血清白蛋白测定标准操作规程

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临床生化检验:3-血清白蛋白测定(溴甲酚绿法)

临床生化检验:3-血清白蛋白测定(溴甲酚绿法)
2012春季学期
试剂与器材
R试剂: pH4.15琥珀酸缓冲液 2.4g/L聚氧乙烯十二烷基醚(Brij-35) 溴甲酚绿(BCG) 白蛋白标准液(28g/L) 分光光度计 水浴锅 病人血清
2012春季学期
样品要求
血清,采血后及时分离,避免溶血,血清在2~ 8℃稳定3天。
2012春季学期
操作步骤
取3支试管做好标记,按下表操作:
加入物
血清 蛋白标准液 蒸馏水 R试剂
B
21μl 3ml
S
21μl
3ml
U
21μl 3ml
混匀,37℃孵育1分钟后,在波长630nm处,以B管调零,读取各 管吸光度A。
2012春季学期
数据处理计算
管号 S U
/ L 28 A u As
平均A值
2012春季学期
技术指标
线性范围:5~80g/L,r≥0.99。 精密度:批内CV≤4.0%,批间相对极差<5%。 准确度:相对误差≤10%。 空白吸光度变化率:波长630nm,光径10mm, 测得试剂吸光度变化率△A/min≤0.5。
2012春季学期
注意事项
1.BCG是一种pH指示剂,变色域为PH3.8(显黄色)~5.4(显蓝绿色 ),因此控制反应液的pH是本法测定的关键。 2.配制BCG试剂也可用其他缓冲液如枸椽酸盐或乳酸盐缓冲液。但以 琥珀酸缓冲液的校正曲线通过原点,线性好,灵敏度高,成为首选推荐 配方。
2012春季学期
血清白蛋白测定(溴甲 酚绿法)
医学检验系临床生化检验教研室
白蛋白生化特性
血清白蛋白(Albumin,Alb) pI4.7 正常人血清Alb含量为35~55g/L,占血浆蛋白的 50%~60%。 生理功能:营养价值

