8分):操作准确度较高,且基本保持无菌和安全措施。
一般(6分):操作准确度有待提高,但仍能保持基本的无菌
和安全措施。
差(4分):操作准确度较低,且未能完全保持无菌和安全措施。
严重不足(2分):操作准确度极低,且明显违反无菌和安全
措施。
失败(0分):操作失败,无法获得可用的血浆样本。
评分标准可根据实验要求进行适当调整,并由负责人进行评分。
以上为血浆抽取(血清蛋白分析)操作流程及评分标准的简要
介绍。
人血白蛋白测定标准操作规程
人血白蛋白测定标准操作规程1.实验原理:(溴甲酚绿法)人血白蛋白在 pH 4.1的缓冲液中带正电荷,在有非离子型表面活性剂存在时,可与带负电荷的燃料溴甲酚绿结合形成蓝绿色的复合物,其颜色深浅与白蛋白浓度成正比,与同样处理的白蛋白标准比较,即可求的血清中白蛋白的含量pH白蛋白溴甲酚绿复合物白蛋白+溴甲酚绿−−→−1.42.试剂主要组成成分3.样本要求:新鲜无溶血血清,勿使用肝素抗凝血浆。
22~25℃保存8小时,2~8℃保48小时,-20℃保存7天,样本不可反复冻融!4.检验方法:仪器法(详见DF-603/DI-600标准操作规程)5.参考范围;6.检验结果的解释6.1线性范围:在给定的样本/试剂比例和条件下测定时,本试剂线性范围可达60g/L。
样本含量超出线性范围时,建议用0.9%(W/V)的氯化钠溶液稀释样本。
最大稀释5倍。
6.2单位换算:g/dL=g/L×0.17检验结果的局限性7.1结果的准确性依赖于仪器的校正和测定温度、时间的控制。
7.2若试剂浑浊或以水空白在630nm处吸光度大于0.300时不能使用。
8.产品性能指标8.1试剂外观:无色透明或淡黄色液体,无悬浮物及沉淀物。
8.2装量:不低于标识值8.3空白吸光度:在630nm处,光径1cm时,空白吸光度A≤0.300。
8.4分析灵敏度:在630nm处,光径1cm时,测量40g/L的总蛋白,吸光度差△A≥0.0028.5线性区间:试剂的线性区间为[10.0-60.0]g/L,在此线性区间内:a)线性相关系数r应不小于0.9900;b)[10-20]g/L区间内,线性绝对偏差不超过±4.0g/L;(20.1-60)g/L区间内,线性相对偏差不超过±10%。
8.6精密度8.6.1重复性:重复测试(40.0±5.0)g/L的样本,所得结果的变异系数(CV)应≤2.0%8.6.2批间差:重复测试(40.0±5.0)g/L的样本,所得结果批间相对极差(R)应≤5.0%8.7准确性:相对偏差应不大于±6.0%。
最新前白蛋白操作SOP
Central Lab SOP 中心实验室- SOP文件TITLE:题目前白蛋白(PA)测定标准操作规程INDEX NUMBER:序列号FL-ML-0-006WRITTEN BY: 书写者:陈先宝DATE WRITTEN:书写日期2011年10月1日EFFECTIVE DATE:生效日期2011年11月1日REVIEW DATE: 审阅日期2011年10月20 REVISIONDATE: 修订日期REPLACE NUMBER: 被替代版号New Format:新版号A/0APPROVED BY:审批者:Lab Director:中心主任黄永富所有相关人员上岗前或文件有变动时均应及时阅读此文件并签字。
1.Intended Use目的通过颗粒增强的免疫散射比浊法定量测定人血清中的前白蛋白含量。
2.Sphere of Application适用范围在检验部BN ProSpec特定蛋白分析系统上进行的前白蛋白定量的检测。
