小鼠尾静脉注射方法

小鼠尾静脉注射方法

一器材

1 mL 一次性注射器、棉球（酒精棉球和干棉球）、试管夹、橡胶手套、固定器(自制，将

50mL螺盖塑料离心管底部钻开4-6个透气小孔，离心管盖子正中钻一直径约5mm的小孔)，电热恒温水槽。

二方法

1.小鼠的固定

最好使用小鼠固定器，前部有气孔保证小鼠呼吸，后部可以将尾部拉出，不要让小鼠在固定器中有太多活动空间，如空间较大，可加入一些填充物，防止小鼠在注射时乱动。

2.尾静脉的准备

对于小鼠，其尾部血管中有4根十分明显:背腹各有一根动脉,两侧各有一根静脉。动脉的位置相对较深且管腔相对较小，不容易刺入，因此常常选择两侧的静脉，且两侧的静脉较容易固定，它的直径平均小于0.6±0 .5 mm，但当遇到热水，75 %酒精，或远红外线的烘烤时，尾静脉呈明显扩张，平均为0.9± 0 .7 mm。可以将小鼠尾部在45℃左右温水浸浴2分钟，以扩张静脉法适用于室温较低的情况。如果是炎炎夏天，可直接省去热水浸泡，改为喷酒精即可。

3.尾静脉的选择

小鼠尾部有3条尾静脉。背部1天，两侧各1条。由于背部静脉较深，较细，一般选择侧面的2条。

4.注射器的选择

选择1-2ml注射器，针头采用4号或4.5号（外径为0.4mm，0.45mm）。注射器吸入药液后，应将空气推出，防止因空气栓塞。

5.注射

用75%酒精消毒鼠尾后，一般在尾部远端的1/3到1/2处进针，此处皮肤较薄，血管清晰，进针容易，而且一旦注射不成功，可以有更多近端注射的余地。将欲注射的鼠尾用左手紧紧压在桌面上，右手进针时针头与桌面平行，针尖稍稍朝下，一旦进入，将针头稍稍上挑进入，针头沿血管进入，肉眼可关察到针头前进。如果针头在血管中前进，可明显地感觉到针行通畅，毫无阻力。若针头不在血管中，手感针行有阻力。进针时不要太深，针头入皮肤后马上把针头略往上，平行进针，针扎入时有落空感，推液时无阻力则说明成功了。如果推液阻力较大，甚至注射处出现渗液，则说明不在静脉内，需要重新调整注射。

6.注射成功的特点

药液注射到静脉和非静脉的区别，注射到静脉的推液几乎没有阻力，可快速将液体推完，通常600ul可在10秒推完。如果注射到静脉以外，强行推液，阻力较大，注射处周围会出现露水样渗液，而且出针后，出血较少。并且由于药液瘀阻在尾部，导致血流不畅，尾部缺血，易导致尾部炎症和坏死。

7.注射完成后创口处理

用纱布按压针口，直到不出血为止，一般5-10分钟。这样有利于创口尽快恢复，以利于下次注射。

三注意事项：

1 环境温度和尾静脉扩张实验室内温度应保持在28℃左右，特别是冬季很有必要，因为适宜的室内温度对小鼠尾静脉也有一定的扩张作用，并且能够使血流通畅，降低注射阻力。热水浴浸泡法能使尾静脉更加充分的扩张，往往能收到比涂擦酒精和二甲苯更好的效果，水浴的温度以40~ 45°C较为适宜，超过60°C以上时容易烫伤皮层，甚至在拉尾固定的过程中小鼠挣扎导致皮层脱落并出血，容易诱发感染，导致小鼠死亡。

2 注射部位的选择进针处最好在尾巴的下1/ 3-1/ 2 处, 甚至可以更下一点。因为此处皮肤较薄，角质层少，血管清晰, 进针容易，血管大小已接近尾根部，而且为注射失败或需多次注射留有足够空间。

3 注射器持针手式采用正确的注射器持针手式来进行注射也很重要，右手拇指和中指夹住注射器尾部，食指向前固定针头方向，针头扎入血管后拇指随即后移推动推柄进行注射，这样可以有效避免采用其它不规范手式持针在针头扎入血管后又换手或换人注射带来的针头位移问题。

4 固定的重要性此注射方法在熟练掌握以后，可一人操作完成，关键在于固定，我们采用

50mL螺盖塑料离心管作为固定器，这样小鼠的顺应性好，而且可以有效避免被小鼠咬伤的危险。左手拇指和中指拉尾尖,食指沿尾根部抵住螺旋离心管管盖，使小鼠尾部拉紧呈一直线，以充分暴露左右两侧尾静脉。

5 注射剂量单次小鼠尾静脉注射的剂量一般不宜超过0.4mL，大剂量迅速推注容易造成小鼠超负载性猝死，特别是混悬型或粒子型注射液更容易造成并发血管栓塞性猝死，单次注射0.3mL 以上时就应该缓慢注射并特别注意这一问题。尽管如此，有时中小剂量注射后小鼠仍然会立即出现呼吸急促、窒息和心脏骤停等猝死前征兆，这时立即采取按压心脏进行人工抢救可能会使一部分小鼠抢救成功。我们在实验中常采用的注射剂量为0.2mL，即约为全血体积的14%，小于0.1mL时在一次注射不成功时对药物损失的影响就会比较大，所以应尽量将给药剂量调整到一个适合的体积。

6 注射准确的判断针头刺入后,若无阻力，且见液体沿静脉走向流动，表明穿刺成功,若进针后阻力较大，且局部肿胀变白则表明未刺入血管，注射失败。

7 注射完毕后处理应用棉球按压止血，由于尾部张力较高，如若注射后不按压注射点，不但不利于止血，而且会有部分药液流出，导致剂量误差，影响实验结果。

李玮,朱应群,李喆,何龙培.小鼠尾静脉注射方法与体会.心理医生杂志,2012,6(218)506-507

在临床静脉采血后引起穿刺部位皮下出血的原因常见以下几种：

A.按压时间短，2min

;B.只对穿刺部位的皮肤穿刺点进行按压，而忽略了隐藏在皮下的静脉穿刺点

;C.体位因素(站立位，采血后的上肢自然下垂等)加速出血

;D.穿刺部位上方加压因素未解除。如果静脉采血后及时采取正确按压方法均可以消除如上这些引起出血的因素。但是由于患者缺乏专业知识，按压不正确，经常造成不必要的皮下出血。如果采血后操作者针对这些原因及时给予正确的指导，是完全可以避免由以上因素造成的皮下出血。