血清前白蛋白测定标准规程

血清前白蛋白测定标准规程

血清前白蛋白测定标准操作规程1 检验申请单独检验项目申请:血清前白蛋白(缩写PAB)测定,组合项目申请:血生化中肝功能项目测定。

临床医生根据需要提出检验申请。

2 标本采集与处理2.1标本采集2.1.1常规静脉采血约2 ml,不抗凝,置普通试管中。

或采用含分离胶的真空采血管。

检查体液乳酸脱氢酶的体液标本应用肝素抗凝。

2.1.2检验申请单和血标本试管标上统一且唯一的标识符。

2.1.3急诊标本采集后,在检验申请单上填写标本采集时间。

2.1.4标本采集后与检验申请单一起及时运送至检验科。

专人负责标本的接收并记录标本的状态,对不合格标本予以拒收。

2.1.5下列标本为不合格标本2.1.5.1标本量不足:少于0.3ml的全血标本,或少于0.1ml的血清或血浆。

2.1.5.2对反应吸光度有干扰的标本,包括严重溶血、严重浑浊的标本。

2.1.5.3无法确认标本与申请单对应关系的。

2.1.5.4其他如标识涂改、标本试管破裂等。

2.2标本保存2.2.1接收标本后在30min内将标本离心分离出血清。

2.2.2标本保存时间:室温(15~25℃)下可稳定8h,普通冰箱中(2~8℃)稳定24h。

-20℃保存稳定30天。

为避免标本中水分挥发使血清浓缩,对保存时间超过1天的标本均加塞密闭或覆盖湿巾。

2.2.3已完成测试的标本保持完整的识别号,置4~8℃冰箱内保存7天。

2.3标本采集的注意事项2.3.1采血前使受检者保持平静、松弛、避免剧烈活动,24h不饮酒和12h以上禁食空腹状态。

2.3.2注意有无应用影响测试项目的药物。

2.3.3可以使用肝素抗凝的血液标本。

3 方法原理人血清PA与其相应抗体在液相中相遇,立即形成抗原-抗体复合物,并形成一定浊度。

该浊度的高低在一定量抗体存在时与抗原的含量成正比。

通过与同样处理的校准比较,计算未知样品的PA含量4 试剂及其他用品4.1试剂:前白蛋白试剂盒,由北京利德曼生化技术有限公司出品。

4.2试剂盒保存:未开瓶的试剂储存在2~8℃可稳定至有效期。

血清白蛋白标准操作规程,1200字

血清白蛋白标准操作规程,1200字

血清白蛋白标准操作规程血清白蛋白是一种重要的血液蛋白,其浓度的检测对于评估肝功能和营养状况等方面具有重要意义。

以下是血清白蛋白标准操作规程的详细步骤和注意事项。

一、试剂和仪器准备1. 检测血清白蛋白的试剂包括:白蛋白测定试剂盒、标准品、去离子水等。

2. 仪器包括:分光光度计、细管离心机等。

二、标本的取样和处理1. 选取新鲜、无血液溶血和降脂等异常的血清样本作为检测对象。

2. 血样采集后,立即置于无菌离心管中,以4,000转/分钟离心10分钟,将血浆分离。

3. 将血浆分装在无菌离心管中,分别标注,冷藏保存。

三、试剂的使用及准备1. 将试剂盒中的白蛋白测定试剂平均摇匀,按每次检测的样本数量和所需要的试剂量计算,避免过量使用试剂。

2. 准备好所需标准品的稀释液,按照试剂盒说明书中建议的浓度稀释标准品。

四、试验操作步骤1. 均衡室温为20-25摄氏度。

2. 试剂和样本准备:a. 在试验前半小时,将试剂和样本从冰箱中取出,适应室温。

b. 将待测样本和标准品平均搅拌均匀,避免生成气泡。

3. 试剂预热:取足够的试剂和样本,在试剂的使用温度下预热15分钟。

4. 光度计的调整:a. 打开分光光度计,选择合适的检测波长,适用于试剂盒中所使用的测量波长。

b. 将白色比色杯放入试槽中,调零,使显示屏上的光吸收值为0。

5. 基线测定:a. 将预热的白色比色杯置于试槽中,按下基线的按钮,待显示屏上的光吸收值稳定后,即可进行下一步操作。

b. 注意每次操作前都要进行基线测定,确保测量结果的准确性。

6. 样本和标准品的检测:a. 在预热的白色比色杯中,加入1.0mL的试剂,再加入0.01mL的样本,立即搅拌均匀。

b. 取45秒后的吸光度值作为测量值。

c. 重复上述步骤,测量标准品的吸光度值,并根据标准曲线计算样本中的白蛋白浓度。

7. 结果的记录计算:a. 将吸光度值记录在结果表格中。

b. 根据标准曲线的结果,计算样本中的白蛋白浓度。

血清白蛋白测定标准操作规程

血清白蛋白测定标准操作规程

血清白蛋白测定标准操作规程1 检验申请单独检验项目申请:血清白蛋白测定(缩写ALB);组合项目申请:血生化中肝功能测定项目组合。

临床医生根据需要提出检验申请。

2 标本采集与处理2.1标本采集2.1.1常规静脉采血约2ml,不抗凝,置普通试管中。

或采用含分离胶的真空采血管。

2.1.2检验申请单和血标本试管标上统一且唯一的标识符。

2.1.3急诊标本采集后,在检验申请单上填写标本采集时间。

2.1.4标本采集后与检验申请单一起及时运送至检验科。

专人负责标本的接收并记录标本的状态,对不合格标本予以拒收。

2.1.5下列标本为不合格标本2.1.5.1标本量不足:少于0.3ml的全血标本,或少于0.1ml的血清或血浆。

2.1.5.2对反应吸光度有干扰的标本,包括严重溶血、严重浑浊的标本。

2.1.5.3无法确认标本与申请单对应关系的。

2.1.5.4其他如标识涂改、标本试管破裂等。

2.2标本保存2.2.1接收标本后在30min内将标本离心分离出血清。

2.2.2标本保存时间:室温(15~25℃)下可稳定一周,普通冰箱中(2~8℃)稳定一个月。

为避免标本中水分挥发使血清浓缩,对保存时间超过1天的标本均加塞密闭或覆盖湿巾。

2.2.3已完成测试的标本保持完整的识别号,置4~8℃冰箱内保存7天。

2.3标本采集的注意事项2.3.1采血前使受检者保持平静、松弛和空腹状态。

2.3.2不建议采集抗凝血标本,如果必须使用血浆,推荐的抗凝剂是肝素。

3 方法原理血清中的白蛋白与溴甲酚绿在PH=4.2的条件下结合生成绿色复合物,溶液由黄色变为绿色,其颜色深浅与白蛋白浓度成正比,通过在630nm处测定其吸光度可得出白蛋白的含量。

PH=4.2白蛋白 + 溴甲酚绿 --------------- 绿色复合物4 试剂及其他用品4.1试剂:溴甲酚绿法测定白蛋白试剂盒,由北京利德曼生化技术XXX出品。

4.2试剂盒保存:保存于2~8℃,不开盖情况下至标签的失效期。

血清总蛋白测定标准操作规程

血清总蛋白测定标准操作规程

1. 检测目的用于定量测定人体血清或血浆中总蛋白的含量2. 检测原理双缩脲法:在碱性溶液中,血清蛋白与二价铜离子反应生成紫色络合物(双缩脲反应),颜色深浅与总蛋白的浓度成正比例关系,通过测定546nm 吸光度,计算总蛋白含量。

碱性蛋白质 + 铜离子 ------------ 紫红色络合物3.适用范围血清,或用肝素抗凝的血浆4.试剂及仪器1.试剂品迈瑞公司TP 试剂盒,为液体单一试剂,各组分如下:2.校准品由迈瑞公司提供的校准液,在更换试剂批号或出现质控漂移;仪器进行保养;仪器重要零件更换后进行校准;3.质控品由迈瑞公司提供的两个不同水平定值质控血清,在每一批标本测定前做两个水平的质控血清各一次,采用Westgard 多规则质控规则,如出现失控情况,按室内质控标准操作程序采取各种有效的纠正措施及时纠正,在确认重新恢复控制状态后开始标本检测。

4.仪器迈瑞BS-800型号仪器5.操作步骤装载试剂—→进行校准—→进行质控—→输入标本检测项目—→加载标本—→标本测定—→结果复核—→报告6.注意事项1. 不能测试严重溶血、脂浊、黄疸的标本, 血浆标本可用肝素抗凝,待测样品室温放置不超过24小时,可于2℃-8℃保存72小时,胸腹水经抗凝取上清液。

2. 不能使用过期的试剂,2℃-8℃保存。

3.定标液,质控液应冰冻保存。

7.结果计算 c = Χ C O 式中:c —— 测定样本总蛋白浓度,g/L ;A 测定—— 样本管吸光度;A 标准—— 标准管吸光度;C O —— 校准血清总蛋白浓度,g/L ;8.操作性能1 精密度:批内CV ≤ 3.0%,批间CV ≤ 4.5%。

2 准确度:以参考方法定值的血清作为校准品时,本法测定结果与参考方法基本一致。

3 灵敏度:白蛋白浓度为:浓度为70g/L 时,吸光度为>0.09A 。

试剂空白吸光度:试剂以水为空白在37℃±1℃,吸光度<0.3A 。

4 可报告范围:血清与试剂用量之比为1:50时,测定上限为120g/L 。

牛血清白蛋白的提取与鉴定

牛血清白蛋白的提取与鉴定

牛血清白蛋白的提取与鉴定一、实验目的1. 掌握牛血清白蛋白的提取与鉴定方法2.掌握盐析法、透析法及电泳法二、实验原理牛血清白蛋白是牛血清中的简单蛋白,是血液的主要成分(38g/100ml),分子量68kD。

