微生物学实验：实验三 霉菌的形态观察
实验三霉菌放线菌形态观察及微生物菌落观察
观察青霉菌 丝和分生孢 子着生情况：
1.单轮生青霉群；2.对称二轮 生青霉群；3.多轮生青霉群；4. 不对称生青霉群
担子菌担孢子的观察
切片标本的制作：现场演示
下次实验准备
每组两个平板，分别是马铃薯培养基（培养 真菌），另一个高氏培养基（培养放线菌）
实验室环境中微生物的检查 用棉签取实验室环境条件下的微生物进 行涂板。
一、实验目的
了解放线菌、霉菌、酵母菌和大型真菌的特点 并观察其形态特征
学习掌握霉菌染色的基本方法
二、实验原理
原核微生物
放线菌：
由不同长短的纤细的菌丝所形成的单细 胞菌丝体。菌丝体分为两部分，即潜入 培养基中的营养菌丝（或称基内菌丝） 和生长在培养基表面的气生菌丝。有些 气生菌丝分化成孢子丝，呈螺旋形、波 浪形或分枝状等。孢子常呈圆形、椭圆 形或杆状。气生菌丝及孢子的形状和颜 色常作为分类的重要依据。
真核微生物
酵母菌：酵母菌细胞一般呈卵圆形、圆形、圆柱形或
柠檬形。酵母细胞核与细胞质有明显的分化，个体直 径比细菌大几倍到十几倍。繁殖方式也较复杂，无性 繁殖主要是出芽生殖，有些酵母能形成假菌丝。有性 繁殖是通过接合形成子囊及子囊孢子。
霉菌：凡在营养基质上形成绒毛状、棉絮状或蜘蛛网
形丝状菌体的真菌，统称为霉菌。霉菌包括分类学上 许多不同纲或类的真菌，它们分别属于藻状菌纲、子 囊菌纲、担子菌纲和半知菌类。
常见大型真菌：在分类上属于子囊菌纲和担子菌纲，
均为丝状真菌。
三、实验材料
放线菌和真菌培养物
1. 放线菌培养物：青色链霉菌四天插片培养物。 2. 啤酒酵母24至28h液体培养物。 3. 黑曲霉和根霉4d搭片培养物。 4. 各种真菌示范片。 5. 市售平菇
实验三 酵母菌、霉菌、放线菌的形态观察
实验三酵母菌、霉菌、放线菌的形态观察一目的要求1.观察酵母菌的个体形态及出芽生殖方式，学习区分酵母菌死活细胞的实验方法。
2.掌握酵母菌的菌落特征及其与细菌菌落的区别。
3．学会识别霉菌的菌落特征，掌握霉菌的乳酸石炭酸制片法。
4．学习观察霉菌个体形态及各种无性孢子的方法。
5．学会观察放线菌的菌落特征，个体形态及其繁殖方式。
二实验原理1．酵母菌是不运动的单细胞真核微生物，多数是圆形或椭圆形，其大小通常比常见细菌大几倍甚至十几倍。
用美蓝对酵母菌的活细胞进行染色时，由于细胞的新陈代谢作用，细胞内具有较强的还原能力，能使美蓝由蓝色的氧化型变为无色的还原型，因此，具有还原能力的酵母活细胞是无色的、而死细胞或代谢作用微弱的衰老细胞则呈蓝色或淡蓝色，借此即可对酵母菌的死细胞和活细胞进行鉴别。
2.霉菌形态比细菌、放线菌复杂，个体比较大，具有分支的菌丝体和分化的繁殖器官。
霉菌菌丝体(尤其是繁殖菌丝)及孢子的形态特征是识别不同种类霉菌的重要依据。
因此，在观察时要注意菌丝直径大小，菌丝体有无隔膜，营养菌丝有无假根，无性繁殖形成的孢子是那一种？孢子是怎样着生的？3.放线菌是指能形成分枝丝状体或菌丝体的一类革兰氏阳性细菌。
常见放线菌大多能形成菌丝体，紧贴培养基表面或深入培养基内生长的叫基内菌丝，基内菌丝生长到一定阶段还能向空气中生长出气生菌丝，并进一步分化产生孢子丝及孢子。
孢子的表面光滑或粗糙、圆或椭圆，孢子有各种颜色，这些形态特点都是鉴定放线菌的重要依据。
三实验材料1．菌种（1）啤酒酵母、面包酵母、裂殖酵母、热带假丝酵母;（2）毛霉、黑根霉、青霉、黑曲霉;（3）白色链霉菌、红色链霉菌2. 0.1%的美蓝染色液，乳酸石炭酸溶液、乳酸石炭酸棉蓝溶液, 芽孢染色液、无菌水、盖玻片、载玻片，接种钩，接种铲。
