大豆皂甙的分离

合集下载

大豆皂苷

1040521121 高康
简介
• 皂苷又名皂甙或皂素，是固醇类或三萜类化合物的低聚配糖体泛存在于植物和海洋动物体内。大豆皂苷是一种常见的皂苷，它主要存在于豆科植物中。豆类植物种子中大豆皂苷的含量一般在0.62%-6.16%之间。人们对大豆的认识和利用有很久远的历史，但对大豆皂苷的研究起步较晚，直到20世纪90年代中期 DDMP大豆皂苷的发现，才引起人们的重视。
大豆皂苷的应用前景
• 油脂氧化是食物变质的主要原因之一，由于它导致高脂肪食物产生酸败，从而影响食物的营养价值和贮存期。防止油脂氧化酸败最常用的方法是添加抗氧化剂。近年来常用的抗氧化剂多为人工合成，虽然作用效果显著，但对人体有一定的毒副作用，令消费者心存疑虑。
大豆皂苷 mx66633 分享于 2012-05-22 08:40:8.0 大豆皂苷大豆皂苷,◆ 文档格式: .ppt 文档页数: 12页文档大小: 45.5k 文档热度: 文档分类: 论文 -- 毕业论文文档标签: 大豆皂苷系统标签: 大豆提取大孔树脂吸附豆渣微波溶剂
大豆皂苷的提取工艺
• 大孔树脂吸附法称取 36 目的大豆豆渣 10 g, 用 40% 乙醇浸泡 , 在 70 ℃ 条件下回馏 6 h, 将混合物过滤 , 取上清液以 24 mL/min 的流速用 50% 乙醇上柱洗脱 , 得提取物。 • 有机溶剂提取法称取 36 目的大豆豆渣 10g, 按 1：20 料液比加入 75% 乙醇溶剂 , 在 80℃ 条件下提取 2 次 , 每次时间 3 h, 合并提取液并真空抽滤 , 测定固形物质量。
1、四种大豆皂苷提取方法液料比对比四种方法中除大孔树脂吸附法液料比为 1：10 外 , 其余三种均为 1 ：20 。 2、四种大豆皂苷提取方法提取温度对比四种大豆皂苷提取方法提取时所需温度分别为 : 大孔树脂吸附法 70 e 、有机溶剂提取法 80 ℃ 、微波提取法和超声波提取法均为 60 ℃ 。 3、四种大豆皂苷提取方法提取时间对比四种大豆皂苷提取方法提取时所需时间依次为 : 大孔树脂吸附法最长 , 为 6 h; 其次是有机溶剂提取法为 3 h; 再次为超声波提取法 , 需 25 min; 微波提取法最短 , 仅为 90s 。

大豆皂苷

• 四种大豆皂苷提取方法所得大豆皂苷吸光度对比 4、四种大豆皂苷提取方法提取所得大豆皂苷吸光度依次为 : 微波提取法 (0.310)< 超声波提取法 (0.317)< 大孔树脂吸附法 (0.479)< 有机溶剂提取法 (0.489) 。 5、四种大豆皂苷提取方法中大豆皂苷提取率对比四种大豆皂苷提取方法中大豆皂苷提取率依次为 : 微波提取法 (59.8% )< 超声波提取法 (61.0% )< 大孔树脂吸附法 (90.2% )< 有机溶剂提取法 (93.4% ) 。 6、几种大豆皂苷提取方法的比较从上述提取结果对比可以发现 : 在这四种常见方法中 , 有机溶剂提取法的提取率最高 , 提取率可达 93.4%, 但提取步骤较多 , 有机溶剂用量也相对较大 ; 大孔树脂吸附法的提取率也比较高 , 为 90.2%, 料液比较少 , 但提取时间却很长 , 需要 6 h; 微波法提取温度低 , 且提取时间最短 , 提取率为 59.8%; 超声法可以降低提取的温度 , 缩短提取时间 , 提取率 61.0% 。比较而言 , 微波法和超声法提取温度较低、用时短且操作相对简单 , 而大孔树脂吸附法和有机溶剂提取法则可以获得较高的提取率。
• 微波提取法称取 36 目的大豆豆渣 10 g, 按 1 B 20 料液比加入 75% 乙醇溶剂 , 在微波功率270W 的条件下微波提取 90s, 真空抽滤 , 测定固形物质量。 • 超声波提取法称取 36 目的大豆豆渣 10 g, 按 1 B 20 料液比加入 75% 乙醇溶剂 , 以功率 50W 超声处理 25 min, 超声提取温度为 60 e , 过滤 , 旋转蒸发仪挥干 , 用甲醇溶解 , 过滤 , 定容 , 得供试品溶液。

