最新啤酒花多酚类化合物提取工艺1

啤酒花多酚类化合物提取工艺1

啤酒花多酚类化合物提取方法的研究

摘要：本实验以确定酒花中多酚类化合物的最佳提取工艺为目的。通过单因素实验分析了浸提剂---丙酮的浓度、料液比、浸提时间、浸提温度四个因素对酒花多酚提取量的影响，通过正交实验确定出酒花中多酚类化合物的最佳提取条件为：浸提剂---丙酮浓度为70 %，料液比1︰25（g/mL），回流温度45℃，回流时间

1h，在此提取条件下提取量达到最大为47.36mg/g。

关键词：啤酒花多酚

The research of a method in distilling the polyphenol of humulus lupulus Abstract: The aim is to ascertain the optimum distilling condition of polyphenol from humulus lupulus.Single factor trail showed that impregnant’s type、distilling temperature、time、impregnant’s concentration have infection to humulus lupulus，distilling ratio． Hand over experiment ascertain the optimum condition of the polyphenol of humulus lupulus：impregnant’s concentration 70%、the ratio of materiel and impregnant 1：25(g/mL) 、temperature 45℃、time 1h and distilling quantity achieve crest：47.36mg/mL．

Key words：humulus lupulus；polyphenol

酚类化合物广泛地存在于植物中，具有多种保健功能，其中最重要的是它的抗氧化功能。它不仅对活性氧自由基具有很强的捕捉能力，而且可以对由氧自由基诱发的生物大分子损伤起到保护作用。具有明显的抗突变、抗诱变、抗肿瘤、抗病毒、抗微生物、抗衰老等功能[1-3]。

啤酒是一种受消费者欢迎的低醇饮料，它含有多种对人体有益的化学物质，酚类化合物是其中最重要的一类[4-5]。啤酒中的酚类化合物部分来源于啤酒花[6]。酚类化合物不仅与啤酒的风味和口感有关，而且与啤酒的化学特性及货假期有很大的关系[6-7]。所以，以往人们对酒花的研究主要集中在它对啤酒质量及风味的影响上[8-9]，对其提取条件的研究报道甚少。本文先通过单因素实验确定出最佳的提

取溶剂、温度、料液比、提取液浓度、时间，再以提取剂、浓度、时间、料液比、温度设计四因素三水平正交试验确定出酒花多酚的最佳提取工艺。以开发其在医药、食品、保健品、饮料、化妆品等行业中的应用。

1.实验部分

1.1材料与仪器

材料：

啤酒花由天龙啤酒厂提供

主要试剂：

丙酮酒石酸钾钠硫酸亚铁 Na2HPO4 NaH2PO4单宁酸等均为分析纯

主要试验仪器：

sp-2102uvpc紫外分光光度计（上海光谱仪器有限公司），AL204型电子天平（Mettler Toledo Group ）回流加热装置恒温水浴锅

1.2实验方法

1.2.1实验样品处理方法

酒花经粉碎后，取出部分测定水分，其余小量分装于离心管中，密封后置冰箱保存备用。

1.2.2酒花多酚总量的测定

标准曲线的绘制

酒花多酚测定用酒石酸亚铁法[10]，以单宁酸为标样，测定波长为540nm，具体方法如下：

标准曲线绘制：精确配制0.1mg/mL的单宁酸标准溶液，分别精确吸取0，1，2，3，4，5，6mL的单宁酸标准溶液，置于25mL的容量瓶中，各加水4mL，酒石酸亚铁试剂5mL，用PH7.5的磷酸缓冲液定容至25mL，混匀后，在540nm的波长处测其光密度，然后以单宁酸标准液的浓度为横坐标，以光密度为纵坐标作标准曲线如图1。

酒花中总多酚的测定：称取样品1g，先用石油醚加热回流1h，以70%的丙酮20mL为溶剂，45℃浸提1h后过滤，以62%的丙酮定容为50mL，取样液1mL 测定，从上述标准曲线计算相应的多酚含量。

1.2.3酒花多酚的提取工艺

1.2.3.1酒花多酚提取的单因素实验

1.2.3.1.1浸提剂的选择

有机溶剂浸提：准确称取1g啤酒花样品2份，分别用无水丙酮、无水乙醇20mL在45℃加热回流1h后过滤，溶液定容至50mL。用1.2.2中的方法测定多酚的含量。如表2所示。

水浸提：准确称取1g样品置于100mL的三角瓶中，用70mL的蒸馏水置沸水浴中浸提1h后趁热过滤，滤液定容至100mL，测定多酚的含量。

1.2.3.1.2最佳浸提剂浓度的选择

准确称取1g酒花样品5份，分别用10%、30%、50%、70%、90%的丙酮液20mL45℃下加热回流1h后过滤，滤液定容至50mL，测定多酚含量。如图2所示。

1.2.3.1.3浸提料液比的确定

准确称取1g酒花样品3份，分别用70%的丙酮液10mL、20mL、30mL在45℃水浴中加热回流1h后过滤，滤液定容至50mL，测定多酚含量。如表3所示。

1.2.3.1.4浸提温度的确定

准确称取1g酒花样品4份，用70%的丙酮液20mL分别在30℃、40℃、50℃、60℃下加热回流1h后过滤，滤液定容至50mL，测定多酚含量。如图3所示。

1.2.3.1.5浸提时间的确定

准确称取1g酒花样品4份于四个锥形瓶，分别用70%的丙酮液20mL，在45℃下分别加热回流1h、2h、3h、4h后过滤，滤液定容至50mL，测定多酚含量。如图4所示。

1.2.3.2酒花多酚提取的正交试验

根据1.2.3.1实验所得结果，按表1所列的因素水平设计L9(34)正交实验。

确定酒花多酚的最佳提取条件。

2.试验结果：

2.1单宁酸标准曲线

2.2多酚提取的单因素实验