四内容与步骤1．酵母菌(1)菌落特征和菌苔特征的观察。
观察菌落表面干燥或湿润、隆起形状、边缘整齐度、大小、颜色等，并用接种环挑菌，注意与培养基结合是否紧密。
霉菌的形态观察实验报告
霉菌的形态观察实验报告
实验目的，通过观察霉菌的形态特征，了解霉菌的生长规律和形态特点。
实验材料和方法，将霉菌培养基均匀涂抹在培养皿上，接种霉菌，放置在25摄氏度下培养一周。
观察霉菌的生长情况，记录下霉菌的形态特征。
实验结果，经过一周的培养，我们观察到霉菌在培养皿上呈现出不同的形态特征。
首先，我们发现霉菌的生长呈现出不规则的菌丝状，有的呈现出圆形，有的呈现出分枝状，有的呈现出丝状。
其次，霉菌的颜色也各不相同，有的呈现出白色，有的呈现出绿色，有的呈现出黑色。
最后，我们还观察到霉菌在培养基上形成了孢子，孢子的形态也各异，有的呈现出囊状，有的呈现出杆状，有的呈现出球状。
实验分析，通过观察和记录，我们发现霉菌的形态特征具有多样性，不同的霉菌在不同的培养条件下呈现出不同的形态特征。
这些形态特征与霉菌的生长环境、营养条件、气候等因素密切相关。
霉菌的形态特征对其生长繁殖、传播途径等具有重要意义，也为我们研究霉菌的生物学特性提供了重要的参考。
实验结论，通过本次实验，我们对霉菌的形态特征有了更深入的了解。
霉菌的形态特征具有多样性和变异性，这为我们研究霉菌的分类、鉴定和防治提供了重要的依据。
同时，我们也意识到了霉菌的生长环境对其形态特征的影响，这对我们预防和控制霉菌的生长具有一定的指导意义。
总结，本次实验通过对霉菌的形态特征进行观察和记录，增加了我们对霉菌的认识，也为我们今后的研究工作提供了重要的参考。
希望通过我们的努力，能够更好地认识和理解霉菌，为人类的健康和生活环境做出更大的贡献。
实验三、霉菌的形态观察和酵母菌的形态观察及死活细胞鉴别
二、基本原理 基本原理
1、酵母菌形态观察和死活细胞鉴别
酵母菌是不运动的单细胞真核微生物， 酵母菌是不运动的单细胞真核微生物，其大小通常比常 见细菌大几倍甚至十几倍。大多数酵母以芽殖 少数以裂殖 见细菌大几倍甚至十几倍。大多数酵母以芽殖、少数以裂殖进 芽殖、 裂殖进 行无性繁殖；有性繁殖则通过结合产生子囊孢子。 子囊孢子。 行无性繁殖；有性繁殖则通过结合产生子囊孢子 美蓝是一种无毒性的染料，它的氧化型呈蓝色 美蓝是一种无毒性的染料，它的氧化型呈蓝色，还原型 氧化型呈蓝色， 无色。用美蓝对酵母的活细胞进行染色时， 无色。用美蓝对酵母的活细胞进行染色时，由于细胞的新陈代 谢作用，细胞内具有较强的还原能力， 谢作用，细胞内具有较强的还原能力，能使美蓝由蓝色的氧化 型变为无色的还原型。因此，具有还原能力的酵母活细胞 型变为无色的还原型。因此，具有还原能力的酵母活细胞是无 活细胞是 色的，而死细胞或代谢作用微弱的衰老细胞则分别呈蓝色和淡 死细胞或代谢作用微弱的衰老细胞则分别呈蓝色和 或代谢作用微弱的衰老细胞则分别呈蓝色 蓝色。 蓝色。
四、操作步骤
在载玻片上滴加一滴乳酸石炭酸棉蓝染色液 子挑取少许菌丝， 子挑取少许菌丝，浸于染液中 散开 盖上盖玻片 用镊 用解剖针将菌丝分 用高倍
低倍镜观察
镜观察菌丝局部
操作要点： 操作要点： • 挑菌和制片时要细心，尽可能保持霉菌自然生长状态。 挑菌和制片时要细心，尽可能保持霉菌自然生长状态。 • 尽可能将菌丝分开，加盖玻片时勿压入气泡，以免影响观察。 尽可能将菌丝分开，加盖玻片时勿压入气泡，以免影响观察。 • 挑取菌丝前镊子和解剖针要在酒精灯上灼烧灭菌。 挑取菌丝前镊子和解剖针要在酒精灯上灼烧灭菌。