大豆胚芽甲醇提取物中大豆皂甙_大豆异黄酮分离纯化工艺研究

$( !( $ 原料液预处理大豆胚芽甲醇提取液于 !L 下存放 !A4 后取出，离心机 *"""M N =>O 离心 $"=>O，抽滤除去沉淀后真空浓缩得到糖浆状的粗配糖体。 $( !( # 异黄酮甙的测定方法以葛根素为标样紫外法 #:"O= 下定量测定 $( !( * 大豆皂甙的测定方法芳香醛 9 硫酸显色反应后，用分光光度法，在 ::"O= 最大吸收波长处进行定量测定。 $( !( ! 总配糖体的制备粗配糖体用甲醇溶解后，用正丁醇 N 水 + $P $ 混合溶剂震荡萃取，静置 #4 后收集上层正丁醇相并真空浓缩得总配糖体。 $( !( : 有机溶剂沉淀法分离大豆皂甙和异黄酮甙 $( !( :( $ 沉淀溶剂的选择实验利用皂甙类物质难溶于乙醚、丙酮等有机溶剂的性质，选取无水乙醚、丙酮、乙酸乙酯三种有机溶剂为沉淀剂，将总配糖体甲醇溶液逐滴加入沉淀溶剂体系之中，摇匀并静置 $4 后用高速离心机 *"""M N =>O 离心 $"=>O 后取出，分别收集上清液和沉淀并测定其中各自皂甙与异黄酮甙的含量，计算回收率，并根据分离效果选择最佳沉淀溶剂。大豆皂甙，异黄酮甙回收率的计算方法如下：
与大豆异黄酮甙的回收率情况，在 01 值为 2 左右时的回收率并不依此规律变化。在较高极性的丙酮中大（即不调节 01 值的乙酸乙酯溶剂体系），可以达到较豆皂甙回收率最低是因为丙酮 * 甲醇体系能溶解相当数量的大豆皂甙，使其不能充分沉淀，而在极性最低的乙醚中大豆皂甙的回收率也较低说明大豆皂甙在溶剂体系中能否充分沉淀不仅仅取决于体系溶剂的极性。实验中发现，在乙醚中形成的大豆皂甙沉淀颗粒非常细小，离心后仍不能完全聚集，上清液并不澄清，说明相当部分的大豆皂甙微粒并未能从上清液中分离出来，这可能也就是在乙醚沉淀体系中皂甙回收率低的缘故。综合大豆皂甙，异黄酮甙的回收率情况，选择有效成分回收率较高，且毒副作用较小的乙酸乙酯为沉淀剂比较好。 "( "( " 总配糖体甲醇浓度对沉淀分离效果的影响不同母液浓度对大豆皂甙，异黄酮甙回收率的影响如图 +。好的分离效果。 "( "( ! 分离产品的制备在用乙酸乙酯为沉淀溶剂，最佳分离条件下，分离制备所得的大豆异黄酮甙产品 !经测定纯度为大豆皂甙产品! 纯度为 26( 65 。 $3( 45 ，大豆异黄酮甙 "( + 柱层析法分离精制大豆皂甙、 "( +( $ 酮甙硅胶柱层析法分离精制大豆皂甙、大豆异黄

大豆皂苷的提取纯化和测定

大豆皂苷的提取测定1、大豆简介1．1 大豆的组成成分：大豆主要成分为蛋白质35%、脂肪16%~21%、碳水化合物23%~ 27%、水分和粗纤维15%左右、皂苷和异黄酮等糖苷占2%左右, 其中, 皂苷约占0. 5%。

