BY4741酿酒酵母菌使用说明
酵母菌表面展示的前期准备步骤
酵母菌表面展示的前期准备步骤酵母菌表面展示是一种常用的生物学实验技术,用于研究酵母菌表面蛋白的功能和相互作用。
在进行酵母菌表面展示之前,需要进行一系列的前期准备步骤,以确保实验的顺利进行和结果的准确可靠。
下面将详细介绍酵母菌表面展示的前期准备步骤。
1. 酵母菌培养基的准备:首先需要准备适合酵母菌生长和表面展示的培养基。
常用的酵母菌培养基包括YPAD培养基(酵母菌粉末、蔗糖、酵母氮碱基、复方氨基酸、蛋白胨等成分)和SD培养基(葡萄糖、酵母氮碱基、蛋白胨、酵母胺基酸等成分)。
将培养基按照配方准确称量和制备,严格控制pH值和温度。
2. 酵母菌菌种的制备:从冷冻保存的酵母菌库中取出所需的菌株,接种在含有相应选择性抗生素(如草地绿藻素或新霉素)的培养基上,通过连续传代使其稳定生长。
定期检测菌种纯度并保存备用。
3. DNA片段的构建与插入:选择目标蛋白的DNA片段,根据需要进行重组或修饰,并通过PCR扩增得到目标片段。
将目标片段与表达载体进行连接,经过酶切和连接反应,获得重组表达载体。
将重组表达载体转化到E.coli菌株中进行扩增,并经酶切和测序验证构建正确。
4. 酵母菌转化:将合适的酵母菌菌种(如酵母菌菌种BY4741)接种到YPAD培养基中,经过培养至对数生长期,收集培养的酵母菌细胞。
使用合适的方法(如化学法、电转法或冷冻法)将目标DNA转化到酵母菌细胞中。
5. 选择性培养与筛选:将转化后的酵母菌细胞以适当稀释度涂布在含有选择性抗生素的培养基上,使得只有带有目标基因的酵母菌形成克隆。
经过选代培养,将表达目标蛋白的酵母菌菌落筛选出来。
6. 酵母菌培养与表达:从筛选出的酵母菌菌落中挑选出单克隆,接种到新的培养基中进行扩增培养。
培养过程中需要注意温度、pH值和培养基的氧气供应等因素,以促进酵母菌生长和蛋白的表达。
7. 酵母菌菌落PCR鉴定:从培养的酵母菌中取出DNA,通过PCR扩增目标基因和随机选取的对照基因,根据扩增产物的大小和阳性对照确定表达目标基因的酵母菌菌落。
BY4742酵母菌使用说明
编号
名称
北京华越洋生物 NRR01120 BY4742 酵母菌
基 本 信 息 :
名称:BY4742 酵母菌
规格:300ul 甘油菌
储 存 温 度 :-‐80℃
类别:毕赤酵母表达菌
将得到的菌株的新鲜培养物转接到适宜的固体培养基及液体培养基中(尽量
增大接种量:如用无菌吸管吸取≥50μl 新鲜培养物至固体培养基,边移动边缓
慢释放),适宜温度下培养,用以菌株的保藏、传代及制备工作菌株。
注 意 事 项 :
1、菌种活化前,将冷冻管保存在低温、清洁、干燥的环境中,长时间室温下放
的增加,细菌的活力会逐渐下降。
2,为保证菌种纯正,避免其它细菌污染,尽量先划平板,然后再挑单克隆
菌落进行后续操作。
冷 冻 管 开 封 :
用浸过 75%酒精的脱脂棉严格消毒冷冻管盖。
菌 株 复 溶 :
无菌环境中旋开装有复溶液的滴瓶盖,吸取 1ml 左右复溶液,加入到冷冻
管中。轻轻振荡,使冻干菌株溶解呈悬浮状。
菌株复壮:
用无菌吸管吸取菌悬液,转移到复溶液滴瓶中。做好标识,在适宜温度下培
养。细菌在 30-‐35℃培养箱中培养 24-‐48h,真菌在 23-‐28℃培养箱中培养 24-‐72h
(必要时,可适当延长培养时间)。
菌 株 传 代 :
诱 导 方 式 :甲 醇
培 养 方 式 :28℃, 有 氧 保 存 方 式 :来自0%甘 油 , -‐80℃
操作说明:
1,本品包含一份甘油菌,使用本甘油菌时可以不用完全融解,在甘油菌表
面蘸取少量涂板或进行液体培养即可。也可以完全融解后使用,但随着冻融次数
酿酒酵母使用方法
酿酒酵母使用方法嘿,朋友们!今天咱来聊聊酿酒酵母这小家伙的使用方法。
你可别小瞧这酿酒酵母,它就像是一个神奇的魔法小精灵,能在酿酒的过程中施展出奇妙的魔法呢!咱先说这选酵母吧,就跟挑朋友似的,得找个合适的。
不同的酵母有不同的脾气和特点,有的能让酒变得香甜醇厚,有的则能带来独特的风味。
这可得好好琢磨琢磨,不然选错了,那不就像找了个不靠谱的朋友,把事情给搞砸啦!然后就是活化酵母啦!这就像是叫醒一个还在睡大觉的小精灵,得给它点温暖,给它点营养,让它活跃起来。
把酵母放在温水里,加上点糖,看着它一点点苏醒、膨胀,就好像看到一个小生命在慢慢复苏,那种感觉可奇妙啦!接下来就是把酵母加入到原料中啦!这就像是把小精灵放入了一个大舞台,让它开始尽情表演。
要注意哦,可不能太粗鲁,得轻轻的、温柔的,不然把小精灵惹生气了咋办?在发酵的过程中,你可得好好照顾这些小精灵。
温度不能太高,也不能太低,就像人一样,得有个舒适的环境。
还要时不时地去看看它们,看看它们有没有在努力工作。
要是发现有啥不对劲的地方,可得赶紧想办法解决,这可关系到最后酿出的酒好不好喝呢!你说这酿酒酵母是不是很神奇?它能把普通的原料变成美味的酒。
就好像一个魔法师,用它的魔法棒轻轻一挥,就变出了让人陶醉的美酒。
等酒发酵好了,那扑鼻的香气,啧啧,真是让人陶醉啊!就好像是小精灵们给你送上的一份珍贵礼物。
这时候,你就可以尽情享受自己的劳动成果啦!想想看,自己亲手酿出的酒,和朋友们一起分享,那该是多么开心的一件事啊!大家一起喝着酒,聊着天,笑着闹着,多惬意啊!所以啊,朋友们,别犹豫啦!赶紧去试试这神奇的酿酒酵母吧,让它为你的生活增添一份别样的乐趣和美味!让我们一起在酿酒的世界里尽情遨游,感受那份独特的快乐和满足!。
酵母实验-学生版
酵母实验-学⽣版酵母系列⼤实验设计PCR介导的酿酒酵母基因敲除1、实验⽬的学习理解酿酒酵母中PCR介导的基因⼀步敲除法的原理,掌握酵母的转化⽅法,了解酵母⽣长及遗传学特性。
2、实验原理酵母菌作为最简单的真核⽣物,能以单倍体和⼆倍体两种形式稳定存在,其中单倍体含有两种交配型,可以⾃由的在单倍体和⼆倍体之间进⾏转换,在⽣物学研究中有着得天独厚的优势。
⾸先酵母菌⽣长速度很快。
对数期⽣长的单倍体菌株在YPD(富营养天然培养基)90分钟分裂⼀代,在合成培养基中140分钟分裂⼀代。
其次,酵母的基因组很⼩,遗传背景相对简单,是⼀种很容易进⾏遗传操作的模式⽣物。
酿酒酵母的基因组只有12052 Kb,其基因组序列早在1996年测序完成,已有约6000个超过100个氨基酸的ORF被报道,只有不到5%的ORF含有内含⼦,其中有约5700个蛋⽩编码基因,分散在16条染⾊体上。
上世纪90年代末,由数个实验室联合进⾏的酿酒酵母基因组敲除项⽬的完成是酵母遗传学研究的⾥程碑事件。
在这个项⽬中,四个基因敲除菌株库被成功构建:两种交配型的单倍体菌株库、杂合⼦⼆倍体菌株库以及⾮必需基因的纯合⼦⼆倍体菌株库。
这个项⽬⼏乎完成了全部ORF的敲除,为⽣物学研究,特别是组学研究,提供了⼗分强⼤的系统性研究⼯具,为后续基因功能的研究奠定了坚实的基础。
此外,酵母作为真核⽣物,与⾼等⽣物在很多代谢通路和蛋⽩表达调节等⽅⾯是⾼度保守的,为⾼等⽣物相关基因,例如疾病基因,功能研究具有提供了简单、易于操作的系统。
⽬前,酿酒酵母已经具有⼀套⼗分灵活快速的遗传操作体系。
