醋酸洋红染色液
实验室常用染色液
他用来染细胞质时， 能把 胶 胚胎材料等。
刚果红 可以跟苏 所以洗涤和脱水 处理要迅速。
三、常用染料介绍 （一）天然染料1、苏木精苏木精是从南美的苏木 （热带豆科植物） 干枝中用乙醚浸制出来的一种色素， 是最常用的染 料之 一。
苏木精不能直接染色， 必须暴露在通气的地方， 使他变成氧化苏木精 （又叫苏木素） 后才能 使用，这叫做“成熟” 。
苏木精的“成熟”过程需时较长，配置后时间愈久，染色力 愈强。
被染材 料必须经金属盐作媒剂作用后才有着色力。
所以在配制苏木精染剂时都要用媒 染剂。
常用的媒染剂 有硫酸铝按、钾明矾和铁明矾等。
苏木精是淡黄色到锈紫色的结晶体， 易溶于酒精， 微溶于水和甘油， 是染细胞核的优良 材 料，他能把细胞中不同的结构分化出各种不同的颜色。
分化时组织所染的颜色因处理的情 况而异， 用酸性溶液 （如盐酸—酒精） 分化后呈红色， 水洗后仍恢复青蓝色， 用碱性溶液 （如 氨水）分 化后呈蓝色，水洗后呈蓝黑色。
2、洋红洋红又叫胭脂红或卡红。
一种热带产的雌性胭脂虫干燥后，磨成粉末， 提取出虫红，再用明 矾处 理，除去其中杂质， 就制成洋红。
单纯的洋红不能染色， 要经酸性或碱性溶液溶解后才 能染色。
常 用的酸性溶液有冰醋酸或苦味酸，碱性溶液有氨水、硼砂等。
洋红使细胞核的优良染料， 染色的标本不易褪色。
用作切片或组织块染都适宜， 尤其适宜于 小型 材料的整体染色。
用洋红配成的溶液染色后能保持几年。
洋红溶液出现浑浊时要过滤后 再用。
（二）人工染料人工染料， 即苯胺染料或煤焦油染料，种类很多， 应用极广。
它们的缺点是经日光照射容易 褪 色，苯胺蓝、亮绿、甲基绿等更易褪色。
在制片中注意掌握酸碱度，并避免日光直射，也 能经几年不 褪色。
1、酸性品红 酸性品红是酸性染料，呈红色粉末状，能容于水，略溶于酒精（0.3% ）。
他是良好的细胞制染色剂，在动物制片上应用很广，在植物制片上用来染皮层、髓部等薄壁细胞和纤维素壁。
常用染色液配方
实验室常用染色液配方1、吕氏(Loeffler)美蓝染色液A液：美蓝(Methylene blue) 0.3 克95%酒精毫升B液：氢氧化钾(KOH) 0.01 克蒸馏水100 毫升分别配制A液和B液，然后混合即成。
2、齐氏(Ziehl)石炭酸复红染色液A液：碱性复红(Basic fuchsin) 0.3 克95%酒精10.O 毫升B液：石炭酸(苯酚) 5.0 克蒸馏水95 毫升将碱性复红溶于95%酒精中，配成A液。
将石炭酸溶于蒸馏水中，配成B液。
将两者混合即成。
3、结晶紫染色液(Huclker改订)A液：结晶紫(Crystai violet) 2.5 克95%酒精25.0 毫升B液：草酸铵(NH4)2C2O4H2O 1.0 克蒸馏水100 毫升将结晶紫研细后，加入95%酒精，使之溶解，配成A液。
将草酸铵溶于蒸馏水，配成B液。
两液混合即成。
4、路戈氏(LugoI)碘液(革氏鉴别染色用)碘1.0克碘化钾2.0克蒸馏水300毫升先将碘化钾溶于少量蒸馏水中，再将碘溶于碘化钾溶液中，溶时可稍加热，最后加足蒸馏水量。
5、番红染色液(革氏鉴别染色用)番红O(Safranin O) 2.0克蒸馏水100毫升6、孔雀绿染色液(芽孢染色用)孔雀绿(Malachite green) 5.0克蒸馏水100毫升先将孔雀绿研细，加少许95%酒精溶解，再加蒸馏水。
7、Dorner黑素液(英膜染色用)黑素(Nigrosin) 10.0克蒸馏水100毫升福尔马林(40%甲醛) 0.5毫升将黑素在蒸馏水中煮沸5分钟，加入福尔马林作为防腐剂，用玻璃棉过滤。
8、刚果红染色液刚果红(Congo red) 2.0克蒸馏水100毫升9、稀释结晶紫染液(放线菌染色用)结晶紫染色液(同3) 5.0毫升蒸馏水95.010、乳酸石碳酸棉蓝染色液（真菌制片，短期保存）石炭酸10.0克甘油20.0毫升乳酸(比重l.21) 10.0毫升棉蓝0.02克蒸馏水10.0毫升将碳酸加在蒸溜水中加热溶化，加入乳酸和甘油，最后加入棉蓝，溶解即成。
常用染色液和试剂的配制
一、埃利希(EhrIiCh)氏苏木精染液先将苏木精2g溶于IOOm1乙醇中，再加冰醋酸IOm1,混合后加蒸储水IOOm1和IOOm1甘油，然后加硫酸铝钾(约Iog)至饱和，搅拌均匀，倒入瓶中。
将瓶口用1层纱布包着小块棉花塞上，放在暗处通风的地方，并经常摇动促进“成熟”，直到液体颜色变为深红色为止。
成熟时间约2-4周。
若加0.4g碘酸钠可加快成熟。
二、吉姆萨(GiemSa)氏母液将吉姆萨粉末Ig先溶于少量甘油，在研钵内研磨30min以上，至看不见颗粒为止，再将全部(66m1)剩余甘油倒入，于56℃温箱内保温2h。
然后再加入甲醇(66m1),搅匀后保存于棕色瓶中。
母液配制后放入冰箱可长期保存，一般刚配制的母液染色效果欠佳，保存时间越长越好。
临用时用PH6.8的磷酸盐缓冲液稀释10倍。
