组织免疫共沉淀方法(试题学习)
临床医学检验临床免疫技术：沉淀反应测试题(题库版)
临床医学检验临床免疫技术：沉淀反应测试题（题库版）1、单选在琼脂板上打两排孔，左侧孔加入待测抗原，右侧孔加入已知抗体,抗原在阴极，抗体在阳极。
通电后，抗原泳向阳极，抗体流向阴极，观察在两者之间或抗体侧形成沉淀线。
本试（江南博哥）验采用的是OA.免疫电泳B.免疫固定电泳C.蛋白电泳D.火箭电泳E.对流免疫电泳正确答案：E参考解析：对流免疫电泳原理是将双向扩散试验与电泳相结合的定向加速免疫扩散技术。
2、单选不是免疫比浊试验中伪浊度形成的原因（）A.高血脂标本B.标本反复冻融C高效价抗体（＞1：200）D低效价抗体（＜1：20）E.试剂污染正确答案：C3、单选沉淀反应的钩状效应现象指的是OA.抗原过量B.抗体过量C.沉淀物显著D.凝集明显E.抗原和抗体的比例正确答案：A4、单选对流免疫电泳中，抗体向阴极移动原因是OA.抗体带正电B.抗体带负电C.电渗作用D.电泳作用E.抗原带正电正确答案：C参考解析：对流免疫电泳的原理是将双向扩散试验与电泳相结合的定向加速的免疫扩散技术。
通电后，在pH8.4缓冲液中带负电荷的蛋白质抗原流向阳极抗体侧，而抗体借电渗作用流向阴极侧，在两者之间或抗体侧形成沉淀线。
5、单选下列有关沉淀反应第二阶段的说法，错误的是OA.形成可见的免疫复合物B.出现肉眼可见的沉淀线或沉淀环C.可用散射比浊测定反直结果D.几秒钟至几分钟内即完成E.可用透射比浊测定反应结果正确答案：D6、单选环状沉淀试验中要求OA.抗原澄清B.抗体澄清C.抗原和抗体都必须澄清D.对抗原和抗体没有特别要求E.抗原比重大于抗血清正确答案：C参考解析：环状沉淀试验：在一定内径(1.5→.Omm)的玻璃管中先加入抗血清，再沿管壁加入抗原溶液，因抗血清比重大于抗原，故在两者交界处形成清晰界面，此处抗原抗体生成物在一定时间内形成白色环为阳性。
要求：抗原抗体溶液澄清。
适用于微量抗原测定。
考点：环状沉淀试验7、单选下列关于光学检测原理的叙述何者正确OA.荧光检测时，激发光与发射光处于同一直线上B.反射比色检测时，入射光与反射光处于同一直线上C.透射比浊检测时，入射光与透射光处于同一直线上D.散射比浊检测时，入射光与散射光处于同一直线上E.磷光计检测时，入射光与发射光处于同一直线上正确答案：C参考解析：透射比浊法的基本原理是测定一定体积的溶液通过的光线量，当光线通过时，由于溶液中存在的抗原抗体复合物粒子对光线的反射和吸收，引起透射光的减少，测定的光通量和抗原抗体复合物的量成反比。
临床免疫学和免疫检验沉淀反应反应练习题
临床免疫学和免疫检验沉淀反应反应练习题一、A11、免疫比浊实验属于A、中和反应B、凝集反应C、沉淀反应D、补体结合反应E、溶血反应2、对流免疫电泳的原理是A、单向免疫扩散与电泳相结合的定向加速的免疫扩散技术B、双向免疫扩散与电泳相结合的定向加速的免疫扩散技术C、单向免疫扩散与两相反向的规律改变的电流相结合的免疫扩散技术D、双向免疫扩散与两相反向的规律改变的电流相结合的免疫扩散技术E、抗原抗体反应与电泳相结合的定向免疫扩散技术的统称3、免疫固定电泳的英文缩写是A、ECLB、RIEC、RIAD、IFEE、IEP4、能够定量测定待检标本的免疫学试验是A、间接凝集试验B、协同凝集试验C、单向扩散试验D、双向扩散试验E、对流免疫电泳5、免疫比浊法对抗体的要求不正确的是A、特异性强B、效价高C、亲和力强D、使用H型抗体E、使用R型抗体6、免疫比浊法的基本原则是A、反应体系中保持抗原过量B、反应体系中保持抗体过量C、反应体系中保持抗原抗体为最适比例D、抗体特异性强E、抗体亲和力强7、直接影响絮状沉淀实验的因素是A、抗原分子量B、抗体分子量C、抗原抗体比例D、反应体系的PHE、反应体系的例子强度8、免疫沉淀法目前应用最广、定量比较准确的主要是下列哪种方法A、免疫比浊法B、絮状沉淀试验C、单向扩散试验D、双向扩散试验E、棋盘滴定法9、下列关于免疫浊度测定错误的是A、免疫浊度测定本质上属于液体内沉淀反应B、是将现代光学测量仪器与自动化检测系统相结合应用于沉淀反应，可进行液体中微量抗原、抗体及小分子半抗原定量检测C、当抗原过量时，形成的IC分子小，而且会发生再解离，使浊度反而下降，光散射亦减少，这就是高剂量钩状效应D、当反应液中抗体过量时，IC的形成随着抗原递增而增加，至抗原、抗体最适比例处达最高峰，这就是经典的海德堡曲线理论E、免疫比浊法的基本原理就是在反应体系中保持抗原过量，如形成抗体过量则造成测定的准确性降低10、免疫浊度测定，形成浊度的关键是A、反应温度B、PHC、抗原和抗体的比例D、离子强度E、抗体的亲和力11、单向琼脂扩散法是将相应的（）。
临床医学检验：凝集反应、沉淀反应及免疫电泳技术测试题(题库版)
临床医学检验：凝集反应、沉淀反应及免疫电泳技术测试题（题库版）1、单选Coombs试验的直接法和间接法的主要区别是()A．前者是检测完全抗体的，而后者是检测不完全抗体的B．前者是检测在体内已致敏的红细胞上的不完全（江南博哥）抗体，后者是检测游离在血清中不完全抗体的C．前者主要用于检测IgG型抗体，后者主要用于检测IgE型抗体D．前者主要用于检测IgG型抗体，后者主要用于检测IgM型抗体E．两者判断结果的方法不同正确答案：B2、填空题经典的液相沉淀试验包括_________、_________和免疫浊度试验。
正确答案：絮状沉淀试验；环状沉淀试验3、多选关于双向免疫抗散试验，正确的是()A．抗原或抗体的定性分析B．抗体效价测定C．精确定量抗原或抗体D．抗原或抗体的纯度鉴定E．抗原或抗体相对分子量估计正确答案：A, B, D, E4、问答题在单向扩散试验中，有时会出现结果与真实含量不符，是何原因? 正确答案：在单向扩散试验中，有时会出现结果与真实含量不符，这主要出现在Ig测定中。
如用单克隆抗体或用骨髓瘤纯抗原免疫动物获得的抗血清，都存在结合价单一的现象，若用此作为单向扩散试剂测量正常人的多态性抗原，则抗体相对过剩，使沉淀圈直径变小，测量值降低。
相反，如用多克隆抗体测定单克隆病(M蛋白)，则抗原相对过剩(单一抗原决定簇成分)，致使沉淀圈成不相关的扩大，从而造成某一成分的假阳性增加。
5、单选间接凝集试验和被动凝集试验()A．是同义词B．是完全不同的两种试验C．二者均属凝集试验，但有区别D．前者属玻片凝集反应范畴，后者属试管凝集反应范畴E．是近义词正确答案：A6、填空题母体所产生最常见的免疫性抗体为Rh抗体和ABO抗体，一般为_____________，可通过胎盘，作用于_____________，引起_______________________。
正确答案：7SIgG；胎儿红细胞；新生儿溶血性疾病7、名词解释免疫电泳正确答案：免疫电泳是将区带电泳和双向免疫扩散相结合的免疫化学分析技术。
河南农业大学考研专业课《现代分子生物学》考试试卷(64)