实验三 酵母菌的形态观察及死、 酵母菌的形态观察及死、活细胞 的鉴别和霉菌的形态观察 的鉴别和霉菌的形态观察
霉菌的形态实验报告
霉菌的形态实验报告霉菌的形态实验报告引言：霉菌是一类微生物，广泛存在于自然界中的土壤、空气、水体以及植物和动物体内。
它们具有多样的形态和结构，对人类和环境有着重要的影响。
本实验旨在通过观察和研究霉菌的形态特征，了解其生长和繁殖方式，进一步认识霉菌的生物学特性。
实验材料与方法：1. 霉菌培养基：将适量的琼脂糖、葡萄糖、酵母粉和琼脂按比例混合，加入适量的蒸馏水，混合均匀后加热煮沸，倒入培养皿中，冷却凝固。
2. 霉菌样品：从自然环境中采集到的霉菌样品，如土壤、腐烂的植物等。
3. 实验器材：培养皿、显微镜、移液管、烧杯等。
实验步骤：1. 准备好霉菌培养基，将其倒入培养皿中，待凝固。
2. 从采集到的霉菌样品中取一小块，用移液管将其转移到培养皿的表面，轻轻涂抹均匀。
3. 将培养皿放入恒温箱中，设置适宜的温度和湿度，培养一段时间。
4. 取出培养皿，用显微镜观察霉菌的形态特征，记录下所见。
实验结果与讨论：在观察过程中，我们发现了霉菌的多样形态。
有些霉菌呈现出菌丝状的结构，由细长的菌丝组成，形成一个复杂的网络。
这种菌丝状的结构有助于霉菌在环境中的生长和营养吸收。
另外，还有一些霉菌呈现出颗粒状或球状的形态，它们通常生长在潮湿的环境中，如水体或腐烂的植物上。
除了形态上的差异，我们还观察到了霉菌的颜色多样性。
有些霉菌呈现出白色或浅黄色，而另一些则呈现出绿色、黑色或红色等。
这是由于霉菌在生长过程中产生的色素的不同。
色素的产生与霉菌的代谢活动密切相关，不同的色素可能具有不同的生物学功能。
此外，我们还注意到霉菌在培养基上的分布情况。
有些霉菌呈现出均匀的分布，形成一个连续的菌落；而另一些则呈现出不规则的分布，形成散落的斑点。
这可能与霉菌在培养过程中的生长速度和竞争关系有关。
通过这次实验，我们对霉菌的形态特征有了更深入的了解。
霉菌的多样形态和色彩给我们展示了微观世界的奇妙之处。
同时，我们也认识到霉菌在自然界中的重要作用，它们可以分解有机物质，促进土壤肥沃化，还可以产生抗生素等有益物质。
3.霉菌、放线菌的形态观察-4学时
实验三霉菌、放线菌的形态观察一、实验目的1. 学习并掌握观察放线菌、霉菌形态的基本方法。
2. 初步了解放线菌和四类常见霉菌的基本形态特征。
二、实验原理1. 霉菌（真核微生物）：霉菌是一类可产生菌丝体的真核微生物的统称。
霉菌的菌落形态较大，质地疏松，外观干燥，不透明，菌落与培养基间连接紧密，不易挑取，菌落正反面，边缘与中心的颜色、构造通常不一致，有霉味。
霉菌的菌丝体分基内菌丝和气生菌丝，气生菌丝生长到一定阶段分化产生繁殖菌丝，由繁殖菌丝产生孢子。
霉菌菌丝体（尤其是繁殖菌丝）及包子的形态特征是识别不同种类霉菌的重要依据。
菌丝的孢子较大，在低倍镜下即可清晰观察到有隔或无隔菌丝和孢子及巨大的孢子囊。
霉菌菌丝和孢子的宽度通常比放线菌粗的多，常是细菌菌体宽度的几倍至几十倍。
霉菌菌丝较粗大，细胞易收缩变形，而且孢子很容易飞散，所以制标本时常用乳酸石炭酸棉蓝染色液。
此染色液制成的霉菌标本片特点是：（a）细胞不变形；(b)具有杀菌防腐作用，且不易干燥，能保持较长时间；（c）溶液本身呈蓝色，有一定染色效果。
霉菌的菌丝、分生孢子梗和分生孢子的形态常作为分类的重要依据。
曲霉形态特征：表面灰绿色，菌体有许多复杂的分枝菌丝构成。