三、瑞(Wright)氏染液称取瑞氏染料粉末OJg于研钵内研细后，加入少量甲醇再反复研磨，最后将全部甲醇(总共60m1)加入研匀，染料全部溶解后，将染液保存于棕色瓶内备用。
四、醋酸洋红染液将洋红粉末Ig倒入IOOm145%醋酸溶液中，边煮边搅拌，煮沸(沸腾时间不超过30s),冷却后过滤，即可使用。
也可再加入1%~2%铁明矶水溶液5-10滴，至此液变为暗红色而不发生沉淀为止。
如制作永久标本染色时，可加入饱和氢氧化铁或醋酸铁(媒染剂)溶液数滴，至染色液呈浅蓝色为止。
五、硫堇染液(工作液)①干液(硫堇)：硫堇Ig或2g溶于Ioom150%乙醇中，溶解后过滤备用；②醋酸钠缓冲液：醋酸钠∙3H2O9.7g,巴比妥钠14.7g,溶于50Om1蒸储水中；③0.1mo1/1盐酸；按①：②：③=40：28：32比例配成混合液，调pH5.7±0.2,即得硫堇工作液。
六、0.02%盾纳斯绿B(JanusGreenB)用0.9%生理盐水溶液配制。
七、甲基绿一派洛宁染液(Unna试剂)派洛宁0.25g,甲基绿0.15g,95%乙醇20m1,甘油20m1。
高中生物常用的染色剂染色机理
普知--关于遗传物质被碱性染料染色~碱性液染色后能保持几年。
洋红溶液出现浑浊时要过滤后再用1．2龙胆紫C笛HIN具有金属光泽的暗绿色粉末。
能溶于水、三氯甲烷和醇；难溶于醚。
加热至275℃分解。
其1％一2％溶液俗称紫药水，是人们所熟悉的外用药。
2染色剂的配制2．1配方1醋酸一洋红染液取100mL45％冰醋酸，煮沸后徐徐加入洋红1g，搅拌均匀后加入1颗锈铁钉，煮沸10min，冷却后过滤，贮存在棕色瓶内。
2．2配方2龙胆紫染液，取龙胆紫1～2g，溶解在100mL2％乙酸溶液中，直到溶液成深紫色为止(实验过程中视具体情况溶液可适当稀释)。
保存在棕色瓶内。
3染料的作用机理3．1碱性染料染色试剂的酸碱性与溶液的酸碱性不是一回事。
染色试剂的酸碱性，其划分依据在于染料分子电离后的有色成分是阳离子还是阴离子，如果着色的基团是阳离子的为碱性染料，着色的基团是阴离子的为酸性染料3_2染色机理龙胆紫能不能染DNA?还是只是把染色质上的蛋白质染色?或是DNA和蛋白质都被染色?上文提到，碱性染料的着色基团是阳离子，着色基团可以与细胞中的带负电荷部分牢固地结合。
DNA是酸性物质，可电离出H，其余的部分就带上了负电荷。
因此，带负电荷部分就能和碱性染料电离出的着色阳离子通过电荷问的引力作用牢固结合，而被染上颜色。
有的染色作用随溶液中的pH值而变动。
细胞的主要成分是蛋白质，它含有氨基和羧基，在酸性溶液中，当溶液的pH值小于该蛋白质的等电点时，则蛋白质带正电荷，易被酸性染料染色；在碱性溶液中，当溶液的DH值大于该蛋白质的等电点时，则蛋白质带负电荷。
容易被碱性染料染色。
所以，可以得出结论：碱性染料使染色体着色，使DNA和蛋白质都被染色。
只不过这2种物质被染色的机理是不同的。
4碱性染料用酸配制的原因龙胆紫和洋红都溶于水和酒精。
而做实验用的龙胆紫和洋红溶液。
却都是用醋酸溶液配制的。
这又是为什么呢?原因有2个：1)是为了染色物能方便地进入细胞内，又不会发生细胞膨胀。
实验室常用染色液配方
实验室常用染色液配方1、吕氏(Loeffler)美蓝染色液A液：美蓝(Methylene blue) 0.3 克95%酒精毫升B液：氢氧化钾(KOH) 0.01 克蒸馏水100 毫升分别配制A液和B液，然后混合即成。
2、齐氏(Ziehl)石炭酸复红染色液A液：碱性复红(Basic fuchsin) 0.3 克95%酒精10.O 毫升B液：石炭酸(苯酚) 5.0 克蒸馏水95 毫升将碱性复红溶于95%酒精中，配成A液。
将石炭酸溶于蒸馏水中，配成B液。
将两者混合即成。
3、结晶紫染色液(Huclker改订)A液：结晶紫(Crystai violet) 2.5 克95%酒精25.0 毫升B液：草酸铵(NH4)2C2O4H2O 1.0 克蒸馏水100 毫升将结晶紫研细后，加入95%酒精，使之溶解，配成A液。
将草酸铵溶于蒸馏水，配成B液。
两液混合即成。
4、路戈氏(LugoI)碘液(革氏鉴别染色用)碘1.0克碘化钾 2.0克蒸馏水300毫升先将碘化钾溶于少量蒸馏水中，再将碘溶于碘化钾溶液中，溶时可稍加热，最后加足蒸馏水量。
5、番红染色液(革氏鉴别染色用)番红O(Safranin O) 2.0克蒸馏水100毫升6、孔雀绿染色液(芽孢染色用)孔雀绿(Malachite green) 5.0克蒸馏水100毫升先将孔雀绿研细，加少许95%酒精溶解，再加蒸馏水。
7、Dorner黑素液(英膜染色用)黑素(Nigrosin) 10.0克蒸馏水100毫升福尔马林(40%甲醛) 0.5毫升将黑素在蒸馏水中煮沸5分钟，加入福尔马林作为防腐剂，用玻璃棉过滤。