等电点4.8。

应用相同浓度硫酸铵盐析法将血清中白蛋白与其它球蛋白分离,最后用透析法除盐,即可提取白蛋白。

再利用电泳过程中带电粒子的移动速度与粒子荷电量、电场强度、粒子重量与半径及介质的黏稠度等有关,对牛血清白蛋白进行分离与鉴定。

三、操作步骤(一)盐析取离心管一支加入牛血清2mL、加入等量PBS(磷酸盐缓冲生理盐水)稀释血清,摇匀后,逐滴加入pH7.2饱和硫酸铵溶液2mL,边加边摇,充分混匀,然后静止放臵10分钟,再离心(2000r/min)10min,将上清液倾入试管中。

(二)透析(1 )取干净的比色板,在各孔内滴加一滴纳氏试剂(2)透析袋未放入水中时,立即取水中液体检查有无NH4+(3)取玻璃纸一张,折成袋形,将离心后的上清液倒入袋内,用线扎紧上口(注意要留有空隙),用玻璃棒悬在盛有半杯蒸馏水的100mL烧杯内,使透析袋下半部侵入水中,对蛋白液进行透析,常用玻璃棒搅拌袋外(烧杯中)液体,以缩短透析时间。

(4)每隔2分钟检查一次,更换蒸馏水多次,用纳氏试剂检查袋外液体的NH4+,观察颜色变化并记录,直至袋内盐分透析完毕。

(5)将袋内液体倾入试管,即得牛血清白蛋白溶液。

(三)电泳(1)点样取一张膜条,将薄膜无光泽面向下,放入培养皿中的巴比妥缓冲液中使膜条充分浸透,取出,用干净滤纸吸去多余的缓冲液,以薄膜的无光泽面距一端1.5㎝处作点样线,将牛血清样品与待测的牛血清白蛋白溶液分别用点样器在同一张薄膜的点样线处不同位置点样。

标准液点一次,待测液点三次。

(2)电泳将点样后的膜条臵于电泳槽架上,放臵时膜条无光泽面向下,点样端臵于阴极,待平衡5min后,打开电源,调节电泳仪的电压为160伏,通电60min,关闭电源后用镊子将膜条取出。

血清前白蛋白测定标准规程(知识资料)

血清前白蛋白测定标准规程(知识资料)

血清前白蛋白测定标准操作规程1 检验申请单独检验项目申请:血清前白蛋白(缩写PAB)测定,组合项目申请:血生化中肝功能项目测定。

临床医生根据需要提出检验申请。

2 标本采集与处理2.1标本采集2.1.1常规静脉采血约2 ml,不抗凝,置普通试管中。

或采用含分离胶的真空采血管。

检查体液乳酸脱氢酶的体液标本应用肝素抗凝。

2.1.2检验申请单和血标本试管标上统一且唯一的标识符。

2.1.3急诊标本采集后,在检验申请单上填写标本采集时间。

2.1.4标本采集后与检验申请单一起及时运送至检验科。

专人负责标本的接收并记录标本的状态,对不合格标本予以拒收。

2.1.5下列标本为不合格标本2.1.5.1标本量不足:少于0.3ml的全血标本,或少于0.1ml的血清或血浆。

2.1.5.2对反应吸光度有干扰的标本,包括严重溶血、严重浑浊的标本。

2.1.5.3无法确认标本与申请单对应关系的。

2.1.5.4其他如标识涂改、标本试管破裂等。

2.2标本保存2.2.1接收标本后在30min内将标本离心分离出血清。

2.2.2标本保存时间:室温(15~25℃)下可稳定8h,普通冰箱中(2~8℃)稳定24h。

-20℃保存稳定30天。

为避免标本中水分挥发使血清浓缩,对保存时间超过1天的标本均加塞密闭或覆盖湿巾。

2.2.3已完成测试的标本保持完整的识别号,置4~8℃冰箱内保存7天。

2.3标本采集的注意事项2.3.1采血前使受检者保持平静、松弛、避免剧烈活动,24h不饮酒和12h以上禁食空腹状态。

2.3.2注意有无应用影响测试项目的药物。

2.3.3可以使用肝素抗凝的血液标本。

3 方法原理人血清PA与其相应抗体在液相中相遇,立即形成抗原-抗体复合物,并形成一定浊度。

该浊度的高低在一定量抗体存在时与抗原的含量成正比。

通过与同样处理的校准比较,计算未知样品的PA含量4 试剂及其他用品4.1试剂:前白蛋白试剂盒,由北京利德曼生化技术有限公司出品。

4.2试剂盒保存:未开瓶的试剂储存在2~8℃可稳定至有效期。

白蛋白检测操作程序

白蛋白检测操作程序

白蛋白检测操作程序白蛋白(albumin ,ALB )是一种仅含有氨基酸的单纯蛋白质,在血浆中发挥多种生理功能。

溶于水和中性盐,易与阴离子染料结合,故本试验采用溴甲酚绿(阴离子染料)法测定,在反应中加入丁二酸缓冲液能够避免溶液混浊,降低空白吸光度。

主要用于肝、肾等疾病的诊断。

实验原理在pH4.2条件下,白蛋白与溴甲酚绿结合形成蓝绿色结合物,蓝绿色结合物与样本中白蛋白浓度成正比,在630nm 处测定吸光度值,即可求得样本中白蛋白的浓度。

试剂与仪器1. 试剂1.1. 白蛋白试剂盒(由上海复兴长征医学科学有限公司提供)化学组成:溴甲酚绿0.35mmol/L 丁二酸缓冲液50mmol/L工作参数:在开展项目之前或更换试剂品牌时,将以上工作参数输入到仪器内,并按要求进行调整后,方可进行实验。