营养菌丝具有分隔；气生菌丝的一部分形成长而粗糙的分生孢子梗，顶端产生烧瓶形或近球形顶囊，表面产生许多小梗，小梗上着生成串的表面粗糙的球形分生孢子。
根霉形态特征：匍匐菌丝弧形，无色，向四周蔓延。
放线菌形态特征：呈菌丝状生长，以孢子繁殖。
显微镜下呈紫红色。
青霉形态特征：菌丝初期白色，颜色逐渐由白转变为绿或蓝，菌丝有隔膜。
气生菌丝特化成子实体，子实体类型为分生孢子头。
霉菌的培养和观察方法：（1）载玻片培养观察法：无菌操作将培养基薄层置于载玻片上，接种后盖上盖玻片培养，霉菌即在载玻片和盖玻片之间有限的空间内沿盖玻片横向生长。
培养一定时间后，将载玻片上的培养物置于显微镜下观察，这种方法既可以保持霉菌自然生长状态，还便于观察不同发育期的培养物。
实验三 霉菌的形态观察
无性生殖体：
分生孢子梗、顶囊、小梗、分生孢子
பைடு நூலகம்
分生孢子
小梗 顶囊 分生孢子梗
足细胞
有隔菌丝
分生孢子头发辫状
黑曲霉的显微形态
青霉
菌丝体形态：
• 营养菌丝有横隔，无足细胞 • 分生孢子梗有横隔 • 分生孢子头无顶囊，呈帚状 • 小梗顶串生分生孢子（球形 、椭圆或短圆柱状）
电子显微 镜2400倍
青霉的显微形态
五、结果记录
（绘制说明所观察到的几种 霉菌的形态特征。）
根霉
显微形态：菌丝体无隔，有 假根和匍匐枝，其中，匍匐
• 黑根霉（匍枝根霉）枝无色，假根发达呈褐色。
• 菌落：初期白色，老熟 后灰褐色
孢子囊簇生呈黑色或褐色， 可形成球状接合孢子。
孢子囊
假根
匍匐枝 接合孢子
孢囊孢子
接合孢子
• 黑曲霉
曲霉
菌丝体心态：有横隔，常无色，老熟
时变为浅黄色至褐色，有足细胞
实验三 霉菌的形态观察
一、实验目的
(1)掌握低倍镜的使用。 (2)学习霉菌的基本形态特征。
一、实验目的
(1)掌握低倍镜的使用。 (2)学习霉菌的基本形态特征。
二、实验材料
显微镜 青霉标本片 曲霉标本片 根霉标本片
三、原理
霉菌菌丝体及孢子的形态特征是识别不同种类霉菌的 重要依据。霉菌菌丝和孢子的大小通常比细菌和放线菌大得 多，因此用低倍镜即可观察。用乳酸石炭酸棉蓝染色液制成 的霉菌标本片的特点：细胞不变形；具有杀菌防腐作用，且 不易干燥，能保存较长时间；能防止孢子分散；溶液本事呈 蓝色，能增强反差，具有较好的染色效果，在显微镜下易于 观察。
四、实验步骤
①转换到低倍镜，调光；
霉菌的培养及形态观察实验报告
山东大学实验报告2017年11月6日________________________________________ _________________________ 科目：微生物学实验题目：霉菌的培养及形态观察姓名：丁志康一、目的要求1.学习并掌握观察霉菌形态的基本方法。
2.了解四类常见霉菌的基本形态特征。
二、基本原理霉菌可产生复什分枝的菌丝体，分基内菌丝和气生菌丝，气生菌丝生长到一定阶段分化产生繁殖菌丝，由繁殖菌丝产生孢子。
霉菌菌丝体（尤其是繁殖菌丝）及孢子的形态特征是识别不同种类霉菌的重要依据。
霉菌菌丝和孢子的宽度通常比细菌和放线菌粗的多（约为3-10μm），常是细菌菌体宽度的几倍至几十倍，因此，用低倍镜即可观察。
观察霉菌的形态有多种方法，常用的有下列三种：1. 直接制片观察法：是将培养物置于乳酸石碳酸棉蓝染色液中，制成霉菌制片镜检。
用此染色制成的霉菌制片的特点是：细胞不变形；具有防腐作用，不易干燥，能保持较长时间；能防止孢子飞散；染色的蓝色能增强反差。
必要时，还可用树胶封固，制成永久标本长期保存。
2．载玻片培养观察法：用无菌操作将培养基琼脂薄层置于载玻片上，接种后盖上盖玻片培养，霉菌就在载玻片和盖玻片之间的有限空间内沿盖玻片横向生长。