8、刚果红染色液刚果红(Congo red)2.0克蒸馏水100毫升9、稀释结晶紫染液(放线菌染色用)结晶紫染色液(同3) 5.0毫升蒸馏水95.010、乳酸石碳酸棉蓝染色液（真菌制片，短期保存）石炭酸10.0克甘油20.0毫升乳酸(比重l.21) 10.0毫升棉蓝0.02克蒸馏水10.0毫升将碳酸加在蒸溜水中加热溶化，加入乳酸和甘油，最后加入棉蓝，溶解即成。
生物实验常用试剂配制方法
生物实验常用试剂配制方法
1．碘液的配制
取2g碘化钾，溶解在5mL蒸馏水中，再加1g碘，待溶解后用蒸馏水稀释到300mL。
用来测定淀粉和标本染色。
2．斐林试剂
试剂A：将结晶硫酸铜溶于500mL水中，加硫酸，混合均匀。
试剂B：将125g氢氧化钠和137g酒石酸钾钠溶于500mL蒸馏水中。
（贮于带橡皮塞的瓶中）
※临用时试剂A与试剂B等量混合
3．双缩脲试剂
试剂A：10%氢氧化钠试剂B：1%硫酸铜
4．苏丹Ⅲ试剂
苏丹Ⅲ溶于20mL95%酒精中，因脂肪可溶于酒精中，因此染色脂肪不得超过10分钟。
5．二苯胺试剂：
将1g二苯胺溶液于100mML冰醋酸中，再加浓硫酸（置冰箱中可保存根6个月，使用前在室温下摇匀）。
6．醋酸洋红染液
冰醋酸45mL＋55mL蒸馏水＋洋红
先将洋红溶于蒸馏水中，再加入冰醋酸充分摇匀后，加热煮沸 10分钟，待冷却后，即可使用。
7．有丝分裂细胞解离液
15%盐酸和95%酒精按1：1的比例配成解离液。
8．有丝分裂细胞染液
医用紫药水和蒸馏水按1：16的比例混合配成染色液
9．卡诺氏固定液（用于细胞有丝分裂根尖的固定）
酒精：冰醋酸=3：1（体积比）。
实验室常用染色液和试剂配方
实验室常用染色液和试剂配方【很全】实验室常用染色液配方1、吕氏(Loeffler)美蓝染色液A液：美蓝(Methylene blue) 0.3 克95%酒精毫升B液：氢氧化钾(KOH) 0.01 克蒸馏水100 毫升分别配制A液和B液，然后混合即成。
2、齐氏(Ziehl)石炭酸复红染色液A液：碱性复红(Basic fuchsin) 0.3 克95%酒精10.O 毫升B液：石炭酸(苯酚) 5.0 克蒸馏水95 毫升将碱性复红溶于95%酒精中，配成A液。
将石炭酸溶于蒸馏水中，配成B液。
将两者混合即成。
3、结晶紫染色液(Huclker改订)A液：结晶紫(Crystai violet) 2.5 克95%酒精25.0 毫升B液：草酸铵(NH4)2C2O4H2O 1.0 克蒸馏水100 毫升将结晶紫研细后，加入95%酒精，使之溶解，配成A液。
将草酸铵溶于蒸馏水，配成B液。
两液混合即成。
4、路戈氏(LugoI)碘液(革氏鉴别染色用)碘1.0克碘化钾2.0克蒸馏水300毫升先将碘化钾溶于少量蒸馏水中，再将碘溶于碘化钾溶液中，溶时可稍加热，最后加足蒸馏水量。
5、番红染色液(革氏鉴别染色用)番红O(Safranin O) 2.0克蒸馏水100毫升6、孔雀绿染色液(芽孢染色用)孔雀绿(Malachite green) 5.0克蒸馏水100毫升先将孔雀绿研细，加少许95%酒精溶解，再加蒸馏水。
7、Dorner黑素液(英膜染色用)黑素(Nigrosin) 10.0克蒸馏水100毫升福尔马林(40%甲醛) 0.5毫升将黑素在蒸馏水中煮沸5分钟，加入福尔马林作为防腐剂，用玻璃棉过滤。
8、刚果红染色液刚果红(Congo red) 2.0克蒸馏水100毫升9、稀释结晶紫染液(放线菌染色用)结晶紫染色液(同3) 5.0毫升蒸馏水95.010、乳酸石碳酸棉蓝染色液（真菌制片，短期保存）石炭酸10.0克甘油20.0毫升乳酸(比重l.21) 10.0毫升棉蓝0.02克蒸馏水10.0毫升将碳酸加在蒸溜水中加热溶化，加入乳酸和甘油，最后加入棉蓝，溶解即成。
常用染色液的配方
一、常用染色液的配制⒈碘-碘化钾（I2-KI）溶液能将淀粉染成蓝紫色，蛋白质染成黄色，也是植物组织化学测定的重要试剂。
配方：碘化钾2g；蒸馏水300ml ；碘1g先将碘化钾溶于少量蒸馏水中，待全溶解后再加碘，振荡溶解后稀释至300mL，保存在棕色玻璃瓶内。
用时可将其稀释2-10倍，这样染色不致过深，效果更佳。
⒉苏丹Ⅲ（sudanⅢ或Ⅳ）能使木栓化、角质化的细胞壁及脂肪、挥发油、树脂等染成红色或淡红色，是著名的脂肪染色剂。
配方：（1）苏丹III或苏丹Ⅳ干粉；95％酒精10ml；过滤后再加入10ml甘油（2）先将苏丹II I或IV溶解在50m l丙酮中，再加入70%酒精50ml。
（3）苏丹III70%乙醇的饱和溶液。
⒊1％醋酸洋红（acetocarmin e）酸性染料，适用于压碎涂抹制片，能使染色体染成深红色，细胞质成浅红色。
配方：洋红1g ；45％醋酸100m l煮沸2h左右，并随时注意补充加入蒸馏水到原含量，然后冷却过滤，加入4％铁明矾溶液1～2滴（不能多加，否则会发生沉淀），放入棕色瓶中备用。
⒋改良苯芬品红染色液（Carbol fuchsi ne）核染色剂。
配制步骤：先配成三种原液，再配成染色液。
原液A：3g碱性品红溶于100ml 70％酒精中。
原液B：取原液A10ml加入到90ml5％石炭酸水溶液中。
