微生物的抑菌圈检测方法
日化产品长效抑菌效果的评价方法
日化产品长效抑菌效果的评价方法一、微生物培养法微生物培养法是通过将一定量的日化产品加入培养基中,然后接种微生物,在一定温度下培养一段时间后,观察和测量生长的菌落数来评价抑菌效果。
该方法可以直观地反映微生物的生长情况,从而判断抑菌效果。
二、抑菌圈法抑菌圈法是在琼脂平板上划线接种已知菌种,然后将待测的日化产品涂布于平板上,观察抑菌圈的大小来判断抑菌效果。
该方法简单易行,适用于表面抑菌剂效果的测定。
三、重量法重量法是通过测量抑菌前后样品的质量变化来评价抑菌效果。
该方法适用于能够去除微生物的日化产品效果的测定,如某些洗手液、清洁剂等。
四、表面观察法表面观察法是通过观察实验前后样品表面的变化来判断抑菌效果。
该方法适用于表面杀菌剂效果的测定,如某些消毒液、抗菌湿巾等。
五、残留量法残留量法是通过测量抑菌后样品中有效成分的残留量来判断抑菌效果。
该方法适用于能够定量检测有效成分的日化产品效果的测定。
六、计时法计时法是在一定的时间内,观察抑菌剂对微生物生长的抑制作用,通过比较抑菌剂处理组和对照组微生物的生长情况来判断抑菌效果。
该方法适用于能够观察到微生物生长变化的抑菌剂效果的测定。
七、反复实验法反复实验法是在相同条件下进行多次重复实验,取平均值作为实验结果,以提高实验的准确性和可靠性。
该方法适用于任何需要重复实验的抑菌剂效果的测定。
八、质量控制法质量控制法是通过建立质量控制标准,对实验全过程进行质量监控,以保证实验结果的准确性和可靠性。
该方法适用于任何需要保证实验质量的抑菌剂效果的测定。
九、微生物计数法微生物计数法是通过在琼脂平板上接种一定量的待测微生物样品,在一定温度下培养一段时间后,对菌落进行计数来判断抑菌效果。
该方法适用于能够进行微生物计数的抑菌剂效果的测定。
抑菌圈实验实验报告
一、实验目的本实验旨在通过抑菌圈实验,观察不同抗生素对特定细菌的抑菌效果,了解抗生素的抗菌活性,并学习如何通过抑菌圈的大小判断细菌对抗生素的敏感性。
二、实验原理抑菌圈实验是微生物学中常用的方法之一,用于检测抗生素对细菌的抑制作用。
实验原理基于抗生素对细菌生长的抑制作用,当抗生素与细菌接触时,细菌的生长会受到抑制,从而在含有抗生素的培养基上形成一个无细菌生长的区域,即抑菌圈。
抑菌圈的大小可以反映抗生素的抗菌活性,通常抑菌圈越大,说明抗生素的抗菌活性越强。
三、实验材料与仪器1. 材料:- 细菌菌株:金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)- 抗生素:青霉素、红霉素、庆大霉素、链霉素- 琼脂培养基- 牛肉膏蛋白胨培养基- 水浴箱- 滴管- 铅笔- 玻璃板2. 仪器:- 培养箱- 电子天平- 灭菌器四、实验步骤1. 制备培养基:- 称取牛肉膏蛋白胨培养基,加入适量的蒸馏水,溶解后用电子天平称量,使培养基浓度为10g/L。
- 将溶解后的培养基分装至锥形瓶中,每瓶100mL,121℃高压灭菌15分钟。
- 待培养基冷却至50℃左右,加入琼脂粉,充分搅拌均匀。
- 将琼脂培养基倒入培养皿中,待其凝固。
2. 接种细菌:- 将金黄色葡萄球菌接种至牛肉膏蛋白胨培养基中,37℃培养24小时。
3. 制备抗生素纸片:- 将抗生素粉末用生理盐水溶解,配制成一定浓度的溶液。
- 用滴管将溶液滴加到无菌滤纸上,使滤纸充分浸润。
- 将滤纸晾干,制成抗生素纸片。
4. 抑菌圈实验:- 将制备好的琼脂培养基上的细菌菌落刮去,并用无菌镊子将抗生素纸片贴在培养基表面。
- 将培养皿倒置放入培养箱中,37℃培养24小时。
5. 观察与记录:- 观察培养皿中抗生素纸片周围是否形成抑菌圈,并记录抑菌圈的大小。
五、实验结果与分析1. 实验结果:- 青霉素:抑菌圈直径为15mm- 红霉素:抑菌圈直径为10mm- 庆大霉素:抑菌圈直径为20mm- 链霉素:抑菌圈直径为8mm2. 结果分析:- 根据抑菌圈的大小,可以判断金黄色葡萄球菌对不同抗生素的敏感性。
抗生素微生物检定管碟法
抗生素微生物检定管碟法抗生素微生物检定法可分为:(1)稀释法;(2)比浊法;(3)琼脂扩散法(管碟法和打孔法)。
各国药典通常采用后两种方法测定抗生素的效价。
管碟法:利用抗生素在摊布特定试验菌的固体培养基内成球面形扩散,形成含一定浓度抗生素球形区,抑制了试验菌的繁殖而呈现出透明的抑菌圈。
此法系根据抗生素在一定浓度范围内,对数剂量与抑菌圈直径(面积)呈直线关系而设计,通过检测抗生素对微生物的抑制作用,比较标准品与供试品产生抑菌圈的大小,计算出供试品的效价。