河南农业大学考研专业课《现代分子生物学》课程试卷（含答案）__________学年第___学期考试类型：（闭卷）考试考试时间：90 分钟年级专业_____________学号_____________ 姓名_____________1、分析题（5分，每题5分）1. 写出从组织中抽取RNA的关键步骤，并解释如何判断RNA质量。
答案：（1）从组织中提取RNA的步骤如下：①将组织在液氮中磨碎，每50～100mg组织加入1ml TRIzol裂解液溶解样品，充分吹打混匀。
②每1ml TRIzol加入2.0ml氯仿，剧烈震荡15s，室温放置5min。
③4℃，10000g离心15min，此时RNA主要包括集中在水相中。
④将水相转移至新的离心管中，加入等体积异丙醇，室温放置10min。
⑤4℃，10000g离心10min，此时可在离心管底部观察沉淀到白色沉淀，即为RNA。
⑥用75冷的乙醇洗涤沉淀，4℃，7500g以下，离心5min，弃上清。
⑦超净台中吹干，加入无RNase的水溶解。
（2）检测RNA质量的方法如下：①凝胶成像：取适量RNA溶液加入电泳缓冲液后，跑琼脂糖质谱仪，如果28S和18S条带明亮、清晰，并且28S的亮度在18S条带的两倍以上，则认为RNA的质量是好的。
②吸光度检测：使用紫外分光光度计检测RNA样品在260nm、280nm处的吸光度，若两者的比值在1.8～2.0时，可认为RNA纯度良好，蛋白质等其他物质的污染有机物可以接受。
解析：2、判断题（55分，每题5分）1. TDNA插入会导致某些基因表达的缺失，但不会引起植物的致死现象。
（）答案：错误解析：如果TDNA插入到对于植物发育非常重要的基因性状上，就会引起植物的致死弊病。
2. 端粒的序列在同一细胞各条染色体上都是相同的。
（）答案：正确解析：端粒为每个染色体末端特化的部位，着色较深。
由端粒DNA和端粒蛋白组成。
其首要作用主要是防止染色体降解、粘连，抑制细胞凋亡，与细胞寿命长长短有关。
染色体免疫共沉淀(chip)步骤
染色体免疫共沉淀(chip)步骤
染色体免疫共沉淀（ChIP）是一种常用的实验技术，用于研究染色体上特定蛋白质与DNA的相互作用。
以下是染色体免疫共沉淀的基本步骤：
1. 交联：将细胞或组织与形成蛋白质-DNA复合物的交联剂（如甲醛）处理，使蛋白质与DNA之间形成致密的交联。
这一步骤有助于保持蛋白质与DNA的相互作用并固定其在细胞或组织中的位置。
2. 细胞破碎和核裂解：将交联后的细胞或组织进行破碎和核裂解，以释放细胞内的染色质。
这可以通过机械方法（如超声波处理）或化学方法（如利用细胞裂解缓冲液和蛋白酶进行破碎）完成。
3. 免疫共沉淀：在破碎的细胞或组织提取物中，加入特异性抗体，该抗体可以与目标蛋白质结合。
免疫抗体与目标蛋白质形成免疫复合物，并与形成蛋白质-DNA复合物的目标区结合。
4. 洗涤：通过一系列洗涤步骤，去除非特异性和非特定结合的蛋白质和核酸，以减少背景信号的干扰。
5. 解交联：通过加热或酶处理等方法，解除细胞或组织中的蛋白质-DNA交联，并将DNA释放出来。
6. DNA提取：通过加入DNA提取缓冲液和有机溶剂，从溶液中沉淀出DNA，并用适当的方法进行纯化和浓缩。
7. 分析：对提取的DNA进行进一步的分析，可使用PCR、测序等技术，以检测免疫共沉淀的蛋白质与目标DNA的相互作用。
这些步骤旨在允许研究人员从细胞或组织中获得特定蛋白质与DNA的结合信息，并进一步了解基因调控、表观遗传学等相关的生物学过程。
实际操作时，具体的步骤和条件可能会因实验目的和样本类型而有所不同。
因此，在进行染色体免疫共沉淀实验时，建议参考相关文献和实验室经验，以确保实验的准确性和
可重复性。
临床科研实验技能知到章节答案智慧树2023年中南大学
临床科研实验技能知到章节测试答案智慧树2023年最新中南大学第一章测试1.验证假设的最好方法是参考答案:实验2.形态学实验中基本的步骤脱水包埋是指对固定后的（）样品进行脱水包埋形成（）或冰冻组织块。
参考答案:组织，蜡块3.学生进入实验室开展实验的基本要求包括参考答案:全部都是4.实验数据记录、处理和分析的要求是参考答案:全部都是5.以下关于分享的实验心得说法不恰当的是参考答案:只需要通过实验课就可以学会做实验6.实验方法应具有科学性、先进性和可行性，并符合伦理。
参考答案:对7.实验室相关制度中包括每月对新进实验人员进行培训，讲解实验室注意事项和仪器操作使用。
参考答案:对8.未经实验室工作人员同意任何人不得把实验室内的仪器或物品拿出室外使用。
参考答案:对9.学生进入实验室开展实验，需要遵守实验室相关规章制度，如不慎发生事故，应及时向实验指导人员和相关负责人员报告并采取相应措施。
参考答案:对10.实验动物饲养过程中的生物危害不包括存在于动物粪便和尿液中的病原体。
参考答案:错第二章测试1.下列行为不属于科研不端行为的是参考答案:投稿时建议审稿员2.学术不端行为的危害包括参考答案:全部都是3.2014年12月，《科学美国人》(Scientific American) 称期刊《诊断病理学》上的一些论文像是工业规模批量生产出来的，经国家自然科学基金委员会调查，涉假论文被移交给纪检监察审计局处理。
此事件给我们的启示是参考答案:违背科研诚信和学术规范的行为终将受到严惩4.下列属于学术规范类型的是参考答案:全部都是5.黄禹锡因宣布攻克体细胞克隆胚胎干细胞的科学难题而轰动世界，却因被揭发伪造多项研究成果而身陷囹圄。
对于此事件的理解下列不正确的是参考答案:为了出名可以美化和篡改自己的研究成果6.科研活动是我们获得有关人类的新知识的过程。
参考答案:错7.遵纪守法，弘扬科学精神是学术规范的基本准则。
参考答案:对8.涉及以人类为对象的试验只能由具备科研资格的人员操作，如果有学生参加研究，应有相关教师负责安排和监管。
染色质免疫共沉淀技术
染色质免疫共沉淀技术染色质免疫共沉淀技术（ChIP）是一种广泛应用于生物学研究的技术，它可以用来检测蛋白质与染色质之间的相互作用。
该技术能够帮助研究人员确定蛋白质在基因表达中的作用，以及探究细胞的调节机制。
本文将详细介绍染色质免疫共沉淀技术的原理、步骤、优缺点和应用。
一、原理染色质免疫共沉淀技术是基于抗体特异性识别蛋白质的原理。
在该技术中，首先将抗体与磁珠或琼脂糖等载体结合，形成免疫复合物。
接着，将该免疫复合物加入到含有细胞或组织的裂解液中，使其与目标蛋白结合。
随后，使用磁力或离心等手段将免疫复合物与与其结合的蛋白、核酸等分离出来。
最后，利用PCR、微阵列芯片等技术对分离出来的蛋白、核酸等进行检测和分析。
二、步骤染色质免疫共沉淀技术的步骤主要包括：1. 细胞或组织的裂解：将细胞或组织加入到含有蛋白酶抑制剂、核酸酶抑制剂、盐和缓冲液等的裂解液中，使其破裂并释放出蛋白、DNA等。
2. 免疫复合物的制备：将抗体与磁珠或琼脂糖等载体结合，形成免疫复合物。
3. 免疫复合物与目标蛋白的结合：将免疫复合物加入到裂解液中，与目标蛋白结合。
4. 免疫复合物的分离：使用磁力或离心等手段将免疫复合物与与其结合的蛋白、核酸等分离出来。