培养一定时间后，将载玻片上的培养物置显微镜下观察。
这种方法既可以保持霉菌自然生长状态，还便于观察不同发育期培养物。
3．玻璃纸培养观察法：玻璃纸是一种透明的半透膜，将灭菌的玻璃纸覆盖在琼脂平板表面，然后将霉菌接种于玻璃纸上，经培养，霉菌在玻璃纸上生长形成菌苔。
观察时，揭下玻璃纸，固定在载玻片上直接镜检。
这种方法既能保持霉菌的自然生长状态，也便于观察不同生长期的形态特征。
本次试验使用的是第二种方法，即载玻片培养观察法。
三、器材1、菌种：曲霉，青霉，根霉和毛霉培养2-5d的马铃薯斜面培养物。
2、培养基：土豆琼脂培养基。
3、溶液或试剂：蒸馏水。
4、仪器或其他用具：无菌吸管，平皿，载玻片，盖玻片，U形玻棒，解剖针，解剖刀，镊子，95%乙醇以及显微镜等。
霉菌的形态观察
微生物学实验报告题目：霉菌的形态观察姓名：学号：年级班级：组别：同组者：时间：【实验器材】1．菌种曲霉( Aspergillus sp. ) ，青霉，根霉( Rhizopus sp. ) 和毛霉（Mucor sp. ）培养2~5d 的马铃薯琼脂平板培养物。
2．培养基马铃薯培养基（简称PDA）3．仪器或其他用具无菌吸管，平皿，载玻片，盖玻片，U型玻棒，解剖刀，镊子，50%乙醇，20%的甘油以及显微镜等。
【目的要求】1．学习并掌握观察霉菌形态的基本方法。
2．了解四类常见霉菌的基本形态特征。
【基本原理】霉菌菌丝体由基内菌丝、气生菌丝和繁殖菌丝组成，其菌丝比细菌及放线菌粗几倍到几十倍。
可以采取直接制片和透明胶带法观察，也可以采取载玻片培养观察法，通过无菌操作将薄层培养基琼脂置于载玻片上，接种后盖上盖玻片培养，使菌丝体在盖玻片和载玻片之间的培养基之间的培养基中生长，将培养物直接置于显微镜下可观察到霉菌自然生长状态并可连续观察不同发育期的菌体结构特征变化。
【操作步骤】1．培养小室的灭菌在平皿皿底铺一张略小于皿底的圆滤纸片，再放一U形玻棒，其上放一洁净载玻片和两块盖玻片，盖上皿盖、包扎后于110℃灭菌20~30min，烘干备用。
2．琼脂块制备通过无菌操作，用解剖刀由马铃薯琼脂薄层平板上切下1cm2左右的琼脂块，将其移至培养小室的载玻片上，每片两块。
3．接种通过无菌操作，用接种针从黑曲霉或黑根霉马铃薯琼脂平板培养物中挑取很少量孢子，接种于小室中琼脂块边缘上，将盖玻片覆盖在琼脂块上。
4．培养通过无菌操作，在培养小室中圆滤纸片上加3~5mL灭菌的20%甘油（用于保持湿度），盖上皿盖，于28℃培养7天。
5．镜检取出载玻片用低倍镜和高倍镜镜检。
【实验结果】1．图片：四种霉菌的形态假根孢子囊匍匐菌丝图一：根霉（10×10）图二：曲霉（10×10）足细胞孢子梗横隔图三：曲霉孢子（10×40）图四：曲霉足细胞（10×40）分生孢子梗图五：毛霉（10×10）图六：青霉（10×10）黑曲霉和黑根霉在形态特征上有何区别？答：黑根霉菌丝无隔，有匍匐菌丝和假根，假根着生处有直立的向上孢子囊梗，其顶端膨大成孢子囊，孢子囊底部有半球形囊轴。
实验三+霉菌的形态结构观察
霉菌的菌丝
❖ 从结构来看，霉菌的菌丝有两种： ❖无隔菌丝：低等霉菌如根霉、毛 霉等 ❖有隔菌丝：高等霉菌如青霉、曲 霉等
❖在功能上，霉菌的菌丝已有分化， 可分为：
–①营养菌丝： –②气生菌丝： –③繁殖菌丝：
（三）霉菌的繁殖方式和繁殖结构
• 霉菌主要靠形成各 种无性孢子和有性 孢子进行繁殖。
• 霉菌的无性孢子 厚垣孢子 节孢子 分生孢子 孢囊孢子
• 酵母：将芽体说成是子囊孢子或芽孢
实验三、霉菌形态结构的观察
