9-4 分离模式介绍
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电泳常见分离模式
常见模式
1.毛细管区带电泳(CZE)
2.非水毛细管电泳(NACE)
3.胶束电动色谱 (MEKC)
4. 毛细管凝胶电泳 (CGE)
常规毛细管电泳
5. 毛细管等电聚焦(CIEF)
6. 毛细管等速电泳(CITP)
7.毛细管电色谱(CEC)
8. 亲和毛细管电泳(ACE)
芯片毛细管电泳
毛细管区带电泳capillary zone electrophoresis
毛细管区带电泳
分离原理:基于试样中各组分荷质比的差异
CZE 基本操作条件
p毛细管(是否涂层;内径;长度)
p电压 (影响电渗及电泳速度)
p缓冲溶液种类与浓度 (双电层厚度)
p缓冲溶液pH (调节电渗流及目标组分的带电性质)
p 添加剂及其含量 (控制电渗流;降低吸附)
胶束电动色谱法
Micellar Electrokinetic Capillary Chromatography,MEKC
SDS
及胶束的形成
分离原理: 基于组分在溶液相与胶束相之间的相互作用。方法优势:可以实现中性微粒间的分离,扩大CE技术应用范围胶束电动色谱法
常用的表面活性剂
1.长链烷基表面活性剂
阴离子型:十二烷基磺酸钠(SDS)
阳离子型:溴化十六烷基三甲胺(CTAB)
2.胆汁酸表面活性剂
天然阴离子表面活性剂(螺旋形胶束)兼手性拆分试剂3.高分子表面活性剂
毛细管电色谱capillary electrochromatography (CEC)
毛细管电色谱
方法原理:
将HPLC固定相颗粒填充(涂
渍或键合)到毛细管中,以试
样与固定相之间的相互作用为
分离机制,以电渗流为驱动力
的色谱过程。
CEC色谱柱的制作
填充柱
•柱塞制作:水玻璃烧制或填料直接烧制•填充方法:高压匀浆法和电动法
•常用填料:ODS固定相及混合官能团固定相
方法优势:具有选择性
不利方面:气泡干扰柱效
开管柱
•实施方法:在毛细管内壁键合或涂层固定相
•制柱方法:涂层聚合物、化学键合及溶胶-凝胶技术
特点:
1.制备简单(无须烧制柱塞)
2.无气泡影响
3. 柱效高(无涡流扩散)
4. 柱容量小
整体柱
•实施方法:柱内聚合形成交联聚合物
•制柱方法:将反应溶液注入毛细管,促发聚合反应.
特点:
1.制备方法简单(无柱塞烧制)
2.多孔结构,渗透性好;
CEC特点
1. 分离效率高
2. 选择性比CZE高
3. 分析速度快
4. 可实现样品富集