技术性能指标:试剂空白起始吸光度(630nm37℃)≤0.20A 。

线性范围:50g/L ±10%。

准确度:相对偏差(RE%)≤±10%。

精密度:批内精密度变异系数(CV%)≤5%;批间精密度相对极差(%)≤5%。

储存条件、有效期:储存于2~25℃,避光可稳定18个月。

以蒸馏水为空白在630nm 处光吸收值高于0.3A时,则不能使用。

计算公式: 白蛋白深度(g/L )= ×校准液浓度(g/L )样品管吸光度校准管吸光度以上是依据化学实验计算测试结果的公式,全自动分析时将校准液浓度值(Conc值)输入仪器即可。

1.2. 英国郎道(RANDOX)质控品,每次采用正常和异常两个水平,并参照质控品测试要求进行。

1.3. 校准液2. 仪器采用日立(HITACHI)7060型全自动生化分析仪。

选择波长340-800nm之间,能对终点、速率、两点、免疫比浊等方法的实验进行测定。

标本测定程序1. 开机:开机前要加清洗液、上打印纸、接蒸馏水等。

然后打开电源及中文计算机信息管理系统。

2. 试剂准备:开机后将所需试剂置于试剂盘相应位置。

血清白蛋白ALB溴甲酚绿BCG法测定

血清白蛋白ALB溴甲酚绿BCG法测定

血清白蛋白ALB溴甲酚绿BCG法测定1.实验原理在pH值4.2时,白蛋白和溴甲酚绿染料结合产生蓝绿色复合物,在630nm处比色,颜色的深度与白蛋白浓度成正比。

pH4.2白蛋白+溴甲酚绿------------ 绿色化合物2.标本米集2.1病人准备:无特殊要求。

最好用禁食的标本以减少乳糜血的干扰。

2.2类型:血清、肝素或EDTA血浆。

3.标本存放留取标本后请尽快分离血清/血浆。

在室温条件下(15〜25 C )可以稳定一周,在冰箱保存的条件下(2〜8 C)稳定一个月,-20 C保存至少可以稳定3个月。

4.标本运输室温条件下运输5.标本拒收标准:细菌污染的不能做测定。

6.实验材料:6.1上海奥林巴斯白蛋白测定试剂盒6.1.1试剂准备:试剂为即用式。

6.1.2试剂稳定性与贮存:试剂避光保存于2〜25 C ,若无污染,可稳定至失效期。

试剂有效期为24个月。

试剂不可冰冻。

开盖后应避免污染。

6.1.3 变质指示:当试剂有浊度时,表明有细菌污染,不能继续使用6.1.4 注意事项:避免试剂与皮肤及粘膜接触。

6.2校准品:参见生化检验校准品和质控品.SOP文件6.3质控品:参见生化检验校准品和质控品.SOP文件7.仪器:奥林巴斯AU2700生化分析仪8.操作步骤8.1项目基本参数:参见生化检验奥林巴斯AU2700生化分析仪项目测定参数.SOP文件8.2仪器操作步骤:参见生化检验奥林巴斯AU2700生化分析仪操作规程.SOP文件9.检验结果的判断与分析10.质量控制:在每一批标本中都应把非定值血清水平I 与II质控做为未知标本进行分析,以2S为质控警告限,3S为失控限,绘制质控图,判断是否在控。

质控规则参见生化室室内质控操作规程.SOP文件。

11.计算方法:以TruCal U 复合校准品白蛋白校准值或标准品标准值校准仪器后,在病人结果可报告范围内,仪器直接报告可靠的检测结果。

手工测定计算方法为:Au白蛋白(g/L)= x校准液浓度As12.参考值范围成人35〜52g/L参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差别。

蛋白质含量测定法(BCA法)标准操作规程SOP

蛋白质含量测定法(BCA法)标准操作规程SOP

蛋白质含量测定法(BCA法)标准操作规程SOP蛋白质含量测定法(BCA法)标准操作规程文件编码:SOPXXXX目录1. 目的 (1)2. 范围 (1)3. 职责 (1)4. 依据 (1)5. 定义 (1)6. 内容 (1)6.1. 原理 (1)6.2. 实验材料 (1)6.3. 操作步骤 (2)6.4. 结果计算 (3)6.5. 判定标准 (4)6.6. 注意事项 (4)7. 相关文件 (5)8. 附件 (5)9. 变更历史 (5)1.目的1.1.规范蛋白质含量检测(BCA法)的操作过程。

2.范围2.1.本规程适用于BF02及其它适合于BCA法的样品(原液或成品)的蛋白质含量测定。

3.职责3.1.方法学研究员负责严格执行本规程规定;3.2.方法学研究室负责人负责本规程的培训并监督本规程的执行。

4.依据4.1.《中国药典》2015年版,通则0731“蛋白质含量测定法”,第四法2,2,-联喹啉-4,4,-二羧酸法(BCA法)5.定义5.1.BCA:2,2,-联喹啉-4,4,-二羧酸法5.2.BSA:牛血清白蛋白5.3.TCA:三氯乙酸5.4.EDTA:乙二胺四乙酸5.5.EGTA:乙二醇-双-(2-氨基乙醚)四乙酸5.6.DTT:二硫苏糖醇6.内容6.1.原理依据蛋白分子在碱性溶液中将Cu2+还原为Cu+,2,2,-联喹啉-4,4,-二羧酸(BCA)与Cu+结合形成紫色复合物,该复合物在562nm处有最大吸收值。

在一定浓度范围内,其溶液颜色深浅与蛋白质浓度呈正比,以蛋白质对照品溶液(BSA)作标准曲线,采用比色法测定供试品中蛋白质的含量。

6.2.实验材料6.2.1. 试药与试液6.2.1.1. 超纯水:电阻率不低于18.2MΩ·cm ,本方法所有试液均用超纯水配制。

6.2.1.2. 铜-BCA 试液:取2, 2'-联喹啉-4,4'-二羧酸钠l.0g ,无水碳酸钠2.0g ,酒石酸钠0. 16g ,氢氧化钠0. 4 g 与碳酸氢钠0.95g ,加水使溶解成100ml ,调节pH 值至11.25,作为甲液,甲液室温保存不超过6个月;另取4 % 硫酸铜溶液作为乙液,乙液室温保存不超过6个月,临用前取甲液、乙液,按体积比(甲液:乙液=50:1)进行混匀后使用。