3.Principle of Test检验方法及原理免疫散射比浊法。
在免疫化学反应中,人的血清中的前白蛋白会与特异抗体形成免疫复合物。
这些复合物会使穿过标本的光束发生散射。
散射光的强度与标本中前白蛋白的浓度成正比。
与已知的标准浓度对比就可得出结果。
4.Specimen Collection使用的样本4.1.标本种类:新鲜血清或采样后24小时内即进行冷冻储存的血清。
4.2.收集方法:4.2.1.血清:推荐使用超速离心清除脂血样本。
●收集静脉血于空白试管,并立即分离血清和血细胞。
●血清标本必须彻底凝固,并在离心沉淀后绝不能含有任何颗粒或残存的纤维蛋白。
●脂血标本或溶解后变得浑浊不清的冷冻标本,则必须在测试前通过离心沉淀加以澄清(在大约15000×g下10分钟)。
4.3.病人准备要求:4.3.1.一般要求早晨空腹安静时采血。
4.3.2.采血前一天忌用烟、酒、茶、咖啡,并应尽可能避免服用任何药物,不能停用的药物应予以注明,如抗生素、激素、维生素及其它影响代谢或干扰测试反应的药物,以便解释结果时参考。
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血清前白蛋白测定标准操作规程
1 检验申请
单独检验项目申请:血清前白蛋白(缩写PAB)测定,组合项目申请:血生化中肝功能项目测定。
临床医生根据需要提出检验申请。
2 标本采集与处理
2.1标本采集
2.1.1常规静脉采血约2 ml,不抗凝,置普通试管中。
或采用含分离胶的真空采血管。
检查体液乳酸脱氢酶的体液标本应用肝素抗凝。
2.1.2检验申请单和血标本试管标上统一且唯一的标识符。
2.1.3急诊标本采集后,在检验申请单上填写标本采集时间。
2.1.4标本采集后与检验申请单一起及时运送至检验科。
专人负责标本的接收并记录标本的状态,对不合格标本予以拒收。
2.1.5下列标本为不合格标本
2.1.5.1标本量不足:少于0.3ml的全血标本,或少于0.1ml的血清或血浆。
2.1.5.2对反应吸光度有干扰的标本,包括严重溶血、严重浑浊的标本。
2.1.5.3无法确认标本与申请单对应关系的。
2.1.5.4其他如标识涂改、标本试管破裂等。
2.2标本保存
2.2.1接收标本后在30min内将标本离心分离出血清。
2.2.2标本保存时间:室温(15~25℃)下可稳定8h,普通冰箱中(2~8℃)稳定24h。
-20℃保存稳定30天。
为避免标本中水分挥发使血清浓缩,对保存时间超过1天的标本均加塞密闭或覆盖湿巾。
2.2.3已完成测试的标本保持完整的识别号,置4~8℃冰箱内保存7天。
2.3标本采集的注意事项
2.3.1采血前使受检者保持平静、松弛、避免剧烈活动,24h不饮酒和12h以上禁食空腹状态。
2.3.2注意有无应用影响测试项目的药物。
2.3.3可以使用肝素抗凝的血液标本。
3 方法原理
人血清PA与其相应抗体在液相中相遇,立即形成抗原-抗体复合物,并形成一定浊度。
该浊度的高低在一定量抗体存在时与抗原的含量成正比。
通过与同样处理的校准比较,计算未知样品的PA含量
4 试剂及其他用品
4.1试剂:前白蛋白试剂盒,由北京利德曼生化技术有限公司出品。
4.2试剂盒保存:未开瓶的试剂储存在2~8℃可稳定至有效期。
试剂开瓶后,在仪器冰箱试剂仓中可保存28天。
开盖后避免污染。
当试剂变混浊,或者未开盖的液体有沉淀,或起始吸光率>0.8时,表明试剂已变质,不能继续使用。
4.3试剂盒准备:液态双试剂型,即开即用,无特殊准备。
4.4试剂盒主要成分:
5 校准品与校准模式 5.1 校准品:与试剂盒配套的ASO 校准液。
5.2 校准类型和校准点数目:非线性模式,5个校准点。
5.3 校准周期:校准间隔时间14天。
但在:①更换试剂或出现质控漂移时;②仪器进行全面保养后;③仪器的重要零件更换后;均须进行一次校准。
5.4 校准液重建方法:仪器自动稀释成5个不同的浓度标准品。
6 质控品与室内质控规则
6.1 质控品采用由Beckman-Coulter 公司提供的两个不同水平未定值质控血清。
6.2 质控液重建方法:液态质控血清,即开即用,无需特殊准备。
6.3 质控品测定:在每一批标本中测定两个水平质控血清各一次。
6.4 质控规则:采用Westgard 多规则质控规则,由计算机程序进行检索与判断。
7 适用仪器
适用AEROSET 和C16000全自动生化分析仪器。
8 标本检测步骤
装载试剂 → 进行校准 → 进行质控 → 输入标本检测项目 → 加载标本 → 标本测定 →结果复核 → 报告。
9 主要分析参数参见说明书。
10 结果计算
c = ΧC O
式中:c —— 测定前白蛋白浓度,mmmol/L ;
ΔA 标准
ΔA测定——标本管吸光度变化;
ΔA标准——标准管吸光度变化;
C O——校准血清前白蛋白浓度,mmol/L;
11 检验结果的报告及范围
11.1结果的报告
11.1.1结果经审核后,确认准确无误后发出报告。
11.1.2报告单上标明结果的计量单位、参考区间、报告日期、时间、操作者和审核者签名,并有与申请单相同的医学信息。
11.1.3如收到标本的质量可能对测定结果有影响的也在报告单上指出。
11.2报告范围:0~52 mg/dL,超过此范围的结果报告时必须附有证明该结果准确可靠的文字说明,例如:系根据标本稀释后重复测定的结果。
12 操作性能
12.1精密度:批内(17.7mg/dl)CV< 2.5%,批间CV< 5.2%。
12.2线性范围:血清与试剂用量之比为4:200:40时,测定上限为52 mg/dL 。
12.3方法的有限性及干扰因素:内源性干扰物溶血为1000mg/ml、脂血2000mg/ml、黄疸30mg/ml、抗坏血酸300mg/ml对测试结果无明显影响。
12.4灵敏度:试剂的最小检测量为2 mg/dL。
13 参考范围
0.10~0.40g/L
14 临床意义
前白蛋白测定试剂盒临床上用于测定人体血清中前白蛋白的含量。
血清前白蛋白(prealbumin,PA) 是肝脏细胞合成的一种血清蛋白质,其主要生理功能是运输甲状腺
素和维生素A,并具有胸腺激素活性,可通过促进淋巴细胞的成熟来增加机体的免疫力。
PA对临床肝实质性损害有重要诊断价值。
肝癌,肝硬化,慢性活动性肝炎,阻塞性黄疸患者均显著降低,是早期肝功能损伤的指标。
此外,营养不良和急性感染的病人PA也可降低。
15 结果审核以及分析与相关项目的联系
15.1由资深专业人员负责检验结果的审核。
15.2认真审核每一个测定结果,审核者对发出报告结果的准确性和可靠性负责,并在报告单的审核者处签名。
15.3相关项目:审核出现与临床不符甚至相悖的情况,应分析与查找原因。
16 威胁生命的“紧急值”及报告规定(无规定)
17 有关引用程序与文件
17.1 Abbott自动生化分析仪仪器标准操作规程。
17.2生化检验室内质控标准操作程序。
17.3检验结果审核程序。
17.4标本送检和接收程序。
18 参考文献
18.1陆永绥,张伟民主编. 临床检验管理与技术规程. 杭州:浙江大学出版社, 2004.
18.2北京利德曼生化股份有限公司前白蛋白测定试剂盒说明书。