酵母允许外源质粒以独⽴复制⼦游离于基因组之外存在,也允许其整合到基因组中。
但跟其他⽣物相⽐,酵母⽐较独特且强⼤的特点是外源序列的整合依赖于同源重组机制。
之前提到的基因组敲除项⽬的完成就是依赖于⾼效率的同源重组,如图-1所⽰。
⼈们利⽤PCR的⽅法,在筛选标记基因两侧引⼊待敲除基因(YFG,your favorite gene)特异性序列;随后将PCR产物通过转化传递到酵母细胞内部;在同源重组的作⽤下,⼀些细胞的对应基因位点的内源性序列被含有同源臂的外源序列直接取代,并通过选择培养基筛选出来。
啤酒专用酵母安全操作及保养规程
啤酒专用酵母安全操作及保养规程
前言
啤酒酵母作为制作啤酒的重要原材料,是啤酒酿造的关键之一。
为
了保障啤酒酿造过程中酵母的品质和稳定性,以及人员的安全,在操
作酵母时需要注意一些规范和安全措施。
本文档就啤酒专用酵母的安
全操作和保养进行详细介绍,以供生产或者爱好者参考。
一、酵母的存储和保养
1.将啤酒专用酵母置于干燥、阴凉、通风的地方,避免阳光
直射和潮湿环境。
2.使用前,应先查看酵母的保质期限及生产日期,如已超过
保质期限或者使用前期限请勿使用。
3.开封前应先检查包装袋或瓶盖是否完好,以便于在使用前
判断是否已经受到污染。
4.收到酵母后,应立即放置于低温下保存,如有长时间未使
用,则需要在保存条件下定期进行活化。
二、酵母的活化
在投入酵母前,需要进行酵母的活化处理,以保障酵母的发酵能力。
酵母活化的方法如下:
1.可将酵母膏涂在培养基的部位上进行活化。
2.制备定量的酵母悬浮液进行活化,并保证该悬浮液的浓度。
酵母使用方法
酵母使用方法
酵母是一种常见的发酵剂,广泛应用于面包、蛋糕、酒类等食
品的制作过程中。
正确的使用酵母可以使食品更加美味和有口感,
下面将介绍一些关于酵母的使用方法。
首先,选择合适的酵母是非常重要的。
市面上常见的酵母有干
酵母和鲜酵母两种。
干酵母保存时间长,使用方便,适合于家庭烘焙;而鲜酵母活性高,适合于大批量面包生产。
在选择酵母时,要
根据自己的需求和实际情况进行选择。
其次,正确的储存酵母也是至关重要的。
干酵母应保存在阴凉
干燥处,避免阳光直射和高温;鲜酵母则需要冷藏保存,避免冷冻。
储存酵母时,要注意密封,以防止潮气和异味的侵入,从而影响酵
母的活性。
接下来,是正确的使用酵母。
在使用干酵母时,可以将其直接
加入面粉中,然后与其他原料一同揉面;而鲜酵母需要先用温水或
者温牛奶搅拌至完全融化,再加入面粉中。
在揉面的过程中,要注
意不要直接将酵母与盐接触,以免影响酵母的发酵效果。
最后,是关于酵母的发酵时间和温度。
一般来说,酵母的发酵
时间和温度是成正比的,温度越高,发酵时间越短。
在冬季或者低
温环境下,可以适当延长发酵时间,或者选择在温暖的地方进行发酵。
而在夏季或者高温环境下,要注意控制发酵时间,以免过度发
酵导致面团松软度不足。
总之,正确的使用酵母可以使食品更加美味和有口感。
在选择
酵母、储存酵母、使用酵母以及控制发酵时间和温度时,都要注意
细节,以确保酵母的活性和发酵效果。
希望以上内容对您有所帮助,祝您烘焙愉快!。
酿酒酵母养殖
酿酒酵母养殖酿酒酵母是一种重要的微生物资源,广泛应用于酿酒工业。
酿酒酵母的养殖是指通过合理的培养条件和方法,使酵母菌体快速增殖和繁衍,以提高酿酒工艺的效率和产品质量。
酿酒酵母的养殖需要合适的培养基。
培养基是酵母生长和繁殖的基础,它应包含足够的营养物质,如碳源、氮源、矿物质等。
常用的培养基有麦芽提取物、葡萄糖、酵母粉等。
为了提高培养基的效果,还可以添加一些生长因子,如维生素、氨基酸等。
此外,控制培养基的pH值和温度也是重要的因素,一般来说,酿酒酵母的适宜pH 值为4.0-6.0,适宜温度为25-30摄氏度。
酿酒酵母的养殖需要合适的氧气供应。
酿酒过程中,酵母需要大量的氧气来进行呼吸作用,以提供能量和生长所需。
因此,在酿酒酵母的养殖中,需要提供足够的氧气供应。
一般来说,可以通过搅拌或通气的方式增加培养液中的氧气含量,从而提高酿酒酵母的生长速度和产酒效果。
酿酒酵母的养殖还需要适当的环境条件。
光照、湿度和环境卫生等因素都会对酵母的生长和繁殖产生影响。
一般来说,酿酒酵母的养殖宜在无菌条件下进行,以避免杂菌污染。
在酿酒酵母的养殖过程中,还需注意一些技巧和方法。
首先,要合理控制酵母的密度,以免过高或过低造成酵母的死亡或生长不良。
其次,要注意培养液的搅拌,以保持培养液中的酵母均匀分布和氧气供应。
此外,酿酒酵母的养殖还需定期检测和调整培养液的营养物质和环境条件,以保证酵母的生长和繁殖。
总结起来,酿酒酵母的养殖是一项复杂而重要的工作,需要合适的培养基、充足的氧气供应和适宜的环境条件。
只有通过科学的方法和技术,才能培养出高质量的酿酒酵母,提高酿酒工艺的效率和产品的质量。
因此,在酿酒酵母的养殖中,我们需要不断学习和探索,以满足酒类市场的需求,推动酿酒工业的发展。
混合型饲料添加剂酿酒酵母的使用方法
混合型饲料添加剂酿酒酵母的使用方法下载提示:该文档是本店铺精心编制而成的,希望大家下载后,能够帮助大家解决实际问题。
文档下载后可定制修改,请根据实际需要进行调整和使用,谢谢!本店铺为大家提供各种类型的实用资料,如教育随笔、日记赏析、句子摘抄、古诗大全、经典美文、话题作文、工作总结、词语解析、文案摘录、其他资料等等,想了解不同资料格式和写法,敬请关注!Download tips: This document is carefully compiled by this editor. I hope that after you download it, it can help you solve practical problems. The document can be customized and modified after downloading, please adjust and use it according to actual needs, thank you! In addition, this shop provides you with various types of practical materials, such as educational essays, diary appreciation, sentence excerpts, ancient poems, classic articles, topic composition, work summary, word parsing, copy excerpts, other materials and so on, want to know different data formats and writing methods, please pay attention!混合型饲料添加剂酿酒酵母的使用方法I. 介绍混合型饲料添加剂是一种提高动物生长速度和增加饲料营养价值的重要工具。
酿酒酵母标准菌株编号