白蛋白检测作业指导书

白蛋白检测作业指导书

白蛋白检测作业指导书
1 检验目的
规范白蛋白(ALB)检测试验,确保检测结果准确性和重复性。

2 测定方法
溴甲酚绿法。

3 检测原理
白蛋白在PH4.2的缓冲液中带正电荷,在有非离子型表面活性剂存在时,可与带负电荷的染料溴甲酚绿(BCG)结合形成蓝绿色复合物,在波长630nm处有吸收峰,其颜色深浅与白蛋白浓度成正比例。

4 样本
血清、肝素或EDTA抗凝血浆,处理方法见生化标本采集程序。

稳定性:2~8℃稳定6天
5 仪器和试剂
5.1 仪器:美国贝克曼-库尔特DXC800、AU5811全自动生化仪、迈瑞BS800M生化分析仪。

5.2 试剂:由武汉元景商贸公司提供原装贝克曼-库尔特试剂及迈瑞公司提供的生化试剂(详见试剂说明书),超过失效期的试剂不能使用。

血清前白蛋白测定检验程序(new)

血清前白蛋白测定检验程序(new)
16.4 在仪器运转过程中,勿触及样品针、移动的传输装臵等,避免造成人身 伤害。禁止触摸分析仪的电路板。触摸电路是危险的,可能造成电击,尤其用湿 手触摸时。
16.5 血液标本在离心过程中,应将所有标本加盖。离心后,开启试管盖时应 防止气雾胶污染环境。
16.6 与血液标本接触的一切器皿、仪器组装/拆卸组合零件都应视为污染源, 因此操作人员应采取必要的保护性措施如穿戴保护性外套、手套等。不小心接触 了这种污染源时,应立即用清水冲洗被污染区域并用0.2%过氧乙酸溶液或75%酒精 溶液进行消毒处理。
16 安全性预警措施
16.1 实验室及工作人员一般安全防护措施见《实验室安全管理程序》(PLA301LJK-CX-030)。
16.2 血液标本溢出后,由工作人员立即用0.2%过氧乙酸溶液或75%酒精溶液 对污染的环境进行消毒。
16.3 如果操作人员的皮肤或衣物上沾到了血液、废液或试剂,应立即用0.2% 过氧乙酸溶液或75%酒精溶液消毒处理,再用肥皂水、清水进行冲洗。如果眼睛被 溅入血液、废液或试剂,用大量的清水冲洗并采取必要的医疗措施。
16.7 对突发传染性疾病的血液标本的防护应启动特殊的安全防护程序。
17 变异的潜在来源
标本、反应液中的颗粒微粒、微小团块可影响结果分析。
18 报告时间
免疫学前白蛋白检测8小时出结果。
19 参考文献
①叶应妩, 王毓三主编. 全国临床检验操作规程. 中华人民共和国卫生部医政 司. 南京. 第二版. 1997。
9.2 室间质控措施 每年参加卫生部临床检验中心的室间质量控制。
10 干扰因素
严重溶血或脂血的标本会影响测定,使结果不稳定导致结果测不出来。 反应溶液中的灰尘颗粒或其他颗粒物质,会造成非特异性的散射信号,从而 影响样本分析结果的准确。

白蛋白测定标准操作程序

白蛋白测定标准操作程序

白蛋白测定标准操作程序1. 摘要白蛋白试剂盒适用于体外临床检验,用于测定人血清中白蛋白的含量。

2. 适用范围程序适用于日立7600自动生化分析仪检测血清、血浆中白蛋白的浓度。

3. 职责使用日立7600自动生化分析仪进行测定白蛋白浓度的工作人员要严格按照本SOP 程序进行,室负责人监督管理;本SOP 的改动,可由任一使用本SOP 的工作人员提出,并报经生化室负责人、科主任签字批准生效。

4. 检测方法上海科华生物工程股份有限公司生产的白蛋白试剂盒采用的是溴甲酚绿法。

5. 原理在PH4.2环境中,在有非离子型表面活性剂Brij-35存在同时,血清中的白蛋白可以与溴甲酚绿形成蓝绿色复合物,并且引起630nm 处吸光度的上升。

由于反应所产生的化合物在波长630nm 处有吸收峰,所以在一定底物浓度范围内, 630nm 处吸光度的变化值与样本中白蛋白的含量成正比。

白蛋白溴甲酚绿复合物)溴甲酚绿(白蛋白−−−−→−+35-rij 2.4p B H BCG6. 仪器日立7600自动生化分析仪7. 试剂7.1 试剂来源:上海科华生物工程股份有限公司提供7.2 试剂瓶内主要成分:溴甲酚绿、Brij-35、丁二酸7.3 试剂稳定性:试剂避光保存于2-8℃,若无污染,可稳定至失效期,本试剂有效期为12个月。

试剂不可冰冻。

7.4 试剂准备:试剂为即用式。

8. 标准品和质量控制8.1 校准程序:使用某某公司提供的标准品对自动分析仪进行校准。

按照公司标准品使用要求,并以9g/L 氯化钠溶液或去离子水为空白,经校准测定,仪器自动对标准品响应量通过合适的数学模型绘制校准曲线。

8.2 质控品某某公司提供的生化复合定值质控血清做为室内质控品。

每日在测定前做一 次质控。

该质控品为干粉包装,在2-8℃冰箱可稳定到失效期,使用前用5ml 去离子水复溶,待质控物充分溶解(大约30分钟)后使用。

8.3质控数据管理:按程序对检验后的质控后结果进行转换,及时质控数据进行分析处理,如出现失控值,应及时分析失控原因,并填写好相关失控记录。

中国药典牛血清白蛋白残留量实验流程

中国药典牛血清白蛋白残留量实验流程

中国药典牛血清白蛋白残留量实验流程下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成,希望大家下载以后,能够帮助大家解决实际的问题。