原理:利用抗生素在固体培养基中的平面扩散作用,依据量反应平行线原理并采用交叉实验设计方法,在相同实验条件下通过比较标准品(已知效价)和供试品两者对所接种试验菌产生的抑菌圈(直径或面积)大小,来测定供试品效价的一种方法。
管碟法的操作步骤:1、预试验:确定最佳的试验条件:调整试验菌的浓度、使用量、抗生素终浓度、培养基等,使抑菌圈的大小符合规定:一剂量法中心点的抑菌圈直径应在16~17.5mm,二剂量法高剂量浓度标准品溶液所致的抑菌圈直径在18~22mm,三剂量法中间剂量浓度标准品溶液所致的抑菌圈直径在15~18mm。
2、试验准备:双碟、钢管、毛细滴管、吸管的清洗及灭菌;容量瓶、定量吸管的清洗;培养基、缓冲液的准备、半无菌间的紫外消毒等。
3、双碟的制备:每只双碟加底层培养基约20ml,待培养基凝固后,将双碟放入35~37℃培养箱中,待用。
4、供试品、标准品溶液的制备:估计供试品的效价,根据试验要求设计供试品、标准品溶液稀释步骤,平行制备供试品、标准品相关剂量的溶液。
5、菌层的制备:注意菌层培养基温度;根据预试验确定加入菌层培养基的菌液量,注意制备菌层的速度和平整度。
6、滴加抗生素溶液:注意标准品、供试品高、低剂量溶液滴加顺序,保证滴加速度和加量的均匀一致。
7、双碟的培养:根据培养温度的要求在培养箱中进行培养,培养箱中水平碟放的双碟数以不超过三层为宜。
8、抑菌圈的测量:抑菌圈测量仪的使用,每组试验双碟应在相同的测量参数下进行测量。
抑菌圈实验知识点
抑菌圈实验知识点抑菌圈实验简介抑菌圈实验是一种常见的微生物学实验方法,用于评估抗菌物质对细菌生长的抑制效果。
通过在寒天平板上涂布一定数量的细菌,然后在不同的实验条件下施加待测物,观察生成的抑菌圈直径来判断其抗菌活性强弱。
实验步骤1.准备寒天平板:将寒天溶液煮沸,倒入培养皿中,等待冷却凝固。
2.预处理细菌:选取待测细菌培养液,进行适当稀释,利用吸管在寒天平板上均匀涂布。
3.滴加待测物质:使用滴管将待测物质滴加到已涂布细菌的平板上。
4.孵育:将带有滴加待测物的平板倒置,放入恒温培养箱(通常在37摄氏度)进行孵育。
5.观察抑菌圈:经过一定时间后,观察平板上的抑菌圈,通过测量抑菌圈直径来评估待测物质的抗菌活性。
影响抑菌圈直径的因素1.待测物质浓度:一般来说,随着待测物质浓度的增加,抑菌圈直径也会增加,因为更高浓度的物质具有更强的抗菌活性。
2.细菌菌株的敏感性:不同的细菌对待测物质的敏感程度有所不同,因此不同细菌菌株在相同浓度的待测物质下可能产生不同大小的抑菌圈。
3.孵育时间:不同的细菌在不同时间内生长速度不同,所以孵育时间对抑菌圈直径的大小有一定影响。
4.寒天平板的厚度:寒天平板的厚度越薄,细菌的扩散速度越快,抑菌圈直径也可能相应增大。
实验应用抑菌圈实验是一种常用的筛选抗菌物质的方法,常用于药物研发、食品安全检测和环境监测等领域。
通过观察抑菌圈的大小,可以初步了解待测物质对细菌的抑制能力,并进一步筛选出具有较强抗菌活性的物质进行深入研究。
结论抑菌圈实验是一种简单有效的方法,用于评估抗菌物质的抑菌活性。
实验结果可以提供初步的信息,但需要进一步的实验和研究来验证和确定物质的抗菌效果。
该实验在医学、食品和环境领域具有广泛的应用价值,对于保障人们的健康和安全具有重要意义。
微生物检验实验室药物敏感性试验标准操作规程
微生物检验实验室药物敏感性试验标准操作规程1.目的规范药物敏感性试验标准操作规程,确保药敏结果准确。
2.原理将含有定量抗菌药物的纸片贴在已接种待检菌的琼脂平板上,纸片中所含的药物吸取琼脂中的水分溶解后会不断的向纸片周围区域扩散,形成递减的浓度梯度,在纸片周围抑菌浓度范围内待检菌的生长被抑制,从而产生透明的抑菌圈。
抑菌圈的大小反映检测菌对测定药物的敏感程度,并与该待检菌的最低抑菌浓度(MIC)呈负相关,即抑菌圈愈大,MIC愈小。
3.试剂M-H培养基、无菌生理盐水、药敏纸片、无菌棉签、35℃孵育箱、标准比浊管或比浊仪。
4.质控4.1 常用细菌药敏质控标准菌株参见CLSI规定。
4.2 质控菌株每日随临床标本一起进行药敏试验,测定质控菌株的抑菌环。
质控菌株的抑菌环在允许范围之内,说明结果可信。
4.3 质控的频率由于纸片法药敏试验是很稳定的,在不失控的时候,可以每周作1~2次质控菌株的测定。
如果发现有失控的情况,就必须每日做1次,寻找失控的原因并予以纠正。
如果连续30日失控<3次的,可以恢复每周1次。
5.操作步骤5.1 挑取4~5个纯培养菌落,接种于3~5ml M-H肉汤(0.5麦氏单位)中,经35℃培养6~8h。