酿酒酵母标准菌株编号酿酒酵母是一种非常重要的微生物,是酿造酒类饮品的主要微生物之一。
酿酒酵母可分为多种不同的菌株,不同菌株的特点各不相同,因此在酒类饮品制造中,选择合适的酿酒酵母是非常关键的一步。
然而,在挑选酿酒酵母的过程中,一项重要而具有标准化的指标便是酿酒酵母标准菌株编号。
接下来我们将分步骤地阐述酿酒酵母标准菌株编号的相关信息。
第一步:了解酿酒酵母标准菌株编号的涵义与作用酿酒酵母标准菌株编号是指对不同种类的酿酒酵母进行分类编号,以便进行标准化管理和挑选。
这些菌株编号可以通过多种渠道获取,例如专业出版物或相关行业组织。
这些编号旨在使酒类饮品工业的各个组成部分(包括生产商、供应商、第三方检测机构等)能够共同使用同样的酵母菌株,确保生产的稳定性和品质的一致性,同时也有助于进行检测和管理。
第二步:了解不同酿酒酵母标准菌株编号的含义酿酒酵母标准菌株编号通常由字母和数字组成,通常分为两部分。
字母代表酵母属,一般为“S”代表Saccharomyces(酿酒酵母的一个重要属种),数字标识具体某个菌株的编号。
例如,S. cerevisiaeBY4741就是一种常见的酿酒酵母标准菌株编号,其中“BY”是菌株的缩写,“4741”则代表了这个具体的菌株编号。
第三步:了解不同酿酒酵母标准菌株编号的用途不同的酿酒酵母标准菌株编号有着各自的用途。
例如,S. cerevisiae BY4741是广泛用于研究酿酒酵母生长和代谢方面的标准菌株,而S. cerevisiae AWRI1631则是用于生产香槟等高档酒类的酿酒酵母标准菌株。
挑选合适的酿酒酵母标准菌株,可以有助于提高酿酒酵母的生产效率和酿酒的品质和口感。
综上所述,酿酒酵母标准菌株编号是酿酒酵母管理和选择的重要指标,它可以及时明确具体的菌株信息,方便行业内各个方面的标准化管理及信息交流。
了解不同酿酒酵母标准菌株编号的含义、作用和用途,可以使我们更加快速准确地选择合适的酿酒酵母,提高酒类饮品生产的效率与品质。
BY4741酿酒酵母菌使用说明
BY4741酿酒酵母菌BY4741StrainBY4741菌信息:培养基:YPD菌株类别:酵母菌培养条件:28℃,有氧,YPD质粒转化:电激保存方式:30%甘油,-20℃基本应用:用于蛋白表达BY4741菌使用说明:四区划线培养,挑单菌落接种培养使用并保存甘油菌。
BY4741操作说明:1,本品包含一份甘油菌,使用本甘油菌时可以不用完全融解,在甘油菌表面蘸取少量涂板或进行液体培养即可。
也可以完全融解后使用,但随着冻融次数的增加,细菌的活力会逐渐下降。
2,为保证菌种纯正,避免其它细菌污染,尽量先划平板,然后再挑单克隆菌落进行后续操作。
冷冻管开封:用浸过75%酒精的脱脂棉严格消毒冷冻管盖。
BY4741菌株复溶:无菌环境中旋开装有复溶液的滴瓶盖,吸取1ml左右复溶液,加入到冷冻管中。
轻轻振荡,使冻干菌株溶解呈悬浮状。
BY4741菌株复壮:用无菌吸管吸取菌悬液,转移到复溶液滴瓶中。
做好标识,在适宜温度下培养。
细菌在30-35℃培养箱中培养24-48h,真菌在23-28℃培养箱中培养24-72h(必要时,可适当延长培养时间)。
BY4741菌株传代:将得到的菌株的新鲜培养物转接到适宜的固体培养基及液体培养基中(尽量增大接种量:如用无菌吸管吸取≥50μl新鲜培养物至固体培养基,边移动边缓慢释放),适宜温度下培养,用以菌株的保藏、传代及制备工作菌株。
注意事项:1、菌种活化前,将冷冻管保存在低温、清洁、干燥的环境中,长时间室温下放置会导致菌种衰退;2、冷冻管开封、冻干粉复溶、菌株恢复培养等操作应在无菌条件下进行;3、一些菌种经过冷冻干燥保存后,延迟期较长,部分需连续两次继代培养才能正常生长;4、苛养菌的培养需采用含特定营养成分的培养基,敬请正确选择,不清楚时来电询问;5、某些厌氧菌的培养,自开封到接种完成,均需以无氧气体充填,以保持厌氧状态;培养过程中亦要保持厌氧状态;6、某些菌种,如肺炎链球菌、流感嗜血杆菌、淋病奈瑟菌等需要5-10%CO2促进生长;7、如发现冷冻管盖松动、复溶液浑浊等异常情况,应停止使用对应产品。
常用酿酒酵母菌株基因型教程文件
常用酿酒酵母菌株基因型Commonly used strains▪▪van Dijken et al. (2000) Enzyme Microb Technol 26:706-714 - compares various characteristics of commonly used lab strains▪Winzeler et al. (2003) Genetics 163:79-89 - uses SFP (single-feature polymorphisms) analysis to study genetic identity between common lab strainsS288CGenotype:MATαSUC2 gal2 mal mel flo1 flo8-1 hap1 ho bio1 bio6Notes: Strain used in the systematic sequencing project, the sequence stored in SGD. S288C does not form pseudohyphae. In addition, since it has a mutated copy of HAP1, it is not a good strain for mitochondrial studies. It has an allelic variant of MIP1 which increases petite frequency. S288C strains are gal2- and they do not use galactose anaerobically.The S288C genome was recently resequenced at the Sanger Institute.References:Mortimer and Johnston (1986) Genetics 113:35-43.BY4743Genotype:MAT a/αhis3Δ1/his3Δ1 leu2Δ0/leu2Δ0 LYS2/lys2Δ0 met15Δ0/MET15 ura3Δ0/ura3Δ0Notes: Strain used in the systematic deletion project, generated from a cross between BY4741 and BY4742, which are derived from S288C. As S288c, these strains have an allelic variant of MIP1 which increases petite frequency. See Brachmann et al. reference for details.References:Brachmann et al. (1998) Yeast 