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白蛋白项目SOP

白蛋白项目SOP

白蛋白项目SOP1. 检测目的在罗氏cobas c701生化分析仪上定量检测人血清的白蛋白,确保检测结果的准确性及重复性。

2. 检测方法溴甲酚绿比色法法3. 检测原理pH 4.1白蛋白BCG复合物白蛋白+BCG当pH值达到4.1时白蛋白充分显示出阳离子特征,能与阴离子染料溴甲酚绿(BCG)相结合,形成蓝绿色复合物。

蓝绿色的颜色强度与白蛋白浓度成正比,可使用光度计来判定。

4. 样本要求4.1抽取患者静脉血3-5ml,加入一次性含分离胶的试管内,试管粘贴标注患者姓名、科别、床号等信息的条形码并送检。

4.2 标本采血后尽快送检,送检后放入离心机,离心转速3500转/分离心10分钟,或参阅cobas 前处理标准操作程序,分离出血清准备检测。

如因仪器或其它原因不能及时检测标本,可将标本置于2-8℃冰箱暂存,并尽快检测标本。

5. 仪器:罗氏cobas c701生化分析仪6.试剂:罗氏原装配套试剂,试剂无需任何处理,可直接使用6.1 试剂成分:R1:枸橼酸盐缓冲剂:95mmol/l,pH 4.1;防腐剂R3:枸橼酸盐缓冲剂:95mmol/l,pH 4.1;溴甲酚绿:0.66mmol/l;防腐剂6.2试剂存储及稳定ALB: 15-25°C下保存期限:见cobas c pack标签上的有效期机上稳定期:4周Nacl 稀释液9%:2-8°C下保存期限: 见cobas c pack标签上的有效期机上稳定期: 4周7. 校准程序7.1 校准材料:S1:H20,S2:C.f.a.s(罗氏多项生化校准品)7.2 校准模式:线性7.3 校准方法:2点校准7.4 校准频率:-试剂批次改变之后-如有需要,遵循质控步骤8. 质量控制程序8.1 质控材料:PRECINORM U (罗氏通用正常值质控品,复溶后使用);PRECIPATH U (罗氏通用病理值质控品,复溶后使用)8.2 质控周期:每工作日一次,于每日标本检测前进行。

白蛋白检测标准操作规程

白蛋白检测标准操作规程
8.校准程序
8.1校准品来源
美康生物
8.2校准品名称
多项生化校准品
8.3校准品规格:
1×5ml
8.4用途
校准品与宁波美康生物科技有限公司生产的白蛋白检测试剂盒及全自动生化分析仪配套使用,用于上述检测系统进行项目的校准。
8.5主要组成成分
校准品组成成分为非人源性。
校准品中白蛋白的活性成分浓度具有批特异性,准确浓度见随附的数值表或说明书反面。
6.检测仪器
日立7180全自动生化分析仪,使用具体要求和校准程序详见《仪器操作规程》。
7.试剂
7.1试剂品牌
美康生物
7.2包装规成分
试剂
成分
终浓度
试剂
琥珀酸缓冲液
0.05mol/L
聚氧乙烯(23)十二烷基醚
2.4g/L
溴甲酚绿
1.8×10-4mol/L
不同批次的试剂不推荐混合使用
8.8校准周期
按照生化分析仪操作手册中的校准程序进行校准。至少每两周校准1次。
当发生以下情况时建议重新校准:变更试剂批号;质控值发生显著偏移;生化分析仪进行了较大维护。
9.质量控制程序
9.1质控品来源
BACKMAN质控品,上海市临检中心提供
9.2质控品浓度
低/中/高三个浓度
9.3储存条件
-20℃冷冻保存
4.2恶性肿瘤、重症结核、营养不良、急性大失血、严重烫伤、肝脏合成功能障碍、胸腹水、肾病、怀孕后期等
5.标本采集及干扰因素
5.1标本要求
空腹不抗凝静脉血2~3ml。
5.2标本保存
室温保存,及时送检。血清在2-8℃储存可稳定6d,-20℃冰冻保存可稳定3个月。
5.3注意事项
推荐选用血清。因为采用肝素抗凝血浆可能使溴甲酚绿染料结合法测得的ALB值偏高。推荐早晨空腹采血。标本应避免溶血、脂血、黄疸。

人血白蛋白的检验流程

人血白蛋白的检验流程

人血白蛋白的检验流程下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成,希望大家下载以后,能够帮助大家解决实际的问题。

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血清白蛋白测定方法

血清白蛋白测定方法

血清白蛋白测定方法
白蛋白在血液里挺重要的,就像咱们身体里的“小助手”。

想知道白蛋白有多少,就得测一测。

有个简单的方法,就是看颜色。

用专门的试剂跟血液混一混,如果颜色变深了,那就说明白蛋白多了。

这种方法挺直观的,就是得靠眼睛估摸,可能不太准。

还有种方法更高级点,就是用抗体去找白蛋白。

抗体就像个“猎人”,专门找白蛋白这个“猎物”。

找到了就做个标记,然后数数有多少个标记,就知道白蛋白有多少了。

这种方法比较准,但得在实验室里弄。

还有一种方法是看白蛋白在电场里怎么跑。

给血液通个电,白蛋白就会跟着电流跑。

跑得快还是慢,就能看出白蛋白有多少。

这个方法就像看比赛,看哪个跑得快,就知道谁赢了。

不管哪种方法,都是为了知道白蛋白多不多,是不是在正常范围内。

这样医生就知道咱们的身体情况了,该怎么调理就心里有数了。

血清白蛋白的分离与纯化、蛋白定量测定

血清白蛋白的分离与纯化、蛋白定量测定
血清白蛋白的分离与纯化、 蛋白定量测定
实验ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ的