5. 分析：利用PCR、微阵列芯片等技术对分离出来的蛋白、核酸等进行检测和分析。
三、优缺点染色质免疫共沉淀技术具有以下优点：1. 高特异性：该技术可以通过抗体特异性识别蛋白质，具有高特异性。
2. 高灵敏度：该技术可以检测到极低浓度的蛋白质。
3. 可重复性：该技术具有较高的可重复性，可以用于多次实验。
4. 可广泛应用：该技术可以应用于不同种类的细胞和组织。
然而，染色质免疫共沉淀技术也存在以下缺点：1. 受抗体质量限制：抗体的质量、特异性和亲和力等因素会影响该技术的结果。
2. 受组织分解程度限制：组织分解不彻底会导致目标蛋白无法完全释放，从而影响该技术的结果。
3. 受背景干扰影响：免疫复合物的制备和分离过程中，可能会出现背景干扰，影响结果的准确性。
组织Co-IP
百泰派克生物科技
组织Co-IP
免疫共沉淀（Co-Immunoprecipitation，Co-IP）使用靶蛋白特异性抗体间接捕获与特定靶蛋白结合的蛋白来鉴定体内相关的蛋白-蛋白相互作用，是研究蛋白互作的经典方法。
在组织Co-IP实验过程中，为了保证足够多的蛋白浓度以维持原本存在的蛋白质互作状态，通常需要准备足够多的动物或者组织样品。
且Co-IP的实验条件很难一次成功，常需要反复摸索，尤其当蛋白丰度较低、相互作用力不强、使用不易提取蛋白的组织等情况时，组织Co-IP实验可能无法继续进行。
因此，用于Co-IP实验需要准备动物组织细胞＞500mg，植物组织＞2g的样品，样品采集后应速冻于-80℃保存并避免反复冻融。
之后利用特异性抗体捕获组织中靶蛋白，形成抗体-靶蛋白复合物，同时使用能够与抗体结合的基质（如Nanoab-Agarose）对复合物进行沉淀和固定。
相应的，与组织中靶蛋白相互作用的互作蛋白也将被沉淀下来。
最后对基质上的非特异性蛋白进行洗去得到互作蛋白，通过SDS-PAGE进行分析、Western blot检测即可对互作蛋白进行表征。
百泰派克生物科技针对样品蛋白的提取、表达和纯化的优化方案可确保获得高质量的诱饵和猎物蛋白，为客户提供优质的Co-IP蛋白互作分析服务。
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免疫共沉淀操作步骤
免疫共沉淀操作步骤免疫共沉淀（immunoprecipitation）是一种常用的实验技术，用于检测特定蛋白与其他分子的相互作用。
本文将介绍免疫共沉淀的操作步骤，包括前期准备、取样、免疫共沉淀、洗涤、洗脱和分析结果等。
一、前期准备1. 准备所需试剂：PBS缓冲液（含0.1%的Tween-20）、蛋白质抽提缓冲液（含有适当的蛋白酶抑制剂）、抗体（单克隆或多克隆抗体）、控制组织或细胞苗、蛋白质A/G磁珠等。
2.对样品进行处理：收集样品，如细胞或组织，并用蛋白质抽提缓冲液裂解细胞膜或组织。
3. 确定抗原-抗体反应的条件：进行Western blot或其他实验，确定抗体和目标蛋白的最佳工作浓度和最佳条件。
二、取样1.将裂解的细胞或组织样品通过离心等手段去除细胞碎片和残留的细胞核。
2.将上清液收集到新的离心管中，并测定样品的总蛋白浓度，以便后续计算抗体的用量。
3.根据总蛋白浓度将样品分成相等的小样本，并放入不同的离心管中。
三、免疫共沉淀1.将试验管中的抗体与适量的蛋白质A/G磁珠混合，孵育一段时间，使抗体与磁珠形成固定复合物。
2.将磁珠与固定复合物加入到每个含有样品的离心管中，混匀并在冰上孵育一段时间。
3.离心管置于磁珠磁架上，使磁珠在离心管底部附着，将上清液小心地转移至新的离心管中，以减少非特异性结合的背景。
4.用PBS缓冲液洗涤磁珠至少3次，以去除非特异性结合的蛋白质。
5.转移沉淀到新的离心管中，并用PBS缓冲液洗涤磁珠至少3次，以去除残留的非特异性结合蛋白质。
四、洗涤1.将磁珠与背景低的洗涤缓冲液混合，孵育一段时间，混匀后在冰上孵育。
2.将磁珠与洗涤缓冲液加入到每个含有沉淀的离心管中，混匀并在冰上孵育一段时间。
3.离心管置于磁珠磁架上，使磁珠在离心管底部附着，将上清液小心地转移至新的离心管中。
4.用洗涤缓冲液洗涤磁珠至少3次，以去除非特异性结合的蛋白质。
五、洗脱1.将洗涤缓冲液去除，加入适量的脱附缓冲液，孵育一段时间，混匀并在冰上孵育。
免疫共沉淀(CO-IP)实验方法与操作步骤
免疫共沉淀(CO-IP)实验方法与操作步骤CO-IP是用于检测或探究蛋白与蛋白之间相互作用的实验，属于IP实验的扩展，在样品溶液中，捕获和纯化通过天然相互作用及靶标结合的其他大分子蛋白，基于抗原抗体的特异性免疫结合，以饵蛋白为诱饵蛋白，通过饵蛋白抗体捕获，磁珠吸附结合，进而将饵蛋白结合的互作蛋白捕获得到，纯化定量定性分析。
实验操作步骤：1.样本准备组织和细胞是最常见的样本类型。
组织用液氮研磨，研磨时少量多次加入液氮，研磨时用研磨杵按住组织旋转研碎，需戴护目镜或是头盔。
细胞直接消化或刮下离心，预冷1XPBS清洗1-2次，消化是影响细胞膜表面蛋白构象，尤其是层黏连蛋白和粘附蛋白改变，导致细胞贴壁不牢，进而脱落，对细胞内蛋白影响几乎没有，细胞刮下来也行，虽然存在物理机械损伤，但损伤相基本可忽略。
2.细胞裂解使用弱裂解液，不要直接用WB裂解蛋白的裂解液，做免疫共沉淀，要保留细胞内天然构建结合，强裂解液会使蛋白变性，弱性裂解液在于表面活性剂，比如NP-40、Triton X-100。
3. 磁珠清洗及抗体孵育磁珠用之前摇一摇，按照使用量吸取，不要用小枪头，用1ml大枪头，且是无菌无酶，加入适量抗体与buffer，混入磁珠即可。
4. 磁珠-抗体-裂解液孵育此为核心步骤，磁珠与抗体孵育完成后，buffer清洗3次，加裂解液。
清洗是为去除未结合至磁珠表面的游离抗体，防止游离未结合的抗体结合到饵蛋白，降低结合总量。
磁珠-抗体复合物清洗完，加裂解液孵育，注意要颠转孵育，不能静置，磁珠是固体，溶液沉降，颠转孵育，不但能使磁珠不沉降，而且使磁珠-抗体与蛋白结合更充分全面。
放置4℃，颠转过夜。
5.清洗纯化磁珠-抗体-蛋白复合物关键步骤，需清洗6次，清洗少了会导致假阳性，清洗次数过多结合蛋白损失大，清洗时要用两种buffer，一种低盐，一种高盐，尽量去除未结合的蛋白，防止假阳性出现。
6.检测检测分为三种，根据实验目的区分。
一是银染：按照input组、目的组、IgG 组、beads组跑胶银染，查看蛋白差异性；二是WB检测：根据预测结合的靶蛋白，进行WB检测，看有无条带，确认是否结合（要做内参）；三是MS（质谱）检测：质谱检测是根据产物蛋白，进行酶解消化成多肽，再测定多肽，获取序列，比对蛋白数据库，查看潜在结合蛋白有哪些，探讨结合蛋白。
免疫学习题库+答案