14:115-32.FY4Genotype:MAT aNotes: Derived from S288C.References:Winston et al. (1995) Yeast 11:53-55.FY1679Genotype:MAT a/αura3-52/ura3-52 trp1Δ63/TRP1 leu2Δ1/LEU2 his3Δ200/HIS3 GAL2/GALNotes: Isogenic to S288C; used in the systematic sequencing project, the sequence stored in SGD.References:Winston et al. (1995) Yeast 11:53-55.AB972Genotype:MATα X2180-1B trp10 [rho 0]Notes: Isogenic to S288C; used in the systematic sequencing project, the sequence stored in SGD. AB972 is an ethidium bromide-induced rho- derivative of the strain X2180-1B-trp1.References:Olson MV et al. (1986) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 83:7826-7830.A364AGenotype:MAT a ade1 ade2 ura1 his7 lys2 tyr1 gal1 SUC mal cup BIONotes: Used in the systematic sequencing project, the sequence stored in SGD.References:Hartwell (1967) J. Bacteriol. 93:1662-1670.XJ24-24aGenotype:MAT a ho HMa HMα ade6 arg4-17 trp1-1 tyr7-1 MAL2Notes: Derived from, but not isogenic to, S288CReferences:Strathern et al. (1979) Cell 18:309-319DC5Genotype:MAT a leu2-3,112 his3-11,15 can1-11Notes: Isogenic to S288C; used in the systematic sequencing project, the sequence stored in SGD.References:Broach et al. (1979) Gene 8:121-133X2180-1AGenotype:MAT a SUC2 mal mel gal2 CUP1Notes:S288c spontaneously diploidized to give rise to X2180. The haploid segregants X2180-1a and X2180-1b were obtained from sporulated X2180YNN216Genotype:MAT a/αura3-52/ura3-52 lys2-801amber/lys2-801amber ade2-101ochre/ade2-101ochreNotes: Congenic to S288C (see Sikorski and Hieter). Used to derive YSS and CY strains (see Sobel and Wolin).YPH499Genotype:MAT a ura3-52 lys2-801_amber ade2-101_ochre trp1-Δ63 his3-Δ200 leu2-Δ1Notes: Contains nonrevertible (deletion) auxotrophic mutations that can be used for selection of vectors. Note that trp1-Δ63, unlike trp1-Δ1, does not delete adjacent GAL3 UAS sequence and retains homologyto TRP1 selectable marker.gal2-, does not use galactose anaerobically. Derived from the diploid strain YNN216 (Johnston and Davis 1984; original source: M. Carlson, Columbia University), which is congenic with S288C.YPH500Genotype:MATαura3-52 lys2-801_amber ade2-101_ochre trp1-Δ63 his3-Δ200 leu2-Δ1Notes:MATα strain isogenic to YPH499 except at mating type locus. Derived from the diploid strain YNN216 (Johnston and Davis 1984; original source: M. Carlson, Columbia University), which is congenic with S288C.YPH501Genotype:MAT a/MATαura3-52/ura3-52 lys2-801_amber/lys2-801_amber ade2-101_ochre/ade2-101_ochre trp1-Δ63/trp1-Δ63 his3-Δ200/his3-Δ200 leu2-Δ1/leu2-Δ1Notes:a/α diploid isogenic to YPH499 and YPH500. Derived from the diploid strain YNN216 (Johnston and Davis 1984; original source: M. Carlson, Columbia University), which is congenic with S288C.Sigma 1278BNotes: Used in pseudohyphal growth studies. Detailed notes about the sigma strains have been kindly provided by Cora Styles.Granek and Magwene, PLoS Genet. 