1．2 大豆皂苷的化学组成：大豆皂苷，又称大豆皂甙（Soyasapon ins)属于三萜类齐墩果酸型皂苷, 是三萜类同系物的羟基和糖分子环状半缩醛羟基失水缩合而成, 它可以水解生成多种糖类和配糖体, 目前已确认的大豆皂苷约18种, 是由5种皂苷元( SoyasapogenoⅠ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ )和糖基中的β-D-半乳糖、β-D-木糖、α-L-鼠李糖、α-L-阿拉伯糖、β-D-葡萄糖醛酸等6种单糖以及乙酰基大豆皂苷(A cety1- soyasaponin ) 所组成。

大豆皂苷根据其苷元不同分为A 类、B 类、E 类和DDMP 类, A 类皂苷是以soyasapogeno lA 为配基的双糖皂苷, B 类和E类是以soyasapogeno lB和soyasa- po geno lE为配基的单糖皂苷, DDMP皂苷是以soyas- apogenoB 作配基在C-22 位上结合有2,3-dihydro- 2, 5- dinydroxy- 6-methy-l 4h-py ran-4- one的单糖链皂[ 4- 5 ] 。

因为所有DDMP大豆皂苷对热不稳定, 受热易分解生成A 类和E 类皂苷, 所以, 有些人认为DDMP皂苷是大豆中存在的真正皂苷。

由低聚糖及齐墩果烯三萜缩合形成的一类化合物,具有抗癌、调节免疫功能、防治心血管疾病、抗菌、抗病毒、护肝等多重生理功效。

除用作药物外, 皂苷还可以作为高级化妆品和食品添加剂, 如作为杀菌剂、抗氧化剂、发泡剂等, 在化妆品和食品工业中具有广泛的应用。

大豆加工制品种类繁多，一般分为传统的大豆制品和新兴大豆制品。

传统豆制品分为非发酵制品如豆腐、干豆腐、豆腐皮、豆腐干、豆芽和发酵的豆制品如腐乳、豆豉、豆酱、酱油、天培、纳豆等；新兴的豆制品有大豆油脂、大豆蛋白、大豆磷脂、大豆低聚糖、大豆异黄酮、大豆纤维、大豆皂苷等。

大豆皂苷化学结构及分析方法精品资料

1.2大豆皂苷B型
B型大豆皂苷是以大豆皂醇B（3β，22β，24-三羟基-齐墩果烷-12-烯）为母核结构，C-3结合糖苷的单糖链型皂苷。目前根据C-22的官能团的不同主要分为：DDMP型（αg，βg，γg，αa，βa，γa），B型（Ba，Bb，Bb’，Bx，Bc，Bc’），和E型皂苷（Bd，Be，Be’，Bf，Bg，Bg’）。DDMP型大豆皂苷较为特殊，是在大豆皂醇B配基上，C-22结合一个DDMP环（2,3-二氢-2,5-二羟基-6-甲基-4氢-吡喃-4-酮）；此外，C-22结合羟基为典型的B类皂苷，羟基氧化成酮为E类皂苷。DDMP型皂苷被认为是大豆中皂苷的原始形态，对提取条件比较苛刻，在Fe3+存在的情况下，极易被氧化成B型或E型皂苷[26]。此外，大豆B型皂苷中还含有常见的大豆皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ。
大豆皂苷化学结构及分析方法
摘要：大豆皂苷是豆科植物特别是大豆的主要活性成分之一，目前已经应用到食品、化妆品及药品各个领域。目前根据其苷元结构类型，以C-21，C-22及C-29的官能团不同，把大豆皂苷归纳为三类，分别为A型、B型及Sg-6型。为了便于分析和归纳，本文把大豆皂苷细分为大豆皂苷A、B、DDMP、E、H、I、J等。因大豆皂苷应用广泛，分离检测手段也越来越多。根据大豆皂苷定量定性原则为基础，将分析型检测手段分为两种，一种是分离型检测型的定量手段：如包括薄层色谱（ThinLayerChromatography）、高效液相（HighPerformanceLiquidChromatography）、超高压液相（UltraPerformanceLiquidChromatography）、气相（GasChromatography）；另一种是基于不进行分离的定性分析的检测方法：核磁共振技术（NuclearMagneticResonance）、高速逆流色谱(High-speedCountercurrentChromatography)、质谱（MassSpectrometry）、代谢组学指纹图谱、免疫方法分析组成。值得注意的是质谱联用技术既是重要的定性手段也是常用的定量手段。本文对大豆皂苷的化学结构、检测分析方法进行了综述研究，并对其未来的应用做出了探讨。