5.2 用无菌生理盐水或M-H肉汤校正菌液浊度,使其与标准比浊管的浓度相同。
5.3 用无菌棉拭蘸取校正过的菌液,在试管壁上挤压几次,压去多余的菌液,涂布整个M-H平板表面,再重复两次,每次旋转平板60°,使整个平板涂布均匀,最后用棉拭涂布平板四周缘一圈。
5.4 涂布菌液的平板于室温中干燥3~5分钟后,用纸片分配器或无菌镊子取药敏纸片,贴于平板表面,并用镊尖轻压一下纸片,使其贴平。
每张纸片的间距不小于24mm,纸片的中心距平板的边缘不小于15mm,直径90mm的平板宜贴6张药敏纸片。
5.5 将贴好纸片的平板置35℃孵育18~24小时后,用卡尺量取抑菌圈直径。
个别菌孵育温度,时间及条件应按照CLSI规定。
抑菌圈法实验流程
抑菌圈法实验流程
实验目的:通过抑菌圈法检测不同抗生素对细菌的敏感性,为临床治疗提供参考依据。
实验原理:利用纸片或圆筒在琼脂平板上制造抑菌圈,测定不同药物对细菌的抑制能力。
当细菌被抗生素抑制生长时,抑菌圈周围的菌落会出现明显的清晰区域,即抑菌圈。
抑菌圈大小与细菌对该药物的敏感性成正比。
实验步骤:
1. 培养细菌:选取待测菌种,在无菌条件下接种于琼脂平板上,进行预培养。
2. 制备药物纸片:将不同抗生素药物浸泡在无菌纸片中,使纸片充分吸收药物。
3. 在琼脂平板上制造抑菌圈:用无菌铁环或无菌棉签将药物纸片放置于琼脂平板表面,轻轻压实,使药物充分扩散。
然后在纸片周围接种待测菌种,使其均匀生长。
4. 培养细菌:将琼脂平板倒置,放入培养箱中,在适宜的温度下培养细菌。
5. 观察抑菌圈:经过一定时间的培养,观察琼脂平板上细菌的生长状态,记录不同药物纸片周围的抑菌圈大小和形态。
6. 结果分析:根据抑菌圈的大小和形态,判断该菌株对不同药物的敏感性,为临床治疗提供参考。
实验注意事项:
1. 所有操作均在无菌条件下进行,避免外界微生物的污染。
2. 选择合适的药物浓度,避免药物过浓或过稀而影响实验结果。
3. 操作时要注意卫生,避免药物接触到皮肤或口腔。
4. 实验后应及时处理琼脂平板和药物纸片,避免造成环境污染。
抑菌圈实验报告
一、实验目的1. 了解抑菌圈实验的基本原理和操作步骤。
2. 通过抑菌圈实验,探究不同抗生素对金黄色葡萄球菌的抑菌效果。
3. 掌握抑菌圈直径的测量方法,并分析抗生素的抑菌活性。
二、实验原理抑菌圈实验是微生物学中常用的一种实验方法,用于测定抗生素对细菌的抑菌效果。
实验原理是:将含有抗生素的纸片放置在已接种有细菌的琼脂平板上,抗生素会通过扩散作用渗透到琼脂中,抑制细菌的生长,形成透明圈,即抑菌圈。
抑菌圈的大小可以反映抗生素的抑菌活性。
三、实验材料与仪器1. 材料:金黄色葡萄球菌、青霉素、链霉素、头孢噻肟钠、肉汤培养基、琼脂、无菌生理盐水、无菌棉签、无菌镊子、无菌培养皿、无菌滤纸、酒精灯、放大镜等。
2. 仪器:恒温培养箱、天平、电子显微镜、显微镜等。
四、实验方法1. 制备菌悬液:将金黄色葡萄球菌接种于肉汤培养基中,37℃恒温培养24小时,用无菌生理盐水调整菌悬液浓度为1×10^8 CFU/mL。
2. 准备平板:将熔化的琼脂倒入培养皿中,待凝固后,用无菌棉签将菌悬液均匀涂布于平板表面。
3. 制备抑菌圈:将含有不同抗生素的纸片分别放置于平板表面,用无菌镊子轻轻按压使其与琼脂表面紧密接触。
4. 培养平板:将平板倒置放入恒温培养箱中,37℃培养24小时。
5. 测量抑菌圈直径:用放大镜观察平板,用尺子测量抑菌圈的直径,取平均值。
五、实验结果与分析1. 实验结果:实验结果显示,青霉素、链霉素、头孢噻肟钠对金黄色葡萄球菌具有较强的抑菌作用,抑菌圈直径分别为15mm、12mm、10mm;而其他抗生素对金黄色葡萄球菌的抑菌效果较差。
2. 结果分析:抑菌圈直径越大,说明抗生素的抑菌活性越强。
根据实验结果,青霉素、链霉素、头孢噻肟钠对金黄色葡萄球菌的抑菌活性较强,可作为治疗金黄色葡萄球菌感染的首选抗生素。
六、实验结论通过抑菌圈实验,我们成功探究了不同抗生素对金黄色葡萄球菌的抑菌效果。
实验结果表明,青霉素、链霉素、头孢噻肟钠对金黄色葡萄球菌具有较强的抑菌作用,可作为治疗金黄色葡萄球菌感染的首选抗生素。
抑菌试验方法
抑菌圈测量是微生物分析的经典方法。
它是利用抑菌物质在涂布特定试验菌的琼脂培养基内成球形立体状扩散,抑制试验菌的繁殖,在抑菌物质的周围形成透明圈,即抑菌圈。
管碟法测定生物效价:利用抗生素在琼脂培养基内的扩散作用,采用量反应平行线原理的设计,比较标准品与供试品两者对接种的试验菌产生抑菌圈的大小,以测定供试品效价的一种方法。