2010 Jan 22;6(1):e1000823, established that certain lineages of theSigma1278B background contain a nonsense mutation in RIM15, a G-to-T transversion at position 1216 that converts a Gly codon to an opal stop codon. This rim15 mutation interacts epistatically with mutations in certain other genes to affect colony morphology.Annotation of the Sigma1278b genome and information about the systematic deletion collection can be found here. SK1Genotype:MAT a/α HO gal2 cup S can1R BIONotes: Commonly used for studying sporulation or meiosis. Canavanine-resistant derivative.The SK1 genome was sequenced at the Sanger Institute.References:Kane SM and Roth J. (1974) Bacteriol. 118: 8-14CEN.PK (aka CEN.PK2)Genotype:MAT a/α ura3-52/ura3-52 trp1-289/trp1-289 leu2-3_112/leu2-3_112 his3 Δ1/his3 Δ1 MAL2-8C/MAL2-8C SUC2/SUC2Notes: CEN.PK possesses a mutation in CYR1 (A5627T corresponding to a K1876M substitution near the end of the catalytic domain in adenylate cyclase which eliminates glucose- and acidification-induced cAMP signalling and delays glucose-induced loss of stress resistance (Vanhalewyn et al., 1999; Dumortier et al., 2000).References:van Dijken et al. (2000) Enzyme Microb Technol 26:706-714W303Genotype:MAT a/MATα {leu2-3,112 trp1-1 can1-100 ura3-1 ade2-1 his3-11,15} [phi+]Notes: W303 also contains a bud4 mutation that causes haploids to bud with a mixture of axial and bipolar budding patterns. In addition, the original W303 strain contains the rad5-535 allele. As S288c, W303 has an allelic variantof MIP1 which increases petite frequency.The W303 genome was sequenced at the Sanger Institute.References: W303 constructed by Rodney Rothstein (see detailed notes from RR and Stephan Bartsch).bud4 info: Voth et al. (2005) Eukaryotic Cell, 4:1018-28.rad5-535 info: Fan et al. (1996) Genetics 142:749W303-1AGenotype:MAT a {leu2-3,112 trp1-1 can1-100 ura3-1 ade2-1 his3-11,15}Notes: W303-1A possesses a ybp1-1 mutation (I7L, F328V, K343E, N571D) which abolishes Ybp1p function, increasing sensitivity to oxidative stress.References: W303 constructed by Rodney Rothstein (see detailed notes from RR and Stephan Bartsch).ybp1-1 info: Veal et al. (2003) J. Biol. Chem. 278:30896-904.W303-1BGenotype:MATα {leu2-3,112 trp1-1 can1-100 ura3-1 ade2-1 his3-11,15}References: W303 constructed by Rodney Rothstein (see detailed notes from RR and Stephan Bartsch).W303-K6001Genotype:MAT a; {ade2-1, trp1-1, can1-100, leu2-3,112, his3-11,15, GAL, psi+, ho::HO::CDC6 (at HO), cdc6::hisG, ura3::URA3 GAL-ubiR-CDC6 (at URA3)}References: K6001 was developed by Bobola et al in Kim Nasmyth's lab (PMID: 8625408), and has become a common model in yeast aging research (PMID: 15489200). Its genome has been sequenced by Timmermann et al (PMID: 20729566)D273-10BGenotype:MATαmalNotes: Normal cytochrome content and respiration; low frequency of rho-. This strain and its auxotrophic derivatives were used in numerious laboratories for mitochondrial and related studies and for mutant screens. Good respirer that's relatively resistant to glucose repression.References:Sherman, F. (1963) Genetics 48:375-385.FL100Genotype:MAT aReferences:Lacroute, F. (1968) J. Bacteriol. 