大豆皂苷的提取

大豆皂苷的提取
徐龙权;韩颖;田晶;金凤燮
【期刊名称】《大连工业大学学报》
【年(卷),期】2000(019)001
【摘要】为提取具有生理活性和药用价值的大豆皂苷，以脱脂大豆为原料，用乙醇浸提，正丁醇萃取，丙酮沉淀法提取大豆中皂甙，通过紫外光谱法检测大豆皂苷的含量和纯度，得出提取大豆皂苷的最佳条件为温度８０℃，乙醇浓度７０％，浸泡时间７ｈ，大豆皂苷的提取率为９４％。

【总页数】3页(P51-53)
【作者】徐龙权;韩颖;田晶;金凤燮
【作者单位】大连轻工业学院分析中心;大连轻工业学院化学工程系
【正文语种】中文
【中图分类】Q946.839
【相关文献】
1.豆粕中大豆皂苷提取工艺的研究 [J], 阮洪生;陈志宝;朱丹;葛文中
2.脱脂豆粕大豆皂苷提取物的定性分析和抗油脂氧化 [J], 刁小琴;关海宁;徐桂花;马松艳
3.超声波法提取大豆糖蜜中大豆皂苷的研究 [J], 许晶;张永忠;江连洲;李成刚;曲妍妍
4.微波辅助提取挤压后大豆皂苷工艺研究 [J], 周泉城;区颖刚;申德超
5.大豆皂苷Ⅱ的提取及HPLC-MS分析 [J], 徐龙权;田晶
因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

高速逆流色谱分离大豆皂苷和异黄酮

分离色谱技术，用互不混溶的两相溶剂，利在处于高
基金项目：海市科委标准化专项资助（５Ｚ５０）上０Ｄ００１收稿日期：０９—１２２０１— ４作者简介：吴永慧，，９６年出生，女１８硕士，品科学食通讯作者：赵大云，，９６年出生，男１６副教授，品化学食
剂体系下分离大豆异黄酮和皂苷，并通过调整乙酸含量得到最优的溶剂体系。结果表明，该体系下可得到在
分离度很高的两个峰，第一个峰主要为大豆异黄酮，第二个峰为大豆皂苷。随着乙酸含量的增加，苷逐渐集皂
中于第二个峰，大豆异黄酮和大豆皂苷被逐渐分开。正丁醇一％乙酸一水，系对大豆异黄酮和皂苷达到最５体
好的分离效果。大豆粗提物进样量过大时，利于两者的分离，流动相流速为３ｍ／ｉ不在Ｌｍｎ时，最佳的进样量
为１０ｍｇ０。
关键词高速逆流色谱大豆异黄酮大豆皂苷
中图分类号：Ｓ２．Ｔ２２１
文献标识码：Ａ
乙酸、浓硫酸、酚：为分析纯，苯均国药集团化学试剂有限公司；乙腈：色谱纯，国ＳＧＡ公司。美ＩＭ１１３仪器．．
高速逆流色谱：Ｂ０Ａ，海同田生物技术有ＴＥ３０上
限公司；ＰＣ系统：ｔｓ０Ｅ型溶剂泵系统，．ＨＬＷａｅ０ｒ６Ｗａ