制药企业,药检所常常进行抗生素的效价测定,最普遍的方式就是管碟法测定生物效价。
管碟法测定生物效价实验中存在大量抑菌圈测量工作,常规都是用游标卡尺手工测量抑菌圈的直径,如今可以用仪器自动进行分析,提高检测精度,减少测量误差。
迅数-自动抑菌圈测量系统是通过CCD 采集数字图像后,进行自适应差分滤波预处理,采用改进的四叉树交叉熵分割算法进行准确快速的分析,精确检测出抑菌圈直径数据,最后对数据建模统计,自动得到分析结果。
所有分析过程只要一秒就可以完成。
手动测量存在的问题有:1. 重现性差,准确性不够:同一培养皿,不同的人测量结果有差异;2. 当抑菌圈呈卵原形、边缘模糊或出现双层圈时,边界确定的人为误差大;3. 一个培养皿内有大量抑菌圈时,如做菌种筛选时,无法人工测量;自动抑菌圈测量的好处在于:快速、精度高、重现性好、操作简单。
示意;将试样剪成直径为2-3公分的园片,紧紧平贴在已接种试验菌种的FDA琼脂培养基表面上,经37℃24小时培养,培养基表面上长出密密麻麻的菌落,•而试样周围有一个不长菌落的"晕圈".测量晕圈环的宽度,用毫米表示.(如果没有晕圈•,应揭开试样,检查样品复盖若无菌落可视为样品具有非溶出性抗菌作用.应进一步用摇晃烧瓶•--菌落数测定法评价效将细菌植入或嫁接入营养琼脂培养基的表面,通过在营养琼脂培养基上形成的抑制圈来评估其抗菌效果。
目前普遍采用该方法来观测抗菌素的抗菌效果。
图1描述了抑菌圈测试方法。
图1: 涂层后基于抑菌圈的抗菌测试日本工业标准(JIS)Z2801:20009和ASTME2180-0110是目前使用最广泛的测试评估方法。
抑菌圈法实验流程
抑菌圈法实验流程
抑菌圈法是一种用于评价抗菌剂和抗微生物物质活性的方法。
其实验流程如下:
1. 准备培养基和细菌:选取合适的培养基,接种待测菌株,培养至适宜的生长期。
2. 稀释菌液:将培养的菌液按一定比例稀释至一定浓度,以便于后续实验操作。
3. 制备平板:将准备好的培养基倒入通气性好的培养皿中,待其凝固后,以均匀的方式涂布已稀释好的菌液,让其在平板上覆盖均匀。
4. 加入试剂:将待测药物或化合物加入到培养皿上,让其在平板上扩散均匀。
5. 孵育:将制备好的培养皿,反转放置在孵化箱中,以适合待测菌株的生长温度和时间进行孵育。
6. 读数:观察培养皿上的菌落是否受到药物或化合物的抑制,并通过测量抑制菌落周围形成的清晰区域(抑菌圈)的直径,来评价药物或化合物的抗菌活性。
需要注意的是,实验中要注意消毒操作、依照标准化操作程序进行实验、精确测量并记录数据,以得到可靠的实验结果。
纸片法抑菌试验实验报告
一、实验目的1. 掌握纸片法抑菌试验的基本原理和操作方法。
2. 了解抑菌试验在微生物学研究和临床医学中的应用。
3. 通过实验,学会分析实验结果,为临床用药提供参考。
二、实验原理纸片法抑菌试验是一种常用的微生物学实验方法,用于检测细菌对各种抗生素的敏感性。
其原理是将含有定量抗生素的纸片贴在接种有细菌的琼脂平板上,培养一段时间后,根据抑菌圈的大小判断细菌对相应抗生素的敏感性。
三、实验材料1. 细菌菌种:金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、肺炎克雷伯菌等。
2. 抗生素纸片:青霉素、氨苄西林、头孢唑啉、红霉素等。
3. 琼脂培养基:M-H琼脂培养基。
4. 实验器材:无菌平板、无菌镊子、无菌棉签、酒精灯、游标卡尺等。
四、实验步骤1. 将琼脂培养基融化后,待其冷却至50℃左右,倒入无菌平板中,均匀铺开,待其凝固。
2. 将待检菌接种于M-H琼脂平板上,用无菌棉签均匀涂抹。
3. 待菌液干燥后,用无菌镊子取抗生素纸片,贴在平板上,纸片间距大于24mm。
4. 将平板置于37℃恒温培养箱中培养18-24小时。
5. 观察并测量抑菌圈直径,记录数据。
五、实验结果与分析1. 金黄色葡萄球菌对青霉素、氨苄西林、头孢唑啉、红霉素等抗生素均表现为敏感,抑菌圈直径分别为15mm、12mm、18mm、20mm。
2. 大肠杆菌对青霉素、氨苄西林、头孢唑啉、红霉素等抗生素均表现为耐药,抑菌圈直径分别为0mm、0mm、0mm、0mm。
3. 肺炎克雷伯菌对青霉素、氨苄西林、头孢唑啉、红霉素等抗生素均表现为耐药,抑菌圈直径分别为0mm、0mm、0mm、0mm。
根据实验结果,金黄色葡萄球菌对青霉素、氨苄西林、头孢唑啉、红霉素等抗生素敏感,可作为临床治疗金黄色葡萄球菌感染的首选药物。
大肠杆菌和肺炎克雷伯菌对青霉素、氨苄西林、头孢唑啉、红霉素等抗生素均表现为耐药,需要根据耐药性选择其他抗生素进行治疗。
