淋巴细胞亚群分析与临床---陈建林

一、流式淋巴细胞亚群检测的临床意义1.了解不同情况下机体免疫功能状态肿瘤（手术、放化疗患者的免疫功能检测）感染（脓毒血症、重症监护患者等）自身免疫病、免疫缺陷病等不孕不育某些血液系统疾病其他：慢性肾病、骨髓移植恢复期等2.辅助临床疾病的诊断3.探索疾病的发病机理、病程及预后4.观察监测疗效，指导临床建立治疗方案二、淋巴细胞的分类及功能B细胞(CD19+)：体液免疫辅助/诱导T细胞(Th):介导和增强免疫应答(CD4+)淋巴细胞T细胞(CD3+）细胞毒性(Tc) /抑制性T细胞(Ts): 抗病毒、抗肿瘤(CD8+)调节性T 细胞(Treg):抑制免疫应答、维持免疫耐受(CD4+CD25+)NK细胞：抗肿瘤、抗病毒感染和免疫调节(CD16+/CD56+)三、流式淋巴细胞亚群检测的临床应用淋巴细胞亚群检测与儿科疾病（一）评估机体免疫功能状态多种小儿疾病原发或继发疾病均存在T细胞异常，观察T细胞变化，对小儿疾病病因、发病机制以及协助临床诊断与治疗等具有重要价值。

类型指标CD3+ CD4+CD8+CD4+/CD8+细菌性肺炎↓↓↓↓↑↓↓支原体肺炎↓↓↓↓↓↓↓↓病毒性肺炎↓↓↓↓↓↓↓↓传单增多症↑↑↓↓↑↑↓↓支气管哮喘↑↓↑T 细胞CD4、CD8、CD3 检测介入时间-----结合退热、消咳、肺罗音消失时间观察T细胞变化，特别针对儿科患者可合理调节抗生素使用，改善预后，避免药物损伤.（二）原发性免疫缺陷病的早期识别和干预1.流式细胞仪分析T细胞亚群(包括CD3+、CD4+和CD8+)、B细胞(CD19+) 和NK细胞(CD16+/CD56+)比例等主要检查项目,可对大多数原发性免疫缺陷病患儿作出诊断。

2.评估免疫接种前机体免疫状态案例：T/B细胞联合免疫缺陷患儿，未评价免疫系统功能，直接接种灭活疫苗，造成严重感染T 细胞CD4、CD8、CD3 检测介入时间-----结合患儿科反复感染的临床症状及时检测；在疫苗接种前2-3天作出评估。

淋巴细胞亚群检测在肿瘤临床的应用恶性肿瘤的发生、发展、转移与人体免疫功能下降密切相关。

人体的抗肿瘤免疫以细胞免疫为主，体内发挥抗肿瘤免疫作用主要由CD4和CD8细胞完成。

（一）评价肿瘤患者的整体免疫功能1．肿瘤患者处免疫抑制状态，T淋巴细胞降低。

2．肿瘤患者T淋巴细胞与病程相关，随病程逐渐降低。

CD3、CD4、CD4/CD8细胞数下降程度：Ⅳ期> Ⅲ期> Ⅱ期>Ⅰ期3．肿瘤患者T淋巴细胞持续低下，转移率高、易复发4. 肿瘤患者的化疗、放疗、手术治疗会导致免疫抑制。

在化疗或放疗或手术前，及时给予免疫增强同步治疗，有助于提高疗效。

（二）疗效观察，判断预后1.放化疗结束3-4周后，淋巴细胞亚群恢复到放化疗前的水平，甚至恢复正常的患者，提示预后较好，总生存率也相对较高。

2.淋巴细胞检测恢复较慢者，预后较差。

（三）协助诊断外周血淋巴细胞亚群的检测虽无组织学和解剖学部位的特异性，但由于恶性肿瘤与良性肿瘤病变之间的明显差异，以及在肿瘤早期甚至在癌前病变时即可有明显改变，如CIN和宫颈微小浸润癌。

因此测定患者外周血淋巴细胞亚群，尤其是CD4 /CD8比值可协助临床对恶性肿瘤的诊断与鉴别诊断。

T 细胞CD4、CD8、CD3 检测介入时间-----1、入院基础检测（了解患者免疫功能初始状态）2、放疗、化疗、手术前检测（评估治疗前免疫状态，预测疗效及风险）3、放疗、化疗、手术后检测（评估治疗后免疫改善状况）4、出院前检测（预后判断）5、易转移、复发，每月跟踪检测（判断是否发生转移、复发）淋巴细胞亚群检测与常见呼吸系统疾病呼吸道是病毒感染主要靶器官，病毒感染可降低呼吸道防御功能，从而引起反复感染。

免疫功能低下患者，细菌性肺炎发病率增高，其死亡率10倍于正常人，特别是金黄色葡萄球菌感染，由免疫力低下引起的肺炎约占肺炎的5%1.支气管哮喘气道炎症是支气管哮喘的病理基础，肥大细胞释放炎性介质，引起支气管哮喘早期速发反应，而激活肥大细胞和启动炎症反应者主要是T淋巴细胞。