免疫学习题库+答案一、单选题(共IOO题，每题1分，共100分)1、酶联免疫吸附试验所用固相材料是A、聚苯乙烯微孔板(96T)B、聚苯乙烯小试管C、纳米颗粒600~800nm)D、聚苯乙烯乳胶颗粒20Onm)E、纳米磁性颗粒600~800nm)正确答案：A2、属于间接偶联的标记方法是A、碳二亚胺(EDC)缩合法B、过碘酸钠氧化法C、戊二醛交联法D、重氮盐偶联法E、N-羟基琥酰亚胺活化法正确答案：E3、正常情况下，胚胎对母体的免疫系统而言是A、不能引起母体的免疫应答B、含有父系抗原，可以被母体排斥C、母体免疫系统不识别父系抗原D、母体免疫系统对胚胎形成免疫耐受E、无免疫原性正确答案：D4、最有效的MCAb纯化方法是A、盐析法B、有机溶剂沉淀法C、凝胶层析法D、亲和层析法E、离子交换层析法正确答案：D5、E11SA板包被后最常用的封闭剂是A、人血清球蛋白B、牛血清球蛋白C、人血清白蛋白D、牛血清白蛋白E、2%脱脂牛奶正确答案：D6、金颗粒直径为6~10nm的还原剂是A、白磷B、维生素CC、乙醇-超声波D、柠檬酸三钠E、硼酸钠正确答案：C7、预示病情进展或恶化时，乳腺癌患者CAI5-3比原来水平升高A、15%B、20%C、25%D、30%E、35%正确答案：C8、主要分泌胃蛋白酶原I(PGI)的细胞是A、内分泌细胞B、颈黏液细胞C、壁细胞D、G细胞E、主细胞正确答案：E9、常用的HRP发光底物为A、鲁米诺或其衍生物B、A MPPDC、4-MUPD、口丫咤酯E、三联毗咤钉正确答案：A10、能与第一抗体结合，促进免疫复合物沉淀作用的组分是A、标记抗原(*Ag)B、结合标记物(*AgAb)C、待测抗原(Ag)D、免疫复合物(AgAb)E、第二抗体(Ab)正确答案：E11、生物素-亲合素系统用于包被小分子抗原的模式为A、固相-生物素-亲合素化抗原B、固相-亲合素化抗原C、固相-亲合素-生物素化抗原D、固相-生物素化抗原E、固相-SPA-生物素化抗原正确答案：C12、抗-HBs可以保护机体不受哪个病原体的感染A、HSVB、HEVC、HDVD、HAVE、HPV正确答案：C13、提高R1A分析敏感度，方法学设计时需要避免的是A、增加抗体用量B、制备高比活性标记抗原C、采用顺序饱和法，让待测抗原优先结合抗体D、筛选并使用高亲合力抗体E、降低非特异性结合正确答案：A14、酶免疫组化染色中最常用的酶是A、碱性磷酸酶B、葡萄糖氧化酶C、过氧化物酶D、辣根过氧化物酶E、B-半乳糖酶正确答案：D15、B细胞表面最重要的标志为A、Sm1gCB、F cγRC、CD40D、CD15E、CD80正确答案：A16、抗原刺激诱导的体液免疫应答中最先产生的抗体是A、IgGB、IgAC、IgMD、IgEE、IgD正确答案：C17、根据抗原-抗体反应的特点，正确的说法是A、抗原抗体结合牢固，不易受环境因素影响B、抗体与抗原结合后仍可与其他抗原结合C、解离后抗体不能再与抗原结合D、解离后的抗体生物学活性改变E、解离后抗原的生物学活性不变正确答案：E18、以亲合素作“桥”的反应模式称为A、1AB模式B、直接模式C、间接模式D、BAB模式E、BA模式正确答案：D19、在抗原-抗体反应中，通常用作抗原抗体稀释液的是A、0.55%NaCI溶液B、B65%NaC1溶液C、0.75%NaC1溶液D、0.85%NaeI溶液E、0.95%NaCI溶液正确答案：D20、以下选项中，确认试验的特点是A、敏感性高，阴性预测值高B、必须是免疫学检测方法C、特异性高，阳性预测值高D、特异性高，阴性预测值高E、敏感性高，阳性预测值高正确答案：C21、外斐试验是利用了A^过量抗原B、共同抗原C、可逆反应D、亲和性E、过量抗体正确答案：B22、HIV抗体检测确认试验采取的方法是A、E1ISAB、化学发光法C、免疫印迹法D、放射免疫法E、胶体金免疫层析法正确答案：C23、超敏反应属于A、过敏反应B、天然免疫反应C、获得性免疫反应D、不是免疫反应E、正常生理反应正确答案：C24、HBV感染后，最早出现的血清标本物是A、抗一HBSB、抗-HBcIgCC、HBsAgD、HBeAgE、抗-HBe正确答案：C25、双向扩散试验中估计抗原或抗体的相对含量是根据下列选项中的A、沉淀线的形态B、沉淀线的数量C、沉淀线的位置D、沉淀线弯曲的方向E、沉淀线的粗细正确答案：C26、评价机体体液细胞功能，需做下列检查中的A、OT试验B、淋巴细胞转化试验C、T细胞亚群D、血清Ig测定E、T细胞数量检查正确答案：D27、下面说法错误的是A、标记物是抗原或抗体蛋白质时，尽量选择较低标记温度，以避免蛋白失活B、碱性磷酸酶可催化鲁米诺氧化并稳定发光C、碱性(PH8.6)条件下，鲁米诺与电0板应，可产生强度较弱的自发光D、小分子物质主要是通过偶联反应进行标记，而生物大分子利用交联剂标记E、一般可用透析法、凝胶过滤法和盐析沉淀法等纯化发光剂标的结合物正确答案：B28、在生物素-亲合素法组织化学技术中，关于灵敏度的描述正确的是A、ABC法灵敏度低B、ABC法灵敏度高C、BRAB法灵敏度比ABC法低D、1AB法灵敏度比ABC法低E、ABC法灵敏度最高正确答案：B29、下列选项中，不属于生物素-亲合素相互作用特点的是A、具有多级放大反应B、具有极高亲和(结合)常数C、抗酸、碱干扰能力强D、呈高度专一性反应E、呈可逆性结合反应正确答案：E30、双向扩散试验平板法当两个抗原完全不同时，沉淀线出现A、两条弧线部分融合B、两条沉淀线平行C、两条弧线完全融合D、两条弧线不连接E、两条沉淀线相交叉正确答案：E31、关于抗精子抗体的叙述，错误的是A、当机体抗精子免疫发生后血液中首先出现的抗体是IgMB、当机体抗精子免疫发生后血液中首先出现的抗体是IgGC、血-睾屏障遭到破坏可致抗体产生D、抗精子抗体可引起精子凝集、制动导致不育E、酶联免疫吸附试验可用于抗精子抗体的检测正确答案：B32、在速率散射比浊法中加入PEG的目的是A、减缓抗原-抗体复合物的形成B、加速抗原-抗体复合物的形成C、减少伪浊度的形成D、降低抗原抗体的亲和力E、提高抗原抗体的亲和力正确答案：B33、可灭活C4,作为补体C4缺陷血清的是A、将血清用氨或朋处理B、将血清用酵母多糖处理C、将血清经加热56℃15分钟D、将血清经加热56°C30分钟E、加入适量的Ca和Mg正确答案：A34、制备鞭毛抗原的方法是A、75%乙醇B、2%氯仿C、C3%〜0∙5%甲醛D、2%氯仿E、0.5%甲醛正确答案：E35、以下关于亲合素-生物素-过氧化物酶复合物技术(ABC)的基本原理描述中，不正确的是A、亲合素与酶标生物素按比例结合，形成可溶性ABCB、生物素化抗体(直接法)与ABC中未饱和的亲合素结合部位结合C、生物素化第二抗体(间接法)与ABC中未饱和的亲合素结合部位结合D、生物素与ABC中未饱和的亲合素结合部位结合E、抗原-抗体反应体系与ABC标记体系连成一体进行检测正确答案：D36、诊断血栓和溶栓治疗监测所广泛应用的指标是A、CRPB、肌钙蛋白C、肌红蛋白D、D-二聚体E、脑钠肽正确答案：D37、金免疫层析试验竞争法测小分子抗原(a),层析条的待测样品结果判读处应包被A、抗免疫金抗体Bs抗a抗体C、标准抗原aD、小鼠IgGE、胶体金标记抗a抗体正确答案：C38、在速率散射比浊法中，测定下列哪个单位时间段内抗原-抗体复合物形成速率作为定量依据A、抗原-抗体复合物形成的最快时间段B、抗原-抗体复合物形成结束的时间段C