植物中皂甙类物质的提取与分离

植物中皂甙类物质的提取与分离皂甙是一类广泛存在于植物中的化合物，具有多种生物活性，如抗菌、抗炎、降低血脂等。

因此，皂甙被广泛应用于药物、保健品及化妆品等领域。

本文将介绍植物中皂甙类物质的提取和分离方法。

一、提取方法1. 水提法水提法是常用的皂甙提取方法。

将干燥或鲜植物材料粉碎后，用水提取，然后通过浓缩、沉淀等工艺步骤得到皂甙物质。

水提法易操作、成本较低，但提取效率低，皂甙的纯度较低。

2. 有机溶剂提取法有机溶剂提取法是利用有机溶剂如醇、乙酸乙酯等接触植物材料，利用溶剂将皂甙分离出来。

有机溶剂提取法提取效率高，皂甙的纯度较高，但操作比较繁琐，使用有机溶剂也会带来环境污染问题。

3. 超声波提取法超声波提取法是利用超声波的振动作用，使有机溶剂和植物材料充分接触，从而提高皂甙提取效率。

超声波提取法操作简便快速，提取效率高，但设备价格较昂贵。

二、分离方法1. 离子交换层析法离子交换层析法是利用离子交换树脂将目标物质分离出来的方法。

该方法具有选性好、分离效果稳定等特点，但设备价格昂贵，操作比较复杂。

2. 逆流色谱法逆流色谱法是利用色谱柱的分离作用，将不同性质的物质分离出来的方法。

该方法具有分离效果稳定、重复性好等特点，但需要专业设备和技术支持。

3. 薄层层析法薄层层析法是利用吸附剂吸附目标物质并在一层薄层上逐渐被分离的方法。

该方法成本低、适用范围广，但分离效果较差。

三、总结植物中皂甙类物质的提取和分离是一个复杂且多样化的过程。

在实际应用中需要根据实际情况选择最合适的方法。

目前，水提法和有机溶剂提取法是两种常用的方法，逆流色谱法和离子交换层析法是高端的方法选择。

最终要选择合适的方法，确保提取得到的皂甙物质的纯度和品质。

两种大豆皂甙提取方法的比较

２．ｐ．ｏｅ．Ｅｎ．ＤｅｔｆＣｈｍｇ，ＤａｉｎＩｓ．ｏｇｔＩｄ。ｌｎ１６３Ｃｈｎ；ｌｎｔｆＬｉｈｎ．Ｄａｉ１０４，ｉａａａ
３．ｃｏｌｆＢｉ．＆Ｆｏｇ．ＳｈｏｏｏｏｄＥｎ，ＤａｉｎＩｓ．ｏｇｔＩｄ．Ｄａｉｎ１６３Ｃｈｎ）ｌｎｔｆＬｉｈｎ，ｌ１０４，ｉａａａＫｅｒｙｗｏｄｓ：ｏｅｎｓｐｎｉｅｔａｔｏａｓｒｈｒｍａｏａｈｙｓｙｂａａｏｎ；ｘｒｃｉｎ；ｄｂｃｏｔｇｒｐｏＡｂｔａｔＩｅｔｇｔｎｘｔａｔｏｔｏｄｓｒｃ：ｎｖｓｉａｉｇｅｒｃｉｎｍｅｈｗｉｈｏｇｎｃｒａｅｔｗｅｕｅａｓｒｈｏａｏｒｐｈｂｅｉｔｒａｉｅｇｎ，ｓｄｂｃｒｍｔｇａｙｙｒｓｎｏｃｌｍｎｔｘｒｃｙａｎｓｐｉｏｕｏｅｔａｔｓｂｅａｏｎｎ．ＡｎｌｚｄｂｙＨＰＬＣ，ＵＶ，ａｄＴＬＣ，ｃｍｐｒｓｎｂｔｅｗｏｅｒｃｏａｙｅｎｏａｉｅｗｅｎｔｘｔａ — ｏｔｏｔｄｙｂａａｏｎｉｅｏｔｄｉｈｉａｒｉｎｍｅｈｏｓｏｆｓｏｅｎｓｐｎｉｓｒｐｒｅｎｔｓｐｐｅ．
Ｖｏ．１．ＮＯ３Ｉ２．Ｓｐ．２００２ｅｔ
文章编号：０５４１（０２０ — １２０１０—０４２０）３０７ —３