六、实验讨论1. 纸片法抑菌试验是一种简单、快速、经济的抑菌试验方法,广泛应用于微生物学研究和临床医学中。
抗菌实验—抑菌圈法
抑菌圈实验说明抑菌圈法是衡量杀菌防霉剂效果的一种方式,主要用于测定杀菌防霉剂对细菌、霉菌、酵母菌的抑菌作用,是定性或半定量的方法。
通过杀菌防霉剂在琼脂平板上的扩散能力来初步筛选更有效的杀菌防霉剂品种。
用具和材料精品文档,你值得期待霉菌培养皿,无菌吸管(或针筒),圆片滤纸(直径2cm),带玻璃珠的无菌水,带过滤漏斗的三角牌,镊子,接种针(环),熔化状态的琼脂培养基(最好保温于45℃左右水浴中),一定浓度的药剂,供试验用的菌种。
试验过程1.用接种环挑取各试管斜面的菌种于带玻璃珠的无菌水中,用手振荡数分钟使孢子分散,过滤后制成混合孢子悬液。
2.用无菌吸管(或针筒)向各培养皿中注入一定浓度的混合孢子悬浮液0.5mL。
3.向各培养皿内注入15Ml~20ml的熔化状琼脂培养基(约45℃),将菌液与培养基混合均匀,待其冷却。
4.用镊子将圆片滤纸在不同浓度的防霉剂中浸渍片刻,取出置于带菌培养基平板的中央,盖上盖子5.置适宜温度下,培养2~3d,观察滤纸片圆片周围抑菌圈的有无及大小。
注意事项1.所有的操作用具和材料都要事先做灭菌处理,操作必须在无菌室(或无菌箱)内于火焰旁进行。
2.霉菌、细菌、酵母菌等各种微生物都必须分别配置混合菌液,即这里指的混合菌液是霉菌或酵母菌等诸种菌的分别混合液,并非霉菌、细菌和酵母菌的混合液。
3.混合菌液的浓度一般为106~108cfu/mL.4.倒入培养皿的琼脂培养基温度不能太高(一般为45℃左右),否则会引起微生物死亡。
也不能太低,因为琼脂会很快凝结,以致搅拌不均匀,影响试验结果。
5.各种微生物的最适生长温度不同(例如霉菌一般为25~30℃,细菌一般为32~37℃等),恒温培养时宜分开放置。
结果评判由于滤纸圆片所吸附的药液慢慢向四周扩散,因此在滤纸片的周围就出现清晰的抑菌圈(加入该防霉剂对供试菌有抑制效果)。
抑菌圈的大小代表药剂抗菌力的高低。
在一定的药剂浓度范围内,药剂的浓度越高则抑菌圈的直径越大。
抑菌试验测定方法
抑菌试验测定方法本页仅作为文档封面,使用时可以删除
This document is for reference only-rar21year.March
纸片法、牛津杯法等,但原理都是一样的,纸片法做起来比较简单,不用特殊的材料,可能比较适合你:
1.把实验室用的普通滤纸用打孔器打成0.5cm直径的圆片,装在试管中密封灭菌(121度,20分钟)。
2.将已经培养好的菌制成一定浓度的悬浮液,取1ml该菌悬液至灭过菌的(121度,20分钟)培养皿中,倒入适量(约4毫米厚吧)已灭菌的培养基(温度约45度,用手摸瓶壁不感觉烫手即可),轻轻转动培养皿,使培养基与菌液混匀,静置凝成平板。
3.将用于试验的农药配制成几个所需的浓度,用无菌镊子夹起一片滤纸放入药液中浸透,夹出时在容器边缘停靠片刻,滤掉多余的药液,把滤纸片放在平板中凝好的培养基的中心,用镊子稍用力按一下,使之与培养基充分紧贴。
4.按上述方法,每个浓度做3个重复,以灭菌水浸湿的滤纸片做空白对照。
5.在适当温度下培养一定时间后观察,用直尺或游标卡尺测量抑菌圈的大小,计算抑菌率就OK了!
希望能对你有帮助,有什么问题可以短消息我:)
2。
抗生素微生物检定中抑菌圈测量法的改进
低 剂 量 标 准 品所 致 的抑 菌 圈直 径 , 4 二
,
高剂 盆
最为 常 用 高
,
。
其 中 抑 菌 圈 测定 仪 测 定速 度 快
,
,
,
精 密度
、
供 试 品 所 致的 抑 菌 圈直 径
致 的抑 菌 圈 直 径 ,
6
%
4
3 2
低剂 量 供 试 品所
。
可 减 少 人为 误 差
,
且 能 自动 进 行 效价 及 生 物统
)
保 持两 针 长 用其 他
日光 灯 四 周 内 壁 涂不 反 光 的黑 漆
在 玻 璃 台面
,
并使 针 距 等 于 卡 尺 测 量 面 的距 离
。
上 靠 近 中 间 的地 方 用 玻璃 刀 或 记 号 笔 画 两 条 相 互 垂 直 平 分长 约 ∋
Δ
游 标 卡尺校 正 针 距 后 即 可
&
)
.
的直线
)
测量 抑 菌 圈直 径 时遮
影响
&
也 不 利 于 得 到 准 确 的 结果
三剂 量 法与此相同
− .
。
& &
)
改进方法
抑菌 一 洲 + 台 的 制 作 及 使 用
抑 菌 圈 测 量 台 设 计为 ! ∋
Δ
)
材料
(,
∀
)
普 通 游 标卡 尺 ∃ 精
密度
−
)
& ∋
或
Ε
.
又
∋ #
Δ Δ
.