、抗原-抗体复合物形成的最稳定时间段D、抗原-抗体复合物形成最大的时间段E、抗原-抗体复合物形成的最长时间段正确答案：A39、在荧光偏振免疫试验时，下列描述正确的是A、大分子免疫复合物转动慢，偏振荧光强B、小分子抗原转动慢，方向性好C、偏振荧光强度与转动速度无关D、大分子免疫复合物转动快，偏振荧光强E、小分子抗原转动快，方向性好正确答案：A40、目前最常用的鉴定M蛋白类型的方法为A、免疫扩散B、免疫比浊法C、对流免疫D、免疫荧光E、免疫固定电泳正确答案：E41、用小鼠抗人CD3单克隆抗体检测T淋巴细胞，其结果代表A、T淋巴细胞总数B、Th细胞数C、Treg细胞数D、CD4+T细胞数E、CD8+T细胞数正确答案：A42、下列免疫学反应中，造成急性排斥反应中移植物损伤的最主要机制是A、I型超敏反应B、ADCCC、In型超敏反应D、IV型超敏反应E、CDC正确答案：D43、不属于IRMA体外诊断试剂的组分是A^系列标准品抗原B、标记抗体C、预包被捕获抗体的塑料试管D、洗涤缓冲液E、PEG分离溶液正确答案：E44、对淋巴细胞亚群测定的临床意义描述错误的是A、诊断免疫缺陷或免疫增生病B、了解机体的免疫状态C、了解体液免疫情况D、是自身免疫疾病和肿瘤发生发展的监控指标E、探讨免疫调节功能的状况正确答案：C45、单向扩散试验试管法在试管上部的沉淀带表示A、R型抗体B、抗体过量C、抗体量少D、抗原过量E、抗原量少正确答案：E46、1个链霉亲合素分子能结合生物素分子的数目是A、8B、12C、6D、4E、2正确答案：D47、ABo血型不符，移植后会发生以下排斥反应中的A、超级性排斥反应B、急性排斥反应C、慢性排斥反应D、移植物抗宿主反应E、超慢型排斥反应正确答案：A48、所有补体成分被灭活，无补体活性的是A、将血清用氨或脱处理B、将血清用酵母多糖处理C、将血清经加热56C15分钟D、将血清经加热56°C30分钟E、加入适量的Ca和Mg正确答案：D49、关于抗dsDNA抗体在系统性红斑狼疮中的临床意义，描述错误的是A、有助于疾病诊断B、有助于判断疾病预后C、对疾病的特异性很高D、对疾病有预测作用E、对疾病的敏感性很高正确答案：E50、常作为肾脏炎症的主要黏附分子A^E-选择素B、ICAMC、N-CadherinD、整合素E、P-选择素正确答案：B51、下列情况不支持细胞缺陷病的诊断的是A、患者反复发生病毒性肺炎B、患者外周血E花环形成率低下C、患者外周血淋巴细胞对PHA反应增强D、患者结核菌素试验阴性E、患者外周血淋巴细胞Sndg细胞数正常正确答案：C52、血清区带电泳时，泳动速度最快的成分是A、Y-球蛋白B、B-球蛋白C、球蛋白D、。
中级临床医学检验技术临床免疫学及检验(沉淀反应、放射免疫分析
中级临床医学检验技术临床免疫学及检验（沉淀反应、放射免疫分析）模拟试卷3(题后含答案及解析)题型有：1. B1型题 2. A1型题 3. A2型题A．琼脂糖B．琼脂糖珠4BC．聚乙二醇D．硫酸铵E．聚丙烯酰胺1．制备亲和层析柱选择正确答案：B 涉及知识点：沉淀反应2．增加沉淀反应的浊度选择正确答案：C 涉及知识点：沉淀反应3．双向免疫扩散试验选择正确答案：A 涉及知识点：沉淀反应4．抗体的纯度鉴定选择何种物质作为凝胶电泳支持物正确答案：E解析：制备亲和层析柱选择琼脂糖珠4B；聚乙二醇是增浊剂；琼脂糖是双向免疫扩散试验中常用的支持物；常用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳进行抗体纯度的鉴定。
知识模块：沉淀反应5．沉淀反应中最主要的影响因素A．溶液的pHB．溶液的离子浓度C．抗体的质量D．抗原抗体的比例E．温度正确答案：D解析：沉淀反应只有在抗原抗体比例合适的时候才能发生。
知识模块：沉淀反应6．免疫比浊的基本原则是在反应体系中A．保持有电解质溶液B．保持在37℃进行C．保持抗原过量D．保持抗体过量E．保持抗原抗体比例合适正确答案：D解析：免疫比浊是在过量的抗体中分别加入递增量的抗原，经一定时间后形成抗原抗体复合物，用浊度计测量反应液体的浊度，并由此推算样品中的抗原含量。
知识模块：沉淀反应7．下列哪一项不是与免疫浊度法测定密切相关的因素A．抗原抗体的比例B．抗体的质量C．抗原抗体反应的溶液D．增浊剂的应用E．佐剂的应用正确答案：E解析：与免疫浊度法测定密切相关的因素有：抗原抗体的比例，当比例合适时二者充分结合，形成的沉淀最多；抗体的质量，如抗体的特异性、效价、亲和力以及抗体类型等；反应溶液的pH、离子强度等；增浊剂，可促进免疫复合物的形成。
知识模块：沉淀反应8．目前常用的鉴定M蛋白类型的方法是A．免疫电泳B．区带电泳C．免疫对流电泳D．免疫固定电泳E．免疫选择电泳正确答案：D解析：免疫固定电泳最常用于M蛋白的鉴定，此外免疫固定电泳也用于尿液中本周蛋白的检测及K、入分型，脑脊液中寡克隆蛋白的检测及分型。
中级临床医学检验技术临床免疫学及检验(沉淀反应、放射免疫分析
中级临床医学检验技术临床免疫学及检验（沉淀反应、放射免疫分析）模拟试卷2(题后含答案及解析)题型有：1. A1型题 2. B1型题1．抗原抗体形成明显沉淀物的条件是A．抗体多于抗原B．抗原多于抗体C．抗原抗体一样多D．抗原抗体比例合适E．不必考虑抗原抗体的比例正确答案：D解析：抗原和抗体的比例是沉淀形成的关键因素，抗原和抗体比例恰当时，二者充分结合，形成沉淀最多。
知识模块：沉淀反应2．沉淀反应的反应中，抗原抗体分子比例合适的范围称为A．带现象B．后带C．前带D．等价带E．以上都不对正确答案：D解析：抗原抗体分子比例合适的范围称为等价带。
知识模块：沉淀反应3．双向琼脂扩散试验中，若抗原抗体含量相同，但抗原的分子量比抗体大，则沉淀线应为A．靠近抗原孔，且弧线弯向抗原侧B．靠近抗原孔，且弧线弯向抗体侧C．靠近抗体孔，且弧线弯向抗原侧D．靠近抗体孔，且弧线弯向抗体侧E．居于抗原孔和抗体孔中间，且弧线弯向抗原侧正确答案：E解析：沉淀反应中，沉淀线靠近抗原孔，提示抗体含量大；靠近抗体孔，提示抗原含量多。
抗原抗体在琼脂内扩散速度受分子量的影响，分子量小的扩散快。
由于速度慢者扩散圈小，局部浓度大，形成的沉淀线弯向分子量大的一方。
知识模块：沉淀反应4．实验：在琼脂板上相距5mm打双排孔，A排加入粗提纯人血清IgG，B 排加入兔抗人血清抗体，放入湿盒内，置37℃温育48小时后，A排和B排之间可见多条沉淀线。
此免疫学方法为A．单向扩散试验B．双向扩散试验C．絮状沉淀试验D．凝胶凝集试验E．双向凝集试验正确答案：B解析：双向扩散试验是抗原抗体在琼脂内各自向对方扩散，在最适当的比例初形成抗原抗体沉淀线，再根据沉淀线的位置、形状及比对关系，对抗原或抗体作出定性分析。
知识模块：沉淀反应5．下列有关免疫速率散射比浊法说法中错误的是A．测定方法有终点法和速率法两种B．终点法是在抗原抗体反应达到平衡时，即复合物形成后作用一定时间，通常是30～60分钟，复合物浊度不再受时间的影响C．速率法是测最大反应的速度，即反应达到顶峰时的峰值D．速率法的灵敏度和特异性都比终点法好E．终点法必须在聚合产生絮状沉淀之后进行浊度测定正确答案：E解析：终点法是在抗原抗体反应达到平衡时，即复合物形成后作用一定时间，通常是30～60分钟，复合物浊度不再受时间的影响，但又必须在聚合产生絮状沉淀之前进行浊度测定。