掌握DEAE纤维素层析法分离纯化蛋白的方 法

掌握考马斯亮兰法测定蛋白质的原理
DEAE纤维素层析法分离纯化 白蛋白
离子交换层析基本原理

根据待分离物质带电性质不同的分离纯化 方法 以离子交换剂为固定相,特定的离子溶液 为流动相,依据各种离子或离子化合物与 离子交换剂的结合力不同进行分离纯化的 层析方式

β-球蛋白 γ-球蛋白
5.06
5.12 6.85-7.50
300000
9000-150000 156000-300000
实验原理

除去硫酸铵后的白蛋白在0.02mol/L醋酸铵缓冲液(pH 6.5)条件下,加 到DEAE纤维素柱上,此pH时, DEAE纤维素带正电荷。 改用0.06mol/L醋酸铵缓冲液(pH 6.5)后。在此pH与离子强度时, DEAE-纤维素带有正电荷,能吸附带负电荷的蛋白质如白蛋白(pI 4.9)。 带正电荷蛋白质如γ-球蛋白(pI约7.3),不被吸附故直接流出。用 0.06mol/L醋酸铵缓冲液洗脱吸附在离子交换柱上的少量β-球蛋白及α-球 蛋白。 将醋酸铵浓度提高至0.3mol/L,白蛋白被洗脱下来(尚混有少量α-球蛋 白)。 整个层析过程用紫外检测仪监测流出蛋白组分,用自动部分收集器收集, 用记录仪记录整个洗脱过程。
1标准方法1具体测定按下表操作待测样品的加样量见下表的第8910管加入物ml001002004006008010002004006蒸馏水01009008006004002008006004考马斯亮蓝试剂50505050505050505050边加边混匀23分钟后以1号管为空白对照测定各样品在595nm处的光吸收值a595最好在试剂加入后的520min内测定吸光值因为这段时间内颜色最稳定测定中蛋白染料复合物会有少部分吸附在比色杯壁中不可使用石英比色皿因不易洗去染色可用塑料或用玻璃比色皿使用后用95的乙醇荡洗以洗去染色

检验科生化白蛋白测定的标准程序

检验科生化白蛋白测定的标准程序

白蛋白测定的标准程序【目的】体外检测血清白蛋白(ALB )的含量。

【职责】1.实验室工作人员均应熟知并严格遵守本SOP,室负责人监督落实。

2.本SOP的改动,可由任一使用本SOP的工作人员提出,并报经下述人员批准签字:室负责人、科主任。

【标本类型及实验前准备】1.受检者的准备病人空腹12h,不饮酒24h后采集血样。

体检对象抽血前应有两周的的正常状况。

孕妇应在产后或终止哺乳3个月后检验。

此外,有无服用影响的药物以及采血的季节都应做相关记录。

2.静脉采血除非是卧床的病人,一般在采血时取坐位。

体位影响水分在血管内外的分布,会影响测试项目的浓度。

在采血前至少应静坐5分钟,一般从肘静脉取血,使用止血带的时间不超过1分钟,穿刺成功后立即松开止血带。

【仪器设备】东芝TBA-FX8全自动生化分析仪,低速离心机一、检测原理本试剂采用澳甲酚绿染料结合法,即在PH4.2条件下,白蛋白与澳甲酚绿结合形成蓝绿色络合物。

反应形成的蓝绿色络合物与样本中白蛋白浓度成正比。

通过在630nm处测定吸光度值的变化值,即可测得样本中白蛋白的浓度。

二、试剂1.试剂本科使用上海复星长征医学科学有限公司ALB试剂盒,为液体单试剂,其各组分如下:试剂组分澳甲酚绿0.35 mmol/L丁二酸缓冲液50 mmol/L2.校准要求2.1校准品:使用与试剂配套使用的复星长征临床化学校准血清(货号:449 5 0/4 5 9 5 0对测定进行校准。

2. 2校准间隔2. 2. 1试剂批号变更时使用与试剂配套使用的复星长征临床化学校准血清对测定进行校准后再对临床病人样本进行测定。

2. 2. 2室内质量控制出现问题时使用与试剂配套使用的复星长征临床化学校准血清对测定进行校准并确认问题得到解决后方可对临床病人样本进行测定。

三、操作按生化分析仪操作要求结合长征试剂说明书输入测定参数,并按校准、质量控制、样本测定的顺序进行常规测定。

四、计算白蛋白浓度(g/L ) 五、质控程序1. 建议采用朗道水平2(正常范围质控)和 水平3 (病理范围质控)两个水平的血清进行室内质控。

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血清白蛋白测定标准操作规程
1 检验申请
单独检验项目申请:血清白蛋白测定(缩写ALB);组合项目申请:血生化中肝功能测定项目组合。

临床医生根据需要提出检验申请。

2 标本采集与处理
2、1标本采集
2、1、1常规静脉采血约2ml,不抗凝,置普通试管中。

或采用含分离胶得真空采血管.
2、1、2检验申请单与血标本试管标上统一且唯一得标识符。

2、1、3急诊标本采集后,在检验申请单上填写标本采集时间。

2、1、4标本采集后与检验申请单一起及时运送至检验科。

专人负责标本得接收并记录标本得状态,对不合格标本予以拒收。

2、1、5下列标本为不合格标本
2、1、5、1标本量不足:少于0、3ml得全血标本,或少于0、1ml得血清或血浆。

2、1、5、2对反应吸光度有干扰得标本,包括严重溶血、严重浑浊得标本。

2、1、5、3无法确认标本与申请单对应关系得。

2、1、5、4其她如标识涂改、标本试管破裂等。

2、2标本保存
2、2、1接收标本后在30min内将标本离心分离出血清。

2、2、2标本保存时间:室温(15~25℃)下可稳定一周,普通冰箱中(2~8℃)稳定一个月。

为避免标本中水分挥发使血清浓缩,对保存时间超过1天得标本均加塞密闭或覆盖湿巾。

2、2、3已完成测试得标本保持完整得识别号,置4~8℃冰箱内保存7天。

2、3标本采集得注意事项
2、3、1采血前使受检者保持平静、松弛与空腹状态。

2、3、2不建议采集抗凝血标本,如果必须使用血浆,推荐得抗凝剂就是肝素。

3 方法原理
血清中得白蛋白与溴甲酚绿在PH=4、2得条件下结合生成绿色复合物,溶液由黄色变为绿色,其颜色深浅与白蛋白浓度成正比,通过在630nm处测定其吸光度可得出白蛋白得含量。