原液C：取原液B 55ml，加入6ml冰醋酸和6m l福尔马林（38％的甲醛）。
（原液A和原液C可长期保存，原液B限两周内使用）染色液：取C液10～20ml，加45％冰醋酸80～90ml，再加山梨醇1~，配成10％～20％浓度的石炭酸品红液，放置两周后使用，效果显著（若立即用，则着色能力差）。
适用范围：适用于植物组织压片法和涂片法，染色体着色深，保存性好，使用2～3年不变质。
实验室常用染色液
三、常用染料介绍（一）天然染料1、苏木精苏木精是从南美的苏木（热带豆科植物）干枝中用乙醚浸制出来的一种色素，是最常用的染料之一。
苏木精不能直接染色，必须暴露在通气的地方，使他变成氧化苏木精（又叫苏木素）后才能使用，这叫做“成熟”。
苏木精的“成熟”过程需时较长，配置后时间愈久，染色力愈强。
被染材料必须经金属盐作媒剂作用后才有着色力。
所以在配制苏木精染剂时都要用媒染剂。
常用的媒染剂有硫酸铝按、钾明矾和铁明矾等。
苏木精是淡黄色到锈紫色的结晶体，易溶于酒精，微溶于水和甘油，是染细胞核的优良材料，他能把细胞中不同的结构分化出各种不同的颜色。
分化时组织所染的颜色因处理的情况而异，用酸性溶液（如盐酸—酒精）分化后呈红色，水洗后仍恢复青蓝色，用碱性溶液（如氨水）分化后呈蓝色，水洗后呈蓝黑色。
2、洋红洋红又叫胭脂红或卡红。
一种热带产的雌性胭脂虫干燥后，磨成粉末，提取出虫红，再用明矾处理，除去其中杂质，就制成洋红。
单纯的洋红不能染色，要经酸性或碱性溶液溶解后才能染色。
常用的酸性溶液有冰醋酸或苦味酸，碱性溶液有氨水、硼砂等。
洋红使细胞核的优良染料，染色的标本不易褪色。
用作切片或组织块染都适宜，尤其适宜于小型材料的整体染色。
用洋红配成的溶液染色后能保持几年。
洋红溶液出现浑浊时要过滤后再用。
（二）人工染料人工染料，即苯胺染料或煤焦油染料，种类很多，应用极广。
它们的缺点是经日光照射容易褪色，苯胺蓝、亮绿、甲基绿等更易褪色。
在制片中注意掌握酸碱度，并避免日光直射，也能经几年不褪色。
1、酸性品红酸性品红是酸性染料，呈红色粉末状，能容于水，略溶于酒精（0.3%）。
他是良好的细胞制染色剂，在动物制片上应用很广，在植物制片上用来染皮层、髓部等薄壁细胞和纤维素壁。
他跟甲基绿同染，能显示线粒体。
组织切片在染色前先浸在带酸性的水中，可增强它的染色力。
酸性品红容易跟碱起作用，所以染色过度，易在自来水中褪色。
2、刚果红刚果红是酸性染料，呈枣红色粉末状，能溶于水喝酒精，遇酸呈蓝色。
醋酸洋红染色液
北京雷根生物技术有限公司
醋酸洋红染色液
简介：
醋酸洋红是一种比较常用的碱性染料, 常用于细胞核染色、染色体的固定和染色。
在观察植物细胞有丝分裂时，对染色体进行染色，需要用碱性染液，此时可以使用醋酸洋红或龙胆紫染液。
花粉检测中，可以采用醋酸洋红检测花粉是否处于单核期。
醋酸洋红染色液主要由高浓度乙酸和洋红(也称胭脂红)组成，pH 呈酸性，是很好的细胞核、线粒体染色剂。
组成：
操作步骤(仅供参考)：
1、花粉类颗粒：取少量花粉物质置于载玻片，滴加适量醋酸洋红染色液，充分混合，立即盖片染色，吸去多余液体，显微镜下观察。
2、动植物切片：常规处理(如脱蜡至水)，滴加醋酸洋红染色液染色，自来水冲洗，封片，显微镜下观察。
3、部分新鲜植物组织(如洋葱表皮)，直接浸染于醋酸洋红染色液， 自来水冲洗2～3min ，置于载玻片并盖上盖玻片，显微镜观察。
注意事项：
1、 染完色后，应立即显微镜下观察。
2、 由于本试剂含有高浓度弱酸，有刺激性气味，请注意自我保护。
3、 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
编号 名称 DA0045 DA0045 Storage 醋酸洋红染色液 50ml 100ml RT 避光
使用说明书 1份。
[转载]【必修2】改良苯酚品红与醋酸洋红、龙胆紫的染色有什么区别？
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[转载]【必修2】改良苯酚品红与醋酸洋红、龙胆紫的染⾊有什么区别？原⽂地址：【必修2】改良苯酚品红与醋酸洋红、龙胆紫的染⾊有什么区别？作者：lifedna【⽹路摘录】改良苯酚品红染液配法顺序如下：原液A：取3克碱性品红溶于100毫升70%酒精中，此液可以长期保存。
原液B：取A液10毫升加⼊90毫升5%苯酚(即⽯炭酸)⽔溶液中(2周内使⽤)。
原液C：取B液55毫升加⼊6毫升的冰醋酸和6毫升38%的甲醛(可长期保存)。
染⾊液：取C液10-20毫升，加⼊90-80毫升45%醋酸和1.5克⼭梨醇。
放置2周后使⽤，染⾊效果显著，可普遍⽤于植物组织的压⽚法和涂⽚法，使⽤2-3年不变质。
⼭梨醇为助渗剂，兼有稳定染⾊液的作⽤。
如果没有⼭梨醇，也能染⾊，但效果稍差。
改良苯酚品红染⾊液对果蝇唾液腺染⾊体的染⾊效果与醋酸染洋红染⾊液的染⾊效果是相同的。