Pull-down实验和免疫共沉淀
Pull-down实验和免疫共沉淀Pull-down实验及原理Pull down是一种研究蛋白质或RNA与蛋白质相互作用的体外方法，这里主要讲研究蛋白与蛋白互作的pull-down实验。
在Pull-down实验中，首先要利用基因重组技术构建含有亲和标签与诱饵蛋白基因的载体，然后通过表达纯化得到带亲和标签的诱饵蛋白，该诱饵蛋白可固定在某种基质上以吸附细胞裂解液中的能与诱饵蛋白互作的蛋白，之后再通过洗脱即可得到目的蛋白，对目的蛋白进行检测可实现诱饵蛋白与目的蛋白相互作用的分析。
Pull-down实验的基本原理是将一种含亲和标签的蛋白质作为“诱饵蛋白”固定于某种基质上，当细胞或组织裂解液经过该基质时，可与“诱饵蛋白”相互作用的蛋白就会被吸附，而没有被吸附的其他蛋白质则被洗脱液洗脱，被吸附的蛋白可以通过改变洗脱液或洗脱条件而被回收，从而获得能与已知蛋白（即带亲和标签的诱饵蛋白）相互作用的蛋白。
诱饵蛋白上的亲和标签是pull down实验的基础。
常见的诱饵蛋白的亲和标签包括谷胱甘肽S-转移酶（GST）标签和多组氨酸（6×His）标签。
Pull-down实验后可以对获得的互作蛋白进行电泳分析或质谱鉴定等，以确定已知蛋白或发现未知蛋白。
Pull down串联质谱Pull down实验也叫做蛋白质体外结合实验，是一种在体外研究蛋白质与蛋白质相互作用的简单而灵敏的技术。
Pull-down实验，通过带亲和标签的诱饵蛋白可以把细胞或组织裂解液中与诱饵蛋白相互作用的蛋白质拉下来。
串联质谱用于被拉下来的蛋白质的分析鉴定，然后就可以确认与诱饵蛋白互作的蛋白是不是研究者预想的蛋白质，以及得到互作蛋白是什么蛋白等信息。
免疫共沉淀免疫共沉淀（Co-IP）是一种研究天然状态下蛋白质与蛋白质相互作用的技术。
在Co-IP实验中，首先要使用非离子型表面活性剂来裂解细胞或组织样品以更好的保留完整的蛋白质与蛋白质相互作用，然后加入某一蛋白（诱饵蛋白）的专一性抗体，该抗体与诱饵蛋白结合使诱饵蛋白沉淀，同时也可以沉淀与诱饵蛋白相互作用结合在一起的其它蛋白，也就是实现共沉淀，之后通过洗脱即可得蛋白复合物（诱饵蛋白与其互作蛋白的复合物），对产物进行检测可实现互作蛋白的分析。
组织免疫共沉淀方法
论坛里发的都是关于细胞的免疫共沉淀的实验方法,这是我做组织时用到的方法,希望能给大家有点帮助实验方法如下:第一步：制备组织裂解物1. 把组织剪切成细小的碎片。
2. 融解Western及IP细胞裂解液，混匀。
取适当量的裂解液，在使用前数分钟内加入PMSF,使PMSF的最终浓度为1mM。
3. 按照每20毫克组织加入100-200微升裂解液的比例加入裂解液。
(如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液，如果需要高浓度的蛋白样品，可以适当减少裂解液的用量。
)4. 用玻璃匀浆器匀浆，直至充分裂解。
5. 充分裂解后，g离心3-5分钟，取上清，即可进行后续的PAGE、Western、免疫沉淀和免疫共沉淀等操作。
6. 如果组织样品本身非常细小，可以适当剪切后直接加入裂解液裂解，通过强烈vortex使样品裂解充分。
然后同样离心取上清，用于后续实验。
或1. 使用洁净的工具用最快的速度切取待测组织。
最好在冰上操作。
以防止蛋白降解2. 将组织放入圆底离心管中，浸入液氮以达到“snap freeze”. 如果马上裂解则将组织冰浴，否则将组织保存-80°C以备后用。
3. 每5mg组织加入300ul裂解液，使用玻璃匀浆器匀浆，直至充分裂解。
4. 用300ul裂解液冲洗刀片两次，然后将组织液在4°C缓慢摇动2小时5. 12000rpm 4°C.离心20分钟。
轻轻的将离心管取出冰浴，将上清吸出到新的预冷的离心管中（保持冰浴），弃沉淀。
裂解液的体积要根据组织量来确定。
蛋白提取物不能太过稀释一方面避免蛋白的损失，另一方面也减少后续电泳的上样量（如果需要的话）。
蛋白的合适浓度为1-5 mg/ml ，最低不能少于 mg/ml。
第二步：预纯化裂解物使用无关抗体或血清可以将裂解物非特异性结合Ig的蛋白去除，随后加入的agarose beads一方面将裂解物中非特异结合agarose 或sepharose beads的蛋白去除，另一方面也将加入的无关抗体和血清蛋白去除。
免疫共沉淀的原理
免疫共沉淀的原理首先，将所研究的细胞或组织进行裂解。
裂解的目的是将细胞或组织的膜以及胞浆部分破坏，释放出蛋白质。
裂解的方法一般有机械方法（如超声裂解）和化学方法（如洗涤试剂混合物），目的是破坏细胞或组织的完整性，并使蛋白质均匀地释放出来。
接下来，将抗体固定在一个固相基质上，通常是磁珠或琼脂糖。
抗体的选择应基于抗原的特异性和免疫原性。
抗体与固相基质结合后，形成抗体-固相复合物。
将抗体-固相复合物与细胞裂解液共孵育，使抗体与目标蛋白质发生特异性结合。
在共孵育的过程中，由于抗体与目标蛋白质的高亲和力和特异性，抗原与非特异性蛋白质可以通过洗涤步骤有效地清除。
接下来，通过洗涤步骤除去非特异性蛋白质的干扰。
洗涤可以利用一系列缓冲液，如含有高浓度盐的缓冲液或非离子表面活性剂。
洗涤的目标是去除那些与抗体无关的蛋白质，并增加抗原与抗体之间的特异性结合。
最后，将共沉淀物洗脱并进行鉴定和分析。
洗脱步骤的方法通常是用含有高浓度盐的酸性或碱性缓冲液。
通过洗脱，将共沉淀物从固相基质上解离，并将其收集。
获得的共沉淀物可通过多种方式进行鉴定和分析。
最常见的方法是通过蛋白质质谱分析，通过质谱仪鉴定蛋白质的氨基酸序列，以确认共沉淀物中的蛋白质身份。
此外，还可以利用免疫印迹、酶联免疫吸附测定（ELISA）等方法进行蛋白质的定性和定量分析。
总结起来，免疫共沉淀是一种基于抗体的高亲和力和特异性的免疫学技术，用于检测特定蛋白质与其他细胞或分子之间的相互作用。
该技术的实施步骤包括细胞或组织的裂解，抗体的固相耦联，抗原的结合和洗脱，以及共沉淀物的鉴定和分析。
通过免疫共沉淀技术，我们可以更深入地了解蛋白质的相互作用网络，从而揭示细胞内生物过程的分子机制。
临床医学检验临床免疫：凝集反应及沉淀反应考试资料(强化练习)