大豆皂苷的分离纯化

大豆皂苷的理化性质
物理性质
纯大豆皂苷为白色粉末, 具有辛辣味和微苦味, 对人体各部位的粘膜具有强烈的刺激性。大豆皂苷是两亲性化合物, 具有亲水和亲油两种性质。大豆皂苷还可溶于水, 易溶于热水、稀醇、热甲醇和热乙醇中, 而且在含水丁醇或戊醇中的溶解度较好, 但它不溶或难溶于乙醚、苯等极性小的有机溶剂。大豆皂苷具有热稳定性, 熔点很高, 一般在熔融前就分解, 无明显的熔点。
大豆皂苷的分离纯化
葡聚糖凝胶色谱也称为分子排阻色谱，
凝胶柱系由均匀装
填的多孔凝胶微粒组成，小分子可以进入孔隙之中，大分子不能进入孔内，只能随流动相在凝胶颗粒间隙中流动，最先被淋洗出来，因此
作为分子筛使用，分离大小不同的分子。
这一技术为蛋白质等生物大分子提供了非常温和的分离方法。本试验中采用甲醇为洗脱溶剂，利用葡聚糖凝胶色谱法分离得到高纯度的总大豆皂苷，为后续大豆皂苷单体制备提供很好的原料。
2 高效液相色谱法制备大豆皂苷单体
制备型高效液相色谱技术以获得大量的单成分为目的，具有分
离条件比较温和，分离检测过程中一般没有样品被破坏，装置简单有
效等优点，在天然药物的研究中发挥了重要作用。利用制备型高效液相色谱仪，通过优化流动相、梯度洗脱程序、
该杂志的高级副主编，“均为医学界翘楚”。
进样量，以总大豆皂苷为原料，进行大豆皂苷单体制备。根据谱图手
大豆皂苷的分离纯化
大豆中除了含有大量的脂质和糖质, 还含有固醇配糖体、异黄酮糖体, 其中大豆皂苷的含量只有0.6 %,而且大豆皂苷是强极性酸性皂苷, 有复杂的化学成分, 所以大豆皂苷的分离提取比较困难。大豆皂苷和异黄酮在大豆中共存，在用乙醇浸提和大孔吸附树脂提取大豆皂苷时，往往会与大豆异黄酮一并被提取出来，它们分子极性有重叠，结构类似，皆是由苷元与配糖体组成的糖苷类组分，这对大豆皂苷单体的制备造成了很大的干扰，因此需要除去大豆异黄酮，利用高纯度总大豆皂苷来制备单体。

黄豆皂甙的提取和分离方法的初探

黄豆皂甙的提取和分离方法的初探南方航空(集团)公司航空卫生中心(广州510406)　梁朝晖提　要　用正已烷去除黄豆中的脂质后,用甲醇将皂甙提取出来,蒸去甲醇,用水饱和正丁醇溶解皂甙,并用正丁醇饱和水溶液洗脱糖类及色素等杂质。

蒸去正丁醇后,用甲醇溶解,加入乙醚析出皂甙。

用泡沫试验和Liebermann反应作定性鉴定。

关键词　黄豆　皂甙　提取和分离方法皂甙是一类比较复杂的化合物,它广泛存在于植物中,如蔷薇科、无患子科、云参科、豆科等属植物中。

皂甙分为甾体皂甙和三萜皂甙两类〔1〕。

从中药中提取的皂甙有祛痰、止咳、镇静、止痛、解热、消炎等重要作用;皂甙亦能减低水的表面张力,在水中振荡具有产生泡沫的性质和乳化剂的作用,可用作清洁剂,特别是用作头发和皮肤的护理用品。

