9-4 分离模式介绍

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电泳常见分离模式

常见模式

1.毛细管区带电泳(CZE)

2.非水毛细管电泳(NACE)

3.胶束电动色谱 (MEKC)

4. 毛细管凝胶电泳 (CGE)

常规毛细管电泳

5. 毛细管等电聚焦(CIEF)

6. 毛细管等速电泳(CITP)

7.毛细管电色谱(CEC)

8. 亲和毛细管电泳(ACE)

芯片毛细管电泳

毛细管区带电泳capillary zone electrophoresis

毛细管区带电泳

分离原理:基于试样中各组分荷质比的差异

CZE 基本操作条件

p毛细管(是否涂层;内径;长度)

p电压 (影响电渗及电泳速度)

p缓冲溶液种类与浓度 (双电层厚度)

p缓冲溶液pH (调节电渗流及目标组分的带电性质)

p 添加剂及其含量 (控制电渗流;降低吸附)

胶束电动色谱法

Micellar Electrokinetic Capillary Chromatography,MEKC

SDS

及胶束的形成

分离原理: 基于组分在溶液相与胶束相之间的相互作用。方法优势:可以实现中性微粒间的分离,扩大CE技术应用范围胶束电动色谱法

常用的表面活性剂

1.长链烷基表面活性剂

阴离子型:十二烷基磺酸钠(SDS)

阳离子型:溴化十六烷基三甲胺(CTAB)

2.胆汁酸表面活性剂

天然阴离子表面活性剂(螺旋形胶束)兼手性拆分试剂3.高分子表面活性剂

毛细管电色谱capillary electrochromatography (CEC)

毛细管电色谱

方法原理:

将HPLC固定相颗粒填充(涂

渍或键合)到毛细管中,以试

样与固定相之间的相互作用为

分离机制,以电渗流为驱动力

的色谱过程。

CEC色谱柱的制作

填充柱

•柱塞制作:水玻璃烧制或填料直接烧制•填充方法:高压匀浆法和电动法

•常用填料:ODS固定相及混合官能团固定相

方法优势:具有选择性

不利方面:气泡干扰柱效

开管柱

•实施方法:在毛细管内壁键合或涂层固定相

•制柱方法:涂层聚合物、化学键合及溶胶-凝胶技术

特点:

1.制备简单(无须烧制柱塞)

2.无气泡影响

3. 柱效高(无涡流扩散)

4. 柱容量小

整体柱

•实施方法:柱内聚合形成交联聚合物

•制柱方法:将反应溶液注入毛细管,促发聚合反应.

特点:

1.制备方法简单(无柱塞烧制)

2.多孔结构,渗透性好;

CEC特点

1. 分离效率高

2. 选择性比CZE高

3. 分析速度快

4. 可实现样品富集

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