⽽且⽤改良苯酚品红染⾊液还能提⾼⼯效，简易节约的优点。
龙胆紫，其1～2％溶液俗称紫药⽔，是⼈们所熟悉的外⽤药。
龙胆紫为⼀种碱性阳离⼦染料，因其阳离⼦能与细菌蛋⽩质的羧基结合，影响其代谢⽽产⽣抑菌作⽤。
它能抑制⾰兰⽒阳性菌，特别是葡萄球菌、⽩喉杆菌，对⽩⾊念珠菌也有较好的抗菌作⽤。
它杀菌⼒强，对组织没有刺激性，也没有毒性和副作⽤。
醋酸洋红常被⽤作核、染⾊体的固定和染⾊剂。
在“观察植物细胞有丝分裂”（即“观察根尖分⽣区组织细胞”）时，对染⾊体进⾏染⾊，需要⽤碱性染液，此时可以使⽤醋酸洋红或龙胆紫染液。
改良苯酚品红染⾊液对果蝇唾液腺染⾊体的染⾊效果与醋酸染洋红染⾊液的染⾊效果是相同的。
⽽且⽤改良苯酚品红染⾊液还能提⾼⼯效，简易节约的优点。
观察染色体实验报告
一、实验目的1. 学习和掌握植物细胞有丝分裂及染色体行为的观察方法。
2. 了解染色体的形态、结构及数目。
3. 掌握染色体标本的制作和观察技术。
二、实验原理染色体是生物遗传物质的载体，其结构、形态、功能是细胞遗传学中的核心内容。
通过观察染色体，可以了解细胞的遗传信息，研究生物的遗传规律。
本实验采用植物根尖细胞作为观察对象，利用染色剂对染色体进行染色，通过显微镜观察染色体的形态、结构及数目。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：新鲜植物根尖、卡诺氏固定液、盐酸、酒精、蒸馏水、醋酸洋红染色剂等。
2. 实验仪器：显微镜、解剖镜、剪刀、镊子、载玻片、盖玻片、吸水纸、滴管等。
四、实验步骤1. 取材：从植物根尖中剪取一定长度的根尖，放入盛有卡诺氏固定液的试管中固定。
2. 解离：将固定好的根尖放入盛有盐酸和酒精混合液（1:1）的试管中，在室温下解离30分钟。
3. 漂洗：用蒸馏水冲洗根尖，去除盐酸和酒精。
4. 染色：将根尖放入盛有醋酸洋红染色液的试管中，染色5-10分钟。
5. 制片：将染色后的根尖用镊子取出，放在载玻片上，用盖玻片轻轻压扁，制成临时装片。
6. 观察：将临时装片放在显微镜下，先用低倍镜观察，找到染色体清晰、分散良好的细胞，再换用高倍镜观察染色体的形态、结构及数目。
五、实验结果与分析1. 染色体形态：观察到的染色体呈棒状，两端钝圆，有明显的着丝粒。
2. 染色体结构：染色体由DNA和蛋白质组成，DNA呈双螺旋结构，蛋白质分布在DNA周围。
3. 染色体数目：观察到的染色体数目与理论值相符。
4. 染色体变异：未观察到染色体变异现象。
六、实验讨论1. 实验过程中，染色剂的选择对染色体的染色效果有很大影响。
本实验中，醋酸洋红染色剂染色效果较好。
2. 在观察染色体时，显微镜的放大倍数对观察效果有较大影响。
本实验中，先用低倍镜观察，找到染色体清晰、分散良好的细胞，再换用高倍镜观察。
3. 实验过程中，解离液的浓度和时间对染色体的形态和数目有较大影响。
生物学常用染色液汇总
常用染料介绍（一）天然染料1、苏木精苏木精是从南美的苏木（热带豆科植物）干枝中用乙醚浸制出来的一种色素，是最常用的染料之一。
苏木精不能直接染色，必须暴露在通气的地方，使他变成氧化苏木精（又叫苏木素）后才能使用，这叫做“成熟”。
苏木精的“成熟”过程需时较长，配置后时间愈久，染色力愈强。
被染材料必须经金属盐作媒剂作用后才有着色力。
所以在配制苏木精染剂时都要用媒染剂。
常用的媒染剂有硫酸铝按、钾明矾和铁明矾等。
苏木精是淡黄色到锈紫色的结晶体，易溶于酒精，微溶于水和甘油，是染细胞核的优良材料，他能把细胞中不同的结构分化出各种不同的颜色。
分化时组织所染的颜色因处理的情况而异，用酸性溶液（如盐酸—酒精）分化后呈红色，水洗后仍恢复青蓝色，用碱性溶液（如氨水）分化后呈蓝色，水洗后呈蓝黑色。
2、洋红洋红又叫胭脂红或卡红。
一种热带产的雌性胭脂虫干燥后，磨成粉末，提取出虫红，再用明矾处理，除去其中杂质，就制成洋红。
单纯的洋红不能染色，要经酸性或碱性溶液溶解后才能染色。
常用的酸性溶液有冰醋酸或苦味酸，碱性溶液有氨水、硼砂等。
洋红使细胞核的优良染料，染色的标本不易褪色。
用作切片或组织块染都适宜，尤其适宜于小型材料的整体染色。
用洋红配成的溶液染色后能保持几年。
洋红溶液出现浑浊时要过滤后再用。
（二）人工染料人工染料，即苯胺染料或煤焦油染料，种类很多，应用极广。
它们的缺点是经日光照射容易褪色，苯胺蓝、亮绿、甲基绿等更易褪色。
在制片中注意掌握酸碱度，并避免日光直射，也能经几年不褪色。
1、酸性品红酸性品红是酸性染料，呈红色粉末状，能容于水，略溶于酒精（0.3%）。
他是良好的细胞制染色剂，在动物制片上应用很广，在植物制片上用来染皮层、髓部等薄壁细胞和纤维素壁。
他跟甲基绿同染，能显示线粒体。
组织切片在染色前先浸在带酸性的水中，可增强它的染色力。
酸性品红容易跟碱起作用，所以染色过度，易在自来水中褪色。
2、刚果红刚果红是酸性染料，呈枣红色粉末状，能溶于水喝酒精，遇酸呈蓝色。
常用染色液的配制.