皂甙是人参中的主要药用成分,成本价值较高,现探索从黄豆中提取和分离出皂甙,在营养与食品卫生、中医中药、经济价值等方面均具有一定的意义。

1　试剂及仪器①黄豆粉末　市售。

②正己烷、甲醇、正丁醇、乙醚等　均为分析纯。

③水饱和正丁醇溶液　在150ml的分液漏斗中加入21ml的水和100ml的正丁醇,振摇3分钟后,静置分层,去下层后,上层则为水饱和正丁醇。

④正丁醇饱和水溶液　在150ml的分液漏斗中加入14ml的正丁醇和100ml的水,振摇3分钟后,静置分层,去上层后,则下层为正丁醇饱和水溶液。

⑤仪器　索氏抽提器、搅拌器、减压蒸馏装置、比色管等。

2　实验方法211　黄豆中皂甙提取与分离　称取90.5g黄豆粉末,用快速滤纸包好,装于索氏抽提器中,在球瓶中加入300ml的正己烷, 70℃水浴,回流提取脂肪24小时〔1〕;然后改用甲醇,75℃水浴,回流提取皂甙18小时;然后将甲醇提取液在搅拌下,60℃水浴减压蒸去甲醇,残余物用500ml水饱和正丁醇搅拌下溶解,弃去不溶于正丁醇的物质后,将正丁醇层装于分液漏斗中,用正丁醇饱和水溶液150ml分3次萃取洗去色素及糖类等杂质,弃水相;然后在80℃以下蒸去正丁醇,并干燥,称得残渣重量为1.74g:再加入50ml甲醇溶解,搅拌下加入1000ml乙醚,静置24小时,得白色絮状沉淀物,过滤后得黄豆皂甙0.21g。

大豆皂甙的分离纯化与结构鉴定

SS-Ⅱ和SS-Ⅰ中含有A族双糖链大豆皂甙，在电喷雾电离条件下容易丢失糖基及小于糖基的一些分子，进而生成离子强度较高的离子，易于检测。负离子方式下一级谱仅出现稳定的准分子离子峰，不适合分析A族大豆皂甙，故以后的实验以ESI正离子为SS-Ⅱ和 SS-Ⅰ的电离方式。
2.4.3 SS-Ⅱ的质谱分析结果
图1-15 图1-12中4.657min峰中组分的一级和二级质谱图
图1-15中离子强度最高的m/z1029.1是m/z1239失去C-3 位葡萄糖，接着又丢失CH5O2基团而得到的。母离子 m/z1277.7是A4结合一个钾原子而产生的准分子离子峰。
SS-Ⅰ在ESI正离子方式下的一级和二级质谱图中出现了[M+H]+、[M+Na]+和 [M+K]+离子峰。通过分析图1-12中4.271、 4.657 、8.128 、 9.132、10.103、10.930、 13.174和23.972min组分的电喷雾串联质谱数据，各峰分别归属为A1、A4 、 A2 、、 Ba、Bb、Bc、Bb，和Be。、、、
2.3.3 SS-Ⅲ的质谱分析结果
图1-4 图1-3中组分1的一级和二级质谱图
一级质谱图中m/z957.5是Ba分子失去一个氢原子而产生的准分子离子峰。二级谱图中提供了该皂甙分子断裂的碎片信息，通过分析进一步证实了图1-3中组分1为Ba。
SS-Ⅲ在ESI－/MS中都只出现了 Ⅲ [M－H]－准分子离子峰，没有碎片峰，可以确定大豆皂甙的相对分子量。通过分析其二级质谱中丰富的碎片信息，确定图1-3中组分1、组分2、组分3、组分4和组分8 分别是 Ba、 Bb、Bc、Bb，和 Be。
2.4 SS-Ⅱ的HPLC-ESI/MS2分析 2.4.1 SS-Ⅱ的高效液相色谱分离