临床医学检验临床免疫：凝集反应及沉淀反应考试资料（强化练习）1、单选间接凝集试验常用的载体是（）A.胶乳颗粒B.红细胞C.明胶颗粒D.以上都对E.以上都不对正确答案：D2、单选对于极微量（ng甚至p（江南博哥）g水平）抗原的检测，首先可考虑使用（）A.反向间接血凝法B.荧光抗体技术C.放射免疫测定D.ELISA法E.免疫电泳技术正确答案：C3、单选对流免疫电泳中，抗体向阴极移动原因是（）A.抗体带正电B.抗体带负电C.电渗作用大于电泳作用D.电泳作用大于电渗作用E.抗原带正电正确答案：C4、单选胶乳法检测的RF是（）A.血清中的IgG型RFB.血清中的IgM型RFC.血清中的IgA型RFD.血清中的IgD型RFE.血清中的IgE型RF正确答案：B5、单选抗原抗体比例不合适出现的沉淀现象称为（）A.前带B.后带C.等价带D.带现象E.前后带正确答案：D参考解析：抗原抗体特异性反应时，生成结合物的量与反应物的浓度有关，当抗原抗体分子比例合适时，结合充分，沉淀物形成快而多，称为抗原抗体反应等价；若抗原或抗体极度过剩时，则无沉淀形成，称为带现象；抗体过量时称为前带，抗原过剩时，称为后带。
6、单选能用免疫比浊法进行快速定量的项目有（）A.葡萄糖B.免疫球蛋白C.胆固醇D.尿素E.肌酐正确答案：B7、单选间接抗球蛋白试验检测何类抗体（）A.结合在红细胞表面的IgGB.游离的IgGC.结合在红细胞表面的IgMD.游离的IgME.以上都不是正确答案：B8、单选临床中进行交叉配血试验的方法最常采用（）A.玻片凝集法B.间接凝集反应C.试管凝集法D.间接凝集抑制反应E.协同凝集反应正确答案：C9、单选由PHA诱导的淋巴细胞转化试验中正常人群的转化率为（）A.30％～50％B.40％～60％C.50％～70％D.60％～80％E.70％～90％正确答案： D10、单选用间接Coombs试验检测（）A.红细胞上的不完全抗体B.红细胞上的完全抗体C.游离在血清中的不完全抗体D.血清中的完全抗体E.变态反应性抗体正确答案：C11、单选临床中ABO血型鉴定最常采用的方翔为（）A.正向间接凝集反应B.反向间接凝集反应C.玻片凝集法D.试管凝集法E.间接凝集抑制反应正确答案：C12、单选用免疫学方法确定女性是否妊娠的方法属于（）A.直接凝集试验B.双向琼脂扩散C.单向琼脂扩散D.间接凝集试验E.间接凝集抑制实验正确答案：E13、单选关于单向扩散试验检测时的注意点，错误的是（）A.抗血清必须特异性强B.每次测定都必须做标准曲线C.应用单克隆抗体测量多态性抗原时，测定值偏高D.每次测定时必须用质控血清做质控E.用多克隆抗体测量单克隆病时，测定值偏高正确答案：C14、单选间接凝集试验和被动凝集试验（）A.是同义词B.是完全不同的两种试验C.二者均属凝集试验，但有区别D.前者属玻片凝集反应范畴，后者属试管凝集反应范畴E.是近义词正确答案：A15、单选新生儿溶血性贫血检查可用（）A.胶乳凝集试验B.间接血凝试验C.抗人球蛋白试验D.自身红细胞凝集试验E.协同凝集试验正确答案：C16、单选下列哪项实验不是采用试管凝集试验方法（）A.肥达试验B.外斐试验C.输血交叉配血试验D.ABO型鉴定E.寒冷凝集试验正确答案：D17、单选目前凝胶内沉淀反应中最常用的凝胶是()A.PercollB.Ficoll-HypaqueC.琼脂和琼脂糖D.聚丙烯酰胺凝胶E.淀粉正确答案：C18、单选双扩试验平板法中，抗原含量较大，则夏应沉淀线应（）A.靠近抗原孔B.无沉淀线C.在两孔中点D.呈多条沉淀线E.靠近抗体孔正确答案：E19、单选单向琼脂扩散法是将相应的（）A.抗体均匀地混入琼脂糖凝胶内制板B.抗原均匀地混入琼脂糖凝胶内制板C.补体均匀地混入琼脂糖凝胶内制板D.抗原抗体复合物均匀地混入琼脂糖凝胶内制板E.抗原抗体同时均匀地混入琼脂糖凝胶内制板正确答案：A20、单选直接凝集反应与间接凝集反应的根本区别是（）A.前者采用颗粒性抗原，后者是将可溶性抗原吸附于载体颗粒上B.参与反应介质中电解质的浓度不同C.间接凝集反应敏感性比直接凝集反应敏感性高D.判断结果是在抗原抗体反应的不同阶段E.参与反应介质中的电解质不同正确答案：A21、单选沉淀反应中，抗原与抗体的结合价取决于抗原的分子量，一般说来，抗原的分子量与结合价的关系是（）A.抗原分子量越大，结合价越小B.抗原分子量越大，结合价越大C.两者没有关系D.两者呈函数关系E.抗原结合价为二价正确答案：B参考解析：沉淀反应是可溶性抗原与相应抗体在特定条件下特异性结合所出现的沉淀现象。
免疫共沉淀原理及实验方法
免疫共沉淀原理及实验方法1.利用抗体的高度特异性与抗原结合，将抗原特异性地富集。
2.抗原-抗体复合物与磁珠或珠标记结合，通过磁力或离心作用将复合物分离沉淀下来。
1.材料准备：准备所需的细胞或组织样品，以及抗体、磁珠或珠标记等实验试剂。
2.细胞或组织提取：将细胞或组织样品裂解，并用适当的缓冲液重悬，获得蛋白质提取液。
3.抗体结合：将蛋白质提取液与所需的抗体结合，形成抗原-抗体复合物。
4.沉淀：将磁珠或珠标记加入抗原-抗体复合物中，使其结合，再利用磁力或离心作用将复合物沉淀下来。
5.洗涤：用适当的缓冲液洗涤沉淀物，去除非特异性的蛋白质。
6. 分离与检测：将沉淀物分离出来并进行进一步的分析、检测，如Western blotting、质谱分析等。
1.高特异性：通过使用特异性抗体，可以选择性地沉淀目标蛋白质，减少非特异性的干扰。
2.高灵敏度：沉淀后的蛋白质富集度高，有利于进一步的鉴定和分析。
3.可用于分析蛋白质相互作用：通过免疫共沉淀技术，可以研究蛋白质与其他分子的相互作用关系，揭示机体内蛋白质功能和信号传导的调控机制。
免疫共沉淀技术在生命科学研究中扮演着重要的角色。
例如，通过免疫共沉淀可以研究蛋白质与DNA、RNA或其他蛋白质的相互作用关系，从而了解基因调控、信号传导和代谢途径等重要生物学过程的调控机制。
此外，免疫共沉淀还可以用于筛选靶蛋白质、鉴定疾病标志物，以及评估一些药物对蛋白质相互作用的影响。
综上所述，免疫共沉淀技术是一种重要的实验方法，通过利用特异性抗体与所要研究的蛋白质结合，实现蛋白质的富集、分离和鉴定。
该技术广泛应用于细胞生物学、分子生物学和疾病研究等领域，对揭示分子相互作用、信号传导机制和疾病发生发展具有重要意义。
[医学类试卷]临床医学检验技师初级(师)临床免疫学及检验(沉淀反应)模拟试卷1.doc
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[医学类试卷]临床医学检验技师初级（师）临床免疫学及检验（沉淀反应）模拟试卷11 单向免疫扩散试验，Mancini曲线适用于处理（A）小分子抗原与短时间(＜24小时)扩散的结果（B）大分子抗原与短时间(＜24小时)扩散的结果（C）小分子抗原与长时间(＞48小时)扩散的结果（D）大分子抗原与长时间(＞48小时)扩散的结果（E）所有单向免疫扩散试验的结果处理2 下列关于方阵滴定法，叙述错误的是（A）又称棋盘滴定法（B）常用来测定抗原抗体反应最适比例的方法（C）受抗原抗体比例的直接影响（D）是一种液体内沉淀试验（E）可测大肠埃希菌浓度3 下列关于抗原抗体反应的钩状效应，叙述错误的是（A）抗原过量，形成的免疫复合物分子小，而且会发生解离（B）抗体过量，形成的免疫复合物分子小，而且会发生解离（C）抗原抗体比例是浊度形成的关键因素（D）可使反应浊度下降（E）光散射减少4 沉淀反应中最主要的影响因素（A）溶液的pH（B）溶液的离子浓度（C）抗体的质量（D）抗原抗体的比例（E）温度5 抗原抗体反应最适pH为（A）3．