常用染色液的配制1.番红水液番红0.1g溶入蒸馏水,定溶至100ml。
2. 番红酒液番红0.5g或1g溶入50%酒精,定溶至100ml3. 固绿染液固绿0.1g溶入95%酒精，定溶至100ml。
4. 碘-碘化钾染液碘化钾溶入100ml蒸馏水，再加入1g碘，溶解后即可使用。
5. 苏丹Ⅲ（或Ⅳ）染液将0.1g苏丹Ⅲ或Ⅳ溶解在50ml丙酮中，再加入70%酒精50ml。
6.改良苯酚品红染液原液A：将3g碱性品红溶入100ml 70%酒精，此液可长期保存。
原液B：将10mlA液加入到90ml 5%苯酚水溶液中。
原液C：将55mlB液加入到6ml的冰醋酸和6ml的38%的甲醛中。
染色液：取C液20ml，加45%冰醋酸80ml，充分混匀，再加入1g山梨醇，放置14天后使用，可保存3年。
7. 间苯三酚染液将5g间苯三酚溶入100ml 95%酒精（若溶液呈黄色，即为失效）。
8. 中性红染液将0.1g中性红溶入100ml蒸馏水，用时稀释10倍。
9. 钌红染液将5~10mg钌红溶入25~50ml蒸馏水，现用现配。
10.龙胆紫染液将0.2g龙胆紫溶入100ml蒸馏水。
现常用结晶紫代替。
必要时可将医用紫药水稀释5倍后代用。
11.铁醋酸洋红染液先将100ml 45%醋酸水溶液置入200ml的锥形瓶中煮沸，移去火苗，然后慢慢地分多次加入1g 洋红粉末（切记不可一次倒入）。
待全部倒入后，再煮沸1~2min，并悬入一生锈的小铁钉于染液中，过1min后取出，使染色剂略含铁质，以增加染色性能。
静置12h后过滤于棕色瓶中备用（置于避光处）。
12.苏木精染液苏木精的配方很多，常用的有如下3种：配方Ⅰ：苏木精水溶液0.5g苏木精溶入100ml煮沸的蒸馏水中，静置24h后可使用。
配方Ⅱ：代氏苏木精（De larfield’s haematoxylin）甲液：苏木精1g + 无水酒精6ml乙液：硫酸铝铵（铵矾）10g + 蒸馏水100ml丙液：甘油25ml + 甲醇25ml分别配制甲、乙两液，将甲液一滴滴地加入乙液中，充分搅拌后，放入广口瓶中用纱布蒙住瓶口，置于温暖和光线充足处7~10天，再加入丙液，混匀后静置1~2月，至颜色变为深紫色后，过滤备用，可长期保存。
醋酸洋红液为什么是碱性染料
醋酸洋红液为什么是碱性染料?一：醋酸洋红的PH值小于7高中生物学课本在描述染色质时指出:染色质(体)容易被碱性染料染成深色.实验中对染色质(体)进行染色.须使用龙胆紫溶液或醋酸洋红溶液等碱性染色剂.这些染色剂是以龙胆紫或洋红溶解于醋酸溶液中制得.配制后的龙胆紫溶液pH值约小于7(呈酸性).二：醋酸洋红是碱性染色剂那么为什么把龙胆紫溶液称为碱性染色剂呢?作为染色剂必须具备两个条件:一是具有颜色,二是要与被染组织间有亲和力.染料的颜色和它与组织间的亲和力是由染料本身的分子结构决定的.产生颜色的发色基团和与组织间产生亲和力的助色基团共同决定了染色剂的染色性质.作为染料物质.除了有发色基团外.还需要有一种使化合物发生电离作用的助色基团.如染料化合物中往往由硝基(-NO2).偶氮基(-N=N-).乙烯基等形成了发色基团.而由-OH.-SO3H.-COOH等酸性基团和-NH2.-NHCH3.-N(CH3)2等碱性基团构成了助色基团.它们的存在使染料物质离子化.极性增强.促进染料与组织间发生作用.产生染色效果.我们把助色基团中具有酸性或碱性基团的染料分别称为酸性或碱性染色剂.如硝基是一种发色基团.当苯环中的3个氢原子被3个硝基取代后就成为三硝基苯的黄色化合物.三硝基苯不是染料.仅有一个发色基团.它不溶解于水.也不能电离.既不酸也不碱.不能与酸或碱形成盐类.如果三硝基苯分子中.用羟基再置换一个氢原子.就成为三硝基苯酚.即苦味酸.它即是一种黄色染料.有电离作用.与强碱能形成盐.这里的羟基便是助色基团.由此可知.苦味酸的颜色是由发色基团(硝基)所致.而它的染色性能则是由助色基团(羟基)形成的.如用氨基代替硝基.就形成无色化合物.不是染料.由此可见.作为染料.必须有发色基团和助色基团相互配合.缺一不可.如伊红Y含有一个(-COOH)助色基团.在水中电离时放出氢离子.本身带负电荷.配制成伊红Y染料时.与强碱NaOH作用生成盐(-COONa).此物质的Na+反而在溶液中呈碱性.所以不能认为酸性染料在溶液中就是酸性.所以.酸性(碱性)染色剂的界定并非由染料溶液的pH值决定的.而是根据染料物质中助色基团电离后所带的电荷来决定.一般来说.助色基团带正电荷的染色剂为碱性染色剂.反之则为酸性染色剂。
亚历山大染色液配制与使用
亚历山大染色液
编码名称规格保存条件
北京华越洋QC061亚历山大染色液
100ml
室温,避光,12个
月