实验目的：
❖学习霉菌的制片和染色技术； ❖观察和掌握重要霉菌的形态结构特征
预习检查
• 显微镜下观察霉菌与放线菌的菌丝有什 么异同。
• 根霉、毛霉、曲霉和青霉在显微镜下的 最主要鉴别特征有哪些？
一、实验材料
❖1、黑曲霉、青霉、毛霉平板培养材料和 湿室培养材料。
❖2、黑根霉（面包霉）装片
霉菌的形态结构观察
霉菌（mould，mold）——凡生长在营养基质上形成绒 毛状、蜘蛛网状或絮状菌丝体的小型真菌，统称为霉菌。
（二）霉菌的形态和大小
霉菌的营养体由分支或不 分支的菌丝构成。许多 菌丝相互交织形成菌丝 体。
菌丝的大小：直径约为 2～ 10μm，在光学显微 镜下，菌丝细胞呈管状。
3、观察自制黑曲霉装片和湿室培养材料（菌丝有无 横隔、分生孢子梗着生位置、顶囊、分生孢子的位 置、足细胞等）
4、观察青霉湿室培养材料（菌丝有无横隔、分生孢 子梗和分生孢子穗形态、有无足细胞等）
实验报告
• 绘出黑根霉、黑曲霉、青霉、毛霉 的形 态结构并标明各部分名称。
• 除了培养特征外，请设计一个方案可快 速地从显微特征方面把根霉、毛霉、曲 霉和青霉鉴定出来。
真核微生物构造和形态观察--项目实训：霉菌的形态观察
：简易观察法
➢ 乳酸石炭酸棉蓝染色液使菌丝细胞不收缩变形，孢子不易分散，不易干燥，能保持 较长时间，溶液本身呈蓝色，有一定的染色效果；
➢ 于一洁净载玻片上，滴一滴乳酸石炭酸棉蓝溶液，用接种钩从菌落边缘处取少量带 有孢子的菌丝于染色液中，再细心地把菌丝挑散开，然后用盖玻片盖上，注意不要 产生气泡。
五、项目实训：霉菌的形态观察
２ 实训用品
➢ 菌种：黑曲霉、产黄青霉、腐乳毛霉、黑根霉等； ➢ 培养基和试剂：察氏培养基、半固体PDA培养基、乳酸石炭酸棉蓝溶液； ➢ 仪器或其他用具：显微镜、培养箱、培养皿、水浴锅、乳酸石炭酸棉蓝染色液、载
玻片、盖玻片、无菌水、接种环、接种钩、解剖针、酒精灯、火柴、滤纸、玻璃铅 笔等。
察的霉菌孢子至湿室内的载玻片上，接种时用接种环在载玻片上轻轻碰几下即可； c.加培养基：用无菌细口滴管吸取少量融化约50℃的培养基，滴加到载玻片的接种
处（滴得圆而薄）； d.加盖玻片：在培养基未凝固前，盖盖玻片与其上； e.加保湿剂：往培养皿中倒人约3ml20%的无菌甘油，置于28℃培养箱中培养2-3
天，取出，置于显微镜下观察霉菌的形态。
五、项目实训：霉菌的形态观察
４ 方法二：载玻片湿室培养法
➢ 操作步骤图示：
五、项目实训：霉菌的形态观察
４ 方法二：载玻片湿室培养法
➢ 观察结果图示：
五、项目实训：霉菌的形态观察
５ 方法三：黑根霉假根培养法
➢ 操作步骤：a.在水浴锅中，融化大试管PDA培养基1管； b.将上述以融化的培养基以无菌操作方式注入已灭过菌的空培养皿中，
待凝； c.于上述培养皿中央，用接种环蘸取黑根霉孢子，在平板表面划线接种，将平
皿倒置，在皿盖内放一无菌载玻片； d.置于28℃培养箱中培养2-3天，可见根霉的气生菌丝倒挂成胡须状，菌丝与
霉菌的形态观察实验
霉菌的形态观察实验霉菌菌丝比较粗大（菌丝和孢子的直径达到3-10μm），通常是细菌菌体宽度的几倍至几十倍，因而可用低倍、高倍镜观察。
霉菌菌丝细胞容易收缩变形，孢子容易飞扬，在制备霉菌标本时，常用乳酸石炭酸溶液作为介质，具有不使细胞变形，可杀菌防腐，不易干燥，能保持较长时间等优点。
一、实验目的1. 学习并掌握观察霉菌形态的基本方法；2. 了解常见霉菌（根霉、毛霉、曲霉、青霉、红曲霉、白地霉）的基本形态特征。