Ε
,
∀,
Δ
. ∃长
。
抑菌圈实验知识点(一)
抑菌圈实验知识点(一)抑菌圈实验什么是抑菌圈实验?抑菌圈实验是一种常用的微生物学实验方法,用于测定不同物质对细菌生长的抑制能力。
通过在寒天培养基上均匀涂敷已经培养好的细菌,并在上面滴加待测物质溶液,观察并测量细菌生长受到抑制的范围。
实验步骤1.准备培养基:将寒天粉加入蒸馏水中溶解,并煮沸消毒,冷却至约50℃时均匀分装到培养皿中。
2.培养细菌:将待测的细菌涂布在寒天培养基表面,使其均匀生长。
3.添加抑制物:在涂布好细菌的寒天培养基上滴加待测物质溶液,通常是药物或化合物。
4.孵育:将培养皿倒置放在恒温培养箱中,经过一段时间后细菌会在寒天培养基上形成菌落。
5.观察与测量:观察并测量细菌生长抑制的范围,即抑菌圈的直径。
实验结果解读•抑菌圈直径的大小可以反映待测物质对细菌的抑制能力,直径越大表示抑制能力越强。
•如果抑菌圈的直径接近或超过寒天培养基的直径,说明待测物质具有较强的杀菌或抑菌作用。
•如果没有出现抑菌圈,说明待测物质对所选细菌无抑制作用,或者浓度过低。
实验注意事项•实验操作要严格遵守无菌技术,避免细菌的外源性污染。
•涂布细菌时要均匀、细心,避免形成片状或丛状生长。
•添加待测物质时要注意均匀滴加,避免产生溢出和扩散。
•移动培养皿时要轻拿轻放,尽量不晃动,以避免菌落的移位或扩散。
•实验后要妥善处理寒天培养基和培养皿,避免细菌的传播。
应用领域抑菌圈实验广泛应用于药物研发、食品安全检测、环境污染监测等领域。
通过该实验可以初步评估化合物或药物的抗菌能力,并为后续进一步研究提供参考依据。
结语抑菌圈实验是一种简单、直观的实验方法,对于评估物质的抗菌能力有着重要的意义。
通过了解抑菌圈实验的基本原理和操作步骤,我们可以更好地理解该实验在微生物学研究中的应用和意义。
抑菌圈直径判断标准值
抑菌圈直径判断标准值抑菌圈直径是一种常见的微生物学实验指标,用于评估抗菌物质对细菌的抑制能力。
通过测量抑菌圈直径的大小,可以判断抗菌物质的抑菌效果。
在临床和实验室研究中,抑菌圈直径的判断标准值对于评估抗菌药物的疗效具有重要意义。
本文将就抑菌圈直径的判断标准值进行详细介绍,希望能够对相关研究和实验提供参考。
抑菌圈直径的判断标准值是根据不同抗菌药物和细菌菌株的特性而定的。
一般来说,抗菌药物的抑菌圈直径越大,说明其抗菌效果越好。
而不同的细菌菌株对抗菌药物的敏感性也不同,因此判断标准值会有所差异。
在临床实验中,通常会根据临床标准和先前的研究成果来确定抑菌圈直径的判断标准值。
在进行抑菌圈直径实验时,首先需要选择合适的培养基和细菌菌株。
然后将抗菌药物施加在含有细菌的培养基上,培养一定时间后观察抑菌圈的形成情况。
测量抑菌圈的直径,根据直径大小来判断抗菌物质的抑菌效果。
一般来说,抑菌圈直径大于一定数值时,可以认为抗菌药物的抑菌效果是显著的。
不同的抗菌药物对不同的细菌菌株具有不同的抑菌效果,因此在确定抑菌圈直径的判断标准值时需要考虑多种因素。
一般来说,临床上常用的抗菌药物会有相应的参考值供临床医生参考。
而在科研领域,研究人员会根据自己的实验条件和研究对象来确定相应的判断标准值。
除了抗菌药物和细菌菌株的特性外,抑菌圈直径的判断标准值还受到实验条件和操作方法的影响。
因此,在进行抑菌圈直径实验时,需要严格控制实验条件和操作方法,以确保实验结果的准确性和可比性。
总的来说,抑菌圈直径的判断标准值是根据抗菌药物、细菌菌株、实验条件和操作方法等多种因素综合考虑而确定的。
在进行相关研究和实验时,需要根据具体情况来确定相应的判断标准值,以确保实验结果的科学性和可靠性。
通过本文的介绍,相信读者对抑菌圈直径的判断标准值有了更深入的了解。
在今后的研究和实验中,希望能够根据本文所述的原则来确定抑菌圈直径的判断标准值,从而更准确地评估抗菌药物的抑菌效果。
抑菌圈测量仪工作过程及配置 测量仪技术指标
抑菌圈测量仪工作过程及配置测量仪技术指标抑菌圈分析仪又叫抑菌圈测定仪通过图像分析软件及多种计算方法对微生物产生的抑菌圈进行生物效价、药物敏感度、血药浓度、生物利用度的测定,从而实现快速精准的试验分析。
抑菌圈分析仪广泛应用于生产、检测与讨论抗生素药物的药厂、药检所、医院以及相关的院校与讨论所。
又可称为抑菌圈分析仪,数字式抑菌圈测量仪,抗生素效价测量仪,抑菌圈测量分析仪,抑菌圈测定仪,抑菌圈测量仪,抑菌圈自动测量分析仪。
抑菌圈分析仪自动获得各菌落面积、等效直径、长轴、短轴、长宽比、圆度、周长、形状系数等。
可按形态指标过滤查询,鼠标点击修正,无痕剔除网格及文字,自动剔除杂质,有效支持多而杂微生物统计,仪器直接和微机的USB接口连接,无需传统的接收卡。
提高了微机处理图像的速度,使仪器工作更加稳定,故障率大大降低。
抑菌圈分析仪与国际接轨的大平板扫描法,一次可以完成六个碟子的扫描测量,使工作效率比传统测量仪提高了6倍。
配置自动菌落计数仪主机Zstream自动菌落分析软件、抑菌圈测定及效价分析软件商务一体机(双核CPU/4G内存/1G显存/硬盘500GB/DVD—RM/23”彩显/无线网卡、Windows操作系统环境)测量仪器的仪器误差有哪些?测量的紧要目的就是得到真实的结果,测量过程即使在注意和当心也会误差。
误差通最通俗的话来讲就是“测量结果与标准值的差”,再精准的仪器设备测量结果也会存在确定的误差的;导致误差的原因有很多,比如操作人员操作不当,仪器自身存在确定误差等等。
而仪器自身的误差也常常简单疏忽的一点,仪器误差也分为很多种,紧要包括有:固有误差,基本误差,工作误差,影响误差,稳定误差五种。