PH=4、2
白蛋白 + 溴甲酚绿-—---——-------- 绿色复合物
4试剂及其她用品
4、1试剂:溴甲酚绿法测定白蛋白试剂盒,由北京利德曼生化技术有限公司出品. 4、2试剂盒保存:保存于2~8℃,不开盖情况下至标签得失效期.开盖后放于仪器得冰箱中至少稳定14天。

开盖后避免污染。

变质指示:当试剂有浊度时,表明有细菌污染,不能继续使用。

4、3试剂盒准备:液态单试剂型,即开即用,无特殊准备
4、4试剂盒主要成分:缓冲液(pH 4、2)50 mmol/L,溴甲酚绿0、25 mmol/L,其中含有稳定剂与保护剂〈0、1%.
5 校准品与校准模式
5、1校准品: Beckman—Coulter SYNCHRON LX MULTI 校准液(P/N 442600),其白蛋白浓度值可溯源至美国国家标准技术研究所(NIST)标准参考材料。

5、2校准类型与校准点数目:线性模式,1个校准点。

5、3校准周期:校准间隔时间不限。

但在:①更换试剂批号或出现质控漂移时;②仪器进行全面保养后;③仪器得重要零件更换后;均须进行一次校准。

5、4校准液重建方法:Beckman-Coulter SYNCHRON LX MULTI 校准液即开即用,无需特殊准备.
6 质控品与室内质控规则
6、1质控品采用由Beckman-Coulter公司提供得两个不同水平未定值质控血清.
6、2质控液重建方法:液态质控血清,即开即用,无需特殊准备。

6、3质控品测定:在每一批标本中测定两个水平质控血清各一次。

6、4质控规则:采用Westgard多规则质控规则,由计算机程序进行检索与判断。

7 适用仪器
适用AEROSET与C16000全自动生化分析仪器.
8 标本检测步骤:装载试剂→进行校准→进行质控→输入标本检测项目→加载标本→标本测定→结果复核→报告。

9主要分析参数
参见说明书.
10结果计算
计算公式:白蛋白浓度(g/L)=
仪器根据此公式自动给出每个标本测定结果。

11 检验结果得报告及范围
11、1结果得报告
11、1、1结果经审核确认准确无误后发出报告。

11、1、2报告单上标明结果得计量单位、参考区间、报告日期、时间、操作者与审核者签名,并有与申请单相同得医学信息。

11、1、3如收到标本得质量可能对测定结果有影响得也在报告单上指出。

11、2报告范围:10~60g/L,超过此范围得结果报告时必须附有证明该结果准确可靠得文字说明,例如:系根据标本稀释后重复测定得结果。

12 操作性能
12、1精密度:批内CV为<3、0%,总CV<3、0%。

12、2线性范围:10~60g/L。

12、3方法得有限性及干扰因素:甘油三酯达11、3mmol/L时影响小于10%,血红蛋白达4、5g/L时影响小于10%,胆红素达684umol/L时影响小于2%。

13 参考范围及医学决定水平
参考范围:40~55 g/L.
医学决定水平:
20 g/L:低于此值,肝病患者提示严重预后不良。

还应测定尿蛋白,以查明有无过多得蛋白丢失。

35g/L:此亦为参考值下限,凡低于此值时,各种引起白蛋白降低得因素均应列入考虑范围,如肾病、肝功不全、严重得营养不良、急、慢性炎症、恶性肿瘤等。

55g/L:在此值以上得,应考虑脱水得可能性,并进行红细胞比积测定,以检查其就是否增高.
14 临床意义
14、1血浆白蛋白得生理功能很多,包括营养、维持渗透压、就是血管内多种物质得运输载体等。

白蛋白在肝脏中合成,就是监测肝脏疾病得一个重要指标。

14、2肝脏疾病使白蛋白得合成减少表现为血清白蛋白降低浓度,并与肝脏病变得严重程度成比例,白蛋白就是对肝功能作分级得评价指标之一。

14、3血清白蛋白降低还见于严重得吸收不良、肠梗阻、风湿热、恶病质、以及多种全身性疾病。

14、4当有蛋白质丢失过多得情况,如大面积烧伤、肾病综合征、慢性肾炎、糖尿病、慢性肠炎、肿瘤、充血性心力衰竭等,血清白蛋白也常降低。

14、5血清白蛋白增高得情况较少见,高白蛋白血症偶见于脱水所致得血液浓缩.
15 结果审核以及分析与相关项目得联系
15、1由资深专业人员负责检验结果得审核。

15、2认真审核每一个测定结果,审核者对发出报告结果得准确性与可靠性负责,并在
报告单得审核者处签名。

15、3相关项目:审核与总蛋白、血清蛋白电泳、丙氨酸氨基转移酶等得关系,如出现与临床不符甚至相悖得情况,应分析与查找原因。

16威胁生命得“紧急值”及报告规定
(本项不作规定)
17 有关引用程序与文件
17、1Abbott自动生化分析仪仪器标准操作规程。

17、2生化检验室内质控标准操作程序。

17、3检验结果审核程序。

17、4标本送检与接收程序.
18参考文献
18、1陆永绥,张伟民主编、临床检验管理与技术规程、杭州:浙江大学出版社,2004、
18、2北京利德曼生化技术有限公司白蛋白测定试剂盒说明书。

行业标准WS/T404、2—2012。

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