二、实验材料1. 菌种：根霉（Rhizopus sp.）、毛霉（Mucor sp.）、曲霉（Aspergillus sp.）、青霉（Penicillium sp.）、红曲霉（Monascus sp.）的平板培养物，白地霉（Geotrichum candidum）摇瓶培养液。
2. 培养基：土豆琼脂培养基（PDA）或察氏培养基。
3. 溶液或试剂：乳酸石炭酸棉蓝染色液。
4. 其他：无菌吸管，平皿，载玻片，盖玻片，解剖针，显微镜等。
三、实验原理霉菌菌丝比较粗大（菌丝和孢子的直径达到3-10μm），通常是细菌菌体宽度的几倍至几十倍，因而可用低倍、高倍镜观察。
霉菌菌丝细胞容易收缩变形，孢子容易飞扬，在制备霉菌标本时，常用乳酸石炭酸溶液作为介质，具有不使细胞变形，可杀菌防腐，不易干燥，能保持较长时间等优点。
若加入棉蓝，又具有一定的染色效果。
霉菌的有些结构在制片过程中易被破坏，影响观察，可采用载片培养法。
此法便于直接在显微镜下观察，尤其适用于根霉的假根、曲霉的足细胞及分生孢子链等结构的着生和生长情况的观察。
并且还可以在同一标本上观察到微生物发育的不同阶段的形态。
四、操作步骤（一）一般观察法：1. 点种培养：用接种针沾取斜面少许孢子在无菌的察氏培养基中央穿刺接种（倒置培养皿穿刺接种），30℃下培养7-10天，形成巨大菌落培养物。
2. 直接制片：在载玻片中央加一滴乳酸石炭酸棉蓝染色液于洁净，打开霉菌平板培养物，用解剖针从菌落的边缘挑取少量带有孢子的菌丝，放入载玻片的染液中，细心地把菌丝挑散开，加盖玻片，注意不要产生气泡，置于显微镜下观察，菌丝呈兰色，颜色的深度随菌龄的增加而减弱。
霉菌形态观察实验报告
一、实验目的1. 学习并掌握观察霉菌形态的基本方法；2. 了解四类常见霉菌（曲霉、毛霉、青霉、根霉）的基本形态特征；3. 巩固显微镜操作技术及无菌操作技术。
二、实验原理霉菌属于真菌的一种，可产生分枝的菌丝体，分为基内菌丝和气生菌丝。
气生菌丝生长到一定阶段分化产生繁殖菌丝，由繁殖菌丝产生孢子。
霉菌菌丝体（尤其是繁殖菌丝）及孢子的形态特征是识别不同种类霉菌的重要依据。
霉菌菌丝和孢子的宽度通常比细菌和放线菌粗得多（约3～10μm），常是细菌菌体宽度的几倍至几十倍，因此，用低倍显微镜即可观察。
三、实验器材1. 菌种：曲霉（Aspergillus sp.）、青霉、根霉（Rhizopus sp.）、毛霉（Mucor sp.）；2. 培养基：马铃薯琼脂平板；3. 染色剂：乳酸石炭酸棉蓝染色液；4. 实验器材：载玻片、盖玻片、接种针、显微镜、无菌操作台、酒精灯、镊子、无菌水等。
四、实验步骤1. 霉菌接种（1）将曲霉、青霉、根霉、毛霉分别接种于马铃薯琼脂平板；（2）置于恒温培养箱中，培养条件为25℃、湿度70%；（3）培养2～5天后，观察菌落特征。
2. 霉菌制片（1）用无菌操作将培养好的霉菌菌落挑取少量；（2）将霉菌菌落涂布于载玻片上，用盖玻片轻轻压平；（3）将载玻片置于乳酸石炭酸棉蓝染色液中，染色3～5分钟；（4）取出载玻片，用无菌水冲洗干净，晾干。
3. 霉菌观察（1）将制片置于显微镜下，用低倍镜观察霉菌菌落特征；（2）观察菌丝的粗细、颜色、分隔情况，以及孢子的形状、大小、颜色等；（3）对比四类常见霉菌的形态特征。
五、实验结果与分析1. 菌落特征观察（1）曲霉：菌落呈放射状，菌丝呈淡黄色，孢子呈球形，颜色为绿色；（2）青霉：菌落呈圆形，菌丝呈蓝绿色，孢子呈椭圆形，颜色为蓝绿色；（3）根霉：菌落呈白色，菌丝呈白色，孢子呈椭圆形，颜色为白色；（4）毛霉：菌落呈白色，菌丝呈白色，孢子呈球形，颜色为白色。