5～4．5（B）3．5～5．5（C）5．5～7．5（D）6．5～8．5（E）7．5～9．56 有关沉淀反应第一阶段的说法正确的是（A）几十分钟到数小时才能完成（B）出现肉眼可见的可溶性小复合物（C）出现沉淀线或沉淀环（D）抗原抗体发生非特异性结合（E）可用散射免疫比浊法测定反应结果7 免疫沉淀法目前应用最广、定量比较准确的主要是下列哪种方法（A）免疫比浊法（B）絮状沉淀试验（C）单向扩散试验（D）双向扩散试验（E）棋盘滴定法8 双向琼脂扩散试验中，若抗原抗体含量相同，但抗原的分子量比抗体大，则沉淀线应为（A）靠近抗原孔，且弧线弯向抗原侧（B）靠近抗原孔，且弧线弯向抗体侧（C）靠近抗体孔，且弧线弯向抗原侧（D）靠近抗体孔，且弧线弯向抗体侧（E）居于抗原孔和抗体孔中间，且弧线弯向抗原侧9 沉淀反应的原理是（A）可溶性抗原与相应抗体在特定条件下特异性结合所出现的沉淀现象（B）颗粒性抗原与相应抗体在特定条件下特异性结合所出现的沉淀现象（C）可溶性抗原与相应抗体在特定条件下特异性结合所出现的混浊现象（D）可溶性抗原与相应抗体在特定条件下特异性结合所出现的凝集现象（E）颗粒性抗原与相应抗体在特定条件下特异性结合所出现的凝集现象10 下列关于免疫浊度测定的说法错误的是（A）可进行液体中微量抗原、抗体及小分子半抗原定量检测（B）浊度形成的关键因素是抗原抗体的比例（C）基本原理是在反应体系中保持抗原过量（D）如反应体系中抗原过量则造成测定的准确性降低（E）当反应液中抗体过量时，随着抗原的增加，反应符合海德堡曲线理论11 下列关于单向扩散试验检测时的注意点，错误的是（A）抗血清必须特异性强（B）每次测定都必须做标准曲线（C）应用单克隆抗体测量多态性抗原时，测定值偏高（D）用多克隆抗体测量单克隆病时，测定值偏高（E）每次测定时必须用质控血清做质控12 实验：在琼脂板上相距5 mm打双排孔，A排加入粗提纯人血清IgG，B排加入兔抗入血清抗体，放入湿盒内，置37℃温育48小时后，A排和B排之间可见多条沉淀线。
免疫组化试题参考答案
免疫组织化学试题参考答案一、名词解释：1.PAS反应：即过碘酸--雪夫反应显示糖原，简称PAS反应。
其原理是通过利用过碘酸的氧化作用，使糖分子中的二醇基氧化为二醛基，释放出醛基，与碱性品红反应，生成紫红色化合物沉淀。
2.Feulgen法：即福尔根反应显示DNA法。
其原理是组织用1NHCl 60℃水解，将DNA分子中脱氧核糖核酸与嘌呤间的连链打开，使之释放出醛基与碱性品红发生反应，生成紫红色化合物沉淀。
3.PAP法：即过氧化物酶一抗过氧化物酶法，该技术原理与其他免疫定位技术相同，即通过抗体使标记分子（抗辣根过氧化物酶）定位于抗原附件。
其不同点为三步法，且有放大作用，反应完全依赖于免疫学结合，不需要标记任何抗体，反应灵敏度高，背景低。
注意一抗与复合物中的抗体必须来源于同一种动物，且二抗必须过剩。
4.核酸探针：指能与特定核酸序列发生特异性互补的已知标记的核酸片段，可检测待测样品中特定的基因序列。
无标记的探针称裸探针。
5.核酸分子杂交：指具有互补序列的两条核酸单链在一定条件下按碱基配对原则形成双链的过程。
杂交的双方分别为待测的核酸序列和已知核酸序列，后者通常用核素或非核素示踪标记，称为探针（probe），杂交后形成的异源双链分子称为杂交分子。
6.质量控制：指组织化学反应各环节中获得最佳效果的技术把握，是组织化学的关键环节，是取得满意效果的必要条件，是提高结果可信度的根本保证。
7.诱发荧光：组织细胞中的某些物质本身不发荧光，但在经过一定的化学反应后可以转变成荧光分子。
此技术目前主要应用在生物胺的显示中。
其中最重要的是甲醛和乙醛酸诱发多巴胺、去甲肾上腺素、肾上腺素和5—羟色胺荧光，以及邻苯二醛诱发组织胺荧光的反应。
8.定量分析：定量判断是结果判断中最重要也是具有意义的判断，其判断结果有助于统计学的分析处理。
组织细胞化学结果的定量分析又称定量组织细胞化学，指在组织细胞化学阳性结果的基础上，对阳性结果（最终阳性产物）进行测量，以数值反应被检测物质的含量。
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论坛里发的都是关于细胞的免疫共沉淀的实验方法,这是我做组织时用到的方法,希望能给大家有点帮助
实验方法如下:
第一步：制备组织裂解物
1. 把组织剪切成细小的碎片。
2. 融解Western及IP细胞裂解液，混匀。
取适当量的裂解液，在使用前数分钟内加入PMSF,使PMSF的最终浓度为1mM。
3. 按照每20毫克组织加入100-200微升裂解液的比例加入裂解液。
(如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液，如果需要高浓度的蛋白样品，可以适当减少裂解液的用量。
)
4. 用玻璃匀浆器匀浆，直至充分裂解。
5. 充分裂解后，10000-14000g离心3-5分钟，取上清，即可进行后续的PAGE、Western、免疫沉淀和免疫共沉淀等操作。
6. 如果组织样品本身非常细小，可以适当剪切后直接加入裂解液裂解，通过强烈vortex使样品裂解充分。
然后同样离心取上清，用于后续实验。
或
1. 使用洁净的工具用最快的速度切取待测组织。
最好在冰上操作。
以防止蛋白降解
2. 将组织放入圆底离心管中，浸入液氮以达到“snap freeze”. 如果马上裂解则将组织冰浴，否则将组织保存-80°C以备后用。
3. 每5mg组织加入300ul裂解液，使用玻璃匀浆器匀浆，直至充
分裂解。
4. 用300ul裂解液冲洗刀片两次，然后将组织液在4°C缓慢摇动2小时
5. 12000rpm 4°C.离心20分钟。
轻轻的将离心管取出冰浴，将上清吸出到新的预冷的离心管中（保持冰浴），弃沉淀。
裂解液的体积要根据组织量来确定。
蛋白提取物不能太过稀释一方面避免蛋白的损失，另一方面也减少后续电泳的上样量（如果需要的话）。
蛋白的合适浓度为1-5 mg/ml ，最低不能少于0.1 mg/ml。
第二步：预纯化裂解物
使用无关抗体或血清可以将裂解物非特异性结合Ig的蛋白去除，随后加入的agarose beads一方面将裂解物中非特异结合agarose 或sepharose beads的蛋白去除，另一方面也将加入的无关抗体和血清蛋白去除。
经过处理的裂解物所得试验结果背景更低、信噪比更好。
但如果最后是使用WB来检测的话，预纯化就不是特别的必要了。
主要步骤：
1. 每1ml裂解物加入50ul和IP抗体来源及亚型相同的无关抗体（例如后续免疫沉淀时用的是小鼠IgG，则在本步骤中可以加入normal mouse IgG）或者正常血清（常用兔血清），冰浴1小时
2. 加100 μl Preotein A/G agarose beads，4°C缓慢摇动10-30分钟
3. 14,000 x g 4°C离心10分钟
4. 取上清，弃沉淀。