95:824-832.Sources: ATCC: 28383SEY6210/SEY6211Genotype:MAT a/MATαleu2-3,112/leu2-3,112 ura3-52/ura3-52 his3-Δ200/his3-Δ200 trp1-Δ901/trp1-Δ901ade2/ADE2 suc2-Δ9/suc2-Δ9 GAL/GAL LYS2/lys2-801Notes: SEY6210/SEY6211, also known as SEY6210.5, was constructed by Scott Emr and has been used in studies of autophagy, protein sorting etc. It is the product of crossing with strains from 5 different labs (Gerry Fink, Ron Davis, David Botstein, Fred Sherman, Randy Schekman). It has several selectable markers, good growth properties and good sporulation.References:Robinson et al. (1988) Mol Cell Biol 8(11):4936-48SEY6210Genotype:MATαleu2-3,112 ura3-52 his3-Δ200 trp1-Δ901 suc2-Δ9 lys2-801; GALNotes: SEY6210 is a MATalpha haploid constructed by Scott Emr and has been used in studies of autophagy, protein sorting etc. It is the product of crossing with strains from 5 different labs (Gerry Fink, Ron Davis, David Botstein, Fred Sherman, Randy Schekman). It has several selectable markers and good growth properties. References:Robinson et al. (1988) Mol Cell Biol 8(11):4936-48SEY6211Genotype:MAT a leu2-3,112 ura3-52 his3-Δ200 trp1-Δ901 ade2-101 suc2-Δ9; GALNotes: SEY6211 is a MATa haploid constructed by Scott Emr and has been used in studies of autophagy, protein sorting etc. It is the product of crossing with strains from 5 different labs (Gerry Fink, Ron Davis, David Botstein, Fred Sherman, Randy Schekman). It has several selectable markers and good growth properties.References:Robinson et al. (1988) Mol Cell Biol 8(11):4936-48JK9-3dThere are a, alpha and a/alpha diploids of JK9-3d with the following genotypes:Genotypes: JK9-3da MAT a leu2-3,112 ura3-52 rme1 trp1 his4JK9-3dα has the same genotype as JK9-3da with the exception of the MAT locusJK9-3da/α is homozygous for all markers except mating typeNotes: JK9-3d was constructed by Jeanette Kunz while in Mike Hall's lab. She made the original strain while Joe Heitman isolated isogenic strains of opposite mating type and derived the a/alpha isogenic diploid by mating type switching. It has in its background S288c, a strain from the Oshima lab, and a strain from the Herskowitz lab. It was chosen because of its robust growth and sporulation, as well as good growth on galactose (GAL+) (so that genes under control of the galactose promoter could be induced). It may also have a SUP mutation that allows translation through premature STOP codons and therefore produces functional alleles with many point mutations. References:Heitman et al. (1991a) Science 253(5022):905-9 and Heitman et al. (1991b) Proc Natl Acad Sci U S A 88(5):1948-52RM11-1aGenotype:MAT a leu2Δ ura3Δ ho::KanNotes: RM11-1a is a haploid derivative of Bb32(3), a natural isolate collected by Robert Mortimer from a California vineyard, as in Mortimer et al., 1994. It has high spore viability (80–90%) and has been extensively characterized phenotypically under a wide range