接下来我讲带大家认得这五种仪器误差:1.固有误差简单可以理解为在基准条件下由产品本身产生的允许误差,大致反映了仪器的最高测量精准明确度,通常用于仪器误差的检验和对比。
(下图为推举基准条件)注:β称为失真因子,交流供电波形应保持在(1+β)sin wt 与(1—β)sin;△U为纹波电压峰峰值,Uo为直流供电电压额定值。
微生物的抑菌圈检测方法[整理版]
抑菌圈实验说明抑菌圈法是衡量杀菌防霉剂效果的一种方式,主要用于测定杀菌防霉剂对细菌、霉菌、酵母菌的抑菌作用,是定性或半定量的方法。
通过杀菌防霉剂在琼脂平板上的扩散能力来初步筛选更有效的杀菌防霉剂品种。
用具和材料霉菌培养皿,无菌吸管(或针筒),圆片滤纸(直径2cm),带玻璃珠的无菌水,带过滤漏斗的三角牌,镊子,接种针(环),熔化状态的琼脂培养基(最好保温于45℃左右水浴中),一定浓度的药剂,供试验用的菌种。
试验过程1.用接种环挑取各试管斜面的菌种于带玻璃珠的无菌水中,用手振荡数分钟使孢子分散,过滤后制成混合孢子悬液。
2.用无菌吸管(或针筒)向各培养皿中注入一定浓度的混合孢子悬浮液0.5mL。
3.向各培养皿内注入15Ml~20ml的熔化状琼脂培养基(约45℃),将菌液与培养基混合均匀,待其冷却。
4.用镊子将圆片滤纸在不同浓度的防霉剂中浸渍片刻,取出置于带菌培养基平板的中央,盖上盖子5.置适宜温度下,培养2~3d,观察滤纸片圆片周围抑菌圈的有无及大小。
注意事项1.所有的操作用具和材料都要事先做灭菌处理,操作必须在无菌室(或无菌箱)内于火焰旁进行。
2.霉菌、细菌、酵母菌等各种微生物都必须分别配置混合菌液,即这里指的混合菌液是霉菌或酵母菌等诸种菌的分别混合液,并非霉菌、细菌和酵母菌的混合液。
3.混合菌液的浓度一般为106~108cfu/mL.4.倒入培养皿的琼脂培养基温度不能太高(一般为45℃左右),否则会引起微生物死亡。
也不能太低,因为琼脂会很快凝结,以致搅拌不均匀,影响试验结果。
5.各种微生物的最适生长温度不同(例如霉菌一般为25~30℃,细菌一般为32~37℃等),恒温培养时宜分开放置。
结果评判由于滤纸圆片所吸附的药液慢慢向四周扩散,因此在滤纸片的周围就出现清晰的抑菌圈(加入该防霉剂对供试菌有抑制效果)。
抑菌圈的大小代表药剂抗菌力的高低。
在一定的药剂浓度范围内,药剂的浓度越高则抑菌圈的直径越大。
此法同样适合于测定单个菌的抗菌效果。
抑菌圈直径和MIC解释标准
抑菌圈直径和MIC解释标准抑菌圈直径和MIC解释标准铜绿假单胞菌抑菌圈直径和MIC解释标准试验条件培养基:纸片扩散法:MHA肉汤稀释法:CAMHB琼脂稀释法:MHA接种物:生长法或直接菌落悬液法,相当于麦氏标准孵育:35 2 °C;空气环境纸片扩散法:16 -18 h稀释法:16 - 20 h(1)对于纸片扩散法,直径150mm平板最大放置12只,直径100mm平板放置5只进行试验(见M02第节)测量抑菌圈直径(用肉眼判读),包括纸片直径。
保持平板在反射光照明的、非反射黑的背景上方几英寸,肉眼观察无明显生长的地区作为抑菌圈边缘。
在抑菌圈边缘借助放大镜才能观察到的微小菌落生长可忽略不计。
(2)用纸片扩散法和稀释法能可靠地测定分离于囊性纤维化病人的铜绿假单胞菌的敏感性,但在作为敏感结果报告前,应将孵育时间延长至24小时。
(3)所有抗菌药物在延长治疗期间可致铜绿假单胞菌发生耐药。
因此,初次分离的敏感菌株在开始治疗后3?4不动杆菌属抑菌圈直径和MIC解释标准试验条件培养基:纸片扩散法:MHA肉汤稀释法:CAMHB琼脂稀释法:MHA接种物:生长法或直接菌落悬液法,相当于麦氏标准孵育:35 2° C;空气环境;20-24h,所有方法由于培养基中可能存在拮抗剂,甲氧苄啶和磺胺类药物抑菌圈内可允许出现菌株轻微生长;因此,在测量抑菌圈直径时可忽视轻微生长(20%或较少的菌苔)而测量较明显抑制的边缘。
(2)对四环素敏感的菌株被认为对多西环素和米诺环素也敏感。
然而,某些对四环素中介或耐药的菌株可以对多西环素或米诺环素或二者敏感。
洋葱伯克霍尔德菌抑菌圈直径和MIC解释标准试验条件培养基:纸片扩散法:MHA肉汤稀释法:CAMHB琼脂稀释法:MHA接种物:生长法或直接菌落悬液法,相当于麦氏标准孵育:35 2° C;空气环境;所有方法,20-24h嗜麦芽窄食单胞菌抑菌圈直径和MIC解释标准试验条件培养基:纸片扩散法:MHA肉汤稀释法:CAMHB琼脂稀释法:MHA接种物:生长法或直接菌落悬液法,相当于麦氏标准孵育:35 2° C;空气环境,所有方法,20-24 h由于培养基中可能存在拮抗剂,甲氧苄啶和磺胺类药物抑菌圈内可允许出现菌株轻微生长;因此,在测量抑菌圈直径时可忽视轻微生长(20%或较少的菌苔)而测量较明显抑制的边缘。
生物实验--抗生素微生物检定法
生物实验--抗生素微生物检定法本法系利用抗生素在琼脂培养基内的扩散作用,采用量反应平行线原理的设计,比较标准品与供试品两者对接种的试验菌产生抑菌圈的大小,以测定供试品效价的一种方法。
标准品的品种、分子式及理论计算值见表2.培养基及其制备方法培养基I胨5g琼脂15~20g 牛肉浸出粉3g水1000ml磷酸氢二钾3g除琼脂外,混合上述成分,调节pH使比最终的pH 值略高0.2~0.4,加入琼脂,加热溶化后滤过,调节pH值使灭菌后为7.8~8.0或6.5~6.6,在115℃灭菌30分钟。
培养基Ⅱ胨6g葡萄糖1g牛肉浸出粉1.5g琼脂15~20g酵母浸出粉6g水1000ml除琼脂和葡萄糖外,混合上述成分,调节pH使比最终的pH值略高0.2~0.4,加入琼脂,加热溶化后滤过,加葡萄糖溶解后,摇匀,调节pH值使灭菌后为7.8~8.0或6.5~6.6,在115℃灭菌30分钟。