大豆皂苷分离纯化方法研究进展

黄进[6 ] 研究了甲醇和乙酸乙酯作为沉淀溶剂纯化大豆皂苷。大豆皂苷在乙酸乙酯中溶解度低 ,大豆异黄酮在其中的溶解度高。而在甲醇和乙酸乙酯混和溶剂中大豆皂苷的溶解度进一步降低。田晶等[7] 将大豆皂苷的醇提液经正丁醇萃取 ,减压浓缩得浓缩液加入甲醇溶解后 ,再加入 10 倍体积的丙酮 ,搅拌 ,
利用大豆皂苷在正丁醇中的溶解度较大的性质 , 浓缩液加入一定体积的水溶解 ,再加入等体积的正丁醇萃取 ,减压蒸干回收正丁醇 ,即得大豆皂苷粗品。这种工艺得到的产品含量不高 ,只有 30 %左右[3～7] 。要制备高含量的大豆皂苷 ,必须进行进一步的纯化。 112 有机溶剂沉淀法
大豆皂苷浓缩液经正丁醇萃取 ,减压蒸馏回收正丁醇后得大豆皂苷稠膏 ,先加入甲醇或乙醇溶解 ,再加入乙酸乙酯、丙酮或乙醚等溶剂进行沉淀 ,通过离心分离得大豆皂苷。缺点是沉淀中形成的大豆皂苷颗粒非常细小 ,离心后上清液并不澄清 ,有相当部分的大豆皂苷颗粒并未能从上清液中分离出来 ,大豆皂苷回收率低 ,有机溶剂的用量较多。
许浮萍等[14] 发明采用食用级醇溶液 ,例如乙醇溶液萃取大豆脱脂豆粕 ,得到的提取液经浓缩后进行醇沉 ,醇沉处理得到的上层液经蒸发除去溶剂后加水离心分离 ,得到上清液和沉淀物 ,所述的沉淀物经处理后得到高纯度大豆异黄酮 ;离心所得的上清液用中极性或极性大孔树脂进行吸附分离 ,得到 75 %以上含量大豆皂苷。姜浩奎[15] 将料液经电渗析脱盐后 , 再将料液一次以上通过阳离子交换树脂柱 ,使其电导率进一步下降 ,再将上述料液通过非极性大孔吸附树脂柱 ,用 55 %～65 %的有机溶剂洗脱上述非极性大孔吸附树脂柱 ,收取洗脱液 ,通过真空浓缩回收有机溶剂后 ,将所得产物干燥 ,即得到高含量大豆皂苷。

皂甙提取分离

皂甙提取、分离知母中呋甾皂甙的研究马百平，董俊兴，王秉，颜贤忠自知母AnemarrhenaasphodeloidesBge．根茎的乙醇提取物中，经硅胶柱层析和制备型HPLC分得四种呋甾皂甙。

用化学反应和波谱（IR，FAB－MS，EI－MS，1HNMR，13CNMR，DEPT，一维多重接力CoSY，二维接力HOHAHA，1H－1HCOSY，1H－13CCOSY和NOE差谱）解析，确定其结构为知母皂贰B（anemarsaponinB，I），（25S）－26－O－β－D－吡喃葡萄糖基－5β－呋甾－20（22）－烯－3β，26－二醇－3－O－β－D－吡喃葡萄糖基（1→2）－β...快照...知母中呋甾皂甙的研究马百平，董俊兴，王秉，颜贤忠（军事医学科学院放射医学研究所，北京100850）摘要自知母AnemarrhenaasphodeloidesBge．根茎的乙醇提取物中，经硅胶柱层析和制备型HPLC分得四种呋甾皂甙。

用化学反应和波谱（IR，FAB－MS，EI－MS，1HNMR，13CNMR，DEPT，一维多重接力CoSY，二维接力HOHAHA，1H－1HCOSY，1H－13CCOSY和NOE差谱）解析，确定其结构为知母皂贰B（anemarsaponinB，I），（25S）－26－O－β－D－吡...文献引用 - 相似文献 - 同类文献比色法测定大豆中的总皂甙谷利伟,谷文英文献来自：中国粮油学报 2000年第06期 [CAJ] [PDF]脱脂大豆样品的乙醇提取物以AB - 8大孔吸附树脂快速纯化得到总皂甙 ,用香草醛 -高氯酸体系显色后测定总皂甙含量。

以大豆皂甙B6为标样建立的回归曲线高度显著 ,线性和稳定性可靠。

样品重复测定的变异系数CV =5.72 % ,平均加标回收率为 10 1.7%。

测定结果表明脱脂大豆粕、子叶和胚芽中的皂甙含量分别为 1.0 5%～ 1.2 5% ,1.0 5%和 4 .82 %。