of conditions. It has a significantly longer life span than typical lab yeast strains and accumulates age-associated abnormalities at a lower rate. It displays approximately 0.5–1% sequence divergence relative to S288c. More information is available at the Broad Institute website.References:Brem et al. (2002) Science 296(5568):752-5Y55Genotype:MAT a /MAT alpha HO/HONotes: Y55 is a prototrophic, homothallic diploid strain that was originally isolated by Dennis Winge. Many auxotrophic mutant derivatives have been created by John McCusker by using ethidium bromide treatment to eliminate non-auxotrophs. Y55 background strains have been used to study the timing of meiotic recombination (Borts et al. 1984); to isolate almost all the subunits of the proteasome (McCusker and Haber 1988a, 1988b); to get mutations in PMA1 and related genes (McCusker 1986); and to do meiotic mapping and interference experiments (Malkova et al. 2004).。
酵母高通量筛选耐干旱基因报告
实验报告酵母筛选耐干旱基因酵母高通量筛选耐干旱基因结题报告目的:筛选某物种文库在酵母菌株BY4741中耐干旱的基因。
方法:将pYES2空载转化酵母菌株BY4741作为对照组,通过酵母表型验证,筛选耐干旱基因。
材料:1.载体:pYES22.培养基:1). 酵母完全培养基:YPDA:1% Yeast extract,2% Tryptone,2% Glucose,0.02% Adenine。
2). 酵母缺陷型筛选培养基:参照Clontech公司的PT3024-1/Yeast Protocols Handbook,其中各种培养基分别以下列符号表示:SD-U:-Ura,SG-U:-Ura。
3. 其他贮备液:10 × TE:0.1 M Tris-HCl(pH7.5),10 mM EDTA,高压灭菌;10 × LiAc:1 M LiAc (pH7.5),高压灭菌。
第一部分文库构建之前已完成某物种文库构建。
第二部分将空载质粒转化受体菌BY47411.1酵母转化将以下质粒分别转入BY4741中:Reaction plasmid涂板种类备注1pYES2SD-U对照组1.2 酵母转化方法1.从YPDA平板挑取BY4741单菌落接种于YPDA液体培养基4 ml,30℃,225 rpm,振荡培养18-20 h(过夜),至OD600>1.5。
2.转接YPDA液体培养基,培养体积为50 ml,使初始OD600=0.2,30℃,225 rpm,振荡培养4-5h,至OD600=0.6。
3.离心收菌,室温,4000 rpm,5 min。
4.用20 ml无菌水重悬菌体,混匀,离心收菌,室温,4000 rpm,5 min,弃上清。
5.用5 ml 0.1 M LiAc重悬菌体,混匀,离心收菌,室温,4000 rpm,5 min,弃上清。
6.用500 ul 0.1 M LiAc重悬菌体,混匀,分装至1.5 ml离心管,每个50 ul(每个转化),备用。
酵母的管理与使用
酵母的管理与使用一.酵母管理的目的和原则啤酒工厂的酵母管理包含了酵母选育、酵母的扩大培养、酵母的回收和使用以及酵母的合理保存等方面,在整个酵母管理过程中的杂菌污染控制是极为关键的内容。
几个基本概念:1)啤酒的风味质量更多地决定于酵母的状态而不是麦汁的组成;2)合理的麦汁组成是保证酵母具有良好状态的重要条件;3)新生酵母细胞和健壮酵母细胞在营养基质中的发酵状态与发酵结果是啤酒风味的主体;4)酵母扩培、添加与回收过程管理的主要目标是保证活性细胞和新生细胞在酵母细胞总量中的数量比例优势;5)酵母管理的全过程必须注意的是提供酵母舒适的生存环境。
酵母管理的目的是使酵母在各种条件下保持性能优良和健壮的状态,也就是具有良好的:生存活性和生理活性。
生存活性体现了酵母的生存能力和繁殖能力,其测定可用荧光法、甲基蓝染色法或者测定细胞内ATP或NADH的含量。
生理活性体现了酵母的环境适应能力和代谢能力,许多不同的实验室方法都希望能测量出标准条件下的代谢活性,如酸化能力实验、细胞内的PH值,一些细胞内化合物的数量如ATP、NADH、肝糖原、海藻糖、甾醇、不饱和脂肪酸,糖分解的速率或CO产生的速率等。
2要在酵母管理过程中尽量提供:代谢必要的能源和均衡的营养环境。
要控制多变的代谢条件,保持基本稳定的环境。
要昼避免各种外来的刺激(Stress)作用,剪切力刺激(包括机械剪切力、流体切变剪切力等);氧化刺激(包括过度的氧化、缺乏营养基质条件下的氧化);毒性刺激(在活性代谢和非活性代谢的条件下的浓度控制);酒精毒性刺激(在CO2活性代谢和非活性代谢的情况下的浓度控制);温度刺激(包括冷、热刺激);渗透压刺激(包括麦汁浓度、无机离子含量);压力刺激(细胞表面承受的最大压力值和压力骤变状态);杂菌代谢产物的刺激(包括有机酸、毒素、胞外酶分泌和其他有毒、有害物质的积累)应该说啤酒风味的组成成份主要来自于酵母的代谢过程,啤酒的风味质量更多地决定于酵母的状态而不是麦汁的组成。
酵母粉的用法、用量,使用技巧
酵母粉的用法、用量,使用技巧前段时间疫情紧张,大家基本足不出户,买菜不便。
据数据统计,那段时间酵母的销量奇高,不少地方卖到断货(豆妈所在的地方就有好几天买不到酵母的)。
想必居家做面点是许多家里解决三餐、打发时间的好“手段”。
于是就有朋友的问题来了,做面食往往少不了酵母,那酵母粉可以多放吗?一般放多少合适?如果经常食用会不会对身体有危害呢?今天的这篇文章,豆妈就专门来讲讲关于酵母的那些事儿,希望我的经验能为您解惑一二。
一、酵母粉是什么目前我们在超市买的基本都是活性干酵母粉,它是一种天然的酵母菌提取物,不仅营养成分丰富,还富含维生素和矿物质,并对面粉中的维生素也具有一定的保护作用。
不仅如此,酵母菌在繁殖的过程中还能增加面团中维B的含量,所以用它来发酵来制作的面食营养价值要比没发酵的面食更高。