培养基Ⅲ胨5g磷酸氢二钾3.68g牛肉浸出粉1.5g磷酸二氢钾1.32g酵母浸出粉3g葡萄糖1g氯化钠3.5g水1000ml除葡萄糖外,混合上述成分,加热溶化后滤过,加葡萄糖溶解后,摇匀,调节pH值使灭菌后为7.0~7.2,在115℃灭菌30分钟。
培养基Ⅳ胨10g葡萄糖10g氯化钠10g琼脂20~30g枸橼酸钠10g水1000ml除琼脂和葡萄糖外,混合上述成分,调节pH使比最终的pH值略高0.2~0.4,加入琼脂,在109℃加热15分钟,于70℃以上保温静置1小时后滤过,加葡萄糖溶解后,摇匀,调节pH值使灭菌后为6.0~6.2,在115℃灭菌30分钟。
培养基Ⅴ胨10g琼脂15~20g麦芽糖40g水1000ml除琼脂和麦芽糖外,混合上述成分,调节pH使比最终的pH值略高0.2~0.4,加入琼脂,加热溶化后滤过,加麦芽糖溶解后,摇匀,调节pH值使灭菌后为7.2~7.4,按需要分装,在115℃灭菌30分钟,趁热斜放使凝固成斜面。
培养基Ⅵ胨8g磷酸二氢钾1g 牛肉浸出粉3g 葡萄糖2.5g酵母浸出粉5g琼脂15~20g氯化钠45g水1000ml 磷酸氢二钾 3.3g 除琼脂和葡萄糖外,混合上述成分,调节pH使比最终的pH值略高0.2~0.4,加入琼脂,加热溶化后滤过,加葡萄糖溶解后,摇匀,调节pH值使灭菌后为7.2~7.4,在115℃灭菌30分钟。
不同抑菌药物抑菌圈大小的标准
不同抑菌药物抑菌圈大小的标准下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成,希望大家下载以后,能够帮助大家解决实际的问题。
文档下载后可定制随意修改,请根据实际需要进行相应的调整和使用,谢谢!并且,本店铺为大家提供各种各样类型的实用资料,如教育随笔、日记赏析、句子摘抄、古诗大全、经典美文、话题作文、工作总结、词语解析、文案摘录、其他资料等等,如想了解不同资料格式和写法,敬请关注!Download tips: This document is carefully compiled by the editor. I hope that after you download them, they can help yousolve practical problems. The document can be customized and modified after downloading, please adjust and use it according to actual needs, thank you!In addition, our shop provides you with various types of practical materials, such as educational essays, diary appreciation, sentence excerpts, ancient poems, classic articles, topic composition, work summary, word parsing, copy excerpts,other materials and so on, want to know different data formats and writing methods, please pay attention!不同抑菌药物抑菌圈大小的标准是判断药物在体外对微生物的抑菌能力的重要指标。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
抑菌圈实验说明
抑菌圈法是衡量杀菌防霉剂效果的一种方式,主要用于测定杀菌防霉剂对细菌、霉菌、酵母菌的抑菌作用,是定性或半定量的方法。
通过杀菌防霉剂在琼脂平板上的扩散能力来初步筛选更有效的杀菌防霉剂品种。
用具和材料
霉菌培养皿,无菌吸管(或针筒),圆片滤纸(直径2cm),带玻璃珠的无菌水,带过滤漏斗的三角牌,镊子,接种针(环),熔化状态的琼脂培养基(最好保温于45℃左右水浴中),一定浓度的药剂,供试验用的菌种。
试验过程
1.用接种环挑取各试管斜面的菌种于带玻璃珠的无菌水中,用手振荡数分钟使孢子分散,
过滤后制成混合孢子悬液。
2.用无菌吸管(或针筒)向各培养皿中注入一定浓度的混合孢子悬浮液0.5mL。
3.向各培养皿内注入15Ml~20ml的熔化状琼脂培养基(约45℃),将菌液与培养基混合均
匀,待其冷却。
4.用镊子将圆片滤纸在不同浓度的防霉剂中浸渍片刻,取出置于带菌培养基平板的中央,
盖上盖子
5.置适宜温度下,培养2~3d,观察滤纸片圆片周围抑菌圈的有无及大小。
注意事项
1.所有的操作用具和材料都要事先做灭菌处理,操作必须在无菌室(或无菌箱)内于火焰
旁进行。
2.霉菌、细菌、酵母菌等各种微生物都必须分别配置混合菌液,即这里指的混合菌液是霉
菌或酵母菌等诸种菌的分别混合液,并非霉菌、细菌和酵母菌的混合液。
3.混合菌液的浓度一般为106~108cfu/mL.
4.倒入培养皿的琼脂培养基温度不能太高(一般为45℃左右),否则会引起微生物死亡。
也不能太低,因为琼脂会很快凝结,以致搅拌不均匀,影响试验结果。
5.各种微生物的最适生长温度不同(例如霉菌一般为25~30℃,细菌一般为32~37℃等),
恒温培养时宜分开放置。
结果评判
由于滤纸圆片所吸附的药液慢慢向四周扩散,因此在滤纸片的周围就出现清晰的抑菌圈(加入该防霉剂对供试菌有抑制效果)。
抑菌圈的大小代表药剂抗菌力的高低。
在一定的药剂浓度范围内,药剂的浓度越高则抑菌圈的直径越大。
此法同样适合于测定单个菌的抗菌效果。