2. 霉菌制片观察（1）曲霉：菌丝粗大，分隔明显，孢子球形，绿色；（2）青霉：菌丝粗大，分隔明显，孢子椭圆形，蓝绿色；（3）根霉：菌丝细小，分隔不明显，孢子椭圆形，白色；（4）毛霉：菌丝细小，分隔不明显，孢子球形，白色。
实验三 微生物形态观察及格兰仕染色
七、思考题
1．简述平板上你分离得到的微生物的菌落特征，包括菌落的大小、颜色、隆起程度等，并据此初步区别出大肠杆菌和枯草芽孢杆菌两类微生物。
2.简述曲霉、青霉、根霉和毛霉的菌落颜色及特征。
3.绘制曲霉、青霉、根霉和毛霉的个体形态图，并注明各部位名称。
一般新培养酵母的死亡率应在1%以下，生产上使用的酵母死亡率在3%以下。
2.显微形态检查
载玻片上放一小滴蒸馏水，挑酵母培养物少许，盖上盖玻片，在高倍镜下观察。优良健壮的酵母菌，应形态整齐均匀，表面平滑，细胞质透明均一。年幼健壮的酵母细胞内部充满细胞质；老熟的细胞出现液泡，呈灰色，折光性较强；衰老的细胞中液泡多，颗粒性贮藏物多，折光性强。
3. 死亡率检查
方法同上，可用水浸片法，也可用血球计数板法。酵母细胞用0.025%美兰水溶液染色后，由于活细胞具有脱氢酶活力，可将兰色的美兰还原成无色的美白，因此染不上颜色，而死细胞则被染上兰色。
(1) 菌丝有隔或无隔；
(2) 无性繁殖的方式；
(3) 有性繁殖的方式。
8.你主要根据哪些形态特征来区分上述四种霉菌?
9.你认为哪些环节会影响革兰氏染色结果的正确性？其中最关键的环节是什么？
10.进行革兰氏染色时，为什么特别强调菌龄不能太老，用老龄细菌染色会出现什么问题？
参考文献
1.周德庆. 微生物学实验教程-(第2版).北京：高等教育出版社，2006
2.张玲. 微生物学实验指导. 北京：清华大学出版社，2007
3.夏立梨. 微生物学实验指导. 北京：高等教育出版社，1999
一、实验目的
三、实验材料
酵母培养物。
四、仪器设备及用具
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目的要求
➢学习并掌握观察霉菌形态的基本方法。 ➢了解四类常见霉菌的基本形态特征。
基本原理
霉菌的营养体是分枝的丝状体，分为基内菌丝 和气生菌丝。气生菌丝中又可分化出繁殖丝。不同 霉菌的繁殖菌丝可以形成不同的孢子。常见的观察 霉菌的有三种：直接制片观察法、载玻片培养观察 法和玻璃纸培养观察法。
➢ 用解剖针小心分散菌丝，盖上盖玻片；
➢ 置低倍镜或高倍镜下观察。
根霉：假根、匍匐菌丝、孢囊梗、孢子囊及孢子囊孢子
毛霉：菌丝、孢囊梗、孢子囊及孢子囊孢子
青霉：菌丝、分生孢子梗、帚状分支小梗及分生孢子
曲霉：菌丝、足细胞、分生孢子梗、初生小梗、 次生小梗、顶囊、分生孢子
实验结果 ➢ 绘图说明你所观察到的霉菌的形态特征。
思考题 ➢你主要根据哪些形态特征来区分四种不同的霉菌？
(包括菌落特征与个体特征)
➢ 溶液或试剂 乳酸石碳酸棉蓝染色液、 50％乙醇
➢ 仪器或其他用具 显微镜，盖玻片，载玻片，解剖针等。
直接制片观察法
➢ 在载玻片中央加一滴乳酸石炭酸棉蓝染色液；
➢ 用解剖针挑取少量已产孢子的霉菌菌丝，先用50 ％乙醇洗去脱落的孢子，再放在载玻片的染液中 (青霉、曲霉取菌丝时需连同培养基一起挑取)；
霉菌菌丝较粗大，细胞易收缩变形，且孢子容 易飞散，所以采用直接制片法制标本时常用乳酸石 炭酸棉蓝染色液。此染色液制成的霉菌标本片的特 点是：细胞不变形，具有杀菌防腐作用，且不易干 燥，能保持较长时间，溶液本身呈蓝色，有一定染 色效果。
实验器材
➢ 菌种 曲霉、青霉、根霉、毛霉
➢ 培养基 察氏琼脂培养基