北京华越洋QC062亚历山大染色液
50ml
室温,避光,12个
月
亚历山大染色液是植物花粉染料，常用于细胞核染色，对于植物花粉，染色后成紫红色。
主要由孔雀绿，酸性品红，苯酚等组成，显酸性，是较好的花粉粒染色剂。
自备材料：1载玻片，盖玻片
2光学显微镜
亚历山大染色液操作步骤：
1取新鲜花朵，去除花瓣和雌蕊
2将花粉物质置于载玻片，滴加2-3滴染色液。
3充分混合，立即盖上盖玻片染色5-10h。
4吸去多余液体，显微镜下观察。
注意：1染色后立即显微镜下观察。
醋酸洋红染色原理
醋酸洋红染色原理
醋酸洋红染色是一种常用的生命科学实验中的组织染色方法。
其原理是利用醋酸洋红溶液中的洋红分子与细胞组织中的酸性成分作用，使细胞核和细胞质染上红色。
醋酸洋红染色的操作简单，成本低廉，且可以快速地显示出组织细胞的形态结构和颜色分布，是一种常用的组织染色方法。
在生命科学实验中，醋酸洋红染色常用于细胞学和组织学研究中，如细胞分裂、组织生长和病理学研究等。
醋酸洋红染色的具体操作方法为：首先取一片经过处理的细胞或组织切片，将其浸泡于醋酸洋红溶液中，使其充分染色，然后用水洗净，再用酒精和苯胺等试剂进行后处理，最后用显微镜观察染色效果。
总之，醋酸洋红染色是一种快速、简便、有效的细胞和组织染色方法，广泛应用于生命科学实验中的组织学和细胞学研究。
- 1 -。
醋酸洋红染色法测定油菜花粉的生活力
新鲜的花粉粒是最富有生命力的, 但在杂 粉, 白菜型胞质雄性不育系与保持系花粉, 白菜
交育种的实践中, 由于各种植物花粉的寿命长 型细胞核雄性不育系 (896 AB ) 与保持系花粉,
短不同和花期不一致, 经保存的花粉, 在使用之 化杀不育花粉, 陕 2A 花粉。 仪器设备有显微
前需要快速、可靠的测定花粉的生活力。油菜花 镜、载玻片、镊子、滴瓶。 试剂有 1% 醋酸洋红:
粉的生活力是衡量不育系不育程度, 化杀效果 取 100 m l 45% 醋酸加热至沸, 移去火源, 徐徐 的一个可靠指标。因此研究其快速、可靠的测定 加入 1g 洋红, 加热回流 2～ 24h, 过滤 (最好加
4 徐曼亭. 花粉生活力的速测法. 植物学杂志, 1975; (3) : 11 5 余毓君. 遗传学实验技术. 北京: 农业出版社, 1991; 6～ 8
工费时, 且此法还要受到田间气候、环境条件、 6 王灶安. 植物显微技术. 北京: 农业出版社, 1992; 19～ 27
母本植株状况等多方面的影响, 无法准确测定
2. 1 材料
t2= 1. 16, t3= 0. 316, t4= 0. 199, t5= 0. 289, t6=
供试花粉为本所油菜室提供的正常油菜花 2. 15, t7 = 1. 73 均小于查表所得 t0. 05 = 2. 776,
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用 T TC 法测定玉米花粉生活力[1], 碘—碘化钾 染色法测定水稻、高粱、甘蔗等淀粉生活 力[ 2 ] , 据报道效果均良好。 但已往测定油菜花粉活力 的甲烯兰法受到染色时间的限制, 必须在半小 时之内观察, 否则不能反映真实情况, T TC 法 染色困难, 颜色不易辨别, 测定结果偏低。 笔者 采用醋酸洋红染色法测定花粉的生活力, 镜检 测定清晰、快速、可靠。
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醋酸洋红染色液
编码名称规格单位
北京华越洋生物GT12219-100ml醋酸洋红染色液100ml瓶
醋酸洋红染色液说明：
醋酸洋红是一种比较常用的碱性染料, 常用于细胞核染色、染色体的固定和染色。
在观察植物细胞有丝分裂时，对染色体进行染色，需要用碱性染液，此时可以使用醋酸洋红或龙胆紫染液。
花粉检测中，可以采用醋酸洋红检测花粉是否处于单核期。
华越洋醋酸洋红染色液含高浓度乙酸和洋红，pH呈酸性，是很好的细胞核、线粒体染色剂。
醋酸洋红染色液操作说明：（仅供参考）
1.花粉类颗粒：取少量花粉物质置于载玻片，滴加适量醋酸洋红染色液，充分混合，立即
盖片染色10～30min后，吸去多余液体，显微镜下观察。
2.动植物切片：常规处理(如脱蜡至水)，滴加醋酸洋红染色液染色5～20min，自来水冲洗，
封片，显微镜下观察。
3.部分新鲜植物组织(如洋葱表皮)，直接浸染于醋酸洋红染色液5～20min，自来水冲洗2～
3min，置于载玻片并盖上盖玻片，显微镜观察。
醋酸洋红染色液注意事项：
1.染完色后，应立即显微镜下观察。
2.由于醋酸洋红染色液试剂含有高浓度弱酸，有刺激性气味，请注意自我保护。