二、酵母粉的用法做面食时,有些朋友会直接将酵母粉倒入面粉中。
但对于新手来讲,先将酵母粉活化更容易成功。
具体方法为:将酵母粉倒入30℃左右的温水中搅拌融化,静置3-5分钟后再倒入面粉中。
如果用的是南瓜泥之类的,可将酵母粉放入温热的南瓜泥中搅拌融化后再混合面粉。
三、酵母粉的用量面团的发酵效果很大程度上取决于酵母粉的发酵力,发酵力相同的酵母,在同等条件下,如增加酵母粉的用量可提升发酵速度;反之,如减少用量则降低发酵速度。
对于新手来说,一般建议酵母粉的用量宜多不宜少。
豆妈在操作时,一般面粉与酵母粉的比例按照100:1来使用,好用又好记。
四、酵母粉放多了会有影响吗?虽然我们建议多放些酵母粉,可以提升发酵速度,但显然酵母粉并非越多越好,过多的酵母粉一样会影响面团的品质,导致面团发酸,或者酵子味重。
五、经常吃酵母粉好吗?会不会对身体有危害?首先,酵母粉是天然物质,对身体不会有什么影响,并且食用发酵过的食物更易消化,营养价值也相对更高。
您看看以大馒头为主食的山东人、河南人,不都个个身体健壮呢~其次,一旦酵母粉使用过多,面点的味道就不好了,我相信您也不愿意食用。
酿酒酵母
酒用酵母是指含有大量能将糖类转化为酒精的酵母等人工培养液,它与酵母的概念有所区别,酵母是指个体的微生物酵母菌。
酿酒:利用酵母菌的发酵作用在无氧状态下分解葡萄糖产生副产品甲醚再经过酯化作用产生乙醇。
【产品特点】用于酿造酒用的酵母。
多为酿酒酵母的不同品种。
酒类生产之所以使用酵母,特别是人工培养的酵母,其目的是为了调高出酒率。
酵母在肥料中主要是起发酵作用的,沂源康源生物科技有限公司发酵液是由:放线菌、乳酸菌、枯草杆菌、芽孢杆菌、光合细菌、酵母菌、等单一菌种经特殊工艺研制而成的高效复合微生物菌液。
【作用原理】酿酒酵母菌作为肥料中代替肥料发酵剂,有极强的好(耗)氧发酵分解能力。
把复杂的有机物质分解成高效肥料的微生物制剂统称肥料发酵剂。
肥料发酵剂分为人工选育的发酵剂和自然选育的发酵剂。
过期酵母粉能做肥料吗? 过期与变质存在区别,保质期内也可能变质的,只要没有变质,过保质期也没有问题的。
最主要是查看过期产品与保质期内产品是否存在差别?一般保质期的意思是保证在这个时间内,正常合理存储条件下不会变质,而不是过了这个时间就一定变质变质的就会对身体有伤害,没有变质就没有问题的。
【质量标准】150亿/克
【产品规格】20kg/袋、25kg/袋不等,可定制
【保质期】十二个月
【注意事项】1、置于阴凉干燥处,避免潮湿、暴晒
2、开包后应短期内用完。
酿酒酵母养殖
酿酒酵母养殖一、养殖方法酿酒酵母是一种专门用于发酵酿造酒类的微生物。
为了养殖酿酒酵母,首先需要选择合适的培养基。
常用的培养基包括麦芽汤、葡萄汁、果汁等。
接种酵母菌时,应将培养基加热至80℃左右,然后冷却至适宜的温度(一般在20℃-30℃之间)。
接种时,应注意保持无菌环境,避免杂菌污染。
在养殖过程中,温度控制非常重要。
一般来说,酿酒酵母的适宜生长温度为20℃-30℃。
温度过高或过低都会影响酵母的生长和发酵能力。
此外,养殖容器也需要选择适当的大小和材质。
通常情况下,使用塑料或玻璃容器较为常见。
二、应用领域酿酒酵母广泛应用于酿造工业中。
它可以将发酵基质中的糖分解为酒精和二氧化碳,从而实现酿酒过程。
酿酒酵母对于酿造啤酒、葡萄酒、黄酒等各种酒类都起着至关重要的作用。
在酿造过程中,酿酒酵母可以产生丰富的香气和口感,使得酒类更加美味可口。
除了酿酒业,酿酒酵母还可以在食品行业中得到应用。
例如,在面包、发酵酱油、发酵豆瓣酱等食品的制作过程中,酿酒酵母也扮演着重要的角色。
它能够使食品发酵,增加食品的口感和风味。
三、注意事项在养殖酿酒酵母时,需要注意以下几点:1. 保持无菌环境。
酿酒酵母对杂菌非常敏感,因此在养殖过程中要注意保持无菌操作,避免杂菌污染。
2. 控制适宜的温度。
温度是影响酵母生长和发酵的关键因素,要合理控制温度,避免过高或过低。
3. 注意培养基的配比。
不同的酿酒酵母对培养基的要求有所不同,需要根据具体情况进行调配。
4. 定期搅拌。
搅拌可以促进酿酒酵母的均匀分布和氧气的供应,有利于其生长和繁殖。
5. 防止过度密封。
由于酿酒酵母产生二氧化碳,养殖容器不能过度密封,否则会导致压力过高而破裂。
通过合理的养殖方法和注意事项,可以提高酿酒酵母的养殖效率和质量,为酿造业和食品行业提供更好的支持。
酿酒酵母的应用不仅丰富了人们的饮食文化,也推动了相关产业的发展。
相信随着科技的进步和人们对酒类、食品品质的不断追求,酿酒酵母的养殖和应用将会有更广阔的前景。
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BY4741酿酒酵母菌
BY4741Strain
BY4741菌信息:
培养基:YPD
菌株类别:酵母菌
培养条件:28℃,有氧,YPD
质粒转化:电激
保存方式:30%甘油,-20℃
基本应用:用于蛋白表达
BY4741菌使用说明:
四区划线培养,挑单菌落接种培养使用并保存甘油菌。
BY4741操作说明:
1,本品包含一份甘油菌,使用本甘油菌时可以不用完全融解,在甘油菌表面蘸取少量涂板或进行液体培养即可。
也可以完全融解后使用,但随着冻融次数的增加,细菌的活力会逐渐下降。
2,为保证菌种纯正,避免其它细菌污染,尽量先划平板,然后再挑单克隆菌落进行后续操作。
冷冻管开封:
用浸过75%酒精的脱脂棉严格消毒冷冻管盖。
BY4741菌株复溶:
无菌环境中旋开装有复溶液的滴瓶盖,吸取1ml左右复溶液,加入到冷冻管中。
轻轻振荡,使冻干菌株溶解呈悬浮状。
BY4741菌株复壮:
用无菌吸管吸取菌悬液,转移到复溶液滴瓶中。
做好标识,在适宜温度下培养。
细菌在30-35℃培养箱中培养24-48h,真菌在23-28℃培养箱中培养24-72h(必要时,可适当延长培养时间)。
BY4741菌株传代:
将得到的菌株的新鲜培养物转接到适宜的固体培养基及液体培养基中(尽量增大接种量:如用无菌吸管吸取≥50μl新鲜培养物至固体培养基,边移动边缓慢释放),适宜温度下培养,用以菌株的保藏、传代及制备工作菌株。
注意事项:
1、菌种活化前,将冷冻管保存在低温、清洁、干燥的环境中,长时间室温下放置会导致
菌种衰退;
2、冷冻管开封、冻干粉复溶、菌株恢复培养等操作应在无菌条件下进行;
3、一些菌种经过冷冻干燥保存后,延迟期较长,部分需连续两次继代培养才能正常生长;
4、苛养菌的培养需采用含特定营养成分的培养基,敬请正确选择,不清楚时来电询问;
5、某些厌氧菌的培养,自开封到接种完成,均需以无氧气体充填,以保持厌氧状态;培养过程中亦要保持厌氧状态;
6、某些菌种,如肺炎链球菌、流感嗜血杆菌、淋病奈瑟菌等需要5-10%CO2促进生长;
7、如发现冷冻管盖松动、复溶液浑浊等异常情况,应停止使用对应产品。
8、部分菌种有致病性、扩散性,请专业人员在专业环境下有保护性操作。
BY4741菌保藏条件:
-20℃保存(复溶液于2-8℃保存)
保藏时间:
2-10年,应根据菌种状况及时转接。