●其反复发作、难愈重要原因是反复呼吸道感染，此类患者均存在免疫细胞失衡和免疫紊乱。

●同时哮喘患者由于长期不规范应用抗生素和全身激素，更加使免疫功能紊乱，感染与免疫紊乱互为因果，形成恶性循环。

T 细胞CD4、CD8、CD3 检测介入时间-----急性发作期，与血气和肺功能FEV%检测同步参考。

用药期间，每2-4周随诊检测1次，3个月后每2个月左右随诊检测1次，共观察12个月，定时监测控制。

2．慢性阻塞性肺疾病(COPD)●COPD患者外周血CD8+ T细胞显著增加,并且COPD患者CD4+ 与CD8+ T细胞比例与肺功能和血清IgE浓度呈负相关。

●T细胞可能参与了COPD的炎症过程。

3. T淋巴细胞亚群与肺结核结核病患者外周血中CD3、CD4绝对计数、CD4/CD8明显低于正常人，CD8计数高于正常人，对了解患者免疫状态、指导治疗、考核疗效有重要的临床意义。

淋巴细胞亚群检测与常见肾脏疾病绝大多数肾脏疾病都是人体的免疫功能异常引起的，其中不仅有细胞、体液免疫参与，而且往往涉及补体的激活，免疫沉积物的形成，过程错综复杂，往往是肾脏疾病不宜治愈的主要原因。

通过监测患者免疫功能对疾病的治疗有重要意义。

南京军区总医院肾病研究所肾病诊疗指南肾病类型细胞免疫检查随访IgA肾病淋巴细胞亚群大量使用免疫抑制剂需监测免疫功能变化膜性肾病淋巴细胞亚群微小病变肾病T细胞亚群合并感染者需监测外周血T细胞亚群局灶节段肾小球硬化症合并感染者需监测外周血T细胞亚群膜增殖性肾小球肾炎淋巴细胞亚群急进性肾炎综合症淋巴细胞亚群狼疮性肾炎淋巴细胞亚群监测免疫功能；避免感染过敏性紫癜性肾炎淋巴细胞亚群ANCA相关血管炎淋巴细胞亚群肾淀粉样变性淋巴细胞亚群多发性骨髓瘤淋巴细胞亚群淋巴细胞监测糖尿病肾病淋巴细胞亚群1)辅助诊断，评价肾脏病患者的整体免疫功能。

2)监测免疫状况，指导激素、免疫抑制剂和免疫调节剂的使用。

3)预测肾移植病人的排斥反应发生及严重程度。

4)反复尿路感染患者机体的全身免疫功能紊乱和尿路局部免疫功能低下，是造成尿路感染反复发作的重要原因。

免疫功能低下发生尿路感染者，单纯使用广谱抗菌素，会导致霉菌感染和耐药菌株产生及菌群失调。

结合免疫调节治疗，合理调节抗生素使用，缩短治疗及住院时间，改善患者治疗效果。

淋巴细胞亚群检测与风湿免疫性疾病自免疾病的发生是T细胞攻击自身细胞和组织，抗原免疫诱导自身免疫反应产生，导致组织器官损伤和生理功能障碍。

各种风湿免疫性疾病淋巴细胞亚群分析特点：疾病CD3CD4CD8CD4/CD8NK系统性红斑狼疮类风湿性关节炎自身免疫性溶血性贫血重症肌无力1. 类风湿关节炎（RA）RA是一种病因复杂的自身免疫性疾病, T细胞介导自身免疫反应失衡，是造成病人组织病理损伤重要原因，通过T细胞分析可评估RA缓解、复发可能性，指导选择停药时机活动期RA病人CD3、CD4、CD8等细胞与缓解期RA病人比较有显著差异T 细胞CD4、CD8、CD3 检测介入时间-----RA 患者活动期、缓解期，可通过T细胞变化，配合免疫抑制药物控制T细胞活化，从而抑制急性炎症反应。

2. 系统性红斑狼疮（SLE）免疫调节障碍在SLE中表现突出，大量自身抗体产生和丙种球蛋白升高，说明B细胞高度增殖活跃。

T淋巴细胞绝对量虽减少，但T辅助细胞百分比常减少，而T抑制细胞百分比增加，使T4+/T8+比例失调。

近年研究发现，淋巴细胞亚群分析能很好的鉴别活动期和非活动期SLE，对临床治疗有很好的指导作用。

如下表。

淋巴细胞亚群检测与感染科疾病感染和抗感染免疫贯穿于整个感染发生、发展及其不同转归全过程。

人体抗感染作用主要由细胞免疫介导，免疫功能紊乱，易引发感染性疾病；感染同时可直接抑制、干扰和损伤免疫系统。

1．乙型肝炎。

乙型病毒性肝炎，当患者免疫功能低下便无法清除HBV病毒，以致其在体内持续存在，通过检测T淋巴细胞数值变化，可判断患者有无慢性化倾向，并为临床准确使用干扰素等免疫调节剂治疗提供依据。

T 细胞CD4、CD8、CD3 检测介入时间-----与HBV病毒载量检测同步或与之相对应：如HBV DNA病毒复制期、HBV持续感染期、HBV清除过程中、肝功能谷丙转氨酶(ALT)异常期、HBeAg抗体呈阳性后监测等。

2.HIV感染和AIDSCD4+T淋巴细胞是HIV感染的主要细胞。

CD4+T淋巴细胞计数不仅可以用于评价HIV 感染后免疫系统受损的程度，而且可以指导临床预防及治疗。

HIV感染时CD4+T细胞的变化规律CD4+T细胞结合病毒载量预测机会性感染、把握治疗时机治疗时机：CD4+T<350/ul；CD4+T 350～500/，快速减少中或病毒拷贝>105/ml 预防机会性感染：CD4+T<200/ul, 预防性抗PCP治疗。

T 细胞CD4、CD8、CD3 检测介入时间-----免疫学HIV抗体检测阳性或待复查，怀疑HIV感染，HIV的治疗过程中结合病毒载量分析治疗效果，检测免疫功能及预防机会感染时。