3.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
提示：本品仅用于科研实验，不能用作医疗及临床诊断。
储存条件：避光常温保存，复检期为1年。
醋酸洋红染色液的相关染色液：
名称规格名称规格
中性红染色液(0.33%）500ml 结晶紫水溶液(0.1%) 100ml 中性红染色液(0.5%）500ml 核固红染色液(0.1%) 100ml 中性红染色液(0.1% 常规染色) 100ml 天狼星红染色试剂盒2*50mL TTC染色液（0.4%）500ml 0.5%伊文斯蓝/埃文斯蓝溶液100mL Masson三色染色试剂盒7×50ml 茜素红S染色液(1%,pH4.2) 100mL 普鲁士蓝染色试剂盒2*50ml 0.2%核固红染色液100ml 尼氏染色液(焦油紫法) 2*100ml 改良Lillie-Mayer苏木素染色液100ml 吕氏碱性美蓝染色液（0.4%）100ml 改良Lillie-Mayer苏木素染色液500ml 亮绿SF染色液100ml Ehrlich苏木素染色液100ml 溴甲酚绿-甲基红指示剂溶液100ml Ehrlich苏木素染色液500ml 饱和油红O染色液100ml 苏木素伊红混合染色液(一步法) 100ml Van Gieson 染色液50ml 苏木素伊红混合染色液(一步法) 500ml Van Gieson 染色试剂盒3×50ml 改良Harris苏木素染色液100ml Schiff试剂50ml 改良Harris苏木素染色液500ml 茜素红S染色液（0.2%）100ml Mayer苏木素染色液100ml 煌焦油蓝染色液100ml Mayer苏木素染色液500ml 2% TTC染色液100ml 苏木素伊红(HE)染色液2×100ml 革兰氏染色液试剂盒4×10ml 苏木素伊红(HE)染色液2×500ml 醋酸洋红染色液100ml Core苏木素染色液100ml 姬姆萨原液100ml Core苏木素染色液500ml 姬姆萨工作液100ml Carazzi苏木素染色液100ml 瑞氏-姬姆萨复合染液100ml Carazzi苏木素染色液500ml 瑞氏染液50ml Delafield苏木素染色液100ml 结晶紫染色液(2.5%) 10ml Delafield苏木素染色液500ml 结晶紫染色液(1%) 10ml Gill苏木素染色液(Gill No.1) 100ml 结晶紫染色液(0.1%) 10ml Gill苏木素染色液(Gill No.1) 500ml 荚膜染色液（试剂盒）50ml×2 Gill苏木素染色液(Gill No.2) 100ml 芽孢染色液（试剂盒）50ml×2 Gill苏木素染色液(Gill No.2) 500ml 鞭毛染色液（试剂盒）100ml Gill苏木素染色液(Gill No.3) 100ml 石炭酸复红染液(苯酚品红染液) 100ml Gill苏木素染色液(Gill No.3) 500ml 改良型石炭酸复红染液(苯酚品红染液) 100ml Heidenhain铁苏木素染色液3×100ml 抗酸染色液（试剂盒）50ml×3 天青石蓝苏木素染色液2×50ml 吕氏碱性美蓝染色液（0.1%）100ml 改良MacConaill铅苏木素染色液140ml 卢戈碘液（革兰氏染色）10ml 苏木素无水乙醇溶液(5%) 100ml 番红染色液（沙黄）10ml 苏木素无水乙醇溶液(10%) 100ml 卢戈碘液（标准碘液）100ml 伊红染色液(进口水溶) 100ml Mayer'苏木素染液(免疫组化) 10ml 伊红染色液(进口水溶) 500ml HE染色液(试剂盒) 3×10ml 伊红染色液(水溶) 100ml Cole氏苏木素染色液(常规染色) 100ml 伊红染色液(水溶) 500ml Weigert苏木素染色液2×50ml 伊红染色液(水溶,5%) 100ml
AB-PAS染色试剂盒50ml*6 伊红染色液(醇溶) 100ml 糖原PAS染色液（过碘酸-雪夫染色液）50ml×2 伊红染色液(醇溶) 500ml
50ml×4 Scott蓝化液500ml 糖原PAS染色液试剂盒（过碘酸-雪夫
染色液）
伊红染色液100ml 氨水溶液(0.1%) 500ml 标准阿利新蓝染色液3×50ml 氨水溶液(0.3%) 500ml 阿利新蓝染色液(pH2.5) 100ml 氨水溶液(0.5%) 500ml 阿利新蓝染色液(pH=1.0)（试剂盒）3×50ml 氨水溶液(1%) 500ml 碱性品红乙醇溶液(5%) 100ml 天青石蓝B染色液50ml 碱性品红水溶液(1%) 100ml 天青石蓝B染色液100ml。